HONGOS MICORRCICOS ARBUSCULARES MEJORAR LA TOLERANCIA DE VINCA A ALTA ALCALINIDAD EN EL AGUA DE RIEGO

RESUMEN Este estudio se llev a cabo con el fin de determinar si la inoculacin con hongos micorrcicos arbusculares (HMA) podra mejorar la tolerancia de la vinca plantas a altos niveles de alcalinidad, inducidos por KHCO3, en el agua de riego. AMF-inoculadas y plantas no inoculadas fueron regadas con agua que contiene diferentes HCO3 concentraciones: 0, 2,5, 5, 7,5, 10, y 15 mM. El aumento de HCO3 concentracin inhibe el crecimiento de plantas, especficamente a los concentraciones 7,5 mm. Las hojas se ven ms afectados por la alta HCO3 concentracin que otras partes de la planta. En las plantas no inoculadas, una visual evaluacin de la calidad demostr que la calidad aceptable se produce cuando contena agua de riego? 2,5 mM HCO3, Pero AMF-inoculado plantas de buena calidad se producen cuando contena agua de riego 7.5 mMHCO3. En general, la AMF aliviado HCO3 estrs, segn lo indicado por mayor crecimiento de las plantas y la clasificacin de la calidad. Sin embargo las plantas, AMF-inoculados regados con 0 mM HCO3 reduccin del crecimiento exhibido cuando en comparacin con las plantas no inoculadas. Bicarbonato no afect la concentracin de hoja Fe, lo que indica que la vinca puede ser una planta eficiente Fe. Plantas inoculados con HMA exhibi una concentracin mejorada hoja P y el contenido, que estaba relacionado con un aumento en la actividad de la alcalina soluble fosfatasa. Las plantas inoculadas con HMA mostraron aumento de la concentracin de hoja y el contenido de Mn, Zn, Cu, B, y Mo, y el aumento de antioxidante actividad a altas concentraciones de HCO3. En conclusin, la tolerancia de la vinca a la alcalinidad en el agua de riego se puede mejorar por AMF inoculacin, por lo tanto, lo que permite para el riego con agua de alta alcalinidad. Introduccin Disponibilidad y calidad del agua son cuestiones de gran inters en todo el mundo. El agua de buena calidad es limitada, especialmente en las zonas ridas y las regiones semiridas del mundo (Grieve et al, 2005.); aunque en las regiones templadas algunos pases pueden tener similares problemas (Sonneveld y Voogt, 2003). Ambiental preocupaciones y la intensificacin de la competencia por los municipales y agua industrial reducir an ms la disponibilidad de buena los recursos de agua de calidad para la agricultura y la horticultura produccin (Rosegrant y Ringler, 1998), especficamente riego de zonas ajardinadas. El uso de agua de baja calidad para riego de especies ornamentales y el paisaje le apoyar en la conservacin de agua de mejor calidad para otros fines. Alcalinidad y salinidad del agua son de preocupacin debido a su efecto perjudicial sobre la nutricin y el crecimiento de las plantas. La salinidad es causada por una acumulacin excesiva de iones de Na +, principalmente, Ca2 +, Mg2 +, Cl-, SO42-, Y HCO3-, Que pueden tener txicos efectos sobre la fisiologa vegetal y / o afectar el crecimiento de plantas a travs de efectos osmticos. La alcalinidad es causada por HCO3- y CO32-, La importante lcalis que imparten una

capacidad de tampn a agua y causar un aumento de pH de la solucin, lo que lleva a la formacin de insolubles formas de P y micronutrientes. Clorosis en las hojas jvenes es observa con frecuencia en las plantas regadas con agua de alta alcalinidad, que tambin pueden inhibir el crecimiento de las plantas sensibles a travs de la reduccin del crecimiento de la raz y / o absorcin de nutrientes y utilizacin (Alhendawi et al., 1997). Estos efectos pueden representar una reduccin significativa en la comerciabilidad, esttica valor, y / o el rendimiento de las plantas en el paisaje. Invernadero los productores y el pblico son reacios a utilizar el agua de baja calidad para el riego porque consideran especies ornamentales a ser altamente sensible a la salinidad y la alcalinidad. Sin