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N dordre Anne 2008

Thse



Dgradation anarobie de dchets solides :
caractrisation, facteurs dinfluence et
modlisations



prsente devant
LINSTITUT NATIONAL DES SCIENCES APPLIQUEES DE LYON


pour obtenir
le grade de docteur


Formation doctorale : Sciences de lEnvironnement Industriel et Urbain
cole doctorale : cole doctorale de Chimie de Lyon

Par
Maxime Rouez

Soutenance le 29 Septembre 2008 devant la Commission dexamen

Jury
Directeur R. BAYARD Matre de Confrence (LGCIE, INSA Lyon)
Examinateur T. BOUCHEZ Charg de recherche (Cemagref, Antony)
Prsident P. BUFFIERE Professeur (LGCIE, INSA Lyon)
Directeur R. GOURDON Directeur de recherche (LGCIE, INSA Lyon)
Rapporteur A. PAUSS Professeur (Universit Technique de Compigne)
Rapporteur F. POLANCO Professeur (Universit de Valladolid, Espagne)

Membre Invit : D. BLANC (Matre de Confrence, LGCIE, INSA Lyon)
Laboratoire de recherche : Laboratoire de Gnie Civil et dIngnierie Environnementale Site
Carnot (ex LAEPSI)


Thse M. Rouez 2008 - 4 -
LGCIE, INSA Lyon
Rsum
La caractrisation des phnomnes de biodgradation des dchets mnagers et assimils (DMA), la
comprhension des facteurs qui influencent ces phnomnes et la prvision du comportement des
DMA en conditions anarobies sont des enjeux importants pour la bonne gestion de ces dchets
organiques. Cette tude a permis dexplorer ces trois thmatiques par la mise en uvre de tests
anarobies contrls sur DMA et fractions de DMA. Les rsultats obtenus montrent que pour les
diffrents dchets et fractions tudis, la biodgradabilit anarobie est bien corrle avec la
biodgradabilit arobie, mais difficilement corrlable avec les caractrisations chimiques qui se sont
rvles insuffisantes. Ltude exprimentale a rvl la difficult de ralisation dun test de Potentiel
Bio Mthanogne (PBM) optimis, dun point de vue cintique notamment. La quantit de matire
organique dgradable et disponible vis--vis de lactivit bactrienne au sein du test savrent tre des
facteurs importants et dlicats matriser. Par ailleurs, des essais spcifiques ont confirm les
connaissances actuelles sur linfluence de quelques facteurs tels que la granulomtrie et la teneur en
eau. Une dmarche de complexification successive dun modle a t mise en uvre en se restreignant
aux expriences menes au laboratoire. Au-del de la difficult dintgrer les facteurs dinfluence dans
un formalisme commun, un modle suffisant a pu tre identifi pour chaque condition opratoire.

Mots-cls: dchets mnagers et assimils, caractrisations, biodgradabilit, potentiel mthanogne,
biogaz, modlisations

Solid waste anaerobic degradation: characterisation, influence factors and modelings
Abstract
Characterisation of municipal solid waste (MSW) biodegradation phenomena, understanding of
factors influencing those phenomena and prediction of MSW behaviour under anaerobic conditions
are important issues for an efficient MSW management. This study explored those three thematics by
means of controlled anaerobic tests performed with MSW and fractions of MSW. The obtained results
showed that, for the different studied wastes, anaerobic biodegradability is well correlated with aerobic
biodegradability, but weakly correlated with chemical characterisation, which remained unsufficient.
The experimental study demonstrated the difficulty in performing an optimised Biochemical Methane
Potential (BMP) test, particularly from a kinetic point of view. Degradable and available organic
matter quantity with regard to the bacterial activity within the test are important factors, whose control
remained fussy. Also, specific trials confirmed the actual knowledge on factors affecting the biogas
production, such as particle size and water content. A modeling approach of increasing complexity
was implemented to represent some of the laboratory scale experiments. Beyond the difficulty to
integrate all studied influence factors, a sufficient model has been identified for each specific
conditions.

Key words: Municipal solid wastes, characterisations, biodegradability, methane potential, biogas,
modelings

Thse M. Rouez 2008 - 5 -
LGCIE, INSA Lyon
Ces travaux ont fait lobjet de :

Publications avec comit de lecture
Bayard, R., de Brauer, C., Ducom, G., Naquin, P., Sarrazin, B., Achour, F., Rouez, M. & de Araujo
Morais, J. (2007). Influence du pr-traitement mcanique et biologique des ordures mnagres
rsiduelles sur leurs caractristiques bio-physico-chimiques. /TSM/. N5 Juillet 2007, pp.93-106.
de Arajo Morais, J. ; Ducom, G. ; Achour, F. ; Rouez, M. & Bayard, R.. Mass balance to assess the
efficiency of a Mechanical Biological Treatment before landfilling. /Waste Management/ 2007
Joseph, O. ; Rouez, M. ; Mtivier-Pignon, H. ; Bayard, R. Emmanuel, E. & Gourdon, R. (2008).
Anaerobic degradation of sugar cane bagasse for biogas production and enhanced adsorption
capacities for heavy metals removal. /Bioressource Technology/. (Soumise en juillet 2008)
Bayard, R. ; de Arajo Morais, J. ; Ducom, G. Achour, F. ; Rouez, M. & Gourdon, R. (2008). Carbon
balance and evaluation of biostability in an industrial unit of Mechanical - Biological Treatment of
municipal solid waste. Environment International, /(Soumise en juillet 2008)

Confrences internationales avec comit de lecture
Achour, F. ; de Araujo Morais, J. ; Rouez, M. de Brauer, C. ; Ducom, G. & Bayard, R. (2005).
Characterization of Organic Matter in Municipal Solid Wastes : a pertinent tool for the assessment of a
mechanical-biological treatment. International Symposium MBT 2005. 23-25 november 2005.
Wasteconsult International. Cuvillier Verlag. ISBN 3-86537-665-7. (*communication orale*).
Bayard, R. ; de Araujo Morais, J. ; Rouez, M. ; Fifi, U. ; Ducom, G. & Gourdon, R. (2008). Effect of
Biological Pretreatment of MSW on Landfill Behaviour : Laboratory Study. Vth International
Symposium on Anaerobic Digestion of Solid Wastes and Energy Crops Vth ISAD-SW&EC 2008.
Hammamet, Tunisia, May 25 to 28, 2008. (*communication orale*).
Rouez, M. ; Bayard, R. & Gourdon, R. (2008). Evaluation of aerobic and anaerobic biodegradability
of individual fractions of MSW as compared to mixed waste. WASTEENG08. 2nd International
Conference on Engineering for Waste Valorisation. June 3-5, 2008, Patras, Greece. (*affiche*).

Sommaire
Thse M. Rouez 2008 - 6 -
LGCIE, INSA Lyon
SOMMAIRE

Liste des figures ............................................................................................................... 11
Liste des tableaux ............................................................................................................ 15
Introduction gnrale...................................................................................................... 18

PARTIE A: BIBLIOGRAPHIE
I. Gnralits sur la filire de stockage des dchets mnagers et assimils (DMA) .. 21
I.1. Aspects quantitatifs, qualitatifs et lgislatifs.................................................................................. 21
I.2. Evolution des DMA en centres denfouissement........................................................................... 22
I.2.1. Description gnrale dun massif de dchet ...................................................................... 22
I.2.2. Les cinq tapes dvolution dune ISDND........................................................................ 23
I.3. Facteurs dinfluence de lvolution des DMA en centre denfouissement .................................... 25
I.4. Evolutions des modes de gestion des centres denfouissement .................................................... 28

II. Caractristiques des dchets mnagers et de leur matire organique .................. 30
II.1. Caractristiques physiques............................................................................................................ 30
II.1.1. Composition gnrale....................................................................................................... 30
II.1.2. Autres caractristiques physiques..................................................................................... 32
II.2. Caractristiques chimiques et biochimiques de la matire organique des DMA.......................... 33
II.2.1. Gnralits........................................................................................................................ 33
II.2.2. Caractristiques chimiques............................................................................................... 34
II.2.3. Caractristiques biochimiques.......................................................................................... 37
II.3. Caractristiques biologiques......................................................................................................... 40

III. Biodgradations de la MO des DMA...................................................................... 42
III.1. Aspects gnraux bactriens........................................................................................................ 42
III.2. Phase dhydrolyse........................................................................................................................ 43
III.3. Biodgradation arobie................................................................................................................ 44
III.3.1. Aspects stoechiomtriques.............................................................................................. 44
III.3.2. Aspects cintiques........................................................................................................... 45
III.4. Biodgradation anarobie............................................................................................................ 46
III.4.1. Les 4 tapes biochimiques successives de la mthanogense......................................... 46
III.4.2. Aspects stoechiomtriques.............................................................................................. 48
III.4.3. Aspects cintiques........................................................................................................... 49
III.4.4. Les principales autres respirations anarobies ................................................................ 49
III.5. Facteurs dinfluence de la mthanogense.................................................................................. 51
III.5.1. Inhibiteurs de la mthanognse ..................................................................................... 51
III.5.2. Balance acidogense / mthanogense............................................................................ 53
III.5.3. Autres facteurs dinfluence de la mthanogense........................................................... 54


Sommaire
Thse M. Rouez 2008 - 7 -
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IV. Moyens dvaluation de la biodgradabilit des DMA ......................................... 61
IV.1. Principe et considrations gnrales ........................................................................................... 61
IV.2. Evaluation de la biodgradabilit en arobiose........................................................................... 63
IV.2.1. Les diffrents essais et mthodes dvaluation............................................................... 63
IV.2.2. Domaines dutilisation et limites des essais.................................................................... 65
IV.3. Evaluation de la biodgradabilit en anarobiose....................................................................... 67
IV.3.1. Les diffrents essais et mthodes dvaluation............................................................... 68
IV.3.2. Domaines dutilisation et limites des essais.................................................................... 70
IV.4. Tests dits de simulation ......................................................................................................... 74

V. Modlisation de la production de biogaz par biodgradation anarobie de la matire
organique........................................................................................................................ 75
V.1. Evaluation du potentiel mthanogne selon les caractristiques chimiques et biochimiques ...... 76
V.1.1. Mthode gnrale : approche stoechiomtrique............................................................... 76
V.1.2. Limites de lapproche stoechiomtrique .......................................................................... 78
V.2. Modles cintiques du premier ordre ........................................................................................... 81
V.2.1. Aspects fondamentaux de la cintique chimique ............................................................. 81
V.2.2. Modlisation partir des concepts de cintique chimique............................................... 82
V.2.3. Exemples dapplication aux centres denfouissement...................................................... 83
V.2.4. Bilan................................................................................................................................. 84
V.3. Modles biologiques..................................................................................................................... 85
V.3.1. Aspects fondamentaux de la cintique bactrienne.......................................................... 85
V.3.2. Modlisation des tapes biologiques................................................................................ 86
V.3.3. Modlisation de la phase dhydrolyse.............................................................................. 88
V.4. Prise en compte de processus limitants et de facteurs dinfluence dans les modles................... 89
V.4.1. Phnomnes dinhibition.................................................................................................. 89
V.4.2. Modlisations affines de lhydrolyse.............................................................................. 91
V.4.3. Teneur en eau et prise en compte de lhydrodynamique.................................................. 92
V.4.4. Autres facteurs dinfluence physico-chimiques ............................................................... 94

VI. Bilan et objectifs........................................................................................................ 98

PARTIE B: ETUDE DE LA BIODEGRADATION DE DECHETS
MENAGERS ET DE LEURS FRACTIONS CONSTITUTIVES
I. Matriels et mthodes................................................................................................ 103
I.1. Matriaux tests et caractrisations gnrales.............................................................................. 103
I.1.1. Les diffrents dchets et matriaux tests........................................................................ 103
I.1.2. Caractrisations gnrales................................................................................................ 108
I.2. Incubations anarobies................................................................................................................. 114
I.2.1. Protocole gnral ............................................................................................................. 114
I.2.2. Conditions opratoires optimises ................................................................................... 118
I.2.3. Etude de facteurs dinfluence spcifiques........................................................................ 121


Sommaire
Thse M. Rouez 2008 - 8 -
LGCIE, INSA Lyon
II. Rsultats et discussions............................................................................................ 126
II.1. Caractrisations gnrales .......................................................................................................... 126
II.1.1. Analyses gravimtriques, lmentaires et physiques...................................................... 126
II.1.2. Demande Biochimique en Oxygne sur solides ............................................................. 128
II.2. Incubations anarobies................................................................................................................ 141
II.2.1. Incubations de mise au point .......................................................................................... 141
II.2.2. Etude en conditions dincubations optimises................................................................ 152
II.2.3. Facteurs dinfluence spcifiques .................................................................................... 168
II.2.4. Dchet MIX : comparaison des biodgradations exprimentale et calcule .................. 177
II.2.5. Corrlation entre biodgradabilit arobie et anarobie................................................. 178

III. Conclusions.............................................................................................................. 180

PARTIE C: MODELISATIONS DE LA PRODUCTION DE BIOGAZ EN
CONDITIONS DE LABORATOIRE
I. Matriels et mthodes................................................................................................ 185
I.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises ......................................................... 185
I.1.1. Modle dordre 1 avec hydrolyse cintiquement limitante.............................................. 185
I.1.2. Modle biologique avec hydrolyse et mthanogense..................................................... 187
I.1.3. Modle biologique avec inhibitions de la mthanognse............................................... 192
I.2. Influence de la taille des particules .............................................................................................. 194
I.2.1. Aspects gnraux............................................................................................................. 194
I.2.2. Structure du modle......................................................................................................... 195
I.2.3. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres ...................................... 196
I.3. Influence de la teneur en eau........................................................................................................ 197
I.3.1. Structure du modle......................................................................................................... 197
I.3.2. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres ...................................... 199

II. Rsultats et discussions............................................................................................ 200
II.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises ........................................................ 200
II.1.1. Modle dordre un avec hydrolyse cintiquement limitante .......................................... 200
II.1.2. Modle biologique simple avec hydrolyse suivie de mthanogense ...................... 203
II.1.3. Modle biologique avec inhibition de la mthanogense............................................... 210
II.2. Influence de la taille des particules............................................................................................. 215
II.2.1. Identification des constantes dhydrolyse....................................................................... 215
II.3. Influence de la teneur en eau ...................................................................................................... 219
II.3.1. Identifications prliminaires........................................................................................... 219
II.3.2. Influence de la teneur en eau.......................................................................................... 221

III. Conclusions.............................................................................................................. 223

Conclusions gnrales ................................................................................................... 226
Sommaire
Thse M. Rouez 2008 - 9 -
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Listes des abrviations

ADEME : Agence De lEnvironnement et de la Matrise de lEnergie
ADF : Acid Detergent Fiber
ADL : Acid Detergent Lignin
ADM : Anaerobic Digestion Model
AGLC : Acides Gras Longues Chanes
AGV : Acides Gras Volatils
AT
n
: Activit Respiratoire sur n jours
CAE : Capacit dAuto-Echauffement
CT : Carbone Total
COT : Carbone Organique Total
COV : Composs Organiques Volatils
CELL : Cellulose
CET: Centre dEnfouissement Technique
CNTP : Conditions Normales de Temprature et Pression
CSD : Centre de Stockage des Dchets
CSDU : Centre de Stockage des Dchets Ultimes
DBO
n
: Demande Biologique en Oxygne n jours
DBOS : Demande Biologique en Oxygne sur Solide
DCO : Demande Chimique en Oxygne
DMA: Dchets Mnagers et Assimils
DRI : Dynamic Respiration Index
DSOUR : Dry Specific Oxygen Uptake Rate
EPA : Environmental Protection Agency
FB : Fraction Biodgradable
GB
n
: Test de fermentation sur n jours
GS
n
: Test dincubation sur n jours
HEM : Hmicelluloses
ICPE : Installations Classes pour la Protection de lEnvironnement
ISD : Installations de Stockage des Dchets
ISDND: Installations de Stockage des Dchets Non Dangereux
Sommaire
Thse M. Rouez 2008 - 10 -
LGCIE, INSA Lyon
IWA : International Water Association
LIGN : Lignine
MO : Matire organique
MODECOM :
MOO : Matire Organique Oxydable
MS : Matire Sche
MV : Matire Volatile
NDF : Neutral Detergent Fiber
NPP : Nombre le Plus Probable
NR : Non Renseign
OUR : Oxygen Uptake Rate
PBM : Potentiel Bio-Mthanogne
PTMB : Pr-Traitements Mcaniques et Biologiques
Ratio I/S : Ratio Inoculum / Substrat
ROPA : Racteurs Ouverts Parfaitement Agits
SBK : Surface Based Kinetics
SOUR : Specific Oxygen Uptake Rate
SRI : Static Respiratory Index
STEP : Station dEpuration des Eaux Pollues
UFC : Unit formant colonies


Liste des figures
Thse M. Rouez 2008 - 11 -
LGCIE, INSA Lyon
Liste des figures
Figure 1 : Evolution de la composition des lixiviats et du biogaz au cours de la dgradation anarobie,............. 24
Figure 2 : Illustration interactions entre les principaux phnomnes caractrisant lvolution dun site
denfouissement, les caractristiques du milieu dont ils dpendent et les facteurs les conditionnant ......... 26
Figure 3 : Facteurs dinfluence de lvolution des DMA en conditions denfouissement selon diffrentes chelles
dobservation ............................................................................................................................................... 27
Figure 4 : Fractionnement Van Soest daprs Buffire (2006) Lgende : NDF, Neutral Detergent Fiber ; ADF,
Acid Detergent Fiber ; ADL, Acid Detergent Lignin ; Rsidu 550C par calcination ................................ 39
Figure 5 : Dgradation anarobie de la matire organique.................................................................................... 50
Figure 6 : Variations du taux de croissance relatif des bactries mthanognes en fonction de la temprature
(source : Batstone et al., 2002) .................................................................................................................... 58
Figure 7 : Modle propos pour la production de biogaz lors du test dincubation daprs (Adani et al., 2001)
(A : chantillon trs stable, B : chantillon imparfaitement stabilis, C : chantillon frais )................. 71
Figure 8 : Production cumule de mthane sur dchet alimentaire diffrentes concentrations initiales pour une
mme concentration en inoculum (20 % v/v), daprs (Cho et al., 1995) ................................................... 72
Figure 9 : Valeurs du coefficient dinhibition des bactries mthanognes en fonction du pH (Batstone et al.
2002)............................................................................................................................................................ 95
Figure 10 : Facteur dimpact de la temprature sur lhydrolyse et les ractions biologiques (Mora Naranjo et
al., 2004)...................................................................................................................................................... 97
Figure 11 : Courbe exponentielle et paramtres associs.................................................................................... 113
Figure 12 : Courbe de Gompertz et paramtres associs .................................................................................... 117
Figure 13 : Exemples de variabilits des consommations cumules doxygne entre rplicats.......................... 129
Figure 14 : Autres exemples de variabilits entre rplicats lors des mesures de DBOS ..................................... 129
Figure 15 : Exemples de variabilit des mesures de DBOS entre deux exprimentations diffrentes ................ 130
Figure 16 : Consommations cumules moyennes doxygne observes sur la cellulose lors de diffrentes
exprimentations........................................................................................................................................ 130
Figure 17 : Pressions mesures et DBOs correspondantes obtenues pour deux des rpliquas de lincubation de
FGb 10 gMV.L
-1
..................................................................................................................................... 131
Figure 18 : DBOS en fonction du taux de MV pour chaque matriau test........................................................ 134
Figure 19 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours)
pour chacun des matriaux tests dans la srie 1. ...................................................................................... 136
Figure 20 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours)
pour chacun des matriaux tests srie 2. .................................................................................................. 137
Liste des figures
Thse M. Rouez 2008 - 12 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 21 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, , les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours)
pour chacun des matriaux tests srie 3................................................................................................... 138
Figure 22 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours)
pour chacun des matriaux tests srie 4................................................................................................... 139
Figure 23 : Consommations cumules doxygne exprimentale et calcule du dchet reconstitu MIX......... 140
Figure 24 : Productions cumules moyennes de biogaz (mL.gMV
-1
) et cart-types associs en fonction du temps
(jours) pour les incubations de fines grises, avec pour symboles : (o), CO
2
; (+), CH
4
; (), rgression selon
lquation de Gompertz ............................................................................................................................. 142
Figure 25 : Illustration des productions cumules de biogaz total obtenues lors des essais de mise au point..... 143
Figure 26 : Effet de lagitation manuelle ou magntique sur les productions cumules moyennes de mthane avec
utilisation de 50 et 100 % dinoculum....................................................................................................... 144
Figure 27 : Productions cumules de mthane en fonction du temps selon la quantit dinoculum utilise (10, 50
ou 100 % v/v) et aprs ajout complmentaire de substrat.......................................................................... 145
Figure 28 : Corrlation entre les vitesses maximales et les temps de latence des productions de mthane de
lensemble des exprimentations de mise au point sur les fines grises...................................................... 146
Figure 29 : Productions cumules moyennes de biogaz (mL.gMV
-1
) et cart-types associs en fonction du temps
(jours) pour les incubations de cellulose, avec pour symboles : (o), CO
2
; (+), CH
4
; (), rgression selon
lquation de Gompertz ............................................................................................................................. 149
Figure 30 : Effet de lagitation manuelle ou magntique sur les productions cumules moyennes de mthane avec
utilisation de 50 ( gauche) et 100 % ( droite) dinoculum...................................................................... 151
Figure 31 : Relation entre les potentiels ultimes moyens en mthane et en biogaz total pour les diffrents
matriaux tests ......................................................................................................................................... 154
Figure 32 : Potentiels en biogaz (mL.gMS
-1
) en fonction des caractristiques chimiques (teneur en CT gauche
et en MV droite) pour les diffrents matriaux tests ............................................................................. 154
Figure 33 : Potentiels en biogaz (mL.gMS
-1
) en fonction des DBOs (mL.gMS
-1
) pour les diffrents matriaux
tests (seul T3 Cell est reprsent ici et est not CELL) ........................................................................... 155
Figure 34 : Relation entre potentiels ultimes moyens en mthane (mL.gMV
-1
) et taux maximum de production de
mthane (mL.gMV
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests .................................................................... 157
Figure 35 : Relation entre potentiels ultimes moyens en mthane (mgC(CH
4
).L
-1
) et taux maximum de
production de mthane (mgC(CH
4
).L
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests ....................................... 158
Figure 36 : Relation entre potentiels ultimes en mthane (mgC(CH
4
).L
-1
) et taux maximum de production de
mthane (mgC(CH
4
).L
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests .............................................................. 159
Figure 37 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie ................. 160
Figure 38 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie 2 .............. 161
Liste des figures
Thse M. Rouez 2008 - 13 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 39 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie 3 .............. 162
Figure 40 : Superposition des productions cumules de mthane (mL.gMV
-1
) en fonction du temps (jours)
obtenues lors des premires incubations et lors des ajouts pour trois matriaux (LAN, BRUT et DA) .... 164
Figure 41 : Relation entre les diffrents paramtres obtenus lissu des deux incubations successives pour les
diffrents matriaux tests ......................................................................................................................... 165
Figure 42 : Productions cumules moyennes (et cart-types) en mthane ( gauche) et en biogaz total ( droite)
en mL.gMV
-1
en fonction du temps en jours et de la taille des particules employes (1 ou 10 mm et 1 ou
4 mm) pour les cinq substrats tests .......................................................................................................... 171
Figure 43 : Productions cumules de CH
4
(en haut) et en CO
2
(en bas) obtenues pour les dchets BRUT (
gauche) et MAT ( droite) selon le type dinoculum employ : fumier If (o), lixiviat de dchets Id (),
boue de STEP Is (-) et sans inoculation (). ........................................................................................... 174
Figure 44 : Productions cumules de mthane (mL.gMV
-1
) en fonction du temps des exprimentations ralises
sur le dchet MAT diffrentes teneurs en eau initiales (W = 130, 300 et 500 mL(H
2
O).gMS
initiale
)....... 176
Figure 45 : Comparaisons des productions cumules de mthane et de biogaz, exprimentales et calcules, pour
le dchet MIX, partir des mesures ralises sur chacun de ses composants ........................................... 177
Figure 46 : Relations entre biodgradabilits anarobies (Pot CH
4
gauche et Pot Biogaz, droite) et arobie
(DBOS) pour lensemble des matriaux tests 1 mm dans des conditions optimales............................. 178
Figure 47 : Corrlations linaires entre biodgradabilits anarobies (Pot CH
4
gauche et Pot Biogaz, droite) et
arobie (DBOS) pour lensemble des dchets complexes tests 1 mm dans des conditions optimales .. 179
Figure 48 : Schma gnral utilis pour la modlisation de la dgradation anarobie de matire organique
complexe ................................................................................................................................................... 187
Figure 49 : Interface graphique ralise pour lidentification des paramtres du modle biologique................. 190
Figure 51 : Exemples de rgressions exponentielles simple ( gauche) et multi-susbtrats droite ralises
titre dexemple sur la production cumule moyenne de biogaz (mL.gMV
-1
) des dchets verts (DV)....... 202
Figure 52 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n1.......................................................................................................... 205
Figure 53 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n2.......................................................................................................... 206
Figure 54 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n3.......................................................................................................... 207
Figure 55 : Relations entre teneur en MV des inocula utiliss et la concentration initiale B0 en bactries
mthanognes dtermine par le modle................................................................................................... 208
Figure 56 : Rponses du modle (lignes) suite aux modifications ralises pour rduire les carts avec les
productions exprimentales (points) des matriaux DV et YE.................................................................. 209
Figure 57 : Rponses du modle, productions de mthane gauche et de MO soluble droite selon la valeur de
la constante dinhibition K
I
(avec n = 3) ; la production exprimentale ( Exp.) est indique titre
comparatif ainsi que la rponse du modle sans inhibition ( )............................................................. 210
Liste des figures
Thse M. Rouez 2008 - 14 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 58 : Valeurs du coefficient dinhibition de la mthanogense I
AGV
en fonction de la concentration en
substrat soluble S (AGV) pour diffrentes valeurs du degr de linhibition, n.......................................... 211
Figure 59 : Rponses obtenues par modlisation avec inhibition de la mthanogense (lignes) vis--vis des
productions de biogaz exprimentales (points) du dchet LAN................................................................ 212
Figure 60 : Relation entre vitesse maximale de production du mthane (Rm) et potentiels mthanognes ultimes
(Pot CH
4
) obtenue par rgressions de Gompertz sur les rponses du modle pour diffrentes concentrations
initiales en MO complexe gazifiable ....................................................................................................... 214
Figure 61 : Rponses du modle aprs identification des paramtres vis--vis des productions exprimentales
obtenues sur les incubations des diffrents papiers (PC, PB et PJ) et du bois de tilleul (TIL) broys 1 mm
................................................................................................................................................................... 216
Figure 62 : Sensibilit du modle aux valeurs de tailles des particules dgrades.............................................. 217
Figure 63 : Productions exprimentales de biogaz et rponses du modle pour les incubations des diffrents
papiers (PC, PB et PJ) et du bois de tilleul (TIL) broys 10 et 4 mm respectivement ............................ 218
Figure 64 : Rponse du modle vis--vis de la production exprimentale de mthane pour lincubation du
matriau MAT une teneur en eau de 5 gH
2
O.gMS
-1
laide des paramtres et conditions initiales
mentionnes Tableau 47 ............................................................................................................................ 219
Figure 65 : Sensibilit du modle aux valeurs du taux de croissance et de la concentration initiale des bactries
mthanognes laide des conditions initiales mentionnes Tableau 47 .................................................. 220
Figure 66 : Rponses du modle vis--vis des productions cumules exprimentales de mthane pour les trois
exprimentations ralises aux trois teneurs en eau (130, 300 et 500 %) en considrant une teneur en eau
optimale de 140 % et minimale de 53 %................................................................................................... 221
Figure 67 : Schma du dispositif ralis pour lentretien des inoculums et le suivi de la production de biogaz 248
Figure 68 : Exemples dacquisition de pressions laide du manomtre seuil (A) et de production cumule
obtenues aprs traitement des donnes (B) lissu de lalimentation du racteur..................................... 249
Figure 69 : Comparaison des systmes dacquisition de pression, avec seuil (P 500) et sans seuil (P 1000), aprs
................................................................................................................................................................... 250
Liste des tableaux
Thse M. Rouez 2008 - 15 -
LGCIE, INSA Lyon
Liste des tableaux
Tableau 1 : Dure des phases de dgradation en centre denfouissement de DMA (Augenstein & Pacey, 1991)25
Tableau 2 : Exemple de classification gnrale des DMA propose par Tchobanoglous et al. (1993)................. 30
Tableau 3 : Composition moyenne des DMA franais selon les catgories MODECOM (Ademe, 1998).......... 31
Tableau 4 : Analyses chimiques des constituants typiques de DMA (Tchobanoglous et al., 1993) et des fractions
MODECOM (Ademe, 1998) ....................................................................................................................... 36
Tableau 5 : Composition biochimique (ligno-cellulosique) de DMA et de constituants typiques rapporte par
diffrents auteurs ......................................................................................................................................... 39
Tableau 6 : Populations microbiennes anarobies
*
au sein des dchets et de fractions organiques de dchets .... 41
Tableau 7 : Potentiels en CO
2
, CH
4
et biogaz (mL.gMV
-1
) de diffrentes molcules organiques selon lquation
de Buswell (Angelidaki, 2002) .................................................................................................................... 48
Tableau 8 : Composs inhibiteurs de la mthanogense et tapes affectes. ........................................................ 52
Tableau 9 : Potentiels mthanognes et constantes cintiques de premier ordre de matriaux organiques divers et
fractions de DMA de la littrature (cart-types exprimentaux entre rpliquats entre parenthses, toutes
donnes obtenues 35C)............................................................................................................................ 73
Tableau 10 : Potentiels en CH
4
(en mL.gMV
-1
et en mL.gDCO
-1
) de diffrentes molcules organiques selon
lquation de Buswell (Angelidaki & Sanders, 2004) ................................................................................. 77
Tableau 11 : Potentiels thoriques de diffrentes fractions de dchets en volume de gaz exprim dans les CNTP
en mL.g
-1
ou L.kg
-1
ou m
3
.t
-1
(calcul partir des donnes de composition lmentaire mentionnes par
Tchobanoglous et al., 1993) ........................................................................................................................ 77
Tableau 12 : Fraction biodgradable (FB) de la matire volatile dun matriau en fonction de son contenu en
lignine (L) (Tchobanoglous et al., 1993)..................................................................................................... 79
Tableau 13 : Fraction biodgradable de la matire sche dun matriau en fonction de son contenu en cellulose,
hmicellulose et lignine (donnes exprimes en % des MS) ....................................................................... 80
Tableau 14 : Domaines de valeurs de constantes cintiques de dgradation des DMA en conditions
denfouissement cites dans la littrature .................................................................................................... 84
Tableau 15 : Constantes cintiques dhydrolyse de MO particulaire cits dans la littrature ............................... 89
Tableau 16 : Fractions organiques de dchets mnagers considres dans la procdure NF XP X30-408 et dans la
prsente tude ............................................................................................................................................ 104
Tableau 17 : Composition du dchet MIX reconstitu partir des fractions MODECOM................................ 107
Tableau 18 : Conditions exprimentales des incubations et matriaux testes en arobiose .............................. 111
Tableau 19 : Composition du milieu minral utilis pour les tests de DBOs...................................................... 111
Tableau 20 : Rcapitulatif des conditions dincubation mises en uvre lors de lessai de mise au point du test
dincubation anarobie (PBM) .................................................................................................................. 119
Liste des tableaux
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Tableau 21 : Conditions exprimentales des incubations optimises et matriaux tests lors de chaque srie
dincubations ............................................................................................................................................. 121
Tableau 22 : Rcapitulatif des conditions opratoires des incubations pour lanalyse des effets de la taille des
particules et matriaux tests ..................................................................................................................... 122
Tableau 23 : Rcapitulatif des essais raliss dans diffrentes conditions dinoculation.................................... 123
Tableau 24 : Conditions opratoires des tests PBM en phase solide pour ltude de linfluence de la teneur en eau
................................................................................................................................................................... 124
Tableau 25 : Rsultats des analyses gravimtriques et lmentaires gnrales pour lensemble des matriaux. 126
Tableau 26 : Rsultats des analyses lmentaires complmentaires ralises sur quelques matriaux............... 127
Tableau 27 : Rsultats des analyses de masse volumique (moyenne et cart-type) ............................................ 127
Tableau 28 : Rsultats des mesures de capacit de rtention en eau................................................................... 128
Tableau 29 : Consommations exprimentales, constantes de vitesse et pourcentages de dgradation obtenus lors
des dgradations optimales........................................................................................................................ 133
Tableau 30 : Rsultats moyens et cart-types des potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques des
productions de mthane ............................................................................................................................. 141
Tableau 31 : Rsultats des analyses de carbone en solution de linoculum utilis et de diffrents essais de la mise
au point en fin dincubation....................................................................................................................... 147
Tableau 32 : Rsultats moyens et cart-types des potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques des
productions de mthane obtenus lors des essais de mise au point avec la cellulose.................................. 148
Tableau 33 : Rsultats moyens et cart-types des productions cumules totales de biogaz et des paramtres
cintiques de la production de mthane selon lquation de Gompertz obtenus lors des premires
incubations en conditions optimises ........................................................................................................ 153
Tableau 34 : Caractristiques physico-chimiques des boues utilises en tant quinoculum pour les diffrentes
exprimentations........................................................................................................................................ 157
Tableau 35 : Potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques de la production de mthane selon lquation
de Gompertz obtenus lissue des secondes incubations .......................................................................... 163
Tableau 36 : Rsultats des analyses de carbone en solution en fin dincubation des diffrents essais PBM mis en
uvre selon le protocole optimis ............................................................................................................. 166
Tableau 37 : Rsultats moyens et cart-types associs aux incubations ............................................................. 168
Tableau 38 : Caractristiques des diffrents inoculums utiliss.......................................................................... 172
Tableau 39 : Productions de biogaz et paramtres cintiques obtenus lissue des incubations des dchets BRUT
et MAT selon les trois types dinoculum If, Id et Is et sans inoculation ()............................................. 172
Tableau 40 : Production de biogaz et paramtres cintiques pour le dchet MAT diffrentes teneurs en eau. 175
Tableau 41 : Fourchettes de valeurs des paramtres biologiques utilises dans la littrature pour les bactries
mthanognes actoclastes ........................................................................................................................ 189
Tableau 42 : Rsum des conditions mises en uvre lors de lanalyse de sensibilit ........................................ 191
Tableau 43 : Constantes dhydrolyse obtenues laide de rgressions exponentielles sur les productions
cumules de biogaz total obtenues lors des ajouts..................................................................................... 202
Liste des tableaux
Thse M. Rouez 2008 - 17 -
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Tableau 44 : Valeurs des paramtres biologiques de la loi de Monod,
m
, K
S
, Y et k
d
utiliss dans le modle pour
les bactries mthanognes........................................................................................................................ 203
Tableau 45 : Paramtres utiliss (X
0
et k
H
) et identifis (B
0
, f1 et f2) pour la modlisation des productions de
biogaz pour chaque srie dexprimentations et matriaux tests ............................................................. 204
Tableau 46 : Valeurs des paramtres utiliss et identifis pour la dtermination de la constante dhydrolyse k
SBK

des diffrents matriaux partir des incubations 1 mm et du modle ddi........................................... 215
Tableau 47 : Valeurs des paramtres utiliss et identifis (taux de croissance et concentration initiale des
bactries mthanognes) sur la production de mthane du dchet MAT incub 500 % H
2
O. ................ 220
Tableau 48 : Facteurs dinfluence de la dgradation arobie lors du compostage (daprs Tchobanoglous et al.,
1993 ; Miller, 1996 ; Gourdon, STI).......................................................................................................... 240
Tableau 49 : Description, conditions de mises en uvre et valeurs de respiration typiques pour diffrents tests de
stabilit proposs en arobiose. ................................................................................................................. 241
Tableau 50 : Taux de matire sche initial de certains matriaux utiliss........................................................... 245
Introduction gnrale
Thse M. Rouez 2008 - 18 -
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Introduction gnrale
La gestion des dchets mnagers et assimils (DMA) est devenue une problmatique majeure, ces
dchets tant gnrs en millions de tonnes chaque anne une chelle nationale. Malgr les
recommandations et mesures rglementaires visant rduire la production de dchets la source et les
quantits de dchets ultimes, en favorisant lco-conception, le tri, le recyclage et lincinration,
lenfouissement reste le devenir dune part importante des dchets. Etant donne la prsence dune
fraction organique considrable et lactivit bactrienne qui laccompagne, un massif de dchets
enfouis constitue, durant plusieurs annes plusieurs dcennies, un milieu trs volutif, caractris
notamment par une production de biogaz et de lixiviats. Afin de limiter cette volution et de matriser
les risques quelle comporte, les centres de stockage des dchets mnagers et assimils sont devenus
des installations techniques et contrles, visant confiner les dchets enfouis. Cette gestion permet de
rduire les entres deau et entrane un asschement progressif du massif de dchet, limitant
considrablement son volution. Elle prsente cependant des risques long terme, lis une possible
reprise de lactivit bactrienne puisque le confinement des dchets ne peut tre garanti indfiniment.
De nouveaux modes de stockage sont donc envisags pour diminuer la priode de ractivit du massif
de dchets : le prtraitement des dchets avant enfouissement et la gestion en bioracteur du massif de
dchets. Bien que prsentant des points de vue diffrents, ces procds visent mettre en uvre des
ractions de biodgradation avec un objectif commun, la stabilisation de la matire organique.
Cependant, du fait de leur caractre biologique notamment, les ractions quils tentent de mettre en
uvre savrent influences par de nombreux facteurs, rendant incertaines les rponses des questions
simples en apparence, telles que : en combien de temps la matire organique sera-t-elle stabilise ?
Comment sassurer que la matire est stabilise ? Quelle quantit de biogaz peut tre obtenue partir
de telle quantit de matire organique ? Comment acclrer cette production ?
Dans ce contexte gnral, ltude des phnomnes de biodgradation des dchets mnagers et
assimils, la comprhension des facteurs qui influencent ces phnomnes et la prvision du
comportement de ces dchets en conditions anarobies sont devenues des enjeux importants.

Cette tude a pour objectif de contribuer ltude de ces trois thmatiques par la mise en uvre de
tests de biodgradabilit contrls sur DMA et fractions de DMA.
La premire partie du document est une tude bibliographique. Aprs un chapitre introductif gnral
sur la filire de stockage des dchets mnagers, les principales caractristiques bio-physico-chimiques
des DMA sont prsentes (ch. 2). Les phnomnes de biodgradation de la matire organique y sont
ensuite dcrits ainsi que leurs facteurs dinfluence (ch. 3) avant de prsenter les diffrentes mthodes
dvaluation de la biodgradabilit (ch. 4). Les outils de modlisation de la dgradation anarobie font
lobjet du dernier chapitre (ch. 5). Enfin, une synthse de la revue bibliographique permet de prsenter
les objectifs et les orientations de cette thse.
Introduction gnrale
Thse M. Rouez 2008 - 19 -
LGCIE, INSA Lyon
La seconde partie du document, biodgradations des dchets mnagers et de leurs fractions
constitutives , synthtise et interprte la majorit des exprimentations menes dans le cadre de ces
travaux de thse. Aprs avoir dcrit les diffrents matriaux tudis ainsi que les mthodes de
caractrisation mises en uvre, les matriels et les mthodes utiliss pour raliser les diffrents tests
en conditions anarobies sont dtaills (ch. 1). Ces tests de biodgradation anarobie sont diviss en
deux groupes, le premier rassemblant les essais visant caractriser la biodgradabilit anarobie en
conditions optimales et, le second, ceux o des facteurs dinfluence spcifiques ont t tudis. Le
deuxime chapitre de cette partie prsente les rsultats des diffrentes caractrisations et des tests de
dgradation et saccompagne de discussions.
La troisime partie explore les rsultats exprimentaux au regard de diffrentes modlisations de la
dgradation anarobie et de la production de biogaz. Ainsi, malgr une approche diffrente, sa
structure est similaire celle de la partie exprimentale. Le but est de reprsenter une partie des
phnomnes grce un formalisme commun et minimal et de valider son adquation avec les rsultats
exprimentaux. Un premier chapitre prsente donc la mthode de construction et de rsolution des
modles, puis un second explore les rsultats obtenus.

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 20 -
LGCIE, INSA Lyon
A. Partie bibliographique


Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 21 -
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I. Gnralits sur la filire de stockage des dchets
mnagers et assimils (DMA)
I.1. Aspects quantitatifs, qualitatifs et lgislatifs
Environ 21 millions de tonnes de dchets mnagers sont gnres par an en France soit, en moyenne,
un peu plus de 1 kg par jour et par habitant. Les dchets non mnagers qui proviennent des artisans,
commerants et bureaux, et qui sont collects et traits dans les mmes conditions, reprsentent plus
de 4 millions de tonnes (4,5 en 2000). Ainsi, plus de 25 millions de tonnes de dchets mnagers et
assimils (DMA), hors dchets industriels banals, dchets verts, boues et encombrants, sont donc
gres annuellement au niveau national (ADEME, 2005 ; donnes de lanne 2000).
Ces DMA prsentent une composition varie avec une forte proportion de matires organiques (MO).
Selon lADEME, en 1998, leur composition gnrale en proportion par rapport la masse humide tait
la suivante : 29 % de dchets putrescibles, 25 % de papiers / cartons, 13 % de verre, 11 % de
plastiques, 4 % de mtaux et 17 % de divers (textiles, matriaux combustibles, incombustibles et
complexes).
Environ 50 % en masse des DMA sont enfouis en installations de stockage de dchets non dangereux
(ISDND) soit approximativement 13 millions de tonnes par an. Cette tendance sexplique par le
principal avantage de lenfouissement des dchets, son cot, relativement moins lev que celui des
autres modes de traitement (ADEME, 2005).
Cet avantage est cependant contrebalanc par les risques de pollution, principalement lis la forte
teneur en MO des dchets, dus aux rejets d'effluents :
liquides, les lixiviats, issus de la percolation de l'eau travers les dchets,
gazeux, le biogaz, provenant de la biodgradation des dchets.

Ces risques ont conduit la gestion et le stockage des dchets voluer considrablement, dun point de
vue rglementaire notamment. Les nombreuses dnominations donnes la dcharge contrle en
tmoignent : CSD (Centre de Stockage des Dchets), CSDU (Centre de Stockage des Dchets
Ultimes), CET (Centre dEnfouissement Technique), ISD (Installation de Stockage des Dchets).
La rglementation concerne dune part la gestion des flux de dchets : la prvention et la rduction de
la production de dchets ainsi que leur valorisation matire et/ou nergie doivent tre privilgies
(Directive europenne 91/156/CEE). Le stockage est rserv aux dchets ultimes depuis le 1
er
juillet 2002 selon la loi de juillet 1992 (n 92-646). Les quantits de matires organiques enfouies
devront tre diminues de 20 % dici 2020, selon les prconisations europennes. Cependant, lheure
actuelle, la part de fraction organique enfouie est loin dtre ngligeable.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 22 -
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La rglementation rgit dautre part la gestion du site (mesures de confinement du site, de collecte et
de traitement des effluents liquides et gazeux). Les ISDND sont des installations classes pour la
protection de lenvironnement soumises autorisations prfectorales (Dcret ICPE 77-1133 du 21
septembre 1977 modifi) et, ce titre, doivent suivre les prescriptions communes aux ICPE. Dautres
rglementations fixent des prescriptions et recommandations spcifiques, en particulier larrt du
09/09/1997 relatif aux nouvelles installations de stockage et modifi depuis plusieurs reprises (JO,
1997, 2002, 2006). Cet arrt stipule par ailleurs que la gestion du site doit perdurer aprs la cessation
dactivit, au travers dun suivi post-exploitation comprenant maintenance, surveillance et contrle du
site, pendant une dure minimale de 30 ans.

I.2. Evolution des DMA en centres denfouissement
I.2.1. Description gnrale dun massif de dchet
Les dcharges sont donc devenues des installations contrles faisant lobjet dune gestion et
dune surveillance de plus en plus technique. Les sites prsentent des configurations variables, le plus
souvent en remblai et en tumulus. Ils sont diviss en zones dexploitation (appeles casiers ) qui
prsentent une hauteur gnralement comprise entre 8 et 40 m (hauteur maximale rglementaire). Ces
zones sont elles-mmes subdivises en alvoles de manire rduire les surfaces dexploitation
2500 m (surface maximale rglementaire). La mise en place des dchets seffectue par couches
successives compactes laide dengins spcialiss. Ces dernires sont recouvertes priodiquement
par des matriaux inertes (gnralement de la terre) visant rduire les envols et les missions
dodeurs. Des rseaux de drains sont disposs dans le massif pour assurer lvacuation du biogaz et
des lixiviats. Les fuites de biogaz sont rduites par la mise en dpression du systme de captage. Ce
biogaz est gnralement brl en torchre mais sa valorisation nergtique se dveloppe de plus en
plus. Les lixiviats accumuls en fond de casier sont quant eux pomps priodiquement et, la plupart
du temps, sont orients vers des filires de retraitement (STEP, traitement in situ). En fin
dexploitation dun casier, le massif de dchet est recouvert dune couche dargile et/ou dune
gomembrane.

Un massif de dchets enfouis peut tre dcrit comme un milieu triphasique, constitu de phases
liquide, solide et gazeuse, qui voluent sous leffet de nombreux processus biologiques, physiques et
chimiques :
ractions chimiques acido-basiques, doxydorduction, de prcipitation-solubilisation et de
complexation-lixiviation ;
ractions biologiques sous laction de diffrents groupes bactriens ;
actions physiques induisant une compaction de la matire et des mouvements deau.

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 23 -
LGCIE, INSA Lyon
Au sein et entre chacune des phases ont lieu des phnomnes de transfert et de transport de matires et
dnergies gnrs par ces divers processus. Lensemble de ces processus va donc conduire le systme
dun tat initial un tat dit stabilis i.e. o les caractristiques du milieu ne sont plus sujettes
dimportantes modifications (Warith, 2002). Lvolution gnrale du massif de dchet est couramment
dcrite au travers de cinq tapes successives prsentes ci-dessous.

I.2.2. Les cinq tapes dvolution dune ISDND
Quatre (Barlaz, 1996) cinq tapes (Augenstein & Pacey, 1991 ; Tchobanoglous et al. 1993) sont
communment reconnues selon la prise en compte dune dernire phase de maturation. Elles sont
dfinies en fonction des caractristiques des lixiviats et du biogaz gnrs (Figure 1).
La premire phase de dcomposition a lieu en arobiose. En effet, une certaine quantit dair est
prsente initialement au sein du dchet et le contact avec lair est galement relativement important
lors des oprations de collecte et de dpt des dchets sur le site. Loxygne prsent est consomm par
les micro-organismes arobies stricts ou facultatifs qui oxydent la matire organique la plus facilement
biodgradable en gnrant du CO
2
et des mtabolites organiques hydrosolubles. Lensemble des
processus engendre une lgre acidification des lixiviats. Au cours de cette phase, loxygne
consomm est partiellement renouvel par le contact avec lair de la masse de dchets.
La deuxime phase est une phase de transition. Elle correspond ltablissement progressif de
conditions de plus en plus rductrices : loxygne consomm nest plus suffisamment renouvel au fur
et mesure que le contact avec lair dcrot, du fait du compactage des dchets en couches de plus en
plus paisses, et de leur couverture rgulire par des couches de terre. Les bactries anarobies
facultatives dores et dj prsentes ds la phase arobie continuent leur dveloppement et entranent
une production de plus en plus consquente de dioxyde de carbone, de dihydrogne et dacides gras
volatils (AGV). Ces acides ne sont plus dgrads par le mtabolisme arobie cause de la carence en
O
2
, mais ne peuvent pas non plus tre dgrads par les flores anarobies strictes actognes et
mthanognes qui sont inhibes par la prsence rsiduelle de O
2
mme faible concentration. Les
AGV tendent donc saccumuler au cours de cette phase entranant une acidification progressive des
lixiviats. Le biogaz gnr reste essentiellement constitu de CO
2
. Les tassements observs durant ces
deux premires phases sont importants et sont principalement provoqus par la compaction force des
dchets lors de leur mise en place et par laction mcanique du poids grandissant de la colonne de
dchets.
Lors de la troisime phase (appele parfois phase acide, (Tchobanoglous et al., 1993)), lactivit
microbienne dmarre en phase 2 est son optimum. Le pH du lixiviat est alors trs acide (jusqu 4,5
selon Palmisano & Barlaz (1996)) de part la forte production dAGV et de CO
2
. Les AGV entranent
une charge organique pouvant tre trs leve dans les lixiviats. De part lacidification, de fortes
concentrations mtalliques peuvent tre observes au sein des lixiviats (Tchobanoglous et al., 1993 ;
Barlaz, 1996). Paralllement, les bactries anarobies strictes utilisant les substrats acides se
dveloppent progressivement du fait de labsence complte de O
2
et tendent rquilibrer les
concentrations en AGV et CO
2
et, par voie de consquence, le pH du milieu
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 24 -
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Figure 1 : Evolution de la composition des lixiviats et du biogaz au cours de la dgradation anarobie,
(Williams, 1998 cit par Gachet, 2004)

Lorsque les flores actognes et mthanognes sont leur activit optimale, la quatrime phase
dbute, caractrise par une forte production de mthane (jusqu des concentrations dans le biogaz de
50 60% v/v) : cest la phase mthanogne. Le pH du milieu se stabilise autour de la neutralit (de
6,8 8 selon Tchobanoglous et al. (1993), jusqu 9 selon Palmisano & Barlaz (1996)), du fait de la
dgradation des AGV, de la rduction du CO
2
et de la libration dazote ammoniacal. Les teneurs en
H
2
du biogaz sont trs faibles voire nulles, celui-ci tant galement utilis par les bactries
mthanognes. Les tassements observs lors des deux premires phases se poursuivent, de manire
plus lente, par laction conjugue de la charge massique et des pertes de masse solide dues la
solubilisation et la biodgradation de la MO des dchets (actions mcanique et biologique).
La cinquime et dernire phase est communment appele phase de maturation. La matire
organique biodgradable en anarobiose a t partiellement minralise, tandis que la maturation de la
matire organique rcalcitrante conduit la formation dacides fulviques et humiques, prcurseurs en
milieu naturel de lhumus (molcules trs rsistantes la biodgradation (Tchobanoglous et al.,
1993)).
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 25 -
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Les caractristiques de ces diffrentes phases sont identifies et observes sur tous les sites
denfouissement de DMA. Cependant leur dure est sujette des variations considrables (cf. Tableau
1) dues aux nombreux facteurs dinfluence de la dgradation (Augenstein & Pacey, 1991).

Tableau 1 : Dure des phases de dgradation en centre denfouissement de DMA
(Augenstein & Pacey, 1991)
Phase Dure typique
1 De quelques heures une semaine
2 De 1 6 mois
3 De 3 mois 3 ans
4 De 8 40 ans
5 De 1 plus de 40 annes
Totalit De 10 plus de 80 annes

Ces tapes (maturation mise part) sont galement observes sur des expriences de petite chelle, des
pilotes de laboratoire, destins simuler les conditions denfouissement (Barlaz et al., 1989). Lors de
telles expriences, le processus de dgradation dure gnralement une anne car un certain nombre de
facteurs dinfluence sont matriss afin de faciliter linterprtation des phnomnes observs.

I.3. Facteurs dinfluence de lvolution des DMA en centre
denfouissement
Lvolution du massif de dchets se caractrise extrieurement par 3 principaux phnomnes
observables : la production de gaz, la production de lixiviats et les tassements. La comprhension, la
description et la prvision de ces phnomnes constituent des centres dintrt majeurs en terme de
gestion des points de vue divers (valorisation nergtique du mthane du biogaz, gain despace
exploitable li aux tassements, valuation de la stabilit biologique du massif, risques dmissions
incontrles de biogaz ou de lixiviats, risque daffaissement du massif et dendommagement des
systmes de confinement, ).
Une des difficults lie ces enjeux rside dans linterdpendance de ces phnomnes et de leurs
facteurs dinfluence.
La production de mthane est le rsultat direct de lactivit des bactries mthanognes dgradant la
MO des DMA. Cette activit est dpendante dun grand nombre de facteurs dinfluence (dtaills au
I.3), mais le pH et la teneur en eau sont vraisemblablement les variables les plus influentes en
condition denfouissement (Barlaz, 1996). Non seulement la prsence deau est indispensable
lactivit bactrienne, mais ses dplacements constituent un vecteur de colonisation microbienne et un
vecteur de dispersion des composs chimiques, favorisant lapport de substrats tout comme la dilution
dinhibiteurs (El-Fadel et al., 1996 ; Aguilar, 2000). Ltude de la production et des mouvements de
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lixiviats est cependant complexe puisquelle ncessite la prise en compte dun transport ractif dans
un matriau poreux, htrogne, insatur et volutif. Dautre part, lactivit microbienne et les
mouvements des lixiviats sont en partie lorigine des tassements. Selon Olivier (2003), les
tassements sont la rsultante de cinq actions : action mcanique (lie lapplication de surcharges),
action biologique (lie la dcomposition de la matire organique), action de la percolation et du
tamisage (lie la migration des particules fines vers le fond du massif), action physico-chimiques
(corrosion, oxydation, combustion) et interactions entre ces processus.
Figure 2 propose une illustration des interactions entre ces 3 phnomnes. Ils dpendent des
conditions du milieu et de leurs variations temporelles et spatiales. Ces conditions peuvent tre
dfinies par diffrentes caractristiques plus ou moins mesurables (densit, granulomtrie, teneur en
eau, pH). Chaque caractristique peut tre elle-mme influence par les processus ou les autres
caractristiques bio-physico-chimiques. Cet ensemble constitue donc autant de facteurs dinfluence de
lvolution dun site.
Figure 2 : Illustration interactions entre les principaux phnomnes caractrisant lvolution dun site
denfouissement, les caractristiques du milieu dont ils dpendent et les facteurs les conditionnant

Caractristiques biologiques
(espces prsentes et actives,
biodgradabilit du dchet)
Caractristiques de la MO, accessibilit,
prsence de toxiques et de nutriments, teneur en
eau, mouvements deau pour disperser les
toxiques/nutriments/bactries, T,
caractristiques de la phase gaz, inoculation
Caractristiques hydriques
(teneur en eau, vitesse
dcoulement)
Caractristiques physiques de la matire,
type de confinement, intrusion de laquifre,
systme de collecte et de recirculation des
lixiviat, type de couverture et de vgtation,
prcipitations
Caractristiques physiques
(granulomtrie, densit,
permabilit, T, P)

Nature des DMA, activit microbienne,
mouvement deau, PTMB, compaction


Caractristiques chimiques
(pH, Eh, composition du S/L/G)

Ractions de dissolution, prcipitation,
adsorption, complexation, volatilisation,
ractions biochimiques, pouvoir tampon du
milieu, recirculation et neutralisation des
lixiviat
PRODUCTION DE
BIOGAZ
PRODUCTION
DEFFLUENT LIQUIDE
TASSEMENTS
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Ces facteurs dinfluence peuvent tre tudis diffrentes chelles correspondant diffrents niveaux
dobservation de lvolution des DMA en site denfouissement.
La production de biogaz, par exemple, est le rsultat de la production dun ensemble de zones
possdant des caractristiques propres en terme de rendement (Barlaz, 1996). La production peut ainsi
tre tudie une chelle micro , au niveau dun volume lmentaire du massif de dchets. A cette
chelle, les facteurs dinfluence prpondrants sont les caractristiques des DMA (nature,
accessibilit et concentration des substrats, des nutriments ou des inhibiteurs), les diffrentes
communauts bactriennes prsentes, la temprature, le potentiel redox, le pH et la teneur en eau.

La production peut galement tre tudie une chelle mso , au niveau dun volume plus
important du massif de dchet. Du fait de lhtrognit du milieu, ce sont les distributions initiales
des quantits deau, de substrats, de nutriments, dinhibiteurs, de microorganismes et de chaleur ainsi
que leurs variations spatio-temporelles par transfert de masse et dnergie qui deviennent les facteurs
prdominants.
Cependant ces conditions internes sont conditionnes une chelle macro par les choix de
conception et dexploitation du site (nature des dispositifs dtanchit, efficacit des systmes de
collecte des gaz et lixiviats, dimensions des alvoles, pr-traitements des DMA, compaction,
couvertures intermdiaires, recirculation des lixiviats, additions deau ou dinoculum) (Augenstein
& Pacey, 1991).
Enfin, certains facteurs agissant une chelle mga (climat, zone hydro-gologique,
rglementations) peuvent influencer les facteurs dfinis aux autres chelles (tempratures,
prcipitations, modifications des modes de gestion et de la nature des dchets entrants).
La Figure 3, inspire de Aguilar (2000), permet dillustrer cette imbrication de facteurs dinfluence
agissant diffrentes chelles.

Figure 3 : Facteurs dinfluence de lvolution des DMA en conditions denfouissement selon diffrentes chelles
dobservation


Caractristiques
bio-physico-
chimiques du
milieu
triphasique

Transferts de
masse et
dnergie
Conception et
exploitation de
lalvole, du
casier, du site
Environnement,
rglementations
aspects socio-
conomiques
Micro Mso Macro Mga
< < <
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I.4. Evolutions des modes de gestion des centres denfouissement : de
la tombe sche au PTMB et la dcharge bioactive
Dans les annes 1970, la prise de conscience du risque potentiel quengendrait un site incontrl a
conduit la rglementation prconiser le confinement des sites de manire limiter leur ractivit en
minimisant les quantits deau en contact avec les dchets. Cette pratique a conduit dsigner
communment les centres denfouissement comme des tombes sches ( dry tomb ). Cependant,
lasschement du massif de dchets nest pas un moyen de stabilisation long terme car la reprise de
lactivit microbienne est inluctable en cas de dfaillance des systmes dtanchit (Yuen et al.,
2001). En consquence, mme un suivi de post-exploitation de 30 ans semblerait insuffisant pour
assurer la stabilisation ractive dun massif gr en tombe sche (Fourie & Morris, 2003). Forts de
ce constat, les autorits de la communaut europenne se sont rcemment tournes vers des solutions :
prventives, en limitant le taux de matire organique enfouie par pr-traitement des DMA
avant stockage (PTMB) ;
curatives, en autorisant la gestion des ISDND en bioracteurs (Arrt du 19/01/2006),
grce un ensemble de pratiques acclrant la stabilisation du massif.

Les prtraitements mcaniques et biologiques (PTMB) permettent de diminuer la quantit et le taux de
matriaux volutifs mis en dcharge. Ils trouvent leur origine en Allemagne et en Autriche (Redon,
2006). Les oprations mcaniques (telles que criblage, broyage ou dferraillage) permettent de sparer
les lments recyclables, dhomogniser et de rduire la taille des particules des fractions rsiduelles.
Les oprations biologiques ont pour objectif de biodgrader et de stabiliser la matire organique
(Morais, 2006).

Le concept de dcharge bioactive a t dvelopp principalement aux Etats-Unis partir des
annes 70. Son principal objectif est de rduire le temps ncessaire la stabilisation des dchets
enfouis, (estim entre 30 et 100 ans dans le cas dune dcharge conventionnelle tombe sche ,
contre une dizaine danne en dcharge bioracteur (Reddy & Bogner, 2003) voire 2 - 3 ans selon
Reinhart (1996)). La dcharge bioracteur a t dfinie par la Solid Waste Association of North
America comme tant une dcharge sanitaire gre dans le but de transformer et stabiliser les
fractions facilement et modrment biodgradables des OM dans les cinq dix annes aprs fermeture
du site grce un contrle actif visant optimiser les processus microbiologiques (Pacey et al., 1998
In Reinhart et al., 2002). La recirculation des lixiviats est la principale stratgie mise en uvre afin
doptimiser les processus biologiques, lhumidit des dchets tant largement reconnue comme le
principal facteur dinfluence (Warith, 2002 ; Reddy & Bogner, 2003).



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Ces nouvelles orientations montrent que lenfouissement des dchets nest plus une pratique mais un
procd quil est par consquent possible doptimiser. De plus, les opportunits de valorisation matire
et/ou nergie (mtaux, bois, plastiques, gnration dlectricit et de chaleur par le biogaz) sont de
plus en plus favorises rglementairement et conomiquement, ce qui incite dautant plus une
gestion optimise. Dans ce contexte, la connaissance des phnomnes, leur contrle et leur prdiction
sont devenus des enjeux majeurs. Nous avons donn ici un aperu de la difficult datteindre ces
objectifs, tant donn lhtrognit des matriaux enfouis et la complexit des interactions entre les
phnomnes.
Le domaine dtude a donc t limit dans cette thse au cadre de la production de gaz. Cest
principalement sous cet angle que seront abords les paragraphes suivants. Ainsi les caractristiques
des DMA (chap. II) seront davantage dtailles pour la MO la constituant, cette matire tant
lorigine de la production de biogaz. Afin de comprendre les processus de sa production, les
biodgradations arobies et anarobies seront ensuite dtailles au chapitre III. La description de la
mthanogense et des facteurs linfluenant y sera plus approfondie, car la phase danarobiose est la
plus longue au cours de la vie dune ISDND et quelle conduit la production du compos valorisable
du biogaz, le mthane. Par la suite, nous prsenterons les moyens dvaluation de la biodgradabilit
des DMA, en arobiose comme en anarobiose, et expliciterons leurs domaines dutilisation et leurs
limites (chap. IV). Enfin, nous dcrirons, dans le chapitre V, les principaux outils existants permettant
de modliser la production de biogaz partir de DMA.

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II. Caractristiques des dchets mnagers et de leur
matire organique
Les caractristiques des DMA peuvent tre classes en quatre catgories : physique, chimique,
biochimique et biologique. Celles-ci renseignent de manire plus ou moins adquate, selon les
objectifs recherchs, sur la matire qui les compose et notamment celle qui nous intresse
particulirement, la matire organique.
II.1. Caractristiques physiques
Selon Olivier (2003), les caractristiques (hydro-) physiques des dchets regroupent des proprits
aussi varies que la composition gnrale et la structure des constituants des dchets, la granularit, la
teneur et capacit de rtention en eau, le poids volumique, la porosit et la permabilit.

II.1.1. Composition gnrale
La composition gnrale des DMA vise distinguer les diffrents matriaux prsents dans le dchet.
Cette donne savre particulirement intressante dans le cadre dune gestion globale des DMA, pour
ltude des diffrentes filires de valorisation possibles sur un gisement de dchets, par exemple.
Plusieurs classifications sont possibles. En sappuyant sur la littrature, Tchobanoglous et al. (1993)
proposent la classification suivante (Tableau 2) pour les DMA :

Tableau 2 : Exemple de classification gnrale des DMA propose par Tchobanoglous et al. (1993)
Organiques : Inorganiques
dchets alimentaires
papier
carton
plastiques
textiles
caoutchouc
cuir
dchets de jardin
bois
divers
verre
fer
aluminium
autres mtaux
cendres, poussires




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En France, lADEME a dvelopp une procdure de caractrisation des DMA par catgories de
matriaux : le MODECOM (Mthode de Caractrisation des Ordures Mnagres). Selon cette
procdure, un chantillon reprsentatif (au moins 500 kg) de DM est divis en trois fractions
granulomtriques (< 20 mm, 20- 100 mm et > 100 mm) et caractris selon 12 catgories de
matriaux. Le Tableau 3 prsente ces diffrentes fractions et y associe les rsultats de la campagne de
dtermination de la composition des DMA ralise en 1993 lchelle nationale selon le MODECOM
(ADEME, 1998).

Tableau 3 : Composition moyenne des DMA franais selon les catgories MODECOM
(Ademe, 1998)
Catgorie
*

Moyenne
(% de la masse humide)
Moyenne
(% de la masse sche)
Dchets putrescibles 28,6 15,8
Papiers 16,1 17,7
Cartons 9,3 9,2
Complexes 1,4 1,6
Textiles 2,6 3,0
Textiles sanitaires 3,1 1,9
Plastiques 11,1 12,7
Combustibles n. c. 3,3 3,9
Verre 13,1 19,1
Mtaux 4,1 5,6
Incombustibles n. c. 6,8 8,9
DM spciaux 0,5 0,7

* : La fraction des dchets putrescibles est constitue de dchets alimentaires, de dchets de jardin... Celle des
complexes, de dchets constitus de diffrents matriaux intimement lis du type brique Ttra Pack
(aluminium, plastique et carton) ou emballages de caf (plastique et aluminium). Les combustibles non classs
regroupent bois, os et composites tels que des chaussures (textile/plastique).

Remarque : les fractions organiques constituent une part importante dun DMA typique . Huit
fractions MODECOM, les huit premires de la liste du Tableau 3, sont constitues majoritairement de
dchets organiques et reprsentent 75 % et 68 % du total en masse humide et sche respectivement.
Sans compter les plastiques, peu ou pas biodgradables
+
(Tchobanoglous et al., 1993 ; Barlaz, 1996)
ainsi que les complexes, approximativement 60 et 50 % des DM en masse humide et sche
respectivement sont susceptibles dtre dcomposs par des micro-organismes et ainsi de produire du
biogaz en condition denfouissement.

biodgradables
+
: nous nous cantonnerons pour linstant la dfinition rglementaire : dchet biodgradable, tout
dchet pouvant subir une dcomposition anarobie ou arobie, comme les dchets alimentaires et les dchets de
jardin, ainsi que le papier et le carton (Directive n 1999/31/CE). Pour une dfinition plus dtaille, se reporter
au IV.

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II.1.2. Autres caractristiques physiques
La distribution granulomtrique, la teneur et la capacit de rtention en eau, la densit, la porosit et la
permabilit constituent des proprits physiques du milieu dont la connaissance est indissociable de
la description de lvolution dun massif de dchet. Ces paramtres concernent principalement des
proprits hydriques et mcaniques du massif, particulirement ncessaires ltude des dplacements
deau (production de lixiviats) et des tassements. De nombreuses donnes typiques issues de la
littrature ont t rfrences par Tchobanoglous et al. (1993) et Olivier (2003) notamment. Ces
paramtres ainsi que leurs mthodes de mesure ne seront pas tous dtaills ici et nous nous
cantonnerons la description de quelques uns dentre eux, utiliss par la suite.
La teneur en eau dun sol est dfinie comme le rapport de la masse deau prsente entre les lments
solides du sol par la masse sche de sol aprs passage de lchantillon ltuve ( 105C pendant 24 h.
Dans le cas des dchets, la notion de teneur en eau est plus complexe car les lments du dchet,
commencer par la matire organique, sont constitus dune proportion importante deau (Olivier,
2003). Ainsi, selon ltat du dchet auquel la mesure fait rfrence (tat sec, solide ou humide) et selon
la masse prise en compte pour lexprimer, cet auteur mentionne neuf expressions diffrentes de la
teneur en eau. Dans le cadre de notre tude, la teneur en eau des dchets sera exprime au travers du
taux de matire sche (MS) des chantillons. Ce taux a t exprim en pourcentage de masse sche
sur la masse totale initiale humide du matriau.
La capacit de rtention en eau reprsente la quantit maximale deau que le milieu est capable de
retenir lquilibre. Elle peut aussi tre dfinie comme la somme de la teneur en eau initiale et de la
capacit dabsorption du dchet dfinie par la quantit deau que le dchet peut absorber sans
relargage. La capacit de rtention est souvent assimile la capacit au champs, calcule suite un
essai de ressuyage par le bas (vidange non force) de 48 heures, lquilibre tant on non atteint. Cette
dernire reprsente donc une valeur approche de la capacit de rtention par excs puisque
augmente dune grande partie de leau provenant dun coulement gravitaire lent (Olivier, 2003).
Tout comme pour la teneur en eau, ces capacits peuvent tre exprimes par rapport diffrentes
masses. Dans la suite du prsent rapport, elles seront mentionnes en masse deau totale par rapport
la masse sche de matriau.
Masse volumique, porosit et permabilit
Ces caractristiques visent dcrire la masse dun volume donn de matriaux poreux, la quantit de
vides disponibles au sein de ce matriau et sa conductivit hydraulique, respectivement. Elles sont
principalement utilises dans le cadre dtudes hydrique et mcanique et leur dtermination ncessite
une approche dtaille. Ntant pas utilises par la suite, les mthodes de mesure ne seront pas
exposes ici, mais il est cependant important de noter que la valeur de ces paramtres varie au cours du
temps et selon les conditions dans lesquelles sont ralises les mesures. Par exemple, au sein dun
massif de dchet, la valeur de la masse volumique tend augmenter avec le temps coul et en
fonction de la profondeur de llment de volume considr, cause des tassements et de la
dgradation de la MO. A linverse, les valeurs de porosit et de permabilit tendent diminuer.
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II.2. Caractristiques chimiques et biochimiques de la matire
organique des DMA
Les caractristiques chimiques dun massif de dchet dcrivent la composition des espces constituant
le milieu triphasique. Nous nous cantonnerons la prsentation des caractristiques chimiques de la
matire organique qui constituent les DMA car cest principalement cette fraction, et notamment la
fraction biodgradable (voir III), qui est le sige de lvolution des DMA en centres
denfouissement.

II.2.1. Gnralits
La matire organique des DMA peut tre divise en trois classes principales (Gourdon, 2002) :
les polymres organiques naturels, ou biopolymres, regroupant amidons, cellulose,
hmicelluloses, lignine, polypeptides et protines, lipides.
les polymres organiques synthtiques, i.e. les plastiques, comprenant polyesters, polyvinyles,
polyurthanes...
les autres composs organiques tels quhydrocarbures, polychlorobiphnyles, pesticides...

Ces trois classes sont susceptibles dtre dgrades plus ou moins partiellement sous laction de micro-
organismes (Gourdon, 2002). Cependant, hydrocarbures et pesticides sont normalement minoritaires
en ISDND et les plastiques sont de manire gnrale considrs comme non biodgradables
(Tchobanoglous et al., 1993 ; Barlaz, 1996), bien que lapparition de nouveaux polymres dgradables
puisse remettre en cause cet tat de fait. Pour linstant, ce sont donc les biopolymres qui constituent
la majeure partie de la matire organique des dchets et le principal substrat des bactries lorigine
de la production de biogaz. Ils proviennent essentiellement des dchets putrescibles, papiers, cartons,
textiles, textiles sanitaires et combustibles non classs tels que le bois et ont tous une origine naturelle.

La plupart des polymres organiques naturels peuvent tre classs dans les catgories biochimiques
classiques : lipides, protines et glucides (Tortora et al., 2003).
Les lipides constituent une gamme varie de composs non solubles dans leau. Les lipides simples
sont constitus dune molcule de glycrol lie un ou plusieurs acides gras. Trois groupements OH
sont disponibles sur le glycrol et permettent la formation de mono-, di- ou triglycrides. Les
lipides complexes possdent des lments supplmentaires tels que lazote, le phosphore ou le soufre
qui leur confrent des proprits particulires. Un exemple connu est celui des phospholipides qui
composent les membranes cellulaires. Les strodes, comme le cholestrol, possdent des cycles
aromatiques supplmentaires.
Les protines sont constitues dassociation dacides amins. Il existe naturellement vingt acides
amins diffrents. Ces derniers possdent tous un groupement carboxyle et un groupement amine qui
permettent leur polymrisation par cration dune liaison peptidique. Les protines sont de trs
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grandes molcules avec des caractristiques spatiales importantes (replis, spirales) qui leur confrent
des proprits trs diverses ( reconnaissance dune autre molcule par exemple, les anticorps).
Les glucides ou hydrates de carbone (car composs uniquement de carbone, oxygne et hydrogne)
peuvent tre diviss en trois grandes familles : les plus simples, les monosaccharides (les oses) se
composent de trois sept atomes de carbone do leur noms, triose, tetrose, pentose ou hexose tel que
le glucose. Ce sont des molcules hydrosolubles. Les disaccharides, peu solubles, sont forms de deux
oses. Les polysaccharides sont des polymres composs de plus de deux monosaccharides. Glycogne,
cellulose et amidons, par exemple, sont des associations de glucose. Dautres sont constitus de
diffrents sucres telle que les hmicelluloses, une association de xylose, mannose et glucose entres
autres (Jeffries, 1994)
A ces trois principaux groupes, il est ncessaire dajouter un polymre particulier, la lignine. Il sagit
dun polymre complexe prsent principalement dans les vgtaux o elle a pour fonction de
protger la cellulose et lhmicellulose des attaques enzymatiques (bactries, champignons...),
dimpermabiliser les fibres vgtales et de confrer de la rsistance mcanique aux cellules
(Jeffries, 1994). Elle est essentiellement prsente sous la forme dun complexe ligno-cellulosique qui
est le constituant majeur de la biomasse vgtale (Tuomela et al., 2000). De part ses fonctions
naturelles, la lignine est trs rsistante et elle est dailleurs considre comme non dgradable en
centre denfouissement (Barlaz, 1996). Cest lun des principaux prcurseurs des structures
aromatiques contenues dans les substances humiques (Stevenson, 1994 in Gachet, 2004). Nous
reviendrons sur lorigine et le devenir de ces substances, lignine et matires humiques au III
concernant la biodgradation de la matire organique.

Un dchet mnager dans son intgralit ainsi que chacune de ses fractions peuvent tre caractriss
afin de dterminer leur contenu en matires organiques. Ce dernier peut tre estim laide de
mthodes dites chimiques visant fournir une information globale ou laide de mthodes
biochimiques dont lobjectif est de diffrencier des catgories de biopolymres prsents selon leur
nature.

