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ORGANELOS CELULARES I.

Introduccin

En las clulas vegetales se encuentran pequeos cuerpos llamados plastidios, entre los que destacan los cromoplastos y leucoplastos. Para poder observar estos orgnulos se procedi a cortar pequeos trozos delgados de diferentes vegetales y ponerlos en una caja petri con agua de la llave y posteriormente colocarlos en el porta objetos para despus observar en el microscopio. Los cromoplastos almacenan compuestos llamados carotenos, compuestos responsables del color amarillo, anaranjado y rojo en ptalos de flores, frutos y races de plantas superiores. La funcin precisa de estos orgnulos no se conoce, aunque comnmente se cree que actan como atrayentes para animales y que son el resultado de una coevolucin entre plantas y polinizadores. Pueden presentar diferentes tipos de formas, de las cuales la ms frecuente es una forma ameboide. Dependiendo de los arreglos que presentan los carotenos dentro del cromoplasto, han sido clasificados en cuatro grupos diferentes que son: globulares, tubulares, membranosos y cristalinos. En una gran cantidad de plantas, los cromoplastos provienen de los cloroplastos presentes en las flores y frutos verdes. Leucoplastos son plastidios no pigmentados. Entre sus funciones tenemos que algunos sintetizan almidn, estos se llaman amiloplastos, otros producen aceites y protenas. Si los leucoplastos se exponen a la luz se convierten en cloroplastos. Los leucoplastos almacenan sustancias incoloras o poco coloreadas. Abundan en rganos de almacenamiento como races (como en el nabo) o tubrculos (como en la patata). Los plstidos son orgnulos limitados por membrana que se encuentran solamente en las clulas de las plantas y de las algas. Estn rodeados por dos membranas, al igual que los mitocondrias, y tienen un sistema de membranas internas que pueden estar intrincadamente plegadas. Los plastos, plstidos o plastidios son orgnulos celulares eucariticos, propios de las plantas y algas. Su funcin principal es la produccin y almacenamiento de importantes compuestos qumicos usados por la clula. As, juegan un papel importante en procesos como la fotosntesis, la sntesis de lpidos y aminocidos, determinando el color de de frutas y flores, entre otras funciones. Hay dos tipos de plastos claramente diferenciados, segn la estructura de sus membranas: los plastos primarios, que se encuentran en la mayora de las plantas y algas; y plastos secundarios, ms complejos, que se encuentran en el plancton

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS 1. Qu son las mitocondrias y que funcin realizan? 2. En qu parte de la clula se localiza a las mitocondrias? 3. Cmo se llama el pigmento verde que contienen los cloroplastos y la funcin de cloroplastos? 4. Qu son los plastidios y cmo se clasifican?

1. Por qu razn a los vegetales verdes se les da el nombre de productores o seres auttrofos? 2. Escribe el nombre de las estructuras internas del cloroplasto 3. Escribe la reaccin de la fotosntesis.

IV.6. Procedimiento. Con una navaja hacer cubos de 1.5x1.5 cm de zanahoria, betabel y nabo. Hacer varios cortes de esos cubos lo ms delgado posiblePasar los cortes a una caja petri conteniendo agua de la llave Subir los cortes ms delgados a un porta objetos Cubrir con gelatina glicerinada

DEMOSTRACIN DE FOSFATASA ACIDA I. Introduccin. La enzima fosfatasa acida ubicada en los lisosomas, hidroliza al substrato Bglicerofosfato. El fosfato liberado se precipita como fosfato de plomo mediante la presencia de plomo en el medio-reaccin. Este debe prepararse anticipadamente a) Para permitir que el plomo precipite el fosfato libre que puede hallarse en las muestras comerciales de glicerofosfato libre que puede hallarse en las muestras comerciales de glicerofosfato y b) Para que el plomo se equilibre con el glicerofosfato. No puede utilizar el calcio para esta captura (como en el mtodo de gomori de fosfatasa alcalina) debido a que el fosfato de calcio es soluble a pH en el que la fosfatasa acida acta en forma ptica. Dado que el fosfato de plomo es incoloro o blanco, se tiene que trans forman en sulfuro de plomo que tiene fuerte coloracin (caf o negro cuando se encuentra concentrado). Al observarse que los tejidos han sido tratados en un pH acido para producir fosfato de plomo, es probable que el cambio de pH distorsione mucho las clulas, se debe sugerir entonces en sulfuro de amonio a un nivel muy alcalino de pH, para transformar el precipitado en sulfuro de plomo. De aqu que el H2O-H2s del aparato de kipp, o una solucin de sulfato de sodio, se utiliza para este propsito. En un principio se pens que los lisosomas seran iguales en todas las clulas, pero se descubri que tanto sus dimensiones como su contenido son muy variables. Se encuentran en todas las clulas animales. No se ha demostrado su existencia en vegetales. Entre sus enzimas, la ms importante es la fosfatasa cida. En el caso de los lisosomas se encuentran en la vacuola. Su polimorfismo resulta ahora comprensible, puesto que actan como vacuolas digestivas y esto proporciona contenidos heterogneos. Una caracterstica comn entre ellos es que contienen ENZIMAS HIDROLASAS CIDAS. Hasta ahora se han identificado unos 40 tipos distintos de enzimas hidrolticas, que degradan protenas (proteasas), steres de sulfato (sulfatasas), lpidos (lipasas y fosfolipasas) o fosfatos de molculas orgnicas (fosfatasas). No todas estn presentes en todos los lisosomas. La ms comn es la FOSFATASA CIDA. El pH es de 5 en el interior del lisosoma. Para mantener este pH, los lisosomas poseen en su membrana una protena transmembrana que bombea protones hacia el interior del lisosoma. El pH 5 es el ptimo para la actuacin de las enzimas. Composicin qumica de la membrana de los lisosomas:

