Introduo

Leucograma uma parte do exame de sangue que consiste em avaliar os leuccitos, clulas de defesa do organismo, tambm chamadas de glbulos brancos. Ele indica o nmero de neutrfilos, bastes ou segmentados, linfcitos, moncitos, eosinfilos e basfilos presentes no sangue, para facilitar o diagnstico mdico. Faz-se uma contagem total dos leuccitos e uma contagem diferencial contando-se 100 clulas. O adulto normalmente apresenta de 5.000-10.000 leuccitos por 1 mm de sangue. Leuccitos So elementos figurados do sangue que esto envolvidos no sistema de defesa do organismo contra doenas e infeces. Por meio de fagocitose, eles defendem os tecidos contra invaso de organismos ou substncias estranhas, removendo tambm os restos resultantes da morte ou de ferimentos celulares.Alguns leuccitos so capazes de passar atravs da parede intacta dos vasos chamada de diapedese; agindo assim principalmente no tecido conjuntivo frouxo. So transportados pelo sangue para todo o corpo, a partir da medula ssea, onde so formados. Os leuccitos esto presentes no sangue em muito menor nmero que os eritrcitos, com cerca de 4.000 a 10.000 leuccitos por milmetro cbico de sangue. Neutrfilos: so conhecidos tambm como polimorfonucleares e correspondem cerca de 50 a 70% das clulas circulantes; possuem grnulos citoplasmticos pequenos corados fracamente em prpura-avermelhado. Os neutrfilos so capazes de deixar os vasos sanguneos e entrar nos tecidos, onde protegem o corpo e fagocitando bactrias e substncias estranhas ao organismo. Eosinfilos:

Possuem grnulos corados em laranja-avermelhado e fagocitam complexos antgeno-anticorpo.Seus ncleos geralmente tm dois lobos conectados por um filamento. O nmero de eosinfilos circulantes aumenta de forma muito acentuada no sangue circulante durante as reaes alrgicas, e durantes as infestaes parasitrias. Basfilos: possuem grnulos relativamentes grandes corados em azulprpura; liberam histamina (contribui para as respostas alrgicas dilatando e permeabilizando os vasos sanguneos) e heparina (previne a coagulaco do sangue).Os basfilos funcionam similarmente aos mastcitos, que so encontrados no tecido conjuntivo. Moncitos: Possuem um nico ncleo; so clulas grandes.So formados por monoblastos; So capazes de entrarem no tecido conjuntivo frouxo, onde se desenvolvem em grandes clulas fagocticas denominadas macrfagos, que podem ingerir bactrias e outras substncias estranhas ao organismo. Linfcitos: So o segundo tipo mais abundante de leuccitos( aps os neutrfilos), compreendendo cerca de 30% dos glbulos brancos em circulao; a maioria se localiza no tecido linfide e so formados por linfoblastos.So leuccitos pequenos, sendo apenas um pouco maiores que os eritrcitos, e cada um deles tem um ncleo que circular ou algo recortado num dos lados. So importantes nas respostas imunes especficas do corpo, incluindo a produo de anticorpos. Reticulcitos Os reticulcitos diferem das hemcias por conterem restos de material gentico (RNA) que no existe nas hemcias. Os reticulcitos circulantes perdem esse RNA dentro de um a dois dias, tornando-se hemcias maduras. A contagem de reticulcitos pode ser pedida quando h diminuio do nmero de hemcias, da hemoglobina e do hematcrito, e o mdico quer avaliar a funo da medula ssea. Se o paciente no tem sintomas, esses achados podem ocorrer em um exame de rotina. Esses exames tambm podem ser pedidos quando o paciente apresenta sintomas como palidez, fadiga, fraqueza,

falta de ar ou sangue nas fezes. Quando o paciente est com deficincia de ferro, de vitamina B12 ou de folato, doena renal, supresso de medula ssea resultante de quimioterapia ou transplante de medula ssea, ou est sendo tratado com eritropoietina, o mdico pode pedir a contagem de reticulcitos com um hemograma, em intervalos regulares, para acompanhar a funo da medula ssea e a resposta ao tratamento. Quando h elevao do nmero de hemcias, do hematcrito e da hemoglobina, a contagem de reticulcitos pode ser usada para determinar a intensidade da produo excessiva de hemcias. Esfregao Sanguneo A confeco do esfregao sanguneo , sem dvida alguma, o ponto crucial para a realizao de um hemograma confivel e por isso, a sua padronizao deve ser uma das principais exigncias de um bom laboratrio de hematogia. Os esfregaos podem ser realizados na mo (mtodo de predileo, caso seja necessrio confeccionar um esfregao a campo), o apoio em mesa ou algo do gnero ainda assim pode ser utilizado, e so utilizadas uma lmina (limpa, sem resqucios de gordura ou outros materiais) e uma distensora de vidro transparente (pode-se montar uma extensora com uma lamnula grudada a uma lmina com esparadrapo). O esfregao ideal deve ser livre de falhas e paradas, no muito espesso, nem fino demais, e sem falhas na cauda. Na observao ao microscpio as duas bordas onde so realizadas as contagens devem apresentar os eritrcitos mais separados e os leuccitos bem distribudos Camara de Neubauer Cmara de Neubauer tambm referida como hemocitmetro, uma lmina grossa de uso microscpico, com formato retangular e normalmente de vidro, com uma depresso no centro, utilizada para fazer contagem de clulas por unidade de volume de uma suspenso. Podem ser contadas as clulas sanguneas, tais como as hemcias ou eritrcitos, os diferentes tipos de leuccitos (leuccitos granulcitos e agranulcitos) como tambm as plaquetas. Alm disto, podem ser enumerados tambm alguns microorganismos. No centro desta lmina existem vrias linhas perpendiculares com marcaes em quadrantes. Ao analisar em microscpico com a objetiva de imerso, podese perceber que existem trs tipos de quadrantes, que juntos formam um quadrado maior. Estes quadrantes so usados para fazer as contagens e assim determinar a concentrao de clulas em um determinado volume de fluido,

