5,520.

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

J Kim, S Bhattacharyya, e P Ducheyne, University of Pennsylvania, Filadlfia, PA, EUA

2011 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.

5.520.1. 5.520.1.1. 5.520.1.2. 5.520.2. 5.520.2.1. 5.520.2.2. 5.520.2.3. 5.520.3. 5.520.3.1. 5.520.3.2. 5.520.4. 5.520.4.1. 5.520.4.1.1. 5.520.4.1.2. 5.520.4.2. 5.520.4.2.1. 5.520.4.2.2. 5.520.4.2.3. 5.520.5. 5.520.5.1. 5.520.6. Referncias

Introduo Limitaes de enxertos sseos naturais Sintticos enxertos sseos e materiais utilizados Requisitos Andaime Propriedades de carga Degradao e reabsoro Cintica Andaime Arquitetura para crescimento sseo e Permeabilidade de Nutrientes e neovascularizao Fundamentos da Cermica Bioatividade Transformao de superfcie A adsoro de protena sobre a superfcie biomineralized e ligao selectiva de integrinas Caractersticas de Cermicas Bioativas e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes para engenharia de tecido sseo-Scaffold Biocermica e vidros bioativos Vidros bioativos e cermicas de vidro Fosfatos de clcio Cermica / Polmeros Materiais Compsitos Estratgia de materiais compsitos PLA / PGA com base de polmero / cermica compsitos base de protenas de polmero / compsitos cermicos Modificaes de Cermica Bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes Entrega localizada de biomolculas e clulas Direes concluso e Futuro

256 256 256 257 257 257 257 257 257 258 258 258 258 259 260 260 260 262 263 263 264 265

Glossrio
Biocermica Os materiais cermicos que so especificamente desenvolvido para utilizao como implantes mdicos e dentrios. Biodegradvel Capaz de ser quebrado, especialmente em produtos incuos pela ao dos seres vivos (Como microorganismos). Biomineralizao Processo pelo qual os organismos vivos produzir minerais, muitas vezes para endurecer ou endurecer tecidos existentes. A reabsoro ssea Processo pelo qual os osteoclastos quebrar osso e liberte os minerais, o que resulta numa transferncia de clcio do fluido ssea para o sangue. Os materiais compsitos Muitas vezes abreviado para compsitos, so materiais modificados ou que ocorrem naturalmente feitos a partir de dois

ou mais materiais constituintes com significativamente diferente propriedades fsicas ou qumicas que se mantm separadas e distintas em escala macroscpica ou microscpica dentro da estrutura acabada. Osteoconduo Processo pelo qual o tecido fibrovascular e clulas osteoprogenitoras invadem uma estrutura porosa, muitas vezes agindo como um andaime temporrio, e substitu-lo por osso recentemente formado. Osteoinduo Processo que promove a mitognese de mesenchymalcells indiferenciadas, que conduzem formao de clulas osteoprogenitoras que tm capacidade osteognica. Stress-blindagem Reduo da densidade ssea (osteopenia) e um resultado da remoo de tenso normal do osso por um do implante.

Abreviaturas
ACP ALP bFGF fibroblastos bsico BCP BGs BMP-2 CA CaP CDHA Fosfato de clcio amorfo Fosfatase alcalina Factor de crescimento

de

Fosfato de clcio bifsico Vidros bioativos Protena morfogentica do osso-2 Apatita carbonatada Fosfatos de clcio O clcio-deficiente hidroxiapatite

ECM FDA FN HA HCA PCL PDLLA PEG PGA PLA

Matriz extracelular Food and Drug Administration Fibronectina Hidroxiapatita Apatita Hydroxylcarbonate Poli-e-Caprolactona Poli-DL-lctico Polietileno glicol cido poligliclico cido poliltico

255

256

Engenharia de Tecidos - Musculoesqueltica, craniana e Maxilofacial

PLGA PLLA poli (3HB) poli (3HB-co-3HV) transformante-b PPF

Polilctico-co-cido gliclico Poli-L-lctico Poli (3-hidroxibutirato) Poli (3-hidroxibutirato-cohydroxyhexaoate) Polipropileno fumarato

SCPC TCP TGF-b VEGF b-TCP

Slica de clcio-fosfato nanocompsito Fosfato tetraclcico Factor de crescimento Fator de crescimento vascular endotelial b-Fosfato triclcico

5.520.1.