embargo, Los estudios han demostrado que algunas plantas ornamentales pueden ser crecido a altos niveles de salinidad (Shillo et al, 2002;.. Grieve et al, 2005) o alcalinidad (ValdezAguilar y Reed, 2007). Cartmill et al. (2007) demostraron la viabilidad de la mejora de la tolerancia de Rosa multiflora, una especie alcalinidad-sensibles, cuando las plantas fueron inoculadas con hongos micorrcicos arbusculares (AMF). Se ha informado de que AMF mejorar nutrientes de las plantas adquisicin (Clark y Zeto, 2000), las relaciones hdricas (Auge, 2001), y aliviar las tensiones culturales y ambientales (Jeffries et al., 2003) a travs de una mayor rea de la raz eficaz y la penetracin del sustrato, y la activacin y la excrecin de varias enzimas por las races de HMA y / o hifas (Marschner, 1995, Smith y Read, 1997). El objetivo de este estudio fue determinar si la inoculacin de plantas de vinca (Catharanthus roseus (L.) G. Don) con AMF afectara el crecimiento de la planta, el estado nutricional, la tasa fotosinttica, y la fosfatasa, la nitrato reductasa, y antioxidante actividades cuando se exponen a niveles crecientes de alcalinidad en agua de riego. Materiales y mtodos 2.1. Las condiciones culturales Este estudio se llev a cabo bajo condiciones de invernadero en Texas y MUniversity, College Station, Texas, desde 6 julio 2005 al 25 de agosto de 2005. Temperatura y humedad relativa fueron medido y registrado por hora durante la duracin del experimento. Da / noche la temperatura y la humedad relativa fueron 30.9? 0.2 8C/25.5? 0.1 8C, y 69,5? 0,6% / 82,9? 0,4%, respectivamente. Promedio de radiacin diaria fotosintticamente activa (PAR) y el PAR al medioda solar eran aproximadamente 302.7? 10.2 y 519.5? 39,2 mmol m? 2 s? 1, respectivamente. Tapones vinca fueron trasplantado a 0,65 L recipientes de plstico verde. El envase sustrato era una turba, perlita, vermiculita y mezcla (02:01:01 por volumen), que fue modificada con 8 kg m? liberacin controlada 3 fertilizantes (15-3.9-9.9), 3,5 kg m? 3 caliza dolomtica, 1.75 kg m? 3 yeso y 0,9 kg m? 3 micronutrientes (Micromax). La turba estaba previamente pasteurizada con vapor aireado vapor de agua en 2 das consecutivos durante 3 horas a 80 8C. 2.2. Inoculacin de micorrizas arbusculares La mitad de los tapones fueron inoculados durante la siembra con aproximadamente 700 esporas de las especies Glomus amixed aislar (ZAC-19): Glomus albidum Walker & Rhodes, Glomus

claroideum Schenck & Smith, y Glomus diaphanum Morton & Walker (Chamizo et al., 1998). Se aplic la ZAC-19 inculo directamente al agujero dibble al momento del trasplante (aproximadamente 10 g por maceta) e incluy hifas y colonizado segmentos de raz de Carica papaya L. utiliza para aislar multiplicacin. La tapones restantes fueron no inoculados (no AMF). 2.3. Aplicacin Bicarbonato Diez das despus del trasplante, las plantas se regaron con aproximadamente 100 ml de HCO3? (KHCO3) solucin, a 0, 2,5, 5, 7,5, 10, y 15 mM de HCO3? cada 4 das para la duracin de el estudio. Promedio de pH del agua de riego era 7.10? 0,11; 8.12? 0,03, 8,31? 0,02, 8,40? 0,02, 8,42? 0,03, y 8.46? 0.04, y la CE (dS m? 1) fue 0.02? 0,00, 0,30? 0,01, 0.58? 0,01, 0,84? 0,02, 1,14? 0,04, y 1,68? 0.07, respectivamente. Las plantas fueron irrigadas para conseguir aproximadamente 20% de fraccin en volumen de lixiviados. A la terminacin experimento, la creciente sustrato de cada maceta se sec al aire, y submuestras fueron removidos para determinar la CE y pH de la dilucin 1:02 mtodo (Warncke y Krauskopf, 1983). 2.4. Evaluacin del crecimiento de las plantas y la fotosntesis La evaluacin visual de calidad de la planta fue tomada en la cosecha. Los criterios de evaluacin incluyen: 1 = planta muerta; 2 = la mayora de las hojas necrtico y / o senescentes, 3 = algunas clorosis y necrosis y /o senescentes; 4 = clorosis foliar inicial; 5 = verde, planta sana (N = 4). Tasa de fotosntesis neta se determin con un porttil sistema de fotosntesis (LI-6400, LI-COR, Lincoln, Nebr.), con fuente de luz roja / azul LED a nivel nominal de 500 mmol m? 2 s? 1, y la concentracin de CO2 de 360 ppm de turgentes, ampliado, hojas uniformes (n = 4). La fotosntesis de una planta completa Se calcul la base {planta mmol fotosntesis? 