II.2.2. Caractristiques chimiques
Les mthodes de caractrisation chimique globale de la MO prsentes ici reposent toutes sur des
mesures de loxydabilit de cette matire, mais se distinguent par le type de mesure effectue
(thermique, chimique).

a. Matire volatile
La matire volatile (MV) est un paramtre global intressant car il est relativement simple mesurer,
outre les problmes relatifs la reprsentativit de lchantillon analys. La MV est dtermine, aprs
schage, par calcination hautes tempratures (500 C pendant 4 heures selon la norme AFNOR NF
U44-160 (1985) relative lanalyse des supports de culture). Il est couramment admis qu de telles
tempratures, la totalit de la matire organique est oxyde et la matire volatile est par consquent
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assimile la matire organique. Le rsidu de cette oxydation est par consquent assimilable la
matire minrale.

b. Matire organique oxydable
La mesure de la matire organique oxydable (MOO) ne fait pas spcifiquement lobjet de rfrences
normatives. La littrature ne fait dailleurs pas mention de son utilisation. Cest un protocole
dvelopp au LGCIE (cf. Gachet 2004) sur les bases dune mthode dattaque de la MO par
lhypochlorite de sodium dcrite dans la norme AFNOR XP U44-164. Celle-ci concerne initialement
lanalyse des composants inertes tels que les plastiques, les mtaux et le verre dans un compost. Il y
est mentionn que lattaque successive laide de trois bains dextrait de javel permet de dtruire
compltement la MO, except le bois, les noyaux et la lignine (AFNOR, 2004). Ce protocole, avec
quelques ajustements, peut donc tre mis en uvre afin de dterminer les composants inertes dans
un dchet et par consquent un taux de MOO Dautres oxydants peuvent galement tre utiliss tels
que leau oxygne (AFNOR, 2004).

c. Demande chimique en oxygne
La demande chimique en oxygne (DCO) est une mthode normalise danalyse des eaux et des
effluents. Elle reprsente la concentration, exprime en mg.L
-1
, doxygne quivalente la quantit
de dichromate consomme par les matires dissoutes et en suspension lorsquon traite un chantillon
deau avec cet oxydant dans des conditions dfinies NF T (90-101). La mthode est base sur
l'oxydation des matires organiques en milieu acide par les ions dichromate dont lexcs (nayant pas
ragi) est dos par spectroscopie dabsorption ou par titration.
Cette mesure normalise sur liquide est galement mise en uvre sur solide en solubilisant
pralablement le matriau. Cependant, les protocoles diffrent et ne sont pas dcrits avec prcision.
Les charges organiques plus leves imposent la dilution de lchantillon, qui risque de devenir non
reprsentatif. De plus, certains sont possibles : .les mtaux halogns ou rduits et les nitrites
contribuent la mesure de DCO. Certains composs organiques aromatiques ne sont pas oxyds.
(Angelidaki & Sanders 2004).

d. Composition lmentaire
La matire organique tant constitue majoritairement de carbone, hydrogne, oxygne, azote, soufre
et phosphore, lanalyse lmentaire des dchets permet une caractrisation fine.
Les mthodes mises en uvre sur DMA sont les mmes que sur les sols. La majorit de ces analyses
est base sur une oxydation totale haute temprature (900C pour le carbone et lazote dans les
normes cites ci-aprs) de la matire dun chantillon en prsence dun catalyseur, puis consiste en la
quantification des oxydes gazeux crs. Pour le dosage du carbone total (CT), par exemple, la
quantit de gaz carbonique produit peut tre analyse par titrimtrie, gravimtrie, conductimtrie,
chromatographie en phase gaz ou grce une mthode de dtection dans linfrarouge selon lappareil
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utilis ISO (10694). Le carbone organique total (COT) est dtermin quant lui aprs traitement
lacide sulfurique de lchantillon. Pour le dosage de lazote, aprs transformation de toutes les
formes dazote en N
2
, la teneur en azote totale est mesure par conductibilit thermique ISO (13878)
Le Tableau 4 rpertorie, titre dillustration, des rsultats danalyses chimiques globales (MV et
analyses lmentaires) ralises sur des fractions typiques de constituants des DMA.

Tableau 4 : Analyses chimiques des constituants typiques de DMA (Tchobanoglous et al., 1993) et des fractions
MODECOM (Ademe, 1998)
Fraction de dchet H
2
O
*
MV C H O N S Ref
graisses 2 97 73,0 11,5 14,8 0,4 0,1
dchets alimentaires 70 71 48,0 6,4 37,6 2,6 0,4
dchets de fruits 79 78 48,5 6,2 39,5 1,4 0,2
Aliments
dchets de viande 39 92 59,6 9,4 24,7 1,2 0,2
carton 5 82 43,0 5,9 44,8 0,2 0,2
magazines 4 69 32,9 5,0 38,6 0,1 0,1
journaux 6 86 49,1 6,1 43,0 0,2 0,2
papiers divers 10 85 43,4 5,8 44,3 0,2 0,2
Papiers
carton cir 3 94 59,2 9,3 30,1 0,1 0,1
tissus 10 73 48,0 6,4 40,0 0,2 0,2
Textiles
cuir 10 76 60,0 8,0 11,6 0,4 0,4
dchets de jardin 60 75 46,0 6,0 38,0 0,3 0,3
bois vert 50 85 50,1 6,4 42,3 0,1 0,1
bois dur 12 85 49,6 6,1 43,2 0,1 0,1
Dchets verts
mlange 20 85 49,5 6,0 42,7 0,2 0,1
T
c
h
o
b
a
n
o
g
l
o
u
s

e
t

a
l
.
,

1
9
9
3

dchets putrescibles 63 82 41,3 5,6 - 1,8 0,3
papiers 27 82 43,8 5,8 - 0,3 0,2
cartons 34 87 42,1 6,2 - 0,3 0,2
complexes 25 86 49,0 8,1 - 0,3 0,2
textiles 24 93 51,4 5,5 - 3,3 0,4
textiles sanitaires 60 91 50,4 6,4 - 0,7 0,3
combustibles n. c. 20 84 46,7 5,1 - 1,7 0,4
lments fins 40 43 24,6 2,7 - 1,2 0,6
plastiques 24 92 65,7 9,6 - 0,4 0,2
verre 1 1 0,4 0,0 - 0,0 0,0
mtaux 9 1 - - - 0,4 0,1
incombustibles n. c. 10 8 1,9 0,1 - 0,2 1,4
MODECOM
DM spciaux - 16 - - - - -
Dchet global 35 59 33,4 4,4 - 0,7 0,3
A
d
e
m
e
,

1
9
9
8

*: en % MS (mis part H
2
O en % de la masse humide initiale)

Finalement, chaque mthode chimique prsente permet dapprocher le taux de matire organique
dgradable sans pourvoir le dterminer prcisment (cf. V.1). En effet, lanalyse lmentaire (CT ou
COT) et la mesure de la MV englobent notamment les plastiques ainsi que les matriaux ligneux, non
biodgradables. Les mesures bases sur loxydabilit chimique telle que la MOO ou la DCO
permettent dexclure a priori ces matires mais sont dlicates mettre en uvre sur des DMA
complexes.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 37 -
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Une caractrisation biochimique peut complter ces informations partielles sur la matire organique
dgradable.

II.2.3. Caractristiques biochimiques
a. Gnralits
Lensemble des biopolymres est prsent au sein des ordures mnagres. Pour chacun deux, des
mthodes danalyse et de quantification existent. Elles ont t dveloppes dans la plupart des cas dans
dautres domaines que lanalyse des dchets.
Ainsi le dosage des protines a t emprunt lanalyse des sols, des sdiments et des eaux (Gachet,
2004). Les mthodes danalyse des lipides se basent sur le caractre hydrophobe de ces composs par
extraction laide dun solvant polaire. La sparation et le dosage des composs glucidiques et ligneux
proviennent de travaux concernant notamment la valeur nutritionnelle des aliments pour btail (Binner
et al., 1997). Les diffrentes mthodes danalyse sont prsentes en dtail dans la thse de Gachet
(2004) et ne seront pas toutes dtailles ici.
Ces mthodes prsentent diffrents inconvnients. De part la diversit des composants prsents au sein
des DMA, elles ne permettent pas proprement parler de quantifier chacun des composants
organiques mais fournissent un indice quantitatif global tel que lindice lipidique ou protique. De
plus, nombreuses sont les interactions susceptibles de fausser les rsultats. Certaines ont t identifies
dans les travaux de Gachet comme, par exemple, la prsence de plastiques qui conduit surestimer,
selon les protocoles, certaines fractions de fibres ou les lipides. Enfin, ces mthodes danalyse sont
relativement contraignantes mettre en uvre.
La littrature saccordant sur la prdominance de la fraction ligno-cellulosique dans les DMA (Wang
et al., 1994 ; Palmisano & Barlaz, 1996 ; Garcia-Heras, 2003 notamment), elle fait lobjet dune
attention particulire dans les paragraphes suivants.

b. Lignine et hydrates de carbone
Les donnes qualitatives prsentes au Tableau 3 soulignent indirectement la prpondrance de la
fraction glucidique des DMA : dchets verts, papiers, cartons ou textiles sont constitus
majoritairement dhydrates de carbone de part leur origine vgtale. La seule fraction MODECOM
susceptible de contenir une part importante de lipides et/ou de protines est celle des putrescibles,
notamment compose des dchets alimentaires. Cette fraction putrescible reprsente
approximativement 16 % m/m de la MS des DMA selon les donnes MODECOM (cf. Tableau 3) et
son contenu en protines et lipides reste faible (protines < 3 %, lipides < 6 % et 45 % < glucides < 60
% m/m de la MS (Gourdon, 2002). Barlaz (2006) rapporte galement des rsultats analytiques de la
fraction organique de DMA raliss par deux auteurs diffrents o les protines reprsentent
respectivement 5 et 4,2 % m/m de la MS.
Concernant la fraction majoritaire des hydrates de carbone, les diffrents types de glucides doivent
tre quantifis par analyse, car ils vont prsenter des comportements diffrents vis--vis de leur
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 38 -
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dgradation biologique. Tout dabord, il est ncessaire de diffrencier les glucides, solubles
(monomres principalement), et les polysaccharides, non solubles. De ces derniers, amidons et
hmicelluloses sont les plus facilement biodgradables (Palmisano & Barlaz, 1996 ; Aguilar, 2000), la
cellulose tant plus ou moins rsistante selon sa structure. Enfin, cellulose et hmicelluloses sont bien
souvent lies la lignine sous forme dun complexe lignocellulosique, les rendant difficilement
accessibles aux micro-organismes (Palmisano & Barlaz, 1996).

c. Mthodes analytiques
Les teneurs en cellulose et hmicelluloses peuvent tre dtermines par hydrolyse acide soit par
mesure de la perte de masse de l'chantillon (du type Van Soest, cf. ci-aprs) soit par analyse de la
solution acide et quantification des sucres monomriques dissous, constitutifs des hydrates de carbone,
par chromatographie liquide (Wang et al., 1997 ; Komilis & Ham, 2003).
Par contre, contrairement la cellulose et aux hmicelluloses, la lignine est non hydrolysable par les
acides forts, mme concentrs. Les mthodes les plus utilises pour analyser quantitativement la
lignine sont la mthode Klason et l'indice Kappa, (Tuomela et al., 2000). La lignine dite Klason est
dtermine par gravimtrie aprs traitement de l'chantillon ligno-cellulosique avec de l'acide
sulfurique (72%) afin dhydrolyser les autres composants. Lindice Kappa est couramment utilis dans
l'industrie des ptes papiers. Il est dtermin via le volume de permanganate de potassium ncessaire
pour oxyder une quantit donne de pte (Tuomela et al., 2000).
La mthode Van Soest repose quant elle sur une srie dhydrolyses slectives. Elle permet la
distinction, par analyse gravimtrique des rsidus de chaque hydrolyse, de quatre fractions de plus en
plus rsistantes : les solubles, les hmicelluloses, la cellulose et la lignine (cf. Figure 4). Mis au point
pour lanalyse de la valeur nutritionnelle de fourrages destins lalimentation animale, le protocole
peut tre mis en uvre sur composts, dchets ou catgories de dchets (Binner et al., 1997). Il est
cependant clair que pour des composs complexes comme les dchets mnagers, la signification
biochimique de ces fractions est diffrente, les matires plastiques se retrouvant dans le rsidu final
correspondant initialement la lignine par exemple (Buffire, 2006).

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Figure 4 : Fractionnement Van Soest daprs Buffire (2006)
Lgende : NDF, Neutral Detergent Fiber ; ADF, Acid Detergent Fiber ; ADL, Acid Detergent Lignin ; Rsidu
550C par calcination

Le Tableau 5 regroupe des rsultats danalyses biochimiques ralises selon des protocoles plus ou
moins proches de celui de Van Soest.

Tableau 5 : Composition biochimique (ligno-cellulosique) de DMA et de constituants typiques rapporte par
diffrents auteurs
Matriau MV
*
CELL
*
HEM
*
LIGN
*
Rfrence
Herbe 85 26,5 10,2 28,4
Feuilles 90 15,3 10,5 43,8
Branches 97 35,4 18,4 32,6
Dchet alimentaire 92 50,8 6,7 9,9
Papier bureau 99 87,4 8,4 2,3
Papier cir 74 42,3 9,4 15
Journaux 98 48,5 9 23,9
Carton 92 57,3 9,9 20,8
Barlaz, 1996
Journaux 98 48,3 18,1 22,1
Papier de bureau 88 64,7 13 0,93
Wu et al., 2001
Dchets verts 80 27,7 16 26
Herbe 82 39,7 16,9 17,6
Feuilles 63 9,5 3,2 33,9
Branches 82 14,7 12,9 42,9
Papier bureau 87 68,1 6,7 6,5
Komilis & Ham, 2003
94 55,4 7,2 11,4
89 40,9 6,1 7,4
Dchets
alimentaires
87 32,2 11 15
60 25,6 6,6 7,2
79 51,2 11,9 15,2
75 28,8 9 23,1
71 48,2 10,6 14,5
DMA
86 54,3 10,8 12,1
Barlaz, 2006
* : en % MS

Minraux
Lignine
Celluloses
Hmicelluloses
Solubles
Rsidu
NDF
Rsidu
ADF
Rsidu
ADL
Rsidu
550C
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Ce tableau met en vidence que le contenu en lignine est trs variable selon les catgories de
matriaux, ce qui va avoir une influence considrable sur leur biodgradabilit (cf. V.1.2.b). Les
catgories prsentant les plus fortes teneurs tant celles des dchets verts, notamment les branches et
les feuilles. La teneur des papiers journaux est beaucoup plus leve que celle des papiers de bureau
tant donn leur mode de fabrication (le papier de bureau est dlignifi contrairement aux papiers
destins la fabrication de journaux). Pour un DMA dans son intgralit, le taux de lignine est
variable, de lordre dune dizaine une vingtaine de % de la MS.

II.3. Caractristiques biologiques
La nature et la quantit des espces microbiennes prsentes et actives ainsi que la biodgradabilit de
la MO des DMA constituent les principales caractristiques biologiques des DMA.
Lanalyse quantitative et/ou qualitative de la biomasse peut tre ralise selon diffrentes mthodes et
objectifs. Pestre (2007) distingue trois grands types de mthodes dvaluation de la biomasse :
la dtermination de la biomasse totale par dosage des ions ammoniums issus de la lyse des cellules
bactriennes (mthode de fumigation extraction ),
les dnombrements, aprs extraction,
- par cultures (en phase solide, mesure des UFC, Units Formant Colonies et en phase
liquide, mesure du NPP, Nombre le Plus Probable , par exemple)
- par dnombrement direct (la technique de microscopie pifluorescence tant la plus
adquate)
et enfin, les techniques assez rcentes de biologie molculaire destines ltude des acides
nucliques et qui permet lobtention dune image de la communaut bactrienne.

Ces mthodes ne seront pas dcrites plus en dtail car elles nont pas t mises en uvre dans les
prsents travaux. Cependant, comme nous le verrons, leur quantit a une importance considrable sur
la dgradation de la matire, notamment en anarobiose. Les bactries mthanognes sont quasi
omniprsentes mais en trs faible quantit. Le Tableau 6 mentionne titre dexemple les
concentrations en micro-organismes anarobies dtermines par mesure du NPP sur des dchets ou
fractions de dchets frais (Barlaz, 1996).






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Tableau 6 : Populations microbiennes anarobies
*
au sein des dchets et de fractions organiques de dchets
Acidognes Mthanognes

Anarobies
(total)
Hemicellulolytiques Cellulolytiques
Actognes
Actoclastiques Hydrognophiles
Herbe 9,8 9,2 1,4 1,5 1,6 1,6
Branches 6,5 4,2 2,5 1,3 1,1 0,8
Feuilles 6,6 4,3 1,6 4,1 2,7 3,5
Aliments 9,4 6 < < < <
DMA 9,1 6,5 0,4 0,2 3,6 4,7
* : Nombre le Plus Probable, log
10
(cellule).gMS
-1
, < signifie quaucun tube positif na t dtect

La seconde caractristique biologique, la biodgradabilit du dchet, reprsente son aptitude la
dgradation biologique. Comme nous le verrons dans les prochains chapitres, elle peut tre dtermine
exprimentalement en arobiose ou anarobiose dans des conditions varies (cf. IV) mais galement
thoriquement, partir des caractristiques physique, chimique ou biochimique prsentes ici (cf.
V.1). Sa prsentation ncessite celles des phnomnes de biodgradation de la MO ainsi que de leurs
facteurs dinfluence, qui font lobjet du prochain chapitre de cette bibliographie.
Partie A : bibliographie
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III. Biodgradations de la MO des DMA
III.1. Aspects gnraux bactriens
Les diffrents types de mtabolismes nergtiques mis en uvre par les bactries permettent de
classer celles-ci en diffrents groupes. Le mtabolisme est dfini comme lensemble des ractions
consistant dgrader les lments nutritifs du milieu, transfrer et stocker lnergie rsultant de ces
dgradations (ractions cataboliques), afin de raliser les ractions permettant aux cellules de raliser
la synthse de leurs constituants propres (anabolisme) (Gourdon, 2002).
Les micro-organismes impliqus dans la dgradation de la matire organique sont de manire gnrale
des organismes htrotrophes. Ils utilisent pour la synthse de leurs constituants propres des
composs organiques par opposition aux autotrophes utilisant le dioxyde de carbone. Ils sont
galement qualifis de chimiotrophes car ils puisent leur nergie dans loxydation de composs
chimiques par opposition aux phototrophes qui utilisent lnergie lumineuse. (Tchobanoglous et al.,
1993).
Loxydation de ces composs nergtiques (qui peuvent tre organiques ou inorganiques) est ralise
par tous les tres vivants grce des ractions doxydorduction faisant intervenir de nombreux
couples intermdiaires. Cependant la nature de laccepteur final dlectrons permet de diffrencier
trois types de respiration distincts (Gourdon, 2002) :
si l'accepteur est l'oxygne (rduit en eau), la respiration est qualifie darobie. Les micro-
organismes utilisant ce type de respiration sont dits arobies stricts sils ne se dveloppent
quen prsence doxygne.
si l'accepteur est une substance minrale autre que loxygne (lion sulfate rduit en sulfure
dhydrogne par exemple), la respiration est dite anarobie. Les micro-organismes utilisant
cette forme de respiration peuvent tre anarobies stricts (loxygne leur est toxique) ou
anarobies facultatifs (loxygne est prfrentiellement utilise sil est prsent).
si l'accepteur est une substance organique, la respiration est une fermentation ralise par des
micro-organismes anarobies stricts ou facultatifs galement.

Ainsi, on distingue les dgradations ralises en arobiose (en prsence doxygne) et en anarobiose
(en absence doxygne) comme des processus impliquant des mtabolismes diffrents et par la mme
des communauts diffrentes (avec des bactries communes, les bactries anarobies facultatives).
Comme nous lavons dores et dj succinctement prsent au I.2.2, la matire organique enfouie en
centre de stockage fait lobjet de ces deux phnomnes successivement. La caractrisation biologique
dun dchet peut tre value dans ces deux conditions galement. Ces processus sont dailleurs
connus et utiliss lchelle industrielle depuis des dcennies. Ainsi, le compostage constitue une
mise en uvre contrle de la dgradation arobie et la mthanisation, de la dgradation anarobie. La
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connaissance approfondie des phnomnes provient en grande partie dtudes portant sur le
compostage et la mthanisation de la matire organique. Aussi, nous prsenterons les deux
phnomnes au travers de ces procds avant de prsenter les facteurs dinfluence de la
mthanognse de manire plus dtaille quau I.3, concernant lenfouissement des dchets.
Quel que soit le mtabolisme mis en jeu, les molcules organiques sont transformes : une partie du
carbone est minralise en CO
2
ou CH
4
, une autre est assimile par les micro-organismes et une
dernire, rfractaire la dgradation, persiste. A leur mort, les micro-organismes constituent leur
tour un substrat dgradable et sont galement partiellement minraliss et assimils, une fraction tant
rfractaire. Ainsi, terme, la dgradation biologique conduit la stabilisation de la matire organique
par minralisation et formation de MO rfractaire, stable.

III.2. Phase dhydrolyse
La phase dhydrolyse constitue une premire tape commune aux deux processus (elle est dailleurs
ralise en partie par des micro-organismes communs : les bactries anarobies facultatives). La
matire organique complexe, sous sa forme polymrise, solide, ne peut tre utilise telle quelle par
les micro-organismes et doit tre hydrolyse en composs solubles aptes franchir les membranes
cellulaires bactriennes (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991). La premire tape est donc la
solubilisation des polymres organiques en monomres ou dimres par hydrolyse. Celle-ci est ralise
par lintermdiaire denzymes extracellulaires dont la nature dpend des ractions quelles catalysent
(cellulases, protases et lipases) (Chynoweth & Pullammanappallil, 1996).

Vis--vis de la classification biochimique de la matire organique dcrite prcdemment (hydrates de
carbones, protines et lipides), lhydrolyse entrane la dcomposition de ces derniers en leurs
molcules constitutives lmentaires. Les polysaccharides (type cellulose, hmicellulose) et les
protines sont donc convertis en sucres simples (type glucose, galactose) et en acides amins
respectivement. Les lipides sont dissocis en acides gras longues chanes et glycrol principalement
(Chynoweth & Pullammanappallil, 1996 ; Batstone et al., 2002).

Bien que la lignine soit partiellement hydrolysable en diffrents composs aromatiques qui peuvent
tre eux-mmes utiliss par certaines bactries (Chynoweth & Pullammanappallil, 1996), elle est
considre quasiment non biodgradable en conditions anarobies (Barlaz, 1996). Sa dgradation
arobie est complexe, lente et incomplte de part son rle dans la formation de lhumus (Tuomela et
al., 2000).




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III.3. Biodgradation arobie
La dgradation arobie de la matire organique est ralise par de nombreux micro-organismes
diffrents ayant pour similitude le mode de respiration arobie.
Ces processus sont exploits dans les procds de traitement biologique arobie des dchets
organiques. Ainsi lors du compostage, si celui-ci est ralis dans des conditions non limitantes en eau
et en oxygne, la dgradation de la matire organique suit trois phases successives, nommes phases
msophile, thermophile et de maturation, o lon observe une trs grande diversit de bactries et de
champignons (Miller, 1996). Durant la premire phase, les substrats les plus facilement
biodgradables tels que les sucres libres, les amidons et les lipides sont mtaboliss rapidement par des
bactries msophiles et la temprature augmente (lvation frquente de 30C en 24h selon
Tchobanoglous et al., 1993). La seconde phase dbute aprs 5 10 jours et correspond la
prdominance de micro-organismes thermophiles (principalement des bactries), due aux tempratures
leves, jusqu plus de 70 C. Durant cette tape, si la chaleur nest pas vacue, la limite suprieure
de temprature acceptable par les bactries thermophiles est dpasse et lactivit biologique est
fortement diminue (Miller, 1996). Dans le cas contraire, cette phase est stable jusqu
lappauvrissement des substrats facilement disponibles (en particulier les protines qui sont dgrades
principalement lors de cette phase (Tuomela et al., 2000) entranant une baisse de lactivit
microbienne thermophile et par consquent une baisse de la temprature. Dbute alors la phase de
maturation o, de part les tempratures (< 35C) et le faible taux de substrats simples, les principaux
micro-organismes impliqus sont des actinomyctes et des champignons. Les composs rcalcitrants
la dgradation lors des premires phases telles que la cellulose et la lignine, et plus gnralement les
complexes ligno-cellulosiques, sont dgrads lentement et ne sont minraliss que partiellement
(Tuomela et al., 2000). En effet, durant cette tape appele galement phase de polymrisation
(Tchobanoglous et al., 1993 ; Miller, 1996), la matire organique rfractaire sous laction des micro-
organismes se rorganise en molcules organiques complexes telles que les acides fulviques et
humiques, prcurseurs de lhumus, compos dun ensemble de molcules organiques relativement
stables (Tuomela et al., 2000). Les mcanismes de dgradation de la lignine et de formation de
lhumus sont encore incompltement connus et diffrents modles conceptuels ont t proposs pour
dcrire ces processus. Cette mconnaissance est essentiellement due linexistence de mthodes
disolement non destructrices de la lignine (Tuomela et al., 2000)..

III.3.1. Aspects stoechiomtriques
Les premires phases de transformation de la MO peuvent tre schmatises de manire trs gnrale
selon lquation suivante (Tchobanoglous et al., 1993) :
2 2 2
...
rcalcitrante
MO O sels n MO CO H O Q

+ + + + + + +
La matire organique (MO), loxygne ainsi que des sels minraux (sels) sont utiliss par les
microorganismes () afin de synthtiser une nouvelle biomasse (n

). Une partie de la MO est


rcalcitrante (MO
rcalcitrante
) et nest pas dgrade. La raction saccompagne de productions de dioxyde
de carbone, deau et de chaleur (Q).
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En considrant une dgradation totale (minralisation) de la matire organique (de forme
C
a
H
b
O
c
N
d
), Tchobanoglous et al. (1993) proposent lquation quilibre suivante de la dgradation
arobie :
2 2 2 3
4 2 3 3
4 2
a b c d
a b c d b d
C H O N O aCO H O dNH
+ | | | |
+ + +
| |
\ \

A titre dexemple, la minralisation du glucose est communment dcrite par la raction doxydation
suivante :
6 12 6 2 2 2
6 6 6 C H O O CO H O + +
On observe, par kg de matire volatile dgrade (Veeken et al., 2003) :
consommation doxygne : 1,07 kg O
2
/ kg MV
dgrade

production de CO
2
: 1,47 kg CO
2
/ kg MV
dgrade

production deau : 0,6 kg H
2
O / kg MV
dgrade

production de chaleur : 16 MJ / kg MV
dgrade


En condition arobie, le biogaz est donc majoritairement compos de dioxyde de carbone. De 905
1530 litres de CO2 par kg de matire consomme sont librs lors du compostage de boues de
station dpuration ou dordures mnagres (Aguilar, 2000).

III.3.2. Aspects cintiques
Les aspects stoechiomtriques prsents ci-dessus supposent une minralisation complte de la
matire dgradable. Une telle minralisation peut tre ralise dans des laps de temps trs variables en
fonction notamment des facteurs dinfluence qui vont modifier les cintiques ractionnelles et par la
mme la stoechiomtrie un temps donn. Ainsi, la dure des phases du compostage est sujette
dimportantes variations selon la nature des matriaux dgrads et lefficacit du procd,
dtermin par le degr daration et dagitation (Tuomela et al., 2000). Le Tableau 48 en Annexe 1
tente de rsumer les principaux facteurs et de dcrire succinctement leur mcanisme dinfluence ainsi
que les moyens permettant de les contrler.
Malgr lexistence de nombreux facteurs dinfluence, de part la nature de laccepteur final O
2
et de son
potentiel lev et galement du fait de la grande diversit des micro-organismes impliqus, les
ractions mtaboliques possibles en arobiose sont multiples. Aussi, le processus dans son intgralit
ne prsente pas la relative fragilit observe en anarobiose (Gourdon, 2001).




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III.4. Biodgradation anarobie
En conditions anarobies, le principal processus de dgradation de la matire organique est celui de
mthanisation. Ce phnomne implique diffrentes tapes biochimiques successives et communauts
bactriennes interdpendantes.

III.4.1. Les 4 tapes biochimiques successives de la mthanogense
a. Phase dhydrolyse
En conditions anarobies, ltape dhydrolyse est ralise par des bactries acidognes hydrolytiques
par lintermdiaire denzymes extracellulaires (Chynoweth & Pullammanappallil, 1996). Comme nous
lavons dj voqu, il sagit en quelque sorte dune tape de prparation du substrat pour la phase
suivante dacidogense, ralise par les mmes bactries. Sur dchet solide, cette premire phase de la
dgradation est souvent considre comme ltape cintiquement limitante du processus mthanogne
dans son intgralit (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ; Vavilin et al. 1996 ; Mata-Alvarez et al.,
2000), notamment dans le cas de taux levs en hydrates de carbone qui sont les composants
organiques les plus lents hydrolyser (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991).

b. Phase dacidogense
Lacidogense est dfinie comme une raction biologique anarobie productrice dacides sans
accepteurs ou donneurs dlectrons additionnels inorganiques (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ;
Batstone et al., 2002). Cest le cas de la dgradation des sucres et des acides amins convertis
principalement en formate (HCOOH), actate (CH
3
COOH), dioxyde de carbone et dihydrogne. La
dgradation du glucose en actate, par exemple, est schmatise par la raction suivante (Batstone et
al., 2002) :
6 12 6 2 3 2 2
C 2 2 2 4 H O H O CH COOH CO H + + +
Les composs avec un squelette nombre impair datomes de carbone peuvent toutefois tre
lorigine dautres acides gras tels que le propionate (CH
3
CH
2
COOH). De plus, dans le cas dune
accumulation du dihydrogne (en cas de faible activit des bactries lutilisant, les mthanognes
notamment, cf. ci dessous), la dgradation des sucres va conduire la formation de nombreux autres
produits tels que le butyrate, le lactate ainsi que des alcools. (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ;
Chynoweth & Pullammanappallil, 1996).
La flore acidogne, responsable de ces deux premires tapes (hydrolyse et acidogense), possde un
dveloppement rapide comparativement aux suivantes. De plus, les bactries qui la constituent sont en
grande partie anarobies facultatives et tolrent des pH relativement bas (jusqu 5) ce qui en fait des
organismes dveloppement peu contraignant (Gourdon, 2001).
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 47 -
LGCIE, INSA Lyon
Les acides gras forms au cours de lacidogense en condition daccumulation dH
2
et ceux provenant
de lhydrolyse des lipides sont mtaboliss par un tout autre groupe bactrien, les bactries actognes,
par oxydation anarobie essentiellement (Batstone et al., 2002).

c. Phase dactogense
Cette phase est nomme ainsi car lactate est son principal produit carbon. Contrairement aux
ractions dcrites prcdemment, les ractions mises en jeu ici ncessitent la prsence dun accepteur
dlectron inorganique : lhydrogne (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991) sous sa forme ionique
(Batstone et al., 2002). Ces ractions gnrent du H
2
et les bactries qui les ralisent sont dites
productrices obliges dhydrogne (Mata-Alvarez, 2003).
Acides et alcools forms prcdemment sont transforms en actate, CO
2
et H
2
. Les acides gras avec
un squelette nombre impair ( 5 C ) datomes de carbone (le valrate par exemple) sont toutefois en
partie convertis en propionate (Chynoweth & Pullammanappallil, 1996 ; Batstone et al., 2002) qui sera
son tour converti en actate, CO
2
et H
2
. La dgradation du propionate est schmatise par la raction
suivante (Batstone et al., 2002) :
3 2 2 3 2 2
2 3 2 CH CH COOH H O CH COOH H CO + + +
Les micro-organismes actognes sont anarobies stricts, trs sensibles au pH, et possdent un
dveloppement lent. Ils ralisent de plus une raction mtabolique thermodynamiquement peu
favorable. Lhydrogne produit ne doit pas saccumuler sous peine dinhiber toute conversion. Il doit
donc tre soustrait du milieu au fur et mesure de sa production do un lien trs troit ncessaire, un
dveloppement syntrophique, entre ces bactries et les suivantes qui lutilisent. (Pavlostathis &
Giraldo-Gomez, 1991 ; Chynoweth & Pullammanappallil, 1996 ; Mata Alvarez, 2003).

d. Phase de mthanogense
Les bactries mthanognes constituent un groupe dorganismes si particulier quelles font partie dun
rgne spcifique, les archobactries, spar du rgne des bactries procaryotes par des
caractristiques mtaboliques et une structure membranaire particulires. (Chynoweth &
Pullammanappallil, 1996).
De nombreux substrats (mais trs spcifiques) peuvent tre utiliss (Chynoweth & Pullammanappallil,
1996). Cependant, deux voies de production du mthane sont prdominantes (Batstone et al., 2002) :
lactoclastie, partir de lactate, selon la raction :
3 4 2
CH COOH CH + CO
la rduction du dioxyde de carbone par lhydrogne selon :
2 2 4 2
4H + CO CH + 2H O

En digesteur anarobie, lactoclastie est lorigine de 65 70% du mthane produit (Pavlostathis &
Giraldo-Gomez, 1991). Les bactries responsables de cette tape finale se caractrisent, tout comme
les actognes, par, un dveloppement lent, un caractre anarobie strict et une forte sensibilit au pH
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 48 -
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(Gourdon, 2001). Loptimum se situe autour de la neutralit. La fourchette optimale admise est plus ou
moins large selon les sources : entre 6,8 et 7,4 selon Barlaz (1996) et entre 6 et 8 selon El-Fadel
(1996).

III.4.2. Aspects stoechiomtriques
La dgradation anarobie de la MO peut tre schmatise dans son intgralit de manire trs gnrale
selon lquation suivante (Tchobanoglous et al., 1993) :
2 2 4 rcalcitrante divers
MO H O n MO CO CH gaz

+ + + + +
La matire organique (MO) est utilise par les micro-organismes () afin de synthtiser une nouvelle
biomasse (n

). Une partie de la MO est rcalcitrante (MO


rcalcitrante
) et nest pas dgrade. La raction
saccompagne de productions de dioxyde de carbone, de mthane ainsi que de diffrents gaz ltat de
trace (NH
3
, H
2
S, CO, COV,...).
En considrant une dgradation totale (minralisation) de la matire organique, la quantit de biogaz
forme par digestion anarobie de matires organiques dgradables (de la forme C
n
H
a
O
b
) peut tre
dtermine de manire thorique, grce lquation de Buswell notamment (Shelton & Tiedje, 1984,
Wang et al., 1997, Angelidaki, 2002) :
2 4 2
4 2 2 8 4 2 8 4
n a b
a b n a b n a b
C H O n H O CH CO
| | | | | |
+ + + +
| | |
\ \ \

Cette quation bilan ( laquelle sont parfois ajouts d atomes dazote la molcule organique et
dNH
3
aux produits) a t quilibre en considrant une conversion totale de la matire organique
en CH
4
et CO
2
en conditions anarobies, soit en prsence dH
2
O uniquement. A laide de cette
quation bilan et en connaissant la formule brute de la matire organique (composition lmentaire), il
est donc possible destimer la stoechiomtrie maximale de la raction, le potentiel thorique
maximal de production de biogaz de la MO considre (cf. Tableau 7).

Tableau 7 : Potentiels en CO
2
, CH
4
et biogaz (mL.gMV
-1
) de diffrentes molcules organiques selon lquation
de Buswell (Angelidaki, 2002)
Substrat Formule brute Pot
CH4
Pot
CO2
Pot
Biogaz

Cellulose (C
6
H
10
O
5
)
n
415 415 830
Glucose C
6
H
12
O
6
373 373 746
Protine C
5
H
7
NO
2
496 496 992
Lipide C
57
H
104
O
6
1014 430 1444
Actate C
2
H
4
O
2
373 374 747
Ethanol C
2
H
6
O 730 244 974

Selon cette approche, 1 g de cellulose et de protines ont donc des potentiels respectifs de 830 et
992 mL de gaz compos de CO
2
et de CH
4
en proportion gale. Les lipides et lthanol prsentent par
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 49 -
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contre des proportions en CO
2
et de CH
4
diffrentes. Les lipides ont un potentiel en mthane de plus
de 1 litre de mthane par gramme (en considrant la formule brute C
57
H
104
O
6
).
III.4.3. Aspects cintiques
Comme en arobiose, la cintique de la raction est fortement influence par loccurrence dun grand
nombre de facteurs dinfluence (cf. III.5). Cependant, ltape dhydrolyse tant frquemment
reconnue comme ltape cintiquement limitante du processus de mthanisation de matire organique
particulaire, sa vitesse en condition optimale peut fournir en premire approche une estimation des
cintiques maximales observables. Selon Garcia-Heras (2003), les vitesses dhydrolyse, exprimes
selon un coefficient de premier ordre k en jours
-1
(cf. IV.3.2.b et V.2), sont les suivantes : 0,5 < k
(hydrates de carbone) < 2 ; 0.1 < k (lipides) < 0,7 ; 0,25 < k (protines) < 0,8.
Ces vitesses trs rapides tmoignent indirectement de limportance des facteurs dinfluence en
conditions de stockage des DMA tant donn les dures mentionnes au Tableau 1.

III.4.4. Les principales autres respirations anarobies
En anarobiose et en prsence de sulfates et/ou de nitrates, deux autres processus de respiration
mettant en jeu deux groupes bactriens supplmentaires ont lieu (Batstone et al., 2002) et sont
susceptibles de perturber la mthanognse (cf. III.5.3.e) :
les bactries sulfato-rductrices, qui sont capables doxyder des acides gras (dont lactate),
des alcools, ou lhydrogne en utilisant les sulfates SO
4
2-
comme accepteurs dlectrons
terminaux. Les produits de ces conversions sont principalement lactate, le dioxyde de
carbone et les formes rduites du soufre soit HS
-
et H
2
S.
les bactries dnitrifiantes, qui rduisent les nitrates NO
3
-
afin doxyder les mmes types de
substrats que les prcdents organismes. Les produits de cette biotransformation sont
galement les mmes que prcdemment mais associs aux formes rduites du nitrate soit
NO
2
-
, NO, N
2
O, NH
3
et N
2
.

La Figure 5 propose une illustration gnrale de la dgradation anarobie de matires organiques
solides.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 50 -
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Figure 5 : Dgradation anarobie de la matire organique
Lgende : B1 = Bactries hydrolytiques acidognes ; B2 = Bactries actognes ; B3 = Bactries mthanognes
(a, hydrognophiles ;b, actoclastiques) ; B4 = Bactries sulfato-rductrices ; B5 = Bactries dnitrificatrices


Sulfates
CO
2
, H
2
S
B4
Rduction
des sulfates
Nitrates
CO
2
, NH
3
B5
Rduction
des nitrates
Actognse
Acidognse
Hydrolyse
Mthanognse
B1
B1
B2
B3a B3b
Matire organique complexe
(polysaccharides, protines, lipides)
Matires organiques solubles
(sucres, acides amins, glycrol, )
Acides Gras Volatils, Alcools
(propionate, butyrate, )
CH
4
, H
2
O CH
4
, CO
2
Actate H
2
, CO
2

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Thse M. Rouez 2008 - 51 -
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III.5. Facteurs dinfluence de la mthanogense
La mthanogense est soumise de nombreux facteurs dinfluence troitement lis. Tout dabord, de
nombreux inhibiteurs peuvent affecter certaines de ses tapes ou lensemble du processus.

III.5.1. Inhibiteurs de la mthanognse
Selon Garcia-Heras (2003), une classification simple des inhibiteurs de la dgradation anarobie, et
plus particulirement de la mthanogense, peut tre la suivante :
le ou les substrats, cause de concentrations trop leves (par inhibition des enzymes
bactriennes),
certains produits de la dgradation elle-mme : H
+
(pH), H
2
, NH
3
, H
2
S, AGV, AGLC (acides
gras longues chanes).

Les inhibiteurs les plus frquents en digesteur anarobie sont, selon Mata-Alvarez (2003), les AGV, le
pH, NH
3
et H
2
S. De manire plus complte, il est possible dajouter ces listes les nitrates, les nitrites,
les mtaux lourds ainsi que certains xnobiotiques tels que des solvants, des mdicaments, des
pesticides, des surfactants ou des phnols (Barlaz, 1996 ; Mata-Alvarez, 2003) ainsi que loxygne
pour les anarobies strictes.
Selon Batstone et al. (2002), deux types dinhibitions doivent tre distingus :
les inhibitions biocides, avec une toxicit ractive , irrversible, qui concernent loxygne,
les acides gras longues chanes, les dtergents, les aldhydes, les nitrates, les nitrites ou les
antibiotiques,
des inhibitions biostatiques , avec une toxicit normalement rversible, gnres par les
acides et les bases faibles, les substrats, le pH ou lH
2
.

Le Tableau 8 regroupe les concentrations inhibitrices releves dans la littrature pour certains de ces
composs et prcise les tapes ou les communauts bactriennes affectes.

Partie A : bibliographie
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Tableau 8 : Composs inhibiteurs de la mthanogense et tapes affectes.
Lgende : CE (50) : concentration avec effet significatif (sur 50 % de la population teste) ; CI (50 ou 100 %) :
concentration inhibitrice (de 50 ou 100 % de la population teste) ; NR = non renseign ; Toutes concentrations
en mg.L
-1
si non indiques



Inhibition et
compos
Concentrations
inhibitrices
Etapes ou
bactries
affectes
Remarques Rfrences
- pH < 6 et pH > 8 Mthanognes El Fadel et al., 1996
H
+
(pH)
- pH < 5 Toutes
Important car conditionne
la forme des acides et des
bases
Barlaz, 1996
H
2
p(H
2
) > 10
-4
atm Actognes
Donne concernant la
conversion du propionate
en actate
Gourdon, 2002
NH
3
CE = 3000

Toutes
Toxique sous forme libre
(NH
3
) / pouvoir tampon
important
Chynoweth & Pullam-
manappallil, 1996
CI (50 %) = 50
CI (100 %) = 200
Mthanognes
Affecte sous sa forme libre
principalement
Wens et al., 2001
H
2
S
CI = 0,002 0.003 M
Actognes et
mthanognes
= f (quilibres liquide/gaz) Batstone et al., 2002
CI (100 %) = 3000
Concerne lacide
propionique
Mata-Alvarez, 2003
CE > 10000
Ensemble du
processus
Tout acide confondu
Chynoweth & Pullam-
manappallil, 1996
T
o
x
i
c
i
t

v
e
r
s
i
b
l
e

(


b
i
o
s
t
a
t
i
q
u
e

)

AGV
CE = 2000 - 6000
Hydrolyse -
Mthanogense
A pH neutre, sur cellulose Siegert & Banks, 2004
AGLC
Peuvent tre toxiques
faible (C) mais NR
Toutes les
bactries
Forme libre
principalement. Affecte
notamment par adhsion
sur les parois cellulaires
Batstone et al., 2002
NO
x
. NR Mthanognes
Inhibitions biocide et
par comptition / substrats
Batstone et al., 2002
Mtaux
lourds
CI = 1 mg.L
-1
NR
Toxicit potentielle
fonction de la
biodisponibilit
Mata-Alvarez, 2003
T
o
x
i
c
i
t


i
r
r

v
e
r
s
i
b
l
e

(


b
i
o
c
i
d
e

)

Xno-
biotiques
CE50 :
Surfactants : 7 - 400
Pesticides : > 200
Phnols : 9 - 73
Toutes tapes
confondues
Grande variabilit selon la
nature chimique
Mata-Alvarez, 2003
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 53 -
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Ainsi, les inhibiteurs les plus frquents sont des composs provenant de la mthanogense elle-mme
(de certaines de ses tapes) avec une toxicit normalement rversible. Les AGV, H
+
et H
2
sont des
mtabolites intermdiaires de la dgradation et les productions de NH
3
et H
2
S sont lies la prsence
dazote et de soufre dans la matire organique (et dans la biomasse bactrienne). La prsence en
quantit inhibitrice dAGV, H
+
ou H
2
est principalement le fruit dun dsquilibre du processus, de la
balance acidogense / mthanogense.

III.5.2. Balance acidogense / mthanogense
Comme nous lavons sous-entendu au III.4.1, la digestion anarobie ncessite un quilibre
syntrophique entre des espces bactriennes aux mtabolismes diffrents afin de mener la dgradation
jusqu minralisation de la matire dgradable, notamment au regard de deux paramtres importants :
le pH et le transfert inter- espces de lhydrogne (Batstone et al., 2002 ; Mata-Alvarez, 2003). Ainsi,
en prsence de substrats solubles, ou rapidement hydrolysables par exemple, les bactries acidognes
dveloppement rapide et tolrantes aux pH acides vont gnrer dimportantes quantits dAGV,
abaissant le pH du milieu lorsque le pouvoir tampon est dpass. Ces derniers devront tre consomms
au fur et mesure de leur production par les bactries actognes et mthanognes afin de ne pas
atteindre des valeurs de pH critiques. Le dveloppement lent de ces bactries, ncessitant de plus le
transfert du dihydrogne, sont alors susceptibles de bloquer totalement le processus de biodgradation
selon la raction en chane : plus dacides baisse du pH diminution de lactivit des bactries
utilisant ces acides plus dacides accumuls et ainsi de suite. Cette enchanement peut conduire
acidifier le milieu jusquau point o plus aucune bactrie ne peut se dvelopper.

Mme dans le cas dun pouvoir tampon lev et dune stabilit du pH autour de la neutralit, les AGV
seuls peuvent savrer toxiques et inhiber la fois les bactries mthanognes et ltape dhydrolyse
(Chynoweth & Pullammanappallil, 1996). Les concentrations inhibitrices en AGV sont cependant
dlicates dterminer. Siegert & Banks (2005) dmontrent quindpendamment du pH, les AGV
peuvent affecter les cintiques dhydrolyse de la cellulose partir de concentrations de 2 g (AGV).L
-1

et de fermentation du glucose partir de 4 g (AGV).L
-1
. Un effet sur la production de biogaz et plus
prcisment sur le ratio CH
4
/CO
2
et donc sur la mthanogense a t mis en vidence autour de
6 g (AGV).L
-1
. Veeken et al. (2000) concluent cependant que lhydrolyse est pH dpendante mais
nest pas inhibe par les AGV, jusqu 30 g (DCO).L
-1
dans leurs recherches, dchets

La mthanogense ncessite donc un quilibre entre formation et consommation dacides. Cet
quilibre est communment dsign sous le nom de balance acidogense / mthanogense (Vavilin et
al., 2001, 2003).


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III.5.3. Autres facteurs dinfluence de la mthanogense
Teneur en eau, transferts de matire, caractristiques de la matire organique, quantits et activit des
bactries prsentes, pH, temprature, potentiel redox sont autant de facteurs influenant de manire
directe ou indirecte la mthanisation de la matire organique et notamment la balance acidogense /
mthanogense.
En dcharge conventionnelle, ces facteurs sont largement subis et la gestion des sites en
bioracteur a pour objectif den matriser un certain nombre. Par contre, la gestion de la dgradation
anarobie en racteur (de taille industrielle ou au laboratoire) permet de matriser la plupart de ces
facteurs. La matire convenablement humidifie (voire noye) peut tre homognise, broye et
mlange afin de limiter les impacts lis la teneur en eau et aux transferts de matire. Le milieu peut
tre tamponn afin dviter des variations importantes de pH. Les carences ou excs en nutriments
peuvent tre limits par mlange de la matire dgrader avec dautres matriaux prsentant des
caractristiques adquates. La temprature peut tre maintenue dans une gamme de valeurs donne et
les conditions rductrices peuvent tre assures par ltanchit du racteur. Enfin, la charge organique
peut tre matrise par le dbit entrant et la quantit ncessaire de bactries peut tre assure par
inoculation, rintroduction dune fraction des boues sortantes ou rtention de la biomasse sur un
support.
Cette partie de la bibliographie a pour objectif de dtailler les mcanismes daction de ces facteurs et
leurs consquences, en conditions de stockage notamment, ainsi que dillustrer galement leur
interdpendance.

a. Humidit
Lhumidit est considre comme le facteur dinfluence primordial de la dgradation anarobie en
conditions denfouissement. Cela explique que la recirculation des lixiviats soit le principal moyen
envisag pour optimiser la dgradation en dcharge bioracteur (Pacey, 1999 ; Warith, 2002 ; Reddy
& Bogner, 2003).

Le rle de leau est en effet multiple :
essentielle tout organisme vivant, elle constitue le milieu de vie des micro-organismes (
linterface des solides) et reprsente 80 % de leur masse cellulaire (Aguilar, 2000) ;
cest un ractif de la dgradation de la matire organique. Tchobanoglous et al. (1993),
estiment la quantit deau ncessaire la minralisation de la MO facilement dgradable 190
g (H
2
O).m
-3
de biogaz produit. Lhydrolyse de la cellulose ncessite 0,1g deau par gramme de
cellulose hydrolyse (Aguilar, 2000) ;
enfin, leau et plus prcisment ses dplacements dans le massif de dchets, jouent un rle
important en favorisant les transferts de masse relatifs aux micro-organismes ainsi qu leurs
substrats (Augenstein & Pacey, 1991 ; El-Fadel et al., 1996 ; Mc Dougall & Pyrah, 1999 ;
Mora-Naranjo et al., 2004).
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 55 -
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De part ces considrations, deux niveaux dobservation de ce facteur apparaissent :
Au niveau dun volume dchantillon reprsentatif, il est possible de corrler exprimentalement
lhumidit globale du dchet incub au rendement de sa biodgradation.
De manire gnrale, la littrature saccorde sur lexistence de seuils dhumidit critiques, en de
desquels les activits biologiques sont juges insignifiantes. Ils sont de lordre de 15 50 % exprims
en masse deau par masse sche de matriau (Pommier et al., 2007).
Linfluence de lhumidit au-del de ces valeurs critiques est dlicate formaliser. Diffrentes lois
(rgressions linaires, exponentielles ou autres lois empiriques) sont dailleurs utilises dans les
modles afin de corrler le taux dhumidit certains paramtres cintiques et/ou stoechiomtriques de
la dgradation (cf. V.4.3). A titre dexemple, Mora-Naranjo et al. (2004) utilisent une relation
linaire reliant le taux dhumidit entre 20 et 100 % aux cintiques des diffrentes tapes de la
biodgradation. Pommier et al. (2007) dmontrent quentre une valeur minimale (53 %) et la capacit
de rtention (197 %) du matriau (mlange de papiers/cartons), la teneur en eau a des impacts
cintiques et stoechiomtriques sur la production de mthane, impacts reprsents laide dune loi
linaire. Au-del dune certaine valeur (la capacit au champs (El-Fadel et al., 1996) ou la capacit de
rtention en eau (Pommier et al., 2007)), le taux dhumidit a une influence minime. Cependant, des
valeurs trop leves, celui-ci est susceptible de ralentir, voire de stopper la dgradation, en favorisant
lhydrolyse et lacidogense des substrats, et en dsquilibrant la balance acidogense /
mthanogense (Barlaz, 1996). Cet auteur souligne que ce phnomne rend difficile ltude de
linfluence de lhumidit et quil est donc ncessaire mais dlicat de contrler le pH lors de telles
expriences.
Finalement, les taux dhumidit optimale oscillent selon les tudes, entre 40 et 80 % selon les auteurs
daprs Aguilar (2000) et entre 60 et 400 % selon Barlaz et al. (1990) in (Pommier et al., 2007).

Il apparat donc difficile dtablir prcisment des valeurs critiques et optimales de teneur en eau. De
plus, lhumidit globale dun dchet nest pas mme dexpliquer les phnomnes observs grande
chelle (telle quen site denfouissement) o leau va davantage conditionner lactivit biologique de
part sa distribution et ses dplacements dans le massif de dchet (Augenstein & Pacey, 1991 ; El-
Fadel et al. , 1996 ; Mc Dougall & Pyrah, 1999).
Au sein des diffrentes zones en interactions, les transferts des micro-organismes et des substrats par
leau sont dterminants pour lactivit biologique (cf. les travaux de Vavilin et al., 2001,2002, 2003, et
Veeken & Hamelers, 2000). Ainsi, selon Vavilin et al., certaines zones humides contenant des
matires facilement biodgradables vont gnrer des lixiviats DCO leve, due principalement aux
AGV. Durant son transport dans le massif, cette charge organique peut soit tre consomme , soit
causer des inhibitions selon les caractristiques biologiques, biochimiques et chimiques des zones o
elle est transporte (si la mthanogense est bien amorce et que peu de substrats sont prsents, la
charge organique pourra tre absorbe ). Dans le cas contraire et selon le pouvoir tampon du milieu,
une baisse de pH pourrait tre temporairement matrise. Par ailleurs, ces transferts de masse,
considrs cette fois par rapport aux micro-organismes, vont permettre lensemencement de zones
biologiquement peu actives et favoriser le dveloppement de poches mthanognes (Veeken &
Hamelers, 2000).
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 56 -
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Les caractristiques (hydro) physiques du milieu vont donc avoir une importance considrable
puisquelles vont conditionner ces transferts de matire.

b. pH, pouvoir tampon et transferts liquide-gaz du CO
2

La sensibilit au pH des bactries actognes et mthanognes a dj t mentionne.
Le pH est la consquence dun certain nombre de paramtres et de processus dordre biologique,
chimique ou physique. De part la production de mtabolites acides lors de la dgradation, les
processus biologiques sont lorigine de modifications du pH. Ainsi le pH de DMA bruts,
classiquement neutre lgrement acide, chute rapidement en conditions de stockage vers une valeur
de 6 cause de lacidogense des substrats facilement dgradables (Barlaz, 1996). Selon lquilibre
entre bactries productrices et consommatrices dacides ou selon le pouvoir tampon du milieu, ces
variations de pH pourront ou non tre contrebalances. Les mouvements de lixiviats peuvent permettre
de disperser ces acides tout comme engendrer potentiellement un effet ngatif en favorisant
lhydrolyse et lacidogense, au dtriment des dernires tapes de la mthanisation. Le pouvoir tampon
est fonction de la nature et des teneurs en acides et en bases du milieu. Bon nombre sont dailleurs
forms lors de la dgradation biologique : AGV, NH
4
+
, H
2
S sont les principaux rgulateurs du pH
en termes de pouvoir tampon en racteur anarobie, selon Garcia-Heras (2003). La production de CO
2

et ses quilibres liquides/gaz jouent galement un rle vis--vis du pH car tant relativement soluble,
le CO
2
ragit avec leau pour former de lacide carbonique (Tchobanoglous et al., 1993). Enfin, les
ventuels phnomnes de prcipitation / solubilisation de phases minrales spcifiques peuvent
considrablement affecter le pH. En racteur, lajout de bicarbonate de sodium permet le contrle de
ce paramtre et peut tre ralis jusquau seuil de toxicit du sodium (3500 mg.L
-1
, Chynoweth &
Pullammanappallil, 1996).

c. Caractristiques de la matire organique
Dune part, la nature des dchets influence leur dgradation tant donn les diffrences de
biodgradabilits (dun point de vue cintique et stchiomtrique) des diffrents constituants des OM
(Augenstein & Pacey, 1991 ; El-Fadel et al., 1996). Comme dtaill au III.4.2, la biodgradation
anarobie des lipides, protines et hydrates de carbone nengendre pas la mme quantit de biogaz et
plus prcisment de CO
2
et CH
4
. Leur hydrolyse en condition optimale na pas la mme vitesse (cf.
III.4.3). Tous ces polymres ninduisent donc pas la mme charge organique dgradable.
Ltape dhydrolyse tant ralise par lintermdiaire dexo-enzymes, la taille des particules
dgrades, et plus prcisment leur surface spcifique, est galement un facteur important : il
dtermine la surface de contact disponible entre les enzymes et les substrats (Vavilin et al., 1996 ;
Palmowski & Mller, 2000 ; Garcia-Heras, 2003). Ainsi, la cintique de lensemble du processus,
voire mme sa stoechiomtrie, peut tre affecte par ce facteur. Palmowski & Mller (2000) ont tudi
linfluence de la rduction de la taille particulaire des dchets organiques sur leur digestion anarobie
et, selon leurs travaux, celle-ci a deux consquences distinctes :
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 57 -
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dans le cas dun substrat riche en fibres et caractris par une faible biodgradabilit , elle
augmente le rendement de biogaz (en terme stoechiomtrique). Cest le cas de dchets verts
(foin et feuilles dans ces travaux) dont la production de gaz a pu tre augmente de plus de 20
% par broyage. Sur un mlange de pommes, carottes, pommes de terre et viande, aucun effet
na t observ. Cela est attribu la forte biodgradabilit de ces matriaux, consquence
de leur composition et de leur structure (leur faible contenu en cellulose et lignine
notamment).
dautre part, la rduction de la granulomtrie diminue le temps ncessaire leur dgradation,
et ce quels que soient les substrats (mais cependant plus particulirement pour ceux
faiblement dgradables ). Ainsi, les fermentations batch de foin et de feuilles ont t
acheves (production de gaz proche de zro) deux fois plus rapidement avec broyage que sans.

Ces observations ont t confirmes par dautres travaux et notamment ceux de Veeken & Hamelers,
(1999) et Tong et al., (1990) In (Sanders et al., 2003).

Ainsi, un facteur taille des particules, sajoute un facteur structurel, le degr de complexit
polymrique de la MO (Garcia-Heras, 2003). De manire plus gnrale, il sagit de la
biodisponibilit voire la (bio)-accessibilit de la matire organique vis--vis des micro-organismes et
des enzymes quils scrtent (Sanders et al., 2003). La matire peut tre momentanment indisponible
de part une taille leve des particules mais galement inaccessible long terme cause de facteurs
structurels tels que la prsence dun complexe ligno-cellulosique o la lignine empche la dgradation
de la cellulose et des hmicelluloses.

La composition des dchets va galement conditionner la prsence de composs inhibiteurs
spcifiques ainsi que leur contenu en nutriments ncessaires au dveloppement des bactries
anarobies : azote, phosphore, potassium, calcium, magnsium, chlore et soufre sont les principaux
auxquels ils faut ajouter certains lments traces mtalliques tels que le fer, le cuivre, le zinc, le nickel,
le molybdne, le slnium, le cobalt Tous sont ncessaires mais peuvent tre toxiques des
concentrations excessives (Chynoweth & Pullammanappallil., 1996 ; El-Fadel et al., 1996 ; Mata-
Alvarez, 2003).

Lazote et le phosphore sont cependant les principaux (Chynoweth & Pullammanappallil., 1996).
Selon ces auteurs, la formule empirique moyenne dune bactrie anarobie est C
5
H
7
O
2
NP
0.06
et les
besoins respectifs en azote et phosphore peuvent tre estims partir de cette formule brute. Ainsi, le
contenu ncessaire en N et P de la matire dgrader est souvent exprim au travers de rapports C/N/P
ou DCO/N/P optimaux (DCO/N/P = 600/7/1 selon Mata-Alvarez (2003), 400/5/1 selon Wens et al.
(2001)). Les ratios C/N sont toutefois les plus employs. Les DMA peuvent prsenter des ratios varis
selon leur composition, les papiers / cartons prsentant une carence en azote et les dchets verts et
alimentaires des ratios C/N faibles (cf. Tableau 4). Une des difficults est de dterminer des ratios C/N
relatifs la matire effectivement dgradable et non des ratios C
total
/N
total
.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 58 -
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Enfin, la nature et la quantit de bactries prsentes initialement dans le dchet (bactries anarobies
et mthanognes tout particulirement) ont une influence considrable vis--vis de la balance
acidogense/mthanogense. Ces micro-organismes sont prsents dans de nombreuses fractions de
DMA (Tableau 6). Leur nombre rduit, leur dveloppement lent et leur sensibilit aux pH acides
explique en partie les longues phases acides en ISDND, o la mthanogense ne peut dbuter.
Linoculation du massif a par consquent un impact majeur sur le dmarrage de la production de
mthane (Barlaz, 1996).

d. Temprature
La prsence de bactries mthanognes a t rapporte dans un trs large ventail de tempratures (de
2C dans les sdiments marins plus de 100C dans des zones gothermiques) (Chynoweth &
Pullammanappallil, 1996). Cependant trois domaines principaux sont reconnus concernant la digestion
anarobie : psychrophile (4 15C), msophile (20 40C) et thermophile (45 70C) (Batstone et
al., 2002). Au sein de chacun de ces domaines, les communauts bactriennes sont diffrentes et sont
dsignes bactries psychrophiles, msophiles et thermophiles. La Figure 6 illustre les variations du
taux de croissance relatif (par rapport aux thermophiles) de ces trois types de bactries mthanognes
en fonction de la temprature :

Figure 6 : Variations du taux de croissance relatif des bactries mthanognes en fonction de la temprature
(source : Batstone et al., 2002)

De manire gnrale, on peut considrer que la cintique de la dgradation dans son intgralit double
chaque augmentation de 10C jusqu des tempratures critiques denviron 60C (Chynoweth &
Pullammanappallil, 1996).




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La temprature affecte les ractions biochimiques de part (Batstone et al., 2002) :
laugmentation des vitesses ractionnelles avec laugmentation de temprature (comme prdit
selon la loi dArrhenius) ;
la diminution des vitesses de raction avec laugmentation de la temprature au-del dun
optimum (> 40C pour les msophiles et > 65C pour les thermophiles) ;
la diminution des rendements (stoechiomtriques) due une augmentation de lnergie
ncessaire au renouvellement et la maintenance cellulaire avec laugmentation de
temprature ;
la modification des chemins ractionnels due aux variations des conditions thermodynamiques
et des communauts bactriennes ;
laugmentation du taux de mortalit microbienne due une augmentation de lnergie
ncessaire la maintenance avec laugmentation de temprature.

La temprature a donc une influence considrable sur les processus biologiques. Elle affecte
galement les ractions physico-chimiques (les quilibres liquides / gaz, la dissolution des solides, les
quilibres acides / bases) et biochimiques (lhydrolyse, par modification de lactivit enzymatique)
(Sanders et al., 2003).
La biodgradation anarobie ne produit que trs peu de chaleur, contrairement la dgradation
arobie. Il est dailleurs ncessaire de chauffer les digesteurs anarobies pour les maintenir en
temprature. Ainsi, malgr sa courte dure au sein dune dcharge, la phase arobie a une importance
considrable sur la mise en place de tempratures leves (jusqu plus de 70C) et donc
potentiellement sur le droulement de la dgradation anarobie suivante (Aguilar, 2000).

e. Prsence dautres communauts bactriennes
La prsence initiale de nitrates ou sulfates et des deux groupes bactrien qui y sont lis (cf. III.4.4)
sont susceptibles de perturber le processus de biodgradation selon deux mcanismes (Batstone et al.,
2002) :
un phnomne dinhibition des bactries mthanognes par les composs rduits du soufre
(sous forme H
2
S) et de lazote (sous forme NO
2
-
, NO, N
2
O).
une comptition pour le substrat carbon (AGV et alcools) entre les bactries sulfato-
rductrices et dnitrifiantes et lensemble des bactries acidognes, actognes et
mthanognes ainsi quune comptition pour laccepteur final dlectrons (H
2
) de ces deux
dernires.

Pour plus de dtails, se reporter au III.4.4.

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f. Potentiel redox
Les bactries actognes et mthanognes tant strictement anarobies, le potentiel redox du milieu a
une influence considrable. Les mthanognes requirent un potentiel infrieur -100 ou -300 mV
selon les auteurs (Aguilar, 2000). tant donne la rapide consommation de loxygne et la mise en
place de conditions rductrices au sein dune dcharge, ce paramtre napparat pas comme un facteur
primordial. Nanmoins, il peut devenir influent dans le cadre de la dcharge bioracteur : dune part, la
mise en dpression du massif de dchet peut conduire lintroduction dair dans la dcharge, surtout si
le volume soutir est suprieur au volume de gaz cr. Dautre part, la recirculation des lixiviats, selon
sa gestion, peut impliquer lintroduction dune certaine quantit doxygne dissous...


Pour conclure, linfluence de nombreux facteurs sur le dmarrage et la vitesse de production de
mthane en dcharge a t dmontre parmi lesquels figurent lhumidit, le pH, la taille des
particules, laddition dinoculum, les concentrations en nutriments et la temprature entre autres
(Barlaz, 1996).


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IV. Moyens dvaluation de la biodgradabilit des
DMA
Les moyens dvaluation de la biodgradabilit sont nombreux et lensemble des facteurs prsents
font quils sont dlicats mettre en uvre et doivent rpondre des objectifs prcis
IV.1. Principe et considrations gnrales
De manire gnrale, lvaluation exprimentale de la biodgradabilit dun matriau consiste placer
un chantillon du matriau dans des conditions dincubation plus ou moins contrles puis suivre
dans le temps sa dgradation biologique i.e. : soit la disparition (consommation) des ractifs ,
soit la production de mtabolites intermdiaires ou encore des composs finals de la dgradation
(Angelidaki, 2002 ; Veeken et al., 2003).
Les mesures de la consommation du substrat ou de la production dintermdiaires peuvent tre
ralises laide de paramtres globaux tels que, sur solide, la teneur en MV, COT ou la DCO et, en
phase liquide, le carbone organique dissous (COD), la DCO ou par une analyse directe des composs
considrs. Ces mesures peuvent savrer trs contraignantes notamment en vue dtablir une
cintique de la dgradation. De plus, elles ncessitent une intrusion et un prlvement au sein du
milieu qui peuvent tre sources de biais exprimentaux. Plus simple, la mesure de ractifs ou de
produits finals gazeux est souvent privilgie (Angelidaki, 2002).

De nombreux tests dvaluation de la biodgradabilit de composs organiques font lobjet de
mthodes normalises, dveloppes pour une application certains produits chimiques tels que les
lubrifiants, dtergents ou agents de surface en raison notamment de leur impact sur lenvironnement
(Ademe, 2005). Dautres rfrences normatives existent galement pour lanalyse de la Demande
Biochimique en Oxygne sur n jours (DBO
n
) deffluents liquides, de boues ainsi que des eaux
naturelles AFNOR (NF EN 1899).
Ces mthodes sont spcifiquement adaptes lanalyse de composs liquides et/ou solubles et aucun
test normalis pour ltude de la biodgradabilit de matriaux solides nest disponible lheure
actuelle, mis part ceux concernant les matires plastiques (Pestre, 2007).

Concernant les tests de biodgradabilit des substances chimiques, lOCDE distingue trois catgories
dessais, dcrites ci-dessous (OECD, 1995).
Les tests de biodgradabilit immdiate offrent une possibilit de biodgradation et
dacclimatation de la flore microbienne limite dans le temps. Aussi, un produit donnant un
rsultat positif au cours dun tel essai se biodgradera rapidement dans lenvironnement mais
Partie A : bibliographie
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un rsultat ngatif ne signifie pas ncessairement que il ne se biodgradera pas dans certaines
conditions.
Les tests de biodgradabilit intrinsque permettent une exposition prolonge du compos
tudi aux micro-organismes, la biodgradation tant favorise par une proportion produit
chimique/biomasse plus adquate ou par dautres conditions un compos donnant un rsultat
positif dans un tel essai peut tre class comme intrinsquement biodgradable mais on ne
peut tre sr que sa biodgradation soit rapide et sre dans un autre environnement .
Les essais de simulation fournissent une ide du taux de biodgradation dans des conditions
environnementales particulires. Les essais de ce genre peuvent tre subdiviss selon le type
denvironnement quils sont senss simuler : traitement biologique arobie ou anarobie,
rivire, lac, mer, sol...

Cette classification savre intressante concernant les tests mis en uvre sur les DMA.
De nombreux tests existants pour la mesure de la biodgradabilit de matriaux solides ont pour
objectif de dterminer la stabilit de composts et de dchets ayant subi un prtraitement mcano
biologique (PTMB). Dans ce dernier cas, la vocation des essais est dtablir des critres dacceptabilit
de ces dchets pour lenfouissement, tel que cela est prconis au niveau europen et mis en uvre en
Allemagne et en Autriche (Binner & Zach, 1998 ; Heerenklage & Stegmann 2001). Nombre de ces
tests sont assimilables des tests de biodgradabilit facile ou immdiate tels que dcrits par lOCDE.
Ils sont de courte dure et, la plupart du temps, relativement simples de mise en uvre en vue dune
application routinire.
En vue de sassurer que seules les caractristiques du substrat dgrad conditionne les rsultats du
test (Veeken et al., 2003), dautres mthodes ont pour objectif de matriser la plupart des facteurs
dinfluence susceptibles de modifier les rponses exprimentales et correspondent ainsi aux tests de
biodgradabilit intrinsque. Certains de ces tests sont tudis en vue dtablir des critres de stabilit
des dchets, en conditions arobies notamment (Veeken et al. 2003). En conditions anarobies, ils ont
pour but de dterminer le potentiel maximal (ultime) de biogaz ou de mthane de dchets ou fractions
de dchet ainsi que leur vitesse de dgradation optimale (Angelidaki & Sanders, 2004).
Enfin, le compostage ou les PTMB tout comme lenfouissement de dchets peuvent tre reproduits
lchelle laboratoire en vue de simuler des conditions particulires. Ce type dessai permet notamment
dtudier limpact de diffrentes stratgies, telles que la recirculation des lixiviats ou les PTMB avant
enfouissement, sur le comportement en conditions anarobies de dchets. Les travaux de Morais
(2006) en fournissent un exemple.

Dans les deux paragraphes suivants, nous prsenterons des moyens dvaluation de la biodgradabilit
des DMA appartenant aux deux premires catgories, en les diffrenciant selon le mode de respiration
bactrienne quils sont destins induire : arobie et anarobie. Les domaines dapplication et limites
des tests de simulation seront ensuite voqus.
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IV.2. Evaluation de la biodgradabilit en arobiose
IV.2.1. Les diffrents essais et mthodes dvaluation
La dgradation biologique arobie de la matire organique conduit la consommation doxygne et
la formation de dioxyde de carbone, deau, de chaleur et de biomasse microbienne (cf. III.3.1). Par
voie de consquence, elle peut tre plus ou moins facilement caractrise par le suivi de la
consommation doxygne (a) et/ou de la production de CO
2
(b) ainsi que de chaleur (c). (Veeken et
al., 2003 ; Gomez et al., 2006).

a. Consommation doxygne
Les tests bass sur la consommation doxygne peuvent tre classs notamment selon le mode
daration employ : de nombreux auteurs distinguent ainsi les tests raliss en conditions statiques
des tests en conditions dynamiques (Adani et al., 2001 ; Cossu et al., 2001 ; Heerenklage & Stegmann,
2001).
Les conditions de mise en uvre et des valeurs de respiration typiques pour ces diffrents tests de
stabilit sont rsumes en Annexe 2.
(i). Tests en conditions statiques
Le matriau tester est plac dans un flacon clos ou une jarre et loxygne prsent dans la phase
gazeuse est consomm par lactivit bactrienne. Cette consommation est suivie par mesure directe
des variations du taux doxygne par chromatographie gazeuse ou grce des sondes spcifiques ou
encore laide de respiromtres tels que le matriel OxiTop
TM
ou le Sapromat
TM
(Gomez et al., 2006).
Les respiromtres ont pour principe gnral de capter le dioxyde de carbone produit laide dun
pige alcalin (solution ou pastilles de soude) plac dans la phase gaz du flacon ractionnel. La
dgradation se droulant volume constant, des mesures manomtriques permettent de suivre la
dpression lie la consommation doxygne et, par la mme, le volume doxygne consomm. Dans
le cas des respiromtres lectrolytiques tels que le Sapromat
TM
, cette dpression induit llectrolyse
dune solution approprie (gnralement de sulfate de cuivre) aboutissant la formation dO
2
et
permettant ainsi le maintien dun taux doxygne constant (Lasiridi & Stentiford, 1998). Pour les
autres respiromtres, le taux doxygne dans le milieu peut devenir le facteur limitant la dgradation et
ncessite une attention particulire (Veeken et al., 2003).

Dans ces conditions statiques, lchantillon peut tre galement humidifi une teneur proche de sa
capacit de rtention en eau. Le test AT
n
, activit respiratoire sur n jours, est un test de rfrence du
dcret allemand sur le stockage des dchets prtraits (Morais, 2006). Il est dcrit notamment par
Binner & Zach (1998) et Heerenklage & Stegmann (2005). DSOUR et SRI sont dautres appellations
donnes des tests de respiration raliss en mode statique sur solide quivalents lAT
n
. Le taux
spcifique de consommation doxygne en phase solide (DSOUR, Dry Specific Oxygen Uptake
Rate ) a t developp par Iannoti et al. (1993) in : (Lasaridi & Stentiford, 1998 ; Gomez et al.,
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2006). Lindice de respiration statique (SRI, Static Respiratory Index ) a t introduit par Adani et
al. (2001).

Toujours en condition statique, lchantillon peut tre noy, la biodgradation tant alors suivie en
suspension aqueuse. Sinspirant du test de DBO utilis en qualit des eaux (Gomez et al., 2006),
certains auteurs proposent lindice OUR, Oxygen Uptake Rate (Veeken et al., 2003) ou SOUR,
Specific Oxygen Uptake Rate (Lasaridi et Stentiford, 1998) o lchantillon broy est mis en
suspension faible concentration en phase liquide. Une solution minrale, un inhibiteur de la
nitrification et ventuellement un inoculum, sont ajouts et les milieux sont agits laide dun
barreau aimant afin dassurer le transfert de loxygne de la phase gaz vers le liquide.
(ii). Tests en conditions dynamiques
Sopposant aux tests raliss en conditions statiques, lindice de respiration dynamique (DRI,
Dynamic Respiration Index ) a t propos par Adani et al. (2001) notamment (in Gomez et al.,
2006). Dans de telles conditions, le matriau ltat solide, humidifi sa capacit de rtention en eau
si ncessaire, est plac en racteur et ar en permanence par un flux dair le traversant. Deux sondes
oxygne, lune en entre de racteur et lautre en sortie, ainsi quun dispositif de mesure du dbit et de
la temprature permettent la dtermination du taux de consommation en oxygne. La masse
dchantillon peut tre trs variable, de quelques grammes jusqu plus de dix kilogrammes selon les
dimensions du racteur utilis (Adani et al., 2001 in Gomez et al., 2006).
Heerenklage et Stegmann (2001) dcrivent galement une procdure dvaluation du DRI dans des
racteurs de 2-3 litres o jusqu 400 g de dchet (masse sche) peuvent tre tests. Les chantillons
frais ou contenant une forte proportion de matire facilement dgradables sont inoculs laide dun
compost mature afin dviter une acidification.

b. Production de CO
2

Les essais les plus couramment mis en uvre utilisent une solution alcaline pour piger le CO
2
form
lors de lincubation du matriau en phase liquide (incubation similaire au test OUR prsent ci-avant).
Le dosage de la solution alcaline en fin ou au cours de lincubation permet dexprimer la quantit de
CO
2
produite par gramme de matriau test (Gomez et al., 2006).
Ce type de suivi est galement appliqu des essais de simulation, de plus grande taille, tels que ceux
prsents en condition dynamique. A titre dexemple, Komilis (2006) prsente ainsi une analyse
cintique du compostage de dchets solides en conditions optimales dans des racteurs de 25 litres
ars en permanence. La production de CO
2
est dtermine par dosage quotidien dune solution pige
dhydroxyde de potassium place en sortie de racteur (un pige CO
2
est galement plac en
entre...).

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c. Production de chaleur
La capacit dauto-chauffement (CAE) (ou test du Rottegrad) est une mthode qualitative de
dtermination de la stabilit des composts qui peut tre mise en uvre sur dchets solides (Morais,
2006). Elle consiste placer lchantillon brut tamis 10 mm une teneur en eau proche de sa
capacit de rtention dans un rcipient isol (Vase Dewar) et suivre llvation de la temprature sur
dix jours. La temprature maximale atteinte permet daffecter une classe de stabilit au matriau test
(ADEME, 2000).
Des tableaux de correspondance entre production de CO
2
, temprature maximale et classe de stabilit
sont proposes dans la littrature (Gomez et al., 2006).

