ANALISIS FITOQUMICO PRELIMINAR CUESTIONARIO PREVIO

1. Explicar cmo se concentran los extractos vegetales. Dar dos mtodos. a) Al vaco. Mediante el uso de un rotovapor. Se trabaja a temperatura inferior a 40C y en ausencia de oxgeno ya que se practica el vaco. Se aplica para concentrar lquidos extractivos obtenidos con disolventes orgnicos y mezclas hidroalcohlicas. b) Liofilizacin. Consiste en eliminar el disolvente mediante una congelacin a temperatura muy baja, seguido de una sublimacin del disolver que pasa directamente del estado slido a vapor. Este mtodo se aplica principalmente en el caso de lquidos extractivos acuosos. (Kulinski, 2000) 2. Explicar qu tcnicas se emplean para llevar a cabo la separacin de extractos. Sublimacin: O volatilizacin, es el proceso que consiste en el cambio de estado de slido al estado gaseoso sin pasar por el estado lquido. Son escasos los principios activos obtenidos por este mtodo, el ejemplo clsico que utiliza dicha tcnica es la cafena. Destilacin: Es la operacin de separar, mediante vaporizacin y condensacin en los diferentes componentes lquidos, slidos disueltos en lquidos o gases licuados de una mezcla, aprovechando los diferentes puntos de ebullicin de cada una de las sustancias ya que el punto de ebullicin es una propiedad intensiva de cada sustancia, es decir, no vara en funcin de la masa o el volumen, aunque s en funcin de la presin. Se aplica en la extraccin de productos voltiles, por ejemplo aceites esenciales. Anlisis cromatogrfico: Se puede decir que todas las tcnicas cromatogrficas se basan en un mismo principio: la separacin de las sustancias presentes en una mezcla dada, entre dos fases; una permanece fija (fase estacionaria), que puede ser slida o lquida, mientras que la otra eluye a travs de la primera (fase mvil) y que puede ser un lquido o un gas o la combinacin de ambos. Esto permite distinguir entre dos sistemas cromatogrficos: el de adsorcin y el de particin. a. Cromatografa de adsorcin: Esta depende de la diferente polaridad que presentan los distintos productos, as como de su configuracin molecular. Es especialmente valida en el aislamiento y purificacin de vitaminas, hormonas, diversos alcaloides, hetersidos cardiotnicos, antraquinonas, etc. b. Cromatografa de particin: La separacin de los componentes va a depender de los diferentes coeficientes de particin: una fase acuosa y una fase orgnica no miscible; por tanto la separacin se basa en la solubilidad entre las dos fases. c. Cromatografa en papel (CP) y en capa fina (CCF): Tcnicas simples donde la separacin de las sustancias viene determinada por un conjunto complejo de propiedades fsicas: velocidad de difusin, solubilidad del soluto y naturaleza del solvente, capacidad de adsorcin, intercambio, etc. La cromatografa en papel ha sido sustituida en gran medida por la de capa fina que es una tcnica ampliamente

usada en los controles de toda clase de productos naturales y se ha establecido como un mtodo analtico muy importante en las modernas farmacopeas, permitiendo identificar de forma rpida el nmero de componentes presentes en un material vegetal. d. Cromatografa gaseosa (CG): Utilizada principalmente para drogas con componentes voltiles, permitiendo identificar aceites esenciales, alcanfor, cidos vegetales, algunos alcaloides, resinas y compuestos esteroides. e. Cromatografa lquida de alta resolucin (CLAR/HPLC): Tcnica muy sencilla y muy sencilla que se realiza directamente cobre el extracto acuoso o alcohlico. Permite la separacin de molculas muy parecidas, incluso ismeros. Se puede aplicar a una amplia gama de compuestos fijos no voltiles, tales como alcaloides, hetersidos, lpidos, esteroides, glcidos, protenas, vitaminas, etc. Electroforesis: Se basa en el transporte de sustancias cargadas en un campo elctrico. Para ello se impregna un soporte en un electrolito que lo hace conductor; en el centro del mismo se coloca la sustancia problema y se somete a diferencia de potencial generada por dos electrodos. El paso de corriente elctrica determina la separacin de la sustancia en funcin de la naturaleza, carga, masa electrolito y concentracin de iones del mismo, diferencia de potencial aplicado, etc. (Villar, 1999) 3. Explicar cuntos tipos de pruebas de identificacin qumica hay. Reacciones de coloracin o precipitacin: Se trata de reacciones simples que actan como identificador de especficas de algn principio activo. Las reacciones a veces tienen un inters limitado y no son aplicables a todas las drogas debido a la interferencia que pueden ser observadas con sustancias qumicas parecidas a aquellas que se pretenden identificar. Estos ensayos son muy tiles debido a su sencillez y rapidez y se realizan directamente sobre el extracto de la planta, que suele ser el extracto alcohlico por ser el ms apropiado para detectar la presencia de los principios activos ms importantes. Fluorescencia: la luz rica en longitudes de onda corta es muy activa en cuanto a la produccin de fluorescencia, tal como sucede con la luz fuertemente ultravioleta, que produce fluorescencia en muchas sustancias que no dan fluorescencia visible a la luz natural. Micro sublimacin: suele realizarse con principios activos fcilmente sublimables (antraquinonas, alcaloides). El estudio de las constantes cristalogrficas, la determinacin de punto de fusin o la produccin de determinadas reacciones coloreadas caractersticas de los cristales formados sirven para la identificacin de la droga.

(Villar, 1999). .

4. Explicar dos pruebas de identificacin general para los siguientes metabolitos: Alcaloides. La mayora de los alcaloides son precipitados por soluciones neutras o ligeramente cidas. Se pueden utilizar las siguientes sustancias: Reactivo de Mayer (Solucin yoduro de potasio mercrico), Reactivo de Wagners (Solucin de yoduro-yoduro en potasio), Reactivo de Dragendorffs (Solucin de yoduro potasio bismuto) generando un producto precipitado (amorfo o cristal) coloreado: crema (Mayer), caf rojizo (Wagner), amarillonaranja (Dragendorff). No todos los alcaloides responden a estas pruebas, como la cafena que debe ser tratada con una mezcla de una gota de cido clorhdrico y una pequea cantidad de clorato de potasio, dejar secar y exponer a vapores de amonio, la reaccin dar positivo cuando se torne de color morado. Saponinas. Las saponinas se pueden identificar por los siguientes tests: Hemlisis. Se coloca una gota de sangre con unas cuantas gotas del extracto acuoso. Los eritrocitos se lisan en presencia de saponinas. Foam Test. Para drogas slidas. A un miligramo de la droga se agrega de 10- 20 ml de agua. Se procede a agitar. Es positiva esta prueba cuando se forma una espuma que persiste de 60-120 s. Triterpenos. Taninos. Flavonoides. Glucsidos Cianognicos. Azcares Glsidos Cardiotnicos.

Referencias Kuklinski C. 2000. Farmacognosia. Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Barcelona: Omega. pp. 39-41. Villar AM. 1999. Farmacognosia General. Ed Sintesis. Espaa. Pp 68-70, 89.