1 s? 1 = [(Tasa fotosinttica en mmol m? 2 s? Diezmilsima)? rea de la hoja en cm2]}. Mediciones de crecimiento final se registraron en la cosecha (n = 4). Las muestras de tejido se secaron durante 7 das a 70 8C y flor, hoja, tallo, raz y masa seca total (MS) se registraron. El rea foliar relacin {LAR = [rea foliar (cm2)] / planta DM (g? 1)]} y especficos rea foliar {SLA = [rea foliar (cm2)] / [hoja de DM (g? 1)]} fueron calculado. El efecto de la inoculacin de micorrizas (MIE) fue calculado por la frmula MIE (%) = (MS total de AMF planta? MS total de la planta no AMF) / (total de MS de la no-AMF planta)? 1? 100 (Plenchette et al, 1983;. Sylvia, 1994). 2.5. Anlisis de nutrientes Leaf Hojas fisiolgicamente maduros de tres seleccionados al azar plantas por tratamiento se recogieron en la cosecha (n = 3) y suelo para pasar de una pantalla de malla 40. El anlisis de tejidos de P, K, Mg, Ca, S, Na, Fe, Mn, Zn, Cu, Al, B, y Mo, se llev a cabo en una plasma acoplado inductivamente espectrofotmetro de emisin atmica (Modelo Optima 4300V ICP-OES, Vida PerkinElmer y Analytical Sciences, Inc., Boston, MA) en el cido ntrico / digestiones perxido de hidrgeno de muestras de hojas, mientras que la hoja N concentracin se determin con la digestin Kjedlahl. Resultados se informa que la concentracin de nutrientes de hojas y nutrientes de las hojas contenido.

2.6. Concentracin de clorofila de la hoja, la actividad antioxidante, nitrato de actividad de la reductasa, y la actividad de la fosfatasa raz Concentracin de clorofila en la hoja y la actividad antioxidante fueron determinado por extraccin con acetona (Harborne, 1998) y por extraccin de antioxidantes solubles (Re et al., 1999), respectivamente. Hoja nitrato de actividad de la reductasa y la raz de la fosfatasa alcalina (ALP) la actividad enzimtica (solubles y extrables) se determinaron sobre la base de la formacin de NO2 (Foyer et al., 1998) y sobre la base de la hidrlisis de fosfato de p-nitrofenilo (p- NPP) sustrato para producir p-nitrofenol (p-NP) e inorgnicos fosfatasa (Eivazi y Tabatabai, 1977; Tabatabai y Bremner, 1969), respectivamente. Estos anlisis se realizaron en la cosecha (n = 4). 2.7. Desarrollo de las micorrizas arbusculares Para el anlisis de la colonizacin HMA, segmentos de raz de 1 cm de cuatro plantas seleccionadas al azar por tratamiento fueron muestreados a cosecha y se agruparon para evaluar porcentaje de colonizacin a travs de limpiar con KOH y tincin de muestras de races con tripn azul (Philips y Hayman, 1970). Veinte raz teida de 1 cm piezas se colocaron en cada diapositiva y tres observaciones (las superior, el centro y la parte inferior) por 1 cm pedazo de raz se hicieron con un microscopio a 40?. La presencia de arbsculos, vesculas, hifas y se determin (Biermann y Linderman, 1981). Haba cuatro diapositivas por tratamiento (n = 240 observaciones por tratamiento de 80 piezas de raz de 1 cm). 2.8. Diseo y anlisis estadstico El experimento fue un 2? 6 factorial de forma totalmente diseo al azar con dos niveles de AMF (AMF y no AMF) y seis niveles de HCO3?: 0, 2,5, 5, 7,5, 10, y 15 mM de HCO3?. Hubo una planta por contenedor, con cada contenedor como un solo replicar. Nmero de repeticiones variado dependiendo de la atributos de crecimiento y las actividades enzimticas analizadas y eran mencionado previuosly. Los datos se analizaron mediante anlisis de la varianza (ANOVA) y la prueba de comparacin mltiple de Tukey (P <0,05). Efectos lineales y cuadrticas dentro de cada nivel AMF Tambin se estimaron (SAS Institute Inc., 2000). 3. Resultados 3.1. Desarrollo de las micorrizas arbusculares Al terminar el experimento, una colonizacin promedio total del AMF de 55% se observ en las plantas inoculadas AMF-(Tabla 1). En plantas no AMF no se observ ninguna colonizacin (datos no mostrados). El aumento de HCO3? concentracin no afect significativamente total colonizacin o la formacin de vesculas, aunque el porcentaje de arbsculos se redujo significativamente cuando las plantas fueron regadas con agua que contiene? 10 mM HCO3?, En comparacin con plantas regadas con agua que contiene 2,5 mM HCO3 3.2. PH del sustrato y de la CE