IV.2.2. Domaines dutilisation et limites des essais
a. Type de suivi
Les tests bass sur la mesure de la production de dioxyde de carbone sont trs utiliss dans les
laboratoires commerciaux pour lanalyse des composts. Ils sont en gnral trs simples et faciles
utiliser. Cependant, selon Gomez et al (2006), la mesure de la consommation doxygne est prfre
celle du dioxyde de carbone et ce pour plusieurs raisons :
le CO
2
peut tre produit en anarobiose si les conditions daration ne sont pas bien assures ;
ces mthodes supposent un ratio CO
2
produit / O
2
consomm de 1 alors que le ratio dpend du
degr doxydation de la matire organique ;
le CO
2
est particulirement soluble en phase aqueuse et sa solubilit dpend fortement du pH.
Dans les cas o le pH nest pas contrl, il est ainsi dlicat de comparer lactivit respiratoire
dchantillons nayant pas le mme pH.

La mesure de la production de chaleur via la capacit dauto-chauffement est une mthode simple
et largement mise en uvre en Europe et aux Etats-Unis pour des suivis de routine de la qualit de
composts (Gomez et al., 2006). Cependant, ce test a les mmes limites que ceux raliss en phase
solide (cf. ci-aprs) et peut frquemment conduire des rsultats et interprtations errones (Weppen,
2002 in Veeken et al., 2003).

b. Conditions de mise en uvre :
(i). Mode statique ou dynamique
Selon Adani et al. (2006), le DRI prsente les avantages suivants comparativement aux autres
mthodes respiromtriques dvaluation :
la prsence dun flux dair continu durant les mesures permet dviter les limitations du
transfert de loxygne travers le dchet et vers les microorganismes ;
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la possibilit de travailler sur dimportantes quantits permet de limiter les prparations
initiales du matriau (quartage, broyage). Ces conditions offrent ainsi une meilleure garantie
de la reprsentativit de lchantillon et permet dviter la rduction de la taille des particules
ou le tamisage qui peuvent savrer complexes, sur matriau humide notamment.

Adani et al. (2004) ont ralis en parallle des tests SRI et DRI sur diffrents dchets mnagers
prtraits. Les respirations obtenues en mode statique se sont avres effectivement infrieures celles
dtermines en mode dynamique (DRI/SRI 1.6) confirmant ainsi les limitations lies au transfert de
loxygne en mode statique (et phase solide).
(ii). Essais en suspension aqueuse ou sur milieu solide
Pour les tests statiques tout comme les tests dynamiques, quelques auteurs soulignent limportance de
matriser un certain nombre de facteurs dinfluence de la dgradation arobie afin de dterminer le
taux de consommation doxygne rellement optimal. Dans ces conditions matrises, seules la
quantit et la nature du carbone assimilable du matriau test devraient conditionner la rponse
exprimentale (Lasaridi & Stentiford, 1998 ; Veeken et al., 2003). Ainsi, les conditions suivantes
doivent tre assures (Veeken et al., 2003) :
la surface complte du solide test devrait tre accessible la dgradation : le dchet devrait
tre finement broy et plac en suspension dans leau ;
la teneur en micro ou macro nutriments ne devrait pas tre limitante : une solution minrale
devrait tre ajoute ;
les conditions de pH acide et daccumulation dacides gras doivent tre vites : la solution
peut tre tamponne ;
lactivit bactrienne initiale doit tre suffisante pour permettre un bon dmarrage de la
dgradation : un inoculum peut tre employ ;
les transferts doxygne de la phase gaz vers le mlange liquide solide ne doivent pas tre
cintiquement limitants : la quantit de solide doit tre faible, le mlange agit et la teneur en
oxygne de lespace gazeux suprieure 10 % (v/v) ;
les autres respirations arobies que celles lies au carbone doivent tre matrises ; la
nitrification peut tre empche laide dun inhibiteur.

Cette matrise ne peut tre assure dans les essais en phase solide car la prsence dagrgats empche
un accs total la matire dgradable et la surface (bio)disponible dpend de la teneur en eau et de la
densit effective. De plus, dans ces conditions, le transfert de loxygne du gaz vers le milieu
ractionnel est bien souvent ltape cintiquement limitante et la consommation doxygne mesure
nest pas fonction de la matire elle-mme mais de ce transfert. Enfin, sur une matrice solide, il est
difficile dajouter solution minrale, inoculum ou inhibiteur de la nitrification de manire uniforme
(Veeken et al., 2003).
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c. Bilan
Les tests de biodgradabilit arobie appliqus aux dchets font lobjet de nombreuses propositions
mthodologiques. Il nexiste cependant pas de consensus gnral concernant lutilisation dune
mthode commune (Gomez et al., 2006).
Dans de nombreux tests, le dchet est incub sans inoculum et/ou solution minrale et ces conditions
peuvent induire des phnomnes dinhibition de la respiration sur dchets frais ou ayant subi un
PTMB court ou inefficace (Binner, 2003) Ces inhibitions se traduisent par des phases de latence plus
ou moins importantes, qui peuvent conduire des interprtations errones des rsultats si le test est
men sur n jours sans attention particulire cette phase de latence. Les rsultats de Binner (2003)
illustrent largement cette limite concernant le test AT
4
. Binner & Zach (1998) recommandent
dailleurs une dure de 7 jours afin dviter de fausses interprtations du test sur dchets ractifs .
Heerenklage et Stegmann (2001) prsentent les rsultats dune analyse laide du test AT
n
dun dchet
alimentaire brut et du mme dchet inocul laide dun compost mature. La respiration sur le dchet
frais savre prsenter une phase de latence de plus de 4 jours contrairement au test inocul
(remarque : au terme de la phase de latence, les cintiques de consommation sont quivalentes si la
respiration obtenue sur le test inocul est ramene celle de lchantillon test par soustraction de la
respiration de linoculant). Ces auteurs proposent galement dinoculer les tests de type DRI laide
dun compost mature lors de lanalyse dchantillons frais ou contenant une forte proportion de
matire facilement dgradables afin dviter une acidification.
Ainsi, seuls les rsultats obtenus avec les tests raliss en phase liquide avec solution minrale et
inoculum et o loxygne nest pas limitant semblent permettre une valuation de la biodgradabilit
intrinsque. Ils sont cependant plus contraignants mettre en uvre et ncessitent une prise
dchantillon relativement faible qui implique une importance accrue de sa reprsentativit.

IV.3. Evaluation de la biodgradabilit en anarobiose
Les paramtres de suivi les plus utiliss pour caractriser la biodgradabilit anarobie sont la
production de mtabolites intermdiaires (tels que les AGV) et celle des composs finals (CH
4
et CO
2
,
le biogaz) sont La plupart des mthodes sont bases sur la mesure de la production de biogaz
uniquement, car celle-ci peut tre dtermine de manire relativement simple laide de mthodes
volumtriques (via une augmentation de volume pression constante) ou manomtriques (via une
augmentation de pression volume constant). Cette mesure a de plus lavantage de rendre compte du
taux de biodgradation ultime, de minralisation, du compos test (Angelidaki & Sanders, 2004).
Heerenklage & Stegmann (2001) ont mis en uvre ces deux mthodes (volumtrique et
manomtrique) sur une incubation de cellulose dans les conditions du test GB
n
dcrit ci-dessous. Une
trs bonne corrlation (R=0.99) a t obtenue entre les volumes de biogaz dtermin selon les deux
mthodes sur 10 jours et celles-ci apparaissent donc quivalentes.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 68 -
LGCIE, INSA Lyon
IV.3.1. Les diffrents essais et mthodes dvaluation
Concernant la mesure de la biodgradabilit immdiate ou intrinsque , trois tests sont
principalement appliqus aux dchets mnagers : le GasBilding (GB
n
), le GS
n
et le Potentiel Bio
Mthanogne (PBM).

a. GB
n

Il sagit du second test de rfrence du dcret allemand sur le stockage des dchets prtraits, le
premier tant le test dactivit respiratoire (AT
n
) en arobiose (Morais, 2006). Le GB
n
est galement
appel test de fermentation car il a t dvelopp sur les bases dun test normalis (DIN 38414) du
mme nom (ou encore nomm GP
n
(Heerenklage & Stegmann, 2001)). Le dchet est incub 35C en
prsence dun inoculum (boues de digesteur anarobie) et deau du robinet. Les proportions utilises
sont 50 g de dchet humide, 50 ml de boue et 250 ml deau. Un blanc , o linoculum et leau sont
incubs seuls, est galement mis en uvre afin de dterminer la production de gaz due linoculum
(Heerenklage & Stegmann, 2005).
Une phase de latence plus ou moins longue selon la nature du dchet test peut tre observe. Le
temps dincubation total est gal la dure de cette phase + n jours. La rglementation allemande
recommande un GB
21
soit n = 21 jours (Morais, 2006) dans le cadre de lanalyse de dchets prtraits
destins lenfouissement.

b. GS
n

Ce test, galement nomm test dincubation , diffre du prcdent principalement de part la
quantit totale de dchet test (de 800 1500 g), la teneur en eau fixe la capacit de rtention du
matriau et labsence dinoculation (Heerenklage & Stegmann, 2005). Plac dans un flacon en verre
40C, lchantillon peut tre r-humidifi en cours dincubation. Le volume de biogaz gnr est
quantifi de manire volumtrique laide dun eudiomtre. Selon Binner & Zach (1998), ses
avantages vis vis du test GB
n
sont une meilleure prcision et reproductibilit des rponses de part la
robustesse du dispositif ainsi que les quantits importantes de matriau test et, par consquent, de
biogaz gnr. La dure du test est variable, de 21 jours dans les travaux de Heerenklage & Stegmann
(2005) 90 et plus dans ceux de Binner & Zach (1998).

c. PBM
Le test PBM (BMP Biochemical Methane Potential parfois nomms ABP Anaerobic Biogas
Potential car le suivi est ralis sur la production de biogaz total (Gunaseelan, 1997)) est un test
couramment mis en uvre afin de dterminer la biodgradabilit anarobie de matriaux ou de dchets
organiques solides et galement de dchets mnagers ou de fractions de DMA. Le matriau tester,
ainsi quune certaine quantit dinoculum et de minraux, sont placs dans des flacons
hermtiquement clos. Des analyses de la phase gaz (le plus souvent laide dun chromatographe
phase gaz) permettent dtablir une cintique de production du mthane. Lincubation est ralise
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 69 -
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jusqu larrt de la production de biogaz, afin dobtenir le potentiel ultime du matriau test. Cest la
principale diffrence avec le test GB
n
qui est ralis sur une dure limite de n jours.
Dans le but de mesurer un potentiel ultime optimal, le matriau tudi doit tre incub dans des
conditions danarobiose optimises o les principaux facteurs affectant la mthanogense dcrits
auparavant III.5 doivent tre contrls afin dviter loccurrence de phnomnes inhibiteurs
(Angelidaki & Sanders, 2004) :
humidit : le systme est noy ;
temprature : les tests doivent tre raliss temprature constante dans une plage soit
msophile soit thermophile ;
oxygne : les conditions anarobies sont assures au dpart en chassant loxygne de la phase
gazeuse le plus souvent laide dun flux dazote ou dun mlange CO
2
/N
2
. Lajout de sulfure
de sodium la solution minrale est galement parfois utilis afin dassurer des conditions
rductrices ;
pH : la solution minrale contient la plupart du temps une espce tampon vis vis du pH du
mlange et le pH doit tre mesur au lancement et la fin des essais afin de vrifier labsence
dinhibition. Par ailleurs, linoculum a pour but dassurer une concentration en actognes et
mthanognes suffisante pour viter un dsquilibre et donc une accumulation dAGV ;
nutriments : la solution minrale constitue une source dazote sous forme dammonium et
assure la prsence de certains lments mtalliques essentiels ;
disponibilit du substrat : afin dobtenir une bonne surface de contact entre le matriau
dgrader et les micro-organismes et de faciliter ltape de dpolymrisation / solubilisation, les
solides doivent tre broys. Lagitation peut galement permettre une meilleure solubilisation
de la phase particulaire du dchet et limiter limpact des transferts de matire ;
concentration en substrat : celle-ci doit dune part, tre suffisante pour obtenir une quantit de
gaz mesurable et significative au regard des blancs contenant uniquement de linoculum,
mais dautre part, pas trop leve, afin dviter une inhibition par le substrat.

Les conditions de mise en uvre des tests diffrent au sein de la littrature et notamment concernant
trois paramtres dimportance : la substance tester, linoculum et la solution minrale, en terme de
qualit et de quantit.
Les chantillons solides particulaires sont communment broys 1 mm (Wang et al., 1994)
ou moins (Cho et al., 1995 ; Gartiser et al., 1998) bien que le test puisse tre ralis une
taille suprieure (2 mm selon Gunaseelan (2004) et de 1 8 mm selon Owens & Chynoweth et
al. (1993)). La concentration (exprime par rapport au volume total final soit V
inoculum
+ V
solution
minrale
) mise en uvre dans le test est trs variable selon les auteurs : de moins de 1 g de MS.L
-
1
(Gartiser et al., 1998) 7 g selon Gunaseelan (2004) ou encore, exprime en matire volatile,
de 2 g MV.L
-1
selon Owens & Chynoweth (1993) 20 selon Hansen et al. (2004).
Linoculum est la plupart du temps une boue de digesteur anarobie, msophile (Shelton &
Tiedje, 1984 ; Owens & Chynoweth, 1993 ; Gunaseelan, 2004) ou thermophile (Hansen,
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 70 -
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2003). Le volume dinoculum (en % v/v du volume final) employ est galement variable : de
10 % (Owens & Chynoweth, 1993 ; Wang et al., 1994) 80 % selon Hansen et al. (2003) 20
% (Cho et al., 1995 ; Gunaseelan, 2004).
La solution minrale contient de manire gnrale un tampon phosphate ou carbonate
(Gartiser et al., 1998) ou les deux (Owens & Chynoweth, 1993), une source dazote sous
forme de chlorure dammonium ainsi que des lments mtalliques en trace. Hansen et al.
(2003) proposent une procdure sans son utilisation, avec 80 % v/v de boues anarobies.

Cette variabilit des conditions de ralisation des tests rsulte des diffrents moyens et/ou objectifs
spcifiques de leur mise en uvre et de linexistence de protocole normalis (li notamment la
difficult de normaliser un inoculum). Lobjectif principal tant de mesurer le potentiel maximal de la
MO teste, des conditions optimales et dabsence dinhibition doivent tre assures. Celles-ci peuvent
tre vrifies a posteriori en contrlant les rponses obtenues (productions sans ruptures dans le cas
dun quilibre), lhomognit des rponses sur la base de rpliquats, la dure des ventuelles phases
de latence, les teneurs en mthane du biogaz produit (proche de 60 70 % (v/v) du biogaz total en cas
dquilibre) ou le pH en fin dincubation (Chynoweth et al., 1993 ; Hansen et al., 2004 ; Jokela et al.,
2005). Par ailleurs, cette variabilit des conditions opratoires explique en partie la variabilit des
rsultats dun point de vue cintiques notamment (cf. IV.3.2.b et Tableau 9).

IV.3.2. Domaines dutilisation et limites des essais
a. Tests GB
n
et GS
n

Selon la rglementation allemande, une dure de 21 jours (et une valeur limite maximale de 20
L(biogaz).kgMS
-1
) a t fixe pour le test GB
n
(Binner & Zach, 1998). De part cette courte dure, ce
test est typiquement un test de biodgradabilit immdiate. Daprs les travaux de Binner & Zach
(1998), la production de gaz obtenue au terme de ces 21 jours reprsente seulement 10 60 % de la
quantit totale produite en 240 jours laide du test GS
n
et ce test permet donc une mesure dactivit
mais pas dun potentiel de biogaz.
Toujours daprs ces auteurs, le test GS
n
savre intressant pour les DMA ayant subi un PTMB car il
permet de reproduire en majorit les conditions relles denfouissement. La dure ncessaire pour
achever une incubation (i.e. obtenir une production cumule de biogaz stationnaire), peut stendre de
trois huit mois (Binner & Zach, 1998). Selon les matriaux tests et du fait de labsence
dinoculation, des phases de latence, o peu de biogaz est produit, sont observes en dbut de test.
Dans les cas extrmes, une acidification peut bloquer totalement la dgradation (Heerenklage &
Stegmann, 2005). Ainsi, du fait de ces inhibitions, lutilisation de ce test afin de dterminer la stabilit
dun dchet parat problmatique et diffrentes dures sont tudies et proposes, 21 jours par
Heerenklage & Stegmann (2005) et 90 selon Binner & Zach (1998). Les travaux et rsultats de Adani
et al. (2004) illustrent bien la problmatique : des tests DRI, SRI et GS
90
ont t mis en uvre en
parallle, sur des chantillons de dchets ayant subi un prtraitement arobie plus ou moins pouss .
Alors que les rponses des tests arobies SRI et DRI se sont avres plus ou moins en accord entre
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 71 -
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elles et avec les faits (le dchet ayant subi le prtraitement arobie le moins pouss ont prsent les
respirations les plus leves), les rsultats du test GS
90
ont t totalement contradictoires : lchantillon
ayant subi le prtraitement arobie le plus pouss a produit en 90 jours le plus de biogaz et
inversement. Ces phnomnes dinhibition sont principalement lis lincubation de dchets frais
qui imposent aux systmes une charge organique facilement biodgradable trop importante.
Notamment du fait de labsence dinoculation et de contrle du pH, la balance acidogense /
mthanogense est dsquilibre. Le test GS
n
est donc particulirement adapt ltude de dchets
prsentant un haut degr de stabilit (Binner & Zach, 1998 ; Adani et al., 2001) avec un taux de
matires dgradables faibles (et une flore endogne importante). Adani et al. (2001) proposent le
modle illustratif suivant (Figure 7) pour interprter les productions de biogaz obtenues avec le test
dincubation :

Figure 7 : Modle propos pour la production de biogaz lors du test dincubation daprs (Adani et al., 2001)
(A : chantillon trs stable, B : chantillon imparfaitement stabilis, C : chantillon frais )

Cette figure illustre bien que selon la dure du test, les rponses (obtenues en termes de production
totale de biogaz par quantit de matriau n jours) peuvent tre variable et contradictoires selon la
dure du test.

b. Test PBM
Lobjectif du test PBM est de dterminer le potentiel mthanogne dun chantillon de dchets, c'est-
-dire la quantit maximale (ultime) de mthane que sa dgradation anarobie peut produire dans des
conditions dincubation juges optimales. Comme nous lavons prsent, les procdures de mise en
uvre sont varies et il nexiste pas de protocole commun. Cependant, un consensus existe quant au
fait que la balance acidogense / mthanogense doit tre assure. Thoriquement, celle-ci peut ltre
si la quantit de matire biodgradable teste nest pas trop importante au regard de la quantit de
bactries prsentes et plus prcisment de bactries mthanognes prsentes. Dans la pratique,
lquilibre du test est assur avec lutilisation dun ratio MV
inoculum
/MV
substrat
(ratio I/S) suprieur ou
gal 2 (Chynoweth et al., 1993). Lors dincubations de paille de bl, Hashimoto (1987) (in
Gunasselan, 1997) a mis en vidence les points suivants : en de dun ratio I/S de 0.25, le potentiel
Temps (jours)
B
i
o
g
a
z

c
u
m
u
l


(
L
/
k
g
)
C
B
A
90
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 72 -
LGCIE, INSA Lyon
ultime atteint est diminu cause dune accumulation dacides et, au del de ce ratio, le potentiel est
constant mais le taux de production de mthane augmente. A partir dun ratio de 2, potentiel et taux de
production restent relativement constants. Cho et al. (1995) ont galement tudi limpact du ratio I/S
en ralisant des incubations diffrentes concentrations de dchet alimentaire (2, 4, 10 et 50 g MV.L
-
1
) pour une mme concentration en inoculum (20 % v/v). Leurs rsultats illustrent galement le
phnomne (Figure 8) :

Figure 8 : Production cumule de mthane sur dchet alimentaire diffrentes concentrations initiales pour une
mme concentration en inoculum (20 % v/v), daprs (Cho et al., 1995)

A la concentration initiale de 50 g MV.L
-1
, la production de mthane a t nulle du fait laccumulation
dacides trop importante (pH < 4 ds les premiers jours du test). A 10 g MV.L
-1
, le pH sest abaiss
galement jusqu environ 6 les premiers jours mais sest rapidement rtabli entre 7 et 8 (Cho et al.,
1995).

Ainsi, comme lillustre la figure 6, la rponse exprimentale de la production de mthane savre
quasiment sans phase de latence ni point dinflexion dans des conditions optimales dquilibre du
test. Dans ces conditions, sur matire particulaire, la phase cintiquement limitante est reconnue
comme tant lhydrolyse (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ; Vavilin et al. 1996 ; Mata-Alvarez et
al., 2000). Aussi des rgressions exponentielles de premier ordre (cf. V.2.1) sur la production cumule
de mthane permettent de rsumer les dgradations laide de deux paramtres : k, une constante de
vitesse inversement proportionnelle un temps et P, le potentiel de mthane le plus souvent exprim
en ml CH
4
.g (MV)
-1
. Le Tableau 9 rpertorie des valeurs dtermines exprimentalement par
diffrents auteurs.



0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
0 10 20 30
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

d
e

m

t
h
a
n
e

(
m
l
/
g
M
V
)
2 g MV/L
4 g MV/L
10 g MV/L
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 73 -
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Tableau 9 : Potentiels mthanognes et constantes cintiques de premier ordre de matriaux organiques divers et
fractions de DMA de la littrature (cart-types exprimentaux entre rpliquats entre parenthses, toutes donnes
obtenues 35C).
Dchets
% MV
(/ MS)
P CH
4

(ml.gMV
-1
)
k
(1.j
-1
)
Rfrences
Emballages 85 165 (112) 0,058 (0,01)
Carton 77 217 (38) 0,046 (0,009)
Textiles 92 228 (118) 0,021 (0,001)
Journaux 68 58 (10) 0,056 (0,008)
Couches-culottes 78 204 (18) 0,025 (0,003)
DM 69 147 (4) 0,031 (0,001)
DM inf. < 100 mm 82 182 (38) 0,031 (0,003)
DM sup. > 100 mm 69 219 (10) 0,026 (0.002)
Papier de bureau 74 340 (24) 0,036 (0.006)
Putrescibles 78 527 (54) 0,107 (0.04)
Jokela et al., 2005
Cellulose Avicell 99 390-419 0,039-0.18
Peaux de bananes 87 - 94 243-322
*
0,071-0.122
Mangues 89 - 98 373-523
*
0,028-0.050
Peaux de citrons 94 455 (18) 0,064 (0.004)
Graines de citron 95 732 (7) 0,062 (0.001)
Tomates (pyriforme) 93 211 (12) 0,070 (0.009)
Tomates (commune) 98 384 (12) 0,094 (0.007)
Gunaseelan, 2003
Cellulose - 356-375 0,090-0.145
Herbe 88 209 (5) 0,084 (0.005)
Feuilles 95 123 (5) 0,084 (0.009)
Branches 94 134 (6) 0,035 (0.004)
Mlange 92 143 (4) 0,067 (0.005)
Papier bureau 93 369 (14) 0,136 (0.017)
Carton ondul 98 278 (12) 0,058 (0.006)
Journaux (sans encre) 98 84 (3) 0,084 (0.003)
Journaux 98 100 (3) 0,069 (0.004)
Magazine 78 203 (8) 0,116 (0.012)
Cellophane 99 356 (20) 0,119 (0.017)
Brick de lait 99 318 (14) 0,087 (0.014)
Papier glac 99 341 (22) 0,083 (0.012)
Owens & Chynoweth,
1993
*
La fourchette de donne correspond diffrentes varits de fruits, la variabilit entre triplicats est infrieure
20 ml.

Ce tableau montre que les potentiels sont trs variables du fait des diffrences de biodgradabilit des
biopolymres, mme lorsque ces potentiels sont exprims en termes de MV sur des chantillons
essentiellement organiques et naturels (en tout cas sans polymres de synthse type plastique qui
contribuent la MV mais pas au potentiel mthanogne). Il est galement intressant de remarquer
que la constante cintique k est variable pour des matriaux similaires, du fait des lgres
diffrences entre natures des matriaux et entre conditions de mises en uvre lors des tests.

Le test PBM permet donc de saffranchir au mieux des principaux facteurs dinfluence de la
dgradation anarobie autres que ceux lis aux caractristiques du matriau test. Dautres tests ont
pour objectif lanalyse de la biodgradabilit dans des conditions particulires, de simulation.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 74 -
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IV.4. Tests dits de simulation
Selon les objectifs, ces tests peuvent tre raliss en colonnes, racteurs, casiers ou sur site, dans des
conditions arobies ou anarobies et impliquer le suivi de la qualit et de la quantit des gaz, des
lixiviats et de la MO rsiduelle.
Mais bien souvent, ces tests ne permettent pas didentifier clairement les facteurs prpondrants ayant
influenc les effets observs. Comme le reconnaissent El-Fadel et al. (1996), dans de nombreuses
exprimentations, les effets observs ont t le rsultat de linfluence de plusieurs facteurs simultans
voire interdpendants, ce qui a rendu toutes interprtations dun facteur en particulier trs dlicates.
Aussi, il apparat ncessaire dtudier chaque variable susceptible dinfluencer la ou les rponses de
manire individuelle en contrlant la majorit des autres facteurs potentiels (le contrle du pH dans
ltude de linfluence de certains paramtres tels que la concentration en AGV, de la teneur en eau ou
de certaine pratique telle que la recirculation des lixiviats par exemple). Ainsi, les essais de simulation
visant dmontrer limpact de la recirculation des lixiviats, par exemple, ont des conclusions
diverses : dans certaines expriences, la production de biogaz et la stabilisation du dchet ont t
acclres tandis que dans dautres, les rsultats ont t totalement contradictoires cause
dinhibitions de la mthanogense par acidification. La variabilit des taux de production de mthane
obtenus lors dexprience de simulation denfouissement tmoigne galement de ces phnomnes.
Une revue de nombreux travaux mettant en uvre de tels tests de simulation a t effectue par Gachet
(2004) et met en exergue ces contradictions et les limites dapplication de ces tests.

Lutilisation de ces tests semble tre plus pertinente dans un objectif de validation (de lefficacit de
nouveaux modes de gestion, de la reprsentativit de modles prdictifs). Pour assurer la fiabilit de
cette validation, il est ncessaire au pralable dinvestiguer les phnomnes et leurs mcanismes.

Pour ce faire, des tests de type PBM lgrement modifis peuvent permettre dtudier ces facteurs un
un, pour faciliter et avaliser les interprtations. De nombreuses tudes ont ainsi trait le cas de la taille
des particules, de la temprature, des concentrations initiales en bactries, de lagitation, des
inhibitions et de la teneur en eau (dans certaines conditions)... Les donnes mentionnes III.5.3 font
souvent rfrence des tudes de ce type.

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 75 -
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V. Modlisation de la production de biogaz par
biodgradation anarobie de la matire organique
Les modles de production de biogaz par dcomposition anarobie de matires organiques sont
nombreux. Mata Alvarez (2003) distingue les diffrents types de modles dvelopps dans ce domaine
selon :
La prise en compte de cintiques : les modles dynamiques dcrivent les phnomnes
temporellement tandis que dautres sont indpendants du temps ( steady-state models ).
leur structure, avec :
les modles de type bote noire qui visent tablir des relations empiriques entre
entres et sorties grce des jeux de valeurs vraies , mesures,
les modles mcanistes, bass sur des lois de comportement bio-physico-chimiques,
les modles de type bote grise qui sont un mlange des deux prcdents.
les donnes quils exploitent : les modles stochastiques, o donnes dentre et rsultats sont
sous forme de distributions probabilistes, sopposent aux modles dterministes qui utilisent
des valeurs discrtes.
lexpression mathmatique des quations : les modles qualitatifs, pour lesquels les quations
sont sous forme qualitative (logique floue) se distinguent des modles fonctionnels qui
utilisent des expressions dterministes.

Ce chapitre se restreint la prsentation de modles dterministes exprims par des fonctions
mathmatiques, indpendants du temps ou dynamiques et la plupart du temps de type boite grise .

La premire partie de ce chapitre traite des modles steady-state , indpendants du temps. Ceux-ci
visent estimer de manire thorique la production de biogaz partir de la masse de matire
organique suppose biodgradable et dun potentiel de gnration de biogaz (ou de mthane). Ce
calcul peut tre ralis partir de diffrentes caractrisations matires et selon la prise en compte de
corrections diverses.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 76 -
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V.1. Evaluation du potentiel mthanogne selon les caractristiques
chimiques et biochimiques
V.1.1. Mthode gnrale : approche stoechiomtrique
La quantit de biogaz forme par dgradation anarobie de matire organique peut tre estime de
manire trs simple partir du contenu en carbone organique de cette matire et en supposant une
minralisation totale du carbone (soit 1 mole de gaz forme partir de 1 mole de carbone organique
minralis). Ainsi, chaque gramme de carbone organique minralis doit conduire 22,4 / 12 litres de
biogaz (CH
4
+ CO
2
) exprim dans les CNTP (0C et 1 atm).
Remarque : cette relation est parfois utilise avec le contenu en carbone total (Ehrig, 1991 ; Muntoni et
al., 1995). Cela ne parat pas aberrant au vu du faible contenu dun DMA en carbone inorganique et de
la participation ventuelle de ce carbone au processus biologique et au biogaz form.
Toujours en supposant une minralisation totale de la matire organique, les potentiels en mthane et
dioxyde de carbone peuvent tre dtermins partir du contenu en carbone, hydrogne et oxygne de
la matire grce lquation de Buswell (Shelton & Tiedje, 1984, Wang et al., 1997, Angelidaki,
2002) dores et dj introduite ( III.4.2) :
2 4 2
4 2 2 8 4 2 8 4
n a b
a b n a b n a b
C H O n H O CH CO
| | | | | |
+ + + +
| | |
\ \ \


A laide de cette relation, il est possible dexprimer le potentiel de biogaz, de mthane et de dioxyde
de carbone thorique de la MO, en litre de biogaz (exprim dans les CNTP) par gramme de MO,
selon :
22, 4
12 16
Biogaz
n
P
n a b

=
+ +
;
4
22, 4
2 8 4
12 16
CH
n a b
P
n a b
| |
+
|
\
=
+ +
;
2
22, 4
2 8 4
12 16
CO
n a b
P
n a b
| |
+
|
\
=
+ +
,

Ces expressions permettent ainsi de reprsenter que le rapport quantitatif CH
4
/CO
2
est variable selon
les proportions de C, H et O constituant la matire (plus dhydrogne menant la formation de plus de
mthane (cf. Tableau 10)).
Dautre part, considrant toujours une MO de formule brute C
n
H
a
O
b
, il est possible dexprimer une
DCO thorique, c'est--dire la quantit doxygne ncessaire pour oxyder totalement la MO. Cette
raction doxydation peut tre gnralise selon lquation suivante (Angelidaki & Sanders, 2004) :
2 2 2
4 2 2
n a b
a b a
C H O n O nCO H O
| |
+ + +
|
\

La DCO peut donc scrire :
1
32
4 2
( ). ( )
12 16
a b
n
g DCO g MO
n a b

| |
+
|
\
+ +
.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 77 -
LGCIE, INSA Lyon
Exprime en termes de gDCO, le potentiel en CH
4
de la matire organique est de 350 mL.g(DCO)
-1

quelle que soit la MO considre (cf. Tableau 10). Cela explique lintrt port cette mthode de
quantification de la MO.

Tableau 10 : Potentiels en CH
4
(en mL.gMV
-1
et en mL.gDCO
-1
) de diffrentes molcules organiques selon
lquation de Buswell (Angelidaki & Sanders, 2004)
Substrat Formule brute DCO/MV Pot
CH4
Pot
CH4
CH
4
type gDCO.gMV
-1
mL.gMV
-1
mL.gDCO
-1
%
Cellulose (C
6
H
10
O
5
)
n
1,19 415 350 50
Protine C
5
H
7
NO
2
1,42 496 350 50
Lipide C
57
H
104
O
6
2,90 1014 350 70
Glucose C
6
H
12
O
6
1,07 373 350 50
Propionate C
3
H
6
O
2
1,51 530 350 58
Actate C
2
H
4
O
2
1,07 373 350 50

A laide de ces considrations, il est possible dtablir un potentiel thorique partir de lensemble des
caractristiques chimiques prsentes II.2.
A partir dune caractrisation par catgories de dchets telle que papier, carton, dchets verts etc.,
les donnes de la littrature concernant une composition lmentaire classique peuvent tre utilises.
Les potentiels suivants ont t calculs titre dexemple partir des compositions lmentaires
typiques des principales catgories organiques de dchets mnagers telles que mentionnes par
Tchobanoglous et al. (1993) :

Tableau 11 : Potentiels thoriques de diffrentes fractions de dchets en volume de gaz exprim dans les CNTP
en mL.g
-1
ou L.kg
-1
ou m
3
.t
-1
(calcul partir des donnes de composition lmentaire mentionnes par
Tchobanoglous et al., 1993)
Type de dchet P CH4 P CO2 P biogaz
Graisses 958 414 1372
D. alimentaires 539 435 974
D. de fruits 518 443 961
Aliments
D. de viande 782 405 1187
Carton 437 419 857
Magazines 408 395 803
Journaux 487 446 933
Papiers divers 441 425 866
Papiers
Carton cir 718 403 1121
Tissus 516 433 949
Textiles
Cuir 934 473 1407
D. de jardin 516 438 954
Bois vert 505 442 947
Bois dur 488 448 936
D. verts
Mlange 489 452 941
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 78 -
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A partir dun fractionnement de la matire tel que celui de Van Soest, il est possible de ne pas prendre
en compte les matriaux rfractaires (lignine et plastiques) dans les calculs et donc de dterminer un
potentiel partir du contenu en solubles (assimils du glucose par exemple), hmicelluloses et
celluloses.
Certains travaux ont ainsi tent dtablir des corrlations entre caractrisations biochimiques et
potentiels de mthane sur diffrents substrats sans toutefois y parvenir vraiment (Barlaz et al.,
1997, Gunaseelan, 1997). Ces deux auteurs ont essay diffrents paramtres reconnus comme refltant
la stabilit dun dchet tel que les rapports cellulose/lignine ou (cellulose+hmicellulose)/lignine sans
obtenir de rsultats concluants. Selon Barlaz et al. (1997), la concentration en lignine nexpliquerait
pas les diffrences et ce serait plutt sa structure et sa complexation avec la cellulose qui influerait, ce
dont ne rendent pas compte les mthodes analytiques des diffrents biopolymres. La lignine prsente
dans lherbe, par exemple, semblerait plus apte la dgradation que celles de branches.

V.1.2. Limites de lapproche stoechiomtrique
Selon Angelidaki & Sanders (2004), le potentiel thorique calcul laide de la composition
lmentaire est toujours suprieur au potentiel rel, pour plusieurs raisons :
le CO
2
est trs soluble et une fraction produite reste pige en solution ;
la lignine nest pas dgrade en anarobiose (ou trs partiellement) et peut rendre inaccessible
une part de la MO dgradable ;
une fraction du substrat est utilise par la biomasse pour raliser la synthse bactrienne,
typiquement de 5 10 % pour les substrats solides ;
labsence de certains minraux peut limiter la biodgradation.

Il est donc possible de corriger les potentiels mthanognes thoriques pour traduire linfluence de ces
limitations (tout du moins les trois premires).

a. Solubilit du dioxyde de carbone
Pour prendre en compte la solubilit du CO
2
, Angelidaki & Sanders (2004) prconisent lutilisation de
donnes exprimentales de la littrature pour une meilleure estimation du potentiel de biogaz rel.
Shelton (1984) propose de corriger les volumes de CH
4
et de CO
2
obtenus avec lquation de Buswell
afin de tenir compte de la solubilit des deux gaz selon :
4 4
0, 95
CH corrig CH thorique
V V = et
2 2
0, 35
CO corrig CO thorique
V V =
Ces facteurs ont t dtermins de manire empirique 35C lors de tests PBM et doivent donc tre
employs avec prcaution, pour des conditions similaires notamment.

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 79 -
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On a donc selon Shelton & Tiedje (1984) :
4 2
22, 4
0, 95 0, 35
12 16 2 8 4 2 8 4
Biogaz CH CO
n a b n a b
P P P
n a b
| | | | | |
= + = + + +
| | |
+ +
\ \ \
L.g (MO)
-1

Cependant, le CO
2
participe aux quilibres acido-basiques et sa teneur dans le biogaz est galement
fonction du pH (cf. III.5.3.b).

b. Teneur en lignine
Le contenu en lignine dun dchet peut tre utilis afin destimer sa biodgradabilit (ou sa Fraction
Biodgradable, FB) selon la relation suivante (Chandler et al., 1980 in Tchobanoglous et al., 1993) :
0.83 0.028 FB L = o L = contenu en lignine en % de la matire volatile et FB exprime en %
MV galement.
Tchobanoglous et al., 1993 proposent ainsi les valeurs suivantes pour la biodgradabilit de matires
organiques composant les DM :

Tableau 12 : Fraction biodgradable (FB) de la matire volatile dun matriau
en fonction de son contenu en lignine (L) (Tchobanoglous et al., 1993)
Matriau
MV
(% MS)
L
(% MV)
FB
(%MV)
Dchets alimentaires 71 0.4 0.82
journaux 94 21.9 0.22
de bureau 96 0.4 0.82 Papier
carton 94 12.9 0.47
Dchets verts 50-90 4.1 0.72

On remarque ainsi par exemple que, malgr un % MV quasi-identique, les diffrents types de papiers
peuvent prsenter un contenu en matire biodgradable variant de 20 plus de 80 % de leur masse.
Toutefois, cette relation linaire simple semble fournir des rsultats raisonnables pour des matriaux
avec un contenu relativement faible en lignine uniquement. En prsence de matriau trs ligneux, Van
Soest (1996) in (Richard, 1996) a propos, partir de donnes concernant la digestibilit de matriaux
ligno-cellulosiques dans le rumen, la relation suivante afin de calculer la fraction digrable des
Neutral Detergent Fiber (NDF) correspondant la somme des celluloses, hmicelluloses et lignine
(Richard, 1996) :
0.76
% %
100 5.41 ( )
NDF NDF
FB L = o L
%NDF
= contenu en lignine en % massique des NDF et FB
%NDF

= Fraction Biodgradable exprime en % NDF galement.
Richard (1996) propose partir de cette formule de calculer le contenu total en carbone biodgradable
selon la relation :
% % %
deg
1
100 100 100
MS NDF MS
bio radable total total
NDF FB NDF
C C C
| | | |
= +
| |
\ \

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 80 -
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Le premier terme correspondant la fraction biodgradable des NDF exprime par rapport la MS
totale et le second, au complmentaire des NDF par rapport la MS (i.e. la fraction soluble).
Autrement dit, appliqu la MS, on obtient :
%
deg % %
% 100
100
MS
bio radable NDF MS
NDF
MS FB NDF = +


Si on applique ces deux relations aux catgories de DMA pour lesquelles un fractionnement
biochimique est disponible (cf. II.2.3), on obtient (cf. Tableau 13) :

Tableau 13 : Fraction biodgradable de la matire sche dun matriau en fonction de son contenu en cellulose,
hmicellulose et lignine (donnes exprimes en % des MS)
Matriau MV CELL HEM LIGN Rfrence FB 1
*
FB 2
*
Herbe 85 26,5 10,2 28,4 -9 38
Feuilles 90 15,3 10,5 43,8 -48 12
Branches 97 35,4 18,4 32,6 -11 26
D. alimentaire 92 50,8 6,7 9,9 49 72
Papier bureau 99 87,4 8,4 2,3 76 90
Papier cir 74 42,3 9,4 15 19 62
Journaux 98 48,5 9 23,9 14 43
Carton 92 57,3 9,9 20,8
Barlaz, 1996
18 47
Journaux 98 48,3 18,1 22,1 19 45
Papier de
bureau
88 64,7 13 0,93
Wu et al.,
2001
70 95
Dchets verts 80 27,7 16 26 -6 41
Herbe 82 39,7 16,9 17,6 19 55
Feuilles 63 9,5 3,2 33,9 -43 34
Branches 82 14,7 12,9 42,9 -52 13
Papier bureau 87 68,1 6,7 6,5
Komilis &
Ham, 2003
54 79
Dchets 94 55,4 7,2 11,4 46 68
alimentaires 89 40,9 6,1 7,4 53 79
87 32,2 11 15 30 63
60 25,6 6,6 7,2 30 81
79 51,2 11,9 15,2 23 60
75 28,8 9 23,1 -2 48
71 48,2 10,6 14,5 18 62
DMA
86 54,3 10,8 12,1
Barlaz, 2006
38 66
FB : Fraction Biodgradable
FB 1 : selon Chandler et al., 1980 in Tchobanoglous et al., 1993
FB 2 : selon Van Soest (1996) in (Richard, 1996)

La fraction biodgradable dtermine laide de la relation de Chandler est effectivement surestime
par rapport celle obtenue avec la relation propose par Richard, au point que certains matriaux
prsentent une fraction biodgradable ngative (les matriaux forte teneur en lignine). Il est toutefois
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 81 -
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galement possible dobtenir de tels rsultats avec la relation propose par Richard. Ces relations
possdent donc un domaine de validit restreint.

c. Synthse bactrienne
Enfin, une part de la matire est utilise des fins de synthse bactrienne. A leur mort, les micro-
organismes constituent cependant leur tour un substrat et prs de 80 % de leur masse est
biodgradable selon Aguilar (2000). Les limitations ne sont donc a priori pas importantes et dailleurs
le potentiel thorique de la cellulose est atteint exprimentalement lors de certains travaux
(Gunaseelan, 2003). Ces rsultats sont toutefois obtenus pour des dgradations en conditions
optimales. Selon Angelidaki & Sanders (2004), une fraction de 5 10 % du substrat est in fine utilise
par la biomasse pour synthse bactrienne. Les cellules mortes sont en effet en partie converties en
humine microbienne qui contribue la formation de lhumus et qui nest donc pas facilement
minralise. Dans des conditions moins favorables ou de croissance importante, limpact peut tre
important. Ainsi, titre dexemple, Michaud et al. (2005) ont dmontr que le taux dutilisation du
substrat des bactries mthanognes pouvait ne pas tre constant. Lors de la phase de dmarrage dun
racteur biofilm mthanogne, la matire est dgrade mais trs peu de mthane est produit car une
part importante de celle-ci est alloue la synthse du biofilm. Une fois la phase de dveloppement
acheve, les rendements en mthane augmentent pour prendre une valeur proche de la valeur
thorique. Ainsi, il apparat dlicat de corriger les potentiels thoriques en vue dintgrer cet aspect.

Afin de dcrire lvolution temporelle de la dgradation, de nombreux modles dynamiques ont t
proposs. La plupart de ceux dcrits dans la littrature sont de type bote noire ou bote grise, et
utilisent la plupart du temps des valeurs discrtes ainsi que des expressions dterministes (un modle
stochastique appliqu la dcharge est propos par Zacharof & Butler, 1999, 2003). Ces modles
diffrent selon les objectifs, le systme auquel ils sappliquent et, par l mme, suivant les paramtres
et phnomnes pris en compte et/ou ngligs. Les plus simples peuvent tre dsigns de type chimique
car sont bass sur les principes de la cintique chimique et notamment une loi de premier ordre.

V.2. Modles cintiques du premier ordre
V.2.1. Aspects fondamentaux de la cintique chimique
La loi de vitesse dune raction vise dcrire la variation de concentration (dans un milieu homogne
volume constant) dun ou plusieurs ractifs (ou produits) au cours du temps. Dans certains cas, elle
peut se mettre sous une forme simple du type : ) (

= =
i
n
i
i
C k
dt
dC
v
avec : - v, la vitesse de la raction [M] [L]
-3
[T]
-1
,
- C
i
, la concentration du ractif i [M] [L]
-3
,
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 82 -
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- k, la constante de vitesse de la raction (dont lunit dpend de lordre de la raction),
- n
i
, lordre partiel de la raction par rapport i (sans dimension). La somme des ni constitue lordre
global de la raction.

Concernant notre problmatique, la cintique dordre 1 est de manire gnrale la loi la plus utilise et
la loi de vitesse, avec un seul ractif limitant, est de la forme :
kC
dt
dC
v = = soit
kt
e C t C

=
0
) ( avec k en [T]
-1

Remarque :
1/ 2
ln 2
t
k
= avec t
1/2
, le temps de demi-raction tel que
0
1/ 2
( )
2
C
C t = . La constante de
vitesse de la raction rend donc indirectement compte du temps au bout duquel la moiti des ractifs
auront t consomms. Avec un ordre 1, on simule une dcroissance exponentielle de la concentration.

V.2.2. Modlisation partir des concepts de cintique chimique
Appliqu notre problmatique, ce type de relation permet donc de dcrire globalement la quantit (la
concentration, volume constant) de matire organique (de ractif) transforme au cours du temps. En
considrant que celle-ci est proportionnelle la quantit de mthane (ou de biogaz) produit selon la
raction gnrale : (matires organiques) (mthane) ou (biogaz), le volume de biogaz gnr peut
tre dcrit par la relation de proportionnalit suivante :
4
CH
dV dM
P
dt dt
=
avec - V, le volume de mthane gnr (ou de biogaz si le potentiel est exprim en terme de
production de biogaz),
- M, la masse de matire linstant t,
- P
CH4
, le potentiel mthanogne (ou P
biogaz
potentiel de biogaz), [L]
3
[M]
-1
considr constant pour la
matire en cours de dgradation.

En considrant que la masse (M) se dgrade selon une loi cintique de premier ordre de constante k,
par intgration de la relation de proportionnalit prcdente entre t(0) = 0 et t, avec V(0) = 0 et en
supposant un volume constant, on obtient :
4
0
kt
CH
dV
P M k e
dt

=
o V(t) est le volume cumul de mthane (resp. de biogaz) produit linstant t, et M
0
la masse initiale
de matire organique dont le potentiel mthanogne (resp. potentiel biogaz) est P
CH4
(resp. P biogaz).
Cette relation dcrit une production de biogaz de type exponentielle ayant pour limite le volume de
biogaz V() gnr par la dgradation totale dune masse M
0
de matire organique, soit V() = P
CH4

M
0
. Elle est applique pour analyser des productions de biogaz exponentielles observes la fois en
sites denfouissement (cf. paragraphe suivant) et lors de test type PBM (cf. tableau avec k dores et
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 83 -
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dj prsent). Par ailleurs, elle permet de rsumer de manire simple les productions de biogaz en
terme cintique et stoechiomtrique.

V.2.3. Exemples dapplication aux centres denfouissement
L Environmental Protection Agency (US-EPA) utilise la relation :
4
1
2
i
n
kt
CH i
i
i
dV
kP M e
dt

=
=


avec i reprsentant lanne considre (remarque V reprsente ici le volume de biogaz do
lutilisation dun facteur 2 avec le P
CH4
). Plusieurs valeurs ont t suggres : k = 0.04 - 0.05 an
-1
; P
CH4

= 100 - 170 m
3
.t
-1
pour les centres denfouissement conventionnels et k = 0.02 an
-1
et mme potentiel
pour les sites en zone aride (Faour et al., 2007). Faour et al. (2007) ont appliqu ce modle aux
productions de biogaz mesures sur sites grs en bioracteurs ( wet landfills ) et proposent de
nouvelles valeurs applicables de tels sites : k = 0.3 an
-1
; P
CH4
= 100 m
3
.t
-1
.
Une phase de latence, observe entre la mise en place des dchets et le dbut de la production
(Augenstein & Pacey, 1991 ; Faour et al., 2007), peut tre ajoute selon :
( )
4
( )
0
k t
CH
dV
M P k e
dt

= et V(t) = 0 pour t <
Afin daffiner la formulation du modle et de dcrire plus fidlement la production de biogaz, (n)
fractions (i) de matire organique avec des constantes de vitesse, des potentiels mthanognes et des
quantits initiales propres peuvent tre considres. Ces approches sont parfois nommes multi
phases (Augenstein & Pacey, 1991 ; Lifshits & Galueva, 1997) :
4, 0,
( e )
i
k t
CH i i i
i
dV
P M k
dt



Lifshits & Galueva (1997) ont ainsi dtermin les constantes de vitesse sur douze sites
denfouissement diffrents (6 en Russie et 6 en Italie) en considrant le dchet compos de deux
fractions, une rapidement biodgradable et lautre lentement. Aprs calibration, ils ont obtenus k
1

(facilement dgradable) compris entre 0,25 et 0,35 an
-1
et k
2
= 0,069 an
-1
. Selon eux, ces valeurs tant
trs proches quels que soient les sites considrs, elles devraient pouvoir tre utilises de manire
gnrale. Le potentiel en mthane est calcul selon P
CH4
= 1.867 C
org
0.5 o 1,867 est le potentiel
en biogaz en considrant une minralisation totale du carbone organique (C
org
).

De nombreuses classifications visant diffrencier des fractions ayant une bonne, moyenne ou
faible biodgradabilit (ou, plus prcisment, rapide, moyenne ou lente) ont t proposes dans la
littrature partir de mesures de productions de biogaz en condition denfouissement. Les dchets
alimentaires et le bois (la biomasse ligno-cellulosique plus gnralement) sont alors la plupart du
temps associs une biodgradabilit rapide et lente respectivement tandis que les papiers, par
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 84 -
LGCIE, INSA Lyon
exemple, sont assigns lune des trois classes selon les auteurs (Ehrig, 1991). Le tableau 11 rapporte
les valeurs de k de la littrature selon trois sources (en y associant le temps de demi vie) et
souligne la variabilit des donnes de la littrature :

Tableau 14 : Domaines de valeurs de constantes cintiques de dgradation des DMA en conditions
denfouissement cites dans la littrature
Dchets biodgradables k (an
-1
) T
1/2
(an) Rfrences
Rapidement 0,14 - 1,39 5 0,5
Moyennement 0,02 0,2 35 3,5
Lentement 0,02 0,05 35 - 14
Aguilar-Juarez, 2000
Rapidement 0,231 - 0,347 3 2
Moyennement 0,069 - 0,099 10 7
Lentement 0,023 - 0,046 30 15
Delineau & Budka, 2000
Rapidement 0,139 0,693 5 1
Moyennement 0,028 0,139 25 5
Lentement 0,007 0,035 99 - 20
Ehrig, 1991

Enfin, la Solid Waste Association of North America (SWANA) a propos une forme proche des
modles dordre 1 ci-dessus en intgrant une phase de latence, puis une croissance exponentielle de la
production suivie dune dcroissance exponentielle plus lente selon :
4
( ) ( )
0
( ) (1 )( )
c i d i
k t t k t t
CH d c c d
dV
P M k k k e k e
dt

= +
avec : t
i
: temps de latence ; k
d
: constante de dcroissance ; k
c
: constante de croissance

A partir de donnes releves sur des sites denfouissement aux Etats-Unis, les paramtres suivants ont
t dtermins : = 161 m
3
.t
-1
; t
i
= 1,5 an ; k
d
= 0,03 an
-1
; k
c
= 1 an
-1
. (Swana, 1996 in Delineau &
Budka, 2000).

V.2.4. Bilan
Malgr leurs diffrentes formulations et leurs particularits, tous les modles de premier ordre
considrent que le volume de biogaz produit au total sera P
CH4
M
0
au bout dun temps t
x
fonction des
valeurs des constantes cintiques utilises. Paramtrs sur des donnes observes sur site, ils
permettent de raliser des estimations utiles soit en terme de gestion tel que le dimensionnement des
systmes de rcupration du biogaz soit pour raliser des inventaires dmissions de gaz effet de
serre grande chelle par exemple (Faour et al., 2007). Cependant, la variabilit des constantes
cintiques souligne la difficult de transposer les valeurs dun site un autre.

En parallle, dautres types de modles se dveloppent, bass sur une approche mcaniste ou du moins
base physique , dans le sens o ils tentent de dcrire certains des principaux phnomnes affectant
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 85 -
LGCIE, INSA Lyon
les proprits du milieu. Afin de prendre en compte un paramtre primordial, les bactries, dont
lactivit est lorigine de la production de gaz, et dintgrer certains facteurs dinfluence de la
mthanogense, certains aspects fondamentaux de la cintique bactrienne ont t intgrs aux
modles. Ces outils ont t dvelopps dans un premier temps pour modliser le comportement de
digesteurs anarobies et sont maintenant tudis pour des applications aux centres denfouissement.
Les aspects fondamentaux de la cintique bactrienne sont prsents dans les paragraphes suivants afin
de bien dfinir les diffrents termes utiliss par la suite et notamment les dimensions des paramtres et
variables. Puis des exemples de modles de ce type seront prsents.

V.3. Modles biologiques
V.3.1. Aspects fondamentaux de la cintique bactrienne
Les cintiques microbiologiques sont bases sur deux relations fondamentales : le taux de croissance
bactrienne et le taux dutilisation du substrat (des conditions homognes de culture sont supposs
dans le raisonnement qui suit) (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ; Garcia-Heras, 2003) :
a. Taux de croissance
Le taux de croissance microbien est dfinit selon :
dB
B
dt
=
avec - B = concentration en micro-organismes linstant t [M] [L]
-3
,
- = taux de croissance spcifique [T]
-1
.

Afin de prendre en compte la mort des micro-organismes sur ce taux net de croissance, un taux de
dcroissance (de mortalit) est utilis, soit : ( )
d
dB
k B
dt
=
Avec :: k
d
= taux de dcroissance spcifique [T]
-1
.
b. Taux de croissance et taux dutilisation du substrat
Ces deux taux sont relis la consommation du (des) substrat(s) S par la relation de proportionnalit
suivante :
/ dS dB dt
dt Y
=
avec : - Y = taux dutilisation du substrat [M][M]
-1
(M
biomasse
.M
substrat
-1
),
- S = concentration en substrat [M][L]
-3
.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 86 -
LGCIE, INSA Lyon
c. Effet de la concentration du substrat sur la croissance bactrienne
Leffet de la concentration en substrat a t dcrit par de nombreux modles mathmatiques, le plus
rpandu tant celui de Monod (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991) :

S
S
K S

=
+

avec : - K
s
est la constante de demi-saturation [M][L]
-3
(i.e., la concentration du substrat quand
vaut la moiti de ).
- = taux maximum de croissance spcifique [T]
-1
Au del dune certaine concentration en substrat, est donc maximal et constant ( lim
S

= ).
V.3.2. Modlisation des tapes biologiques
Ces diffrentes expressions combines permettent de dcrire les variations de concentration
bactrienne selon :

d
S
dB S
k B
dt K S
| |
=
|
+
\

et de concentration en substrat selon :
1
d
S
dS S
k B
dt Y K S
| |
=
|
+
\

A laide de quatre paramtres ( , K
S
, k
d
et Y), il est donc possible de dcrire une transformation
biologique simple du type :

(dS/dt) et (dB/dt) sont dcrits selon les quations ci dessus. (dP/dt) est dtermin partir du principe
de conservation de la masse, en considrant un systme ferm (la quantit de substrat dgrad
correspond la quantit de bactries cres plus celle de produits forms) soit :
dS dB dP dP dB dS
dt dt dt dt dt dt
= + = soit
1
d
S
dP Y S
k B
dt Y K S
| |
=
|
+
\


On obtient donc un systme de trois quations diffrentielles qui dcrivent chacune les variations de
concentration des trois ples matires organiques que sont le substrat, les micro-organismes et le
produit. Afin dlargir le champ des possibilits, il est possible de considrer que la raction donne
lieu la formation de i produits en ajoutant i autres paramtres, des coefficients de partage
stchiomtriques (f
i
). On a alors, titre dexemple, avec deux produits :
Substrat S Produit P
Micro-
orga B
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 87 -
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Les expressions de (dS/dt) et (dB/dt) restent inchangs et
1
i
i d
S
dP Y S
f k B
dt Y K S
| |
=
|
+
\

Il est donc possible de reprsenter plusieurs tapes de la biodgradation anarobie en incluant
diffrents groupes de micro-organismes se nourrissant de diffrents substrats, les produits des
premires bactries tant les substrats des autres. La totalit des modles incluant une partie biologique
sont construits de la sorte. Les formulations prsentes ci-dessus sont parfois employes telles quelles
pour reprsenter notamment les tapes dacidogense et de mthanogense de dgradation de dchets
organiques en conditions denfouissement (El Fadel et al., 1996 ; Pareek et al., 1999).

Sur dchet solide, une tape dhydrolyse (cf. partie suivante) est bien souvent ajoute. Certains auteurs
considrent alors que les bactries mortes constituent un nouveau substrat solide et sont recycles en
tant que matire hydrolyser (Haarstrick et al., 2001 ; Batstone et al., 2002). Selon cette approche, on
a :

Lexpression de dX/dt est inchange et :
1
S
dS S
X
dt Y K S
| |
=
|
+
\
et
1
S
dP Y S
X
dt Y K S
| |
=
|
+
\

Un coefficient stoechiomtrique peut tre ajout afin de considrer quune fraction seulement de la
biomasse inactive est dgradable. Le terme k
d
B est ajout la nouvelle variable (dX/dt) reprsentant
ltape dhydrolyse, dont la description est faite dans la partie suivante.
LAnnexe 3 prsente la structure de diffrents modles de la littrature principalement appliqus
lenfouissement de dchets ou dvelopps en vue dune application un tel environnement. La
simplicit de certains modles vis--vis dautres soulignent que bien souvent la complexit ne rside
pas dans la structure simple du modle (dans le schma ractionnel biologique) mais dans la prise en
compte dun certains nombre de facteurs dinfluence.

Substrat S
P
1
Micro-
orga B
P
2
f
1
f
2
Substrat S Produit P
k
d
B
X=MO complexe
Micro-
orga X
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 88 -
LGCIE, INSA Lyon
V.3.3. Modlisation de la phase dhydrolyse
Cette phase, considre comme ltape cintiquement limitante de la dgradation anarobie de MO
solide, particulaire, nest pas une tape biologique proprement parler (pas de mtabolisation), mais
une raction tape de prparation du substrat. Par voie de consquence, quand cette tape est
introduite, la principale relation utilise pour la modliser est une quation de premier ordre de type
chimique (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ; El-Fadel et al., 1996 ; Mata-Alvarez et al., 2000 ;
Haarstrick et al., 2001 ; Batstone et al. 2002 ; Vavilin et al., 2002, 2003 ; Mora-Naranjo et al., 2004),
soit :
h
dX
k X
dt
= avec - X, la concentration en matire hydrolysable,
- k
h
, la constante cintique dhydrolyse en T
-1

Cest une quation gnrale empirique qui reflte en ralit les effets cumuls dun ensemble de
processus (Vavilin et al., 1996 ; Veeken et al., 2000 ; Batstone et al., 2002). La vitesse dhydrolyse
dans les meilleures conditions dpend principalement de la quantit de matire qui reste hydrolyser
car les enzymes sont en excs par rapport au substrat. Dans ces conditions, sa cintique est assimilable
celle dune raction de type chimique (dautres approches sont galement utilises pour affiner la
reprsentation de la phase dhydrolyse, cf. V.4.2).

De nombreux auteurs rapportent de la littrature des valeurs de constantes dhydrolyse dtermines
exprimentalement pour diffrents types de MO solides (cf. Tableau 15). Ces constantes rsultent
danalyses de la consommation en substrat ou de la production dAGV ou encore, de biogaz, dans des
conditions permettant une dtermination de la cintique de lhydrolyse. Cest le cas, par exemple, des
mesures de production de mthane ralises lors de tests en conditions contrles (type PBM) o
lensemble des facteurs limitants prsents auparavant ont t matriss et o lhydrolyse savre tre
effectivement ltape cintiquement limitante, c'est--dire notamment o acidogense et/ou
mthanogense ne le sont pas (Sanders et al., 2003). Des cintiques dtermines de cette manire ont
dores et dj t prsentes IV.3.2.b (Tableau 9) concernant les productions de mthane obtenues
sur diffrentes fractions de DMA lors de tests PBM.

Les constantes donnes dans ces deux tableaux (Tableau 9 et Tableau 15) prsentent une certaine
variabilit pour des types de MO similaires qui tmoigne en partie de la sensibilit de lhydrolyse vis
vis de nombreux facteurs qui ne peuvent tre toujours contrls.
Par ailleurs, il est intressant de comparer toutes ces valeurs celles du Tableau 14. Les constantes de
premier ordre mentionnes dans ce dernier ont t dtermines partir de productions de biogaz
observes en site denfouissement. Ces vitesses sont souvent assimiles celle de lhydrolyse en
conditions denfouissement en considrant galement cette tape comme celle cintiquement limitante
dans ces conditions. Cependant, loccurrence en dcharge dune phase acide qui peut durer plusieurs
annes dmontre que lhydrolyse nest pas le seul facteur limitant et que la mthanogense lest
galement, et davantage certaines priodes. Ces comparaisons sont trs instructives car elles
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 89 -
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illustrent les variations cintiques dont la modlisation doit permettre de rendre compte de manire
moins empirique en intgrant des facteurs mcanistes : quels processus limitant faire intervenir pour
passer de temps de demi vie de la MO de quelques jours dans des conditions optimales plusieurs
annes en conditions denfouissement ? Quelques uns de ces facteurs et les mthodes dintgration aux
modles sont prsents dans la partie suivante.

Tableau 15 : Constantes cintiques dhydrolyse de MO particulaire cits dans la littrature
Dchets
Constantes
dhydrolyse (j
-1
)
Temprature
(C)
Rfrences
Hydrates de carbone 0,041 0,13

Lipides 0,04 0,08
Protines 0,02 0,03
34 - 40
Gujer & Zehnder, 1983 In
(Batstone et al. 2002)
Cellulose 0,02 -2,88
Lipides 0,3 0,7
Protines 0,04 1,12
35 - 37
Pavlostathis & Giraldo-
Gomez, 1991
Fractions organiques des dchets 0,08 0,27 30 Veeken & Hamelers, 2000
Hydrates de carbone 0,5 2

Lipides 0,1 0,7
Protines 0,25 0,8
NR Garcia-Heras, 2003
Facilement biodgradable 0,2 0,7
Difficilement biodgradable 0,00002 0,7
Protines 0,005 0,01
NR Mora-Noranjo et al., 2004

V.4. Prise en compte de processus limitants et de facteurs dinfluence
dans les modles
V.4.1. Phnomnes dinhibition
Selon Pavlostathis & Giraldo-Gomez (1991), les relations utilises pour modliser les phnomnes
dinhibition et/ou de toxicit sont de trois types : les lois empiriques, celles de type Monod avec
ajustement des constantes biocintiques et les coefficients dinhibition.

Les coefficients dinhibition sont les plus utiliss concernant notre thmatique. Ils modifient la loi de
Monod par introduction dun facteur de correction. Dans le cas dinhibitions rversibles, trois types de
modles ont t proposs (Pavlostathis & Giraldo-Gomez, 1991 ; Batstone et al. 2002) :

avec - K
I
coefficient dinhibition, homogne une concentration,
- I, la concentration en inhibiteur :
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 90 -
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linhibition comptitive :
1
S
I
S
I
K S
K
=
| |
+ +
|
\
dans laquelle la valeur de K
S
est affecte
(lorsque
I
I K ) mais pas celle du taux maximum de croissance. Cette forme est utilise
lorsque linhibiteur a une structure chimique similaire au substrat et/ou intervient au mme
niveau de mtabolisme.
linhibition non comptitive :
( ) 1
S
I
S
I
K S
K
=
| |
+ +
|
\
dans laquelle le taux de
croissance maximal est diminu mais pas Ks. Elle permet de modliser une baisse dactivit
bactrienne indpendamment de la concentration en substrat. Elle est utilise frquemment
pour laccumulation dH
2
, la toxicit de NH
3

linhibition a-comptitive :
1
S
I
S
I
K S
K
=
| |
+ +
|
\
dans laquelle la fois la valeur du
taux de croissance maximal et celle de la constante de demi saturation Ks sont diminues.
Lorsque linhibiteur est le substrat lui-mme forte concentration, on obtient lquation de
Haldane :
2

1
S
i
S
K S
S K
=
+ +


Remarques :
- Pour tous ces types dinhibitions, lorsque
i i
S K << , on retrouve la loi de Monod sinon, le taux de
croissance est affect.
- Dune manire similaire, il est aussi possible dintgrer le fait que labsence dune substance
particulire rduise le taux de croissance (par rapport certains minraux essentiels par exemple) en
inversant I et K
I
dans cette relation. Le modle ADM1 (voir Annexe 3) prend ainsi en compte les
carences en azote.
- Linhibition non comptitive est la principale forme utilise. Elle permet en effet une intgration
simple au modle de plusieurs inhibiteurs simultanment puisque peut tre mise sous la forme
suivante :
1 2
...
( )
n
S
S
U In In In k
K S
=
+

avec
( )
1/ 1 /
j
j j I
In I K = + , le coefficient dinhibition du compos j.
- Dautres phnomnes, tels que linhibition au pH par exemple, sont modliss en utilisant cette
approche de manire empirique (cf. V.4.4.a(ii)).

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 91 -
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V.4.2. Modlisations affines de lhydrolyse
De nombreux autres modles que de simples cintiques de premier ordre ont t dvelopps afin
daffiner la reprsentation de ltape dhydrolyse de MO particulaire.
Cette tape tant ralise par lintermdiaire denzymes scrtes par des bactries hydrolytiques, la
concentration de ces dernires peut tre prise en compte. Cette approche est envisage laide de
diffrentes lois. Ainsi, la loi de Monod (ou de Contois) peuvent tre utilises (Valentini et al., 1997 ;
Haarstrick et al., 2001 ; Vavilin et al., 2003) et permettent dintgrer un plafonnement de la vitesse
dhydrolyse (du taux de croissance des bactries hydrolytiques) grce des coefficients de saturation.
Valentini et al. (1997) proposent ainsi une description de lhydrolyse, laide dune quation de
premier ordre galement, mais au regard la fois de la concentration en substrat S et en micro-
organismes B selon :
h
dS
k S B
dt
=

Dautres approches o la vitesse de lhydrolyse est fonction de la taille des particules dgrades ont
t considres par plusieurs auteurs. Valentini et al. (1997) dcrivent une gnralisation du modle
prsent ci-dessus permettant une intgration de leffet de la taille des particules (ou plus prcisment
refltant la disponibilit du substrat). Negri et al. (1993) In (Chynoweth & Pullammannappallil, 1996)
ont propos le modle du noyau rtrcissant ( Shrinking Core ).

Le modle SBK Surface Based Kinetics (Vavilin, 1996 ; Sanders et al., 2000 ; Palmowski &
Muller, 2003 ) est du mme type que le modle du noyau rtrcissant mais nintgre pas de
dpendance avec une concentration bactrienne. En supposant que la totalit du matriau dgrad est
couverte denzymes hydrolytiques, la quantit de substrat hydrolyse peut tre alors considre
proportionnelle la surface disponible de ce dernier selon :
( )
( )
SBK
dM t
k A t
dt
=
Avec : - M(t), la masse de substrat au temps t, [M],
- A(t), la surface disponible au temps t, [L]
2
,
- k
SBK
, la constante dhydrolyse relative la surface [M].[L]
-2
.[T]
-1
, note SBK ( Surface
Based Kinetic )

Cette constante dhydrolyse est donc invariable pour un substrat donn, et ce, quelle que soit la taille
des particules de ce dernier. Le taux dhydrolyse, par contre, va tre fonction de la taille des particules
et plus prcisment de la surface disponible pour les bactries et leurs enzymes. Dans la plupart des
cas, une forme sphrique des particules est considre et permet de formaliser mathmatiquement la
diminution de surface disponible (Sanders et al., 2003). Il est gnralement considr que cette
dernire diminue au cours de la dgradation mais que le nombre de particules reste constant. Ce type
de conceptualisation a t valid exprimentalement par Sanders et al. (2003) et Palmowski & Muller
(2003) laide dincubations anarobies contrles sur des MO particulaires de diffrentes tailles.
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 92 -
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Diffrentes mthodes selon les auteurs ont t mises en uvre (en parallle aux incubations) afin de
dterminer exprimentalement la surface spcifique du matriau effectivement disponible pour les
bactries : analyse de la taille des particules, adsorption denzymes puis mesure de la quantit
adsorbe, photographie microscopique (Palmowski & Muller, 2003 ; Sanders et al., 2003).

Pour conclure, Vavilin (1996) a compar les quatre types de lois les plus employes (Monod, Contois,
SBK et premier ordre de type chimique) pour reprsenter lhydrolyse de MO particulaire en racteur
anarobie et conclu que toutes paraissent valables de manire adquate...

V.4.3. Teneur en eau et prise en compte de lhydrodynamique
Comme prsent au III.5.3.a, deux niveaux dinfluence peuvent tre distingus concernant
limpact de lhumidit : la teneur en eau au sein dun volume lmentaire et les dplacements de leau
entre volumes lmentaires.
a. Teneur en eau
Au niveau dun volume lmentaire, la teneur en eau globale dun chantillon peut tre corrle sa
vitesse de dgradation. Haarstrick et al. (Mora Naranjo et al., 2004 ; Reichel et al., 2007) et Pommier
et al. (2007) ont tudi et formalis limpact de la teneur en eau sur la production de mthane laide
dexpriences de type PBM ralises diffrents taux dhumidit (M
H2O
/MS
initiale
100) sur dchets
mnagers ou fractions de DMA. Leurs conclusions concordent sur le fait quen de dune teneur
minimale en eau (w
min
), lactivit biologique est quasi nulle (valeur estime 20 % selon Mora
Naranjo et al. (2004) et valeur exprimentale de 47 % selon Pommier et al. (2007)). Au-del de cette
valeur minimale, le taux spcifique de production de mthane (volume CH
4
/masse dchet/unit de
temps) augmente linairement jusqu ce que soit atteinte une teneur de 100 % selon Mora Naranjo et
al. (2004) et de 147 % selon Pommier et al. (2007), cette dernire valeur correspondant la capacit
de rtention en eau (w
R
) du dchet incub. Ces auteurs proposent donc de pondrer les cintiques
biologiques de manire linaire laide dun facteur empirique compris entre 0 et 1 fonction de la
teneur en eau, tout comme pour les inhibitions rversibles.

Selon Pommier et al. (2007), , le facteur dimpact adimensionnel, prend les valeurs suivantes en
fonction de la teneur en eau (w) :
min
min
0
1
R
w w
w w

si
min
min R
R
w w
w w w
w w
<

< <

>

soit :
Avec - w
min
, la teneur en eau minimale
- w
R
, la capacit de rtention en eau

0
0,5
1
0 50 100 150 200
% H2O (m/m)
F
a
c
t
e
u
r

d
'
i
m
p
a
c
t
w
min
w
R
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 93 -
LGCIE, INSA Lyon
Dans les travaux de Mora Naranjo et al. (2004), le facteur est dfini selon :

0
0.012 0.18 w

si
20%
0 100%
w
w
<

< <



Lors de leurs exprimentations, la teneur en eau, en plus dun impact cintique, sest avre influencer
galement la stoechiomtrie. Selon Pommier et al. (2007), en de de la capacit de rtention en eau
du dchet, la teneur en eau limite laccs la matire dgradable, toute la matire nest pas disponible,
leau tant le milieu de vie des microorganismes. Ainsi, le facteur dinfluence est utilis galement
dans le modle propos afin de pondrer la quantit maximale de matire biodgradable disponible.
Selon Mora Naranjo et al. (2004), cet impact stoechiomtrique provient dune influence accrue de
leau sur les bactries hydrognophiles et limpact est valid dans leur modle en supprimant la
croissance de ces dernires. Reichel et al. (2007) proposent une fonction arctan pour dcrire le
facteur dimpact. Celle-ci nest pas valide dans leurs travaux mais juste prsente. Limpact nest
port que sur la cintique galement et de manire similaire la loi prsente graphiquement ci-
dessus. La formulation laide de cette fonction spcifique permet juste une reprsentation plus
fluide .

b. Dplacements de leau
Au niveau dun massif de dchet, lhumidit globale nest plus mme de reprsenter convenablement
les impacts lis lhumidit des dchets car ce sont les transferts de matire (eau, substrats et
bactries) entre volumes lmentaires qui conditionnent la production de biogaz observe
globalement. Concernant ces aspects, de nombreux travaux ont dores et dj t mens afin
dintgrer, la modlisation biologique de la dgradation, ces transferts de matire. Cest par ailleurs
le but avou des modles dcrits ci-dessus (impact de la teneur en eau) que dtre lavenir intgrs
des modles plus complexes prenant en compte lhydrodynamique.
Ainsi, titre dexemples, Mc Dougall & Pyrah (1999), Veeken & Hamelers (2000) ou encore Vavilin
et al. (2002, 2004) ont dvelopp des modles dcrivant la dgradation laide dune dimension
spatiale o des termes de diffusion / dispersion des bactries et de substrats solubles (principalement
AGV) sont intgrs des modles biologiques. Ceux-ci comprennent principalement deux tapes
(hydrolyse et mthanogense) ainsi que des inhibitions (sur lune ou les deux) afin de reprsenter les
effets de la balance acidogense/mthanogense.
Le modle de Mc Dougall & Pyrah (1999) intgre un effet de la teneur en eau plus ou moins similaire
ceux prsents dans la partie prcdente (teneur en eau) sur la vitesse dhydrolyse et la quantit de
matriaux hydrolyss ainsi que des phnomnes de diffusion des acides et des bactries mthanognes.
Le modle biologique est ensuite coupl un modle hydrodynamique afin dvaluer sa capacit
reprsenter les limitations dues leau en terme de teneur et de circulation.
A laide de distributions non linaires des concentrations initiales en substrats et bactries, Veeken &
Hamelers (2000) et Vavilin et al. (2002, 2004) tudient limpact des interactions lies aux phnomnes
de transport entre des zones aux caractristiques diffrentes : certaines o lactivit mthanogne est
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 94 -
LGCIE, INSA Lyon
faible de part la prsence de substrats en trop grande quantit et dautres o, inversement, lactivit
bactrienne est intense et les substrats prsents initialement ont t consomms. Le modle considre
des phnomnes dinhibitions aux AGV de lhydrolyse et de la mthanogense mais aucun impact de
la teneur en eau tel que dcrit ci-dessus nest pris en compte. Le modle est utilis pour analyser les
productions de mthane obtenues sur des expriences varies (calibration du modle sans prise en
compte de la diffusion sur des expriences de type PBM puis calibration des termes diffusifs laide
dexprimentations de simulation des conditions denfouissement en pilotes de laboratoire avec
recirculation des lixiviats. )
Eberl (2005), partir de simulations ralises laide dun modle proche de celui de Vavilin (2002)
mais en considrant trois dimensions de lespace, conclue que ces effets spatio-temporels peuvent tre
responsables de fluctuations de la dure totale de la dgradation de plus de 100 %.
Certains travaux tentent de coupler un modle simple (de type chimique) de production de biogaz tels
que ceux que nous avons prsent des modles plus ou moins complexes de circulation de leau.
(Muntoni et al., 1995 ; Gil Diaz et al. 1995 ; Steyer et al., 1999).