para poder calcular a concentrao de clulas no lquido global.

Objetivo
Analisar quantitativamente os leuccitos presentes no sangue total.

Materiais esfregao Lanceta ou agulha de injeo, algodo, lcool retificado e lminas lavadas com sabo de coco ou detergente, enxaguadas em gua destilada, secas e colocadas num vidro com lcool, tampado.

Procedimento
Contagem pela Camara de Neubauer leuccitos Em um tubo de ensaio, colocou-se 0,4 mL microlitros de soluo diluidora (TURK); Acrescentou-se 20 microlitros de amostra de sangue; Homogeneizouse a soluo no tubo; Pipetou-se a soluo e colocou-se na cmara de Neubauer. Com uma pipeta encheu-se os retculos da cmara de Neubauer, evitando excesso de lquido e bolhas de ar sob a lamnula, aderida firmemente cmara por compresso daquela sobre esta, cobrindo ambos os retculos. Focalizou-se a preparao em pequeno aumento no microscpio para localizar o retculo e observar a distribuio uniforme dos leuccitos. Em seguida, observou-se com aumento de 100x e 400x conforme a necessidade. Falta contagem de reticulocitos pelaEsfregao Sanguneo Colocou-se uma pequena gota de sangue aproximadamente a 1 ou 2 cm da extremidade da lmina. Colocou-se o lado da lmina com o qual foi feito o esfregao num ngulo de 45 com a face superior da lmina. Faz-se com a lmina um ligeiro movimento para trs at encostar na gota de sangue, deixando ento, que a gota se difunda uniformemente, ao longo de toda borda por capilaridade. Levou-se a lmina para frente de modo que ela carregou a gota de sangue, que se estendeu numa camada delgada e uniforme. ( essencial escorregar a

lmina de uma vez, sem det-la). Secou-se imediatamente o esfregao agitando a lmina no ar ou com auxlio do ventilador.

Resultados e Discurso

Camara de Neubauer (Leuccitos) Contou-se os 4 quadrados de leuccitos e multiplicou-se por 50. Mtodo da cianometemoglobina Para o 1 amostra o valor da absorvancia foi 0,332 para a 2 amostra o valor da absorvancia foi 0,337 Valor da absorvancia padro 0,280 Logo:

1 amostra: Hbg/dL = 0,332/ 0,280 x 10 Hbg/dL = 11,85

2 amostra Hbg/dL = 0,337/ 0,280 x 10 Hbg/dL = 12,03

Concluo

Os mtodos avaliados nas aulas prticas permitem uma avaliao qualitativa e quantitativa dos componentes celulares do sangue, os mtodos de contagem de hemcias juntamente com o hematcrito, auxiliam na determinao dos ndices hematimtricos e possibilitam uma melhor compreenso do tipo de anemia que possivelmente est acometendo o paciente analisado. Porm apenas os resultados individuais destes mtodos no so essenciais para o diagnostico clinico, sendo necessrios outros exames complementares a ele como, por exemplo, o eritrograma. Apesar destas limitaes pode-se afirmar que se tratam de importantes ferramenta no auxilio do diagnostico clinico, de modo que alteraes de seus valores podem estar associados a quadros de anemias, deficincia de vitaminas e minerais, hemorragias, cirrose heptica, hiper-hidratao, policitemias, desidratao, queimaduras, alm de variaes fisiolgicas relacionadas a atividades fsicas, altitudes, idade e sexo, por exemplo. Outro importante mtodo na hematologia clinica o VHS.

Referencias Bibliograficas
Carvalho, W.F. Tcnicas Mdicas de Hematologia e Imuno-hematologia. 8.ed. Belo Horizonte: Coopmed Editora, 2008

Nooum, P.C Hemoglobinopatias e Talassemias. So Paulo, 1998 Verrastro, T. Hematologia e Hemoterapia Fundamentos de Morfologia, Patologia e Clnica. So Paulo: Atheneu, 1998