El aumento de HCO3? concentracin se asoci con una aumento significativo en el pH del sustrato y el sustrato CE (Tabla 2). AMF inoculacin tuvo un efecto significativo sobre el pH del sustrato y sustrato CE (Tabla 2). Sin embargo, el pH del sustrato fue significativamente afectada por el HCO3 ? ? Interaccin AMF, principalmente debido a bajas concentraciones de HCO3? que era menor en las plantas de AMF-inoculadas que en las plantas no AMF, pero mayor cuando HCO3 ? fue? 10 mM. 3.3. Atributos del crecimiento de plantas Bicarbonato caus una reduccin significativa en flor, hoja, tallo y total de MS, pero la raz DM fue afectado (Tabla 3). AMF inoculacin no tuvo un efecto significativo sobre la planta de estos atributos de crecimiento, sin embargo, AMF interactan significativamente con HCO3? para afectar flor, hoja, y DM total. La significativa interaccin se debi principalmente a la disminucin lineal de la masa seca de las plantas no AMF, mientras que en las plantas inoculadas con HMA la respuesta fue cuadrtica. El efecto de segundo grado en las plantas de HMA fue porque la masa seca fue menor en las plantas regadas con 0 mMHCO3?, Incluso ms bajos que el de las plantas no AMF, pero las plantas regadas con 2,5, 5, y 7,5 mM de HCO3? agua mostr un aumento en seco masa. Superior a 10 mM HCO3? concentraciones causaron la crecimiento de la planta para disminuir. Nmero de hojas y rea foliar fueron tambin significativamente afectada por el HCO3 ? ? AMF interaccin (Tabla 4), con tendencias similares a los reportados para la masa seca. El SLA y LAR fueron afectadas significativamente por la AMF la inoculacin (Tabla 4). Como media de todas las concentraciones de HCO3?, AMF plants exhibieron un significant22% and27% mayor SLA y LAR, respectivamente, en comparacin con las plantas no-AMF. La evaluacin visual de la calidad de la planta se vio afectada significativamente por increasing HCO3? and AM Finoculation concentracin (Tabla 5). Las plantas no AMF regadas con agua que contiene 5 mM HCO3? exhibi una disminucin del 27% en el valor esttico visual cuando en comparacin con las plantas de control no-AMF. Micorrizas arbusculares plantas regadas con agua que contiene 7,5 mMHCO3? Exhibido una disminucin similar (35%) en el valor esttico como la no-AMF plantas a 2,5 mM HCO3?. El HCO3 significativa? ? AMF interaccin sugiere que en las plantas de AMF-inocul la disminucin fue menos marcado cuando HCO3? concentracin aument (Tendencia cuadrtica), en comparacin con las plantas no AMF (tendencia lineal). En general, la mayora de los atributos de crecimiento de las plantas fueron ms bajos en plantas inoculadas con HMA, en comparacin con las plantas no AMF, cuando la concentracin de HCO3? fue entre 0 y 2,5 mM (tablas 3 y 4), sin embargo, cuando HCO3? Concentracin las plantas se increment a 10.5 mM, AMF-inoculados mostrado un mayor crecimiento, superando incluso el de la no-AMF plantas. Esta respuesta puede ser detectada numricamente en el MIE (Tabla 3), lo que indica que AMF colonizacin causado un disminuir (MIE negativo) en MS total en HCO3? concentraciones? 2,5 mM. Efecto micorriza limitada en MS total fue observado en 5 mM de HCO3 ? (Tabla 3), sin embargo, a 7,5 y 10 mM de HCO3?, AMF tena un efecto de mejora marcada (MIE positivo) de MS total, y el otro crecimiento vegetal atributos.