V.4.4. Autres facteurs dinfluence physico-chimiques
a. Modlisation du pH
(i). Calcul du pH
Afin de calculer le pH, si linhibition au pH est considre, trois relations principales sont utilises
(Batstone et al., 2002) :
une relation dlctroneutralit selon C A
+
( ( =

avec C
+
, les cations et A
-
, les anions.
une relation de type bilan matire sur chacun des couples acides-bases considrs :
[ ] [ ]
total
Ac HAc Ac

( = +


la constante dquilibre (dacidit) de la raction acide-base :
[ ]
a
H Ac
K
HAc
+
( (

= ,
avec Ac
total
, HAc et Ac
-
les concentrations respectives en acide total, en forme libre et sous
forme dissocie.

A partir des deux dernires relations, on peut crire :
[ ]
a total
a
K Ac
Ac
K H

+
( =

( +

.

En tablissant cette quation pour chaque couple acide / base et en les injectant dans la relation
dlctroneutralit, on obtient une quation une inconnue, [H
+
], les concentrations en acides totaux
tant fournies par le modle biologique. Ainsi, chaque pas de temps du modle biologique, le
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 95 -
LGCIE, INSA Lyon
systme est considr en quilibre et les concentrations en forme libre et dissocie de chaque acide
peuvent tre dtermines et par la mme le pH.
Selon Garcia-Heras (2003), les principaux rgulateurs du pH en terme de pouvoir tampon sont les
bicarbonates, les AGV et lammoniaque. Une plage de pH comprise entre 5,5 et 8 peut tre couverte
par cette approche avec une prdominance du couple NH
4
+
/NH
3
aux valeurs leves de pH, du couple
CO
2
/HCO
3
-
aux valeurs moyennes et de HAc/Ac
-
aux valeurs basses.

(ii). Impact du pH

A titre dexemple, dans lADM1 (Batstone et al., 2002), un coefficient dinhibition I est reli au pH
selon
0.5( )
( ) ( )
1 2 10
1 10 10
pH pH
pH pH pH pH
I
+


+
=
+ +
o pH
+
et pH
-
sont respectivement les pH auxquels I = 0,5.

Graphiquement avec pH
+
et pH
-
gaux 6 et 8 respectivement, on obtient la reprsentation suivante
(Figure 9) :

Figure 9 : Valeurs du coefficient dinhibition des bactries mthanognes en fonction du pH
(Batstone et al. 2002)

Ce coefficient est ensuite utilis comme pour linhibition non comptitive vue ci-dessus selon :

S
S
I
K S
=
+
pour limiter le dveloppement des bactries sensibles au pH dans la gamme
considre.

Dans les travaux de El-Fadel et al. (1996) et White et al. (2004), un coefficient IF affectant la
croissance des bactries mthanognes est calcul dune manire similaire, en fonction des valeurs du
pH.

I = f(pH)
0
0,5
1
3 4 5 6 7 8 9 10 11
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 96 -
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b. Modlisation des transferts liquide-gaz
La solubilisation du dioxyde de carbone est importante vis--vis du pH tant donne la formation
dacide carbonique Quand ce type de phnomne est modlis, seuls les transferts de ce dernier sont
gnralement pris en compte et sa dissociation selon :
2 2 2 3 3 dissout
CO H O H CO H HCO
+
+ +


.

La prise en compte du CO
2 dissous
est donc ncessaire pour la reprsentation des variations de pH. Le
mthane et le dihydrogne sont toujours considrs comme relativement peu solubles (solubilits
respectives 25C de 0,0014 M
liq
.bar
gaz
-1
et 0,0014 M
liq
.bar
gaz
-1
) comparativement au CO
2
. (0,024
M
liq
.bar
gaz
-1
) (Batstone et al., 2002).

A laide du mme raisonnement que pour le calcul du pH sur cette raction, on peut crire :
[ ]
[ ]
2
2
total
dissous
d
H CO
CO
K H
+
+
(

=
( +

avec K
d
, constante de dissociation de lquilibre ci-dessus et
[ ] [ ]
2 2 3 total dissous
CO CO HCO

( = +



Ensuite deux lois sont utilises :
la loi de Henry qui relie la concentration du gaz au sein du liquide sa pression partielle
lquilibre selon :
,
0
H gaz gaz liq
K p C = (White et al., 2004) valable seulement si la phase
liquide est dilue.
La thorie du double film (two film theory ) qui intgre un aspect dynamique afin de
reprsenter la rsistance au transfert du gaz du liquide vers la phase gaz observe en digesteurs
(Batstone et al., 2002) :
2 2
,
( )
dissout
CO CO H gaz gaz liq
m K p C = (Haarstrick et al., 2001)

c. Modlisation de la production de chaleur et des effets de la temprature
Quelques auteurs proposent des approches o la production de chaleur par les ractions biologiques,
son transfert et son impact sur les ractions bio-physico-chimiques sont considrs. Cest
principalement le cas en arobiose (Aguilar, 2000) de part lexothermicit de la dgradation, mais en
anarobiose galement (El-Fadel et al., 1996 ; Haarstrick et al., 2001). Selon Batstone et al. (2002),
leffet global des variations de temprature sur la dgradation anarobie est davantage d leur impact
sur les paramtres physico-chimiques du systme que sur les paramtres biologiques.

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 97 -
LGCIE, INSA Lyon
Concernant linfluence de la temprature sur les ractions biologiques, Mora Naranjo et al. (2004)
proposent une modification des cintiques biologiques et galement de lhydrolyse laide dun
facteur multiplicatif empirique TF(T), fonction de la temprature, suivant :
( )
2
( ) exp ( )
opt
TF T T T
(
=
(


avec, T, la temprature effective ; T
opt
, la temprature optimale des bactries considres (msophiles
ou thermophiles) en C et , un coefficient constant, en C
-2
.
A partir de rsultats exprimentaux dincubation de fractions organiques de dchets mnagers en
conditions contrles diffrentes tempratures, les auteurs proposent les valeurs suivantes : = 0,03
C
-2
pour lhydrolyse et 0,04 pour la mthanogense. La figure suivante reprsente graphiquement le
coefficient en fonction de la temprature pour la mthanogense en conditions msophile et
thermophile.

0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temprature (C)
F
a
c
t
e
u
r

d
'
i
m
p
a
c
t
IF 35C
IF 55C

Figure 10 : Facteur dimpact de la temprature sur lhydrolyse et les ractions biologiques
(Mora Naranjo et al., 2004)

Lquation de vant Hoff est gnralement utilise moyennant des simplifications pour reprsenter
limpact de la temprature sur les constantes physico-chimiques employes dans le cas dune
reprsentation des quilibres acides bases et liquides gaz notamment (Batstone et al., 2002).
Lintgration de phnomnes de transfert de la chaleur ne sera pas expose ici car ncessite une
approche dtaille (cf. Aguilar, 2000).

Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 98 -
LGCIE, INSA Lyon
VI. Bilan et objectifs
Cette tude bibliographique a soulign que lvolution dun site denfouissement rpond un
ensemble de processus bio-physico-chimiques varis et en interaction permanente. Cette volution est
principalement due lactivit bactrienne prenant place dans le massif de dchets, du fait de la
prsence dune fraction organique dgradable considrable. Aprs une courte phase de dgradation
arobie, le confinement des dchets induit des conditions principalement anarobies qui se
caractrisent par un processus biologique particulier, la mthanogense. Cette dgradation biologique
gnre une proportion importante de mthane dans le biogaz, ce qui implique une ncessit de contrle
de sa production, pour limiter les risques lis ce gaz effet de serre explosif, mais aussi pour
acclrer la stabilisation du massif et valoriser son potentiel nergtique.
Or le processus de mthanogense savre tout particulirement sensible car il consiste en une srie
dtapes biochimiques successives ralises par des micro-organismes diffrents. En particulier, les
groupes bactriens responsables de la production de mthane prsentent un taux de croissance faible et
une forte sensibilit aux conditions du milieu. Pour leur assurer un dveloppement satisfaisant, le
milieu doit prsenter des conditions favorables et permettre une balance entre les populations
bactriennes acidognes et mthanognes. Cette mta-stabilit explique que la dure des tapes en
site de stockage ainsi que la quantit totale de biogaz produit sont sujettes de larges incertitudes lies
un certain nombre de facteurs influenant directement ou indirectement la biodgradabilit.
Ces facteurs peuvent tre globalement diviss en deux classes : les facteurs intrinsques au matriau,
lis notamment sa composition en biopolymres, la structure et la taille de ces derniers, et les
facteurs cologiques et physiologiques, c'est--dire les conditions environnementales au regard des
exigences biologiques (le pH, la temprature, la teneur en eau, les nutriments,...).
Lvaluation de la biodgradabilit intrinsque peut tre ralise par des mthodes de
dgradation anarobie contrle, en quantifiant la production de biogaz ou de mthane. La revue
bibliographique a mis en exergue une multitude de protocoles, sans quaucune normalisation soit
envisage. Lestimation de cette biodgradabilit intrinsque peut tre fausse si les conditions ne sont
pas optimales. A partir de ces acquis, il nous semble donc intressant dtudier certaines conditions
opratoires des tests anarobies et dlaborer un protocole optimis pour obtenir une
biodgradabilit intrinsque (cf. I.2.2 Partie B). Nous valuerons galement linfluence de la nature
de linoculum utilis lors de ces tests (cf. I.2.3.b Partie B)
Les facteurs intrinsques ont la fois des consquences sur la stoechiomtrie long terme et sur la
cintique de la dgradation. Selon la nature et / ou la structure des biopolymres qui la compose, une
masse de matriau ne gnre pas la mme quantit de biogaz et son hydrolyse dans des conditions
similaires na pas la mme vitesse. Ce fait bibliographique sera dailleurs vrifi exprimentalement
car nous nous attacherons valuer la production de biogaz gnr par un panel de matriaux de
nature diffrente (des DMA rels, des fractions organiques de DMA ainsi que des matriaux simples
spcifiques, cf. I.1.1 Partie B). Selon la taille des particules de ce matriau, lhydrolyse na pas la
mme vitesse car cest une raction de surface et la quantit de MO accessible peut tre rduite en
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 99 -
LGCIE, INSA Lyon
prsence dun complexe ligno-cellulosique. Au regard de ces considrations, nous valuerons
galement linfluence de la taille des particules sur quelques matriaux en conditions anarobies (cf.
I.2.3.a Partie B).
Dautre part, des mthodes dincubation en arobiose existent mais elles sont employes, la plupart du
temps, pour estimer une biodgradabilit immdiate. Ces mthodes paraissent plus rapides et moins
contraignantes mettre en uvre que les tests anarobies. La bibliographie semble indiquer que leur
utilisation pour estimer le potentiel de production de biogaz na pas t pleinement investigu. Nous
proposons donc de tester ladquation entre les mesures de biodgradabilits intrinsques arobies et
anarobies avec pour objectif dvaluer la possibilit destimer la biodgradabilit anarobie laide
de la biodgradabilit arobie.
Enfin, la revue bibliographique a soulign les limites de lutilisation des analyses physico-chimiques
ou biochimiques de la MO des DMA pour apprhender la biodgradabilit intrinsque dun matriau.
Comme nous lavons remarqu, chacune des approches prsentent potentiellement des biais et, mme
daprs la connaissance exacte des biopolymres composant un matriau, il semble dlicat dvaluer
sa biodgradabilit intrinsque du fait dun certain nombre de limitations. Nous apprcierons
galement cet aspect, en suggrant exprimentalement les limitations de la caractrisation chimique
en vue destimer les biodgradabilits arobie et anarobie.

Concernant les facteurs dinfluence environnementaux, les deux principaux en centre de
stockage sont la teneur en eau (distribution et mouvement) et le pH. Ces facteurs nont pas de
consquence significative sur la stoechiomtrie long terme puisquun massif de dchets secs
momifis ou humide et acidifi, ne prsentant pas dactivit biologique importante, conservera
lintgralit de son potentiel mthanogne jusquau rtablissement de conditions satisfaisantes. Ils ont,
par contre, une influence cintique considrable.
Afin dtudier ces effets cintiques, de nombreux travaux valuent la biodgradabilit dans un
scnario donn, grce des tests de simulation qui permettent de reproduire les conditions spcifiques
dun milieu et dapprhender linfluence des facteurs. Cependant, et la bibliographie ne la que
soulign, linfluence de nombreux facteurs de manire concomitante a souvent rendu lexploitation des
rsultats dlicate et la description de limpact dun facteur spcifique impossible. Les tests de
biodgradabilit intrinsques apparaissent comme un moyen adquat pour faire varier les conditions
dincubation de manire plus contrle et tudier, de manire dcouple, linfluence de certains
facteurs, ou leurs interactions. Nous tenterons donc dvaluer la possibilit dtudier, en conditions
anarobies, linfluence de facteurs spcifiques telle que la teneur en eau sur la biodgradabilit
anarobie (cf. I.2.3.c)

Enfin, la modlisation de la production de biogaz partir de matires organiques solides est un
domaine de recherche actif, en condition denfouissement notamment.
Les modles labors et utiliss des fins prdictives sont des outils relativement simples, tant donn
la complexit du systme dcharge . Calibrs partir de productions mesures sur sites, ils
permettent dextrapoler une production initiale mesure sur un autre site gr de manire similaire ou
destimer la production lchelle dun site comme dun pays. Ces modles sont trs souvent bass
Partie A : bibliographie
Thse M. Rouez 2008 - 100 -
LGCIE, INSA Lyon
sur une approche multi-substrats et supposent que la biodgradabilit dun dchet complexe
compos de diffrentes fractions organiques est gale la somme des biodgradabilits de chacune des
fractions qui le compose. Afin de confirmer cette hypothse sous-jacente la validit de ce type de
modles, nous nous attacherons valuer, en arobiose comme en anarobiose, dun point de vue
cintique et stoechiomtrique, la possibilit destimer les biodgradabilits dun dchet complexe
constitu partir de diffrentes fractions organiques laide des biodgradabilits mesures sur
chacune de ces fractions.
Dautres modles ont pour objectif le stockage de la connaissance . Appliqu aux digesteurs
anarobies, le modle ADM1 constitue un exemple typique doutil dvelopp dans ce but, en
proposant une description dtaille voire exhaustive des processus lis la dgradation anarobie.
Dans le cadre spcifique de lenfouissement des dchets, une reprsentation plus simple de la
dgradation est bien souvent utilise, couple avec une description de un ou plusieurs facteurs
dinfluence. De nombreux outils sont ainsi construits afin dexpliquer des phnomnes complexes par
des mcanismes plus lmentaires. Cette dmarche implique un questionnement sur la simplification
du systme dcrit et le choix des phnomnes reprsents. Pour tenter dapprhender cette
problmatique, qui dpend de chaque systme et de chaque modle, nous nous appliquerons
modliser certaines rponses exprimentales obtenues en anarobiose laide de modles simples de
type explicatif, pour en valider les hypothses. Cette dmarche pourrait de plus conforter certaines
interprtations exprimentales. Linfluence de la taille des particules et de la teneur en eau seront
galement abordes sous cet angle (Cf. Partie C).


Thse M. Rouez 2008 - 101 -
LGCIE, INSA Lyon
Partie B : Etude de la biodgradation de dchets mnagers et de leurs fractions constitutives
Thse M. Rouez 2008 - 102 -
LGCIE, INSA Lyon
B. Etude de la biodgradation de dchets
mnagers et de leurs fractions
constitutives




SOMMAIRE

I. Matriels et mthodes ................................................................................................... 103
I.1. Matriaux tests et caractrisations gnrales.............................................................................. 103
I.1.1. Les diffrents dchets et matriaux tests........................................................................ 103
I.1.2. Caractrisations gnrales................................................................................................ 108
I.2. Incubations anarobies................................................................................................................. 114
I.2.1. Protocole gnral ............................................................................................................. 114
I.2.2. Conditions opratoires optimises ................................................................................... 118
I.2.3. Etude de facteurs dinfluence spcifiques........................................................................ 121

II. Rsultats et discussions................................................................................................ 126
II.1. Caractrisations gnrales .......................................................................................................... 126
II.1.1. Analyses gravimtriques, lmentaires et physiques...................................................... 126
II.1.2. Demande Biochimique en Oxygne sur solides ............................................................. 128
II.2. Incubations anarobies................................................................................................................ 141
II.2.1. Incubations de mise au point .......................................................................................... 141
II.2.2. Etude en conditions dincubations optimises................................................................ 152
II.2.3. Facteurs dinfluence spcifiques .................................................................................... 168
II.2.4. Dchet MIX : comparaison des biodgradations exprimentale et calcule .................. 177
II.2.5. Corrlation entre biodgradabilit arobie et anarobie................................................. 178

III. Conclusions................................................................................................................ 180

Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 103 -
LGCIE, INSA Lyon
I. Matriels et mthodes
I.1. Matriaux tests et caractrisations gnrales
Une grande diversit de matriaux (dchets mnagers et leurs fractions constitutives) a t utilise afin
notamment dvaluer :
limpact de la nature du substrat sur la biodgradation de ce dernier,
les ventuelles corrlations entre les mesures de biodgradabilits arobie et anarobie,
ladditivit de ces biodgradabilits en arobiose dune part et en anarobiose dautre part
grce ltude des fractions organiques individuelles de dchet et du dchet reconstitu
partir de ces fractions.
I.1.1. Les diffrents dchets et matriaux tests
Trois types de matriaux ont t utiliss :
1. des fractions organiques de dchets mnagers telles que considres dans la norme NF XP X30-
408, en majeure partie constitues au laboratoire,
2. des dchets mnagers ou fractions relles de dchets mnagers, rcuprs sur des sites industriels
de tris ou de traitements, dsigns dans ce qui suit par dchets complexes , et
3. quelques substrats simples particuliers.

a. Aspects gnraux
Les matriaux humides et volutifs ont t pralablement stocks en chambre froide 4 C puis schs
le plus rapidement possible afin de limiter leur volution biologique et permettre le broyage sec des
chantillons. Les chantillons traits en grandes quantits ont t schs dans une tuve de grande
capacit environ 70 C jusqu stabilisation de la masse, selon la norme NF XP X30-408. Pour les
petites quantits, les schages ont t raliss en tuve 105 C, pendant 24 h, selon la norme XXX.
Le broyage est mis en uvre afin dobtenir des particules de diamtre infrieur 1 mm et a t ralis
laide dun broyeur couteau (Retsch SM2000) pouvant tre quip avec des grilles de mailles
passantes de 10, 4 et 1 mm. Tous les chantillons ont t ainsi pralablement schs, broys, puis
conditionns dans des flacons plastiques tanches. Les dchets ou fractions complexes et volutives
ont t stocks au rfrigrateur et les matriaux simples comme les papiers, temprature ambiante
labri de la lumire et de lhumidit.
Toutes les analyses prsentes ci-aprs ont t ralises sur chantillons broys. Les mesures et teneurs
en matire sche prsentes en partie rsultats sont donc celles des matriaux utiliss pour les
analyses biologiques et non celles des dchets bruts prsentant parfois un taux dhumidit important
comme dans le cas des fractions de dchets alimentaires ou de dchets verts ainsi que des dchets
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 104 -
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complexes rcuprs sur sites. Les teneurs en matire sche des chantillons bruts sont mentionnes en
Annexe 4.

b. Les fractions organiques de dchets mnagers
Des fractions organiques de dchets mnagers telles que celles considres dans la procdure
normalise NF XP X30-408 ont t reconstitues notamment dans le but dtablir une banque de
matires ainsi quune base de donnes associes. Le Tableau 16 prsente les diffrentes fractions de
DMA de la procdure normalise ainsi que les catgories reconstitues et leur dnomination.

Tableau 16 : Fractions organiques de dchets mnagers considres dans la procdure NF XP X30-408 et dans la
prsente tude
Procdure NF XP X30-408 Notre tude
Catgories Sous-catgories organiques Catgories Dsignation
Dchets alimentaires DA
1 PUTRESCIBLES Dchets alimentaires, de jardin
Dchets verts DV
Papiers de bureau PB
Papiers journaux PJ 2 PAPIERS
Emballages papiers, journaux,
brochures, magazine, pub sur papier
glac, autres
Papiers magazines PMAG
3 CARTONS
Emballages cartons plats, cartons
onduls, autres
Papiers cartons PC
4 COMPLEXES
Emballages complexes cartons, autres
emballages complexes, autres
complexes non emballages
Composites
"Tetrabricks"
TETRAB
5 TEXTILES Emballages textiles, autres Textile coton TEXTC
Papier "essuie-tout" PETT
6
TEXTILES
SANITAIRES
Textiles sanitaires souills
"Couches" TEXTS
7 COMBUSTIBLES N.C
*
.
Emballages bois, autres emballages
combustibles, autres emballages n. c.
Bois BOIS
8 ELEMENTS FINS
Elments fins inf. 8 mm, lments
fins 8 20 mm
Fines FG
* : n. c., non classs

Les putrescibles ont t subdiviss en deux catgories : les dchets verts (DV) et les dchets
alimentaires (DA). Les dchets verts sont constitus dun mlange de feuilles et dherbe en quantit
approximativement gale. Plusieurs dizaines de kg ont t collects sur le campus de la Doua
(Villeurbanne). Les dchets alimentaires ont t collects au sein mme du laboratoire par contribution
du personnel. Ils sont constitus de restes de repas, de pelures de fruits et lgumes, etc. Plusieurs
dizaines de kg ont ainsi t rcupres. Trs volutive, cette fraction a t stocke au conglateur
18 C durant la collecte et a t pralablement broye manuellement laide dun marteau avant
schage et broyage 1 mm.
Les deux catgories papiers et cartons ont t subdivises en quatre sous-catgories : papiers de
bureau (PB), cartons (PC), journaux (PJ) et magazines (PMAG). Ces dchets ont t collects sur le
campus ou au sein du laboratoire (le papier de bureau). Il sagit de matriaux non souills. PB est un
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 105 -
LGCIE, INSA Lyon
mlange de papiers blancs de bureau dont une partie est partiellement imprime. PC est un mlange de
cartons onduls classiques, non imprims, type Kraft. PJ est constitus de journaux de petites
annonces et PMAG, de brochures publicitaires en papier glac. Tous deux sont largement imprims,
en couleurs.
PB10, PC10 et PJ10 dsignent les papiers correspondants broys puis tamiss laide dune grille de
diamtre de mailles de 10 mm et dont les lments fins (< 2 mm) ont t spars. Ils ont t constitus
afin danalyser lventuel impact de la taille des particules sur la biodgradation anarobie.
La catgorie textiles est constitue de vtements usags composs a priori essentiellement de
coton et a t, par consquent, dsigne TEXTC.
La catgorie textiles sanitaires reprsente au sein dun dchet rel de la matire cellulosique
souille (couches-culottes, serviettes hyginiques, mouchoirs en papier et papiers usage mnager).
Une collecte de couches a t envisage au sein du laboratoire afin dobtenir un chantillon
reprsentatif mais cette option a t abandonne pour une raison dhygine. Des matriaux non
souills ont donc t utiliss et cette fraction a t subdivise en deux : des couches culottes dsignes
TEXTS et du papier essuie-tout (du laboratoire) dnomm PETT.
Pour la catgorie complexes , des emballages tetrabrick (TETRAB), principalement de lait, ont
t utiliss. Ils ont galement t collects par contribution du personnel du laboratoire.
La catgorie combustibles non classs a t constitue partir de sciure de bois de conifre
rcupre lors de coupes ralises latelier. Cette fraction est dsigne BOIS.
Enfin, des fractions lments fins ( fines grises , FG) ont t rcupres sur un site de traitement
de dchets mnagers et sont prsentes ci-aprs ( c(iii)).

c. Les dchets complexes
Les dchets dits complexes sont issus, pour la plupart, de prtraitements mcaniques et/ou biologiques
raliss sur des dchets mnagers rels. Ils ont t lobjet de nombreuses tudes au LGCIE dans le
cadre de programmes de recherche divers.
(i). Dchets BRUT, STAB et MAT
Ces dchets sont issus du site de prtraitements mcano biologique de Mende, localis en Lozre, prs
de Mende. Ils ont t collects en quantits importantes dans le cadre des travaux de thse de Morais
(2006).
Sur ce site, les dchets mnagers destins au stockage sont soumis des prtraitements mcaniques et
biologiques avant stockage. A lissue dun criblage double maille, une fraction refus (> 450 mm) est
carte des prtraitements, la fraction < 450 mm constituant le dchet BRUT. La fraction
intermdiaire, comprise entre 70 et 450 mm, subit un traitement prliminaire de 2-3 jours en tube
rotatif de stabilisation acclre avant de rejoindre la fraction initialement infrieure 70 mm en
silos couloirs arobies . A lissue de 6 semaines daration force par la base du casier et de
retournements, le dchet est dit stabilis (STAB). Ce dernier est conduit vers une plateforme de
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 106 -
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maturation en andains sans aration force o, aprs 12 semaines au minimum, le dchet matur
(MAT) obtenu est destin au stockage ultime.
(ii). Dchet LAN
Le dchet LAN est issu dun site de tri-compostage de dchets mnagers localis Launay-Lantic
dans les Ctes dArmor. Il constitue la fraction organique de dchets mnagers obtenue lissue de
diffrentes oprations de traitements mcaniques et biologiques (criblages, tubes rotatifs de
stabilisation acclre, tri magntique, etc.) et destine une maturation arobie. Il sagit donc dun
matriau brut , a priori assez ractif, car riche en matire organique fermentescible.
Approximativement un kilogramme de matriau fin et homogne a t ramen au laboratoire
loccasion dune visite du site et sch en tuve.
(iii). Fines grises
Les dchets fines grises ont t collects sur le centre de tri de Lons-le-Saunier, dpartement du
Jura. Il sagit dun rsidu de criblage (< 35 mm) dOM avant incinration, destin au stockage ultime
en ISDU.
Deux campagnes de prlvement ont t ralises. Des quantits importantes (plus de 100 kg) de
dchet ont t rcupres chaque reprise pour les besoins de diffrentes tudes et dans un souci de
reprsentativit des chantillons. Les dchets ont t transports en fts de 70 litres. Un quartage a t
ralis sur le site mme afin de rpartir la masse de dchet totale de manire homogne dans diffrents
conteneurs. Ces derniers ont ensuite t temporairement stocks en chambre froide ( 4 C) jusquau
schage des sous chantillons ncessaires pour la prsente tude. A lissue de la premire campagne de
prlvement, deux chantillons ont t crs, FG et FGF, pour fines grises et fines grises fines
respectivement. FG correspond au dchet dans son intgralit et FGF la fraction < 8 mm. Cette
fraction fine des fines reprsentait en masse sche prs de la moiti du dchet initial et prsentait un
aspect diffrent, terreux, comparativement la fraction suprieure visiblement compose en majorit
de matriaux cellulosiques souills Cette fraction a t constitue afin danalyser plus finement le
dchet et en vue dobtenir un matriau complexe supplmentaire, avec des caractristiques a priori
particulires. Le dchet FGb dsigne les fines grises rcupres lissue de la seconde campagne de
prlvement, davantage considr comme catgorie matire de la norme NF XP X30-408 que comme
dchet complexe du fait de son utilisation dans la reconstitution du dchet complexe MIX, prsent ci-
aprs.
(iv). Dchet MIX
Le dchet MIX a t reconstitu partir des diffrentes catgories de la norme NF XP X30-408
prsentes au b selon les proportions typiques de ces fractions au sein dun dchet mnager brut. Ce
dchet a t utilis dans le but dvaluer ladditivit des proprits biologiques (biodgradabilits) en
comparant la biodgradabilit mesure exprimentalement sur le dchet reconstitu (MIX) celle quil
est possible dtablir par le calcul (somme pondre) partir des biodgradabilits dtermines
exprimentalement sur chacune des fractions qui le composent.
Le Tableau 17 indique les proportions massiques utilises pour la reconstitution dun kilogramme de
MIX. Celle-ci a t ralise partir des fractions sches et broyes 1 mm
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 107 -
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Tableau 17 : Composition du dchet MIX reconstitu partir des fractions MODECOM
Fractions MODECOM Abb.
Proportion
massique* (
0
/
00
)
*

Dchets Alimentaires DA 62
Dchets Verts DV 127
Fines FGb 353
Papiers de bureau PB 63
Papiers journaux PJ 84
Papiers magazines PMAG 66
Papiers cartons PC 147
Textile coton TEXTC 5
Textile Sanitaire "essuie-tout" PETT 30
Textile Sanitaire "couche" TEXTS 7
Bois BOIS 50
Composites "Tetrabricks" TETRAB 5
TOTAL MIX 1000
* : en terme de matire sche

d. Les substrats simples
Une planchette de bois de tilleul (TIL) destin la sculpture sur bois a t rcupre auprs dun
atelier consacr. Il est exempt de produits phytosanitaires et reprsente un bois souple avec des
caractristiques a priori diffrentes du BOIS prsent b.
La bagasse de canne sucre (BAG) est un sous produit industriel obtenu au terme du pressage de la
canne sucre. Plusieurs kilos de matire sche ont t ramens dHati dans le cadre des travaux de
thse de Joseph O.
Ces deux matriaux, TIL et BAG, ont t slectionns pour leur composition prdominance
cellulosique, tout comme les DMA, et la prsence assure dun complexe ligno-cellulosique,
intressant en vue dtudier limpact de ce dernier sur la dgradation anarobie notamment. Le choix
de ces matriaux sest avr galement plus pertinent en vue dtudier limpact de la taille des
particules. En effet, obtenir des particules de tailles diffrentes mais de compositions quivalentes
savre problmatique avec des matriaux complexes, constitus dun mlange de particules de
compositions diffrentes. TIL4 et BAG4 sont les dnominations donnes aux deux matriaux bruts
broys laide dune grille de diamtre de mailles de 4 mm et dont les lments fins (< 2 mm) ont t
spars (des copeaux denviron 1 cm ont t utiliss pour le tilleul et des morceaux de tiges de bagasse
brute de 1 10 cm).
De la cellulose (CELL) microcristalline (Avicel pH 101) a t choisie en tant que matriau de
rfrence de composition et de dgradation thorique connues. Des extraits de levures ( yeast
extract , YE) ont galement t analyss car ils ont t utiliss par ailleurs pour lentretien des inocula
anarobies.
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 108 -
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I.1.2. Caractrisations gnrales
a. Analyses gravimtriques globales
(i). MS et MV
Les teneurs en matires sches et volatiles ont t dtermines selon les mthodes standardises mises
en uvre dans lanalyse des sols (AFNOR, 1985). La teneur en MS est dduite de la teneur en eau
mesure par perte de masse dun chantillon aprs passage en tuve 105 C pendant 24 heures. Elle
est dtermine en triplicats dans des creusets pralablement schs sur des masses de 1 10 g de
matriau. Conscutivement lanalyse de la MS, la teneur en MV est dtermine par mesure de la
perte de masse de lchantillon sec lors de sa calcination 550 C dans un four moufles pendant au
moins 4 heures.
(ii). Masse volumique
La masse volumique savre ncessaire pour la modlisation de limpact de la taille des particules o
la densit du matriau est utilise (cf. I.2 Partie C) et afin de dterminer le volume occup par le
dchet au sein des flacons dans les tests biologiques (cf. d et I.2.1.b). Elles ont t mesures selon la
procdure suivante : de 1 10 g de matriaux secs sont peses dans une fiole jauge de volume
adapte (de 50 250 mL) pralablement tare. Une quantit deau suffisante noyer le matriau est
ajoute et le mlange est lgrement agit puis laiss reposer quelques dizaines de minutes afin que le
matriau soit correctement imbib. De leau est ensuite ajoute jusquau trait de jauge. Le volume
deau totale ajoute, dtermin par pese, permet la dtermination du volume de lchantillon. La
masse volumique est calcule partir du rapport de la masse de dchet sec introduite sur le volume
occup par le dchet. Les mesures ont t ralises en triplicats.
Aux vues des faibles erreurs impliques sur les volumes gazeux totaux disponibles lors des tests
biologiques en considrant une masse volumique de 1 pour le matriau test, la mesure na pas t
ralise sur lintgralit des chantillons mais principalement sur ceux utiliss pour analyser limpact
de la taille des particules (cf. I.2.3.a).
(iii). Capacit de rtention en eau
La capacit de rtention en eau a t ralise selon la procdure suivante : 5 g de matriau sec sont
placs (sans tassement excessif) dans un buschner au fond duquel a t install un morceau de biddim.
Ce dernier a t pralablement humidifi (par aspersion sous pompe vide) et lensemble buschner et
biddim a t pralablement tar. Le matriau est ensuite satur deau (par le haut) jusqu ce quun
coulement gravitaire soit observ. Le dispositif est laiss tel quel une dizaine de minutes afin
dassurer une bonne absorption deau par le dchet (sec). La pompe vide est ensuite actionne une
minute. Cette opration (saturation puis succion) est renouvele trois reprises afin de garantir une
imprgnation homogne de leau ajoute. A lissue de la troisime saturation et aprs un coulement
gravitaire denviron trois heures, une premire capacit de rtention (C
RET1
) a t mesure par pese,
par dduction de la masse deau totale ajoute. Une seconde capacit de rtention en eau (C
RET2
) a
ensuite t value par pese de la masse totale deau prsente aprs action de la pompe vide durant
une minute. Ces deux capacits ont t exprimes en gH
2
O.gMS
-1
(ou en %).
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 109 -
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b. Analyses lmentaires
(i). Carbone total
La teneur en carbone total a t dtermine au LGCIE selon la norme ISO 10694 (1995) dont le
principe est loxydation totale de lchantillon par combustion haute temprature (950 C) en
prsence dun catalyseur suivie dune mesure du dioxyde de carbone produit par dtection infrarouge.
Le dosage a t ralis laide dun COT-mtre OI Analytical (1020 A). La prise dessai de quelques
dizaines de mg ncessite la rptition de lanalyse pour sassurer de la fiabilit de la mesure. La
mesure du COT est ralise grce au mme appareillage aprs traitement de lchantillon lacide afin
dliminer les hydrogno-carbonates.
(ii). Analyses lmentaires complmentaires
Des analyses lmentaires complmentaires telles que les teneurs en hydrogne (H), en azote total (N)
et ammoniacal (N-NH
3
), en soufre (S) et en phosphore (P) ont t confis des laboratoires extrieurs
(laboratoires CESAR pour lazote et Service Central dAnalyse du CNRS Solaize pour les autres).
Ces analyses nont pas t ralises sur lensemble des matriaux tudis mais principalement sur
certains dchets complexes.

c. Analyses biochimiques
Tel que prsent en partie bibliographique, le fractionnement biochimique de Van Soest permet la
quantification de quatre fractions organiques diffrentes par une srie de trois solubilisations
successives (extractions squentielles), laide de diffrents solvants appropris.
Lanalyse a t effectue quatre reprises sur diffrents matriaux mais na t mene son terme que
lors de la premire mise en uvre, sur lchantillon BAG uniquement, en collaboration avec O.
Joseph. Sur les dchets complexes, diffrents problmes ont t rencontrs et, au regard de ceux-ci
ainsi que des contraintes inhrentes au protocole, cette mthode a par la suite t abandonne. Le
protocole et les matriels utiliss ainsi que les problmes rencontrs sont prsents en Annexe 5.

d. DBOS
La Demande Biochimique en Oxygne sur Solide a t dtermine, pour la majorit des matriaux
broys 1 mm, par incubations laide du matriel OxiTop
TM
, dans une phase liquide comprenant
solution minrale et inoculum, sous agitation 30 C dans lobscurit. La DBOS constitue un
quivalent de la DBO classique mais ralise sur matriaux solides en suspension aqueuse. Les
objectifs de sa mise en uvre ont t dune part dtudier lexistence de corrlations avec les
caractristiques chimiques ainsi quavec les rsultats de biodgradation obtenus en anarobiose et
dautre part dvaluer ladditivit des proprits ainsi mesures laide du dchet MIX.


Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 110 -
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(i). Principe gnral
Une quantit prcise du matriau tester est introduite dans chaque flacon en phase liquide compose
de solution minrale et dinoculum. Les flacons sont clos hermtiquement laide dune tte
OxiTop
TM
. La dgradation biologique du substrat carbon conduit la consommation de loxygne
prsent dans le flacon ainsi qu la production de dioxyde de carbone. Ce dernier est pig grce des
pastilles de soude places dans une nacelle suspendue au-dessus du milieu ractionnel . Ainsi, la
consommation doxygne se traduit par une dpression au sein du flacon, dpression mesure
automatiquement par la tte OxiTop
TM
une frquence dpendante de la dure totale de lessai. En
supposant que seul loxygne consomm au cours du test est lorigine de la baisse de pression et que
lintgralit du CO
2
produit est pige par la soude, la dpression mesure est proportionnelle au
volume doxygne consomm qui peut donc tre dtermin (cf. I.1.2.d(iii)).
(ii). Protocole mis en uvre :
Les incubations ont t ralises dans une chambre thermostate 30 C et lobscurit. Une certaine
quantit de matriau a t pese directement au sein de chaque flacon et mise en suspension dans un
mlange de solution minrale et dinoculum. La solution minrale et linoculum ont t pralablement
mlangs en bcher en proportion volumique gale et maintenus sous agitation durant les
prlvements raliss laide de seringues de 50 mL. Des tmoins ngatifs, de mme composition
mais dans lesquels aucun substrat ntait apport, ont accompagn chaque exprimentation afin de
pouvoir soustraire la consommation doxygne due linoculum seul. Chacun des substrats a t
test en triplicats. En cours dincubation, les dpressions au sein de chaque flacon ont t
rgulirement suivies laide du botier OxiTop
TM
qui permet des relevs rapides grce au systme de
communication infrarouge le reliant aux ttes de mesures. Afin de renouveler lair des milieux et
dassurer la prsence dune quantit non limitante doxygne, les bouteilles taient ouvertes et ares
quelques minutes laide de pompes daquarium plusieurs reprises au cours dune incubation. Une
table dagitation orbitale ou des agitateurs magntiques ont t utiliss pour lagitation des milieux.

Dans un premier temps, de 0,5 1 gramme de matire (selon le taux de MV du matriau considr)
ont t incubs dans 50 mL de liquide (25 mL de solution minrale et 25 mL dinoculum) afin
dobtenir des concentrations de lordre de 10 1 gMV.L
-1
. De nombreuses sries ont t ralises
cette concentration qui a par la suite t abaisse car des phnomnes dinhibition ont t observs lors
des dernires sries (cintiques chaotiques et forte variabilit entre rplicats). Afin de ne pas rduire la
quantit de matriau test, notamment pour assurer la reprsentativit des chantillons complexes, la
quantit de liquide mise en uvre a t augmente 100 mL avec toujours la mme proportion
solution minrale/inoculum impliquant des concentrations de 5 1 gMV.L
-1
. Afin danalyser la
totalit des matriaux avec le matriel disponible et de manire satisfaisante (a priori sans inhibitions),
plusieurs sries dincubation ont t ncessaires. Le Tableau 18 prsente les exprimentations
slectionnes in fine, les matriaux tests ainsi que les conditions opratoires mises en uvre.



Partie B : matriels et mthodes
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Tableau 18 : Conditions exprimentales des incubations et matriaux testes en arobiose
Exp. Matriaux tests
V
inoculum
(mL)
V
minral
(mL)
Concentration
(gMV.L
-1
)
1 FG FGF BRUT MAT LAN TIL BAG 25 25 10 1
2 PB PC PJ CELL 25 25 10 1
3 FGb DA DV PETT TEXTS PMAG BOIS CELL 50 50 5 1
4 DA MIX TETRAB TEXTC BOIS CELL 50 50 5 1

Le milieu minral a t ralis selon un protocole mis au point au laboratoire (Pestre, 2007). Il est
prpar partir de trois solutions A, B et C dont la composition ainsi que celle du milieu est dcrite
Tableau 19.

Tableau 19 : Composition du milieu minral utilis pour les tests de DBOs
Solutions Constituants Quantits
Solution A 40 mL
Solution B 30 mL
Solution C 30 mL
Milieu
minral
H
2
O qsp1 litre
KH
2
PO
4
28,25 g
K
2
HPO
4
146,08 g Solution A
H
2
O qsp1 litre
CaCl
2
,2H
2
O 3,66 g
NH
4
Cl 28,64 g Solution B
H
2
O qsp1 litre
MgSO
4
, 7H
2
O 3,06 g
FeSO
4
, 7H
2
O 0,7 g
ZnSO
4
, 7H
2
O 0,4 g
Solution C
H
2
O qsp1 litre

Le pH du milieu final doit tre proche de la neutralit (7 0,2). Les solutions A, B et C peuvent tre
conserves au rfrigrateur 6 mois et rutilises si elles ne prsentent pas de prcipits.

Linoculum a t ralis au laboratoire partir de rsidus de bagasse non broys incubs dans de la
solution minrale (cf. ci aprs) et a t entretenu la temprature de ralisation des essais dans une
colonne de plexiglas maintenue sous bullage permanent dair laide dune pompe aquarium.
Lapparition dun floc bactrien a t rapide, la bagasse servant la fois de source endogne
cellulolytique, de support de croissance et de source carbone. Avant le lancement des essais,
lensemble du dispositif tait grossirement agit et un volume suffisant la ralisation des tests tait
prlev puis laiss dcanter. La phase liquide ainsi obtenue, exempte de grosses particules, a t
utilise pour inoculer les tests.


Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 112 -
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(iii). Mthodes analytiques et exploitation des donnes
La consommation doxygne est dtermine partir des mesures manomtriques. Un premier
traitement des donnes vise cumuler ces mesures de dpressions, la pression tant ramene
pression atmosphrique lors de chaque ouverture des flacons pour leur aration, et galement
soustraire la respiration moyenne des tmoins afin de ne comptabiliser que la consommation relative
aux substrats. La seconde tape est de convertir les mesures de dpression en volume doxygne
consomm laide de la loi des gaz parfait. Les tests sont raliss volume et temprature constants et
on a donc, au temps t
1
,
1 1 Gaz
PV n RT = et au temps t
2
,
2 2 Gaz
PV n RT = avec V
Gaz
= volume de lespace
gazeux disponible dans les flacons =
Total Suspension
V -V
Remarque : un V
Total
moyen de 503 mL pour les flacons utiliss a t dtermin par pese de la
quantit deau ncessaire pour remplir totalement les flacons. Ce volume tient compte de celui de la
nacelle et des grains de soude. Le volume des agitateurs a galement t dtermin et soustrait lorsque
lessai en contenait.
Le nombre de moles de gaz consommes entre t
1
et t
2
est donc :
2 1 2 1
( )
Gaz Gaz
V P V
n n n P P
RT RT

= = =
Do une quantit doxygne consomme exprime par gramme de matire sche teste de :
2
2
( ) / ( )
O
Gaz
teste
M
P V
m O g MS
R T m

=


avec : P, variation de pression (mbar), V
Gaz
= volume de lespace gazeux (L), M
O2
, masse molaire du
dioxygne (32 g.mol
-1
), R, constante des gaz parfait (83,14 L.mbar.mol
-1
.K
-1
), T, temprature (K),
m
teste
, quantit de MS teste (g).
Des rgressions exponentielles ont permis de dterminer, partir des consommations cumules
doxygne prsentant une forme exponentielle, deux paramtres, lun cintique, k, la constante de
vitesse, et lautre stoechiomtrique, DBOS

, la consommation ultime doxygne atteint selon


lquation :
( ) (1 )
k t
DBOS t DBOS e

=
avec : DBOS (t), la consommation cumule doxygne (mgO
2
.gMV
-1
ou mgO
2
.gMS
-1
) au temps t (j) ;
DBOS

, la consommation ultime doxygne (mgO


2
.gMV
-1
ou mgO
2
.gMS
-1
) ; k, la constante de vitesse
(j
-1
).
La constante de vitesse est inversement proportionnelle au temps de demi vie t
1/2
, temps ncessaire
la consommation de la moiti de loxygne consommable ( la dgradation de la moiti de la matire
dgradable). La Figure 11 illustre lallure dune telle courbe et prcise la signification des deux
paramtres associs, DBOS

et k.
Partie B : matriels et mthodes
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Figure 11 : Courbe exponentielle et paramtres associs

Les paramtres DBOS

et k ont t estims laide de la fonction solver de Microsoft Excel. Cette


fonction permet de minimiser la somme des diffrences au carr entre valeurs exprimentales et
valeurs thoriques associes au modle , Eq. Erreur ! Source du renvoi introuvable..
Un pourcentage de minralisation peut tre calcul en tablissant une consommation dO
2
thorique
maximale et en exprimant les rsultats obtenus en pourcentage de cette consommation maximale
thorique. Cette dernire peut tre dtermine laide de la raction de minralisation totale du
glucose : selon lquation
6 12 6 2 2 2
6 6 6 C H O O CO H O + + , la consommation doxygne est de
1,066 g dO
2
par g de glucose dgrad soit une DBOS thorique de 1066 mg O
2
.gMV
-1
.
De la mme manire, la DBOS thorique maximale exprime par rapport la quantit de carbone
teste est de 2675 mg O
2
.gCT
-1
(1 g de glucose contenant 0,4 g de carbone).
Ainsi, en assimilant du glucose la matire organique des substrats tests, un pourcentage de
minralisation (%min) peut tre calcul selon :
1
exp 2
( . )
%min 100
1066
DBOS mgO gMV

= par rapport au contenu en MV ou


1
exp 2
( . )
%min 100
2675
DBOS mgO gCT

= par rapport au contenu en CT.








D
B
O
s


D
B
O
s

/
2

t
1/2
= ln (2)/k
D
B
O
s

(
t
)

Temps (t)

( ) (1 )
k t
DBOs t DBOs e

=
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 114 -
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I.2. Incubations anarobies
Tout dabord, le protocole gnral, commun toutes les incubations ralises en anarobiose, est
prsent. Les exprimentations accomplies dans le but de dfinir des conditions dobtention dune
dgradation optimise font lobjet de la partie suivante et saccompagnent de ltude de facteurs
dinfluence subis (principalement le ratio I/S) ou spcifiquement mis en uvre telles que la nature du
substrat, lagitation ou la prsence de Na
2
S dans la solution minrale. Enfin, dans une dernire partie,
sont dtaills les tests raliss pour ltude de facteurs dinfluence spcifiques telles que la taille des
particules, la nature de linoculum ou la teneur en eau.

I.2.1. Protocole gnral
a. Incubations
Les incubations anarobies ont t ralises en flacons de diffrentes tailles (flacons en verre
borosilicat type GL 45 de 2000, 500 et 250 mL et flacons type pnicilline de 125 mL) dans une
chambre noire thermostate 35 C selon le protocole gnral suivant : une quantit prcise du
matriau tester ainsi quun volume connu de solution minrale (cf. composition ci aprs) sont
introduits dans les bouteilles places ensuite sous flux dazote afin den chasser loxygne prsent.
Aprs quelques minutes de dgazage , un volume dinoculum est ajout sous flux dazote avec une
seringue et les bouteilles sont fermes laide dune capsule et dun bouchon plastique (en aluminium
pour les flacons de 125 mL) permettant les mesures de pression et garantissant ltanchit. Des
flacons tmoins, dans lesquels seuls linoculum et la solution minrale sont introduits, permettent de
dterminer la production de linoculum seul et de la retrancher, si ncessaire, aux productions des
flacons tests . La production de biogaz est suivie par un relev manomtrique ralis laide dun
manomtre (Digitron 2085P) muni daiguilles spcifiques ( BD Microlance needles , 0.3 13 mm).
A chaque relev, la pression dans les bouteilles est ramene par dgazage jusqu 1100 mbar afin
dviter les pressions excessives (la limite suprieure du manomtre tant de 2085 mbar). La
composition du biogaz (CH
4
, CO
2
, N
2
, O
2
et H
2
S) est dtermine par micro chromatographie en phase
gazeuse par prlvement direct au sein des bouteilles laide des mmes aiguilles que pour les
mesures de pression et les dgazages. Les essais sont suivis jusqu larrt de la production de biogaz.
Des boues provenant dun digesteur anarobie traitant les eaux uses de la municipalit de Chambry
ont t utilises, pour la plupart des exprimentations, en tant quinoculum de rfrence (nomm
Inoc
step
). Quelques modifications de la nature de linoculum ont t values et sont prsentes au
I.2.3.b. Ces boues ont t chantillonnes sur le site deux reprises et ramenes au laboratoire en
bidon de 5 litres quip dun clapet empchant toute entre dair. Elles ont t stockes en chambre
thermostate 35 C jusqu la ralisation des essais afin dassurer la radaptation des
microorganismes aux tempratures msophiles et galement la dgradation des ventuelles matires
organiques biodgradables rsiduelles. Linoculum a t entretenu en compensant les volumes
soustraits par ajout de solution minrale la boue restante et en lalimentant avec de la cellulose et des
extraits de levures. Ayant potentiellement volu dans la dure de la thse, linoculum a t analys au
lancement de la plupart des exprimentations pour son contenu en MS et en MV ainsi que le pH et la
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 115 -
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teneur en COT et CIT de sa phase liquide (aprs filtration 0,45 m). Au final, trois boues ont t
distingues, nommes Inoc
step
1, 2 et 3. Inoc
step
1 est la boue rcupre lissue du premier
prlvement et entretenue quelque peu laveugle . Inoc
step
2 a t rcupr lors du second
prlvement sur site et a t entretenue laide dun dispositif exprimental prsent lAnnexe 6
permettant un suivi de son activit. Inoc
step
3 est issu de la mme boue aprs plusieurs mois
dentretien.
La solution minrale de rfrence (cf. modifications prsentes en I.2.3.b) a t ralise selon
les prconisations de la norme ISO 11734 (1995) relatives la mesure de la biodgradabilit ultime de
composs organiques dans les boues de digesteur. Sa composition est la suivante : un tampon
phosphate (0.27 g de KH
2
PO
4
, 1.12 g de NA
2
HPO
4
.12H
2
O) ainsi que des sels minraux (0.53 g de
NH
4
Cl, 0.075 g de CaCl
2
.2H
2
O, 0.10 g de mgCl
2
.6H
2
O 0.1 g de Na
2
S.9H
2
O) sont dissous dans
1000 mL deau permute. 3 mL dune solution dlments traces contenant 5 mg.L
-1
de H
3
BO
3
,
5 mg.L
-1
de ZnCl
2
, 3 mg.L
-1
de CuCl
2
et 100 mg.L
-1
de CoCl
2
, 6H
2
O sont ensuite ajouts un litre de
la solution prcdente.

b. Quantit et qualit du biogaz produit
Le volume de biogaz produit est dduit des mesures de pression selon la loi des gaz parfait. Les tests
sont raliss volume et temprature constants, on a donc : au temps t
1
,
1 1 Gaz
PV n RT = et au temps t
2
,
2 2 Gaz
PV n RT = avec V
Gaz
= volume de lespace gazeux disponible dans les flacons =
Total Suspension
V -V .
Le V
Total
moyen a t dtermin pour chaque type de flacon utilis (2000, 500, 250 et 125 mL) par
pese de la quantit deau ncessaire pour remplir totalement les flacons. Le V
Suspension
a t dtermin
en prenant en compte les volumes de solution minrale, dinoculum et dchantillon.
Remarque : pour certaines exprimentations, la masse volumique a t suppose gale 1 au regard
des rsultats prliminaires et des masses faibles utilises lors de la plupart des tests (cf. I.1.2.a(ii)).
Le nombre de moles de gaz produites entre t
1
et t
2
est obtenu selon la relation suivante :
2 1 2 1
( )
Gaz Gaz
V P V
n n n P P
RT RT

= = =
Le volume dune mole de gaz parfait la pression P et la temprature T tant de :
molaire
RT
V
P
= litres avec T en K et P en atm, il est possible den dduire un volume de biogaz produit
de :
Gaz Gaz
Biogaz molaire molaire
P V P V
V V n V
RT P

= = =
Ce volume correspond la quantit de biogaz produit pression et temprature utilises pour le calcul
du V
molaire
soit 1013 mbars et 308 K (35 C). Une correction est ncessaire afin de lexprimer dans les
CNTP (273 K et 1013 mbars) selon :
308
273 273
308 308
Gaz
CNTP K
P V
V V
P

= = .
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 116 -
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Le volume de gaz produit entre deux mesures de pression est calcul grce la formule prcdente et
la production cumule de biogaz peut donc tre dtermine et exprime en normo volumes de biogaz
par quantit de matriaux.
La composition du gaz a t suivie laide dun micro chromatographe Agilent phase gazeuse
(Hlium) quip de deux colonnes munies de dtecteurs conductivit thermique : une colonne
Poraplot U pour la sparation du CO
2
et de lH
2
S et une colonne molculaire Molsieve pour
O
2
, N
2
et CH
4
. Les analyses ont t ralises approximativement tous les 3-4 jours en dbut
dincubation, durant la phase de forte production, puis moins frquemment, de manire quasi
hebdomadaire jusqu la fin des exprimentations.
Les analyses du biogaz form tant faites moins frquemment que les mesures de production, des
interpolations linaires ont t effectues afin destimer la composition du biogaz en dioxyde de
carbone, mthane et sulfure dhydrogne pour chaque mesure de pression. Les productions
instantanes de biogaz ont ensuite t pondres afin dobtenir les productions cumules
respectives de chaque gaz.

c. Rgressions sur les courbes de productions cumules de biogaz
Deux types de rgressions ont t raliss sur les productions cumules de mthane ou de biogaz
obtenues.
Lorsque les courbes prsentaient une allure exponentielle, des rgressions exponentielles ont permis
le calcul de deux paramtres, lun cintique, k, la constante de vitesse et lautre stoechiomtrique,
Pot

, le potentiel ultime de biogaz (ou de mthane) atteint, selon lquation suivante (cf. illustration de
la courbe Figure 11, I.1.2.d(iii), prsente pour les consommations doxygne obtenues en
arobiose) :
( ) (1 )
k t
Pot t Pot e

=
avec : Pot (t), production cumule de biogaz ou de mthane (mL.gMS
-1
ou mL.gMV
-1
) en fonction du
temps t (j), Pot

, potentiel ultime de biogaz (mL.gMS


-1
ou mL.gMV
-1
), k, constante de vitesse (j
-1
)

Lquation de Gompertz modifie (Lay et al., 1996) a t utilise afin danalyser les productions
cumules de mthane obtenues pour chaque exprimentation, et particulirement celles prsentant des
phases de latence. Elle a t dveloppe initialement dans le but de dcrire des courbes de croissance
bactrienne et a t modifie notamment afin de dcrire la production cumule de mthane dans une
culture batch . Elle sexprime selon :
( ) exp exp ( ) 1
m
R e
Pot t Pot t
Pot


(
= +
` (
)

avec Pot(t), production cumule de mthane (mL.gMS
-1
) en fonction du temps t (j), , temps de
latence (j), Pot

, potentiel ultime de mthane (mL.gMS


-1
), R
m
, vitesse maximale de production de
mthane (mL.gMS
-1
.j
-1
), e, exponentiel de un.
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 117 -
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Lquation de Gompertz permet de reprsenter des courbes dallure sigmodale laide de trois
paramtres explicites. La Figure 12 illustre lallure dune telle courbe et prcise la signification des
trois paramtres associs, Pot

, R
m
et .

Figure 12 : Courbe de Gompertz et paramtres associs

Les potentiels ultimes (Pot) ont t calculs partir de la moyenne des deux ou trois dernires valeurs
des courbes de productions cumules de biogaz ou de mthane. Les paramtres cintiques, k ou R
m
et
ont t estims laide de la fonction solver de Microsoft Excel, en minimisant la somme du
carr des diffrences entre valeurs exprimentales et valeurs thoriques associes au modle
utilis.
Contrairement aux consommations doxygne obtenues en arobiose, la production cumule de biogaz
a souvent termin avec une pente nulle. Ainsi, le paramtre Pot

a t dtermin exprimentalement,
ceci permettant de navoir plus que deux paramtres calculer avec la fonction solveur .

d. Calcul du pourcentage de minralisation
Un pourcentage de minralisation peut tre calcul en tablissant une production thorique maximale
et en exprimant les potentiels obtenus en pourcentage de cette dernire. Celle-ci peut tre dtermine
laide de la raction de minralisation totale du glucose :
6 12 6 4 2
3 3 C H O CH CO + . Selon cette
raction, la production de biogaz est de 0,746 L (biogaz) par g de glucose dgrad ( 0 C) soit un
potentiel thorique de 746 mL (biogaz).gMV
-1
et de 373 mL (CH
4
).gMV
-1
.
De la mme manire, la production de biogaz thorique maximale exprime par rapport la quantit
de carbone teste est de 1865 mL (biogaz).gCT
-1
(1 g de glucose contenant 0,4 g de carbone) et de
933 mL (CH
4
).gCT
-1
.
Ainsi, en assimilant la matire organique du glucose, un pourcentage de minralisation (% min)
peut tre calcul selon :

[ ] { }
( ) exp exp ( ) / 1
m
Pot t Pot R e t Pot

= +

R
m
Temps (t)
P
o
t

(
t
)


Pot

Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 118 -
LGCIE, INSA Lyon
1
exp
( . )
%min 100
746
Pbiogaz mL gMV

= par rapport au contenu en MV ou


1
exp
( . )
%min 100
1865
Pbiogaz mL gCT

= par rapport au contenu en CT,


et de la mme manire pour les productions de mthane.

I.2.2. Conditions opratoires optimises
Plusieurs sries dincubations ont t ralises avant de parvenir une dgradation anarobie optimale,
c'est--dire prsentant une cintique exponentielle de production du biogaz (et plus prcisment du
mthane) sans phase de latence puis une phase plateau correspondant au potentiel ultime de biogaz
(ou de mthane) du matriau test.
Dans cette partie, la srie dessais ayant conduit la mise au point des conditions optimises est tout
dabord prsente puis, au regard des rsultats obtenus, le protocole appliqu la caractrisation de la
majorit des matriaux tudis est dtaill au b.
a. Incubations de mise au point
Des retards importants (> 10 jours) des productions de mthane ont t observs lors de nombreuses
incubations prliminaires ralises sur diffrents dchets. Afin dtudier limpact de certaines
conditions de mise en uvre du test sur un nombre limit de substrats, une mise au point est apparue
ncessaire. Plusieurs facteurs dinfluence ont t tudis :
la nature du matriau test ; les fines grises (FG) ont t utilises en tant que matriau
reprsentatif dun DMA complexe et la cellulose Avicel (CELL), en tant que matriau de
rfrence, de dgradation thorique connue ;
la proportion en inoculum ; les quantits utilises dans la littrature sont variables et la
concentration en inoculum constitue un facteur dinfluence reconnu (cf. IV.3). La
concentration utilise lors des essais prliminaires tait de 10 % (V
inoculum
/V
total
) et trois
concentrations ont t testes ici : 10, 50 et 100 %
le mode dagitation est galement susceptible daffecter la dgradation. Deux modes ont t
tests, les agitations manuelle et quotidienne ou magntique et permanente
enfin, labsence de Na
2
S dans la solution minrale (dont lemploi est prconis dans la
procdure ISO 11734, 1995) a t value du fait des nuisances olfactives et des risques
quentrane son emploi.

Tous ces essais ont t raliss une concentration de 9 1 gMV.L
-1
. Cette concentration a t choisie
en tant que compromis dans le but de tester une quantit suffisante de matriau, permettant lobtention
dune production de biogaz significative, et galement dassurer la reprsentativit de lchantillon aux
vues de lhtrognit des dchets complexes (pour ces mmes raisons, Hansen et al. (2004)
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 119 -
LGCIE, INSA Lyon
emploient une concentration de 20 gMV.L
-1
mais observent des phnomnes dinhibition pour certains
matriaux). Dautre part, cette concentration apparat aux vues de la littrature ainsi que des rsultats
dincubations prliminaires comme une limite maximale afin dviter une charge organique initiale
trop leve susceptible de dsquilibrer la balance acidogense / mthanogense. Le Tableau 20
rcapitule les conditions exprimentales mises en uvre et prcise le nom donn chaque
exprimentation :

Tableau 20 : Rcapitulatif des conditions dincubation mises en uvre lors de lessai de mise au point du test
dincubation anarobie (PBM)
Exprience
C
Matriau

(gMV.L
-1
)
Prsence de
Na
2
S
Mode
dagitation
V
inoculum
/
V
total
(%)
FG 1 oui manuel 10
FG 2 non manuel 10
FG 3 oui manuel 50
FG 4 oui manuel 100
FG 5 oui magntique 50
FG 6
8,5
oui magntique 100
CELL 1 oui manuel 50
CELL 2 oui manuel 100
CELL 3 oui magntique 50
CELL 4
9,5
oui magntique 100

Les expriences FG 1 et 2 ont t ralises dans des flacons de 2 L afin de reproduire les conditions du
protocole initial. Des flacons de 250 mL ont t utiliss pour les autres exprimentations afin dviter
une consommation excessive dinoculum et galement de permettre lagitation de FG 5 et 6 ainsi que
de CELL 3 et 4, ralise laide dune table dagitation magntique. Une seconde solution minrale a
t prpare dans les mmes conditions que celles dcrites I.2.1.a sans ajout de Na
2
S.9H
2
O pour
lexprimentation FG 2.
Au terme de soixante jours dincubation, alors que la production tait stoppe depuis plusieurs jours
sur les exprimentations FG, des ajouts complmentaires de matire ont t raliss afin dtudier
limpact des conditions initiales sur la cintique et la stoechiomtrie de la raction. En effet, aucune
des conditions mises en uvre pralablement navait permis de satisfaire les objectifs, c'est--dire
lobtention dune cintique exponentielle de production de biogaz (ou de mthane). Ces ajouts ont t
raliss sur lexprience FG 5, cet essai ayant prsent les cintiques les plus rapides lors de la
premire incubation. 4 gMV.L
-1
de FG ont t introduits sous flux dazote dans lun des triplicats
(FG 5a) et la mme quantit de cellulose dans un second (FG 5b). Le troisime flacon (FG 5c) a t
conserv tel quel en tant que nouveau tmoin et afin de retrancher sa production de biogaz celles des
ajouts. Ces essais ont t nomms Ajout FG et Ajout CELL et ont t suivis jusqu larrt des
productions de biogaz. Les exprimentations CELL 1 4 ont t poursuivies jusqu 90 jours, la
production de biogaz ntant pas acheve 60 jours.

En fin dincubation, les phases liquides de certains essais ont t analyses pour leur pH ainsi que leur
contenu en carbone total et carbone inorganique total, aprs filtration 0,45 m. Seules les
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 120 -
LGCIE, INSA Lyon
exprimentations prsentant des caractristiques trs diffrentes en terme de compositions et de
rponses ont t utilises : FG 2 et FG 5 ainsi que CELL 3 et 4.

b. Incubations en conditions optimises
Les deux objectifs principaux de ces incubations ont t :
obtenir une cintique se rapprochant au mieux dune cintique exponentielle pour chaque
matriau afin de dterminer leur vitesse dhydrolyse en conditions optimales
vrifier ladditivit des proprits mesures sur chaque fraction de DMA laide du dchet
MIX

Lincubation par ajout de matire lissue dune premire dgradation (cf. I.2.2.a Incubations de
mise au point) ayant permis lobtention de cintiques exponentielles, le protocole optimis suivant a
t tabli : les substances broyes 1 mm sont incubes en triplicats en phase liquide une
concentration maximale de 10 g MV.L
-1
, sous agitation, 35 C. La phase liquide est compose de
50 % dinoculum et 50 % (v/v) de solution minrale telle que dcrite au I.2.1.a (sans ajout de
Na
2
S.9H
2
O). Des tmoins ngatifs, de mme composition mais ne contenant aucun substrat, sont
galement raliss afin de dterminer le bruit de fond de linoculum. A lissue de cette premire
incubation, lorsque la production de biogaz est termine (production quasi nulle sur plusieurs jours),
un nouvel apport de substrat est ralis sous flux dazote et une seconde incubation est mene une
concentration de 3 5 gMV.L
-1
. En fin dincubation, les phases liquides sont analyses, aprs filtration
0,45 m, pour leur pH ainsi que leur contenu en carbone total et carbone inorganique total.

Les constantes de vitesse obtenues lors des secondes incubations (par ajouts de matire) ont
notamment t utilises en partie modlisation (cf. I.1 Partie C) pour interprter les rponses
obtenues lors des premires incubations pour chaque dchet ou fraction de dchet. La comparaison des
dgradations, exprimentale et calcule, du dchet MIX a t ralise laide des paramtres identifis
lors des premires incubations de chaque fraction de DMA (ce rsultat est prsente en fin de partie
rsultats et discussion car trois matriaux, PB, PC et PJ ont t caractriss dans des conditions
particulires, lors de sries spcifiques prsents dans le prochain paragraphe).

Des bouteilles de petites tailles, 250 et 500 mL, ont t utilises afin dassurer lagitation des milieux,
ralise laide dune table dagitation orbitale, durant la totalit des exprimentations. Plusieurs
sries dincubations ont t menes afin danalyser lensemble des matriaux.
les dchets complexes (LAN, FGF, BRUT et MAT) ont t tudis dabord, une
concentration initiale de 10 1 gMV.L
-1

les fractions organiques de DMA ont t analyses plus tardivement une concentration
initiale de 5 1 gMV.L
-1
lors de deux sries dincubations
Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 121 -
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Le Tableau 21 rsume les matriaux tests et les conditions opratoires mises en uvre lors de chaque
srie.

Tableau 21 : Conditions exprimentales des incubations optimises et matriaux tests lors de chaque srie
dincubations
1
re
incubation 2
me
incubation
Incubations Inoculum
Matriau gMV.L
-1
Ajout de gMV.L
-1
LAN 10 LAN 3
FGF 11 FGF 3
BRUT 10 BRUT 3
MAT 10 MAT 4
S

r
i
e

1

Is
1
T1 Cell 10 - -
DV 5 DV 3
FGb 6 FG 3
DA 9 DA 5
PETT 5 PETT 5
PMAG 5 PMAG 3
TEXTS 5 TEXTS 5
S

r
i
e

2

Is
2

T2 Cell 10 - -
BOIS 5 BOIS 5
TEXTC 5 TEXTC 3
TETRAB 4 TETRAB 5
YE 4 YE 5
MIX 5 - -
S

r
i
e

3

Is
3

T3 Cell 5 CELL 5

La quasi-totalit des substrats a ainsi t teste selon cette procdure. Certains matriaux simples tels
que TIL et BAG nont t incubs quune seule fois et aucun ajout na t ralis, du fait de leur
cintique de dgradation trs lente notamment (cf. I.2.3.a). Par ailleurs, les papiers PB PC et PJ ont
t analyss en condition dajout uniquement, durant ltude de facteurs dinfluence spcifiques
(cf. partie suivante, I.2.3.a).

I.2.3. Etude de facteurs dinfluence spcifiques
Plusieurs sries dincubations ont t mises en uvre afin dtudier des facteurs dinfluence
spcifiques.

a. Taille des particules
Leffet de la taille des particules sur la dgradation anarobie a t valu laide de diffrents
matriaux selon deux procdures.
Partie B : matriels et mthodes
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Tout dabord, les trois papiers, carton (PC), de bureau (PB) et journaux (PJ), ont t utiliss broys
10 et 1 mm. Afin dvaluer limpact de la taille des particules dans des conditions optimales au regard
dventuels autres facteurs dinfluence, ces papiers ont t incubs en conditions dajouts , telles
que dcrites prcdemment ( I.2.2.a et I.2.2.b), c'est--dire par ajout complmentaire de matire des
tests dincubation achevs. Une srie de tests PBM pralablement mis en uvre par Morais (2006) a
t utilise. Cet essai avait pour but dvaluer les potentiels rsiduels de dchets dores et dj incubs
en anarobiose. La production de biogaz tait termine depuis plus de 20 jours au lancement de la
prsente tude. Environ 6 g de papier ont t ajouts par flacon sous flux dazote conduisant des
concentrations de matire de 4-5 g MV.L
-1
. 18 flacons taient disponibles et chaque substrat (PC, PB,
PJ, PC10, PB10 et PJ10) a ainsi t test en triplicats jusqu larrt de la production de biogaz. De
part leur taille importante (flacons de 2 L), les flacons ont t agits manuellement au mieux
quotidiennement.

Par ailleurs, deux autres matriaux, le bois de tilleul et la bagasse de canne sucre (TIL et BAG), ont
t incubs dans les conditions dcrites au I.2.2.b i.e. une concentration denviron 9 g MV.L
-1
, sous
agitation 35 C, la phase liquide tant compose de 50 % v/v inoculum et 50 % v/v solution minrale
(sans ajout de Na
2
S.9H
2
O). Des flacons de 250 mL ont t utiliss pour les matriaux broys 1 mm
(TIL et BAG) avec 60 mL de solution minrale, 60 mL dinoculum (Inoc
step
1) ainsi quenviron 1,25 g
de matriau solide. Afin dassurer la reprsentativit des prises dessais pour les matriaux broys
4 mm (TIL4 et BAG4), des flacons de plus grande taille (500 mL) ont t utiliss pour leur incubation
et la quantit de chacun des constituants impliqus dans le test a t double. Du fait des cintiques
obtenues et afin dobserver les effets long terme au niveau stoechiomtrique notamment, la
production de biogaz de ces essais a t suivie durant prs de 250 jours.
Le Tableau 22 rcapitule le nom donn aux diffrents essais et les conditions gnrales de mise en
uvre.

Tableau 22 : Rcapitulatif des conditions opratoires des incubations pour lanalyse des effets de la taille des
particules et matriaux tests
Flacon Concentration
Essai
(mL) (gMV.L
-1
)
Conditions gnrales
PC 2000 4,7
PC 10 2000 4,7
PB 2000 4,5
PB 10 2000 4,5
PJ 2000 4,3
S

r
i
e

1

PJ 10 2000 4,2
Ajouts des matriaux des tests
PBM achevs
Agitation manuelle et quotidienne
TIL 250 9
TIL 4 500 9
BAG 250 9,5
S

r
i
e

2

BAG 4 500 9,5
Incubations dans 50 % (v/v)
inoculum (Is
1
) et 50 % solution
minrale
Agitation magntique et permanente

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b. Nature de linoculum
Afin dtudier limpact ventuel de la nature de linoculum utilis sur un nombre restreint de
matriaux, les dchets BRUT et MAT ont t tests dans diffrentes conditions dinoculation :
Tout dabord, deux autres inocula que Inoc
step
ont t utiliss. Lun a t constitu partir de lixiviats
de racteurs anarobies de laboratoire mis en uvre par Morais (2006). Ces racteurs avaient pour but
de simuler les conditions denfouissement de dchets mnagers prtraits et se trouvaient en phase
mthanogne (forte proportion de mthane dans le biogaz) au moment du prlvement. Lautre a t
ralis partir de fumier de vache rcupr auprs dun agriculteur des Monts du Lyonnais. Aprs
incubation en ft de 25 litres 35 C pendant prs de deux semaines, deux litres de la phase liquide
ont t prlevs afin de constituer linoculum, le fumier contenant une forte proportion de matriaux
solides faiblement dgradables (paille). Les deux inocula ainsi obtenus, nomms respectivement I
d
et
I
f
, ont t conserv 35 C dans des flacons Schott de 2 litres, chacun quip dun clapet anti-retour
afin dassurer des conditions anarobies strictes jusqu la ralisation des essais. Les incubations ont
t ralises en triplicats en flacons Schott de 500 mL en phase liquide constitue de 50 % v/v
inoculum et de la mme proportion de solution minrale. Le dchet MAT a t test une
concentration de 9 gMV.L
-1
et le dchet BRUT, 7 gMV.L
-1
. Des tmoins raliss dans les mmes
conditions mais sans substrat ont t galement suivis.
Par ailleurs, des incubations ont t conduites sans ajout dinoculum, dans une phase liquide
compose uniquement de solution minrale. Les dchets ont t tests une concentration plus faible
(3 gMV.L
-1
) afin dviter une charge organique excessive au regard de la faible concentration initiale
en microorganismes. Des flacons de 500 mL contenant 200 mL de solution minrale ont t autoclavs
pendant 20 min 120 C afin dassurer la prsence dune flore uniquement endogne aux chantillons.
Aprs refroidissement temprature ambiante, les matriaux ont t ajouts et les phases gazeuses ont
t purges lazote quelques minutes avant fermeture des flacons laide des septums et bouchons
spcifiques.
Ces exprimentations ont ainsi permis de comparer les rendements de biodgradation obtenus sur ces
deux dchets dans diffrentes conditions, partir de quatre type dinocula, en utilisant les rponses
obtenues en I.2.2.b avec Inoc
step
. Le Tableau 23 prcise les noms donns aux diffrents essais et
rsume les conditions mises en uvre.

Tableau 23 : Rcapitulatif des essais raliss dans diffrentes conditions dinoculation
Flacons Conc.

Inoculum Dchet
(mL) (gMV.L
-1
)
Proportion
inoc / sol min
BRUT 7

If

MAT
500
9
50 / 50
BRUT 7

Id

MAT
500
9
50 / 50
BRUT 3


MAT
500
3
0 / 100

Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 124 -
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c. Teneur en eau
Afin danalyser limpact de la teneur en eau, des tests de type PBM en phase solide ont t raliss.
Du fait de la faible quantit de liquide employe, la charge organique implique par de telles
conditions (exprime en gMV.L
-1
par exemple) est a priori beaucoup plus importante quen
suspension aqueuse et, de plus, le milieu ne peut tre efficacement tamponn et/ou inocul. Une
exprimentation prliminaire effectue sur trois papiers (carton, de bureau et journaux) a en effet
dmontr la difficult dtudier cet aspect sans influence majeure dautres facteurs tels que le pH
notamment mais galement lazote pour lequel les papiers prsentent une carence. Les conditions
choisies pour cette exprimentation ainsi que le choix des substrats savrant inadquats, cette dernire
ne sera pas prsente. Les rsultats ont par ailleurs t trs peu rptables (fortes variabilits entre
triplicats).
Cette tude a t renouvele sur le dchet MAT. Celui-ci a t choisi car il prsente notamment les
avantages suivants : un ratio C/N adquat, une faible teneur en matire dgradable do une charge
organique plus modre et, par consquent, un risque dacidification a priori rduit. Afin dassurer des
conditions satisfaisantes (a minima) au dveloppement des bactries mthanognes, un certain volume
de solution minrale ainsi que dinoculum a t utilis dans la totalit des essais. Le matriau a t
incub trois teneurs en eau diffrentes : aux deux valeurs moyennes des capacits de rtention (C
RET1

et C
RET2
) mesures selon le protocole prsent I.1.2.a(iii), nommes ici w
130%
et w
300%
ainsi qu une
teneur suprieure, w
500%
. Dans le but dvaluer conjointement leffet de la concentration initiale en
inoculum, quelques exprimentations ont t menes en augmentant la proportion dinoculum utilise
(et en diminuant les quantits deau ajoutes). De manire gnrale, 5 g de dchet sec ont t placs
dans chaque flacon et une certaine quantit deau puis de solution minrale ont t ajoutes laide
dun pulvrisateur afin dtre rparties de manire uniforme. Les volumes introduits ont t mesurs
par peses laide dune balance de prcision, en considrant une densit de 1 pour les deux solutions.
Placs sous flux dazote, une certaine quantit dinoculum a t additionne aux flacons goutte
goutte laide de seringues de 5 mL et les bouteilles ont t fermes. Les conditions prcises de mise
en uvre de chaque exprimentation sont prsentes dans le Tableau 24. Chacune a t ralise en
triplicats.

