Actividad enzimtica y determinacin de PH Enzyme activity and determination of PH

Resumen En el presente artculo se describen los procedimientos utilizados para la determinacin de las enzimas y sus respectivos sustratos, a su vez tambin describen la determinacin de pH. Para la realizacin de este trabajo se tuvieron en cuenta los distintos procesos que se deban llevar a cabo tales como catalasa, temperatura, determinacin de enzimas y determinacion de pH. Palabras claves PH, enzimas, catalasa, sustratos. Abstract This article describes the procedures used for the determination of enzymes and their substrates in turn also describe the determination of pH. To carry out this work took into account the different processes that should be carried out such as catalase, temperature, determination of enzymes and pH determination. Keywords PH, enzymes, catalase substrates. Introduccin Las clulas poseen compuestos qumicos que controlan las reacciones que ocurren en su interior. La sustancia que controla la velocidad a la que ocurre una reaccin qumica sin que la

Miguel garcia1, Angie Murcia1, Roberto Mendoza1, Jihan Issa1.

clula sufra dao alguno ni se destruya se conoce como catalizador. Las enzimas son sustancias (protenas) que actan como catalizadores en las clulas y hacen posibles las, reacciones que ocurren en las clulas disminuyendo la cantidad de energa de activacin que se necesita. Las enzimas tambin controlan la velocidad a la que ocurre la reaccin para que la energa se libere a una temperatura que no haga dao al organismo. Las miles de reacciones que constituyen el metabolismo de los seres vivos estn bajo control de miles de enzimas. Diferentes enzimas controlan diferentes reacciones. La sustancia sobre la cual acta una enzima se llama Sustrato: Al ocurrir una reaccin el sustrato se convierte en uno o ms productos nuevos. Las enzimas no se consumen en las reacciones y se pueden volver a utilizar. Sin embargo una enzima particular acta solo sobre un sustrato especfico, as que una enzima solo puede controlar un tipo de reaccin especfica. Una enzima recibe el nombre del sustrato sobre el cual acta; Ej. Anhidrasa carbnica, la cual acta en la conversin del CO2 en HCO3. Como nota, a una parte del nombre del sustrato sobre el cual acta la enzima se le aade el sufijo asa. Corno las enzimas son protenas; los factores que afectan la estructura de la protena, tambin afectan la funcin o actividad de las enzimas. La temperatura, el pH y la concentracin son

algunos de los factores que influyen en la actividad de las enzimasMateriales y mtodos En la prctica experimental se realizaron distintos procedimientos para determinar la actividad enzimtica en distintos materiales y reactivos. Laboratorio beakers, tubos de ensayo pequeo, bao mara, gradilla, vidrio de reloj, pinzas para tubos de ensayo, cuchilla, papel absorbente, estufa, termmetro, probetas, pipetas, cinta para rotular. Reactivos y soluciones 100 ml de solucin de perxido de hidrogeno al 6%, agua destilada, agua de bolsa, hielo, cido actico, hidrxido de sodio, solucin salina, solucin de almidn y saliva. Biolgicos 200 gramos de hgado fresco licuado en poco agua. Para lograr la determinacin de catalasa se tomaron 4 tubos de ensayo en uno se le aadi 0ml de extracto de hgado, al otro se le aadi un mililitro de extracto de hgado, al tercero 2 mililitros de extracto de hgado, y al cuarto 4 mililitros de extracto de hgado. Luego de tener los cuatro tubos de ensayo listos se le agrego 2 mililitros de perxido de hidrogeno (H2o2). Luego se usaron cinco tubos de ensayo cada uno con 1 mililitro de extracto de hgado al primero se le aadi 0 mililitros de H2o2, al

segundo 1 mililitro de H2o2, al tercero 2 mililitros de H2o2, al cuarto 4 mililitros de H2o2 y al quinto 6 mililitros de H2o2. Para determinar en qu medio trabaja mejor la catalasa (temperatura) fue necesario utilizar tres tubos de ensayo cada uno con 2 mililitros de extracto de hgado aadiendo 2 mililitros de H2o2 en cada uno de estos, en distintas temperaturas tales como caliente, ambiente y frio. Para la determinacin de la reaccin enzimtica se usaron 3 tubos de ensayo todos con 2 mililitros de extracto de hgado, donde al primero se le adiciono 5 gotas de cido actico, al segundo 5 gotas de suero fisiolgico y al tercero 5 gotas de amoniaco. Luego para establecer cmo actan las enzimas con las distintas sustancias fue necesario utilizar 4 tubos de ensayo, a los dos primero se le adicionaron a uno 1 mililitro de saliva y al otro 1 mililitro de extracto hgado correspondientemente ms 2 mililitros de H2o2, a los otros 2 se le adiciono a uno 1 mililitro de extracto de saliva y al otro 1 mililitro de extracto de hgado ms de 2 mililitros de solucin de almidn y 5 gotas de Lugol durante tres minutos. Para la determinacin del PH fue necesario utilizar distintos materiales y reactivos tales como leche, saliva, orina, agua de mar, gaseosa, suero fisiolgico, orina diabtica, vinagre,

limn, azcar, detergente liquido, clara de huevo y alka seltzer. Resultados Determinacin de la catalasa

Parte a: en este procedimiento logramos observar que la muestra constituida por 1 mililitro de extracto de hgado con 2 mililitros de perxido de hidrogeno obtuvo una mayor concentracin la cual fue completa a comparacin de la otras ya que por su menor cantidad se consumieron todas las enzimas.

Parte b: en la muestra constituida por 1 mililitro de extracto de hgado con 6 mililitro de H2o2 se logr observar la perdida de las enzimas ya que su volumen cambio y se present una mayor efervescencia.

Temperatura

Actividad enzimtica

Ambiente la temperatura aumento, caliente se demacro la enzima y no sucedi nada, frio hubo una mayor efervescencia aumentando su temperatura causndole menor volumen.

Parte a cido actico cambio completamente ya que pareca que estuviera en proceso de desnaturalizacin. Suero fisiolgico (neutro) se calent debido a que es una sustancia exotrmica sustancia exotrmica es aquella capaz de liberar calor. Amoniaco (bsico) no se present ningn cambio.

Los resultados de este proceso se ven reflejados en el siguiente cuadro. sustancias Leche Saliva Orina Agua de mar Gaseosa Suero fisiolgico Orina diabtica Vinagre Limn Azcar Detergente liquido Clara de huevo Alka seltzer Parte b Las enzimas que se producen en la saliva van ligada a los carbohidratos. Las enzimas del hgado no actan bien con el almidn y saliva s. (Funcin contraria). Valor PH 7 7 5 6 2 7 5 3 1 7 8 9 6

Determinacin del PH

Discusin

Conclusin

Bibliografa De la Hoz, T. 2013. Biologa general, gua de laboratorio. Actividad enzimtica. De la Hoz, T. 2013. Biologa general, gua de laboratorio pH.