3.4. Anlisis de nutrientes Leaf El aumento de HCO3? concentracin aument significativamente hoja concentracin de K (Tabla 6), Cu y Mo (Tabla 7), pero disminuido significativamente hoja de Ca, Mg (Tabla 6), Mn, y B concentracin (Tabla 7). AMFinoculation aument significativamente hoja P, K, Ca, Mg (Tabla 6), Mn, Zn, Cu, B, andMoconcentration (Tabla 7), pero la hoja de Na se redujo significativamente (Tabla 6). El HCO3 significativa? ? Interaccin AMF para la hoja de Ca y Mg (Tabla 6) se debi principalmente a un mayor Ca y Mg concentracin a baja HCO3? en plantas de HMA, en comparacin con las plantas no-AMF. A mayor HCO3?, Ca y la concentracin de Mg fue comparable en las plantas AMF y no-AMF. El HCO3? ? AMF interaccin tambin fue significativa para la hoja Concentracin de K (Tabla 6). A pesar de la tendencia al aumento de la hoja Concentracin de K como HCO3? aumento fue cuadrtica (Tabla 6), una tendencia lineal se adaptan mejor a la respuesta observada en el AMF y no-Plantas de HMA. La interaccin significativa se debi principalmente a la diferencia en la pendiente de las lneas de regresin (m = 3,1 para los no-Plantas de HMA, ym = 3,7 para las plantas de HMA). El HCO3 significativa? ? Interaccin AMF para la hoja de Mn concentracin (Tabla 7) se debi principalmente a una disminucin menos drstica en la concentracin foliar de Mn en plantas inoculadas con HMA, mientras que para la interaccin Mo significativo fue debido a una ms aumento pronunciado en la hoja Mo cuando HCO3? Concentracin aumentado en plantas AMF-inoculados. En trminos de contenido, todos los nutrientes foliares fueron significativamente afectada por el aumento de HCO3? (Tablas 8 y 9). AMF inoculacin aument significativamente el contenido de la hoja de P, K, Ca, Mg, S (Tabla 8), Mn, Zn, Cu y Mo (Tabla 9), independientemente del HCO3? nivel. La tendencia de los contenidos de todos los nutrientes era principalmente lineal en plantas no-AMF (excepto para K), y cuadrtica en plantas AMF (excepto para el Mg, Mn, Al, y B). La respuesta cuadrtica en plantas AMF se debi a una hoja mayor contenido de nutrientes en condiciones de baja HCO3 ? concentraciones y porque que se vio menos afectada por el aumento HCO3? at? 10 mM; Sin embargo, 15 mM de HCO3? provocado una marcada disminucin en nutrientes contenido. En las plantas no AMF haba una disminucin lineal en la hoja contenido de nutrientes como HCO3? se increment la concentracin. 3.5. La concentracin de clorofila en la hoja y total tasa de fotosntesis Clorofila total y tasa fotosinttica fueron significativamente afectada por concentraciones crecientes de HCO3? (Tabla 5). Inoculacin micorrcica no tuvo un efecto significativo, pero interactuaron significativamente con HCO3? afectando a la clorofila total de concentracin. El HCO3 significativa? ? AMF es una interaccin como resultado de la concentracin de clorofila en las plantas inferiores AMF, en comparacin con las plantas no AMF, cuando HCO3? concentracin era? 7,5 mM, pero en concentraciones ms altas, las plantas tenan una AMF mayor concentracin de clorofila. La concentracin total de clorofila disminuy linealmente en las plantas inoculadas AMF-, pero en no-Plantas AMF la respuesta fue cuadrtica, lo que sugiere que el disminuir en clorofila fue ms pronunciado en las plantas AMF cuando HCO3? concentracin fue de? 7,5 mM. Esto puede ser debido a un efecto de dilucin desde el rea de la hoja de las plantas de HMA fue mayor que el de las plantas no AMF en HCO3? las concentraciones entre 5 y 10 mM.

La tasa fotosinttica mostr una respuesta cuadrtica para aumentar HCO3? en plantas no AMF y la AMF (Tabla 5). Esto se debi a niveles moderados de HCO3?, Entre 0 y 7,5 mM de tasa, fotosinttica no se vio afectada significativamente, pero cuando HCO3? fue? 10 mM hubo una disminucin pronunciada. En un base de toda la planta (teniendo en cuenta la superficie total del rea foliar por planta), la fotosntesis total de la planta fue mayor en las plantas de HMA en HCO3? las concentraciones entre 5 y 10 mM (Fig. 1). Total DM en plantas AMF aument cuando la tasa de fotosntesis aument desde 7,9 hasta 13,2 mmol CO2 m 2 s 1 (fig. 2)??; Sin embargo, las tasas de fotosntesis ms altos no se asociaron con la acumulacin de materia seca superior, probablemente debido a los mayores tasas se combinaron con alta HCO3? concentraciones. NoAMF plantas inoculadas mostraron una tendencia toAMF plantas similares; Sin embargo, en las tasas de fotosntesis comparables, las plantas no AMF producido en serie ms seco que las plantas de HMA. En las plantas no AMF, tasa fotosinttica tambin se asoci con un aumento en total DM cuando aument 6,4 a 19,3 mmol CO2 m? 2 s? 1, pero a mayores tasas fotosintticas que no hubo crecimiento en total La acumulacin de MS, probablemente debido al aumento de HCO3? concentracin de 2,5 a 7,5 mM. 3.6. Actividad de la nitrato reductasa Hoja, actividad antioxidante, y la actividad de la fosfatasa raz Actividad nitrato reductasa Leaf fue significativamente menor en AMF-inocularon las plantas en comparacin con las plantas no-AMF (Tabla 5). El aumento de la concentracin de HCO3? en el agua de riego no lo hizo afectar a la actividad de la nitrato reductasa, sin embargo, la HCO3? ? AMF result significativa. AMF no tuvo un efecto significativo sobre la