(Remarque : la contribution de linoculum en termes de solide t nglige du fait des faibles
volumes utiliss ainsi que de sa teneur en matire sche peu importante)

Tableau 24 : Conditions opratoires des tests PBM en phase solide pour ltude de linfluence de la teneur en eau
Exprimentations Conditions mises en uvre Conditions induites
N Nom Dchet
M
dchet

(g)
V
H2O

(mL)
V
sol min

(mL)
V
inoc

(mL)
V
liq
/ M
sol

(mL.g
-1
)
V
inoc
/ M
dchet

(mL.g
-1
)
1 w
300%
MAT 5 8,5 5 1,5 3 0,3
2 w
130%
MAT 5 0 5 1,5 1,3 0,3
3 w
500%
MAT 5 18,5 5 1,5 5 0,3
4 B
0
3 MAT 5 5,5 5 4,5 3 0,9
5 B
0
5 MAT 5 2,5 5 7,5 3 1,5
6 BRUT solide BRUT 5 8,5 5 1,5 3 0,3

Partie B : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 125 -
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Lexprimentation n1 a constitu en quelque sorte le test de rfrence. Elle a t ralise un ratio
liquide / solide de 3 mL.g
-1
( C
RET1
), laide dun certain volume deau, de solution minrale et
dinoculum. Elle a t nomme w
300%
. Les tests 2 et 3 ont t raliss en modifiant uniquement la
quantit deau ajoute au test impliquant des ratios liquide / solide diffrents, de 1,3 ( C
RET2
) et
5 mL.g
-1
respectivement. Ces tests ont t nomms W
130%
et W
500%
. Les expriences 4 et 5 ont t
effectues des ratios liquide / solide identiques ( C
RET1
), mais des teneurs initiales en inoculum
suprieures et ont t dsignes B
0
3 et B
0
5 respectivement. Le dchet BRUT a t test
paralllement dans les mmes conditions que lexprimentation n1 humidifi sa capacit de
rtention en eau (suppose identique celle du dchet MAT). Cette exprience (nomme BRUT
solide) a t ralise afin de confirmer limpossibilit dtudier limpact de la teneur en eau sur ce
dchet, dans les conditions utilises ici, du fait de sa ractivit et de lacidification du milieu quil est
susceptible dentraner.
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 126 -
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II. Rsultats et discussions
II.1. Caractrisations gnrales
II.1.1. Analyses gravimtriques, lmentaires et physiques
a. MS, MV, CT et N
Les rsultats des analyses de teneurs en MS, MV, CT et N sont rpertoris au Tableau 25. Entre
parenthses sont mentionns les cart-types associs la mesure lorsque cette dernire a t ralise en
triplicats.
.
Tableau 25 : Rsultats des analyses gravimtriques et lmentaires gnrales pour lensemble des matriaux
Matriau MS
(% masse brute)
MV
(% des MS)
CT
(% des MS)
N
(g.kgMS
-1
)
N-NH
3

(g.kgMS
-1
)
BRUT 93,7 (0,4) 59,1 (1,3) 35,8 - 14,5 0,5
STAB 92,1 - 69,7 (5,0) 39,3 - 13,3 0,2
MAT 92,3 (0,3) 57,3 (0,5) 35,5 - 19 0,4
FG 92,4 (0,2) 46,0 (0,4) 28,8 - 16,5 1
FGF 96,5 (0,3) 41,8 (0,6) 30,9 - 15,4 0,6
LAN 95,0 (0,3) 75,6 (0,5) 39,0 - 16,4 0,9
D

c
h
e
t
s

c
o
m
p
l
e
x
e
s

MIX 96,6 (0,5) 73,6 (0,5) - - - -
FGb 95,7 (0,5) 64,9 (1,3) 36,4 (0,8) 19,45 0,7
DA 93,6 (0,1) 94,0 (0,2) 45,2 (3,3) 33,46 0,1
DV 96,5 (0,3) 50,9 (0,7) 33,4 (3,2) 13,20 0,1
PC 90,1 (0,1) 89,0 (0,5) 39,1 (2,7) 0,87 0
PB 94,3 (0,1) 83,1 (0,5) 35,4 (1,4) 0,68 0
PJ 95,6 (0,9) 82,4 (0,1) 34,7 (1,4) 0,89 0
PMAG 97,0 (0,5) 52,6 (1,0) 28,8 (0,0) 0,36 0
PETT 95,4 (2,4) 97,8 (2,0) 38,2 (0,3) 0,81 0
TEXTS 93,2 (1,7) 100 (4,0) 46,4 (0,7) 0,70 0
TETRAB 95,9 (0,2) 93,7 (0,2) - - - -
TEXTC 96,6 (0,3) 99,1 (0,3) - - - -
F
r
a
c
t
i
o
n
s

d
e

D
M
A

BOIS 92,9 (0,9) 98,9 (0,4) 41,0 (1,5) 1,36 0,1
BAG
*
95,3 (2,4) 96,3 (2,1) 42,4 - 3,00 -
TIL 89,8 (1,0) 100 (1,0) - - - -
YE 92,5 (0,5) 91,9 (0,5) - - - -
S
i
m
p
l
e
s

CEL 96,1 (0,5) 100 (0,0) 44,4 - - -
* : analyses en CT et N ralises dans le cadre des travaux de thse de Joseph
Note : Les taux de MS indiqus sont ceux des dchets tels quutiliss dans les tudes de laboratoire et non pas
ceux des dchets frais de dpart

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 127 -
LGCIE, INSA Lyon
b. Analyses lmentaires complmentaires
Les rsultats des analyses de teneurs en COT, CIT, H, N, S et P sont mentionns Tableau 26.

Tableau 26 : Rsultats des analyses lmentaires complmentaires ralises sur quelques matriaux
(en % des MS)
Matriau % COT % CIT % H % N % S % P
BRUT 35,45 0,34 5,04 1,44 1,07 0,34
STAB 38,76 0,52 5,70 1,34 0,39 0,24
MAT 35,09 0,44 4,77 2,18 0,53 0,46
FG 27,59 1,18 4,03 1,39 0,70 0,50
FGF 27,99 2,88 4,76 1,31 0,46 0,38
LANTIC 38,87 0,13 5,67 1,28 1,26 0,23
BAG
*
42,44 0,00 6,10 0,30 0,18 -
* : analyses ralises dans le cadre des travaux de thse de Joseph O.

c. Masse volumique
Le Tableau 27 prsente les masses volumiques dtermines sur certains des matriaux. Ces donnes
ont t principalement exploites en partie modlisation de linfluence de la taille des particules, pour
les quatre premiers matriaux du tableau PJ, PC, PB et TIL.

Tableau 27 : Rsultats des analyses de masse volumique (moyenne et cart-type)
Matriau
Masse volumique
(g.mL
-1
)
PJ 0,60 (0,03)
PC 0,43 (0,05)
PB 0,48 (0,06)
TIL 0,80 (0,06)
DV 0,84 (0,15)
FGb 0,80 (0,09)
TEXT S 0,30 (0,03)
PETT 0,83 (0,10)
PMAG 0,52 (0,01)
BOIS 0,88 (0,23)






Partie B : rsultats et discussions
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d. Capacit de rtention
Le Tableau 28 prsente les rsultats des mesures de capacits de rtention.

Tableau 28 : Rsultats des mesures de capacit de rtention en eau
C
RET1
C
RET2

Matriau
(mL(H
2
O).gMS
-1
)
PC 6,24 2,88
PJ 6,47 2,64
PB 6,59 2,85
MAT
*
3,03 (0,14) 1,33 (0,11)
* : moyennes et carts-type des mesures ralises en triplicats

II.1.2. Demande Biochimique en Oxygne sur solides
Dans un premier paragraphe, quelques aspects prliminaires relatifs la variabilit des rsultats sont
prsents rapidement. Puis, dans un second, sont exposs les rsultats slectionns pour caractriser
lensemble des matriaux tests. Enfin, la comparaison entre les dgradations thorique et
exprimentale du dchet MIX est expose dans une dernire partie.

a. Aspects prliminaires relatifs la variabilit des rsultats
Pour un matriau donn, de nombreuses exprimentations ont tmoign dune certaine variabilit des
mesures de consommation doxygne. Cette variabilit a t observe parfois au sein dune mme
exprimentation, entre triplicats, mais galement entre certaines exprimentations ralises sur le
mme matriau des moments diffrents (rptabilit).

Concernant les variations entre rplicats dune mme manipulation (reproductibilit), plusieurs
phnomnes ont visiblement t lorigine des carts observs : lors de la premire srie
dincubations, tous les triplicats n1 de chaque dchet test ont prsent des cintiques chaotiques
et/ou trs diffrentes des deux autres, relativement homognes (cf. Figure 13). Le problme a
vraisemblablement t dordre technique et, afin dexpliquer que seuls les triplicats n1 aient t
affects, lemplacement des flacons durant le test a trs certainement jou un rle.
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 129 -
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Figure 13 : Exemples de variabilits des consommations cumules doxygne entre rplicats

Un autre type de variation entre triplicats a t observe avec les matriaux BOIS et PMAG o une
consommation doxygne trs importante a eu lieu pour un des triplicats seulement. Les deux
matriaux ayant t tests deux reprises, les graphiques en Figure 14 illustrent les rponses obtenues
en reprsentant la moyenne des cinq respirations homognes avec les carts-type associs ainsi que la
mesure (a priori) aberrante seule (remarque : ces surconsommations doxygne nont pas t
observes lors de la mme exprimentation).

Figure 14 : Autres exemples de variabilits entre rplicats lors des mesures de DBOS

Ces variabilits intra exprimentales restent inexpliques et ces rsultats illustrent limportance de
raliser ce type danalyse laide de plusieurs rplicats. Dans la partie bilan ( b), ces rponses
marginales ont t cartes.
Concernant la rptabilit des mesures, la concentration du matriau test a visiblement t
responsable de certaines variations. Ainsi, les consommations cumules doxygne de certaines
incubations ralises 5 gMV.L
-1
ont prsent des cintiques exponentielles sans rupture et des
variabilits entre triplicats relativement faibles contrairement dautres ralises 10 gMV.L
-1
sur les
mmes matriaux. La Figure 15 illustre ce rsultat sur deux matriaux (DV et FGb) incubs deux
reprises aux deux concentrations lors dexprimentations diffrentes :
BRUT
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
Rep 1
Rep 2
Rep 3
FG
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
Rep 1
Rep 2
Rep 3
PMAG
0
500
1000
1500
2000
0 5 10 15 20
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
BOIS
0
200
400
600
800
0 5 10 15 20
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 130 -
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Figure 15 : Exemples de variabilit des mesures de DBOS entre deux exprimentations diffrentes

Cependant, des effets dus lactivit de linoculum utilis plutt qu la concentration du
matriau ont t galement observs. Plusieurs expriences ralises dans des conditions similaires sur
les mmes matriaux en ont tmoign. Ainsi, sur la cellulose par exemple, les rponses obtenues lors
des sries 3 et 4, ralises dans les mmes conditions des concentrations identiques (5 gMV.L
-1
), ont
prsent des cintiques de dgradation diffrentes, comme le prsente la Figure 16 (alors que les
rsultats des sries 2 et 4 ont t quasi-similaires malgr des concentrations initiales de 10 et 5 g
MV.L
-1
respectivement).
Figure 16 : Consommations cumules moyennes doxygne observes sur la cellulose lors de diffrentes
exprimentations

DV 10 gMV.L
-1
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30
DV 5 gMV.L
-1
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30
FGb 5 gMV.L
-1
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30
FGb 10 gMV.L
-1
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30
CELL
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
Srie 2
Srie 3
Srie 4
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 131 -
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Par consquent, tant donn que lors de chaque exprimentation, un matriau a t test une et une
seule concentration, les effets dus cette dernire ont t cumuls ceux de lactivit de linoculum.
Cela a rendu dlicate linterprtation globale de limpact de chaque facteur.
Concernant les ruptures de cintique obtenues lors de certaines exprimentations, deux phnomnes
ont pu tre distingus. La possibilit selon laquelle la prsence de plusieurs fractions plus ou moins
rapidement dgradables au sein dun mme matriau ait cause une consommation doxygne en deux
temps a t exclue. En effet, certains matriaux composs dune fraction cellulosique homogne, le
papier essuie-tout PETT par exemple, ont prsent parfois de telles cintiques.
Un manque doxygne a visiblement t lorigine de certains ralentissements de lactivit
respiratoire. Ainsi, partir de dpressions de lordre de -140 mbars, des arrts de la consommation ont
t quelquefois observs sur diffrentes exprimentations. La Figure 17 (graphiques de gauche) illustre
le phnomne en prsentant la consommation cumule doxygne et les mesures de dpressions en
parallle, obtenues sur lincubation du dchet FGb 10 gMV.L
-1
. La zone o une carence suppose en
oxygne a eu lieu est entoure (il est cependant notable que des dpressions de -160 mbars ont t
parfois atteintes en dbut dexprimentation sans pour autant affecter la cintique).

Figure 17 : Pressions mesures et DBOs correspondantes obtenues pour deux des rpliquas de lincubation de
FGb 10 gMV.L
-1


A une dpression de 140 mbars, 66 % de loxygne initialement prsent a t consomm et sa teneur
dans les flacons est donc lgrement suprieure 9 % (v/v) (en supposant une teneur de 21 % (v/v)
doxygne dans lair initial, cf. I.1.2.d(iii)). Ce rsultat est en accord avec les observations de Veeken
-180
-160
-140
-120
-100
-80
-60
-40
-20
0
P
r
e
s
s
i
o
n

(
m
b
a
r
)
FGb : 10 gMV/L Rep. 1
0
200
400
600
800
1000
1200
0 5000 10000 15000 20000 25000
Temps (min)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
FGb : 10 gMV/L Rep. 2
0
200
400
600
800
1000
1200
0 5000 10000 15000 20000 25000
Temps (min)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
V
-
1
)
-180
-160
-140
-120
-100
-80
-60
-40
-20
0
P
r
e
s
s
i
o
n

(
m
b
a
r
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 132 -
LGCIE, INSA Lyon
et al. (2003) qui rapportent quen de de 10 % dO
2
dans la phase gaz, les transferts de loxygne vers
la phase liquide deviennent limitants et peuvent affecter la cintique de dgradation arobie.
A dautres reprises, une inhibition particulire autre que le manque doxygne a eu lieu (car observe
sans dpressions importantes), vraisemblablement lie laccumulation de mtabolites intermdiaires
et lacidification temporaire du milieu (cf. Figure 17, graphiques de droite).

Enfin, le matriau TEXTC, incub plusieurs reprises faible concentration, a prsent pour chaque
exprimentation des phases de latence importantes ainsi que des carts significatifs entre triplicats (cf.
Figure 22, le rsultat slectionn obtenu srie 4) et parfois mme une absence totale de respiration
(exprience non prsente). Etant donn la nature a priori principalement cellulosique du matriau
ainsi que laptitude de linoculum dgrader la cellulose (mme microcristalline), la seule cause parat
tre la prsence de composs inhibiteurs particuliers au sein des textiles rcuprs.
Dans la partie suivante, seules sont prsentes les quatre sries qui ont permis, pour lensemble des
matriaux, lobtention de rsultats satisfaisants au regard des variabilits exposes ci-dessus.

b. Rsultats exprimentaux slectionns (conditions dincubation optimales)
Le Tableau 29 regroupe les constantes de vitesse et les potentiels de consommation ultimes obtenus
pour chaque matriau lissue des quatre sries dincubations juges satisfaisantes (dites
optimales ). Lensemble des graphiques reprsentant, pour chaque srie et chaque matriau, la
consommation exprimentale moyenne, les carts-type associs ainsi que la rgression exponentielle
moyenne sont prsents Figure 19, Figure 20, Figure 21 et Figure 22, en fin de partie.

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 133 -
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Tableau 29 : Consommations exprimentales, constantes de vitesse et pourcentages de dgradation obtenus lors
des dgradations optimales
Matriau DBOS

exp
(1)
DBOS

tho
(1)
k % dgradation
Catgorie Nom (mgO
2
.gMS
-1
) (mgO
2
.gMS
-1
) (j
-1
) / MV / CT
Dchets FG
(2)
418 (3) 417 (5) 0,373 (0,026) 85 54
complexes FGF
(2)
334 (19) 336 (19) 0,411 (0,021) 75 41
LAN
(2)
724 (82) 736 (114) 0,284 (0,040) 91 71
BRUT
(2)
491 (73) 518 (64) 0,233 (0,008) 82 54
MAT
(2)
321 (16) 331 (13) 0,237 (0,025) 54 35
MIX 569 (21) 656 (15) 0,102 (0,010) 84 ND
Fractions FGb 746 (29) 747 (58) 0,154 (0,007) 108 77
MODECOM DV 328 (9) 360 (23) 0,083 (0,006) 66 40
DA 933 (41) 933 (41) 0,119 (0,008) 93 77
PJ 637 (10) 708 (17) 0,055 (0,007) 81 76
PC 688 (31) 789 (39) 0,050 (0,010) 82 75
PB 698 (15) 901 (36) 0,036 (0,004) 102 95
PMAG 409 (8) 422 (69) 0,109 (0,003) 75 55
PETT 652 (82) 690 (22) 0,097 (0,011) 66 68
TEXTS 523 (55) 578 (26) 0,081 (0,019) 54 47
TETRAB 495 (21) 576 (42) 0,105 (0,012) 58 ND
TEXTC 234 (73) 249 (49) 0,139 (0,071) 24 ND
BOIS 126 (26) 129 (26) 0,091 (0,016) 12 12
Simples TIL 329 (28) 381 (30) 0,079 (0,013) 36 ND
BAG 1026 (30) 1097 (77) 0,087 (0,011) 107 97
CELL S2 960 (64) 1060 (86) 0,065 (0,004) 99 89
Entre parenthses figurent les cart-types calculs sur la base des rsultats des triplicats
ND : non dtermin
(1) : deux potentiels (DBOS

) sont mentionns, exp et tho car les rgressions ont t ralises sans
contraintes et les valeurs de consommations ultimes obtenues laide du solveur ( tho ) ont parfois t
lgrement suprieures celles effectivement atteintes en fin dincubation ( exp ). Cela a permis notamment
dobtenir des rgressions trs proches des valeurs exprimentales.
(2) : les carts-type mentionns ont t calcul sur la base de deux rsultats seulement, un des triplicats ayant t
cart du fait de sa rponse chaotique (cf. a).

Les pourcentages de dgradation obtenus sur la base du contenu en MV (qui correspondent aux
consommations doxygne par gramme de matire volatile teste) sont en moyenne de 65 22 % (sur
la base des valeurs exprimentales, DBOs

exp ) et de 72 24 % sur la base des valeurs obtenues


partir du solveur , DBOs

tho .
Les DBOS exprimes en terme de MS prsentent une plus grande dispersion et le taux de MV rend
donc compte, en partie, du taux de matire dgradable en arobiose. La Figure 18, illustrant les DBOS
(exprimes par gramme de MS) en fonction des taux de MV pour les diffrents matriaux tests, met
clairement en vidence lexistence logique dune relation linaire entre les deux paramtres pour un
certain nombre de matriaux, de biodgradabilit analogue. Les matriaux BOIS, TIL, TEXTC,
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 134 -
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TETRAB et TEXTS ont cependant prsent des potentiels faibles malgr des taux de MV importants
(proches de 100 %) et se distinguent des autres par leur faible biodgradabilit.
Figure 18 : DBOS en fonction du taux de MV pour chaque matriau test

Pour ces matriaux spcifiques, les pourcentages de dgradation les plus faibles (< 50 %) ont donc t
obtenus (Tableau 14). La nature de leur matire organique explique en tout ou partie ces rsultats.
Ainsi la nature ligneuse des chantillons BOIS et TIL a probablement t responsable des taux de
dgradation observs de 12 et 36 % respectivement. Concernant les fractions TETRAB et TEXTS, la
prsence de plastiques, non biodgradables mais contribuant pleinement aux taux de matire volatile
mesurs, a conduit de faibles taux galement, de 30 et 46 % respectivement. Enfin, la fraction
TEXTC prsente un taux de dgradation de 24 % du fait dune inhibition particulire dj aborde au
paragraphe prcdent.

Pour trois des matriaux, FGb, PB et BAG, des pourcentages de dgradation suprieurs 100 % ont
t obtenus (cf. Tableau 29). Deux hypothses peuvent tre avances :
1- selon le type de matire, le potentiel peut tre plus important que celui considr pour calculer le %
de dgradation o la matire a t assimile du glucose ;
2- une part de la consommation doxygne peut tre impute une autre respiration bactrienne que
celle lie au carbone telle que la dnitrification (lutilisation dun inhibiteur de la dnitrification est
dailleurs recommande, cf. Partie bibliographique). Bien quil soit possible dtablir une respiration
thorique lie au contenu en azote du matriau partir de la caractrisation matire, linoculum et la
solution minrale ont galement t sources dazote et les teneurs des inocula nont pas t
dtermines. PB et BAG prsente plutt une carence en azote tandis que FGb, un ratio C/N trs faible
et aucune tendance en fonction du type de matriau ne peut tre tablie.

Concernant les constantes de vitesses obtenues, les cintiques de dgradation des cinq dchets
complexes tests dans la premire exprimentation ont t nettement suprieures (> 0,2 j
-1
) celles
obtenues sur lensemble des autres matriaux qui se sont avres toutes infrieures 0,2 j
-1
mis part
FG
FGF
LAN
BRUT
MAT
MIX
FGb
DV
DA
PJ
PC
PB
PMAG
PETT
TEXTS
TETRAB
TEXTC
BOIS
TIL
BAG
CELL S2
0
200
400
600
800
1000
1200
40 50 60 70 80 90 100 110
% MV (m/m)
D
B
O
s

(
m
g
O
2
.
g
M
S
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 135 -
LGCIE, INSA Lyon
TETRAB. Les dchets MAT et BRUT ont prsent des vitesses de dgradation similaires (0,237
0,025 et 0,233 0,008 j
-1
) et ces constantes de vitesse nont donc pas reflt leur tat de stabilit
biologique diffrent. Ce point peut paratre en dsaccord avec la littrature o des vitesses de
dgradation sont utilises afin de caractriser la stabilit biologique en arobiose (cf. Partie
bibliographique). Cependant, les vitesses sont alors mesures sur des intervalles de temps relativement
courts (jusqu 4 jours pour lAT4) et exprimes en mgO
2
.gMV
-1
.j
-1
et non en j
-1
. Ces vitesses
correspondent donc la vitesse instantane en dbut de dgradation et donc, dans notre cas, la pente
de la tangente au point (0,0), soit DBOS

k. Ainsi, du fait de leurs potentiels ultimes diffrents,


malgr des vitesses en j
-1
similaires, les dchets BRUT et MAT ont bien des vitesses initiales de
biodgradation diffrentes, exprimes en mgO
2
.gMV
-1
.j
-1
.

Pour conclure, ces valeurs sont principalement intressantes en vue dtudier les corrlations
ventuelles existant avec les paramtres mesurs en anarobiose et notamment du point de vue des
potentiels, c'est--dire, des taux de matires dgradables dtermins dans les deux conditions. Tout
dabord, la comparaison des dgradations exprimentale et calcule du dchet MIX est prsente.

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 136 -
LGCIE, INSA Lyon
Srie 1 (voir conditions exprimentales au Tableau 18, I.1.2.d(ii)) :
Figure 19 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours) pour
chacun des matriaux tests dans la srie 1.
TIL
0
100
200
300
400
0 10 20 30
BAG
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30
BRUT
0
200
400
600
800
1000
1200
0 5 10 15 20
MAT
0
200
400
600
800
0 5 10 15 20
FG
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
FGF
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
LAN
0
200
400
600
800
1000
1200
0 5 10 15 20
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 137 -
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Srie 2 (voir conditions exprimentales au Tableau 18, I.1.2.d(ii)) :
Figure 20 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours) pour
chacun des matriaux tests srie 2.
PJ
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30 40
PC
0
100
200
300
400
500
600
700
800
0 10 20 30 40
PB
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30 40
CELL
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30 40
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 138 -
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Srie 3 (voir conditions exprimentales au Tableau 18, I.1.2.d(ii)) :
Figure 21 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, , les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours) pour
chacun des matriaux tests srie 3 (pour DA et CELL, les rgressions nont pas t ralises de part lallure des
consommations obtenues).
BOIS
0
50
100
150
200
0 10 20 30
TEXTS
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30
P Mag
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30
PETT
0
100
200
300
400
500
600
700
800
0 10 20 30
FGb
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
0 10 20 30
DV
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30
CELL
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30
DA
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 139 -
LGCIE, INSA Lyon
Srie 4 (voir conditions exprimentales au Tableau 18, I.1.2.d(ii)) :
Figure 22 : Consommations cumules moyennes doxygne (mgO
2
.gMV
-1
, les barres verticales reprsentent
lcart type des valeurs des triplicats) et rgressions exponentielles associes en fonction du temps (jours) pour
chacun des matriaux tests srie 4 (pour BOIS, les rsultats de chaque triplicats est illustr sans rgression du
fait des rsultats inhomognes)
DA
0
200
400
600
800
1000
1200
0 5 10 15 20
BOIS
0
200
400
600
800
0 5 10 15 20
TETRAB
0
100
200
300
400
500
600
0 5 10 15 20
MIX
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
TEXTC
0
50
100
150
200
250
300
350
0 5 10 15 20
CELL
0
200
400
600
800
1000
0 5 10 15 20
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 140 -
LGCIE, INSA Lyon
c. Dchet MIX : comparaison des dgradations exprimentale et calcule
A partir des mesures de DBOS effectues sur chacune des fractions composant le dchet MIX et des
proportions massiques de ces fractions au sein de ce dchet reconstitu, une dgradation thorique
peut tre calcule selon la formule suivante : ( ) % (1 )
i
MIX
k t calc
i i
i
DBOS t DBOS e


avec - i : fractions composant le dchet MIX
- %
i
: pourcentage massique de la fraction considre (en terme de MS)
- DBOS
i
et k
i
: potentiel (exprim en gMS) et constante de vitesse (j
-1
) de la fraction
considre

La Figure 23 illustre les consommations doxygne en fonction du temps, obtenues exprimentalement
et par le calcul. Hormis un lger dcalage, la tendance est similaire indiquant une trs bonne additivit
des proprits dtermines en arobiose.
Figure 23 : Consommations cumules doxygne exprimentale
et calcule du dchet reconstitu MIX

.Ce premier rsultat rvle :
ladditivit des proprits de biodgradation mesures sur les fractions individuellement
la robustesse du test malgr certaines rponses chaotiques qui ont ncessit dincuber certains
matriaux plusieurs reprises
le protocole satisfaisant de reconstitution du dchet MIX

Ce dernier point est dailleurs galement confirm par le taux de MV exprimental du dchet MIX de
73,6 % vis--vis du taux calcul (de la mme manire que pour la DBOS) de 73,8 %...
Une dmarche similaire sera tablie pour le dchet MIX teste en anarobiose (cf. II.2.4)

0
100
200
300
400
500
600
700
0 5 10 15 20 25
Temps (jours)
D
B
O
s

(
m
g
O
2

.
g
M
S
-
1
)
MIX exp
MIX calc
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 141 -
LGCIE, INSA Lyon
II.2. Incubations anarobies
Les rsultats des incubations de mise au point sont prsents dans un premier temps. Les conclusions
de ces expriences prliminaires ont permis la mise au point du protocole optimis mis en uvre sur la
majorit des matriaux dont les rsultats sont prsents en seconde partie. Enfin, les exprimentations
ralises pour ltude de diffrents facteurs dinfluence spcifiques, telles que la taille des particules,
la nature de linoculum et la teneur en eau, sont discutes dans une dernire partie.

II.2.1. Incubations de mise au point
Ces incubations ont permis dvaluer limpact de diffrentes conditions de mise en uvre des tests
PBM (prsence de Na
2
S dans la solution minrale, agitation, concentration en inoculum) sur deux
matriaux : un dchet complexe (les fines grises) et un matriau simple , la cellulose. Du fait de
leurs rponses significativement diffrentes, les exprimentations ralises respectivement sur les fines
grises (FG) et sur la cellulose Avicel (CELL) ont t abordes une une.
Les blancs (inoculum seul, sans matire ajoute), avec ou sans solution minrale, ont produit des
quantits ngligeables de biogaz et de mthane vis--vis des autres essais. Les quelques millilitres
produits ont t retranchs aux productions mentionnes ci aprs mais reprsentent moins de 0,1 % du
biogaz (du mthane) produit dans les essais.

a. Essais avec les fines grises :
Le Tableau 30 propose un rsum des productions de biogaz obtenues. Les conditions de mises en
uvre dtailles de chaque essai ont t prsentes en partie Matriels et mthodes, I.2.2.a, et les
principales conditions opratoires sont rappeles Tableau 30.

Tableau 30 : Rsultats moyens et cart-types des potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques des
productions de mthane
Conditions opratoires Pot CO
2
Pot H
2
S Pot CH
4
Rm
Essai
Na
2
S
1
Agitation
2
% Inoc
3

(ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
FG 1 oui - 10 173 (3) 3,86 (1,39) 212 (4) 9,6 (0,1) 15,6 (0,7)
FG 2 non - 10 170 (8) 5,41 (1,03) 213 (11) 10,4 (0,8) 15,8 (0,7)
FG 3 oui - 50 189 (2) 0,39 (0,09) 217 (1) 13,0 (0,7) 11,5 (0,4)
FG 4 oui - 100 203 (7) 0,10 (0,02) 222 (6) 13,5 (1,1) 11,4 (0,5)
FG 5 oui 50 181 (4) 0,17 (0,00) 203 (4) 17,5 (1,5) 8,0 (0,2)
FG 6 oui 100 210 (8) 0,08 (0,01) 213 (8) 14,6 (1,9) 9,5 (0,3)
Ajout FG -
- 145 - 0,00 - 225 - 25,8 - 1.6 -
1 : prsence de Na
2
S dans la solution minrale
2 : mode dagitation : -, manuelle et quotidienne ou , magntique et permanente
3 : proportion dinoculum utilis en % (v/v) du volume total, inoculum et solution minrale

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 142 -
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La Figure 24 illustre graphiquement les productions cumules moyennes de dioxyde de carbone et de
mthane en fonction du temps ainsi que les rgressions de Gompertz associes aux productions de
mthane pour chacun de ces essais. Des figures spcifiques illustreront, dans la suite de la discussion,
certaines comparaisons entre les diffrents essais.
Figure 24 : Productions cumules moyennes de biogaz (mL.gMV
-1
) et cart-types associs en fonction du temps
(jours) pour les incubations de fines grises, avec pour symboles : (o), CO
2
; (+), CH
4
; (), rgression selon
lquation de Gompertz (cf. Tableau 30 le rappel des conditions de mise en uvre)
Temps (jours)
FG 1
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
FG 2
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
FG 3
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
FG 4
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
FG 5
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
FG 6
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
Ajout FG
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)

Temps (jours)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 143 -
LGCIE, INSA Lyon
Les productions cumules de biogaz des six exprimentations initiales (FG 1 6) ont prsent une
allure globalement similaire. Contrairement au dioxyde de carbone, des temps de latence ont t
observs sur la production de mthane. Du fait du dcalage ainsi induit entre les productions de CO
2
et
CH
4
durant les premiers jours, la production cumule totale (des deux gaz) a prsent une allure
globale bi phasique comme lillustre la Figure 25. Cette allure gnrale est galement rapporte
dans la littrature, notamment lorsque le suivi de la production est ralis sur le biogaz total sans
distinction du mthane et du dioxyde de carbone tel que dans les travaux de Chen et al. (1995
Sardinia), Gartiser et al. (1998) ou encore de Adani et al. (2001 Sardinia...) par exemple.
Figure 25 : Illustration des productions cumules de biogaz total obtenues lors des essais de mise au point

Malgr une allure gnrale commune, les cintiques de production ainsi que certains potentiels ultimes
obtenus diffrent selon les exprimentations et une approche gaz par gaz a facilit la discussion des
rsultats obtenus.
Avant tout, la comparaison des rsultats des exprimentations FG 1 et 2 (cf. Tableau 30) indique
labsence deffet de Na
2
S dans la solution minrale. Tous les paramtres mesurs quils soient
cintiques ou stoechiomtriques ont globalement t similaires. Seul les potentiels ultimes moyens en
H
2
S prsente une lgre diffrence (sans utilisation de Na
2
S, plus dH
2
S a t produit) mais la
diffrence nest pas significative. Le Na
2
S tant ajout afin dassurer des conditions rductrices, il
savre que le dgazage des flacons a t suffisant afin dobtenir des conditions anarobies
satisfaisantes.

(i). Productions de mthane
La moyenne et cart-type des productions cumules ultimes en mthane obtenues sur lensemble des
19 incubations (FG 1 6, en triplicats, et ajout) a t de 215 et 7 mL.gMV
-1
, correspondant un
coefficient de variation relativement faible, de 3 %. Ce potentiel moyen concorde avec les valeurs
mentionnes dans la littrature. Vavilin et al. (2004) ont estim un potentiel de 245
15 mL(CH
4
).gMV
-1
pour la fraction fine dun dchet gris et Owens et Chynoweth (1993)
rapportent des valeurs comprises entre 205 et 222 mL (CH
4
).gMV
-1
pour des fractions fines
organiques de DMA. Les diffrences entre les potentiels des six groupes de triplicats (FG 1 6) ne
0
100
200
300
400
500
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

e
n

b
i
o
g
a
z

t
o
t
a
l

(
N
m
l
.
g
M
V
-
1
)
FG 2
FG 4
FG 6
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 144 -
LGCIE, INSA Lyon
sont statistiquement pas significatives (test de Kruskal-Wallis, = 0,05) et le potentiel obtenu lors de
la seconde incubation par ajout a t cohrent (seuls les potentiels ultimes en mthane nont dailleurs
pas prsent de diffrences significatives, cf. ci-aprs). Ainsi, chacune des conditions mises en uvre a
permis lobtention, au terme de soixante jours dincubation, dun potentiel ultime en mthane
similaire. Pour lensemble des essais, le biogaz produit en fin dincubation prsentait un rapport
CH
4
/CO
2
de 70/30. Proportion dinoculum et agitation manuelle ou magntique nont donc pas eu
deffets stoechiomtriques sur la production de mthane mais principalement des effets cintiques.
Comme lillustre la Figure 26, lagitation magntique a globalement acclr la production de mthane
en diminuant les temps de latence et en augmentant lgrement les vitesses maximales de production
(cf. Tableau 30). Lagitation magntique permanente a donc amlior la dgradation probablement en
favorisant le contact entre substrats et microorganismes ainsi que leurs enzymes Leffet a t plus
important et significatif sur les exprimentations ralises avec 50 % dinoculum.

Figure 26 : Effet de lagitation manuelle ou magntique sur les productions cumules moyennes de mthane avec
utilisation de 50 et 100 % dinoculum

Les rsultats des essais FG 1 (10 % inoculum), FG 3 (50 % inoculum) et FG 4 (100 % inoculum), tous
agits manuellement, illustrent les effets de la proportion dinoculum. Le passage de 10 % 50 ou
100 % dinoculum a fortement rduit les temps de latence et augment la vitesse maximale de
production (cf. Tableau 30). Ainsi, entre 10 et 50 % dinoculum, les vitesses maximales de production
de mthane ont augment de 35 %, passant de 9,6 13 mL (CH
4
).gMV
-1
.j
-1
respectivement, et les
temps de latence ont diminus de 25 %, de 15 11 jours. Avec lutilisation dune concentration de
100 % dinoculum (FG4), les taux maximums et temps de latence moyens ont respectivement
augment et diminu faiblement mais la diffrence avec FG 3 50 % na pas t significative (cf.
Tableau 30). Les rsultats obtenus sur les exprimentations avec agitation magntique (FG 5 50 % et
FG 6 100 % dinoculum) rvlent mme que la cintique de production de mthane la plus rapide a
t observe pour la concentration initiale en inoculum de 50 % (cf. Tableau 30), impliquant deux
possibilits : prsence dun compos lgrement toxique dans linoculum ou carence particulire
comble grce lutilisation de la solution minrale. Cette deuxime possibilit parat plus probable.
Les effets de la proportion dinoculum utilis et donc de la concentration initiale en bactries ont donc
pu tre partiellement masqu par ce phnomne de carence.
Inocul um 50 % (v/v)
0
50
100
150
200
250
0 20 40 60
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

d
e

C
H
4
(
N
m
l

.
g
M
V
-
1
)
FG 3 Manuelle
FG 5 Magntique
Inocul um 100 % (v/v)
0
50
100
150
200
250
0 20 40 60
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

d
e

C
H
4
(
N
m
l

.
g
M
V
-
1
)
FG 4 Manuelle
FG 6 Magntique
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 145 -
LGCIE, INSA Lyon
Lexprience ralise par ajout complmentaire de substrat aprs les premires incubations (Ajout FG)
permet une comparaison plus reprsentative des impacts cintiques. Cependant, cet essai ayant t
men une concentration de MV plus faible que les incubations initiales, la juxtaposition des
cintiques observes prsente, de manire plus gnrale, les effets du ratio inoculum / substrat (I/S).
La Figure 27 illustre graphiquement les diffrences observes.

Figure 27 : Productions cumules de mthane en fonction du temps selon la quantit dinoculum utilise (10, 50
ou 100 % v/v) et aprs ajout complmentaire de substrat

Les temps de latence sont probablement dus lacclimatation des microorganismes aux conditions
environnementales et aux substrats (Nopharatana et al., 2007) mais peuvent tre aussi imputs la
croissance lente des bactries mthanognes, en accord avec leur taux de croissance faible
(Chynoweth et Pullammanappallil, 1996), et par l mme leur concentration initiale.
Les temps de latence obtenus sur les premires incubations (FG 1 6) se sont tals de 8 prs de 16
jours, les phases les plus longues tant associes aux exprimentations ralises avec le moins
dinoculum (10 %). Ces temps relativement importants peuvent sexpliquer par les trs faibles ratios
I/S employs dans les conditions mises en uvre. Daprs les caractristiques de linoculum
(prsentes plus loin, Tableau 31) et la concentration de dchet utilise, les ratios I/S associs aux
exprimentations ralises avec 10, 50 et 100 % dinoculum ont t respectivement de 0,04, 0,18 et
0,37 (MV
Inoculum
/MV
Substrat
) alors que les ratios recommands dans la littrature sont de un et plus
(Gunaseelan, 1997) sur la base des taux de MV galement. Hashimoto (1987, cit par Gunaseelan,
1997) a rapport que, pour des ratios infrieurs 0,25, les potentiels mthanognes peuvent tre
largement minors. Cet effet na pas t observ ici avec les fines grises puisque, quel que soit le ratio
mis en uvre, les potentiels ont t similaires. Du fait que la matire volatile de FG ne soit pas
intgralement dgradable et galement que le dchet soit susceptible de contenir des microorganismes
endognes, les ratios I/S rels ont t probablement plus levs que ceux calculs ci-dessus. Dailleurs,
en considrant un potentiel thorique maximal de 415 mL (CH
4
).gMV
-1
pour des composs de type
cellulosique, seule la moiti de la matire volatile de FG peut tre considre comme dgradable,
impliquant des ratios I/S deux fois plus importants que ceux calculs et expliquant en partie labsence
deffets stoechiomtriques. Quoi quil en soit, les effets cintiques ont t significatifs lors des
0
50
100
150
200
250
0 20 40 60
Temps (jours)
P
r
o
d

c
u
m
u
l

e

e
n

m

t
h
a
n
e

(
N
m
l
.
g
M
V
-
1
)
10 %
50 %
100 %
Ajout
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 146 -
LGCIE, INSA Lyon
premires incubations et le sont dautant plus au regard des rsultats obtenus par ajout. Du fait de
lajout dune quantit moindre (3 gMV.L
-1
) et de la croissance suppose des microorganismes lors de
la premire incubation, le ratio I/S impliqu lors de lajout a du tre beaucoup plus lev et cette
incubation a ainsi permis une production de mthane sans phase de latence avec une allure quasi-
exponentielle (cf. Figure 27).
Enfin, il est apparu notable que plus la phase de latence a t longue plus la vitesse maximale de
production du mthane a t faible. Ce rsultat a t observ sur lintgralit des exprimentations et la
corrlation significative obtenue entre les deux paramtres est prsente Figure 28.
Figure 28 : Corrlation entre les vitesses maximales et les temps de latence des productions de mthane de
lensemble des exprimentations de mise au point sur les fines grises (voir Tableau 30 pour les conditions
opratoires)

Selon Cho et al. (1995), la diminution du taux de production de mthane associe une diminution du
ratio I/S peut tre impute la prsence accrue dAGV, consquence du dsquilibre de la balance
acidogense / mthanogense. Ainsi, la diminution des vitesses de production du mthane observe
dans nos essais est donc trs vraisemblablement due une lgre inhibition de la mthanogense due
une accumulation dAGV. Cette accumulation na par ailleurs t que transitoire notamment puisque
les potentiels ultimes en mthane ont t similaires (de plus, FG 2 et 5 ont prsent en fin dincubation
des pH et teneurs en COT en solution similaires (cf. Tableau 31, prsent ci aprs).

(ii). Productions de CO
2

Du fait de lhydrosolubilit trs leve du dioxyde de carbone en comparaison avec celle du mthane,
les productions de CO
2
obtenues lors de tests de potentiel mthanogne ne sont, la plupart du temps,
pas mentionnes dans la littrature. De plus, en cas dacidification, ce dernier est gazifi causant
potentiellement des surestimations (Shelton et Tiedje, 1984). Contrairement aux potentiels de
mthane, les potentiels ultimes de CO
2
obtenus sur la srie des six incubations initiales ont prsent
des diffrences significatives (test de Kruskal-Wallis, = 0,05). Ces dernires sont apparues
directement lies la proportion dinoculum utilise. Sur les exprimentations ralises avec 10, 50
et100 % dinoculum, les productions cumules moyennes de CO
2
ont t de 169, 185 et 207 mL.gMV
-
1
respectivement. Ainsi, la quantit de CO
2
gazifie a t plus faible lorsque la solution minrale tait
Ajout
FG6
FG5
FG4
FG3
FG2
FG1
R
2
= 0,97
0
5
10
15
20
25
30
0 5 10 15 20
lambda (jours)
R
m

(
m
l
.
g
M
V
-
1
.
j

-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 147 -
LGCIE, INSA Lyon
prsente en plus grande proportion, trs probablement du fait de sa capacit de solubilisation plus
importante que linoculum, dores et dj charg en carbone inorganique dissous. Les analyses de
carbone inorganique total en en solution ont, en partie, confirm cette hypothse (cf. Tableau 31). A
partir des teneurs en CIT de linoculum utilis, il est possible de calculer des teneurs initiales de 43 et
217 mgCIT.L
-1
pour les exprimentations FG 2 et FG 5 respectivement (en supposant des teneurs
nulles dans la solution minrale). Malgr ces diffrences de teneurs initiales, en fin dincubation, les
teneurs en CIT ont t trs proches, de 434 mgC.L
-1
pour FG 2 et de 446 pour FG 5c (rplicat sans
ajout) et laccumulation du CIT en solution a donc t lgrement suprieure pour les essais FG 2,
contenant une plus forte proportion de solution minrale.

Tableau 31 : Rsultats des analyses de carbone en solution de linoculum utilis et de diffrents essais de la mise
au point en fin dincubation
% C liquide
Inoculum
*
et essai pH CT mg.L
-1
COT mg.L
-1
CIT mg.L
-1

% C
gaz Org. Inorg. Total
Is
1
7,8 559 125 434 - - - -
FG 2 8,4 537 (53) 117 (6) 420 (50) 32 2 7 9
FG 5 a 8,3 745 187 558 32 2 5 6
b 8,2 608 144 465 44 1 4 5
c 8,3 587 141 446 33 1 4 6
CELL 3 6,9 1696 (149) 1691 (151) 5 (2) 48 38 -5 33
CELL 4 8,0 954 (99) 252 (21) 703 (84) 78 3 6 9
Avec : % C gaz = % carbone test gazifi = mgC(biogaz)/L sur mgC(substrat)/L *100
% C liquide = % carbone test accumul en solution
= (mgC_fin.L
-1
mgC _initial.L
-1
) / (mgC_substrat.L
-1
)*100
* : inoculum avec 7,5 gMS.L
-1
et 3,4 gMV.L
-1

(iii). Productions de sulfure dhydrogne
Les productions dH
2
S obtenues ont illustr en quelque sorte le phnomne de comptition existant
entre les bactries sulfato-rductrices et mthanognes (Batstone et al., 2002). Plus les phases de
latence sur la production de mthane ont t longues plus les productions cumules ultimes en sulfure
dhydrogne ont t importantes (cf. Tableau 30). Le gaz na t produit que durant les quinze
premiers jours avant le dbut des productions stables de mthane. Lors de la seconde incubation de FG
(ajout), avec une concentration a priori suprieure en bactries mthanognes, le gaz na pas t
dtect. Labsence de diffrences significatives entre les potentiels en mthane permet cependant de
conclure que la rduction des sulfates na pas eu deffets considrables sur la dgradation anarobie
comme le rapportent galement Wang et al. (1994) lors dincubations anarobies de DM galement (sa
prise en compte semble ncessaire dans des environnements spcifiques, riches en sulfates). Malgr
labsence de comptition pour le substrat (potentiels identiques), une lgre inhibition due lH
2
S est
tout de mme probable pour les essais raliss 10 % dinoculum o la quantit totale moyenne de
gaz produit a t importante, denviron 5 mL.gMV
-1
. En supposant quavant dtre gazifis, la totalit
se trouvait dissous en solution, une concentration de presque 70 mg.L
-1
aurait t atteinte, les valeurs
inhibitrices (CI 50%) de la littrature se situant vers 50 mg.L
-1
et dinhibition totale 200 mg.L
-1
, pour
la forme libre du compos (Wens et al.., 2001). Cette inhibition potentielle et transitoire a peut tre
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 148 -
LGCIE, INSA Lyon
jou galement un rle dans les temps de latence de la production de mthane trs importants de FG 1
et 2.

b. Essais avec la cellulose
Le Tableau 32 prsente un rsum des productions de biogaz obtenues. Les conditions de mise en
uvre dtailles de chaque essai ont t prsentes en partie Matriels et mthodes, I.2.2.a, et les
principales conditions opratoires sont rappeles Tableau 32. La Figure 29 illustre graphiquement les
productions cumules moyennes de dioxyde de carbone et mthane en fonction du temps ainsi que les
rgressions de Gompertz associes aux productions de mthane de chaque essai.

Tableau 32 : Rsultats moyens et cart-types des potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques des
productions de mthane obtenus lors des essais de mise au point avec la cellulose
Conditions opratoires P CO
2
P H
2
S P CH
4
Rm
Essai
Na
2
S
1
Agitation
2
% Inoc
3

(ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
CELL 1 oui - 50 279 (21) 0,42 (0,04) 160 (14) 9,0 (1,1) 27,8 (1,7)
CELL 2 oui - 100 383 (5) 0,24 (0,01) 289 (2) 15,4 (0,5) 29,3 (0,5)
CELL 3 oui 50 267 (15) 0,13 (0,01) 132 (10) 4,9 (0,3) 22,2 (0,2)
CELL 4 oui 100 381 (3) 0,11 (0,00) 269 (3) 17,0 (0,1) 25,8 (0,6)
Ajout CELL -
- 404 - 0,12 - 250 - 18,1 - 0,6 -
1 : prsence de Na
2
S dans la solution minrale
2 : mode dagitation : -, manuelle et quotidienne ou , magntique et permanente
3 : proportion dinoculum utilis en % (v/v) du volume total, inoculum et solution minrale

Les productions cumules obtenues lors des incubations de cellulose ont rvl diffrents phnomnes
dinhibition. La teneur en inoculum a t, de loin, le facteur dinfluence prpondrant. Pour les
exprimentations CELL 1 et 3, ralises avec 50 % dinoculum, les productions cumules de biogaz
total (CO
2
+ CH
4
) ont eu une allure similaire celles observes sur le dchet FG. Du fait des temps de
latence sur la production de mthane, la production cumule en biogaz total a prsent une allure
globale bi phasique comme prsente Figure 25 pour les exprimentations FG (cf. Figure 29, les
productions de CO
2
et CH
4
de la cellulose). Cependant, les productions de biogaz de ces essais ont
prsent une inhibition importante. Tout dabord, les proportions en CH
4
du biogaz produit nont pas
dpasses 50 %. De plus, les productions volumiques cumules ultimes atteintes, au terme de 90 jours
dincubation, ont t trs faibles au regard des potentiels thoriques maximums de la cellulose
(P CH
4
= P CO
2
= 415 mL.gMV
-1
, cf. Partie bibliographique) puisquelles ont t de 160 et
130 mL(CH
4
).gMV
-1
et de 279 et 267 mL(CO
2
).gMV
-1
pour les essais CELL 1 et CELL 3
respectivement (cf. Tableau 32). Les rsultats des analyses post incubations ralises sur CELL 3
tmoignent dun phnomne daccumulation dacides au sein de ces exprimentations. La teneur finale
moyenne en COT dissous a t de 1691 mgCOT.L
-1
contre des teneurs de 100 200 mgCOT.L
-1
dans
linoculum utilis tout comme au sein des phases liquides finales des exprimentations FG.
Conjointement, la teneur finale en CIT liquide de CELL 3 a t trs faible, de 5 mgCIT.L
-1
, cause de
l acidification du milieu (cf. Tableau 31). Ainsi, sur les 3800 mgCOT.L
-1
tests (9,5 g.L
-1
de
cellulose), prs de 50 % ont t gazifis et 40 % se sont accumuls en solution (cf. Tableau 31). La
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 149 -
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quasi-totalit de la cellulose a donc t hydrolyse, solubilise, et linhibition observe a
principalement concerne la mthanognse. Le pH final est cependant proche de la neutralit (6,9)
trs certainement du fait du pouvoir tampon du milieu et linhibition observe a donc, a priori, t
principalement due aux AGV accumuls et non aux ions H
+
. partir de 50 jours dincubation, la
production de biogaz a t quasi nulle (cf. Figure 29) et na pas repris du fait de cette inhibition aux
acides.

Figure 29 : Productions cumules moyennes de biogaz (mL.gMV
-1
) et cart-types associs en fonction du temps
(jours) pour les incubations de cellulose, avec pour symboles : (o), CO
2
; (+), CH
4
; (), rgression selon
lquation de Gompertz (cf. Tableau 32, le rappel des conditions de mises en uvre)

CELL 1
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CELL 2
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CELL 3
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CELL 4
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Ajout CELL
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n
s

c
u
m
u
l

e
s

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 150 -
LGCIE, INSA Lyon

Durant les 50 premiers jours, les productions cumules obtenues sur les exprimentations CELL 2 et
4, ralises dans 100 % dinoculum, ont prsent un profil quelque peu similaire malgr une lgre
production initiale de mthane et une production de dioxyde de carbone plus importante que sur
CELL 1 et 3. (cf. Figure 29). Aprs 50 jours approximativement, la production de mthane a
cependant repris conduisant une allure gnrale tri modale de la production de biogaz total
cumul sur CELL 2 et 4 (et une allure bi modale sur les productions respectives de CO
2
et CH
4
, cf.
Figure 29). Les 50 % dinoculum supplmentaires ont donc vit une accumulation irrversible
dacides et ont visiblement permis la reprise de lactivit mthanogne. Les teneurs en mthane du
biogaz ont dpass 50% autour du 45
me
jour pour atteindre des proportions de 70 % la fin des
incubations (au-del du 60
me
jour). Les analyses post incubation de CELL 4 confirment que la
majeure partie de la matire solubilise a t minralise car les teneurs finales en COT dissous sont
faibles, denviron 250 mgCOT.L
-1
. Linoculum de dpart avait une teneur de 125 mgCOT.L
-1
donc
approximativement 125 mgCOT.L
-1
se sont accumuls en phase liquide lors de la dgradation sur les
3800 mgCOT.L
-1
tests soit moins de 4 % (cf. Tableau 31). Malgr tout, les productions volumiques
cumules ultimes, et notamment celles en mthane, ont prsent galement un cart significatif avec
les potentiels thoriques puisque sont de 289 et 269 mL(CH
4
).gMV
-1
et de 383 et 381 mL(CO
2
).gMV
-1

pour CELL 2 et CELL 4 respectivement (cf. Tableau 30). Mme en considrant les limites de
lapproche stoechiomtrique prsentes partie bibliographique, les potentiels mthanognes ont t
faibles (en supposant que 5 % du mthane est solubilis et que 20 % du carbone est utilis pour la
synthse bactrienne, le potentiel minimal de la cellulose est de 315 mL.gMV
-1
).
Si laccumulation de carbone inorganique en solution est prise en compte, les potentiels ultimes en
CO
2
savrent mme suprieur au potentiel thorique. En effet, 269 mgCIT.L
-1
se sont accumuls en
solution lors de lincubation de CELL 4. Ces 269 mgCIT.L
-1
reprsentent un potentiel de 53 mL.g
-1
de
cellulose teste do un potentiel ultime en CO
2
de 433 mL(CO
2
).gMV
teste
-1
. Ainsi, le dfaut de CH
4

au regard de la forte production de CO
2
obtenue peut sexpliquer en partie par linfluence des bactries
hydrognophiles qui convertissent le dioxyde de carbone en mthane ( laide de dihydrogne, cf.
Partie bibliographique). Les dgazages raliss afin dviter loccurrence de pressions trop leves
peuvent avoir dtourn du systme une partie du dihydrogne, ce qui a induit un potentiel ultime en
mthane plus faible. Cependant, le dihydrogne produit na pas t analys et cette hypothse ne peut
tre confirme. Limpact de lactivit de ces microorganismes est galement avanc par Gartiser et al.
(1998) afin dexpliquer des rendements faibles et des cintiques retardes lors dincubation de
polymres cellulosiques en test PBM (les auteurs prsentent des impacts importants sur les
productions de biogaz des teneurs initiales en CIT liquide).
Ainsi, les effets stoechiomtriques induits par lutilisation de faibles ratios I/S, rapports par
Hashimoto (1987, cit par Gunaseelan, 1997, cf. II.2.1.a(i)), ont t observs sur les incubations de
cellulose. Pour des ratios I/S de 0,2 et 0,4 pour les essais avec 50 et 100 % dinoculum respectivement,
les potentiels mthanognes ont t largement minors, dans le premier cas cause dune
accumulation irrversible dacides et dans le second, dun autre phnomne.

Bien que la concentration en inoculum ait donc t le facteur primordial pour les incubations de
cellulose, limpact de lagitation a t tout de mme visible comme lillustre la Figure 30.
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 151 -
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Figure 30 : Effet de lagitation manuelle ou magntique sur les productions cumules moyennes de mthane avec
utilisation de 50 ( gauche) et 100 % ( droite) dinoculum

Ainsi, leffet dacclration de la production de biogaz et plus particulirement de mthane observe
sur les exprimentations FG a t galement observ sur les incubations de cellulose. Les productions
cumules des essais avec agitation magntique ont, en effet, prsent une petite avance sur ceux agits
manuellement (cf. Figure 30). En fonction de la proportion dinoculum, les effets globaux ont
cependant t diffrents. Dans les essais raliss avec 100 % dinoculum, lavance induite par
lagitation magntique a t conserve jusqu la fin des productions (cf. graphique de droite). Pour les
exprimentations CELL 1 et 3, ralises avec 50 % dinoculum, la vitesse moyenne de production de
mthane a t considrablement rduite avec lutilisation de lagitation magntique et les productions
volumiques cumules ultimes atteintes ont t significativement plus faibles (cf. graphique de gauche).
Dans ce cas, tant donne laccumulation dacides, lagitation a acclre le phnomne dinhibition
en favorisant le contact entre ces acides et les microorganismes.
Lagitation peut donc avoir des effets contradictoires : dans des conditions satisfaisantes, elle acclre
la production de mthane mais, en cas dinhibition, elle peut dfavoriser la mthanognse.

Enfin, lajout de cellulose, ralise par introduction complmentaire de substrat la fin des
incubations de FG (FG 5b), a rvl un impact cintique important des conditions initialement mises
en uvre (et donc principalement du ratio I/S). La production de mthane a prsente un temps de
latence trs faible, de 0,6 jours (cf. Tableau 30), ainsi quune cintique dallure quasi exponentielle (cf.
Figure 29). Toutefois, la production volumique cumule ultime de mthane a prsent, nouveau, un
cart important par rapport au potentiel mthanogne thorique de la cellulose.



Inocul um 50 % (v/v)
0
50
100
150
200
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

d
e

C
H
4
(
N
m
l

.
g
M
V
-
1
)
CELL 1 Manuelle
CELL 3 Magntique
Inocul um 100 % (v/v)
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

d
e

C
H
4
(
N
m
l

.
g
M
V
-
1
)
CELL 2 Manuelle
CELL 4 Magntique
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 152 -
LGCIE, INSA Lyon
c. Conclusions des essais de mise au point
Concernant chaque facteur dinfluence tudi, les conclusions des essais de mise au point sont les
suivantes :
labsence de Na
2
S dans la solution minrale ninfluence pas la mthanogense lors de tests du
type PBM.
lagitation permanente prsente, vis--vis de lagitation quotidienne, des effets diffrents selon
les conditions du milieu : dans le cas o les phases dacidogense et de mthanogense sont en
quilibre, vitant ainsi laccumulation dacides, elle permet dacclrer la dgradation en
favorisant le contact entre microorganismes et substrats. Dans le cas contraire, elle est
susceptible de ralentir la dgradation et de rduire les productions ultimes de mthane en
acclrant les phnomnes dinhibitions dues une prsence excessive dacides.
la proportion dinoculum, et donc la concentration initiale en microorganismes, est un facteur
dinfluence majeur dont les effets dpendent galement des conditions du milieu et notamment
de la balance acidogense / mthanogense : dans le cas dun quilibre des deux processus, les
consquences sont principalement cintiques. Une plus grande proportion dinoculum rduit
les temps de latence de la mthanognse mais lutilisation dinoculum uniquement peut
conduire des carences particulires diminuant la vitesse de la dgradation. En prsence dune
forte charge organique initiale (cas des essais avec la cellulose), lutilisation de 100 % (v/v)
dinoculum peut toutefois augmenter la stoechiomtrie ultime de la dgradation car permet
dviter une accumulation irrversible dacide.
la nature de la substance teste a galement une influence considrable car conditionne la
charge initiale de matire organique biodgradable. Ainsi, malgr des concentrations quasi
identiques ( 9 gMV.L
-1
), les incubations de cellulose ou de fines grises ont impliqu des
conditions trs diffrentes, la totalit de la MV de la cellulose tant biodgradable
contrairement au dchet complexe FG. Une concentration de lordre de 10 gMV.L
-1
apparat
donc, dans les conditions utilises ici et dans le cas o la totalit de cette MV savre
biodgradable, comme une limite maximale partir de laquelle des phnomnes
daccumulation dacides sont susceptibles de perturber la dgradation, la balance acidogense
/ mthanogense.
Concernant les objectifs de lessai, seules les incubations ralises par ajout complmentaire de
substrat en fin dune premire incubation ont permis lobtention de cintiques exponentielles de
production de mthane, avec des phases de latence trs rduites.

II.2.2. Etude en conditions dincubations optimises
Au regard des rsultats obtenus lors des essais de mise au point et des conclusions prcdentes, le
protocole optimis prsent I.2.2.b a t mis en uvre sur la majorit des matriaux dtude.
Ainsi, notamment cause des nuisances olfactives quentrane lutilisation de Na
2
S (principalement
lors de la prparation de la solution minrale), son emploi a t abandonn dans les incubations en
conditions optimises. Pour lensemble de celles-ci, lagitation permanente a t ralise grce une
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 153 -
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table dagitation. Une proportion de 50 % dinoculum et 50 % de solution minrale a t utilise afin
dviter dventuels phnomnes de carences. Dans ces conditions, les dchets complexes ont t
tests une concentration proche de 10 gMV.L
-1
et les fractions organiques de DMA, 5 gMV.L
-1
,
afin dviter toutes accumulations irrversibles dacides. Des ajouts complmentaires de substrat ont
t oprs des concentrations de 3 4 gMV.L
-1
la fin des premires incubations afin dobtenir des
cintiques exponentielles de production de biogaz, sans phase de latence initiale.
Les rsultats de ces essais et leur discussion ont ainsi t spars en deux : tout dabord, les
productions obtenues lors des premires incubations (c'est--dire avant ajout) sont prsents puis, dans
un second paragraphe, les rsultats obtenus par ajout complmentaire sont abords avant de conclure.

a. Premires incubations
Le Tableau 33 prsente les potentiels ultimes en dioxyde de carbone, sulfure dhydrogne et mthane
ainsi que les paramtres cintiques de la production de ce dernier selon lquation de Gompertz,
obtenus lissue de la premire incubation des diffrents matriaux. Les graphiques illustrant les
productions cumules en fonction du temps ainsi que les rgressions sont prsents en fin de partie,
Figure 37, Figure 39 et Figure 38 pour les sries 1, 2 et 3 respectivement.

Tableau 33 : Rsultats moyens et cart-types des productions cumules totales de biogaz et des paramtres
cintiques de la production de mthane selon lquation de Gompertz obtenus lors des premires incubations en
conditions optimises
P CO
2
P H
2
S P CH
4
Rm
Incubations Matriau
(mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
FG
*
181 (4) 0,17 (0,00) 203 (4) 17,5 (1,5) 8,0 (0,2)
LAN 254 (6) 0,18 (0,02) 279 (1) 9,4 (0,7) 10,2 (0,5)
FGF 188 (2) 0,18 (0,01) 227 (5) 11,9 (0,8) 10,2 (0,6)
BRUT 226 (5) 0,42 (0,03) 210 (2) 7,9 (0,2) 11,7 (0,3)
MAT 106 (2) 0,07 (0,01) 112 (3) 8,6 (0,3) 7,6 (0,3)
S

r
i
e

1

T1 Cell 262 (1) 0,12 (0,02) 159 (2) 7,6 (0,6) 18,2 (0,2)
DV 100 (4) 0,00 (0,00) 136 (10) 10,3 (0,7) 0,9 (0,2)
FGb 221 (7) 0,04 (0,04) 306 (9) 26,6 (0,5) 2,3 (0,2)
DA 316 (10) 0,17 (0,06) 285 (11) 11,1 (1,8) 7,0 (0,5)
PETT 278 (7) 0,00 (0,00) 272 (2) 22,0 (0,5) 2,5 (0,0)
PMAG 331 (5) 0,00 (0,00) 299 (16) 24,7 (1,2) 3,3 (0,0)
TEXTS 271 (5) 0,00 (0,00) 221 (21) 19,0 (1,9) 3,3 (0,2)
S

r
i
e

2

T2 Cell 188 (7) 0,09 (0,02) 92 (4) 6,8 (0,2) 2,5 (0,1)
MIX 185 (10) 0,00 (0,00) 197 (3) 13,5 (0,5) 3,8 (0,4)
BOIS 38 (1) 0,00 (0,00) 16 (2) 0,9 (0,1) 0,0 (0,0)
TEXTC 336 (10) 0,01 (0,00) 278 (10) 24,0 (1,9) 5,0 (0,3)
TETRAB 182 (18) 0,01 (0,00) 158 (25) 19,2 (2,2) 2,3 (0,2)
YE 329 (12) 0,12 (0,02) 302 (7) 25,8 (2,0) 0,6 (0,4)
S

r
i
e

3

T3 Cell 374 (7) 0,02 (0,03) 271 (4) 23,4 (0,8) 4,5 (0,3)
* : rappel des rsultats prsents II.2.1.a

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 154 -
LGCIE, INSA Lyon
(i). Aspects stoechiomtriques
Une corrlation significative a t observe entre les productions cumules ultimes (exprimes
en mL.gMV
-1
) en mthane et en biogaz total, selon P CH
4
= 0,48 P Biogaz (cf. Figure 31). En
moyenne 48 % du biogaz total produit a donc t compos de mthane pour lensemble des matriaux
tests. Ainsi, seul lun de ces deux paramtres a t utile afin de comparer entre elles les
biodgradabilits des diffrents matriaux.

Figure 31 : Relation entre les potentiels ultimes moyens en mthane et en biogaz total pour les diffrents
matriaux tests (voir I.1.1la signification des sigles et I.2.2.b les conditions opratoires des diffrents essais)

De manire gnrale, ces potentiels nont pas prsent de corrlation significative avec les
caractrisations chimiques classiques telles que le contenu en MV ou en CT. En effet, des potentiels
trs distincts, malgr des taux de MV ou de carbone similaires, ont t mesurs pour de nombreux
matriaux. La Figure 32 illustre labsence de corrlation nette en reprsentant les potentiels de biogaz
obtenus (exprims en terme de MS) en fonction du taux de CT ou de MV respectivement.
Figure 32 : Potentiels en biogaz (mL.gMS
-1
) en fonction des caractristiques chimiques (teneur en CT gauche
et en MV droite) pour les diffrents matriaux tests (la teneur en CT de certains matriaux na pas t
analyse et le nombre de points est donc plus faible que pour la MV)

T3 Cell
BOIS
T2 Cell
TEXTS
P MAG
P ETT
DA
FGb
DV
T1Cell
MAT
BRUT
FGF
LAN
FG
0
100
200
300
400
500
600
700
20 25 30 35 40 45 50
% CT(m/m)
P

B
i
o
g
a
z

(
m
L
.
g
M
S

-
1
)
FG
LAN
FGF
BRUT
MAT
T1Cell
DV
FGb
DA
P ETT
P MAG
TEXTS
T2 Cell
BOIS
TEXTC
TETRAB
T3 Cell
YE
MIX
0
100
200
300
400
500
600
700
40 50 60 70 80 90 100
% MV (m/m)
P

B
i
o
g
a
z

(
m
L
.
g
M
S

-
1
)
MIX
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
T2 Cell
TEXTS
PMAG
PETT
DA
FGb
DV
T1Cell
MAT
BRUT
FGF
LAN
FG
y = 0,48x
R
2
= 0,91
0
50
100
150
200
250
300
350
0 100 200 300 400 500 600 700
P Bi ogaz (mL.gMV
-1
)
P

C
H
4

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 155 -
LGCIE, INSA Lyon
Ainsi, titre dexemple, les potentiels en biogaz des matriaux MAT, BRUT, FGb, LAN et PETT se
sont chelonns de 125 403 mL.gMS
-1
malgr des teneurs en carbone toutes comprises entre 35 et
39 % m/m. Concernant les taux de MV, les exemples les plus parlants ont t les nombreux matriaux
exhibant des taux de MV de prs de 100 % et des potentiels en biogaz schelonnant de 54 (pour
BOIS) 645 (pour CELL) mL.gMS
-1
.
Les mesures de biodgradabilit arobie (DBOS, cf. II.1.2.b) ont prsent, de loin, la corrlation la
plus significative avec les potentiels mesurs en anarobiose. La Figure 33 illustre le lien existant entre
DBOS et potentiels en biogaz pour les matriaux analyss dans la prsente partie. Mise part la
fraction des textiles coton (TEXTC) qui a exhib une DBOs trs faible et qui a t exclue de la relation
linaire, la corrlation entre biodgradabilit arobie et anarobie savre significative (cf. Figure 33).
Remarque : la corrlation gnrale, avec lensemble des matriaux, est prsente au II.2.4 car la
caractrisation anarobie de plusieurs matriaux est prsente ci-aprs ( II.2.3.a), lors de ltude de
facteurs dinfluence spcifique (cas des matriaux PC, PB, PJ, BAG et TIL).

Figure 33 : Potentiels en biogaz (mL.gMS
-1
) en fonction des DBOs (mL.gMS
-1
) pour les diffrents matriaux
tests (seul T3 Cell est reprsent ici et est not CELL)

Les potentiels dH
2
S obtenus ont confirm le phnomne de comptition existant entre les bactries
mthanognes et sulfato-rductrices observ en partie mise au point du protocole. Les productions
cumules ultimes dH
2
S les plus leves (> 0,1 mL.gMV
-1
) ont, en effet, t obtenues lors des
incubations o des inhibitions plus ou moins importantes de la mthanogense ont eu lieu (cf. ci aprs,
aspects cintiques) et notamment o les phases de latence sur la production de mthane ont t les plus
longues (cf. Tableau 33). Le potentiel le plus lev (P H
2
S = 0,47 mL.gMV
-1
) a t obtenu pour le
matriau BRUT qui est un des dchet contenant le plus de soufre (S = 1,07 %, cf. Tableau 26). Le
contenu du matriau semble donc jou un rle. Cependant, en prenant en compte les rsultats de la
partie prcdente mise au point ( II.2.1.a), les potentiels jusquici obtenus confirment linfluence
prpondrante des conditions de mise en uvre du test plutt que de la matire teste dans la
production dH
2
S. Les potentiels les plus levs, et de loin (> 5 mL.gMV
-1
), ont en effet t mesurs
sur le dchet FG (contenu en S de 0,7 %) incub dans 10 % dinoculum (cf. essai FG 1 et 2 de la partie
prcdente).
CELL
BOIS
TETRAB
TEXTS
P ETT
P MAG
DA
DV
FGb
MIX
MAT
BRUT
LAN
FGF
FG
y = 0,65x - 46,63
R
2
= 0,81
0
100
200
300
400
500
600
700
0 200 400 600 800 1000 1200
DBOs (mgO
2
.gMS
-1
)
P

B
i
o
g
a
z

(
m
L
.
g
M
S
-
1
)
TEXTC
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 156 -
LGCIE, INSA Lyon
Les tmoins cellulose des sries 1 et 2 ont t fortement inhibs. Ce sont les seuls essais o la
proportion de mthane na pas dpasse 50 % (v/v) du biogaz produit au cours de lincubation. Ils
prsentent une trs faible stoechiomtrie et une accumulation de COT en solution (cf. Tableau 36), tout
comme les essais prcdemment raliss avec la cellulose incube 10 gMV.L
-1
avec une proportion
dinoculum de 50 %. Le tmoin de la troisime srie (T3 Cell) a prsent un comportement proche des
autres matriaux dun point de vue cintique (cf. partie suivante) et en terme de qualit du biogaz
produit (proportion finale de CH
4
de 60 %), malgr une stoechiomtrie dvoilant toujours un cart
important avec une dgradation totale.

(ii). Aspects cintiques
Les trois sries dincubations ralises se sont caractrises par des comportements diffrents quant
la production de mthane notamment. La premire srie sest distingue par des temps de latence
relativement importants, de 11 jours en moyenne (de 8 jours pour les matriaux MAT et FG 18 pour
la cellulose). Lors des deuxime et troisime sries, ces phases de latence ont t fortement rduites
puisquelles ont t de 2,6 jours en moyenne et se sont chelonnes de 0 (pour BOIS) 7 jours (pour
DA). Sur les exprimentations ayant prsent des temps de latence de plusieurs jours, les productions
cumules totales de biogaz ont prsent une allure globale bi phasique cause du dcalage induit
entre les productions de CO
2
et CH
4
durant les premiers jours, comme cela a t observ lors des
premires incubations du dchet FG, prsentes en mise au point (cf. Figure 25).

Ces temps de latence sont peu discuts dans la littrature car ils sont la plupart du temps annuls par
lutilisation dun ratio I/S lev (cf. biblio) et ladaptation du consortium bactrien aux conditions
environnementales du test ainsi quau substrat est la principale explication avance dans la littrature.
Comme nous le verrons dans la partie modlisation, selon la charge organique applique une
quantit de bactries donne, les temps de latence apparaissent variables.

Ainsi, les temps de latence relativement importants de la premire srie ont t probablement
conditionns par ces deux paramtres. Tout dabord, les matriaux ont t incubs, dans cette srie,
une concentration de 10 gMV.L
-1
contre des concentrations denviron 5 gMV.L
-1
dans les suivantes.
Les quantits de matires dgradables ont donc t plus importantes dans la srie 1, particulirement
pour les matriaux prsentant une forte biodgradabilit. De plus, les boues utilises dans les sries 2
et 3 avaient t entretenues de manire efficace ( laide des dispositifs prsents Annexe 6) tandis que
la premire la t plus ou moins laveugle (voire a t sous nourrie par peur dinduire une
inhibition ou daugmenter la quantit de matire rsiduelle dgradable de linoculum au lancement des
tests). Les caractrisations matires des diffrents inoculums utiliss, prsentes Tableau 34,
tmoignent de ces diffrences puisque le contenu en MV des inoculums 2 et 3 sont de 8,7 et 5 gMV.L
-
1
respectivement contre 3,5 gMV.L
-1
pour linoculum de la srie 1. Les quantits initiales de bactries
impliques dans les deux dernires sries ont donc vraisemblablement t plus importantes.


Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 157 -
LGCIE, INSA Lyon
Tableau 34 : Caractristiques physico-chimiques des boues utilises en tant quinoculum pour les diffrentes
exprimentations
Inoculum
MS
(g.L
-1
)
%MV
(m/m)
CT
(mg.L
-1
)
CIT
(mg.L
-1
)
COT
(mg.L
-1
)
pH
Inoc
step
1 7,5 (0,5) 47,0 - 552 (108) 423 (91) 129 (20) 7,8 (0,1)
Inoc
step
2 17,0 (0,9) 51,1 (0,5) 791 - 503 - 288 - 7,5 -
Inoc
step
3 10,0 (0,5) 50,0 - 721 (64) 445 (52) 275 (12) 7,9 (0,1)

Concernant les vitesses maximales de productions du mthane, une corrlation linaire significative a
t observe avec les potentiels mthanognes ultimes pour une majorit des matriaux tests. La
Figure 34 illustre graphiquement la relation obtenue.