La hemimembrana interna de la membrana de los lisosomas est intensamente glucosilada, lo que ayuda a proteger la membrana de los enzimas que contiene. La membrana contiene protenas de transporte que permiten que los productos finales de la digestin (como azcares y nucletidos) sean transportados cara el citosol donde van a ser utilizados por la clula o secretados al exterior. La membrana tambin contiene una bomba de hidrgeno impulsada por ATP que bombea hidrogeniones cara el interior del lisosoma, lo que hace que se mantenga el pH cido en su interior, pH cido necesario para la actuacin de las hidrolasas cidas. Formacin de las enzimas lisosmicas y transporte al lisosoma : Los enzimas lisosmicos se forman en el RE donde se les va a aadir una manosa. Del RE pasan por transporte vesicular a la cara cis del complejo de Golgi, y aqu, a la manosa se le une un grupo fosfato. Avanzan por tansporte vesicular o tubular por los diferentes sculos del dictiosoma, y en la cara trans se van a unir la un receptor situado en las membranas de estos sculos de la cara trans. Estos receptores reconocen la manosa-6-fosfato. De la cara trans del C.G. se escinden vasculas recubiertas de clatrina. Posteriormente el recubrimento de clatrina se pierde y por un transporte dependiente de receptores que van a reconocer los lisosomas, estas vesculas se van a fusionar con los lisosomas. Debido al pH cido del interor del lisosoma, los enzimas se disocian del receptor. Posteriormente se libera el grupo fosfato que estaba unido a la manosa y ya tenemos los enzimas maduros. A su vez, ve a haber un proceso de reciclaje de los receptores, mediante vesculas que se separan del lisosoma y se fusionan con los sculos de la cara trans del C.G. Funciones de los lisosomas: Degradar los diferentes tipos de sustratos. Dependiendo de su origen, los materiales siguen diferentes rutas incluso los lisosomas. El fluido extracelular y las macromolculas son captadas por pequeas vesculas (pinocitosis). Estas pequeas vesculas, al fusionarse, forman endosomas tardos. Estos endosomas tardos se fusionan con los lisosomas primarios y se forman los lisosomas secundarios donde se produce la degradacin del contenido de los endosomas. Las partculas extracelulares son captadas por fagocitosis formndose fagosomas que se van a fusionar con los lisosomas primarios dando lugar a fagolisosomas donde se produce la degradacin de las partculas fagocitadas. Otra ruta es la de utilizar partes viejas de la clula, as se pueden ver lisosomas digiriendo mitocondrias u otros orgnulos. 6. Procedimiento. Matar el ratn rpidamente por decapitacin o bien con cloroformo, obtener los testculos y tomar una muestra lo mas delgada posible, colocarla en un portaobjetos. Haga reaccionar las secciones coloradas en el portaobjetos a una temperatura de 37C en el medio-reaccin, colocndolos en una caja de Petri, drate una hora aproximadamente. Al finalizar el tiempo de incubacin, lavar con agua destilada para remover todo el plomo que se observe como ion libre. Transferir durante 1 min de agua destilada que ha sido saturada con H2s. Medio-reaccin. Agregue .53g nitrato de plomo y 40ml de una solucin al 3% de B-glicerofosfato de sodio a 400ml de una solucin de una solucin de acetato de sodio .05M: Amortiguador de cido actico a un pH=5. Deje se cuando menos de un da para otro a una temperatura de 37C, durante cuyo tiempo, puede formarse un precipitado, o floculacin. Enfri y luego filtre, use de inmediato.