hoja de antioxidante actividad (Tabla 5) pero interaccin significativa de HCO3?. La interaccin es una consecuencia de la actividad antioxidante de la hoja no ser afectado en las plantas inoculadas cuando AMF-HCO3? Era aumentado, mientras que en plantas no-AMF hubo una disminucin lineal en la actividad con el aumento de alcalinidad en el agua de riego. Actividades de las fosfatasas alcalinas extrables y soluble fueron aumentado de manera significativa con alta HCO3? Concentraciones (Tabla 5). En las plantas no AMF, el aumento de la solubles y la actividad de la fosfatasa extrable fue lineal o cuadrtica y que fueron significativamente ms altos cuando HCO3? Concentraciones eran? 10 mM, en comparacin con las plantas tratadas con 0 mM de HCO3?. En las plantas de AMFinoculados, extrable alcalina actividad de la fosfatasa fue significativamente menor que en los no Plantas de HMA. Inoculacin Bicarbonato y AMF interactu afectar de manera significativa a la actividad de la alcalina soluble fosfatasa. Esto fue debido a la fosfatasa alcalina soluble actividad fue mayor en las plantas inoculadas con HMA cuando HCO3? estaba entre 0 y 7,5 mM, pero cuando HCO3? Concentracin fue? 10 mM, la actividad enzimtica fue menor que la de los las plantas no AMF. 4. Discusin El aumento de la alcalinidad del agua de riego inhibi el crecimiento de plantas de vinca, especficamente en concentraciones 10 mM HCO3??. Esto est de acuerdo con los informes anteriores de Valdez-Aguilar y Reed (2007). La mayora de los atributos de crecimiento de las plantas mostraron un tendencia cuadrtica cuando se inocularon las plantas con AMF, mientras las

plantas no AMF mostraron una tendencia lineal decreciente. La tendencia cuadrtica se debi principalmente a la falta de efecto de aumentar HCO3? desde 0 mM a 7,5 mM o 10 en las plantas de AMF, mientras que en las plantas no AMF, el crecimiento se redujo a un menor HCO3? niveles. Esto implica que la inoculacin AMF asistido Vinca plantas para aliviar el estrs alcalinidad y que no inoculadas plantas eran ms sensibles a la alcalinidad. Inoculado se obtuvieron plantas de buena calidad cuando el agua contena hasta a 7,5 mM HCO3? pero se obtuvo una calidad comparable cuando agua contena 2,5 mM HCO3? en las plantas no inoculadas, lo que sugiere que la inoculacin AMF permite la produccin de Vinca plantas de buena calidad, incluso cuando se riegan con agua de alta alcalinidad. A pesar de la mayor tolerancia a la alcalinidad, AMF-inoculado plantas mostraron una disminucin del crecimiento y la acumulacin de masa seca, en comparacin con las plantas no AMF, cuando se riegan con agua contiene 0-2,5 mM HCO3?. Esto puede ser debido al carbono requerida para mantener la respiracin por los hongos bajo no limitativo condiciones ambientales (Bryla y Eissenstat, 2005). El uso de carbono por los hongos se reflej en una disminucin en total DM en las plantas de HMA, que acumula menos masa seca incluso en las tasas de fotosntesis comparables a los de las plantas no-AMF. La disminucin del crecimiento en las plantas de HMA puede ser numricamente detectado en el MIE, lo que indica que la inoculacin AMF provocado una disminucin de la MS total en HCO3? concentraciones? 2,5 mM. Sin embargo, en 7,5 y 10 mM de HCO3?, AMF mejorada crecimiento, superando a la de las plantas no AMF. Esta mayor el crecimiento en mayor HCO3? en las plantas de HMA fue apoyado por un mayor rea foliar, lo que permiti el aumento de la fotosntesis en un base de toda la planta y siempre que el carbono requerido para mantener la asociacin de micorrizas. High HCO3 Alcalinidad? Inducida se ha reportado que causa clorosis de las hojas, que por lo general se asocia con una deficiencia de Fe debido a una reduccin en la disponibilidad de Fe a un pH alto (Alhendawi et al, 1997;. Ro mheld, 2000). Bicarbonato tambin puede causar un precipitacin interna de Fe en los tejidos vegetales, procesamiento de Fe inactivo en las races debido a la alcalinizacin tejido (Ro mheld, 2000). En el presente estudio no se detect un efecto de HCO3? O AMF de la concentracin de la hoja de Fe, sin embargo, el aumento de HCO3? En agua de riego se asoci con una disminucin de la hoja de Fe en trminos de contenido de nutrientes. Hoja contenido de Fe fue significativamente disminuido slo cuando HCO3? concentracin fue de? 7,5 mM en AMF y las plantas no AMF. Esto sugiere que la vinca puede ser Fe eficiente, ya que esta concentracin es suficiente para inducir Fe deficiencia en muchas especies de plantas. Esto tambin es apoyado por el hecho de que una alta concentracin de HCO3? (7,5 mM) fue requerido para inducir una disminucin significativa en la concentracin de clorofila total, cuya sntesis requiere Fe. Se ha informado de que AMF puede mejorar la nutricin por Fe productoras de quelantes de Fe (Berro et al., 1986) que mejoran Fe captacin. En nuestro estudio, la AMF inoculacin no se asoci con cambios en la concentracin de Fe hoja o el contenido, pero en una anterior informe hemos encontrado resultados contradictorios en R. multiflora, ya aumentar HCO3? concentracin de 0 a 10 mM fue asociado a una disminucin de hasta un 48% en pan de Fe concentracin, pero AMF ayud a las plantas en la acumulacin de en las plantas no AMF promedio 36% ms Fe que (Cartmill et al., 2007).