Figure 34 : Relation entre potentiels ultimes moyens en mthane (mL.gMV
-1
) et taux maximum de production de
mthane (mL.gMV
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests (les points () ont t exclus de la rgression
linaire)

Ainsi, les vitesses maximales de production (Rm) sont apparues, dans de nombreux cas, lies aux
potentiels mthanognes ultimes atteints et, pour une majorit des incubations, la relation suivante a
t observe : Rm(CH
4
) = 0,08 P(CH
4
) (r = 0,93). Les vitesses de productions maximales
apparentes ont donc t diffrentes selon les matriaux mais la vitesse de la mthanogense a, en
quelque sorte, t sensiblement identique. La vitesse spcifique, exprime en j
-1
, a t constante.
(Nopharatana et al., 2007).
Les matriaux BRUT, LAN, FGF et DA ainsi que les tmoins cellulose (T1 Cell et T2 Cell) ont t
exclus de la relation car ils ont tmoigns dun comportement diffrents. Les vitesses spcifiques de
productions de mthane ont en effet t plus faibles pour ces matriaux (T2 Cell aurait pu ne pas tre
exclu, mais le potentiel mesure est trs loin du potentiel thorique de 415 mL.gMV
-1
et ces deux
tmoins cellulose ont clairement t fortement inhibs).
Afin dintgrer, la relation prsente Figure 34, les diffrences de concentrations en matriaux tests
et, plus prcisment, les diffrences de concentrations impliques dans chaque incubation en matire
MIX
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
TEXTS
PMAG
PETT
FGb
DV
MAT
FG
DA
T2 Cell
T1 Cell
BRUT
FGF
LAN
y = 0,08x
R
2
= 0,93
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
0 50 100 150 200 250 300 350
P CH4 (mL.gMV
-1
)
R
m

(
m
L
.
g
M
V
-
1
.
j
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 158 -
LGCIE, INSA Lyon
dgradable par litre de suspension, les deux paramtres Rm et P peuvent tre exprims dans dautres
units telles que des mL(CH
4
).L
-1
pour les potentiels mthanognes et des mL(CH
4
).L
-1
.j
-1
pour les
vitesses de production.
En supposant que toute la matire dgradable a t effectivement dgrade, ces units permettent
dintgrer les diffrences entre les concentrations de matire volatile mises en uvre dans chaque srie
ainsi que celles lies aux biodgradabilits variables des diffrents matriaux. La figure suivante
illustre la relation entre les Rm exprims en mg de carbone gazifi sous forme de mthane par litre de
suspension et par jour (mgC(CH
4
).L
-1
.j
-1
)

et les potentiels mthanognes en mgC(CH
4
).L
-1
(units
choisies car ce sont celles utilises par la suite dans le modle).

Figure 35 : Relation entre potentiels ultimes moyens en mthane (mgC(CH
4
).L
-1
) et taux maximum de
production de mthane (mgC(CH
4
).L
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests (les points () ont t exclus de la
rgression linaire)

Etant donnes les diffrences de concentrations utilises et de biodgradabilit des matriaux, lordre
des matriaux est modifi par rapport la premire relation prsente Figure 34 mais la relation
linaire est toujours significative. Il apparat ainsi que les vitesses de production de mthane ont
globalement augment proportionnellement laugmentation de la concentration en carbone
minralis in fine pour des concentrations en C(CH
4
) de 0 un peu plus de 1000 mgC(CH
4
) (i.e.
approximativement jusqu 2000 mgC_dgradable.L
-1
, le CH
4
reprsentant la moiti du carbone total
minralis, cf. Figure 31). Au-del de cette concentration initiale en carbone dgradable, les vitesses
de productions ont t rduites indiquant probablement un phnomne dinhibition. Les tmoins de
cellulose T1 et T2 ne rentrent pas dans ce cadre gnral mais si lon considre que la production de
mthane partir de cellulose aurait du tre de 373 mL_CH
4
.gMV
-1
soit un potentiel denviron
1900 mgC_CH
4
.L
-1
pour T1 et T2 (test 10 gMV.L
-1
), la reprsentation suivante est obtenue :
MIX
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
TEXTS
PMAG
PETT
FGb
DV
MAT
FG
DA
T2 Cell
T1 Cell
BRUT
FGF
LAN
y = 0,08x
R
2
= 0,94
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600
P CH4 (mgC_CH
4
.L
-1
)
R
m

(
m
g
C
_
C
H
4

.
L
-
1
.
j
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 159 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 36 : Relation entre potentiels ultimes en mthane (mgC(CH
4
).L
-1
) et taux maximum de production de
mthane (mgC(CH
4
).L
-1
.j
-1
) pour les diffrents matriaux tests ( gauche, ensemble des rsultats et droite,
valeurs moyennes des triplicats et noms des matriaux)

Il apparat ainsi clairement quau-del de potentiels ultimes de 1100 mgC_CH
4
.L
-1
(i.e. de
concentration en carbone gazifiable de 2200 mgC.L
-1
), les vitesses spcifiques de productions du
mthane ont t affectes dmontrant un dveloppement diffrent des microorganismes mthanognes
pour certains essais, trs probablement d une accumulation temporaire dacides.
Remarque : lemplacement graphique des tmoins cellulose T1 et T2 a t modifi car ils ont t
raliss 10 gMV.L
-1
. T3 Cell est rest dans la relation linaire car a t test 5 gMV.L
-1
soit
900 mgC_CH
4
.L
-1
.

Pour la plupart des matriaux tests, lissue de ces premires incubations, des ajouts
complmentaires ont t raliss et les rsultats des ces secondes incubations font lobjet de la partie
suivante (voir b suivant).
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 500 1000 1500 2000
P CH4 (mgC.L
-1
)
R
m

(
m
g
C
.
L
-1
.
j
-1
)
MIX
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
T2 Cell
TEXTS
PMAG
PETT
DA
FGb
DV
T1 Cell
MAT
BRUT
FGF
LAN
FG
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 500 1000 1500 2000
P CH4 (mgC.L
-1
)
R
m

(
m
g
C
.
L
-1
.
j
-1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 160 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 37 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie 1 (voir I.1.1 pour
la signification des sigles et I.2.2.b pour les conditions opratoires). Les cart-types ne sont indiqus que sur
les productions de mthane.

LAN
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
FGF
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
BRUT
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
MAT
0
20
40
60
80
100
120
140
0 10 20 30 40
T1 CELL
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
FG
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 161 -
LGCIE, INSA Lyon

Figure 38 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie 2 (cf. I.1.1 pour la
signification des sigles et I.2.2.b pour les conditions opratoires). Les cart-types ne sont indiqus que sur les
productions de mthane

DV
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 10 20 30 40 50
FG
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50
DA
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50
PETT
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50
PMAG
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50
TEXTS
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50
T2 CELL
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
0 10 20 30 40 50
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 162 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 39 : Productions cumules moyennes (mL.gMV
-1
) en CO2 (+) et CH4 () et rgressions de Gompertz
associes la production de mthane en fonction du temps (jours) pour les essais de la srie 3 (cf. I.1.1 pour la
signification des sigles et I.2.2.b pour les conditions opratoires). Les cart-types ne sont indiqus que sur les
productions de mthane

BOIS
0
5
10
15
20
25
30
35
40
0 5 10 15 20 25 30
TEXTC
0
50
100
150
200
250
300
350
400
0 5 10 15 20 25 30
TETRAB
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
0 5 10 15 20 25 30
T3 CELL
0
50
100
150
200
250
300
350
400
0 5 10 15 20 25 30
YE
0
50
100
150
200
250
300
350
0 5 10 15 20 25 30
MIX
0
50
100
150
200
250
0 5 10 15 20 25 30
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 163 -
LGCIE, INSA Lyon
b. Secondes incubations : ajouts de substrat
Le Tableau 35 prsente les potentiels ultimes en dioxyde de carbone, sulfure dhydrogne et mthane
ainsi que les paramtres cintiques de la production de ce dernier selon lquation de Gompertz,
obtenus lissue des secondes incubations des diffrents matriaux, ralises par ajouts
complmentaires des matriaux la fin des premires incubations.

Tableau 35 : Potentiels ultimes en biogaz et paramtres cintiques de la production de mthane selon lquation
de Gompertz obtenus lissue des secondes incubations
Incub. 1 Incub. 2 P CO
2
P H
2
S P CH
4
Rm
Exp.
Essai Ajout de (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
.j
-1
) (j)
FG FG 145 0,00 225 25,82 1,63
LAN LAN 278 0,00 271 15,40 2,53
FGF FGF 198 0,06 242 21,10 1,40
BRUT BRUT 278 0,00 263 10,92 0,02
MAT MAT 76 0,00 149 16,84 0,34
S

r
i
e

1

T1 Cell -
DV DV 198 0,00 183 7,86 0,00
FGb FGb 291 0,00 373 32,06 0,00
DA DA 420 0,16 435 23,02 0,00
PETT PETT 326 0,00 252 18,21 3,68
PMAG PMAG 397 0,00 294 33,35 2,82
TEXTS TEXTS 330 0,07 225 13,03 5,16
S

r
i
e

2

T2 Cell -
MIX -
BOIS BOIS 13 0,00 4 0,68 0,56
TEXTC TEXTC 366 0,00 244 36,59 2,94
TETRAB TETRAB 179 0,00 134 29,14 2,44
YE YE 318 0,00 281 35,93 1,19
S

r
i
e

3

T3 Cell CELL 390 0,00 285 36,46 3,17


Ces incubations ont globalement permis de rpondre aux objectifs fixs puisque les productions
cumules de mthane (et de biogaz total) obtenues ont prsent des phases de latence trs rduites
ainsi quune allure globalement exponentielle. Mme pour les dchets sur lesquels des phases de
latence importantes avaient t observes en premire incubation, les ajouts ont permis lobtention de
cintiques exponentielle. La Figure 40 prsente, titre dexemple, la superposition des productions de
mthane entre les deux incubations successives pour trois matriaux, BRUT, LAN et DA ; matriaux
pour lesquels des diffrences particulirement significatives ont t observes (lensemble des
graphiques nest pas prsent ici, les productions cumules de biogaz total tant prsentes Partie C).

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 164 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 40 : Superposition des productions cumules de mthane (mL.gMV
-1
) en fonction du temps (jours)
obtenues lors des premires incubations et lors des ajouts pour trois matriaux (LAN, BRUT et DA)

(i). Aspects stoechiomtriques
Comme lillustre la Figure 41 (graphiques du haut), les productions cumules ultimes de mthane et de
dioxyde de carbone obtenues lors des premires et des secondes incubations ont t cohrentes
(corrlations linaires significatives), mais lgrement suprieures lors des ajouts de matire. Les
productions des blancs, flacons sans substrat pour les premires incubations et flacon sans ajout de
matire pour les secondes, ont t retranches toutes les productions mentionnes, comme cela a t
prcis en partie matriels et mthodes . Ces dernires ont par ailleurs t trs faibles pour toutes
les incubations (< 2 mL.gMV
teste
-1
). Ainsi, les potentiels ultimes en CO
2
et CH
4
ont t globalement
augments de 13 et 8 % respectivement (pour le CO
2
, P
Incub 1
= 1,13 P
Incub 2
et pour le CH
4
, P
Incub 1
=
1,08 P
Incub 2
, cf. Figure 41). La diffrence la plus significative a t observe pour les dchets
alimentaires (DA) pour lesquels le potentiel mthanogne a t de 435 mL.gMV
-1
lors de la seconde
incubation contre 285 11 mL.gMV
-1
lors des premires. La production cumule mesure lors de la
seconde incubation tant plus proche des valeurs cites dans la littrature pour ce type de matriau
(dchets alimentaires et putrescibles prsentent souvent des potentiels suprieurs 450 mL.MV
-1
, cf.
Partie bibliographique), le potentiel mthanogne obtenu en premire incubation a vraisemblablement
t diminue cause du faible ratio I/S.
LAN
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

C
H
4

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
Incubation n1
Ajout
BRUT
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
Incubat ion n1
Ajout
DA
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
Incubat ion n1
Ajout
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 165 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 41 : Relation entre les diffrents paramtres obtenus lissu des deux incubations successives pour les
diffrents matriaux tests

Les potentiels (productions cumules) dH
2
S obtenus ont confirm lamlioration des conditions vis--
vis des bactries mthanognes lors des secondes incubations puisque le gaz na t dtect (Pmax =
0,16 mL(H
2
S).gMV
-1
) que pour trois matriaux (FGF, DA et TEXTS) contre 13 lors des premires
incubations.
Les rsultats des analyses post incubations des phases liquides (teneurs en CIT, COT et pH) sont
prsents Tableau 36. Seuls les tmoins de cellulose (T1 Cell et T2 Cell) ont prsent des teneurs en
COT liquide importantes tmoignant de limportant phnomne dinhibition ayant affect ces essais.
Ceux-ci ont par ailleurs prsent des teneurs en CIT quasi nulles, en accord avec lacidification du
milieu (pH de 7 et 6 respectivement). Pour lensemble des autres essais, les pourcentages de carbone
accumul sous forme organique et inorganique en phase liquide (exprim par rapport au carbone total
du matriau test et calculs partir des teneurs des inoculums mentionnes Tableau 34) ont t
relativement faibles. La majorit du carbone hydrolys, solubilis, a donc t gazifi. Les teneurs en
COT finales ont mme parfois t infrieures aux teneurs initiales (pourcentage daccumulation
ngatif). Globalement, les accumulations de CIT ont t un peu plus importantes que pour le COT
mais sont restes faibles (accumulation maximale de 12 % pour les extraits de levures, YE, et
accumulation moyenne de 3 %). Les essais o des ajouts ont t raliss nont pas prsent de
diffrences significatives avec les essais sans ajout (les diffrences observes entre les incubations de
DA sans ajout et avec nexplique pas les diffrences de potentiels ultimes en biogaz observes). Les
pH finaux ont t compris entre 7,4 et 8,4.
FG
LAN
FGF
BRUT
MAT
DV
FGb
DA
P ETT
P MAG
TEXTS
BOIS
TEXTC
TETRAB
T3 Cell
YE
y = 1,13x
R
2
= 0,88
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
0 100 200 300 400
P CO
2
Incubati on n1
(mL.gMV
-1
)
P

C
O
2

I
n
c
u
b
a
t
i
o
n

n

2
(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
TEXTS
P MAG
P ETT
DA
FGb
DV
MAT
BRUT
FGF
LAN
FG
y = 1,08x
R
2
= 0,78
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
0 100 200 300 400
P CH
4
Incubati on n1
(mL.gMV
-1
)
P

C
H
4

I
n
c
u
b
a
t
i
o
n

n

2
(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
TEXTS
P MAG
P ETT
DA
FGb
DV
MAT
BRUT
FGF
LAN
FG
y = 1,33x
R
2
= 0,72
0
5
10
15
20
25
30
35
40
0 5 10 15 20 25 30
Rm CH
4
Incubati on n1
(mL.gMV
-1
.j
-1
)
R
m

C
H
4

I
n
c
u
b
a
t
i
o
n

n

2
(
m
L
.
g
M
V
-
1
.
j
-
1
)
YE
T3 Cell
TETRAB
TEXTC
BOIS
TEXTS
P MAG
P ETT
DA FGb
DV
MAT BRUT
FGF
LAN
FG
0
1
2
3
4
5
6
0 5 10 15
Lambda CH
4
Incubati on n1
(jours)
L
a
m
b
d
a

C
H
4

I
n
c
u
b
a
t
i
o
n

n

2
(
j
o
u
r
s
)
y = x
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 166 -
LGCIE, INSA Lyon
Tableau 36 : Rsultats des analyses de carbone en solution en fin dincubation des diffrents essais PBM mis en
uvre selon le protocole optimis
Incub. 1 Incub. 2 CIT COT % C liquide
Exp.
Essai Ajout de (mgC.L
-1
)
pH
% C
gaz
Org. Inorg.
FG 558 187 8,3 32 2 4
FG
446 141 8,4 33 1 4
LAN 477 141 7,9 55 1 4
LAN
291 77 7,7 56 0 2
FGF 726 275 8,1 30 2 5
FGF
734 233 8,1 30 2 6
BRUT 589 443 7,9 40 5 5
BRUT
482 365 7,8 39 5 4
MAT 350 260 7,8 19 2 2
MAT
414 289 7,9 19 4 3
S

r
i
e

1

T1 Cell 12 (5) 1628 (59) 7,0 51 36 -5
DV 539 96 7,9 24 -1 6
DV
503 94 7,9 18 -1 4
FGb 404 25 7,7 56 -2 3
FGb
700 124 7,8 49 0 6
DA 720 292 7,8 77 2 7
DA
655 479 7,7 65 4 5
PETT 340 80 7,8 78 -2 2
PETT
358 88 7,9 75 -1 2
PMAG 239 48 7,4 62 -2 0
PMAG
201 39 7,4 62 -2 -1
TEXTS 255 61 7,6 61 -2 0
TEXTS
306 177 7,2 59 0 1
S

r
i
e

2

T2 Cell 5 (2) 2112 (159) 5,9 34 46 -6
MIX - - - - - -
BOIS 236 386 8,0 5 6 0
BOIS
230 123 7,8 7 -1 0
TEXTC 235 136 8,0 74 0 0
TEXTC
243 127 7,8 76 -1 1
TETRAB 228 196 8,1 42 1 0
TETRAB
244 112 8,1 35 -1 1
YE 674 200 8,1 73 2 11
YE
452 192 7,8 76 3 12
CELL 221 171 8,1 80 1 0
S

r
i
e

3

T3 Cell
247 113 8,1 80 -1 1

Avec : % C gaz = % du carbone test gazifi = mgC(biogaz)/L sur mgC(substrat)/L *100
% C liquide = % du carbone test accumul en solution
= (mgC_fin.L
-1
mgC _initial.L
-1
) / (mgC_substrat.L
-1
)*100
: pas de matire ajoute
Remarque : les teneurs en carbone total des matriaux TEXTC, TETRAB et YE ont t tablies
de manire empirique selon la relation % TC = 0,26 (% MV) + 17,3, dtermine par
corrlation linaire (R = 0,75) entre les teneurs en CT et MV des autres matriaux

Partie B : rsultats et discussions
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(ii). Aspects cintiques
Les phases de latence observes sur les productions de mthane ont t globalement rduites et ont
fortement diminu pour les matriaux tests des concentrations initiales proches de 10 gMV.L
-1
(FG,
FGF, MAT, LAN, BRUT et DA) contre des concentrations plus faibles lors des secondes incubations,
des ajouts. Sur lensemble des matriaux tests, seuls les textiles sanitaires (TEXTS) et papiers
essuie-tout (PETT) ont prsent des phases de latence lgrement suprieures lors des secondes
incubations (cf. Figure 41), peut-tre cause dune carence ou de composs inhibiteurs spcifiques
(les phases de latence du tmoin cellulose, T3 Cell, nont pas t affectes donc une carence en azote
est peu probable). Il est remarquable que les dgradations des matriaux exclusivement cellulosiques
des fractions de DMA tels que les papiers (PETT et PMAG) et les textiles (TEXTS et TEXTC), testes
lors des sries 2 et 3, ont prsent des phases de latence de quelques jours mme lors des secondes
incubations contrairement diffrents matriaux de composition complexe pour lesquels les phases de
latence ont t annules lors des ajouts (BRUT, MAT, FGb, DV et DA). La fraction soluble, trs
certainement non ngligeable, de ces derniers matriaux a probablement t responsable de ce
phnomne, permettant une production plus rapide de substrats pour la mthanogense.
Paralllement cette diminution globale des temps de latence, les vitesses de production du mthane
ont considrablement augment, de 33 % en moyenne (cf. Figure 41, Rm
Incub 1
= 1,33 Rm
Incub 2
).
Aucune relation gnrale entre les potentiels ultimes et les cintiques de production du mthane na t
souligne en seconde incubation, contrairement aux premires incubations des matriaux. Les vitesses
spcifiques de production du mthane ont donc t diffrentes, selon les matriaux tests.

c. Bilan des essais en conditions optimises
Mises part les incubations de cellulose (T1 Cell et T2 Cell), les essais nont pas prsent
dinhibitions importantes, et ont permis la mesure de potentiels mthanognes (de biogaz) pour
lensemble des matriaux. Ces potentiels ont prsent une corrlation significative avec les mesures de
DBOS pour la majorit des matriaux. Des effets cintiques des conditions de mise en uvre du test
(1
re
et 2
me
incubations) ont toutefois t souligns. Les vitesses de production du mthane obtenues
lors des premires incubations ont t en majeure partie conditionnes par la mthanogense : les
productions cumules de mthane ont prsent une allure sigmodale, typique dune croissance
microbienne en batch . Aprs des temps de latence plus ou moins longs, les productions de mthane
ont dbut et ont prsent des vitesses spcifiques similaires pour la plupart des incubations, jusqu
lobtention dun plateau, atteint lorsque toute la matire biodgradable avait t convertie. Lors des
secondes incubations, les vitesses de production ne sont pas apparues lies aux quantits de matire
dgradable impliques : les vitesses spcifiques ont t diffrentes selon les matriaux et les
productions cumules ont prsent une allure exponentielle pour de nombreux matriaux. La
mthanogense ntait donc probablement plus la phase limitante de la production de biogaz lors des
ajouts car les bactries mthanognes taient prsentes en plus grand nombre et des quantits plus
faibles de matire avaient t ajoutes. Les vitesses obtenues ont alors t principalement
conditionnes par la nature des matriaux, la phase cintiquement limitante tant alors lhydrolyse des
diffrents matriaux.

Partie B : rsultats et discussions
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Ces considrations confirment linfluence des conditions mises en uvre, et non des substrats tests,
sur les cintiques obtenues lors des premires incubations. Les secondes incubations ont permis, a
priori, de sapprocher des vitesses optimales de dgradation de chaque matriau, vitesses
correspondant lhydrolyse, communment dcrite comme la phase limitante de la dgradation
anarobie de matriaux solides.

II.2.3. Facteurs dinfluence spcifiques
Linfluence de la taille des particules sur la dgradation anarobie a t tudie laide de plusieurs
matriaux cellulosiques broys diffrentes granulomtries. Les rsultats de cette tude font lobjet
dune premire partie. Afin dtudier les impacts ventuels de diffrentes inoculations des tests, des
incubations ont t ralises, laide de deux autres inocula que la boue de STEP utilise jusqualors,
sur deux matriaux dores et dj caractriss, BRUT et MAT. Deux essais ont galement t mens
sans inoculation. Les rsultats sont prsents dans une seconde partie. Enfin, en dernire partie, sont
dtaills les rsultats obtenus lors de lincubation du dchet MAT diffrentes teneurs en eau initiale.

a. Influence de la taille des particules
Le Tableau 37 rcapitule les rsultats obtenus lors des deux sries dincubations pour chacun des
matriaux tests deux granulomtries diffrentes. La srie 1 a t ralise par ajout des tests PBM
achevs des diffrents papiers (carton PC, de bureau PB et journaux PJ) broys 1 et 10 mm. La
seconde a t effectue dans les mmes conditions que les essais discuts prcdemment II.2.2.a
(premires incubations) avec le bois de tilleul (TIL) et la bagasse (BAG) broys 1 et 4 mm. Les
conditions dtailles ont t prsentes en partie matriels et mthodes 121
.
Tableau 37 : Rsultats moyens et cart-types associs aux incubations
Pot CO2 Pot H2S Pot CH4 Rm
Essai
(mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
) (mL.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
PC 276 (17) 0,44 (0,02) 255 (12) 12,1 (1,7) 1,3 (0,2)
PC 10 239 (6) 0,66 (0,12) 245 (7) 12,6 (0,7) 2,3 (1,4)
PB 361 (30) 0,29 (0,04) 322 (7) 18,4 (3,1) 3,5 (3,1)
PB 10 333 (30) 0,19 (0,07) 322 (29) 14,1 (1,6) 6,6 (3,4)
PJ 188 (20) 0,89 (0,46) 173 (13) 10,0 (1,8) 2,6 (1,1)
S

r
i
e

1

PJ 10 160 (6) 0,00 (0,00) 176 (14) 9,6 (1,2) 5,2 (0,6)
TIL 132 (6) 0,00 (0,00) 177 (9) 1,8 (0,1) 23,0 (2,3)
TIL 4 137 (10) 0,00 (0,00) 161 (7) 1,3 (0,2) 28,1 (4,6)
BAG 176 (2) 0,17 (0,02) 124 (5) 2,2 (0,0) 5,5 (0,4)
S

r
i
e

2

BAG 4 173 (2) 0,18 (0,00) 129 (2) 2,1 (0,2) 3,2 (1,3)




Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 169 -
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Pour chaque type de matriaux tests, on constate que les potentiels mthanognes ultimes (au terme
des 50 jours dincubation pour les papiers, srie 1, et de 250 jours pour la srie 2) nont pas t
significativement diffrents selon les granulomtries testes. La rduction de la taille des particules par
broyage na donc pas donn accs, in fine, de la matire inaccessible une taille suprieure,
contrairement aux rsultats de Palmowski et Muller (2000) notamment. Les conditions mises en uvre
par ces derniers taient en effet plus extrmes : les matriaux utiliss taient des graines de
tournesol entires ou broyes grossirement, des morceaux de feuilles drable de 2 2 cm ou broyes
120 m et encore des tiges de foin de 1,5 cm de long ou broyes et mixes pendant une heure
dans de leau. Dans leurs travaux, les potentiels mthanognes obtenus ont prsent des diffrences
significatives, les productions ultimes les plus faibles tant associes aux granulomtries les plus
leves, notamment du fait de la rsistance la dgradation des parties ligneuses, bloquant laccs
des matires dgradables une granulomtrie infrieure. Dans nos essais, la rduction de
granulomtrie, par broyage dans les fourchettes tudies (1 ou 10 mm et 1 ou 4 mm), na pas eu
deffets stoechiomtriques, long terme, comme en tmoignent dautres travaux (Chynoweth et al.,
1996). Dans ces derniers, la rduction de la taille des particules de dchets organiques de 8 1 mm na
pas eu deffet sur les potentiels mthanognes ultimes.

Des effets cintiques ont, en revanche, t observs dans nos essais. La Figure 42 prsente
graphiquement les productions moyennes cumules obtenues (CH
4
et biogaz total) en fonction du
temps pour les diffrentes exprimentations. Mis part pour BAG o, globalement, aucun effet
significatif na t observ, pour tous les autres matriaux, la rduction de la taille des particules a
engendr une augmentation des cintiques de productions de biogaz. Ce rsultat sexplique
probablement par laugmentation de la surface disponible pour lhydrolyse (tape extracellulaire) et le
fait que cette dernire ait constitu effectivement ltape cintiquement limitante de la production de
biogaz, de mthane. Les cintiques obtenues ont prsent dailleurs une allure exponentielle typique de
cette tape.

Une variabilit relativement importante a t observe entre les productions de gaz des triplicats sur
les incubations de papiers de bureau (PB) et, dans une moindre mesure, des journaux (PJ, cf Figure
42). Lincubation par ajout des tests PBM achevs a t trs certainement lorigine de ce
phnomne, entranant des conditions initiales lgrement diffrentes en terme de concentrations
initiales en microorganismes et en matires rsiduelles faiblement dgradables. Ce protocole, ainsi que
lemploi de concentrations faibles (6 gMV.L
-1
), sest toutefois avr bnfique puisque les phases de
latence moyennes sur les productions de mthane ont t relativement faibles, tmoignant de
conditions satisfaisantes vis--vis du ratio I/S notamment. Au troisime jours dincubation, les
rapports CH
4
/CO
2
taient dores et dj de 30/70 et, au 14
me
jour, le biogaz form tait en majeure
partie compos de mthane (ratios de 60/40 en moyenne). Pour les matriaux TIL et BAG, la
variabilit inter-triplicats a t beaucoup plus rduite (cf Figure 42), du fait de leur incubation de
manire classique , c'est--dire dans un mlange inoculum et solution minrale constitu au
lancement des essais. Les productions cumules en mthane partir de la bagasse ont prsent des
phases de latence du mme ordre que celles des papiers, malgr des concentrations initiales en
matriaux tests de 9 gMV.L
-1
. Les temps de latence de la production de mthane mesurs pour le bois
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 170 -
LGCIE, INSA Lyon
de tilleul ont t relativement importants (cf. Tableau 37) mais nont pas sembl lis un dsquilibre
de la mthanognse car nont pas t caractriss par une forte production concomitante de CO
2
. Au
6
me
et 12
me
jours dincubation respectivement, le CH
4
reprsentait dores et dj 40 et 47 % (v/v) du
biogaz total produit. Les vitesses de dgradation (dhydrolyse) beaucoup plus lentes de ces matriaux
par rapport aux dchets complexes tests 9 gMV.L
-1
(cf. II.2.2.a) ont donc visiblement permis la
balance acidogense / mthanogense de ne pas tre dsquilibre et, par-l mme, dtudier
spcifiquement limpact de la taille des particules via les productions de biogaz.

Les diffrences de cintiques observes pour les diffrentes granulomtries testes ont t interprtes
de manire plus approfondie en partie modlisation (cf. partie suivante, I.2).

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 171 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 42 : Productions cumules moyennes (et cart-types) en mthane ( gauche) et en biogaz total ( droite)
en mL.gMV
-1
en fonction du temps en jours et de la taille des particules employes (1 ou 10 mm et 1 ou 4 mm)
pour les cinq substrats tests (signification des sigles I.1.1, conditions opratoires prsentes Tableau 22)


Bi ogaz
0
100
200
300
400
500
600
0 10 20 30 40 50
PC
PC 10
Bi ogaz
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30 40 50
PB
PB 10
Bi ogaz
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50
PJ
PJ 10
CH4
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50
PC
PC 10
CH4
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50
PB
PB 10
CH4
0
50
100
150
200
0 10 20 30 40 50
PJ
PJ 10
CH4
0
50
100
150
200
0 50 100 150 200 250
TIL
TIL 4
CH4
0
50
100
150
0 50 100 150 200 250
BAG
BAG 4
Bi ogaz
0
100
200
300
400
0 50 100 150 200 250
TIL
TIL 4
Bi ogaz
0
100
200
300
400
0 50 100 150 200 250
BAG
BAG 4
Temps (jours) Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)

P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 172 -
LGCIE, INSA Lyon
b. Influence de la nature de linoculum
Lobjectif de ces exprimentations a t de comparer les productions de biogaz (aspects cintiques et
stoechiomtriques) obtenues lors de test type PBM laide de quatre inoculations diffrentes sur un
nombre restreint de matriaux (dchets BRUT et MAT). En plus de la boue anarobie de station
dpuration utilise prcdemment (Is
1
), deux autres inocula, lun constitu partir de fumier de vache
(If) et lautre dun lixiviat de dchets en phase de mthanogense (Id), ont t tests. Des essais ont
galement t mis en uvre sans inoculation (). Les conditions prcises de chaque essai ont t
prsentes partie matriels et mthodes I.2.3.b.
Le Tableau 38 prsente les rsultats de la caractrisation des trois inocula utiliss en terme de contenus
en matire sche (exprim en gMS.L
-1
) et volatile ainsi que les teneurs en carbone organique et
inorganique de leur phases liquides.

Tableau 38 : Caractristiques des diffrents inoculums utiliss
Inoculum Nom
MS
(g.L
-1
)
% MV
(m/m)
CT
(mg.L
-1
)
CIT
(mg.L
-1
)
COT
(mg.L
-1
)
Inoculum Ferme If 16,3 51,6 857 558 299
Inoculum Dchet Id 13,0 44,1 - - -
Inoculum Step Is 7,4 47,1 552 423 129

Les trois inocula ont prsent des diffrences significatives en terme de contenus en MS et MV
notamment et, donc, a priori, en terme de concentrations en microorganismes. Ainsi, au lancement des
essais, les contenus en matire volatile des trois inocula taient de 8,4 ; 5,7 et 3,5 gMV.L
-1
pour If, Id
et Is respectivement (soit, en normalisant par rapport Is, 2,4 / 1,6 / 1).
Les rsultats moyens des productions ultimes de biogaz obtenues et des paramtres associs la
production de mthane sont prsents Tableau 39 avec les cart-types associs (mis part pour
lexprience sans inoculation, ralise sans rplicat).

Tableau 39 : Productions de biogaz et paramtres cintiques obtenus lissue des incubations des dchets BRUT
et MAT selon les trois types dinoculum If, Id et Is et sans inoculation ()
Pot CO2 Pot H2S
+
Pot CH4 Rm

Inoculum Dchet
(ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
BRUT 240 (6) 0,70 (0,09) 337 (5) 12,9 (0,5) 0,0 (0,0)

If

MAT 142 (4) 0,10 (0,06) 212 (8) 8,8 (0,4) 0,0 (0,0)
BRUT 209 (5) 0,12 (0,05) 221 (6) 10,8 (0,5) 5,5 (0,3)

Id

MAT 110 (2) 0,05 (0,00) 127 (9) 8,4 (0,6) 4,8 (0,3)
BRUT 226 (5) 0,42 (0,03) 210 (2) 7,9 (0,2) 11,7 (0,3)

Is
*
MAT 106 (2) 0,07 (0,01) 112 (3) 8,6 (0,3) 7,6 (0,3)
BRUT 177 - 176 9,6 12,9


MAT 92 - 106 6,0 11,0
* : rappel des rsultats prsents partie mise en uvre II.2.2.a
+ : pour les essais sans inoculation, la mesure du sulfure dhydrogne na pas t ralise cause dun problme
dtalonnage de lappareil.
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 173 -
LGCIE, INSA Lyon
Les rsultats obtenus rvlent une influence considrable de la nature de linoculum tant au niveau
stoechiomtrique que cintique.
Les potentiels mthanognes obtenus tmoignent dimpacts stoechiomtriques importants de la
nature de linoculum. Ainsi, par rapport aux inocula Is et Id, avec lesquels des potentiels ultimes
proches ont t mesurs pour les deux matriaux tests, ceux-ci ont t considrablement augments
avec lutilisation de If et, sans inoculation, les productions cumules ultimes atteintes ont t
lgrement plus faibles (cf. Tableau 39).
Concernant les potentiels mthanognes obtenus laide de linoculum If, il est notable que ce dernier
a prsent une activit trs importante au regard des deux autres inocula : les blancs (essais avec
inoculum et solution minrale seuls) raliss avec If ont produit des quantits non ngligeables de
biogaz (2,2 mL(biogaz).mL(inoculum)
-1
) contre des productions cumules nulles voire lgrement
ngatives (lgres dpressions au terme dune dizaine de jours) pour les autres blancs (avec Id et Is).
Linoculum If contenait donc trs certainement une proportion importante de matires biodgradables
rsiduelles au lancement des tests, matires rsiduelles dont la dgradation peut tre lorigine des
potentiels de production ultimes significativement suprieurs. Comme prcis en partie matriels et
mthodes, les productions des blancs ont cependant t retranches aux productions cumules de
chaque essai et aux potentiels ultimes de production mentionnes au Tableau 39. Afin dexpliquer les
diffrences observes, il est donc probable que la production due linoculum seul au sein des flacons
contenant galement les dchets ait t plus importante que celle de linoculum seul au sein des blancs
cause deffets synergiques tels que ceux rapports par diffrents auteurs en cas de co-digestion
notamment (Mata-Alvarez et al., 2000). Ainsi, la prsence dun co-substrat, en loccurrence les
dchets tests, est susceptible davoir augment le potentiel mthanogne des matires rsiduelles
contenues dans linoculum If.
Les essais raliss sans inoculation confirment lexistence deffets ayant major les productions
laide de If puisque, bien que lgrement plus faibles, les potentiels mthanognes obtenus ont t
cohrents avec ceux mesurs laide des deux autres inocula, Id et Is. La lgre diminution des
productions cumules ultimes peut tre attribue aux ratios I/S probablement trs faibles induits par les
conditions de mise en uvre de ces essais, sans inoculation autre que les microorganismes endognes
aux dchets tests. Concernant ces impacts stoechiomtriques associs aux ratios I/S, dores et dj
mentionns dans les parties prcdentes (conditions optimises), deux phnomnes peuvent
notamment tre distingus. La diminution de la biodgradabilit en relation avec une diminution
des ratios I/S peut tre tout simplement due linhibition de la mthanogense par une accumulation
irrversible dacides gras volatils comme le soulignent Neves et al. (2004) par exemple et comme cela
a t observ sur de nombreux essais de la prsente tude raliss avec de la cellulose. Cela na pas t
le cas ici car de fortes proportions de mthane ont t mesures la fin des incubations synonymes
dun dveloppement satisfaisant des bactries mthanognes. Un autre phnomne potentiellement
lorigine de diminution de la biodgradabilit est un changement du taux dutilisation du substrat ou
plus prcisment des flux destins lanabolisme et au catabolisme nergtique comme le rapportent
Michaud et al. (2004). Les conditions diffrent toutefois fortement avec nos essais puisquelles
concernent un racteur biofilm mthanogne.

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 174 -
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Concernant les aspects cintiques, les productions cumules de mthane ont prsent des diffrences
quelque peu similaires celles releves dans la partie mise au point lors de ltude de limpact de la
concentration initiale en inoculum (cf. Figure 27). La Figure 43 prsente graphiquement une
comparaison des productions de mthane et de dioxyde de carbone des diffrents essais pour chacun
des dchets tests. Les temps de latence sur les productions de mthane ont t dautant plus rduits
que linoculum utilis contenait une forte proportion de MV. Ainsi, le dchet BRUT analys avec Is a
prsent des temps de latence de prs de 12 jours contre 5 jours avec Id et aucun laide de If. De
mme pour le dchet MAT, les temps sont passs de 8 6 jours pour Is et Id et aucune phase de
latence na t observe lors de son incubation avec If. Par ailleurs, les essais raliss sans inoculation
ont prsents les temps de latence les plus longs, de 13 et 11 jours pour les dchets BRUT et MAT
respectivement (cf. Tableau 39), en accord avec les concentrations initiales en microorganismes
potentiellement trs faibles quils contenaient (population endogne aux dchets tests). Les vitesses
maximales de production du mthane ont prsent des diffrences moindres, notamment pour le
dchet MAT o quel que soit linoculum utilis, les vitesses ont t sensiblement identiques.
Toutefois, pour le dchet BRUT, plus les phases de latence ont t rduites plus les vitesses maximales
atteintes ont t importantes, comme cela a t observ en partie mise au point avec les fines
grises, FG, pour les diffrentes concentrations en inoculum testes.
Figure 43 : Productions cumules de CH
4
(en haut) et en CO
2
(en bas) obtenues pour les dchets BRUT (
gauche) et MAT ( droite) selon le type dinoculum employ : fumier If (o), lixiviat de dchets Id (), boue de
STEP Is (-) et sans inoculation ().

BRUT
0
50
100
150
200
250
300
350
0 10 20 30 40 50 60 70
C
H
4

c
u
m
u
l


(
m
l
.
g
M
V
-
1
)
I f I d I s
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60 70
Temps (jours)
C
O
2

c
u
m
u
l


(
m
l
.
g
M
V
-
1
)
MAT
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60 70
I f I d I s
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 10 20 30 40 50 60 70
Temps (jours)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 175 -
LGCIE, INSA Lyon
c. Influence de la teneur en eau
Lobjectif de cette srie dessais a t dtudier linfluence de la teneur en eau initiale du dchet sur la
production de biogaz tout en sassurant que dautres facteurs dinfluence naient pas conditionn eux
aussi les rponses. Des essais prliminaires (non prsents), raliss avec diffrents papiers (PC, PB et
PJ) diffrentes teneurs en eau, avaient prsent des rponses trs chaotiques et inhomognes entre
triplicats rendant dlicate toute exploitation des rsultats. Ltude a donc t renouvele avec le dchet
MAT. Ce matriau a t choisi car il a prsent dans les exprimentations prcdentes une bonne
aptitude la dgradation du fait de son faible taux de matire dgradable (cf. son potentiel
mthanogne au regard des autres dchets tests, II.2.2.a(i)) ainsi que son contenu non ngligeable
en microorganismes endognes (cf. b). Ce dchet tait donc un candidat adquat afin dassurer
lquilibre de la balance acidogense / mthanogense, et ainsi dviter les influences du pH et des
acides, dans les conditions mise en uvre ici (trs forte concentration de gMV.L
-1
). Par ailleurs, ce
matriau est susceptible de contenir davantage de minraux essentiels que des substrats simples de
type cellulosique. Le dchet a t incub diffrentes teneurs initiales en eau ainsi quen inoculum.
Le dchet BRUT a galement t incub, mais une seule teneur en eau, afin de valider limpossibilit
dtude de linfluence de la teneur en eau (et uniquement de ce facteur) laide de ce matriau, trop
ractif.
Le Tableau 40 rappelle les principales conditions de mise en uvre de chaque essai (prsentes en
dtail I.2.3.c) et rsume les potentiels en dioxyde de carbone et en mthane ainsi que les paramtres
cintiques de la production de mthane obtenus lors des diffrentes exprimentations.

Tableau 40 : Production de biogaz et paramtres cintiques pour le dchet MAT diffrentes teneurs en eau
Essai Conditions Pot CO
2
Pot CH
4
Rm
n Nom Dchet H
2
O Inoc. (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
) (ml.gMV
-1
.j
-1
) (jours)
1 W
300%
MAT 3 0,3 116 (2) 119 (4) 4,3 (0,3) 10,8 (0,7)
2 W
130%
MAT 1,3 0,3 111 (1) 111 (3) 2,9 (0,1) 13,8 (1,3)
3 W
500%
MAT 5 0,3 113 (3) 124 (2) 4,3 (0,3) 9,6 (1,3)
4 B
0
3 MAT 3 0,9 120 (2) 122 (1) 4,2 (0,1) 10,1 (0,7)
5 B
0
5 MAT 3 1,5 118 (5) 117 (8) 3,9 (0,1) 11,7 (0,3)
6 BRUT solide BRUT 3 0,3 59 (5) 0 (0) - -
Entre parenthses : cart-types calculs sur les rponses des triplicats
H
2
O : teneur en eau initiale (solution minrale, eau et inoculum), exprime en mL(H
2
O).gMS
-1
Inoc. : teneur initiale en inoculum, exprime en mL(Inoculum).gMS
-1


Il apparat clairement que laugmentation de la teneur initiale en inoculum sur les incubations du
dchet MAT na pas eu dimpact dans ces conditions : lensemble des paramtres (stoechiomtriques
et cintiques) sont similaires pour les essais 1, 4 et 5, ces deux derniers contenant cependant trois et
cinq fois plus dinoculum respectivement que lessai 1. La balance acidogense / mthanogense a
donc t assure laide de la concentration initiale en inoculum B
0
.
La Figure 44 illustre les productions cumules en mthane obtenues pour les essais 1, 2 et 3 raliss
la mme concentration initiale en inoculum et aux diffrentes teneurs en eau initiales.

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 176 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 44 : Productions cumules de mthane (mL.gMV
-1
) en fonction du temps des exprimentations ralises
sur le dchet MAT diffrentes teneurs en eau initiales (W = 130, 300 et 500 mL(H
2
O).gMS
initiale
)

Au-del dune certaine teneur en eau (la capacit de rtention en eau selon Pommier et al., 2007), la
teneur en eau initiale na pas eu dimpact sur la dgradation : les productions des essais raliss des
teneurs en eau de 300 %et 500 % ont t quasi similaires (cf. Figure 44, A). La production de mthane
a prsent, en moyenne, un potentiel ultime ( 110 jours) de 120 mL.gMV
-1
, une vitesse maximale de
production de 4,3 mL CH
4
.gMV
-1
.j
-1
et une phase de latence de 10 jours (cf. Tableau 40). A une teneur
en eau de 130 %, la fois cintique et stoechiomtrie de la raction ont t modifies. Les temps de
latence sont graphiquement trs proches mais potentiels ultimes et vitesses de production ont t
rduits de 8 et 33 % respectivement. La Figure 44 (B) prsente un zoom des productions cumules en
mthane obtenues sur les trois essais o la diffrence significative entre les potentiels mthanognes
ultimes est illustre laide des cart-types sur les productions des triplicats.
Linfluence de la teneur en eau a donc t globalement similaire celui rapport par Pommier et al.
(2007). Cependant, dans nos essais, un lger mais significatif impact de la teneur en eau a t observ
ds la teneur identifie comme la capacit de rtention en eau (C
RET2
de 133 %). La mesure de cette
capacit savre toutefois lgrement diffrente. Dans leurs travaux, le matriau (mlanges de
papiers / cartons chantillonn en ISD broy 1 cm) a t mlang avec de leau et lexcs deau a
ensuite t limin par filtration sous pompe vide durant 30 min. Il est probable que notre mesure ait
quelque peu minore la capacit de rtention (pas de phase de mlangeage). Nous reviendrons sur sa
valeur en partie modlisation.
Enfin, lors de lincubation du dchet BRUT (essai n6, Tableau 40), seul du dioxyde de carbone a t
produit. Lactivit mthanogne a t totalement inhibe par la prsence accrue dAGV lie la
charge organique implique et plus prcisment la charge en matire organique dgradable (car
BRUT et MAT ont sensiblement la mme teneur en matire organique, en MV).

Ces essais nont pas t raliss en grand nombre car il sagissait dune exprience prliminaire dont
lobjectif tait de vrifier la possibilit dtudier la teneur en eau sans que des phnomnes
dinhibitions dus aux acides, au pH ou au manque de nutriments par exemple interviennent de manire
prpondrante. Bien que ni le pH ni les concentrations en AGV naient t mesurs en cours
dincubation (ce qui savre dailleurs tre problmatique, en milieu solide et en conditions
anarobies), les essais semblent avoir permis des conditions relativement satisfaisantes au regard du
0
20
40
60
80
100
120
140
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Temps (jours)
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

C
H
4

(
N
m
l
.
g
M
V
-
1
)
W 130%
W 300%
W 500%
80
90
100
110
120
130
40 50 60 70 80 90 100 110
Temps (jours)
W 130%
W 300%
W 500%
B A
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 177 -
LGCIE, INSA Lyon
dveloppement des bactries mthanognes notamment et ont permis lanalyse de linfluence de la
teneur en eau principalement. Non seulement les essais raliss avec des quantits initiales suprieures
en inoculum en tmoignent mais galement les teneurs en mthane du biogaz produit sur les essais aux
trois teneurs en eau, quasi-similaires tout au long de lincubation et de 60 % (v/v) partir du 30
me
jour
jusqu la fin des mesures. Il serait donc intressant de renouveler cette exprience en valuant
linfluence dun plus grand nombre de teneurs en eau initiales sur ce dchet.

Ces quelques rsultats ont t exploits sous un autre angle en partie modlisations et la discussion y
est plus approfondie, notamment les valeurs de la capacit en eau. Avant daborder la partie
modlisation, deux bilans sont prsents :
la comparaison des biodgradations anarobies exprimentale et calcule du dchet MIX ;
la comparaison des mesures de biodgradabilits arobie et anarobie sur lensemble des
matriaux tests.

II.2.4. Dchet MIX : comparaison des biodgradations exprimentale et calcule
Comme cela a t prsent pour les dgradations arobies, les rgressions ralises sur les productions
cumules de mthane pour chacune des fractions composant le dchet MIX ont permis le calcul dune
production cumule thorique . La Figure 45 suivante illustre la comparaison des productions
cumules exprimentales et calcules, en mthane et en biogaz total, pour le dchet. La production
CH
4

calc
a t calcule partir des paramtres des rgressions de Gompertz obtenus lors des
premires incubations. La production thorique de biogaz a t calcule partir de paramtres de
rgressions exponentielles ralises sur les productions cumules de biogaz total obtenues lors des
premires incubations galement (dont les rsultats nont pas t prsents).

Figure 45 : Comparaisons des productions cumules de mthane et de biogaz, exprimentales et calcules, pour
le dchet MIX, partir des mesures ralises sur chacun de ses composants
0
50
100
150
200
250
300
350
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Temps (jours)
P
o
t
e
n
t
i
e
l

(
m
L
.
g
M
S
)
Biogaz Tho Biogaz
CH4 Tho CH4
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 178 -
LGCIE, INSA Lyon

Une tendance similaire est observe entre les productions exprimentale et calcule. Le temps de
latence et la vitesse de production de mthane sont relativement bien reprsents mais le rsultat est
cependant moins bon quen arobiose. Les potentiels calculs pour le mthane et le biogaz sont de xx
et xx mL.gMS
-1
respectivement, contre des potentiels exprimentaux de xx et xx mL.gMS
-1
. Linverse
aurait pu apparatre plus logique notamment du fait dune ventuelle synergie entre substrats (la
codigestion amliore parfois le potentiel en comblant notamment des carences en minraux dun
matriau spcifique). Une hypothse probable de lcart observ est une surestimation des potentiels
des trois papiers (PB, PC et PJ), pour lesquels les incubations ont t ralises par ajout dans des essais
PBM achevs contenant potentiellement des matires rsiduelles faiblement biodgradables et qui ont
pu participer au potentiel de manire non ngligeable De plus, ces trois papiers reprsentent une
proportion trs importante du dchet MIX

II.2.5. Corrlation entre biodgradabilit arobie et anarobie
Les graphiques suivants (Figure 46) prsentent les potentiels mesurs en anarobiose en fonction des
DBOS mesures en arobiose pour lensemble des matriaux tests.

Figure 46 : Relations entre biodgradabilits anarobies (Pot CH
4
gauche et Pot Biogaz, droite) et arobie
(DBOS) pour lensemble des matriaux tests 1 mm dans des conditions optimales.

Mis part pour deux matriaux (TEXTC et BAG), les mesures de biodgradabilits arobie et
anarobie de lensemble des matriaux tests ont prsent une corrlation significative. La relation est
importante indpendamment du potentiel utilis en anarobiose, Pot CH
4
ou Pot Biogaz, la relation
existant entre ces potentiels a t souligne (Pot CH
4
0,5 Pot biogaz). Cependant, il a galement
t remarqu que certaines conditions (le ratio inoculum / solution minrale notamment) ont des
impacts sur la production de CO
2
et donc sur la production de biogaz total. La relation est donc valide
pour des conditions similaires de ralisation du test. Pour les dchets dits complexes, auxquels les
fractions complexes de DMA telles que les fines (FGb), les dchets verts (DV), les dchets
alimentaires (DA) peuvent tre ajoutes, la corrlation linaire est mme trs significative (cf. Figure
47). Six autres dchets complexes, analyss dans le cadre dun autre programme de recherche, ont t
CELL
TIL
BOIS
TETRAB
TEXTS
PETT
PMAG
PB
PC
PJ
DA
DV
FGb
MIX
MAT
BRUT
LAN
FGF
FG
BAG
TEXTC
0
50
100
150
200
250
300
0 200 400 600 800 1000 1200
DBOS (mgO2.gMS
-1
)
P
o
t

C
H
4

(
m
L
.
g
M
S
-
1
)
CELL
TIL
BOIS
TETRAB
TEXTS
PETT
PMAG
PB
PC
PJ
DA
DV
FGb
MIX
MAT
BRUT
LAN
FGF
FG
BAG
TEXTC
0
100
200
300
400
500
600
700
0 200 400 600 800 1000 1200
DBOS (mgO2.gMS
-1
)
P
o
t

B
i
o
g
a
z

(
m
L
.
g
M
S
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 179 -
LGCIE, INSA Lyon
ajouts aux donnes prsentes. Ce rsultat confirme lexistence dune trs bonne relation entre les
deux mthodes de mesure de la biodgradabilit pour ces matriaux.
En limitant la corrlation aux dchets complexes , la droite passe plus difficilement par (0 ;0) cf.
Figure 47) et il est dailleurs visible Figure 46 que ces dchets prsentent un cart avec de nombreuses
fractions cellulosiques (telles que TIL, PMAG, TEXTS et PETT). Une surestimation de leur DBOS est
probable du fait de la dnitrification qui na pas t matrise (lutilisation dun inhibiteur est
recommande dans la littrature). Cette possibilit apparat plus probable quune surestimation des
potentiels anarobies des matriaux cellulosiques car globalement les potentiels obtenus avec la
cellulose ont t faibles vis--vis de son potentiel thorique.
Figure 47 : Corrlations linaires entre biodgradabilits anarobies (Pot CH
4
gauche et Pot Biogaz, droite) et
arobie (DBOS) pour lensemble des dchets complexes tests 1 mm dans des conditions optimales

Concernant les deux matriaux prsentant des carts importants, les hypothses suivantes peuvent tre
avances :
- la dgradation arobie du textile coton (TEXTC) a t inhibe, vraisemblablement par un compos
spcifique prsent dans le matriau, car la cellulose, mme cristalline, a prsent une dgradation
satisfaisante (cf. II.1.2). La mesure a t renouvele plusieurs reprises et la DBOS ultime en
conditions optimales est mentionne ici.
- la bagasse de canne sucre (BAG) a prsent un comportement oppos : sa biodgradabilit arobie
sest avre trs importante vis--vis de son potentiel anarobie. Etant donn que les autres matriaux
ligneux tests (le bois de tilleul, TIL, et le papier journal, PJ) nont pas prsent cette caractristique,
leffet provient peut tre de la nature de la lignine de la bagasse ou de la configuration du complexe
ligno-cellulosique. Les mesures de fractionnement biochimique (Van Soest) ralises ont indique un
trs faible contenu en lignine, dapproximativement 5 % (/MS). Cest donc davantage la nature du
complexe que la quantit de lignine qui a influenc les mesures.

Ainsi, malgr des diffrences trs importantes, en terme de mtabolisme notamment, les
biodgradabilits arobie et anarobie se sont avres fortement lies pour la majorit des matriaux
tests et en troite relation pour les fractions complexes de DMA.
y = 0,32x - 45,48
R
2
= 0,92
0
50
100
150
200
250
300
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
DBOS (mgO2.gMS
-1
)
P
o
t

C
H
4

(
m
L
.
g
M
S
-
1
)
y = 0,64x - 84,57
R
2
= 0,92
0
100
200
300
400
500
600
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
DBOS (mgO2.gMS
-1
)
P
o
t

B
i
o
g
a
z

(
m
L
.
g
M
S
-
1
)
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 180 -
LGCIE, INSA Lyon
III. Conclusions
Dans cette tude exprimentale, les teneurs en MV et en CT ainsi que les DBOS des diffrents
dchets, fractions de dchets et matriaux spcifiques ont t mesures. En parallle, des essais
dincubations anarobies ont t mis en uvre afin danalyser limpact de certaines conditions
opratoires du test dans le but dobtenir une dgradation optimise ( mise au point ). Le protocole,
dfini lissue de cette exprimentation, a t appliqu la majorit des matriaux ( mise en
uvre ). En parallle, des essais spcifiques ont permis ltude de facteurs dinfluence particuliers.

A lissue de cette tude exprimentale, deux rsultats apparaissent remarquables :
les biodgradabilits anarobies ont prsent une bonne corrlation avec celles dtermines en
arobiose pour 26 des 28 matriaux tests (22 ont t prsents dans ltude et 6, caractriss dans le
cadre dautres travaux, ont t ajouts au bilan). Mises part les fractions cellulosiques spcifiques, la
relation linaire obtenue pour les matriaux complexes savre mme trs significative.
Les DBOS peuvent donc permettre une prdiction convenable des potentiels anarobies,
contrairement aux mesures chimiques de type % MV, % CT ou COT. Les DBOS tant
relativement plus simples de mise en uvre que les tests anarobies (conditions arobies, pas
danalyses de biogaz), ce rsultat est trs intressant.
en arobiose et en anarobiose, les biodgradabilits mesures sur 12 fractions organiques de DMA
ont permis de calculer la biodgradabilit, de points de vue cintique et stoechiomtrique, dun dchet
reconstitu avec ces fractions. Les comparaisons des dgradations exprimentales et calcules de ce
dchet se sont avres satisfaisantes, quoiquun lger cart ait t observ en condition anarobie.
Lanalyse de diffrentes catgories de MO composant les DMA a dmontr la variabilit
des biodgradabilits de ces matriaux et donc limportance dune approche multi-
substrats pour la prdiction de la biodgradabilit dun dchet complexe. Cette approche a
t valide par les rsultats obtenus sur le dchet reconstitu.

Par ailleurs, les tests dincubation anarobie mis en uvre ont soulign linfluence de nombreux
facteurs reconnus sur la dgradation, dun point de vue cintique tout particulirement. Les
incubations de mise au point ont mis en vidence les aspects suivants :
lagitation prsente des effets diffrents selon les conditions du milieu. Dans le cas o les phases
dacidogense et de mthanogense sont en quilibre, elle permet dacclrer la dgradation en
favorisant le contact entre microorganismes et substrats. Dans le cas contraire, elle peut ralentir la
dgradation et mme la stopper en acclrant les phnomnes dinhibitions dues une prsence
excessive dacides.
Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 181 -
LGCIE, INSA Lyon
la proportion dinoculum par rapport la solution minrale a galement des effets varis dont les
consquences sur la production de mthane sont principalement cintiques, en cas dquilibre
acidogense / mthanogense. Une grande proportion dinoculum acclre la mthanognse mais
lutilisation dinoculum uniquement peut conduire des carences diminuant la vitesse de la
dgradation. Dans le cas dune forte charge organique initiale impliquant un quilibre instable,
lutilisation dinoculum uniquement peut toutefois savrer positive en vitant une accumulation
irrversible dacide.
la nature de la substance teste conditionne la charge initiale de matire organique biodgradable.
Ainsi, des concentrations identiques en terme de quantit de MV par litre, par exemple, impliquent des
charges trs diffrentes selon la biodgradabilit du matriau test.
une cintique exponentielle de production de mthane sans phase de latence a t obtenue en
ralisant une seconde incubation, par ajout complmentaire de substrat la fin de la premire. Cette
mthode est apparue comme un moyen efficace dy parvenir.
Les essais de mise en uvre ont confirm ces deux derniers points. Les productions de mthane
des matriaux les plus biodgradables et/ou tests aux plus fortes concentrations ont prsent, lors des
premires incubations, des phases de latence importantes et des vitesses spcifiques plus faibles que
les autres. Lajout complmentaire de substrat a permis cependant dobtenir une cintique de
production de mthane exponentielle pour lensemble des matriaux. Par ailleurs, lanalyse des
productions de mthane selon lquation de Gompertz a permis de mettre en vidence un phnomne
dinhibition de la mthanogense lors des premires incubations. Pour des concentrations en carbone
gazifiable test suprieures 2200 mgC.L
-1
, les vitesses spcifiques de production de mthane ont
t significativement diminues.
Enfin, concernant les facteurs spcifiques tudis, les conclusions suivantes peuvent tre formules :
la taille des particules influence la cintique de dgradation, les particules les plus fines tant
dgrades plus rapidement. Leffet observ, plus ou moins marqu pour des papiers broys laide de
grilles de 10 et 1 mm, a t trs significatif pour le bois de tilleul, broy 1 et 4 mm. A ces deux
dernires granulomtries, la bagasse de canne sucre na cependant pas prsent de diffrences
significatives, dmontrant limportance conjointe de la nature de la MO du matriau.
la nature de linoculum utilis a potentiellement un impact considrable car, tout comme la
proportion dinoculum, elle peut induire des quantits initiales de bactries diffrentes. Les effets sont
principalement cintiques et affectent surtout les temps de latence de la production de mthane.
Cependant, un inoculum contenant un taux important de matires rsiduelles peut visiblement
conduire une survaluation des potentiels des matriaux tests, mme en retranchant sa production,
dtermine en lincubant seul, aux productions mesures sur les essais contenant les matriaux.
la teneur en eau est un paramtre dlicat tudier sans linfluence dautres facteurs. Lutilisation
dun matriau complexe, contenant des micro-organismes endognes et peu volutif facilite son
analyse car cela permet dassurer la prsence de minraux, de bactries initiales et dune faible charge
organique. Les quelques rsultats obtenus ont confirm ceux dautres travaux, savoir, limpact
cintique et stoechiomtrique de la teneur en eau en de dune certaine valeur.

Partie B : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 182 -
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Concernant les conditions opratoires des tests de biodgradabilit, assurer un quilibre au cours de la
dgradation apparat comme un point essentiel de ralisation dun test de biodgradabilit intrinsque.
Cet quilibre peut tre assur en incubant la quantit la plus faible possible de matriau avec la
quantit la plus leve de micro-organismes.
une concentration de lordre de 10 gMV
teste
.L
-1
est apparue, dans les conditions mises en uvre,
comme une limite maximale partir de laquelle des phnomnes daccumulation dacides ont
perturbs significativement la dgradation, notamment dans le cas o la totalit de cette MV savre
biodgradable. Une concentration de 3 5 gMV.L
-1
parat un bon compromis afin de garantir une
charge organique faible, une production de gaz ou une consommation doxygne significative et la
reprsentativit de lchantillon analys.
en ce qui concerne linoculum, lutilisation dune proportion importante tout comme lentretien de
son activit constituent des lments cl dune dgradation quilibre. Cette activit peut tre garantie
en alimentant linoculum rgulirement et en sassurant de labsence de matire rsiduelle au
lancement des essais. Un systme de suivi des inoculums anarobies a t dvelopp pour faciliter cet
entretien (cf. Annexe 6).

Globalement, cette tude exprimentale a permis de mettre en vidence linfluence de conditions de
mises en uvre et de facteurs spcifiques sur la production de biogaz. A la lumire de ces rsultats, il
est tentant de vrifier si certains de ces phnomnes sont descriptibles par des modles. Cest lobjet
de la partie suivante.


Thse M. Rouez 2008 - 183 -
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Partie C : modlisations de la production de biogaz en conditions de laboratoire
Thse M. Rouez 2008 - 184 -
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C. Modlisations de la production de
biogaz en conditions de laboratoire




SOMMAIRE

I. Matriels et mthodes ................................................................................................... 185
I.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises ......................................................... 185
I.1.1. Modle dordre 1 avec hydrolyse cintiquement limitante.............................................. 185
I.1.2. Modle biologique avec hydrolyse et mthanogense..................................................... 187
I.1.3. Modle biologique avec inhibitions de la mthanognse............................................... 192
I.2. Influence de la taille des particules .............................................................................................. 194
I.2.1. Aspects gnraux............................................................................................................. 194
I.2.2. Structure du modle......................................................................................................... 195
I.2.3. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres ...................................... 196
I.3. Influence de la teneur en eau........................................................................................................ 197
I.3.1. Structure du modle......................................................................................................... 197
I.3.2. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres ...................................... 199

II. Rsultats et discussions................................................................................................ 200
II.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises ........................................................ 200
II.1.1. Modle dordre un avec hydrolyse cintiquement limitante .......................................... 200
II.1.2. Modle biologique simple avec hydrolyse suivie de mthanogense ...................... 203
II.1.3. Modle biologique avec inhibition de la mthanogense............................................... 210
II.2. Influence de la taille des particules............................................................................................. 215
II.2.1. Identification des constantes dhydrolyse....................................................................... 215
II.3. Influence de la teneur en eau ...................................................................................................... 219
II.3.1. Identifications prliminaires........................................................................................... 219
II.3.2. Influence de la teneur en eau.......................................................................................... 221

III. Conclusions................................................................................................................ 223

Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 185 -
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I. Matriels et mthodes
La modlisation a t ralise en recherchant le niveau minimal de complexit requise pour
reprsenter les productions de biogaz obtenues lors de diffrentes incubations anarobies. Comme
dtaill dans la partie bibliographique, la plupart des modles de la littrature adoptent, pour premire
tape de dgradation de la matire, une cintique dordre 1 reprsentant la phase dhydrolyse. Cette
phase est communment dcrite comme ltape cintiquement limitante du processus de dgradation
dans son intgralit, en conditions optimales notamment. A partir des exprimentations ralises dans
les conditions optimises lors des secondes incubations (par ajout, cf. I.2.2.b Partie B), les cintiques
exponentielles de production de biogaz obtenues ont pu tre assimiles celles de lhydrolyse, la
mthanogense ne savrant alors pas limitante. Un premier modle trs simple a donc t construit
laide de rgressions exponentielles, ralises sur les productions cumules de biogaz, pour chaque
matriau test. Ce modle a ensuite t complexifi en ajoutant conscutivement cette tape
dhydrolyse, une phase de mthanogense, reprsente laide des concepts de croissance
microbienne (cf. Partie bibliographique). Les rponses de ce modle ont t confrontes aux
productions de biogaz obtenues lors des premires incubations des essais optimiss (avant ajout) o les
productions de mthane ont parfois prsent des temps de latence importants ainsi que des vitesses
variables selon les matriaux. La dmarche employe est dtaille dans une premire partie ( I.1).
Linfluence de la taille des particules a ensuite t intgre ce modle afin danalyser les rsultats
obtenus lors des incubations des matriaux cellulosiques diffrentes granulomtries ( I.2). Enfin,
limpact de la teneur en eau est abord dans une dernire partie. Les rponses obtenues lors de son
tude ont t analyses laide du modle propos par Pommier et al. (2007), prsent rapidement en
partie bibliographique et dtaill dans le prsent chapitre au I.3.

I.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises
Ce modle a t construit exclusivement partir des exprimentations prsentes dans la partie
exprimentale incubations en conditions optimises laide des premires et secondes incubations
des diffrents matriaux.

I.1.1. Modle dordre 1 avec hydrolyse cintiquement limitante
a. Structure gnrale
En considrant la raction dun ractif de concentration X, ici la matire organique biodgradable,
conduisant un produit de concentration P, ici le biogaz, le systme dquations diffrentielles
reprsentant les variations de concentrations des constituants est le suivant :

Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 186 -
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H
H
dX
k X
dt
dP dX
k X
dt dt

= =


avec k
H
, la constante dhydrolyse, homogne linverse dun temps. Les variables X et P sont, dans la
plupart des modles, exprimes dans des units diffrentes ncessitant un coefficient de
proportionnalit, un potentiel de biogaz (gnralement exprim en volume de gaz par unit de masse
de substrat). Le substrat, la matire organique biodgradable, peut tre pris en compte en terme de MS,
MV, CT, COT ou encore de DCO par exemple, ncessitant des valeurs de potentiel spcifiques. Ce
coefficient peut par ailleurs intgrer le fait quune partie du substrat ne produit pas de gaz mais de la
biomasse microbienne.
Cependant, les aspects stoechiomtriques ont dores et dj t discuts en partie exprimentale et,
comme nous lavons remarqu, mis part les mesures de DBOs, les caractrisations ralises nont
pas reflt les quantits de matires biodgradables des diffrents matriaux. Aussi, afin de simplifier,
il a t considr que les rgressions ralises correspondaient aux conditions initiales suivantes :
(0) ( )
(0) 0
X P
P
=

avec X et P exprims dans les mmes units, en mL(biogaz).gMV


-1
.
Ainsi, le terme X reprsente plus prcisment la matire bio gazifiable plutt que la matire
biodgradable. Cette concentration en substrat a pu tre aisment convertie, laide des
concentrations mises en uvre lors des incubations, en mgC
gazifiable
.L
-1
, qui sont les units utilises
dans le modle biologique suivant.

b. Identification de la vitesse dhydrolyse
Lidentification de la vitesse dhydrolyse k
H
de chaque matriau a t ralise partir des productions
cumules de biogaz obtenues en conditions optimises, lors des secondes incubations des matriaux
(par ajout). En supposant que lhydrolyse tait effectivement ltape cintiquement limitante de la
production de biogaz de ces dgradations, des rgressions exponentielles ont t ralises sur les
productions cumules selon lquation suivante :
( ) (1 )
H
k t
Pot t Pot e

=
avec : Pot(t), la production cumule de biogaz (mL.gMV
-1
) en fonction du temps t (j), Pot

, le
potentiel ultime de biogaz (mL.gMV
-1
) et k
H
, la constante de vitesse, dhydrolyse, (j
-1
).
Comme pour les autres mthodes de rgression prsentes en partie exprimentale, la fonction
solveur dExcel t utilise, en minimisant la somme du carr des diffrences entre valeurs
exprimentales et valeurs thoriques associes au modle , lquation prcdente.




Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 187 -
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I.1.2. Modle biologique avec hydrolyse et mthanogense
a. Structure gnrale du modle
Le premier modle dordre 1 a t complexifi en considrant la dgradation dans son ensemble
comme deux tapes successives. En sinspirant de diffrents modles prsents en partie bibliographie,
le processus de mthanogense a t dcrit de la manire suivante (cf. Figure 48) : une premire tape
dhydrolyse / acidogense (dont la vitesse est limite par celle de lhydrolyse, identifie ci-dessus) de
la matire complexe gazifiable (X) conduit la formation de dioxyde de carbone (CO
2
) et de MO
(matire organique) soluble simple (S), compose de divers AGV (acides gras volatils) et assimile
de lactate. Ce dernier est utilis en tant que substrat par les bactries mthanognes (B) qui
produisent leur tour du dioxyde de carbone (CO
2
) ainsi que du mthane (CH
4
). A leur mort, les
bactries mthanognes constituent leur tour un substrat complexe hydrolyser.

Figure 48 : Schma gnral utilis pour la modlisation de la dgradation anarobie de matire organique
complexe

Les coefficients f
1
et f
2
sont des coefficients stoechiomtriques qui reprsentent les parts de MO
transforme en MO simple ou en mthane lors des phases dhydrolyse / acidogense ou de
mthanogense respectivement. Les paramtres (1-f1) et (1-f2) reprsentent, par consquent, les parts
de MO transforme en CO
2
lors de ces deux tapes respectivement. Ces coefficients ont t introduits
afin de reprsenter les productions de dioxyde de carbone et danalyser les dcalages parfois obtenus
entre les productions de ce gaz et du mthane. Seul un groupe bactrien a t considr afin de rduire
le nombre de paramtres du modle et notamment de paramtres biologiques dont lidentification ( la
fois exprimentale et calcule) est dlicate. La raction dhydrolyse / acidogense a t considre
comme une raction de type chimique dont la vitesse a t identifie pour chaque matriau dans
ltape prcdente.
Il est possible dassocier ce schma gnral le systme dquations diffrentielles suivant en
appliquant le principe de conservation de la masse chaque lment du systme et laide de la loi de
Monod (cf. Partie bibliographique) :
HYDROLYSE / ACIDOGENESE
METHANOGENESE
(1-f
1
)
f
1
f
2
(1-f
2
)
MO complexe
dgradable X
CH
4
MO simple
soluble S
CO
2
B
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 188 -
LGCIE, INSA Lyon
1
2
1 2
4
2
1
1
(1 ) (1 )
1
H d
m
d
S
m
H
S
m
H
S
m
S
dX
k X k B
dt
S dB
k B
dt K S
S dS
f k X B
dt Y K S
S dCO Y
f k X f B
dt Y K S
S dCH Y
f B
dt Y K S

= +

| |
=
|
+
\


= +


=
+


avec :
Variables dynamiques (toutes exprimes en concentration de carbone par litre de suspension
aqueuse, mg C.L
-1
)
X = matire complexe dgradable
B = biomasse mthanogne
S = matire organique soluble
CO
2
= dioxyde de carbone
CH
4
= mthane

Paramtres constants
Biochimiques :
k
H
= vitesse dhydrolyse (j
-1
)
f
1
= fraction de carbone organique soluble produit lors de lhydrolyse (mg C(S).mg C(X)
-1
)
f
2
= fraction de mthane produit lors de la mthanogense (mg C(CH
4
).mg C(S)
-1
)
Biologiques :
Y = taux dutilisation du substrat (mg C biomasse. mg C substrat
-1
)
K
S
= constante de demi saturation (mg C.L
-1
)

m
= taux de croissance maximal (j
-1
)
k
d
= taux de mortalit (j
-1
)

b. Stoechiomtrie et choix des units
Selon ce systme, leur mort, les bactries sont intgralement recycles en substrat dgradable (le
terme k
d
B apparat ainsi positivement dans dX/dt ). Dautres approches sont cependant adoptes
concernant la mortalit bactrienne dans la littrature. Dans le modle ADM de lIWA notamment,
lapproche est la mme part que seule une fraction de la biomasse bactrienne morte est considre
biodgradable. Une fraction est considre comme de la matire organique stable, non dgradable (de
type humique). Dans les travaux de El-Fadel et al. (1996) ou Vavilin et al. (2004), la biomasse
inactive, morte, nest pas recycle dans une tape particulire. Parfois, la mortalit bactrienne nest
tout simplement pas prise en compte (cf. I.3.1). Ces diffrentes conceptualisations ont de lgers
impacts sur la stoechiomtrie ultime principalement.
Lavantage de lapproche adopte ici ( biodgradation intgrale de la biomasse morte ) rside dans
le fait quin fine la totalit de la matire dsigne comme initialement dgradable (X(0)) est
effectivement dgrade (et plus prcisment, la matire bio gazifiable est gazifie). Les
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 189 -
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diffrences stoechiomtriques observes lors des quelques exprimentations ont ainsi t, dans un
premier temps, plus facilement ludes.
Concernant le choix des units, une seule unit a t choisie pour reprsenter lensemble des variables
dynamiques, savoir des milligrammes de carbone par litre de suspension aqueuse (mgC.L
-1
). Ce
choix prsente lavantage de ne ncessiter aucun coefficient de proportionnalit entre les diffrentes
variables. Par l mme, il facilite la vrification de la conservation de la masse qui peut tre ralise
lissue des rsolutions numriques en sommant tout simplement les valeurs des variables chaque pas
de temps. Enfin, il est relativement ais de convertir, si besoin est, la matire dgrade ou le biogaz
produit en dautres units (telles que des mL(gaz).L
-1
ou des mL(gaz).gMS
-1
ou de MV).

c. Rsolution du systme dquations diffrentielles et identification des
paramtres
Des simulations ralises de manire prliminaire, et dans le cadre de ltude de la sensibilit du
modle notamment, ont soulign linterdpendance des valeurs des paramtres biologiques choisis et
des conditions initiales en microorganismes mthanognes. Diffrents jeux de donnes peuvent tre
utiliss afin de reprsenter des productions de biogaz similaires. Ainsi, tant donne la variabilit des
valeurs de la littrature et la difficult de dterminer exprimentalement ces constantes ainsi que la
concentration initiale en microorganismes, la dmarche suivante a t adopte : les valeurs moyennes
(ou des valeurs proches) des paramtres biologiques rfrences dans la littrature et prsentes au
Tableau 41 ont t utilises.

Tableau 41 : Fourchettes de valeurs des paramtres biologiques utilises dans la littrature pour les bactries
mthanognes actoclastes
Auteurs
m
(j
-1
) K
S
*
(mg C.L
-1
) Y (m.m
-1
) k
d
(j
-1
)
Pavlostathis et Giraldo-Gomez (1991) 0,08 - 0,7 4 - 158 0,01 - 0,045 0,004 - 0,036
Kalyuzhnyi, (1996) 0,192 - 0,6 (0,36) 2 - 187 (55) 0,032 - 0,055 (0,041) 0,01 - 0,03 (0,02)
El-Fadel et al. (1996) 0,1 - 0,5 (0,25) 4 938 (188) 0,053 - 0,075 (0,064) 0,01 - 0,04 (0,03)
Batstone et al., 2002 0,05 - 1,4 (0,4) 11 - 349 (56) 0,008 - 0,046 (0,03) 0,004 - 0,2 (0,02)
Garcia Heras (2002) 0,1 - 0,4 20 - 240 0,02 - 0,05 0,02 - 0,04
Mora-Naranjo et al. (2004) 0,1 - 0,5 (0,2) 10 - 320 (20) 0,02 - 0,06 (0,06) 0,005 - 0,02 (10
-4
)
Moyenne 0,37 160 0,05 0,03
Min 0,05 2 0,008 10
-4

Max 1,4 938 0,075 0,2
Entre parenthses figurent les valeurs appliques ou suggres par les auteurs (la plupart des donnes sont valables 35 C)
* diffrents facteurs ont t utilises pour la conversion des valeurs dans une unit commune (mg C.L
-1
) : g COT.g
actate
-1
=
0,4 ; g DCO.g
actate
-1
= 1,06

Ces paramtres biologiques ont t considrs invariants et nont pas t modifis par la suite afin
dtudier lensemble des rponses obtenues laide dun seul et unique jeu de donnes biologiques. La
rduction des carts entre rponses du modle et productions exprimentales du biogaz a t
accomplie en modifiant uniquement les valeurs des coefficients f
1
et f
2
(compte tenu de la
stoechiomtrie principalement) et les valeurs de concentration initiale en bactries mthanognes (dont
linfluence est uniquement cintique avec le formalisme employ ici). Concernant ces dernires, des
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 190 -
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valeurs identiques ont t utilises pour lanalyse des dgradations obtenues lors dune mme srie,
ralise avec le mme inoculum, en supposant donc que la flore endogne lchantillon tait faible
vis--vis des bactries prsentes dans linoculum.
Lidentification de ces trois paramtres a t ralise sous Matlab, laide dune interface ralise
spcifiquement et qui permet la modification de lensemble des paramtres, conditions initiales
incluses, et la visualisation des rponses correspondantes, de manire pratique. La Figure 49 prsente
une capture dcran de cette interface.
Figure 49 : Interface graphique ralise pour lidentification des paramtres du modle biologique

La rsolution du systme dquations diffrentielles a t ralise laide de la fonction ode15s
(algorithme de Runge-Kutta) de Matlab avec les conditions initiales suivantes :
2 4
2
4
X(0) = CO ( ) + CH ( ) ;
B(0) = variable selon les sries d'essais ;
S(0) = 0 ;
CO (0) = 0 ;
CH (0) = 0 ;



Tous les modles ont par ailleurs t rsolus de la sorte, laide de la fonction ode15s et par
visualisation des rponses laide dune interface graphique.

Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 191 -
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d. Valeurs des paramtres et analyse de sensibilit du modle
Les valeurs des paramtres biologiques ont t dtermines partir de la littrature. Le Tableau 41
(paragraphe prcdent) mentionne les fourchettes de valeurs cites et/ou utilises par diffrents auteurs
pour les bactries mthanognes actoclastes.
Ces valeurs prsentent une variabilit relativement importante et ont, par consquent, t utilises
(notamment la moyenne, le minimum et le maximum) afin de raliser une tude de sensibilit du
modle selon les conditions dfinies dans le Tableau 42. Par la suite, des valeurs proches des valeurs
moyennes prsentes Tableau 41 ont t utilises.

Tableau 42 : Rsum des conditions mises en uvre lors de lanalyse de sensibilit
Variables Valeurs
Composantes
Nom Symbole (units) de base de sensibilit
Biochimique Constante dhydrolyse k
H
(d
-1
) 0,15 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
Coefficients stoechiomtriques f
1
et f
2
*
0,7 -
Biologique Taux de croissance
m
(d
-1
) 0,4 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
Constante de demi saturation K
S
(mg C.L
-1
) 160 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
Taux dutilisation du substrat Y (mgC.mgC
-1
) 0,05 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
Taux de mortalit k
d
(d
-1
) 0,03 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
Conditions [C] en MO complexe X (0) 3000
1
(0,05 0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10 ; 20)
initiales [C] en microorganismes B (0) 30
2
(0,05 0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10 ; 20)
(mgC.L
-1
) [C] en MO soluble simple S (0) 0

-
[C] en biogaz CO
2
(0), CH
4
(0) 0 -
* : adimensionnels
1 : substrat 50 % MV, et 0,4 gC.gMV
-1
, incubations ralises de 3 15 g MV.L
-1
, impliquent 1000 <
[substrat] < 6000 mgC.L
-1
. Si toute la MV nest pas dgradable, la plus faible concentration, on a X < 1000.
2 : inoculum avec TS = 5 10 g MS.L
-1
, MV = 50 %, incubations ralises 50 % v/v inoculum, bactries avec
0,4 gC.gMV
-1
, impliquent 500 < [bactries] < 1000 mg C.L
-1
. Il faut cependant considrer quune certaine
proportion de cette biomasse est constitue de bactries mortes notamment et que les bactries vivantes ne sont
pas toutes des mthanognes en supposant que la moiti de la biomasse de linoculum est constitue de divers
polymres et de bactries mortes et que 1/10 de ces bactries sont des mthanognes, on a 25 < [B] < 50. La
plage tudie pour la sensibilit est plus large afin de reprsenter limpact dune trs faible concentration en
bactries (exprimentations sans inoculum notamment) et car ce paramtre est trs incertain.

Concernant les autres paramtres du modle :
La valeur de k
H
a t identifie pour chaque substrat et, globalement, les rsultats ont conduit 0,07 <
k
H
< 0,2 j
-1
.
De manire pralable (et pour ltude de sensibilit notamment), une valeur de 0,7 a t choisie pour
les deux coefficients f
1
et f
2
, pour plusieurs raisons. Tout dabord, ces valeurs ont t satisfaisantes
lors de simulations prliminaires et permettent notamment dobtenir au final P CO
2
P CH
4
et, plus
prcisment, P CH
4
= 0,49*X(0) i.e. ce qui a t observ exprimentalement de manire gnrale (cf.
II.2.2.a(i)). De plus, ces valeurs sont galement employes dans certaines approches. Concernant
ltape dhydrolyse / acidogense (coefficient f
1
), la production dactate et de dioxyde de carbone
partir de composs cellulosiques peut tre schmatise selon la raction suivante, laide de glucose
comme substrat standard (Batstone et al. 2002) :
6 12 6 2 3 2 2
2 2 2 4 C H O H O CH COOH CO H + + +
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 192 -
LGCIE, INSA Lyon
En considrant galement une synthse bactrienne partir du glucose selon
6 12 6 3 5 9 3 2
5 6 6 12 C H O NH C H O N H O + + , Nopharatana et al. (2007) proposent la raction globale
suivante :
6 12 6 3 2 5 9 3 3 2 2
0, 2434 1,1 0, 2434 1, 5944 1, 5944 3,188 C H O NH H O C H O N CH COOH CO H + + + + +

Ces deux relations conduisent des proportions de CO
2
form par unit de glucose dgrad (en
mgC
CO2
.mgC
glucose
-1
) de 0,33 et 0,27 respectivement, contre une valeur de 0,3 ici (avec f
1
= 0,7).
Concernant la mthanogense, en considrant la raction dactoclastie classique (cf. partie
bibliographique) telle que sous entendue ici (un groupe bactrien produisant du CO
2
et du CH
4
partir
dactate), la valeur du coefficient f
1
devrait tre de 0,5. Cependant, bien que cette voie de production
du mthane soit juge prdominante, en racteurs notamment (Mata-Alvarez, 2003), une partie du
mthane est forme par rduction des carbonates par les microorganismes hydrognophiles. De la
mme manire que dans les travaux de El-Fadel et al. (1996), une valeur de 0,7 a permis ainsi de
compenser la non prise en compte de ces bactries et de reprsenter ainsi ltape globale de
mthanogense laide dun seul groupe bactrien. Les valeurs de ces coefficients ont t lgrement
modifies par la suite afin de rduire lcart entre les rponses du modle et les productions
exprimentales pour chaque dgradation.

I.1.3. Modle biologique avec inhibitions de la mthanognse
Le modle prcdent a globalement permis de reprsenter un certain nombre de productions de biogaz
obtenues lors des premires incubations laide de jeux de donnes homognes. Cependant, certains
matriaux ractifs, pour lesquels les vitesses spcifiques de production de mthane taient apparues
plus faibles que les autres (cf. partie rsultats exprimentaux, II.2.2.a(ii)), nont pu tre modliss
correctement laide de paramtres identiques (et notamment laide dune concentration initiale en
microorganismes similaire pour une mme srie dessais). Afin de prendre en compte linfluence
dune accumulation transitoire dAGV lors de ces exprimentations, un phnomne dinhibition de la
mthanogense vis--vis de la concentration en AGV a t intgr au modle. Celui-ci a t introduit
de la mme manire que Vavilin et al. (2004) notamment, laide dun coefficient dinhibition I
AGV
,
de la forme suivante :
( )
1
1 ( / )
AGV
n
I
I
S K
=
+

Avec S, la concentration en carbone soluble dgradable (mgC.L
-1
)
K
I
, la constante dinhibition (mgC.L
-1
)
n, le degr de linhibition (adimensionnel)

Selon la valeur de S(t), le coefficient I
AGV
prend ainsi diffrentes valeurs comprises entre 0 et 1
permettant de reprsenter une diminution de lactivit mthanogne dans le cas de concentration
excessive en acide, en substrat. Ce coefficient a t tout simplement introduit au modle prcdent au
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 193 -
LGCIE, INSA Lyon
niveau de la loi de Monod dcrivant la croissance de la population bactrienne tel que cela a t
prsent en partie bibliographique, concernant les coefficients dinhibition non comptitive. Le
systme dquations diffrentielles dcrivant les variables du systme est alors le suivant :
1
2
1 2
4
2
1
1
(1 ) (1 )
1
H d
m
AGV d
S
m
H AGV
S
m
H AGV
S
m
AGV
S
dX
k X k B
dt
S dB
I k B
dt K S
S dS
f k X I B
dt Y K S
S dCO Y
f k X I f B
dt Y K S
S dCH Y
I f B
dt Y K S

= +

| |
=
|
+
\


= +


=
+



Lensemble des paramtres et variable du systme sont les mmes que prcdemment auxquels il faut
ajouter les paramtres K
I
et n du coefficient dinhibition I
AGV
.
La rsolution du systme dquations diffrentielles a t ralise comme prcdemment voqu
laide de la fonction ode15s de Matlab avec les conditions initiales suivantes :
2 4
*
2
4
X(0) = CO ( ) + CH ( ) ;
B(0) = fixe pour chaque srie ;
S(0) = 0 ;
CO (0) = 0 ;
CH (0) = 0 ;


*: fixe pour chaque srie lors des indentifications ralises partie prcdente avec le modle sans inhibitions
Concernant le coefficient dinhibition, le degr n permet de modifier lintensit de linhibition. La
constante dinhibition K
I
peut tre qualifie de constante de demi inhibition car elle reprsente la
concentration de linhibiteur (ici le substrat soluble, S) pour laquelle I
AGV
prend une valeur de 0,5.
Une valeur de 1400 mgC(S).L
-1
a t utilise de manire prliminaire tant donnes les observations
faites en partie exprimentale sur les essais a priori inhibs pour lesquels, partir de productions de
1000 mgC_CH
4
.L
-1
, les vitesses spcifiques de production de mthane avaient t rduites (cf.
II.2.2.a(ii) Partie B). Cette dernire valeur correspond une concentration en MO complexe
gazifiable, X(0), denviron 2000 mgC.L
-1
(avec f
1
= f
2
= 0,7) impliquant des concentrations de MO
soluble (S) maximale de f
1
2000 = 1400 mgC.L
-1
. Cette valeur est en accord avec la valeur identifie
par Vavilin et al. (2004), sur des incubations de dchets organiques solides, de 4,5 g(actate).L
-1

correspondant une constante de 1700 mgC(actate).L
-1
. Ces auteurs ont identifi par ailleurs une
valeur de 3 pour lordre de linhibition affectant la mthanognse.
Ces valeurs ont donc t utilises prliminairement puis les valeurs des paramtres K
I
et n ont
t identifies afin de rduire les carts entre prdiction du modle et productions exprimentales et de
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 194 -
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reprsenter lensemble des dgradations laide dun jeu de paramtres biologiques identiques et des
concentrations initiales en microorganismes similaires pour les essais raliss laide du mme
inoculum.

I.2. Influence de la taille des particules
Afin dintgrer linfluence de la taille des particules au modle et dtudier les dgradations ralises
sur les matriaux cellulosiques diffrentes granulomtries (cf. II.2.3.a Partie B), lapproche
prsente par Sanders et al. (2000) notamment a t adopte. Prsente succinctement en partie
bibliographique, la formalisation mathmatique de cette approche est dtaille ci-aprs avant de
prsenter le modle mis en uvre.

I.2.1. Aspects gnraux
Linfluence de la taille des particules a t intgre au modle au niveau de ltape dhydrolyse, celle-
ci tant une tape extracellulaire. En supposant que la totalit du matriau dgrad est couverte
denzymes hydrolytiques, la quantit de substrat hydrolyse peut tre alors considre proportionnelle
la surface disponible de ce dernier selon :
( )
( )
SBK
dM t
k S t
dt
=
Avec : - M(t), la masse de substrat au temps t, [M],
- S(t), la surface disponible au temps t, [L]
2
,
- k
SBK
, la constante dhydrolyse relative la surface [M].[L]
-2
.[T]
-1
, note SBK ( Surface
Based Kinetic ) en rfrence Sanders et al. (2000)

Cette constante dhydrolyse est donc invariable pour un substrat donn, et ce, quelle que soit la taille
des particules de ce dernier. En assimilant le matriau n particules de gomtrie sphrique (de rayon
R et de masse volumique ), les variables M(t) et S(t) peuvent tre formules de la manire suivante :
3
4
( ) ( )
3
M t n R t = et
2
( ) 4 ( ) S t n R t =
En rinjectant ces expressions dans la premire quation, la diminution du diamtre des particules au
cours du temps est obtenue :
( )
SBK
k dR t
dt
= soit
0
( )
SBK
k
R t R t

= par intgration entre 0 et t, et


avec des particules de rayon initial R
0
. Selon ce modle, le rayon des particules diminue donc
linairement au cours du temps. Il est par ailleurs possible de reformuler la quantit de matire
hydrolyse au cours du temps, toujours laide de la premire quation, selon :
2
0
( )
( ) 4
SBK
SBK SBK
k dM t
k S t k n R t
dt

| |
= =
|
\

Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 195 -
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Un systme de trois quations diffrentielles permet donc de dcrire les variations du rayon des
particules et des quantits (ou des concentrations si lon considre le volume total des particules
ngligeable devant celui du liquide dans lequel elles se trouvent et en supposant ce dernier constant)
de matire hydrolyse et de biogaz form ( laide des mmes considrations que I.1.1, c'est--dire
en supposant lhydrolyse comme ltape cintiquement limitante de la production de biogaz).

I.2.2. Structure du modle
Ce modle a t intgr au prcdent, au niveau de la phase dhydrolyse, laide de quelques
modifications. Tout dabord, une variable a t ajoute afin de reprsenter la diminution du diamtre
des particules (dR/dt). La mortalit bactrienne (k
d
B) a d tre intgre au sein dune autre variable
que la matire complexe hydrolyse car cette dernire est alors dpendante de la taille des particules.
Une constante dhydrolyse de cette biomasse a t ajoute afin de recycler les microorganismes de
la mme manire que prcdemment. La concentration de matire complexe hydrolyse a t
modlise laide de lquation de (dM/dt) prsente ci-dessus en supposant un volume constant (V)
de la phase aqueuse et en utilisant un coefficient de proportionnalit C
deg
/ V , C
deg
reprsentant
la quantit de carbone dgradable (gazifiable) par unit de masse sche de matriau (mgC.gMS
-1
).
Le systme dquations diffrentielles suivant a t utilis :
( )
( )
( )
deg 2
deg 2
1 1
deg 2 2
1 1 2
4 ( )
1
4 ( )
(1 ) 4 ( ) (1 ) (1 )
SBK
SBK
m
AGV d Hb m
m
AGV d
S
m
SBK Hb m AGV
S
SBK Hb m AGV
k dR
dt
C
dX
k n R t
dt V
dB
I k B k B
dt
S dB
I k B
dt K S
C
S dS
f k n R t f k B I B
dt V Y K S
C
dCO
f k n R t f k B f I
dt V

=
=
=
| |
=
|
+
\
= +
+
= + +
4
2
1
1
m
S
m
AGV
S
S Y
B
Y K S
S dCH Y
I f B
dt Y K S



Avec les nouvelles variables et paramtres suivants (par rapport au systme prsent partie
prcdente) :

Variables dynamiques :
R = rayon des particules (cm)
B
m
= biomasse inactive (mgC.L
-1
)
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 196 -
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Paramtres constants :
k
SBK
= constante dhydrolyse (g.cm
-2
.j
-1
)
k
Hb
= constante dhydrolyse de la biomasse inactive (j
-1
)
C
deg
= concentration en carbone gazifiable du matriau (mgC.gMS
-1
)
= masse volumique (g.cm
-3
)
n = nombre de particules
V = volume de suspension aqueuse (L)

La rsolution du systme dquations diffrentielles a t ralise comme prcdemment voqu avec
les conditions initiales suivantes :
*
2 4
m
2
4
R(0) = 0,05 (matriaux broys 1 mm) ou variable
X(0) = CO ( ) + CH ( ) ;
B (0) 0;
B(0) = variable selon les sries d'incubations;
S(0) = 0 ;
CO (0) = 0 ;
CH (0) = 0 ;


* : cf. paragraphe suivant

I.2.3. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres
La sensibilit du modle diffrentes tailles de particules a t value succinctement laide de
paramtres et conditions initiales spcifis en partie rsultats.
Les masses volumiques des matriaux incubs aux diffrentes granulomtries ont t dtermines
exprimentalement (cf. II.1.1.c Partie B). Le nombre de particules a t calcul partir de la masse
totale de matriau et de la masse dune particule lmentaire selon
deg
totale
3
particule
(X(0) V/ )
M
n=
M 4/3 R(0)
C

=

.
Une valeur de 0,1 j
-1
a t utilise pour lhydrolyse des bactries inactives (k
Hb
).

La constante dhydrolyse relative la surface k
SBK
a t identifie graphiquement pour chaque
matriau en rduisant les carts entre productions de biogaz exprimentales et modlises laide des
productions cumules de biogaz obtenues avec les tailles de particules 1 mm et en considrant ces
dernires comme effectivement des sphres de diamtre 1 mm. Les paramtres f
1
et f
2
ont t identifis
simultanment ainsi que les concentrations initiales en bactries mthanognes.

Les productions obtenues laide des particules de diamtres 10 ou 4 mm ont ensuite t analyses en
modifiant la taille des particules considres uniquement.
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 197 -
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I.3. Influence de la teneur en eau
Les rsultats obtenus lors de ltude de linfluence de la teneur en eau (cf. II.2.3.c Partie B) ont
dmontr une influence similaire celle prsente par Pommier et al. (2007). Par consquent, un
modle semblable celui propos dans leurs travaux a t utilis et calibr sur nos exprimentations.
Le modle a t dcrit succinctement en partie bibliographique et il est tout dabord dtaill avant de
prsenter lapproche mise en uvre ici.

I.3.1. Structure du modle
Le modle propos par Pommier et al. (2007) pour modliser linfluence de la teneur en eau sur la
dgradation anarobie de dchets solides intgre la fois un impact cintique et stoechiomtrique. Un
coefficient dinhibition adimensionnel dpendant de la teneur en eau effective du matriau permet la
modification des cintiques ractionnelles et de la stoechiomtrie ultime de la dgradation. Les valeurs
du coefficient sont bases sur lobservation, dans leurs travaux et galement au sein dautres
recherches (cf. Partie bibliographique), dune teneur en eau minimale (w
min
) en de de laquelle
lactivit bactrienne est inexistante et dune teneur optimale (la CRE du matriau, w
R
) au-del de
laquelle lactivit bactrienne est maintenue son optimum. Entre ces deux valeurs de teneurs en eau,
lactivit bactrienne tout comme la quantit de matriaux dgradables et accessibles sont limites, de
manire proportionnelle la teneur en eau.
En fonction de la teneur en eau effective (w), en eau minimale (w
min
) et la capacit de rtention en
eau du matriau (w
CRE
), le facteur dinhibition () prend les valeurs suivantes :
min
min
0
1
R
w w
w w

si
min
min R
R
w w
w w w
w w
<

< <

>



Le processus de mthanogense dans son intgralit est reprsent laide dune seule et unique
raction biologique, la mortalit bactrienne est nglige et seule la production de mthane est prise en
compte. Le schma ractionnel gnral trs simple est donc le suivant :

La croissance bactrienne est dcrite laide dune loi de type logistique afin de limiter lutilisation de
paramtres dont les valeurs sont difficilement identifiables (du type paramtres de la loi de Monod) et
afin dintgrer facilement limpact stoechiomtrique de la teneur en eau (une part de la MO nest pas
dgrade si w < w
R
). A laide des mmes considrations que celles utilises jusquici (taux
dutilisation du substrat et principe de conservation de la masse dans un systme ferm), le systme
dquations diffrentielles suivant est utilis pour reprsenter les variations de concentrations des
constituants du systme :
Polymres
organiques, X CH
4
B
Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 198 -
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max
0
0
4
1
1
1
m
X X dB
B
dt X
dX dB
dt Y dt
dCH Y dB
dt Y dt

| |
=
|
\


Avec :
Variables dynamiques (gDCO.gMS
initiale
-1
dans les travaux de Pommier et al., (2007))
B = concentration en bactries mthanognes
X = concentration en polymres organiques dgradables
CH
4
= concentration en mthane
Paramtres constants :
X
0
max
= concentrations en polymres dgradables initiale
X
0
= concentrations en polymres dgradables initiale et accessible (cf. ci-aprs)

m
= taux de croissance des bactries mthanognes (j
-1
)
Y = taux dutilisation du substrat


Les conditions initiales sont les suivantes :
0
max
0
4
(0)
(0)
(0) 0
B B
X X
CH
=

et limpact de la teneur en eau est pris en


compte, laide du facteur dinhibition (), selon :
max
max
0 0
m m
X X

avec
m
= taux de croissance
maximal (vis--vis de la teneur en eau) des bactries mthanognes.

Le modle mis en uvre dans la prsente tude a t similaire mis part que toutes les concentrations
ont t prises en compte ici en terme de mgC
dgradable
.gMS
initiale
-1
.
La mortalit bactrienne ntant pas prise en compte dans le modle, la quantit initiale en matire
dgradable (X
0
max
) est majore de la quantit de matire utilise in fine pour la synthse bactrienne
(qui nest alors pas restitue au systme).
Ainsi, dans les travaux de Pommier et al. (2007), il est considr que
max
0
1
1
biodgradable
initiale
gDCO
X
Y gMS
=


et dans la prsente tude que
max
0
1
1
gazifiable
initiale
mgC
X
Y gMS
=






Partie C : matriels et mthodes
Thse M. Rouez 2008 - 199 -
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I.3.2. Sensibilit du modle, valeurs et identification des paramtres
Les valeurs des paramtres biologiques (principalement le taux de croissance maximal et la
concentration initiale des bactries mthanognes) ont t identifies laide des rsultats obtenus sur
les exprimentations ralises des teneurs en eau non limitante (dsignes w
300%
et w
500%
en partie
exprimentale). La sensibilit du modle aux valeurs de ces paramtres a t rapidement value pour
diffrentes valeurs, proches de celles identifies, afin dillustrer leur influence gnrale.
Linfluence de la teneur en eau a ensuite t value laide de la production obtenue la teneur en
eau qui sest avre limitante (w
130%
), cintiquement et en terme de stoechiomtrie. La valeur de la
teneur en eau optimale du modle a t identifie afin de rduire les carts entre rponses du modle et
productions exprimentales de mthane observes pour les diffrentes teneurs en eau testes.
Enfin, lintgration de ce modle au modle complet avec inhibition prsent au I.1 a t value et
sera discute pour conclure la partie rsultats.

Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 200 -
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II. Rsultats et discussions
Les rsultats et discussions des modlisations ralises prsentent la mme structure que celle utilise
en matriels et mthodes, savoir, trois parties principales o sont prsents successivement :
II.1, le modle chimique / biologique dhydrolyse / mthanogense construit sur la base des
rsultats des incubations anarobies en conditions opratoires optimises ;
II.2, lintgration de linfluence de la taille des particules ce prcdent modle laide des
incubations de matriaux cellulosiques diffrentes granulomtries ;
II.3, le modle mis en uvre pour lanalyse de linfluence de la teneur en eau.

II.1. Hydrolyse et mthanogense en conditions optimises
La premire partie ( II.1.1) prsente les rgressions exponentielles ralises afin de dterminer les
constantes dhydrolyse de chaque matriau laide des productions de biogaz obtenues lors des ajouts.
La seconde dtaille les rsultats de la dmarche visant analyser les productions obtenues lors des
premires incubations ( II.1.2) laide du modle avec une tape biologique simple. Enfin, dans une
troisime partie, les rsultats du modle avec inhibition de la mthanogense sont discuts ( II.1.3).
II.1.1. Modle dordre un avec hydrolyse cintiquement limitante
Les rgressions ont t ralises sur les productions de biogaz total plutt que de mthane seul car la
production de ce dernier a parfois prsent de lgers temps de latence, mme en conditions dajout.
Lobjectif tant didentifier la vitesse de ltape dhydrolyse / acidogense, il a donc t suppos que
les productions de lensemble des gaz taient limites principalement par les cintiques de lhydrolyse.
Le dioxyde de carbone nayant pas prsent de tels retards, les rgressions exponentielles ont t
amliores en tant ralises sur les productions de biogaz total et ont par ailleurs permis
lobtention de constantes cintiques lgrement plus leves que si ralises sur le mthane seul (ce
qui par la suite, laide du modle biologique, sest avr bnfique). A titre dexemple, la Figure 50
illustre ces propos en reprsentant les rgressions et les constantes cintiques obtenues sur la
production cumule de biogaz total ou de mthane pour trois dchets LAN, FGF et BRUT tests en
srie 1 des incubations optimises .
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 201 -
LGCIE, INSA Lyon
Figure 50 : Illustration des rgressions exponentielles ralises sur les productions cumules (mL.gMS
-1
) de
biogaz total ( gauche) et de mthane ( droite) en fonction du temps (jours) et des constantes cintiques
obtenues

Dans la plupart des cas, il na pas t possible de distinguer, au sein des productions de biogaz (ou de
mthane) dun matriau complexe, lexistence de diffrentes fractions de matire prsentant des
constantes cintiques dhydrolyse diffrentes. Mis part les dchets verts (DV) reprsents en Fig. 4,
pour lesquels la considration de deux fractions, lune rapidement hydrolysable et lautre
lentement est apparue envisageable vue la forme de la production cumule de biogaz (et de
mthane), pour lensemble des autres matriaux, les productions de biogaz nont pu tre relies qu la
dgradation dun seul et unique type de matire complexe, tant donne la forme purement
exponentielle des productions obtenues. La Figure 50 illustre les productions typiquement
exponentielles obtenues sur la plupart des productions cumules. La Figure 51 illustre la production
obtenue sur le matriau DV et le fait que la prise en compte de deux types de matire, chacune
caractrise par un potentiel de biogaz et une constante cintique, amliore la qualit de la rgression
Temps (jours)
Biogaz total
0
100
200
300
400
500
600
0 10 20 30 40 50 60 70
Biogaz total
0
100
200
300
400
500
0 10 20 30 40 50 60 70
Biogaz total
0
100
200
300
400
500
600
0 10 20 30 40 50 60 70
CH4
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70
CH4
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70
CH4
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60 70
Matriau FGF
Matriau BRUT
k = 0,088 j
-1
k = 0,067 j
-1
k = 0,153 j
-1
k = 0,086 j
-1
k = 0,060 j
-1
k = 0,129 j
-1
Matriau LAN
P
r
o
d
u
c
t
i
o
n

c
u
m
u
l

e

(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 202 -
LGCIE, INSA Lyon
(celle-ci a t ralise sans contraintes, les valeurs de potentiels et de cintiques ont t dtermines
par le solveur pour minimiser lcart entre la production exprimentale et la rgression).
Figure 51 : Exemples de rgressions exponentielles simple ( gauche) et multi-susbtrats droite ralises
titre dexemple sur la production cumule moyenne de biogaz (mL.gMV
-1
) des dchets verts (DV)

Cependant, tant donne lincertitude lie lidentification de plusieurs types de matire pour
lanalyse de chaque matriau et tant donnes galement les formes typiquement exponentielles
obtenues pour la plupart des matriaux incubs, seules des rgressions exponentielles simples ont t
ralises. Le Tableau 43 rsume, pour chaque matriau test par ajout (deuxime incubation) au sein
des trois sries dexprimentations (cf. I.2.2.b Partie B), les constantes dhydrolyse obtenues laide
des rgressions exponentielles.

Tableau 43 : Constantes dhydrolyse obtenues laide de rgressions exponentielles sur les productions
cumules de biogaz total obtenues lors des ajouts
Exp. Matriau Constante k en j
-1
FG 0,128
LAN 0,088
FGF 0,153
BRUT 0,086
Srie 1
MAT 0,176
DV 0,096
FGb 0,153
DA 0,109
PETT 0,116
PMAG 0,123
Srie 2
TEXTS 0,091
BOIS 0,291
TEXTC 0,151
TETRAB 0,214
CELL 0,139
Srie 3
YE 0,192

Ces constantes cintiques ont t principalement utilises afin danalyser les productions obtenues lors
des premires incubations des matriaux (avant ajout), en considrant que, lors de ces incubations, les
DV Biogaz
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
B
i
o
g
a
z

c
u
m
u
l


(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
DV Biogaz
0
100
200
300
400
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
B
i
o
g
a
z

c
u
m
u
l


(
m
L
.
g
M
V
-
1
)
P(t) = 355(1-e
-0,096

t
)
P(t) = 116(1-e
-0,648

t
) + 259(1-e
-0,048

t
)
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 203 -
LGCIE, INSA Lyon
vitesses dhydrolyse ont t identiques celles mesures par ajout (via la production de biogaz). Cette
analyse est dtaille dans le paragraphe suivant.

II.1.2. Modle biologique simple avec hydrolyse suivie de mthanogense
Les rsultats de ltude de sensibilit sont dtaills en Annexe 7. Les conditions de mise en uvre de
cette analyse sont rappeles dans lannexe. Les principaux rsultats peuvent tre rsums de la manire
suivante :
les gammes de valeurs testes des paramtres biologiques nont globalement quune trs faible
incidence sur le comportement gnral du systme hormis aux valeurs extrmes.
les concentrations initiales en MO complexe dgradable pour une mme concentration en
microorganismes mthanognes (et inversement) ont une forte influence sur les cintiques de
production de biogaz et de mthane particulirement. Des cintiques exponentielles sont
obtenues pour des concentrations faibles en MO initiale ou des concentrations leves en
bactries mthanognes. Lhydrolyse est alors cintiquement limitante. Dans les cas
contraires, des cintiques sigmodales sont observes et cest alors la croissance des bactries
mthanognes qui limite dans un premier temps la production de gaz.
Ce dernier point est en accord avec les rsultats exprimentaux obtenus o des productions
sigmodales ont t observes lors des incubations de matriaux ractifs forte concentration et des
productions exponentielles ont caractris les incubations ralises par ajout des matriaux faible
concentration. Ce modle rend donc compte de linfluence du ratio I/S (B
0
/X
0
avec la terminologie
employe ici) prsente en partie exprimentale.
Par ailleurs, lors de lanalyse de sensibilit et didentification prliminaire des paramtres, il est apparu
que le jeu de paramtres biologiques convenant une reprsentation adquate des phnomnes
considrs (la production de biogaz) ntait pas unique, comme le reconnaissent dailleurs Vavilin et
al. (2004) notamment. Ce jeu de paramtres est aussi fortement dpendant des conditions initiales
utilises, et notamment de la concentration en bactries mthanognes. Ainsi, les effets, sur la
production de biogaz, de lutilisation dun taux de croissance faible des bactries mthanognes ou
dune constante de demi saturation leve, peuvent tre compenss par lutilisation dune
concentration initiale plus leve en microorganismes.
Etant donnes ces considrations, des valeurs proches des valeurs moyennes des paramtres
biologiques de la littrature ont t utilises par la suite et ce jeu de donnes na plus t modifi. Les
valeurs des paramtres biologiques du modle sont mentionnes Tableau 44 en parallle avec les
valeurs moyennes de la littrature prsentes partie matriel et mthodes ( I.1.2.d).

Tableau 44 : Valeurs des paramtres biologiques de la loi de Monod,
m
, K
S
, Y et k
d
utiliss dans le modle pour
les bactries mthanognes
Valeurs des paramtres biologiques
m
(j
-1
) K
S
(mg C.L
-1
) Y (m.m
-1
) k
d
(j
-1
)
Moyennes de la littrature 0,37 160 0,05 0,03
Utilises dans le modle 0,30 160 0,05 0,04
Partie C : rsultats et discussions
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Remarque : la valeur du taux de croissance maximal des bactries mthanognes a t lgrement
diminue par rapport la valeur moyenne, de 0,4 j
-1
0,3 j
-1
(cette valeur est dailleurs celle
prconise par Batstone et al., 2002). En parallle, une valeur de 0,04 j
-1
a t utilise pour la constante
de mortalit. Cette lgre augmentation par rapport la valeur moyenne de la littrature (0,03 j
-1
) a
permis de diminuer sensiblement les valeurs de concentration bactrienne obtenues en fin dincubation
(cest dailleurs le principal impact de la valeur de cette constante, cf. analyse de sensibilit). De cette
manire, les productions obtenues par ajout des matriaux ont t globalement modlises de manire
satisfaisante en utilisant, pour concentration initiale en bactries mthanognes de ces incubations, les
valeurs de concentrations finales en microorganismes obtenues par modlisation des premires
incubations.
Une concentration initiale en bactries mthanognes a t identifie pour chaque srie dincubations
ralises avec des inoculums diffrents (nomms Is1, 2 et 3, cf. I.2.2.b). Le Tableau 45 rcapitule les
valeurs de concentrations initiales en bactries mthanognes identifies pour chaque srie
dincubations ainsi que les valeurs des coefficients f
1
et f
2
identifies pour chaque matriau.

Tableau 45 : Paramtres utiliss (X
0
et k
H
) et identifis (B
0
, f1 et f2) pour la modlisation des productions de
biogaz pour chaque srie dexprimentations et matriaux tests
Exp.
B
0

(mgC.L
-1
)
Matriau
k
H

1

(j
-1
)
X
0

2

(mgC.L
-1
)
f1 f2
commentaire
3

(exp. / modle)
FG 0,128 1751 0,70 0,76 OK
LAN 0,088 2852 0,72 0,72 retard
FGF 0,153 2467 0,80 0,70 lger retard
BRUT 0,086 2386 0,70 0,70 retard
Srie 1 2
MAT 0,176 1198 0,80 0,65 OK
DV 0,096 625 0,70 0,82 avance
FGb 0,153 1764 0,70 0,83 OK
DA 0,109 2842 0,60 0,80 retard
PETT 0,116 1350 0,70 0,71 OK
PMAG 0,123 1629 0,70 0,70 OK
Srie 2 10
TEXTS 0,091 1385 0,68 0,68 OK
BOIS 0,291 134 0,60 0,50 OK
TEXTC 0,151 1573 0,79 0,58 OK
TETRAB 0,214 818 0,80 0,60 avance
CELL 0,139 1661 0,80 0,55 OK
Srie 3 5
YE 0,192 1470 0,70 0,70 avance
1 : paramtre identifi partie prcdente (cf. Tableau 43)
2 : paramtre dtermin laide des productions ultimes en biogaz exprimes en mgC.L
-1

3 : commentaire relatif aux rponses exprimentales par rapport aux rsultats du modle

Les Figure 52, Figure 53 et Figure 54 prsentent graphiquement les rponses obtenues par
modlisation vis--vis des productions exprimentales pour chacune des trois sries dincubations
respectivement.
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 52 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n1 (les paramtres de la modlisation sont mentionns Tableau 45)

FG
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X
B
S
CO2
CH4
CO2 exp
CH4 exp
LAN
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
FGF
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
BRUT
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
MAT
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
0 10 20 30 40 50 60
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 53 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n2 (les paramtres de la modlisation sont mentionns Tableau 45)
DV
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30 40 50
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X
B
S
CO2
CH4
CO2 exp
CH4 exp
FGb
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
0 10 20 30 40 50
DA
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50
PETT
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50
PMAG
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50
TEXTS
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 54 : Rponses obtenues par modlisation (lignes) vis--vis des productions de biogaz exprimentales
(points) de la srie dincubation n3 (les paramtres de la modlisation sont mentionns Tableau 45)

BOIS
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 10 20 30 40
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X
B
S
CO2
CH4
CO2 exp
CH4 exp
TEXTC
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40
TETRAB
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
0 10 20 30 40
CELL
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40
YE
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 208 -
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Pour la quasi totalit des matriaux, la modlisation sest avre trs satisfaisante. Les productions de
biogaz obtenues lors des premires incubations ont donc t correctement reprsentes en identifiant
une constante dhydrolyse lors des secondes incubations et en ajoutant une composante bactrienne
permettant dintgrer une tape de mthanogense potentiellement limitante en fonction des conditions
de concentration et notamment du ratio I/S.

Les diffrentes concentrations initiales en bactries mthanognes B
0
identifies pour chaque srie
dincubations et la teneur en MV de linoculum utilis (cf. Tableau 34 en partie exprimentale)
prsentent dailleurs une relation linaire significative (cf. Figure 55).

Figure 55 : Relations entre teneur en MV des inocula utiliss et la concentration initiale B0 en bactries
mthanognes dtermine par le modle
( droite, le passage de la droite au point (0,0) est forc)

Remarque : le contenu identifi en microorganismes mthanogne de linoculum est donc faible :
environ 1 mgC
bact
/gMV
inoc
soit environ 2 mgC
bact
/gC
inoc
. En supposant que la moiti de ce carbone
nest pas de la biomasse active, on obtient 4 mgC
bact
/gC
bact
et les bactries mthanognes
reprsenteraient 0,4 % de la biomasse active totale de linoculum.

Pour certains matriaux, les rponses exprimentales ont prsent soit une avance soit un retard vis--
vis des productions modlises (cf. graphiques prcdents Figure 52, Figure 53 et Figure 54 et
commentaires Tableau 45).
Les avances exprimentales vis--vis des rponses du modle concernent quelques matriaux
spcifiques, principalement DV, TETRAB et YE. Plusieurs hypothses peuvent tre avances quant
leur explication :
Pour les dchets verts, la vitesse dhydrolyse a potentiellement t sous estime lors des rgressions
exponentielles ralises. La rgression exponentielle prsentait un cart avec la production
exprimentale et elle a t amliore en considrant le matriau compos de deux fractions, lune
rapidement dgradable, avec une constante dhydrolyse de 0,648 j
-1
, et lautre lentement, la vitesse
de 0,048 j
-1
(cf. Figure 51).
Pour les extraits de levure (YE) et la fraction de DMA tetrabricks (TETRAB), les rgressions
exponentielles nont pas prsent dcarts comme pour les dchets verts et une sous estimation de la
constante dhydrolyse est donc moins probable. La prsence dune population endogne a
Is3
Is2
Is1
y = 1,50x - 2,95
R
2
= 0,99
0
2
4
6
8
10
12
0 2 4 6 8 10
Inocul um (expri mental , gMV.L
-1
)
B
0

(
m
o
d

l
e
,

m
g
C
.
L
-
1
)
Is3
Is2
Is1
y = 1,05x
R
2
= 0,89
0
2
4
6
8
10
12
0 2 4 6 8 10
Inocul um (expri mental , gMV.L
-1
)
B
0

m
o
d

l
e

(
m
g
C
.
L
-
1
)
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 209 -
LGCIE, INSA Lyon
ventuellement contribu de manire non ngligeable la concentration initiale en microorganismes
mthanognes notamment pour les extraits de levures qui, du fait de leur nature, sont susceptibles de
renfermer des bactries ltat de dormance.
Pour le matriau TETRAB, la prsence dune flore endogne, bien que discutable, nest pas
invraisemblable puisquil sagissait de matriaux usags (briques de lait et de jus de fruits) avec des
rsidus prsentant une volution biologique lors de la rcupration de la fraction. Cependant, le
matriau est galement susceptible de contenir certains lments traces qui se sont avrs bnfiques.
Les graphiques suivants (Figure 56) prsentent titre dexemple les rsultats de modlisation obtenus,
en considrant deux fractions pour DV et en augmentant la concentration initiale en bactries
mthanognes pour YE.
Pour le matriau DV, les paramtres obtenus par rgression multi-substrats prsents Figure 51 ont
t utiliss. Sur les 355 mL(biogaz).gMV
-1
produits au total, 116 mL.gMV
-1
(33 %) ont t hydrolyss
rapidement (0,648 j
-1
) et le restant la vitesse de 0,048 j
-1
. Etant donn la cintique trs rapide
identifie par pour la fraction rapidement hydrolysable , cette dernire a t considre comme de
la matire organique soluble (S) dans le modle. Ainsi, Les 625 mgC.L
-1
utiliss prcdemment
comme condition initiale pour la MO complexe, hydrolyse selon une constante de 0,096 j
-1
, ont t
rduits 432 mgC.L
-1
hydrolyss selon une constante de 0,048 j
-1
. 193 mgC.L
-1
(33 %) ont t
considrs comme de la MO soluble initiale (S(0)).
Pour les extraits de levures (YE), les concentrations initiales en microorganismes mthanognes ont
t augmentes de manire rduire les carts entre productions exprimentales et modlisations. Un
B(0) de 13 mgC.L
-1
a t dtermin contre une valeur de 5 mgC.L
-1
pour les incubations de la srie
dessais n3.
Figure 56 : Rponses du modle (lignes) suite aux modifications ralises pour rduire les carts avec les
productions exprimentales (points) des matriaux DV et YE

Ces modifications ont permis damliorer les rponses du modle vis--vis des productions
exprimentales de biogaz. Il est remarquable que ces points particuliers aient t soulevs suite la
dmarche de modlisation qui, avant de constituer un outil de prdiction, savre donc tre un outil
fonctionnel danalyse des rsultats. Par ailleurs, les modifications ralises pour reprsenter
convenablement ces productions de biogaz illustrent les pistes damliorations potentielles de la
caractrisation dun matriau en vue de la prdiction de son comportement. Lanalyse de la fraction
YE
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
DV
0
100
200
300
400
500
0 10 20 30 40 50
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X
B
S
CO2
CH4
CO2 Exp
CH4 Exp
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 210 -
LGCIE, INSA Lyon
soluble dgradable et lanalyse de la population mthanogne endogne aux chantillons apparaissent
comme des caractristiques trs importantes.
Remarque : pour les dchets verts (DV), un dcalage entre productions de dioxyde de carbone
exprimentale et modlise est apparu. Celui-ci est du lutilisation des mmes coefficients
stoechiomtriques f
1
et f
2
que ceux prcdemment identifis et lintroduction dune fraction de MO
soluble qui, ntant plus hydrolyse, rduit la production globale de CO
2
. Ce point illustre certaines
limites du modle sur lesquelles nous reviendrons dans la partie suivante traitant des inhibitions.
Les retards exprimentaux observs ont essentiellement affect les matriaux pour lesquels des
vitesses spcifiques de production de mthane nettement infrieures celles des autres matriaux
avaient t obtenues. Cet aspect a t remarqu et discut en partie exprimentale partir des
rgressions de Gompertz ralises (cf. II.2.2.a(ii) Partie B). Comme dores et dj soulign dans
cette partie exprimentale, cet effet provient vraisemblablement dune inhibition de la mthanogense
due des AGV accumuls de manire transitoire et concerne dailleurs les expriences avec les
concentrations initiales en MO gazifiables les plus leves (X
0
> 2000 mgC.L
-1
, cf. Tableau 45). La
partie suivante ( II.1.3) a pour but dintgrer ce phnomne au modle.

II.1.3. Modle biologique avec inhibition de la mthanogense
Afin de reprsenter, laide dun jeu de conditions initiales homognes, lensemble des productions de
biogaz obtenues en partie incubations optimises , il est apparu envisageable dintroduire un
phnomne dinhibition de la croissance des bactries mthanognes aux acides forms lors de ltape
dhydrolyse / acidogense pour reprsenter les productions retardes obtenus sur les matriaux
LAN, BRUT et DA.
La Figure 57 illustre les effets du coefficient dinhibition sur la production de mthane pour
diffrentes valeurs de K
I
(autour de la valeur prliminaire choisie de 1400 mgC.L
-1
) avec une valeur de
3 pour lordre de linhibition (n). Les paramtres et conditions initiales utilises sont ceux du dchet
LAN dont les valeurs ont t prsentes partie prcdente. La production exprimentale est indique
galement titre comparatif ainsi que la rponse du modle sans inhibition (dsigne ).
Figure 57 : Rponses du modle, productions de mthane gauche et de MO soluble droite selon la valeur de
la constante dinhibition K
I
(avec n = 3) ; la production exprimentale ( Exp.) est indique titre comparatif ainsi
que la rponse du modle sans inhibition ( )

0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
Exp.

1600
1400
1200
1000
800
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
KI =
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 211 -
LGCIE, INSA Lyon
Les diffrentes valeurs de K
I
ont un effet considrable sur la rponse du systme dans la gamme teste.
Plus la constante diminue, plus lactivit mthanogne est rduite et cet effet est dautant plus rapide
quen parallle la MO soluble et donc linhibiteur saccumule et atteint des maxima plus levs.
Leffet devient trs important lorsque cette dernire atteint des concentrations suprieures la valeur
de K
I
puis inhibe totalement lactivit bactrienne lorsque visiblement S(t) dpasse la valeur de 2*K
I
.
Seule une fraction de mthane est produite avant linhibition totale et la MO soluble persiste (leffet
semble irrversible, la rsolution a t teste jusqu 900 jours).

Les valeurs du degr de linhibition n vont galement avoir des effets notables. La Figure 58
prsente la sensibilit du coefficient dinhibition aux valeurs de ce paramtre avec une constante K
I
de
1400 mgC(S).L
-1
.
Figure 58 : Valeurs du coefficient dinhibition de la mthanogense I
AGV
en fonction de la concentration en
substrat soluble S (AGV) pour diffrentes valeurs du degr de linhibition, n (avec KI = 1400 mgC.L-1)

Le degr de linhibition permet ainsi daugmenter la force de linhibition et plus prcisment de
rduire lintervalle de concentration o une inhibition prononce est observe. Sa variation peut donc
avoir des effets contradictoires : si la concentration maximale atteinte en inhibiteur se trouve
lgrement infrieure la valeur de K
I
, laugmentation de n diminue linhibition et, dans le cas
contraire, laugmentation de lordre va prononcer linhibition.
IAGV = f(S,n)
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
0 1000 2000 3000 4000 5000
S (mgC.L
-1
)
I
A
G
V
n = 1
n = 2
n = 3 n = 7
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 212 -
LGCIE, INSA Lyon
Lidentification graphique des paramtres du coefficient dinhibition na pas t vidente. La valeur de
K
I
a due en effet tre abaisse 1100 voire 1000 mgC.L
-1
pour avoir une inhibition satisfaisante
sur les trois matriaux. Cependant, cette valeur, linhibition impacte galement certaines productions
de mthane des autres incubations de matriaux qui nont pas t, a priori, inhibes. Afin dtudier la
possibilit de reprsenter toutes les incubations en considrant linhibition avec une constante
identique pour lensemble des matriaux, lordre n de linhibition a t augment. Cela a permis de
ne pas impacter les productions des autres matriaux pour lesquels des rponses satisfaisantes avaient
t obtenues laide du modle sans inhibition. La rponse du modle pour lincubation du dchet
LAN avec K
I
= 1100 mgC.L
-1
et n = 5 est prsente Figure 59.
Figure 59 : Rponses obtenues par modlisation avec inhibition de la mthanogense (lignes) vis--vis des
productions de biogaz exprimentales (points) du dchet LAN (les paramtres de la modlisation sont
mentionns Tableau 45 et linhibition est simule avec KI = 1100 mgC.L-1 et n = 5)

Toutefois, avec ces paramtres du coefficient dinhibition (K
I
= 1100 mgC.L
-1
et n = 5), les rponses
du modle obtenues pour les incubations des matriaux BRUT et DA prsentent toujours une lgre
avance vis--vis des productions exprimentales. Les productions modlises ne sont pas assez
impactes car les concentrations en inhibiteur (en MO soluble) maximales atteintes ne sont pas assez
importantes.
Plusieurs hypothses peuvent tre avances quant lexplication de ce phnomne :
1. la vitesse dhydrolyse de ces matriaux a t sous estime car une lgre inhibition a persist lors
de la seconde incubation, par ajout ;
2. la composition des AGV produits a t diffrentes selon les matriaux (lacide propionique, par
exemple, prsente un seuil de toxicit plus faible que les autres) ;
3. le pH, plutt que la concentration en acides, a jou un rle prpondrant durant les premiers jours
de certaines incubations (avant de revenir des valeurs neutres lgrement basique) ;
4. la fraction de carbone (total gazifiable) hydrolyse en AGV (coefficient f
1
) a t sous-estime du
fait dune production abiotique de CO
2
(par acidification).

LAN
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X
B
S
CO2
CH4
CO2 Exp
CH4 Exp.
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 213 -
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Chacune de ces hypothses peut, en quelque sorte, tre valide par le modle : laugmentation des
constantes dhydrolyse (1) tout comme la diminution de la constante dinhibition (2) permettent
dobtenir des inhibitions satisfaisantes pour les matriaux BRUT et DA individuellement. Concernant
les hypothses 3 et 4, il est galement possible dobtenir une modlisation satisfaisante pour ces
matriaux en modifiant les coefficients stoechiomtriques f
1
et f
2
(f
1
0,9 et f
2
0,5). La production
de CO
2
est alors sous estime par le modle mais lexcs exprimentalement obtenu peut tre affect
lacidification temporaire du milieu (f
1
reste alors cohrent avec une tape dhydrolyse et f
2
est plus
faible car linhibition des bactries hydrognophiles a t plus importante par exemple).
Ces points illustrent donc nettement les limites du modle propos. Des mesures complmentaires,
telles que les concentrations en AGV ou lvolution du pH au cours de la dgradation, seraient
ncessaires pour une description plus prcise des productions de mthane observes.

Cependant, le modle confirme loccurrence dinhibitions pour certaines des incubations ralises
avec des matriaux fortement biodgradables des concentrations leves (10 gMV.L
-1
) et parat en
mesure de reprsenter le phnomne dinhibition observ moyennant une description plus dtaille.
Afin dillustrer cette dernire remarque, il est notable que plusieurs points remarqus en partie
exprimentale sont confirms par la modlisation :
- les inhibitions irrversibles obtenues lissue des incubations de cellulose 10 gMV.L
-1
lors des
sries 1 et 2 sont reprsentables avec les paramtres dinhibition identifis ci-dessus, les
concentrations initiales en micro-organismes (B
0
) identifies pour chaque srie et la constante
dhydrolyse identifie sur lajout de cellulose non inhib en srie 3. Les quantits de MO solubles
accumules en solution donnes par le modle sont cohrentes avec celles obtenues
exprimentalement et une lgre production de mthane est galement prdite ;
- la relation observe exprimentalement (Figure 36) entre vitesses maximales de production de
mthane (R
m
) et potentiels ultimes atteints (Pot CH
4
), exprims en mgC.L
-1
.j
1
et en mgC.L
-1

respectivement, est galement bien reprsente. A laide du modle sans inhibition, la relation est
totalement linaire : la vitesse maximale est proportionnelle la concentrations initiales en MO
gazifiable (aux potentiels ultimes) pour une concentration initiale donne en bactries mthanognes
(la vitesse spcifique de production de mthane est constante). Avec intgration de linhibition de la
mthanogense, la relation nest plus linaire partir dune certaine concentration en MO initiale et la
relation observe entre R
m
et Pot CH
4
prsente une forte similitude avec celle observe
exprimentalement. La Figure 60 illustre la relation obtenue entre les deux paramtres par simulation
et rgressions de Gompertz sur les productions cumules modlises.
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 60 : Relation entre vitesse maximale de production du mthane (Rm) et potentiels mthanognes ultimes
(Pot CH
4
) obtenue par rgressions de Gompertz sur les rponses du modle pour diffrentes concentrations
initiales en MO complexe gazifiable

- enfin, concernant la relation observe entre temps de latence et vitesses de production maximales du
mthane lors des incubations de mise au point du protocole optimis (cf. Figure 28, Partie B) : laide
du modle biologique sans inhibition, les temps de latence sont principalement dpendant de la
quantit initiale de bactries mthanognes et la vitesse dpendante de la charge organique. La
dgradation dune quantit de matire avec diffrentes concentrations initiales en micro-organismes
(cas des incubations de mise au point) prsente donc des temps de latence diffrents mais une vitesse
similaire. Avec inhibition de la mthanogense, les vitesses sont influences partir dune certaine
concentration et, selon le ratio I/S (B
0
/X
0
), il est possible dobtenir la relation observe sur une gamme
de B
0
. Cependant, ces exprimentations nont pas t analyses suffisamment pour dtailler cet aspect.


La partie suivante prsente les rsultats du modle avec intgration de linfluence de la taille des
particules.

0
20
40
60
80
100
120
0 500 1000 1500
Pot CH4 (mgC_CH4.L
-1
)
R
m

(
m
g
C
_
C
H
4
.
L
-
1
.
j
-
1
)
Partie C : rsultats et discussions
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II.2. Influence de la taille des particules
La bagasse de canne sucre nayant pas prsent de diffrences significatives pour les diffrentes
granulomtries testes, les rsultats obtenus sur ce matriau nont pas t exploits laide du modle
(cf. II.2.3.a, Partie B). Seuls les rsultats obtenus sur les diffrents papiers (PB, PC et PJ) et le bois
de tilleul (TIL) ont donc t analyss.
Dans un premier temps, les constantes dhydrolyse relative la surface ont t identifies pour chaque
matriau partir des rsultats des incubations 1 mm, en supposant que le matriau se composait
effectivement de particules sphriques de 1 mm.

II.2.1. Identification des constantes dhydrolyse
Le Tableau 46 rcapitule les valeurs des diffrents paramtres utiliss pour lidentification des
constantes dhydrolyse k
SBK
de chaque matriau ainsi que les valeurs identifies de k
SBK
, f
1
, f
2
et
concentrations initiales en bactries mthanognes (B
0
).

Tableau 46 : Valeurs des paramtres utiliss et identifis pour la dtermination de la constante dhydrolyse k
SBK

des diffrents matriaux partir des incubations 1 mm et du modle ddi
Paramtres utiliss
.
.
Paramtres identifis
M
volumique
V C
deg
X
0
R
0
f
1
f
2
B
0
k
SBK

Matriau
(g.cm
-3
) (litre) (mgC.gMS
-1
) (mgC.L
-1
) (cm) / / (mgC.L
-1
) (g.cm
-2
.j
-1
)
PC 0,43 1,1 255,9 1327 0,05 0,6 0,81 15 0,00047
PB 0,48 1,1 310,9 1640 0,05 0,7 0,68 8 0,00055
PJ 0,6 1,1 159,6 834 0,05 0,7 0,7 8 0,00083
TIL 0,8 0,122 165,3 1521 0,05 0,7 0,83 0,01 0,000145

La Figure 61 illustre les rponses du modle vis--vis des rponses obtenues exprimentalement pour
chaque matriau incub, broy 1 mm.
Linhibition intgre au modle nest pas intervenue dans les simulations, tant donnes notamment
les concentrations en matire gazifiable initiale, infrieures 2000 mgC.L
-1
. Dans ces conditions, les
concentrations initiales en bactries mthanognes ont un impact principalement sur les temps de
latence de la production de mthane et cela a facilit leur identification (il existe cependant une
concentration en de de laquelle, du fait des temps de latence, la MO soluble saccumule et peut
devenir inhibitrice, selon la vitesse de ltape dhydrolyse notamment). Les constantes dhydrolyse
ont alors t identifies finement laide des productions obtenues aprs les phases de latence
initiales.
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 61 : Rponses du modle aprs identification des paramtres vis--vis des productions exprimentales
obtenues sur les incubations des diffrents papiers (PC, PB et PJ) et du bois de tilleul (TIL) broys 1 mm

Exprimes en g.cm
-2
.j
-1
, les constantes dhydrolyse savrent relativement faibles (cf. Tableau 46).
Sanders et al. (2000) rapportent une constante dhydrolyse (k
SBK
) de 0,4 g.m
-2
.h
-1
pour des particules
damidon (identifie avec une reprsentation mathmatique similaire). Dans les mmes units, les
constantes dtermines ici sur les matriaux PC, PB, PJ et TIL sont de 0,20 ; 0,23 ; 0,34 et 0,06 g.m
-
2
.h
-1
respectivement. Ces valeurs paraissent donc a priori cohrentes car lamidon shydrolyse plus
rapidement que ces matriaux cellulosiques.

La sensibilit du modle a t principalement value vis--vis des valeurs du paramtre taille des
particules . La figure suivante illustre les rponses de plusieurs variables du modle (R(t), S(t) et
CH
4
(t)) pour quatre rayons initiaux de particules (0,5 ; 1 ; 2 et 3 mm). Les valeurs utilises pour les
paramtres et les conditions initiales (autres que le rayon initial des particules) sont celles du matriau
PJ, prsentes Tableau 46.

TIL
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 50 100 150 200 250
Temsp (jours)
PC
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
0 10 20 30 40 50 60
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X B S CO2 CH4 CO2 Exp CH4 Exp
PB
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
X B S CO2 CH4 CO2 Exp CH4 Exp
PJ
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
Partie C : rsultats et discussions
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Figure 62 : Sensibilit du modle aux valeurs de tailles des particules dgrades (les autres paramtres du modle
sont ceux du matriau PJ, mentionns Tableau 46).

Le modle savre donc trs sensible la taille initiale des particules. Alors que la MO complexe est
totalement dgrade au bout de trente jours avec des particules de 0,5 mm de rayon, la dgradation
nest pas termine au bout de 90 jours pour des particules de 2 ou 3 mm. Dans les conditions simules
ici, la biomasse mthanogne nest pas limitante et la production de CH
4
est quasi-directement
proportionnelle la quantit de MO complexe hydrolyse. Les carts entre rponses du modle et
productions exprimentales de biogaz obtenues avec des particules de granulomtrie suprieure ont t
rduits graphiquement en modifiant le rayon initial des particules, et uniquement ce paramtre. Etant
donne la sensibilit du modle au rayon de particules, il est clair que les exprimentations ralises
avec des granulomtrie de 10 et 4 mm nont pu tre interprtes avec le modle en considrant des
rayons initiaux de particules de 5 et 2 mm respectivement. Limpact modlis savre en effet trop
important.
La Figure 63 prsente, pour chaque matriau, les productions de biogaz exprimentales et les rponses
du modle ainsi que le rayon initial considr afin de minimiser les carts. Les productions des
papiers, broys 10 mm, ont donc t correctement reprsentes en considrant des rayons de
particules trs faiblement suprieurs 0,5 mm : de 0,7 mm pour les papiers journaux (PJ10) et de
bureau (PB10) et de 0,6 mm pour les papiers carton (PC10). Ces matriaux ntaient bien sr pas des
particules sphriques de diamtre de 10 mm mais des papiers dilacrs laide dune grille de 10 mm.
Ils prsentent une face fine (< 1 mm) et ne peuvent pas en toute rigueur tre assimils une sphre de
rayon prcis. Un facteur de forme des particules pourrait donc tre intgr pour amliorer le modle.
La rponse obtenue pour le bois de tilleul sest avre plus satisfaisante puisque le matriau broy
4 mm a du tre considr comme des particules sphriques de 1,5 mm de rayon.
Le modle a permis de reprsenter convenablement leffet observ de laugmentation de la taille des
particules incubes. La reprsentation de ce facteur dinfluence, son intgration un modle, nest pas
la vritable problmatique qui rside davantage dans la connaissance de la surface effectivement
disponible. Les travaux de Sanders et al. (2000) raliss laide de particules damidon, de rayon
connu avec prcision, confirment galement le comportement adquate du modle et limportance de
la surface hydrolysable de substrat. Diffrentes mthodes analytiques de dtermination de la surface
spcifique dun matriau existent (dtermination de la quantit dune substance spcifique adsorbe
sur la surface du matriau, analyse dimage microscopique du matriau laide de logiciels ddis par
exemple). Sur les matriaux simples tudis ici, de telles caractrisations auraient pu tre ralises,
mais elles paraissent dlicates sur un DMA rel, complexe et htrogne.
Rayon des particules
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
R

(
t
)

e
n

c
m
Concentration en MO complexe
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
X

(
t
)

e
n

m
g
C
.
L
-
1
R0 = 0,5 mm R0 = 1 mm R0 = 2 mm R0 = 3 mm
Concentration en CH4
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
H
4

(
t
)


e
n

m
g
C
.
L
-
1
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 218 -
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Figure 63 : Productions exprimentales de biogaz et rponses du modle pour les incubations des diffrents
papiers (PC, PB et PJ) et du bois de tilleul (TIL) broys 10 et 4 mm respectivement (en encadrs figurent les
rayons initiaux identifis)

Pour conclure, malgr cette problmatique lie la surface, les constantes dtermines sur les
matriaux broys 1 mm semblent toutefois pouvoir tre utiles pour la prdiction de cintiques
dhydrolyse sur des matriaux similaires mais de granulomtries suprieures. Ces constantes
pourraient galement tre calcules pour les autres fractions de DMA analyses, partir des
incubations o lhydrolyse tait vraisemblablement limitante comme les ajouts. Lutilisation de
donnes gnralistes concernant la distribution granulomtrique des constituants de DMA pourrait
permettre lutilisation de ces cintiques des fins diverses.


PC 10
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
0 10 20 30 40 50 60
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X B S CO2 CH4 CO2 Exp CH4 Exp
PB 10
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
X B S CO2 CH4 CO2 Exp CH4 Exp
PJ 10
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
L
-
1
)
TIL 4
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 50 100 150 200 250
Temps (jours)
R0 = 1,5 mm
R0 = 0,7 mm
R0 = 0,7 mm
R0 = 0,6 mm
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 219 -
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II.3. Influence de la teneur en eau
Les rsultats obtenus lors de ltude de linfluence de la teneur en eau (cf. II.2.3.c Partie B) ont t
utiliss afin de calibrer un modle similaire celui prsent par Pommier et al. (2007). Dans un
premier temps, certains des paramtres et conditions initiales du modle ont t identifis laide des
exprimentations o la teneur en eau ne constituait pas un facteur limitant. Linfluence de la teneur en
eau a ensuite t value laide de lincubation ralise une teneur en eau rduite o des impacts
cintiques et stoechiomtriques ont t observs. Cet aspect est prsent dans une seconde partie.
Enfin, dans une dernire partie, lintgration des impacts lis la teneur en eau dans le modle
construit prcdemment est discute ainsi que les limites de lapproche considre.

II.3.1. Identifications prliminaires
La production moyenne de mthane obtenue pour des teneurs en eau non limitantes (en loccurrence
w = 3 et 5 gH
2
O.gMS
i
-1
) a t utilise pour identifier le taux de croissance (
max
) et la concentration
initiale en bactries mthanognes (B
0
). La valeur de la capacit de rtention en eau (utilise dans le
modle, w
RET
) a t fixe 133 % dans un premier temps, tant celle mesure exprimentalement
(pour toute valeur infrieure ou gale 300 %, la teneur en eau na pas dinfluence et les autres
paramtres peuvent tre identifis indiffremment de la valeur choisie).
La Figure 64 prsente la rponse du modle (pour les trois variables X, B et CH
4
) obtenue laide des
paramtres et conditions initiales mentionns Tableau 47.

Figure 64 : Rponse du modle vis--vis de la production exprimentale de mthane pour lincubation du
matriau MAT une teneur en eau de 5 gH
2
O.gMS
-1
laide des paramtres et conditions initiales mentionnes
Tableau 47

Variables du sytme avec paramtres identifis
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
0 20 40 60 80 100 120
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
g
M
S
i
n
i
t
i
a
l
e
-
1
)
X
B
CH4
CH4exp
Partie C : rsultats et discussions
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Tableau 47 : Valeurs des paramtres utiliss et identifis (taux de croissance et concentration initiale des
bactries mthanognes) sur la production de mthane du dchet MAT incub 500 % H
2
O.
Paramtres fixs Paramtres identifis
Y X
0
1
w
2
w
RET
w
MIN
3

max
B
0

(mgC.mgC
-1
) (mgC.gMS
i
-1
) (gH
2
O.gMS
i
-1
) (gH
2
O.gMS
i
-1
) (gH
2
O.gMS
i
-1
) (j
-1
) (mgC.gMS
i
-1
)
0,05 37,39 5 ou 3 1,33 0,53 0,13 0,07
1 : dtermin partir des productions moyennes de mthane ultime obtenues sur les essais avec 300 et 500 %
dH
2
O (gH
2
O.gMS
i
-1
.100)
2 : W = valeur exprimentale de teneur en eau teste ; W
RET
= CRE exprimentale du matriau
3 : Valeur de teneur en eau minimale dtermine par Pommier et al. (2006)

Les valeurs du taux de croissance et de la concentration initiale en bactries mthanognes ont t
identifies aisment, celles-ci influenant principalement la vitesse et le temps de latence de la
production de mthane respectivement. La Figure 65 illustre la sensibilit du modle aux valeurs de

max
et B
0
autour des valeurs identifies partir de la production exprimentale obtenue.

Figure 65 : Sensibilit du modle aux valeurs du taux de croissance et de la concentration initiale des bactries
mthanognes laide des conditions initiales mentionnes Tableau 47

Les paramtres (et conditions initiales) biologiques identifies par Pommier et al. (2006) sont les
suivants : Y = 0,05 gDCO
biomasse
.gDCO
substrat
-1
;
maxc
= 0,088 j
-1
; B
0
= 0,0004 gDCO
biomasse
.gMS
initiale
-1
.
Le taux dutilisation du substrat est donc similaire celui utilis jusqu prsent car on peut considrer
gDCO
biomasse
.gDCO
substrat
-1
gC
biomasse
.gC
substrat
-1
. Le taux de croissance des bactries mthanognes
correspond aux valeurs basses de la littrature (cf. Tableau 41) et est beaucoup plus faible que celui
utilis jusquici de 0,4 j
-1
. La concentration initiale en bactries exprime en mgC.gMS
initiale
-1
est de B
0

= 0,00015 mgC
biomasse
.gMS
i
-1
(la biomasse peut tre caractrise par 0,376 gC.gDCO
-1
, Batstone et al.
2002)).
Ces taux de croissance et concentration en bactries initiales se sont avrs beaucoup trop faibles pour
nos essais car la production de mthane a t beaucoup plus rapide que lors des travaux raliss par
Pommier et al. (2007).

0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
0 20 40 60 80 100 120
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
g
M
S
i
n
i
t
i
a
l
e
-
1
)
m = 0,03
m = 0,08
m = 0,13
m = 0,23
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
0 20 40 60 80 100 120
Temps (jours)
B0 = 0,0007
B0 = 0,007
B0 = 0,07
B0 = 0,7
CH
4
CH
4
Exp
CH
4
CH
4
Exp
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 221 -
LGCIE, INSA Lyon

II.3.2. Influence de la teneur en eau
Avec une valeur de capacit de rtention en eau de 133 % (w
R
du modle de 1,33), limpact obtenu par
modlisation pour la dgradation du matriau une teneur initiale de 130 % nest pas assez important.
La valeur considrer dans le modle a donc t identifie. La Figure 66 illustre les productions
cumules exprimentales obtenues aux trois teneurs en eau teste ainsi que les rponses du modle, en
considrant comme teneur en eau optimale une capacit de rtention de 140 %.

Figure 66 : Rponses du modle vis--vis des productions cumules exprimentales de mthane pour les trois
exprimentations ralises aux trois teneurs en eau (130, 300 et 500 %) en considrant une teneur en eau
optimale de 140 % et minimale de 53 %

Ainsi, laide des paramtres w
R
= 140 % et w
min
= 53 %, les productions exprimentales de mthane
obtenues pour les trois teneurs en eau testes ont t simules de manire satisfaisante. La valeur
identifie de w
R
est trs proche de la valeur de la capacit de rtention en eau mesure
exprimentalement, compte tenu de la variabilit de la mesure notamment (ralise en triplicats,
moyenne de 1,33 0,11 gH
2
O.gMS
i
-1
).

Avant de conclure cette partie modlisation, soulignons que lintgration de linfluence de la teneur en
eau au modle prcdemment construit a t value de diffrentes manires. La modification la plus
simple envisage, et galement la plus raliste, a t de modifier la quantit de matire gazifiable
initiale disponible pour lhydrolyse dune manire similaire celle utilise dans la formulation ci-
dessus et laide dun coefficient dpendant de la teneur en eau. Ainsi, si la teneur en eau est
infrieure la teneur optimale, seule une partie de la matire est hydrolyse, puis convertie en
mthane. De plus, comme nous lavons vu prcdemment, le modle biologique rend compte de la
diminution de la vitesse apparente de production de mthane avec la diminution des quantits de
matires dgradables initiales et il nest donc pas forcment ncessaire dajouter un impact cintique
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
0 20 40 60 80 100 120 140
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s

(
m
g
C
.
g
M
S
i
-
1
)
X (W = 130%)
B (W = 130%)
CH4 (W = 130%)
X (W = 300 ou 500%)
B (W = 300 ou 500%)
CH4 (W = 300 ou 500%)
CH4 Exp 130%
CH4 Exp 300%
CH4 Exp 500%
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 222 -
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de la teneur en eau sur le taux de croissance des bactries mthanognes. Si une quantit plus faible de
matriau est hydrolyse, la vitesse de production de mthane (exprime en mL.gMS
-1
.j
-1
par exemple)
est plus faible galement.
Diffrentes formulations sont possibles mais nous ne les dtaillerons pas car la principale difficult
savre lie la concentration initiale en matire dgradable et ses units. En utilisant les mmes
units que prcdemment, savoir, des mgC.L
-1
et non des mgC.gMS
-1
comme cela est le cas dans le
modle ci-dessus, les concentrations initiales en carbone dgradable savrent trs leves et
lintgration est impossible laide des paramtres identifis tant donne linhibition aux acides.
Cet aspect illustre la difficult lie une description gnrale des phnomnes observs et souligne
limpossibilit de transposer un milieu solide, le modle dvelopp en milieu liquide.


Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 223 -
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III. Conclusions
La premire approche de modlisation de la production de biogaz lors de tests de biodgradation
anarobie a consist identifier une constante dhydrolyse pour chaque matriau, partir des
productions de biogaz obtenues dans des conditions optimales, par ajouts. La dgradation a alors t
simplement dcrite comme une raction chimique de premier ordre par rapport au substrat de la
dgradation.
La description du processus a ensuite t dtaille en ajoutant, conscutivement lhydrolyse, une
tape biologique de mthanogense partir de concepts et de paramtres en majeure partie tirs de la
littrature. Les concentrations initiales en bactries mthanognes ont t identifies pour chaque srie
dincubations ralise. Confronte aux rsultats obtenus lors des premires incubations, cette
description sest avre trs satisfaisante pour la quasi-totalit des matriaux, comme en ont tmoign
les faits suivants :
les productions de CO
2
et de CH
4
obtenues lors des premires incubations ont t correctement
reprsentes, y compris les dcalages observs entre les deux gaz ;
les concentrations initiales en bactries mthanognes identifies pour chaque srie
dincubations et la teneur en MV de linoculum utilis lors de chaque srie sont lis par une
relation linaire significative, meme si elle nest base que sur trois couples de valeurs ;
les productions obtenues par ajout des matriaux ont t modlises de manire satisfaisante
laide du modle biologique en utilisant les valeurs de concentrations finales en bactries
mthanognes obtenues par modlisation des premires incubations en tant que concentration
initiale des ajouts.
Toutefois, pour certains matriaux, les rsultats exprimentaux ont prsent soit une avance soit un
retard vis--vis des rponses du modle. Les avances ont concern quelques matriaux spcifiques, les
dchets verts, les tetra-bricks et les extraits de levures, et peuvent sexpliquer soit par une sous-
estimation de la vitesse dhydrolyse (lors des rgressions exponentielles) soit par la prsence dune
population endogne aux chantillons. Le modle permet dailleurs de valider ces deux
hypothses. Les retards ont essentiellement affect les matriaux les plus ractifs et tests aux plus
fortes concentrations et cet aspect a t intgr au modle en ajoutant un phnomne dinhibition de la
mthanogense due la concentration en AGV.

Lidentification dun jeu de valeurs uniques du coefficient dinhibition, permettant une reprsentation
de lensemble des incubations (expriences non inhibes comprises) na t possible quen modifiant
les paramtres de linhibition initialement dtermins. Malgr cet ajustement, les trois incubations
ayant prsent des retards nont pu cependant tre reprsentes convenablement par le mme jeu de
paramtres. Plusieurs hypothses ont t avances : vitesses dhydrolyse sous-estimes du fait
dinhibitions persistantes lors des ajouts, AGV produits de nature diffrentes et donc de toxicits
diffrentes, influence du pH plutt que des concentrations en AGV, coefficients f
1
sous-estims du fait
dune production abiotique de CO
2
, par acidification. Toutes peuvent tre prises en compte par le
Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 224 -
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modle et permettre une reprsentation satisfaisante. Le modle savre donc trs sensible aux valeurs
de la constante dhydrolyse, de la constante dinhibition et des coefficients stoechiomtriques (f
1
et f
2
).
Malgr ces limites, le modle avec inhibition a toutefois permis de reprsenter certains phnomnes
observs exprimentalement :
- les inhibitions irrversibles et les accumulations dacides obtenues lissue des incubations de
cellulose 10 gMV.L
-1
;
- la relation observe entre vitesses maximales de production de mthane (R
m
) et potentiels ultimes
atteints (Pot CH
4
) ;
- la relation observe entre temps de latence et vitesses de production maximales du mthane lors des
incubations de mise au point du protocole optimis.

La dmarche de complexification successive du modle a t poursuivie en intgrant un impact
cintique li la taille des particules hydrolyses. Confront aux rsultats obtenus sur les matriaux
incubs diffrentes granulomtries, le modle a permis de reprsenter convenablement la diminution
des cintiques de dgradation lie laugmentation de la taille des particules incubes. Aussi,
lintgration de ce facteur dinfluence un modle ne constitue pas une problmatique majeure. La
principale problmatique rside davantage dans la connaissance de la surface effectivement disponible
pour les micro-organismes. Toutefois, les mthodes analytiques de dtermination de la surface
spcifique dun matriau paraissent dlicates mettre en uvre sur un DMA rel, complexe et
htrogne.
Grce ce type de modle, les constantes dhydrolyse relatives la surface (k
SBK
) des fractions de
DMA analyses (broyes 1 mm) pourraient galement tre identifies. Utilises conjointement des
donnes gnralistes de distribution granulomtrique des constituants majeures de DMA, cette
approche pourrait permettre une reprsentation plus mcaniste de la phase dhydrolyse. Elle pourrait
par ailleurs justifier, en partie, lutilisation dans la littrature de valeurs trs faibles pour la constante
dhydrolyse de premier ordre en conditions denfouissement. Enfin, pour mieux apprcier la gamme
de validit de la simulation, une approche de type stochastique pourrait permettre dintgrer une
incertitude relative la surface effectivement disponible en fonction des tailles ou de la nature des
matriaux.