Clorofila total no se vio afectada por HCO3? Concentraciones? 7,5 mM en plantas no-AMF y? 10 mM en plantas AMF, probablemente como resultado de la situacin Fe no afectado en este alcalinidad rango. Valdez-Aguilar y Reed (2007) estimaron un 10% disminucin de la concentracin de clorofila en las plantas de vinca cuando agua de riego contena 6,8 mM de NaHCO3, que es en estrecha acuerdo con nuestras observaciones. En las plantas de AMF haba un disminucin pronunciada de la concentracin de clorofila en HCO3? Era aument, lo que puede ser debido a un efecto de dilucin ya que en mayor niveles de HCO3? rea de la hoja de las plantas de HMA fue mayor que de plantas no AMF. El fsforo puede formar compuestos insolubles en condiciones de alta suelo condiciones de pH, lo que conduce a la deficiencia de P en plantas. En el Este estudio nos informan de que la concentracin de P foliar no fue afectada por el aumento del pH asociado con una mayor concentraciones de HCO3?. Sin embargo, el aumento de HCO3? Era asociada con una disminucin en el contenido de P foliar en tanto y AMF las plantas no AMF. Sin embargo, en AMF plantas inoculadas hoja P contenido era ms alto que el de las plantas no AMF, que puede ser debido a la mayor actividad de la ALP soluble en AMF inoculated plantas cuando HCO3? concentracin fue de? 7,5 mM. Especies reactivas del oxgeno son subproductos del metabolismo vegetal que se producen en grandes cantidades bajo condiciones de estrs (Munne'-Bosch y Pen ~ uelas, 2003). Estas especies de oxgeno puede daan las membranas celulares (Marschner, 1995) si no estn rpidamente neutralizado por un complejo enzimtico y / o de otro compuestos antioxidantes (sistema antioxidante) (Alguacil et al.,2006). En nuestro estudio, las plantas no AMF no haba una HCO3 detectables? efecto sobre la actividad del antioxidante sistema cuando HCO3? las concentraciones fueron de entre 0 y 10 mM, pero la actividad se redujo notablemente cuando HCO3? estaba en 15 mM. Por lo tanto, una muy alta alcalinidad deteriora la desintoxicacin de respuesta de las plantas a las especies reactivas del oxgeno. Sin embargo, en las plantas de AMF no hubo ningn efecto sobre el antioxidante actividad, lo que sugiere que AMF asistido / mejorado la capacidad de los plantas para soportar el estrs impuesto por la alta alcalinidad. El ms nutricin equilibrada proporcionada por asociaciones AMF estrs alcalinidad puede ser la causa de la ms alta antioxidante actividad en plantas de AMF, probablemente como resultado de la mayor concentracin de Mn, Zn, y Cu, que se requieren para la funcin de los enzimas antioxidantes (Marschner, 1995). En trminos de contenido foliar de nutrientes, la inoculacin con HMA causado un incremento en P, K, Ca, Mg, S, Mn, Zn, Cu y Mo, en comparacin con las plantas no AMF. Resultados similares han sido informaron de una serie de especies, y que se han atribuido a una mayor rea efectiva de la raz y la penetracin del sustrato proporcionado por AMF y para la activacin y la excrecin de enzimas colonizados por las races y / o hifas (Marschner, 1998; Clark y Zeto, 2000), como en la nitrato reductasa y soluble actividades de las fosfatasas que est reportando. En el presente experimento, las plantas se cultivaron en relativamente pequea contenedores y crecimiento de las races no se vio afectada, lo que sugiere que el efecto beneficioso de la AMF se debi a una mayor nutriente la adquisicin y el transporte a la planta, en lugar de una mayor zona radicular efectiva. A pesar de que el aumento de alcalinidad en agua de riego caus una disminucin en el