La dmarche de complexification successive du modle a trouv ses limites avec les expriences
ralises aux diffrentes teneurs en eau. Les teneurs en eau trs faibles de ces expriences impliquent
en effet des concentrations initiales en matire dgradable trs importantes, exprimes en mgC.L
-1
, et,
par voie de consquence, une prdiction systmatique dinhibition par le modle. Il sest donc avr
impossible de transposer un milieu solide, le modle (et ses paramtres) dvelopp en milieu liquide.
Cependant, le modle spcifique mis en uvre pour linfluence de la teneur en eau a dmontr des
capacits certaines et ces aspects ncessiteraient un approfondissement, tant au niveau exprimental en
valuant linfluence dun plus grand nombre de teneurs en eau sur diffrents matriaux, quau niveau
de la description mathmatique des phnomnes.

Partie C : rsultats et discussions
Thse M. Rouez 2008 - 225 -
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La dmarche de complexifications successives du modle a permis une analyse dtaille dun certain
nombre de rsultats exprimentaux. Bien loin dun outil de prdiction, le modle a surtout constitu un
outil danalyse des rsultats permettant de confronter les donnes exprimentales un schma
conceptuel commun. Loin davoir confirm toutes les hypothses, elle a permis den conforter
certaines. Par ailleurs, cette dmarche a permis de souligner certaines limitations et, par l mme,
dventuelles pistes damliorations ncessaires une description plus fine du comportement dun
matriau en conditions anarobies :
- En terme de caractrisations complmentaires dun matriau : la fraction soluble dgradable et la
population mthanogne endogne aux chantillons sont apparues comme des caractristiques trs
importantes, quil faudrait analyser car elles pourraient potentiellement expliquer certains carts
observs entre rponses exprimentales et modlises.
- En terme de caractrisations du milieu : la mesure du pH semble importante, notamment durant les
premiers jours du test o il est susceptible de varier rapidement et dinfluencer le dveloppement des
bactries mthanognes. La mesure des teneurs en H
2
du biogaz produit pourrait permettre dvaluer
lactivit des bactries hydrognophiles et ainsi dexpliquer la variabilit des valeurs du coefficient f
2
.
- En terme de caractrisation de linoculum : le jeu de paramtres biologiques convenant une
reprsentation adquate de la production de biogaz ntait pas unique. Il sest avr fortement
dpendant des conditions initiales utilises, et notamment de la concentration en bactries
mthanognes. De plus, le contenu identifi en micro-organismes mthanognes de linoculum a t
trs faible. Des mesures exprimentales des quantits de micro-organismes prsents dans les boues
utilises permettraient soit de valider les concentrations identifies avec le modle soit, dans le cas
contraire, de rduire le nombre de variables identifier en utilisant des concentrations initiales
dtermines exprimentalement. Cette dtermination exprimentale autoriserait par ailleurs
lutilisation dalgorithmes didentification des paramtres par rsolution inverse, alors quils sont
inactifs pour des paramtres constituant des conditions initiales.
- En terme de modlisation : le choix de la prise en compte de la production de CO
2
a t motiv par la
rponse trs satisfaisante du modle certaines expriences, et notamment par sa capacit
reprsenter les dcalages observs entre les productions de CO
2
et de CH
4
observs en premire
incubation. A lissue de lanalyse des modlisations, ce choix apparat cependant comme une
limitation potentielle du modle dvelopp car lensemble des phnomnes rgissant la production de
CO
2
ntait pas reprsent. Ainsi, sur certains matriaux, et notamment ceux pour lesquels des
inhibitions ont t observes, une partie de la production de CO
2
peut avoir t simplement due une
acidification transitoire du milieu. Lidentification des paramtres stoechiomtriques aurait alors t
fausse. En tmoignent certains matriaux pour lesquels les coefficients se sont rvls trs diffrents
des autres. Par ailleurs, les diffrences de capacit dabsorption du CO
2
du milieu, en fonction de la
proportion de solution minrale, mises en vidence lors des incubations de mise au point, constituent
un autre exemple de limite du modle associe la production de CO
2
. La reprsentation adquate des
diffrentes incubations du mme dchet ncessiterait en effet de considrer des coefficients diffrents
en fonction de la proportion de solution minrale employe dans le test. La prise en compte des
principaux phnomnes lis la production de CO
2
tant dlicate (quilibre acide base, liquide gaz
mais aussi activit des bactries hydrognophiles), la modlisation pourrait tre amliore en ne
prenant pas en compte la production de CO
2
dans un premier temps.

Conclusions gnrales
Thse M. Rouez 2008 - 226 -
LGCIE, INSA Lyon
Conclusions gnrales
Malgr les rglementations et prconisations rglementaires visant rduire la production de dchets
la source et limiter les quantits de dchets enfouies, lenfouissement reste et restera le devenir de
tout dchet ultime. A lheure actuelle, les DMA ultimes enfouis prsentent encore une importante
fraction organique potentiellement valorisable, responsable du caractre volutif de ces dchets. Les
phnomnes caractrisant cette volution, et notamment la production de biogaz, sont difficiles
matriser dans les conditions denfouissement actuelles et constituent des centres dintrt majeurs en
terme de gestion des points de vue divers (risques dmissions incontrles de biogaz, valorisation
nergtique du mthane du biogaz, valuation de la stabilit biologique du massif, cots de la gestion
post-exploitation). Aussi, dans le cadre dune gestion durable des DMA, de nouveaux modes de
stockage sont tudis afin doptimiser la stabilisation des dchets enfouis. Cette stabilisation sous-
entend la mise en uvre contrle de processus de dgradations microbiologiques de la MO. Son
optimisation ncessite alors lapprofondissement de trois aspects relatifs la biodgradabilit des
dchets solides : sa caractrisation, ses facteurs dinfluence et sa modlisation, ceci afin de
dcrire et de comprendre lvolution des phnomnes de biodgradation, dans lobjectif ultime de les
prdire.

Cette tude a permis dapprofondir conjointement ces trois aspects des mcanismes de biodgradation,
et en particulier de la mthanogense :
Tout dabord, la revue bibliographique sest attache prsenter un tat de lart relatif ces trois
aspects, en dtaillant les caractristiques des DMA et de leur MO, les mcanismes de biodgradation
des DMA et leurs facteurs dinfluence, les moyens dvaluation de cette biodgradabilit ainsi que les
outils de modlisation de la production de biogaz par dgradation anarobie de MO.
Diffrents dchets ou fractions organiques de dchets ont t chantillonns sur des sites de stockage
ou reconstitus au laboratoire. Leur matire organique a t caractrise par des mthodes chimiques
(teneurs en MV et en CT) et leur biodgradabilit a t value laide dincubations, en arobiose et
en anarobiose, ralises dans des conditions optimales de dgradation.
Des tests anarobies ont t raliss sur certains des matriaux de manire tudier linfluence de
facteurs spcifiques, tels que lagitation, la taille des particules, la nature et la quantit de linoculum
utilis, ainsi que la teneur en eau.
Une dmarche de modlisation des productions de biogaz obtenues lors de diffrents tests
dincubations anarobies mis en uvre au laboratoire, a t entreprise afin dvaluer la possibilit
dune reprsentation mathmatique des phnomnes observs.

Les conclusions de cette tude et les perspectives qui en dcoulent quant la biodgradabilit des
DMA, ses facteurs dinfluence et sa modlisation peuvent tre rsumes transversalement selon
deux types de facteurs : ceux lis la matire et ceux dpendant des conditions du milieu. Ces
Conclusions gnrales
Thse M. Rouez 2008 - 227 -
LGCIE, INSA Lyon
considrations peuvent tre apprcies sous deux points de vue : les tests de laboratoire visant
mesurer la biodgradabilit et la biodgradation en conditions denfouissement.

Concernant les facteurs lis la matire, les constituants organiques des DMA sont tous
biodgradables ( plastiques mis part) du fait de leur origine naturelle mais, selon leur nature,
cette biodgradabilit est variable. Le large panel de matriaux tudis a permis de le souligner et a
mis en exergue les lacunes des caractrisations chimiques simples telles que la MV ou le COT pour
prdire cette biodgradabilit. Par voie de consquence, mens des concentrations identiques de MS,
de MV, de CT ou de COT de matriau par litre de solution, les tests de biodgradabilit impliquent
des concentrations initiales en matire biodgradable trs diffrentes selon le matriau test.
Comme nous lavons mis en vidence, les rponses peuvent alors tre varies et affectes dun point
de vue cintique, voire stoechiomtrique, par des phnomnes dinhibition bactrienne lis
laccumulation de mtabolites intermdiaires. Les tests de biodgradabilit anarobie raliss ont t
trs sensibles ces aspects et, de manire plus gnrale, linfluence du ratio Inoculum / Substrat.
Le modle biologique, construit sur la base de diffrents rsultats exprimentaux et dcrivant la
dgradation anarobie en deux tapes successives, a globalement permis de rendre compte de ces
diffrents phnomnes. Cette reprsentation a donc t suffisante pour permettre une description
relativement fine de la dgradation anarobie en conditions de laboratoire, en prenant en compte
lquilibre ncessaire entre les principales populations microbiennes. Cependant, sa transposition
directe un milieu non noy sest avre dlicate au regard des rsultats dexprimentations menes
des teneurs en eau faibles : aucun jeu de paramtre identique na pu convenir une reprsentation
gnrale des exprimentations. Pourtant, cette approche modlisatrice est dj applique aux
conditions denfouissement dans la littrature, mais ncessite pour linstant des ajustements des
paramtres au cas par cas.
Ces aspects lis la concentration initiale ncessitent donc une certaine vigilance lors des tests
dincubations notamment si leur objectif est de comparer les rponses de diffrents matriaux.
Les tests ne peuvent tre mens dans des conditions similaires qua posteriori. Afin de dterminer les
concentrations initiales, les tests de DBOS, en arobiose, peuvent savrer utiles. En effet, ces essais se
sont rvls plus faciles mettre en uvre que les tests anarobies et une bonne relation a t obtenue
entre les biodgradabilits mesures dans les deux conditions pour une majorit de matriaux.
Par ailleurs, cette variabilit des biodgradabilits des constituants de DMA illustre la ncessit dune
approche multi-substrats pour la prdiction de la biodgradabilit dun dchet complexe. Cette
approche est utilise dans de nombreux modles prdictifs de la production de biogaz en conditions
denfouissement et sa pertinence a t confirme par nos rsultats obtenus sur le dchet reconstitu.
Nous avons montr que la biodgradabilit de ce dchet pouvait en effet tre estime, dun point de
vue cintique et stoechiomtrique, partir de la biodgradabilit de chacun de ses composants.
Cependant, en conditions denfouissement, le facteur dinfluence li la matire dgrade
conditionnant la biodgradabilit nest pas tant la concentration initiale totale de matires
biodgradables mais davantage leur distribution spatiale ainsi que les interactions entre des zones
riches et dautres pauvres en matires biodgradables. La modlisation devrait permettre de
prendre en compte ces aspects en intgrant notamment des phnomnes de transferts de matire (cf. ci-
aprs). Dans cette optique, la fraction soluble biodgradable dun matriau apparat comme une
caractristique importante, quil faudrait mesurer en complment des tests.
Conclusions gnrales
Thse M. Rouez 2008 - 228 -
LGCIE, INSA Lyon

La taille des particules est un autre facteur li la matire dgrade affectant la
biodgradabilit. Comme cela est reconnu dans la littrature et comme nous lavons expriment en
anarobiose, les particules les plus fines sont dgrades plus rapidement tant donn laugmentation de
surface disponible pour lhydrolyse. En supposant des particules sphriques, ce facteur a t ajout au
modle biologique construit. Appliqu aux incubations anarobies ralises avec des matriaux broys
diffrentes granulomtries, les rponses obtenues ont t satisfaisantes. La dmarche a toutefois
soulev le problme de la sphricit suppose des particules et de la surface spcifique rellement
disponible. Etant donn la complexit dune telle mesure, un facteur de forme des particules selon la
nature du matriau considr pourrait tre ajout au modle ainsi quune incertitude relative la
surface disponible. Cette approche, utilise conjointement des donnes de distributions
granulomtriques des constituants organiques de DMA, parat prometteuse en vue de dcrire la
biodgradation (lhydrolyse) en conditions denfouissement o des matriaux grossiers et des
particules fines de nature similaire sont dgrads des vitesses diffrentes.

Les facteurs environnementaux influenant la biodgradabilit sont nombreux et prsentent des
interactions complexes (entre eux et avec les facteurs intrinsques) comme nous lavons illustr en
partie bibliographique. La teneur en eau est reconnue comme lun des plus importants. Bien que
lanalyse de son influence indpendamment dautres facteurs soit dlicate, il a t possible dvaluer
son impact dans des conditions spcifiques. Comme cela a t dmontr par diffrents travaux et
confirm dans les ntres, au niveau dun volume lmentaire, la teneur en eau globale a des
consquences la fois cintique et stoechiomtrique sur la biodgradation car, en-de dun certain
seuil dhumidit, la matire nest pas accessible aux micro-organismes. Un modle spcifique, propos
dans la littrature et intgrant ces aspects, a t appliqu avec succs aux rsultats de nos travaux.
Cependant, son intgration au modle biologique construit prcdemment sest avre dlicate : les
fortes concentrations initiales en matires biodgradables induites par les faibles teneurs en eau
exprimentes taient incompatibles avec le phnomne dinhibition intgr au modle prcdent. Des
analyses complmentaires tant au niveau exprimental que de la description mathmatique des
phnomnes savrent ncessaires.
Cependant, en conditions denfouissement, leau influence la biodgradation davantage par les
transferts de matire quimpliquent ses mouvements au sein dun massif de dchets. Ces transferts
peuvent soit augmenter le rendement global de la biodgradation, en humidifiant des zones sches ou
en apportant des substrats solubles ou des micro-organismes l o ils faisaient dfaut, soit le rduire,
en causant des inhibitions de la mthanogense par acclration de lhydrolyse ou apport trop
consquent de substrats solubles. Cette dualit a t observe lors de nos travaux via lagitation des
tests dincubations anarobies qui a effectivement provoqu des effets contradictoires selon les
conditions du milieu. Ces phnomnes de transfert nont toutefois pas t analyss sous un angle de
modlisation car ils ncessitent la prise en compte dau moins une dimension spatiale qui complique la
rsolution numrique. Par ailleurs, concernant les coulements, ces phnomnes paraissent dores et
dj dlicats formaliser dans des conditions non satures en eau pour un milieu poreux non volutif
structurellement. Appliqu un massif de dchets, o le milieu est trs htrogne et ractif, cet
exercice constitue un vritable dfi. Une approche du type cascade de ROPA (racteurs ouverts
parfaitement agits) apparat comme un moyen de simplification intressant (et non valu dans la
Conclusions gnrales
Thse M. Rouez 2008 - 229 -
LGCIE, INSA Lyon
littrature) : la description mathmatique dveloppe pour la modlisation des racteurs anarobies
pourrait alors tre associe celle des phnomnes de transferts dans un formalisme assez simple et
commun en terme de rsolution numrique.
Comme nous lavons voqu pour les facteurs lis la matire, le ratio Inoculum / Substrat a
une influence considrable sur les phnomnes de biodgradation, particulirement en conditions
anarobies tant donn la sensibilit et le taux de croissance faible des bactries mthanognes. Pour
une mme quantit de matire biodgradable, la quantit de bactries mthanognes prsentes dans
le milieu pour la dgrader a donc des effets importants. Comme nous lavons illustr dans nos travaux
lors des tests de biodgradabilit anarobie, cette quantit est dpendante de lactivit mthanogne de
linoculum utilis et donc de son entretien ou de sa nature ainsi que de la quantit mise en uvre. Cet
aspect ncessite donc une attention toute aussi particulire que la concentration initiale en matire
biodgradable voque auparavant. Afin de garantir des conditions de biodgradation optimales, de
faibles quantits de matire dgradable doivent donc tre testes dans une quantit maximale de
micro-organismes. La ralisation dajout de matire la fin dune premire incubation est apparue
dans nos travaux comme un moyen simple et efficace dobtenir une dgradation optimise, mme en
cas dquilibre initialement instable. En conditions denfouissement, les quantits initiales de bactries
mthanognes sont trs faibles car seuls sont prsents initialement les micro-organsimes endognes
aux dchets. La croissance ncessaire des bactries mthanognes, dans des conditions dfavorables
(forte acidit notamment), est lorigine des trs longues phases de latence observes sur la
production de mthane. Aussi, les quantits de bactries mthanognes endognes aux DMA ou
leurs diffrentes fractions constitutives, apparat comme un paramtre dont la connaissance
amliorerait la prdiction de la biodgradabilit en conditions denfouissement. Dans une optique de
gestion optimise des ISDND, les moyens dinoculation dun massif de dchet devraient faire
lobjet de recherches actives.

Finalement, ces travaux de laboratoire auront permis de mieux cerner les contraintes microbiologiques
en conditions denfouissement, et permettent dapporter les points de vue suivants en ce qui concerne
lamlioration des nouveaux modes denfouissement :
La recirculation des lixiviats permet dhumidifier le massif de dchet mais, accomplie sans leur
neutralisation, son effet sur la production de biogaz et sur lacclration de la stabilisation du massif
ne savre pas toujours effectif, et peut mme tre prjudiciable au dveloppement des bactries
mthanognes. Cette neutralisation est par ailleurs problmatique car elle ncessite des produits
basiques dont lusage ne constitue pas une pratique durable. De plus, elle augmenterait les
concentrations en sels dissous qui sont potentiellement toxiques pour les micro-organismes et sont une
entrave latteinte dun tat co-compatible (seul le lessivage du massif permet la rduction de ces
lments, persistants dans les lixiviats pendant plus de 50 ans (Andreas & Bilitewski, 1999 ; Barlaz
2002)).
Dun autre cot, les PTMB pourraient favoriser plus efficacement la stabilisation du massif car ils
homognisent les dchets et permettent de diminuer la concentration initiale en matires rapidement
dgradable, lorigine des premires phases acides de lvolution dun site (Morais, 2006).
Cependant, mens jusqu stabilisation de la MO, ils reprsentent une perte de matire valorisable
nergtiquement.
Conclusions gnrales
Thse M. Rouez 2008 - 230 -
LGCIE, INSA Lyon
A la lumire de nos connaissances, il semblerait plus pertinent de raliser des prtraitements
uniquement mcaniques des fins dhomognisation, daugmentation de laccessibilit de la matire
enfouie et de valorisation matire dlments recyclables (mtaux). Le matriau enfoui prsenterait
alors une biodgradabilit optimale et la production de biogaz pourrait alors tre acclre par la
recirculation des lixiviats en suivant une gestion particulire. Les lixiviats acides dalvoles jeunes
pourraient tre recirculs dans des alvoles matures o la mthanognse est bien amorce et
permettre le traitement de leur charge organique. Inversement, les lixiviats dalvoles matures,
recirculs dans les alvoles jeunes permettraient de tamponner mais aussi dinoculer le milieu. Ces
approches, dites squentielles, sont dailleurs employes en racteurs anarobies pour traiter les boues,
les lisiers et mme des dchets mnagers (Nopharatana et al., 1998) et sont reconnues pour leur
stabilit accrue. Elles devraient faire lobjet de travaux spcifiques lenfouissement.



Thse M. Rouez 2008 - 231 -
LGCIE, INSA Lyon
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 232 -
LGCIE, INSA Lyon
Rfrences bibliographiques
ADANI F., CALCATERRA E. & MALAGUTTI L., Preparation of a test for estimating biogas
production from pretreated urban waste, In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN
(Eds).Proceedings Sardinia 2001, eighth International Waste Management and Landfill Symposium,
Cagliari, Italy, vol.I, p. 571-577, 2001
ADANI F., TAMBONE F., GOTTI A., Biostabilization of municipal solid waste, Waste Management,
vol. 24, p. 775783, 2004
ADEME, La composition des ordures mnagres en France, ADEME Editions, Paris, 60 p., 1998
ADEME, 2000, collecte slective et traitement biologique des biodchets des mnages, mthodes et
outils de mesure des indicateurs de qualit et de performance, 1
re
dition, volume 2.
ADEME, Mars 2005, Biodgradabilit et matriaux polymres biodgradables, note de synthse
AGUILAR-JUAREZ O., Analyse et modlisation des ractions biologiques arobies au cours de la
phase dexploitation dun casier dun centre denfouissement technique. Thse de doctorat spcialit
Gnie des Procds, INSA de Toulouse, 233 p., 2000
ANDREAS L., BILITEWSKI B., Effects of waste quality and landfill technology on the long-term
behaviour of municipal landfills, Waste Management & Research, vol. 17, p. 413-423, 1999
ANGELIDAKI I., Anaerobic biodegradability of macropollutants. In : LIGTHART J. and NIEMAN
H. (Eds). Workshop on Harmonisation of anaerobic biodegradation, activity and inhibition assays,
Institute for environment and sustainability, Italy, 16p, 2002
ANGELIDAKI I. & SANDERS W., Assessment of the anaerobic biodegradability of macropollutants,
Reviews in Environmental Science and Bio/Technology, vol. 3, p. 117-129, 2004
AUGENSTEIN D. & PACEY J., Modeling landfill methane generation. In : CHRISTENSEN T.H.,
COSSU R. & STEGMANN R. (Eds). Proceedings Sardinia 1991, Third International Waste
Management and Landfill Symposium, Oct. 1991a, Cagliari, Italy, p. 115-148, 1991
BARLAZ M.A., SCHAEFER D.M. & HAM R.K., Bacterial population development and chemical
characteristics of refuse decomposition in a simulated sanitary landfill, Appl. Environ. Microbiol., vol.
55, p. 55-65, 1989
BARLAZ M. A., Microbiology of solid waste landfills, chap. 2 In Microbiology of solid waste, Edited
by Palmisano & Barlaz, 223 p, 1996
BARLAZ M. A., ELEAZER W. E., ODLE W. S., QIAN X., WANG Y-S., Biodegradative analysis of
municipal solid waste in laboratory scale landfills, Project summary, EPA, 1997
BARLAZ M. A., ROOKER A., KJELDSEN P., GABR M., BORDEN R., A Critical Evaluation of
Factors required to terminate the Post-Closure Monitoring Period at Solid Waste Landfills,
Environmental Science and Technology, vol. 36, p. 3457-3463, 2002
BARLAZ M. A., Forest products decomposition in municipal solid waste landfills, Waste
Management, vol. 26, p. 321333, 2006
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 233 -
LGCIE, INSA Lyon
BATSTONE DJ, KELLER J, ANGELIDAKI I, KALYUZHNYI SV, PAVLOSTATHIS SG, ROZZI
A, SANDERS WTM, SIEGRIEST H, VAVILIN VA, Anaerobic Digestion Model No. 1 (ADM1),
International Water Association Scientific and Technical Report No. 13. London, UK: IWA
Publishing, 2002

BINNER E., LECHNER P., WIDERIN M. & ZACH A., Laboratory test methods characterizing the
biological reactivity of wastes. In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds).
Proceedings Sardinia 1997, Sixth International Waste Management and Landfill Symposium, Oct.
1997, Cagliari, Italy, vol.I, p. 485-494, 1997
BINNER E. & ZACH A., Biological Reactivity of Residual Wastes in dependence on the duration of
Pretreatment. In: The 3rd Swedish Landfill Symposium, Lulea, Sweden, 21 p., 1998
BINNER E., Assessment of MBP waste-misinterpretations of respiration activity. In: T.H.
CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds). Proceedings Sardinia 2003, Ninth
International Waste Management and Landfill Symposium, Cagliari, Italy, 10 p., 2003
BOGNER J.E., Controlled study of landfill biodegradtion rates using modified BMP assays. Waste
management and research, 1990, vol. 8, pp. 329-352.
BUFFIERE P., Critres biochimiques pour la prdiction de la biodgradabilit dans le cas de la
mthanisation de dchets: quel lien avec lactivit rsiduelle?, Journe Scientifique, Lyon, 19/12/2006
CHO J. K., PARK S. C. & CHANG H. N., Biochemical methane potential and solid state anaerobic
digestion of Korean food wastes, Bioresource Technology, vol. 52, p. 245-253, 1995
CHYNOWETH & PULLAMMANAPPALLIL, Anaerobic digestion of municipal solid wastes, chap.
3, In Microbiology of solid waste, Edited by Palmisano & Barlaz, 223 p, 1996
COSSU R., LARAIA R., ADANI F. & RAGA R., Test methods for the characterisation of the
biological stability of pretreated municipal solid waste in compliance with EU directive, In : T.H.
CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds). Proceedings Sardinia 2001, eighth
International Waste Management and Landfill Symposium, Cagliari, Italy, vol. I, p. 545-554, 2001
DELINEAU T. & BUDKA A., Rapport final SITA: tat de lart, le concept du Bioracteur, 2000
EBERL H. J., The role of spatio-temporal effects in anaerobic digestion of solid wastes, Nonlinear
Analysis, vol. 63, p. 1497-1505, 2005
EHRIG H.J., Prediction of gas production from laboratory scale tests. In : T.H. CHRISTENSEN, R.
COSSU & R. STEGMANN (Eds). Proceeding Sardinia 1991, Third International Landfill
Symposium, Cagliari, Italy, vol. I, p. 87-114, 1991
EL-FADEL M., FINDIKAKIS A. N., LECKIE J. O., Estimating and enhancing methane yield from
municipal solid waste, Hazardous Waste & Hazardous Materials, vol. 13, n3, p309-331, 1996
EL-FADEL, FINDIKAKIS & LECKIE, Numerical modelling of generation and transport of gas and
heat in Landfills, Waste Management and Research, Model formulation I, 1996
FAOUR A. A., REINHART D. R. & YOU H., First-order kinetic gas generation model parameters for
wet landfills, Waste Management, vol. 27, p. 946953, 2007
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 234 -
LGCIE, INSA Lyon
FOURIE A., MORRIS J., The Irrelevance of Time as a criterion for Aftercare Provision. Proceedings
Sardinia 2003, Ninth International Waste Management and Landfill Symposium Cagliari, 6-10
October 2003
GACHET C. Evolution bio-physico-chimique des dchets enfouis en centre de stockage de dchets
ultimes du SYDOM du Jura sous leffet de la recirculation des lixiviats. Thse INSA de Lyon, Ecole
doctorale de chimie de Lyon, spcialits Sciences & Techniques du Dchet. 2005, 250 p.
GARCIA-HERAS J.L., Reactor sizing, process kinetics, and modelling of anaerobic digestion of
complex wastes, chap. 2 In : Biomethanization of the organic fraction of municipal solid waste, Edited
by J. Mata-Alvarez, IWA publishing, 313 p, 2003
GARTISER S., WALLRABENSTEIN M., STIENE G., Assessment of several test methods for the
determination of the anaerobic biodegradability of polymers, Journal of Environmental Polymer
Degradation, vol. 6 (3), p.159-173, 1998
GIL DIAZ J. L., SZANTO NAREA M., SANCHEZ ALCITURRI J. M., ARIAS IBARRA A.,
Estimating Material Losses in Sanitary Landfills Through Biological Degradation, Proceeding
Sardinia, S. Margherita di Pula, Cagliari, Italy, 1995
GOMEZ R. B., LIMA F. V. & FERRER A. S., The use of respiration indices in the composting
process: a review, Waste Management and Research, vol. 24, p 37 47, 2006
GOURDON R., Traitements biologiques des dchets. Techniques de lingnieur, trat environnement,
G2 060, 2001
GOURDON R., Aide la dfinition des dchets dits biodgradables, fermentescibles, mthanisables
Association RECORD, n00-0118/1A, 2002
GUNASEELAN V. N., Anaerobic digestion of biomass for methane production: a review. Biomass
and Bioenergy, vol. 13 (), p. 83-114, 1997
GUNASEELAN V. N., Regression model of ultimate methane yield of fruits and vegetable solid
wastes, sorghum and napiergrass on chemical composition, Bioresource Technology, vol. 98, p. 1270-
1277, 2007
GUNASEELAN V. N., Biochemical methane potential of fruits and vegetable solid waste feedstocks,
Biomass and Bioenergy, vol. 26, p 389-399, 2004
HAARSTRICK & HEMPEL, Anaerobic digestion in municipal landfills conceptual considerations
and development of structured biodegradations models, Proceedings Sardinia, 2001
HANSEN T.L., SCHMIDT J.E., ANGELIDAKI I., MARCA E., JANSEN J.C., MOSBAEK H.,
CHRISTENSEN T.H., Method for determination of methane potentials of solid organic waste, Waste
Management, p 393-400, 2004
HEERENKLAGE J. & STEGMANN R., Comparison of test systems for the determination of the gas
potential from waste, In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds).Proceedings
Sardinia 2001, eighth International Waste Management and Landfill Symposium, Cagliari, Italy, vol.
I, p. 564-570, 2001
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 235 -
LGCIE, INSA Lyon
HEERENKLAGE J. & STEGMANN R., Analytical methods for the determination of the biological
stability of waste samples, Proceedings Sardinia 2005, Tenth International Waste Management and
Landfill Symposium S. Margherita di Pula, Cagliari, Italy; 3 - 7 October 2005
JEFFRIES T.W. Biodegradation of lignin and hemicelluloses In: C. Ratledge (ed.). Biochemestry of
microbial degradation, Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, 1994, p. 233-277
JOKELA J. P. Y., VAVILIN V. A. & RINTALA J. A., Hydrolysis rates, methane production and
nitrogen solubilisation of grey waste components during anaerobic degradation, Bioresource
Technology, vol. 96, p. 501-508, 2005
KOMILIS D. P. & HAM R. K., The effect of lignin and sugars to the aerobic decomposition of solid
wastes, Waste Management, vol. 23, p. 419-423, 2003
KOMILIS D. P., A kinetic analysis of solid waste at optimal conditions, Waste Management, vol. 26,
p. 82-91, 2006
LASARIDI K. E. & STENTIFORD ED. I., A simple respirometric technique for assessing compost
stability, Water Resources, vol. 32, No 12, p 3717-3723, 1998
LIFSHITS A. & GALUEVA T., Gas Production Modelling based on the field as emissions
measurements. In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds). Proceeding Sardinia
1997, sixth international landfill symposium, Oct. 1997, Cagliari, Italy, vol. II, p. 533-540, 1997
MATA-ALVAREZ J., MACE S. & LLABRES P., Anaerobic digestion of organic solid wastes: An
overview of research achievements and perspectives, Bioresource Technology, p 3-16, 2000
Mata-ALVAREZ J., Biomethanization of the organic fraction of municipal solid wastes. London :
IWA, 2003, 323 p.
MC DOUGALL & PYRAH, Moisture effects in biodegradation model for waste refuse, Proceedings
Sardinia, 1999
MICHAUD S., BERNET N., BUFFIERE P., DELGENES J. P., Use of methane yield to indicate the
metabolic behaviour of methanogenic biofilms, Process Biochemistry, vol. 40, p. 2751-2755, 2005
MILLER F. C., Composting of municipal solid waste and its components, chap. 4 In Microbiology of
solid waste, Edited by Palmisano & Barlaz, 223 p, 1996
MORA NARANJO, MEIMA, HAARSTRICK & HEMPEL, Modelling and experimental influences
on the acetate and methane formation in solid waste, Waste Management, Elsevier, 2004
MORAIS (DE ARAUJO) J. J., Influence des pr-traitements mcaniques et biologiques des ordures
mnagres rsiduelles (OMR) sur leur comportement bio-physico-chimique en installation de stockage
de dchets (ISD), Thse INSA de Lyon, Ecole doctorale de chimie de Lyon, spcialits Sciences &
Techniques du Dchet. 2006, 220 p.
MUNTONI A., MANCA M.G., DEMURO M., An integrated model for the prediction of landfill
emissions. Conference Proceedings Fifth International Landfill Symposium 1995, 26 October,
Sardinia, Italy. Environmental Sanitary Engineering Centre, Cagliari, Italy.
NEVES L., OLIVEIRA R., ALVES M. M., Influence if inoculum activity on the bio-methanization of
a kitchen waste under different waste/inoculum ratios, Process Biochemistry, vol. 39, p. 2019-2024,
2004
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 236 -
LGCIE, INSA Lyon
NOPHARATANA A., CLARKE W. P., PULLAMMANAPPALLIL P. C., SILVEY P.,
CHYNOWETH D. P., Evaluation of methanogenic activities during anaerobic digestion of municipal
solid waste, Bioresource Technology, vol. 64, p. 169-174, 1998
NOPHARATANA A., PULLAMMANAPPALLIL P. C., CLARKE W. P., Kinetic and dynamic
modelling of batch anaerobic digestion of municipal solid waste in a stirred reactor, Waste
Management, vol. 27, p. 595-603, 2007
OECD, Detailed review paper on biodegradability testing, environment monograph n98, OECD
series on the test guidelines programme, 1995
OLIVIER. F., Tassement des dchets en CSD de classe II: du site au modle, Thse de doctorat,
Universit de Grenoble, 334 p., 2003
OWENS J. M. & CHYNOWETH D. P., Biochemical methane potential of municipal solid waste
(MSW) components, Water Science and Technology, vol. 27 (2), p 1-14, 1993
PACEY J.G., Benefits and quantification of performance expectations for an anaerobic bioreactor
landfill, In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds) Proceedings Sardinia 99,
Seventh international waste management and landfill symposium, Oct. 1999, Cagliari, Italy, 1999, vol.
I, p. 293-299
PALMISANO A. C. & BARLAZ M. A., Introduction to solid waste decomposition, chap. 1 In
Microbiology of solid waste, Edited by Palmisano & Barlaz, 223 p, 1996
PALMOWSKI L. M. & MULLER J. A. Influence of the size reduction of organic waste on their
anaerobic digestion, Water Science and Technology, vol. 41, n3, p. 155-162, 2000
PALMOWSKI L. M. & MULLER J. A., Anaerobic degradation of organic materials significance of
the substrate surface area, Water Science and Technology, vol. 47, n12, p. 231-238, 2003
PAREEK S., MATSUI S., KIM S.K. & SHIMIZU Y., Mathmatical modeling and simulation of
methane gas production in simulated landfill column reactors under sulfidogenic and methanogenic
environments. Wat. Sci. Tech., 1999, vol. 39, n7, pp. 235-242.
PAVLOSTATHIS S. G. & GIRALDO-GOMEZ E., Kinetics of anaerobic treatment : a critical review,
Critical Reviews in Environmental Control, vol. 21, p 411-490, 1991
PESTRE C., Evaluation du role des activits microbiennes dans le devenir de dchets essentiellement
minraux en function du scenario de valorisation ou de stockage, Thse INSA de Lyon, Ecole
doctorale de chimie de Lyon, spcialits Sciences de lEnvironnement Industriel et Urbain, 376 p.,
2007
POLANCO F. F., NIETO P., PEREZ ELVIRA S., VAN DER ZEE F. P., POLANC M. F., GARCIA
P. A., Automated equipment for anaerobic sludge parameters determination, Water Science &
Technology, 52, 479 485, 2005
POMMIER S., CHENU D., QUINTARD M., LEFEBVRE X., A logistic model for the prediction of
the influence of water on the solid waste methanization in landfills, Biotechnology and
Bioengineering, Vol. 97, n3, p. 473-482, 2007
REDDY R.K. & BOGNER J.E., Bioreactor landfill engineering for accelerated stabilization of
municipal solid waste. Invited theme paper on solid waste disposal, International e-conference on
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 237 -
LGCIE, INSA Lyon
modern trends in foundation engineering, geotechnical challenges and solutions, Indian Institute of
technology, Madras, India, 2003, 22p.
REDON E., Le MBT en Allemagne et en Autriche, Journe Scientifique, Lyon, 19/12/2006
REICHEL T., IVANOVA L. K., BEAVEN R. P., HAARSTRICK A., Modeling decomposition of
MSW in a consolidating anaerobic reactor, Environmental Engineering Science, vol. 24, n8, p. 1072-
1083, 2007
REINHART D.R., Full-scale experiences with leachate recirculating landfills: case studies, Waste
management and research, 1996 vol. 14 p 347-365
RICHARD T., The effect of lignin on biodegradability, Cornell composting, 1996 (consult en ligne le
20/07/08, http://www.css.cornell.edu/compost/calc/lignin.html)
SANDERS T. M., Anaerobic hydrolysis mechanism, assessment of the hydrolysis rate and pitfalls. In :
Workshop on harmonisation of anaerobic biodegradation, activity and inhibition assays, edited by
Ligthart J. & Nieman H., European Commission Joint Research Center, Lago dOrta, Italy, 7 p., 2002
SANDERS T. M., VEEKEN A. H. M., ZEEMAN G. & VAN LIER J. B., Analysis and optimisation
of the anaerobic digestion of the organic fraction of municipal solid waste, chap. 3, In
Biomethanization of the organic fraction of municipal solid waste, Edited by J. Mata-Alvarez, IWA
publishing, 313 p., 2003
SHELTON D.R. & TIEDJE J.M., General method for determining anaerobic biodegradation potential.
Applied and environmental microbiology, vol. 47, n4, p. 850-857, 1984
SIEGERT I. & BANKS C., The effect of volatile fatty acid additions on the anaerobic digestion of
cellulose and glucose in batch reactors, Process biochemistry, vol. 40, p. 3412-3418, 2005
STEYER E., HILIGSMANN S., RADU J.P., CHARLIER R., DESTAIN J., DRION R. & THONART
P., A biological pluridisciplinary model to predict municipal landfill life. In : T.H. CHRISTENSEN,
R. COSSU & R. STEGMANN (Eds). Proceedings Sardinia 99, Seventh International Landfill
Symposium, Oct. 1999, Cagliary, Italiy, 1999, vol. I, p. 37-43.
TCHOBANOGLOUS G., THEISEN H. & VIGIL S., Engineering principles and management issues:
Integrated solid waste management, Mc Graw-Hill, 978 p, 1993
TUOMELA M., VIKMAN M., HATAKKA A. & ITAVAARA M., Biodegradation of lignin in a
compost environment: a review, Bioresource Technology, vol. 72, p. 169-183, 2000
TOTORA G. J., FUNKE B. R., CASE C. L., Introduction la microbiologie, adaptation franaise,
Louise Martin, Saint-Laurent : ditions du Renouveau pdagogique, 945 p., 2003
Valentini A., GARUTI G., ROZZI A. & TILCHE A., Anaerobic degradation kinetics of particulate
organic matter : A new approach. Wat. Sci. Tech., 1997, vol. 36, n 6-7, p. 239-246.
VAVILIN V. A., RYTOV S. V. &. LOKSHINA L. Ya, A decription of hydrolysis kinetics in
anaerobic degradation of particulate organic matter, Bioresource Technology, n56, p. 229-237, 1996
VAVILIN V. A., SHCHELKANOV M. YU & LOKSHINA L. Ya., The effect of fatty acid diffusion
in leachate on the propagation of concentration waves in the process of municipal solid waste
decomposition, Water Resources, vol. 28, n6, p. 691697, 2001
Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 238 -
LGCIE, INSA Lyon
VAVILIN, RYTOV, LOKSHINA, PAVLOSTATHIS & BARLAZ, Distributed model of solid waste
anaerobic digestion, effects of leachate recirculation and pH adjustment, Wiley Periodicals, 2002
VAVILIN V. A., LOKSHINA L. Y., JOKELA J. P. Y. & RINTALA J. A., Modelling solid waste
decomposition, Bioresource technology, vol. 94, p. 69-81, 2004
VEEKEN A. H. M. & HAMELERS B. V. M., Effect of substrate-seed mixing and leachate
recirculation on solid state digestion of biowaste, Water Science and Technology, vol. 41, n3, p. 255-
262, 2000
VEEKEN A., KALYUZHNYI S., SCHARFF H., HAMELERS B., Effect of pH and VFA on
hydrolysis of organic solid waste, Journal of environmental enginneering, vol 126, n12, 2000
VEEKEN et al., 2003 oxitop system
WANG Y.S., BYRD C.S. & BARLAZ C.S., Anaerobic biodegradability of cellulose and
hemicellulose in excavated refuse samples using a biochemical methane potential assay, Journal of
Industrial Microbiology, vol. 13, p. 147-153, 1994
WANG Y.S., ODLE W. S., ELEAZER W.E., BARLAZ M. A., Methane potential of food waste and
anaerobic toxicity of leachate produced during food waste decomposition, Waste Management and
Research, vol. 15, p. 149-167, 1997
WARITH M., Bioreactor landfills: experimental and field results, Waste Management, vol. 22, p. 7-
17, 2002
WENS P., VERCAUTEREN T., DE WINDT W. & VERSTRAETE W., Factors inhibiting anaerobic
degradation in a landfill. In : T.H. CHRISTENSEN, R. COSSU & R. STEGMANN (Eds).Proceedings
Sardinia 2001, eighth International Waste Management and Landfill Symposium, Cagliari, Italy, vol.I,
p. 13-20, 2001
WHITE, ROBINSON & REN, Modelling the biochemical degradation of solid waste in landfills,
Waste Management, Elsevier, 2004
Wilkie A. C., Smith P. H. and Bordeaux F. M., An economical bioreactor for evaluating biogas
potential of particulate biomass, Bioresource Technology, 92, 103 109, 2004
ZACHAROF & BUTLER, Modelling biodegradation process in heterogeneous landfill waste,
Proceedings Sardinia, 1999
ZACHAROF & BUTLER, Stochastic modelling of landfill processes incorporating waste
heterogeneity. Model formulation and uncertainty analysis, Waste Management, Elsevier, 2003







Rfrences bibliographiques
Thse M. Rouez 2008 - 239 -
LGCIE, INSA Lyon
Rfrences normatives
AFNOR. Matires fertilisantes et supports de cultures : chantillonnage, analyses chimiques et essais
physico-chimiques. Amendements organiques et supports de culture - Dtermination de la matire
organique totale - Mthode par calcination. NF U44-160. Novembre 1985, 4p.
AFNOR. Qualit de l'eau. Dtermination de la demande biochimique en oxygne aprs n jours
(DBO
n
). Partie 1 : mthode par dilution et ensemencement avec apport dallyl thio-ure. NF EN 1899-
1 . Paris : AFNOR, Mai 1998, 28p.
AFNOR. Qualit de l'eau. Dtermination de la demande biochimique en oxygne aprs n jours
(DBO
n
). Partie 2 : mthode pour les chantillons non dilus. NF EN 1899-2. Paris : AFNOR, Mai
1998, 18p.
AFNOR. Amendements organiques et supports de culture. Mthode d'analyse des composants inertes
dans un compost. XP U44-164. Janvier 2004, 13p.
ISO. Qualit des sols. Dtermination de la teneur pondrale en matire sche et en eau : Mthode
gravimtrique. NF ISO 11465, Aot 1994, 12p.
ISO. Qualit des sols. Dosage du carbone organique et du carbone total aprs combustion sche
(analyse lmentaire). NF ISO 10694, Juin 1995, 12p.
ISO. Qualit des sols. Dtermination de la teneur totale en azote par combustion sche ("analyse
lmentaire"). NF ISO 13878, Juillet 1998, 12p.
NF-T 90-101. Essais des eaux Dtermination de la demande Chimique en oxygne (DCO), 1988

Rfrences rglementaires
Arrt du 9 septembre 1997 relatif aux installations de stockage des dchets mnagers et assimils (JO
du 2 octobre 1997), modifi par larrt du 31 dcembre 2001 (JO du 2 mars 2002), modifi par
larrt du 3 avril 2002 (JO du 19 avril 2002), modifi par larrt du 19 janvier 2006 (JO du 16 mars
2006), 27 p.
Directive n99/31/CE du 26 avril 1999, concernant la mise en dcharge des dchets (JOCE L 182 du
16 juillet 1999, JOCE L 282 du 5 novembre 1999). 19 p.

Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 240 -
LGCIE, INSA Lyon
Annexes
Annexe 1. Facteurs dinfluence en arobiose
Tableau 48 : Facteurs dinfluence de la dgradation arobie lors du compostage (daprs Tchobanoglous et
al., 1993 ; Miller, 1996 ; Gourdon, 2001)
Facteur Mcanismes daction, domaines optimaux et moyens de contrle
Nature des
biopolymres
Sucres simples, lipides et protines sont dgrads plus facilement que les hmicelluloses et
celluloses, elles-mmes dgrads plus facilement que la lignine qui peut par ailleurs
empcher laccessibilit de celluloses. Tous les biopolymres sont plus ou moins dgrads en
arobiose donc il nexiste pas de domaine optimal cependant la prsence de matriau
ligneux confre au mlange une structure facilitant son aration.
Taille des
particules
Lhydrolyse tant ralise par des enzymes extracellulaires, la vitesse de cette dernire est
proportionnelle la surface disponible et de plus petites particules sont donc dgrades plus
rapidement. Par ailleurs, la rduction de la taille saccompagne dune plus grande
disponibilit de substrats tels que la cellulose dans le cas notamment de la prsence dun
complexe lignocellulosique. Des particules trop fines peuvent cependant rendre laration du
milieu difficile et affecter la teneur en oxygne. Le broyage des particules entre 25 et 75 mm
permet lobtention de rsultats optimaux.
Carbone/Azote
(ratio C/N)
Les microorganismes impliqus dans la dgradation consomment galement de lazote pour
la synthse de certains de leurs constituants propres. Ils utilisent environ 20 50 fois plus de
carbone que dazote. Par consquent, un ratio C/N de 20 50 est ncessaire une activit
biologique optimale. Le mlange de dchets pauvres en azote (tel que les papiers) avec
dautres riches (tels que les dchets verts ou alimentaires) permet lobtention de ratios
adquats.
pH Un pH initial infrieur 6 peut retarder le dveloppement de lactivit microbienne mais
gnralement nest pas inhibiteur (le pH est souvent rquilibr de part la consommation des
acides organiques et galement la production dions ammonium). Afin de raliser la
dgradation dans des conditions optimales, le pH devrait se maintenir entre 7 et 7.5. Lajout
de chaux empche lobtention de pH acide.
Teneur en eau Leau, milieu de vie des microorganismes et vecteur des enzymes hydrolytiques, est
indispensable lactivit biologique. Le taux dhumidit optimal se situe entre 50 et 60 %
m/m. De faon plus gnrale, une activit microbienne optimale est obtenue avec le taux
dhumidit le plus lev ne nuisant pas laration du milieu. Le mlange de matriaux
respectivement trop secs ou trop humide permet lobtention dhumidit optimale.
Teneur en O
2
Loxygne est fondamental pour la respiration arobie qui peut tre maintenue jusqu des
teneurs de 5 % v/v au sein de la phase gaz. Plus la quantit doxygne disponible est
importante, plus la dgradation est rapide. Retournements mcaniques et/ou aration force
sont les techniques permettant dassurer un renouvellement de loxygne.
Temprature De manire gnrale, plus la temprature est leve plus lactivit microbienne est intense et
notamment lactivit enzymatique. En dessous de 20C, lactivit est faible, et, au dessus,
double tous les 10 C daugmentation jusqu loptimum de temprature (35C pour les
msophiles, 55C pour les thermophiles). Au-del de loptimum (40C et 60C pour les
msophiles et thermophiles respectivement), lactivit est rduite et partir de 80C est nulle.
Les techniques daration permettent galement le contrle de la temprature.
Concentration en
microorganismes
Linoculation permet de rduire la dure de compostage en augmentant la quantit initiale de
microorganismes. Elle nest cependant pas indispensable puisque les microorganismes sont
dores et dj prsents dans les dchets de biomasse notamment. Elle peut tre ralise en
mlangeant la matire fraches, une matire dores et dj composte ou des boues de
traitement arobie.

Annexes
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Annexe 2. Tests arobies de stabilit des DMA
Tableau 49 : Description, conditions de mises en uvre et valeurs de respiration typiques pour diffrents tests de stabilit proposs en arobiose.

*: B : matire Brute ; S : matire Stabilise ; M : matire Mature (valeurs exprimes dans les units mentionnes colonne prcdente)
NC : Non Contrle mais mesure

Indice Echantillon Conditions Rsultats
Type Ab. Nom Etat Masse Inoculation Dure (h) T(C) Mesure O
2
Unit Valeurs types
*
Rfrence
AT
n
Activit
respiratoire
sur n jours
Solide
30 40 g
MH
Non 96 20 Sapromat
mgO
2
.gMS
-1

sur 4 jours
(S) < 7
(M) < 5
Binner &
Zach (1998)
DSOUR
SOUR sur
solide
Solide 60 g MH Non 20 30
Sonde
phase gaz
mgO
2
.gMV
-1
.h
-1
/
Iannoti et
al. (1993)
SRI
Indice de
respiration
statique
Solide
De quelques
g plusieurs
kg
Non 3 NC
Sonde
phase gaz
mgO
2
.kgMV
-1
.h
-1

(B) > 1000
(M) < 500
Adani et al.
(2001)
SOUR
Taux
spcifique de
consommation
dO
2
Liquide
3 8 g MH
dans 500 ml
Potentielle 56 30
Sonde
phase liquide
mgO
2
.gMV
-1
.h
-1

(B) : 10-20 et +
(S) < 3
(M) < 1
Lasaridi &
Stentiford,
(1998)
S
t
a
t
i
q
u
e

OUR
Taux de
consommation
dO
2

Liquide
2 g MV
dans 200 ml
Potentielle 140 25 OxiTop
mmolO
2
.kgMV
-
1
.h
-1

(B) : 50 -100
(S) : 6-15
(M) < 5
Veeken et
al. (2003)
De quelques
g plusieurs
kg
Non 53-96 NC
Sonde
phase gaz
mgO
2
.kgMV
-1
.h
-1

(B) > 1000
(M) < 500
Adani et al.
(2001)
D
y
n
a
m
i
q
u
e

DRI
Indice de
respiration
dynamique
Solide
400 g MS Potentielle 96 35
Sonde
phase gaz
mgO
2
.gMS
-1

sur 4 jours
/
Heerenklage
et Stegmann
(2001)
Annexes
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Annexe 3. Exemples de schmas ractionnels biologiques
de modles de dgradation anarobie
Exemples de schmas ractionnels biologiques de modles appliqus la dgradation anarobie
Afin dillustrer la diversit des approches possibles, quelques uns des principaux modles dvelopps
pour une application en dcharge (mis part lADM1 dvelopp pour des racteurs) sont prsents ci-
dessous. Nest dcrite ici que la partie biologique de ces modles (le schma ractionnel ) sans
prsenter leur structure gnrale, qui est cependant dterminante.

ADM1 Batstone et al. (2001)

Le modle se compose de 15 composs biochimiques et de 7 groupes bactriens distincts, 2 groupes
dacidognes, 3 dactognes et 2 mthanognes. Il ncessite donc 22 quations diffrentielles
chacune reprsentant les volutions dun ple matire organique. Remarque : le groupe bactrien B
4

convertit le butyrate et le valrate en propionate, actate et H
2
.
DPOLYMRISATION
HYDROLYSE
ACIDOGENSE
ACTOGENSE
MTANOGNSE
HPr, HBu, HVa
Matire Organique Particulaire
Inertes
Lipides Protines Hydrates
de carbone
Monosaccharides Acides amins LCFA
HAc H
2
CH
4
, CO
2
B
1
B
2
B
5
B
6
B
7
B
4
B
3
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 243 -
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(Haarstrick et al., 2001)
Le modle comporte donc deux composantes bactriennes, un groupe acidogne / actogne
(regroups car producteurs dacides...) et un autre, mthanogne. Il comprend 10 composs
biochimiques do, un systme de 13 quations diffrentielles.

(El-Fadel et al., 1996)
Carbone organique soluble
Carbone organique solide
Facilement
dgradable
Moyennement
dgradable
Difficilement
dgradable
Carbone actate
Carbone CH
4
Carbone CO
2
B
2
B
1
HYDROLYSE
ACIDOGENSE
MTANOGNSE
Dchet organique solide
Facilement hydrolysable
Difficilement hydrolysable
HYDROLYSE
ACIDOGENSE
Composs organiques solubles
Biomasse inactive, morte
CH
4
, CO
2
ACTOGENSE
METHANOGNSE
B
1
B
1
B
1
Acides organiques
(butyrique, propionique)
B
2
Acide actique, CO
2
, H
2
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 244 -
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(Mc Dougall et al., 1999, 2001 ; Veeken & Hamelers, 2000 ; Vavilin, 2002, 2003)





Pommier et al., 2006








HYDROLYSE et
FERMENTATION
MTANOGNSE
Polymres
organiques
AGV CH
4
B
MTANOGNSE
Polymres
organiques
CH
4
B
Annexes
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Annexe 4. Caractrisations complmentaires
Matires sches des chantillons bruts
Certains matriaux (fractions de DMA et dchets complexes rels) prsentaient un taux dhumidit
initiale important et ont t sches pralablement leur broyage. Le Tableau 50 mentionne le taux de
MS initial de ces matriaux mesur 70C selon la norme NF XP X30-408.

Tableau 50 : Taux de matire sche initial de certains matriaux utiliss
Matriaux % MS
*
DA 23
Fractions de DMA
DV 56
BRUT 47
STAB 61
MAT 60
LAN 60
FG 55
Dchets complexes
FGb 48
* : exprimes en % de la masse humide initiale

Annexes
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Annexe 5. Fractionnement biochimique de Van Sst

Aspects gnraux
Le protocole ainsi que le matriel utiliss ont t fournis par le groupe Foss. Lappareillage se
compose dun large bcher plac sur une plaque chauffante et surmont dun dispositif de
refroidissement des vapeurs. Les chantillons analyser sont placs dans des capsules spcifiques
disposes sur un portoir adapt. Celui-ci peut tre introduit facilement dans le bcher dextraction en
tant le dispositif de condensation et permet dagiter les chantillons lors des extractions ainsi que de
les rincer et de les goutter lissu de celles-ci, par des mouvements de rotation. Afin de quantifier
chacune des quatre fractions organiques en triplicats, 3 prises dessais sont ncessaires pour chacune
des trois extractions soit neuf prises dessai par chantillon. Un blanc peut tre mis en uvre afin de
dterminer la perte de masse due une ventuelle ractivit entre la capsule et les solutions. 18 places
tant disponibles sur le portoir, il est possible danalyser simultanment deux chantillons maximum si
aucun blanc nest ralis. Les capsules doivent tre pralablement sches 105C pendant 2 heures et
refroidies en dessiccateur puis chacune dentre elles est pese avec une prcision de 0,1 mg et
assigne un emplacement sur le portoir. 1 g dchantillon est introduit dans chaque capsule et une
fente est effectue laide dune lame de cutter dans le bouchon de chaque capsule pour permettre une
fuite de vapeur. A lissu de chaque extraction, le portoir contenant les chantillons rsiduels est
goutt et lav 10 fois au moins leau bouillante puis 3 fois lactone dans des bchers adapts
supplmentaires. Si cette tape excde 10 min, la totalit du fractionnement doit tre recommenc.
Trois capsules par chantillon sont ensuite cartes et conserves pour lanalyse ultrieure de leurs
teneurs en MS et MV.
Procdure de solubilisations et fractions matires associes
Les compositions et modes de prparation des solutions dextraction sont dtaills ci-aprs.
La premire extraction est effectue par un traitement leau bouillante de 30 min et la solution au
dtergent neutre bullition de 1 h. La fraction organique des composs insolubles dans cette solution
est dnomme NDF
org
(Neutral Detergent Fiber). Cette dernire est thoriquement la somme des
polymres suivants : cellulose, hmicellulose, lignine, partie des pectines. Elle peut contenir par
ailleurs diverses substances fortement lies ces polymres (protines, amidon, tanins). La fraction
organique des composs solubiliss pendant ce traitement est dsigne SOL.
La seconde extraction est ralise laide dune solution au dtergent acide bullition pendant 1 h.
La fraction organique des composs insolubles dans le dtergent acide est dnomme ADF
org
(Acid
Detergent Fiber). LADF
org
est thoriquement la somme des celluloses et de la lignine. Elle peut
contenir par ailleurs diverses substances fortement lies ces polymres tels que des hmicelluloses
et/ou des composs azots. La diffrence NDF
org
- ADF
org
est une approximation des hmicelluloses
dsignes HEM.
La lignine sulfurique appele aussi ADL
org
(Acid Detergent Lignin) est la fraction organique du rsidu
obtenu par action de lacide sulfurique 72 % sur le rsidu ADF
org
. Cette extraction est effectue
pendant h en rajoutant de lacide si ncessaire. Le portoir est remu rgulirement, au moins 2 fois
Annexes
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par heure. La diffrence ADF
org
-ADL
org
est une approximation de la cellulose, dnomme CEL.
LADL
org
est thoriquement la somme des lignines et des cutines. Elle peut contenir par ailleurs
diverses substances fortement lies ces polymres tels que composs azots. Elle est dsigne LIG.
Les fractions organiques NDF
org
, ADF
org
et ADL
org
sont mesures par calcination (% MV). Les masses
de chaque rsidu dextraction sont exprimes en pourcentage de la quantit de matire organique
(matire volatile) initialement introduite. On en dduit les quantits relatives de fractions solubilises
pendant lextraction : SOL = 100 NDF
org
; HEM = NDF
org
ADF
org
; CEL = ADF
org
ADL
org
; LIG
= ADL
org

Composition et mode de prparation des solutions dextraction
- Solution au dtergent neutre : 30 g de sodium dodecyl sulfate dans un large bcher sont dissous
dans environ 0,4 L deau sous agitation magntique. 18,61 g dEDTA-Na, 6,81 g de ttraborate de
sodium dcahydrat et 4,56 g dhydrognophosphate de sodium sont successivement ajouts la
solution agite jusqu leur dissolution complte. Transvase dans une fiole jauge de 1 L, 10 ml de
trithylneglycol sont ajouts et le volume est ajust 1 L avec de leau. Le pH doit se situer entre 6,9
et 7,1.
- Solution au dtergent acide : 20 g dhexadcyltrimthylammonium bromure sont pess directement
dans une fiole jauge de 1 L. Environ 0,8 L deau sont ajouts puis 26,7 mL dacide sulfurique
concentr (95-97 %). La solution est agite laide dun agitateur magntique jusqu dissolution
complte puis complte 1 L avec de leau.
- Ractif dextraction acide (H
2
SO
4
72%) : 440 mL deau sont ajouts dans un bcher de 2 L
rfrigr puis, lentement, environ 750 mL dacide sulfurique concentr. Le mlange ne doit tre utilis
que lorsquil est revenu temprature ambiante. La pese de 100 ml de cette solution doit tre
comprise entre 162,9 et 163,9 mg. Si tel nest pas le cas, la densit doit tre ajuste 1,634 0,005
avec de leau ou de lacide.
Rsultat et remarques
Lanalyse na t ralise de manire adquate que sur la bagasse de canne sucre (BAG).

Pour les diffrents dchets complexes tests, plusieurs problmes ont t rencontrs : hydrolyse
excessive du dchet lors des premires extractions rendant inexploitables les fractions rsiduelles
(pour certains matriaux, une masse initiale > 1 g doit tre utilise), dbordement du dchet hors des
capsules (le protocole conseille de raliser une fente sur le capuchon qui devrait tre vite) ou encore
hydrolyse des capsules lors des dernires extractions (le protocole de prparation de la solution acide,
bas sur des mesures de densit, devrait tre modifi). De plus, la prparation des solutions et le
protocole danalyse se sont avrs relativement contraignants. Lexprimentation ncessite deux
oprateurs, beaucoup de temps et des quantits importantes deau bouillante et dactone.
Un protocole simplifi parat prfrable. Le matriel dextraction pourrait tre utilis pour ne
dterminer que certaines fractions, par exemple : une soluble, une autre hydrolysable lacide et une
dernire rfractaire, compose des fractions ligneuses et des plastiques.
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Annexe 6.
Systme de suivi de lactivit des inoculums anarobies

Une activit importante des inoculums savre primordial la ralisation de tests rptables, rapides et
fiables. Une des problmatiques consiste lobtention dun inoculum actif i.e. prsentant une forte
concentration en microorganismes mais ne contenant toutefois pas trop de matires dgradables
rsiduelles qui conduiraient potentiellement une survaluation du PBM des chantillons tests. Afin
de simplifier la gestion des inoculums en terme de suivi et dalimentation, des racteurs batch
quips de sytmes dacquisition automatique de la pression ont t mis en uvre. Le racteur lui-
mme a t constitu dun flacon Schott de 2 ou 5 litres surmont dun flacon de garde de un litre
permettant lobtention dun volume gazeux adquat aux productions attendues et vitant galement les
remontes de boues dans le circuit gazeux. Un agitateur magntique assurait le mlange de la boue.
Aprs le flacon de garde, le circuit gazeux a t spar en deux, une section conduisant une
lctrovanne permettant le dgazage du systme, lautre tant reli au manomtre pour les mesures de
pressions. La Figure 67 propose un schma du dispositif.

Figure 67 : Schma du dispositif ralis pour lentretien des inoculums et le suivi de la production de biogaz

Le manomtre quip dun relais permet le contrle de llctrovanne afin de maintenir le systme
entre deux seuils de pression. Une fois le seuil haut atteint, llctrovanne est ouverte et le circuit
dgaz jusquau seuil bas. Le manomtre est lui-mme reli un ordinateur pour lacquisition des
donnes et leur visualisation en temps rel. La Figure 68 illustre les donnes typiques obtenues aprs
alimentation dun racteur laide dun mlange de cellulose et dextraits de levures.

P
Circuit gazeux Circuit lectrique
dagitation
Flacon Schott
Flacon de garde dacquisition
lectrovanne
Manomtre
Boues
P P
Circuit gazeux Circuit lectrique
dagitation
Flacon Schott
Flacon de garde dacquisition
lectrovanne
Manomtre
Boues
Circuit gazeux Circuit gazeux Circuit lectrique Circuit lectrique
dagitation
Flacon Schott
Flacon de garde dacquisition
lectrovanne
Manomtre
Boues
Annexes
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Figure 68 : Exemples dacquisition de pressions laide du manomtre seuil (A) et de production cumule
obtenues aprs traitement des donnes (B) lissu de lalimentation du racteur

Quelques modifications ont t tudies. Le dispositif dagitation dit de Bordeaux prsent en
dtail par Wilkie et al. (2004) a galement t expriment et sest avr efficace et relativement
simple de mis en uvre. Il prsente quelques avantages vis--vis de lagitateur magntique. A laide
de ce dernier, il est notamment difficile de raliser une agitation intermittente car la viscosit de la
boue ne garantit pas la reprise de lagitation. De plus, en fonctionnement permanent, lagitateur
magntique prsente une dure de vie limite et peut constituer une source de chaleur excessive.
Des manomtres sans relais ont galement t expriments. Ils permettent une acquisition des
pressions jusqu + 1000 mbars par rapport la pression atmosphrique. Le dispositif tait identique
celui prsent Figure 67 sans lutilisation dlctrovanne, le dgazage devant tre ralis
manuellement. Les deux systmes (avec seuil et lctrovanne ou sans seuil) ont t tests en parallle
sur 12 heures aprs alimentation de deux racteurs dans des conditions similaires. Les rsultats
obtenus tmoignent de lquivalence des deux systmes (cf. Figure 69), les diffrences de pression
nayant quun impact ngligeable (les travaux de Polanco et al. (2005) font tat de conclusions
similaires). Le dispositif seuil permet toutefois dviter loccurrence de pressions excessives
susceptibles dendommager les flacons et/ou de gnrer des fuites.

Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 250 -
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Figure 69 : Comparaison des systmes dacquisition de pression, avec seuil (P 500) et sans seuil (P 1000), aprs
alimentation de deux racteurs dans des conditions similaires



Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 251 -
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Annexe 7. Sensibilit du modle
hydrolyse / mthanogense aux valeurs des diffrents
paramtres biologiques et aux conditions initiales en substrat
complexe et bactries mthanognes

Les figures suivantes prsentent lvolution de chaque variable dynamique du systme prsent I.1.2
Partie C (X(t), concentration en matire organique complexe ; S(t), concentration en matire organique
soluble ; B(t), concentration en bactries mthanognes, CO
2
(t), concentration en dioxyde de carbone
et CH
4
(t), concentration en mthane) pour chacune des simulations ralises. Les conditions ont t
spcifies en dtail I.1.2.d Partie C et sont rappeles dans le tableau suivant :

Tableau 51 : Rappel des conditions mises en uvre pour lanalyse de sensibilit
Variables Valeurs
Simulation
Nom Symbole (units) de base de sensibilit
1 Constante dhydrolyse k
H
(d
-1
) 0,15 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
2 Taux de croissance
m
(d
-1
) 0,4 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
3 Constante de demi saturation K
S
(mg C.L
-1
) 160 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
4 Taux dutilisation du substrat Y (mgC.mgC
-1
) 0,05 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
5 Taux de mortalit k
d
(d
-1
) 0,03 (0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10)
6 [C] initiale en MO complexe X0 (mgC.L
-1
) 3000

(0,05 0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10 ; 20)
7 [C] initiale en microorganismes B0 (mgC.L
-1
) 30

(0,05 0,1 ; 0,5 ; 2 ; 10 ; 20)


Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 252 -
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Simulation n1 : Sensibilit du modle aux valeurs de la constante dhydrolyse k
H
Les valeurs de la constante dhydrolyse ont une influence considrable sur lensemble des variables
dynamiques du systme. Plus la vitesse de lhydrolyse est leve, plus le dveloppement des bactries
mthanognes est consquent et plus la concentration en microorganismes maximale atteinte est
importante. De la mme manire, et ce malgr le dveloppement plus important des bactries, la MO
soluble (S) atteint des concentrations plus leves, avant dtre rapidement entirement consomme
quelque soit la vitesse dhydrolyse. Les productions de biogaz (dioxyde de carbone et mthane) sont
directement lis aux cintiques de lhydrolyse et prsentent des formes exponentielles tant donn les
conditions simules ici (et notamment la quantit de substrat initiale vis--vis de la quantit de
bactries initiales ; cf. simulation 6 et 7 o ces conditions initiales sont modifies).

X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,1*kH
0,5*kH
kH
2*kH
10*kH
B (t)
0
20
40
60
80
100
120
140
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
S (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 253 -
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Simulation n2 : Sensibilit du modle aux valeurs du taux de croissance des bactries
mthanognes
Mis part pour sa valeur la plus faible (0,04 j
-1
), les valeurs du taux de croissance des bactries
mthanognes nont que trs peu dinfluence sur lvolution des diffrentes variables dans les
conditions utilises ici. La croissance des bactries est davantage limite par la concentration de
substrat disponible S(t), elle-mme limite par la vitesse de lhydrolyse, que par la valeur du taux de
croissance. Pour la valeur la plus faible, la croissance des bactries est cependant fortement ralentie,
entranant une accumulation importante de la MO soluble prcdant sa consommation par lactivit
bactrienne. La production de biogaz est par consquent cintiquement impacte et plus
particulirement celle de mthane, directement lie lactivit des bactries mthanognes (une partie
du CO
2
est produite lors de la phase dhydrolyse et linfluence est donc moins importante).
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,1*mu
0,5*mu
mu
2*mu
10*mu
B (t)
0
20
40
60
80
100
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
S (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 254 -
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Simulation n3 : Sensibilit du modle aux valeurs de la constante de demi saturation K
S

Les valeurs de la constante de demi saturation testes ne prsentent pas un impact considrable sur
lvolution du systme et notamment sur les productions de dioxyde de carbone et de mthane. Dans
les conditions simules ici, le taux de croissance maximal des bactries est rapidement atteint, et ce
quelle que soit la valeur de K
S
, comme en tmoignent les volutions similaires des concentrations en
bactries mthanognes. Toutefois, pour la valeur teste la plus leve (1600 mgC.L
-1
), le taux de
croissance maximal des bactries nest pas atteint (S
max
<< K
S
) impliquant un lger retard sur les
volutions des concentrations en bactries et, par consquent, du mthane produit.
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,1*Ks
0,5*Ks
Ks
2*Ks
10*Ks
B (t)
0
20
40
60
80
100
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
S (t)
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 255 -
LGCIE, INSA Lyon
Simulation n4 : Sensibilit du modle aux valeurs du taux dutilisation du substrat Y
Mis part pour sa valeur la plus leve (0,5 mgC(B).mgC(S)
-1
), les diffrentes valeurs testes du taux
dutilisation du substrat ninfluent que lgrement sur lvolution du systme. Pour la valeur la plus
leve, limpact est important sur lensemble des variables du systme. Le dveloppement des
bactries est trs important et atteint des concentrations leves. En effet, dans ces conditions, pour
deux mgC de substrat dgrad, un mgC bactrien est synthtis. En consquence, beaucoup moins de
mthane est produit par unit de substrat dgrad et la stoechiomtrie de la raction est donc affecte.
Une fois la totalit du substrat consomm (t 15 jours), la production de mthane continue toutefois
proportionnellement la mortalit bactrienne du fait du recyclage de la biomasse inactive en tant que
nouveau substrat. Cet effet sobserve galement sur lvolution des concentrations en MO complexe
(X) o des valeurs non nulles persistent aprs 40 jours de dgradation du fait de cette activit
endogne.
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,1*Y
0,5*Y
Y
2*Y
10*Y
B (t)
0
200
400
600
800
1000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
S (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 256 -
LGCIE, INSA Lyon
Simulation n5 : Sensibilit du modle aux valeurs du taux de mortalit k
d
Les diffrentes valeurs de la constante de mortalit affectent principalement les volutions des
concentrations en bactries et notamment les concentrations finales (au terme de 90 jours de
dgradation). Pour les constantes les plus faibles, la concentration en bactrie ne diminue que trs
faiblement et la concentration 90 jours est par consquent trs leve, plus de trois fois plus
importante quinitialement. Les autres variables du systme ne sont que trs peu affectes par les
valeurs du taux de mortalit, mis part la concentration en MO soluble S qui prsente une fraction
ultime non dgrade pour la valeur du taux de mortalit la plus leve. Pour cette valeur (k
d
= 0,4 j
-1
),
la croissance bactrienne (avec un taux de 0,4 j
-1
galement) est domine par la mortalit et la quantit
de bactrie au-del de 30 jours de dgradation est quasi nulle do la persistance dune fraction de
substrat hydrolys (tape non biologique ici) mais non dgrade par les bactries mthanognes.
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,1*kd
0,5*kd
kd
2*kd
10*kd
B (t)
0
20
40
60
80
100
120
140
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
S (t)
0
100
200
300
400
500
600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 257 -
LGCIE, INSA Lyon
Simulation n6 :Sensibilit du modle aux valeurs de conditions initiales en substrat complexe X(0)
Pour une reprsentation plus claire des rsultats, les graphiques des simulations ralises pour les valeurs infrieures et suprieures la valeur de base (cf.
Tableau 51) ont t spars partie de gauche et de droite respectivement. Les rsultats sont discuts ci aprs.
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,05*X0
0,1*X0
0,5*X0
X0
B (t)
0
20
40
60
80
100
0 10 20 30 40 50 60
S (t)
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60
0,05*X0
0,1*X0
0,5*X0
X0
CO2 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60
X (t)
0
10000
20000
30000
40000
50000
60000
70000
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
X0
2*X0
10*X0
20*X0
B (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
S (t)
0
5000
10000
15000
20000
0 10 20 30 40 50 60
X0
2*X0
10*X0
20*X0
CO2 (t)
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
35000
0 10 20 30 40 50 60
CH4 (t)
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
35000
0 10 20 30 40 50 60
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 258 -
LGCIE, INSA Lyon
Simulation n7 : Sensibilit du modle aux valeurs des conditions initiales en bactries mthanognes B(0)
Pour une reprsentation plus claire des rsultats, les graphiques des simulations ralises pour les valeurs infrieures et suprieures la valeur de base (cf.
Tableau 51) ont t spars, partie de gauche et de droite respectivement. Les rsultats sont discuts ci aprs.
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
0,05*B0
0,1*B0
0,5*B0
B0
B (t)
0
20
40
60
80
100
0 10 20 30 40 50 60
S (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
0 10 20 30 40 50 60
0,05*B0
0,1*B0
0,5*B0
B0
CO2 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 10 20 30 40 50 60
X (t)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
0 10 20 30 40 50 60
Temps (jours)
C
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n

(
m
g
C
.
L
-
1
)
B0
2*B0
10*B0
20*B0
B (t)
0
100
200
300
400
500
600
700
0 10 20 30 40 50 60
S (t)
0
50
100
150
200
250
300
0 10 20 30 40 50 60
B0
2*B0
10*B0
20*B0
CO2 (t)
0
500
1000
1500
2000
0 10 20 30 40 50 60
CH4 (t)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
0 10 20 30 40 50 60
Annexes
Thse M. Rouez 2008 - 259 -
LGCIE, INSA Lyon
Simulation n6 : Sensibilit du modle aux valeurs de conditions initiales en substrat
complexe X(0)

Mises part les diffrences de concentrations maximales atteintes pour les variables B(t), S(t), CO
2
(t)
ou CH
4
(t) inhrentes (et proportionnelles) aux diffrentes concentrations initiales en MO complexe
simules, il est remarquable que les cintiques de productions du biogaz et plus particulirement du
mthane sont modifies. Pour des concentrations initiales faibles en MO complexe, les productions de
mthane prsentent une allure exponentielle (graphique de gauche) tandis que pour des concentrations
leves, elles ont une allure sigmodale (graphique de droite). Ainsi, lorsque peu de substrat
dgradable est disponible, ce dernier est trs vite utilis et devient rapidement limitant. La cintique de
production de mthane est alors directement lie la cintique de lhydrolyse. Pour les concentrations
les plus faibles (150 et 300 mgC.L
-1
), il est dailleurs remarquable que la quantit de substrat
disponible na mme pas permis une augmentation de la concentration initiale en bactrie. En
revanche, pour les concentrations les plus leves en MO complexe initiale, les productions cumules
de mthane lors des premiers jours sont proportionnelles aux concentrations bactriennes qui
augmentent de manire considrables. La production de mthane prsente alors une allure sigmodale
typique dune croissance microbienne en batch .

Simulation n7 : Sensibilit du modle aux valeurs des conditions initiales en bactries
mthanognes B(0)

Les effets cintiques de la concentration initiale en bactries mthanognes sont ici clairement visibles
sur les productions de biogaz, et tout particulirement de mthane. Pour des concentrations initiales
leves en microorganismes, la MO soluble (S) est rapidement convertie en biogaz et ne saccumule
que trs peu (S(t) < 300 mgC.L
-1
) . Pour les concentrations les plus leves, la croissance bactrienne
est mme inexistante (dB/dt < 0), tout comme dans le cas prcdent, simulation n6, avec une trs
faible concentration en substrat. La production de biogaz prsente alors une allure exponentielle
directement lie la cintique de lhydrolyse. Du fait du recyclage de la biomasse inactive, les
productions cumules ultimes de biogaz prsentent des diffrences significatives. Dans le cas contraire
(faibles concentrations initiales en bactries), la production de mthane prsente des phases de latence
plus ou moins importantes, les phases les plus longues tant associes aux concentrations initiales en
bactries les plus faibles. La production de biogaz est alors limite, non plus par lhydrolyse, mais par
le fort dveloppement bactrien initial. En parallle, la MO soluble saccumule de manire importante,
jusqu des valeurs de 1200 mgC.L
-1
, durant le temps ncessaire au dveloppement des bactries qui
vont la consommer. Les productions de mthane prsentent ainsi des formes sigmodales.

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