contenido de nutrientes de las hojas, la disminucin de la tendencia fue mayormente cuadrtica en HMA inoculadas las plantas, mientras que era lineal en plantas no-AMF, lo que sugiere que en Plantas AMF la disminucin bajo mayor alcalinidad fue menos severa que en las plantas no-AMF. Kumar et al. (2003) informaron de una disminucin en la nitrato reductasa la actividad en las hojas de plantas de trigo irrigado con agua de alta alcalinidad; segn los autores esto puede ser debido a un alteracin del metabolismo de N que conduce a una disminucin de la concentracin de N. No obstante, en variedades de trigo tolerantes a la alcalinidad haba ningn cambio en la actividad de la nitrato reductasa. En este estudio, el nitrato actividad de la reductasa no fue afectada por HCO3?, Lo que sugiere que vinca fue capaz de mantener la reduccin del nitrato a pesar del aumento alcalinidad. Se reporta la actividad nitrato reductasa en trminos de actividad por gramo de peso fresco de hoja; desde DMwas hoja menos afectados por el aumento de HCO3 ? concentracin en AMFinoculated plantas, es plausible asumir que la reductasa actividad, sobre una base de toda la planta, fue mayor en las plantas AMF expuestos a un mayor alcalinidad. Esto explicara la ningn efecto sobre hoja N contenido en las plantas de HMA cuando HCO3? aumentado hasta 10 mM, mientras que en las plantas no AMF que exhibe una relacin lineal tendencia decreciente. 5. Conclusiones Vinca es moderadamente tolerante a HCO3 Alcalinidad? Inducida, pero esta tolerancia se mejor cuando se inocularon plantas con la AMF. Un buen crecimiento y la calidad de AMF-inoculado vinca las plantas se pueden producir cuando se usa agua de riego que contiene hasta 7,5 mM HCO3?. La tolerancia de los HMA inoculadas vinca las plantas a la alcalinidad se asoci con un aumento de la capacidad de P absorcin debido a una actividad de la fosfatasa soluble superior a moderada HCO3? concentraciones, y con el mantenimiento de la otra hoja nutrientes cuando HCO3? aumentado hasta 10 mM. El antioxidante actividad tambin se ha mejorado plantas inAMF a alta alcalinidad, lo que sugiere que las plantas fueron capaces de mantener la desintoxicante actividad, probablemente como resultado de su mayor micronutrientes de estado. La actividad de la reductasa de nitrato fue mayor en las plantas AMF expuesto a la alta alcalinidad en una base de toda la planta, la cual hoja mantenido el contenido de N en HCO3? Aumentado

Tabla 1 Efecto de bicarbonato (HCO3?) En la formacin por ciento de arbsculos, vesculas, y la colonizacin de las races clulas corticales de los hongos formadores de micorrizas arbusculares (HMA) - plantas inoculadas vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanca' en experimento terminacin Tabla 2 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en pH del sustrato y la conductividad elctrica (EC) en la terminacin experimento

Tabla 3 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en la masa seca (MS) (en gramos) y el efecto de la inoculacin de micorrizas (MIE), de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco' en la terminacin experimento Tabla 4 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en el crecimiento de la hoja de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco' Tabla 5 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en el valor esttico visual y algunas respuestas fisiolgicas de vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco' Tabla 6 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en macronutrientes de las hojas y de concentracin de Na (g kg? 1) de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco ' Tabla 7 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (AMF) sobre la concentracin de micronutrientes en hojas (mg g? 1) de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco' Tabla 8 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en macronutrientes hoja y contenido Na (g planta? 1) de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco ' Tabla 9 Efecto de bicarbonato (HCO3?) Y hongos micorrcicos arbusculares (HMA) en la hoja del contenido de micronutrientes (planta mg? 1) de la vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Blanco' Figura 1. La fotosntesis de forma de toda la planta de hongos micorrcicos arbusculares (AMF) (lnea slida, smbolos cerrados) y no-AMF (lnea de trazos, smbolos abiertos) Vinca plantas Catharanthus roseus 'Pacifica Blanca', tratados con el aumento de concentraciones de HCO3? en el agua de riego. Figura 2. Relacin entre la tasa de fotosntesis y la masa seca total en nonarbuscular hongos micorrizas (AMF) (lnea discontinua, smbolos abiertos) y AMFinoculated (Lnea continua, smbolos cerrados) vinca Catharanthus roseus 'Pacifica Plantas '. Leyendas cerca de los smbolos cerrados o abiertos indican la concentracin de HCO3?.