Introduo

O Santo Graal em engenharia de tecido sseo a busca de andaimes que funcionam como um suporte temporrio para as clulas para facilitar a regenerao de osso, como os requisitos de andaime mate-riais so extremamente desafiador. Andaimes fornecer-ncora celular stios de idade, a estabilidade mecnica e orientao estrutural, e in vivo, so a interface para responder s alteraes fisiolgicas e biolgicas, bem. Alm disso, eles servem para facilitar a remodelao da matriz extracelular (ECM), a fim de alcanar a integrao com o tecido circundante nativa. Como tal, os materiais ideais andaime precisam de ser biocompatvel, osteoindutor, osteocondutor, integrativa, porosa e mecanicamente compatvel com o tecido nativo. Para cumprir tal papel desejada, muitos biomateriais foram testados.1 Cermicas bioactivas, tais como os fosfatos de clcio e bioacculos positiva (BG), tm sido usadas por muitos anos em odontologia, cirurgia oral e maxilofacial e trauma ortopedia e cirurgia de substituio da articulao. Estes materiais de ligao ao osso e aumentar a formao de tecido sseo (osteoconduo). Eles tipicamente tm caractersticas qumicas e fsicas que imita a estrutura e composio da fase mineral do osso, ou como resultado de reagir com fluidos fisiolgicos, desenvolver uma tal superfcie. A cermica relativamente rgido e quebradio, e difceis de se formar em formas complexas. Por outro lado, os polmeros so mais facilmente fabricado em estruturas complexas, mas so tipicamente muito fraco para satisfazer as exigncias da cirurgia e os em ambiente fisiolgico vivo. Assim, composto andaime compreendendo biocermica e polmeros so estudados, pois a resistncia fractura limitada da cermica podem ser mitigados por uma matriz de polmero, durante todo o tempo do compsito exibe a osteocondutividade e libertao retardada / sustentada caractersticas tpicas para o componente cermico. Este captulo analisa o desenvolvimento recente de bioativos cermica e cermica bioativa andaimes compsitos em termos de constituintes de materiais, as propriedades estruturais e bioactiva, bem como in vitro e in vivo, especialmente as caractersticas para aplica-es em engenharia de tecidos sseos e a regenerao de tecidos. Em nossa anlise, incluir apenas uma breve descrio de alguns aspectos crticos da composio e do mecanismo da atividade biolgica, como esses temas so discutidos em profundidade muito maior em outro lugar neste abrangente (ver Captulo 1,109, Bioactive Cermica e Captulo 1,114, Bioatividade: Mecanismos).

cura e regenerao. Infelizmente, no entanto, a colheita autoenxertos, tipicamente a partir da crista ilaca, adiciona custos ao surgia, limitada por limitaes anatmicas, e est associada a uma morbidade no local dador significativo. 1,3-5 Alm disso, a quantidade de enxerto necessria clinicamente frequentemente torna impossvel auto-enxerto. A alternativa convencional para auto-enxerto foi ssea alognico obtido de doadores cadveres. Embora ele fornece um andaime naturais ssea, existe o risco potencial de induzir uma resposta imunolgica, devido a diferenas genticas e o risco de tanto a transmisso bacteriana e viral a partir do material do dador para o hospedeiro.3,4,6,7 Alm disso, o fornecimento de corrente de ssea de doador falecido apertado.7

5.520.1.2. Sintticos enxertos sseos e materiais utilizados

As limitaes dos enxertos biolgicos levaram utilizao de biomateriais sintticos como enxertos sseos. H evidncias sugerem-ing que merecem considerao sinttica andaimes como a enxertia material da fratura para muitas indicaes. Atualmente, o aplicativo no qual andaimes sintticos mostram a promessa mais imediata-intermdias no tratamento de grande defeito fraturas. 7 Nesta rea, substitutos de osso existentes de enxerto, tais como fosfatos de clcio 8-10 e BGs11 Descobriu-se que produzam resultados equivalentes aos atingidos com autoenxerto. Os excelentes resultados com estes materiais bioac-tiva so principalmente devido sua propriedade bioactivo, que uma camada de superfcie, que o equivalente do osso fase mineral. Quando implantado no osso, materiais bioactivos aumentar o crescimento de osso e clulas de deposio ssea directo sobre as suas superfcies. Portanto, cermicas bioactivas tm sido utilizados como um material de enchimento sseo para proporcionar uma armao para a migrao de clulas e formao ssea rpida. Materiais polimricos, incluindo os de ocorrncia natural12,13 e polmeros sintticos,14 so amplamente considerados materiais para engenharia de tecido sseo aplicaes. Em particular, os polisteres tais como o cido polilctico (PLA), cido poligliclico (PGA) e seus copolmeros de cido polilctico-co-gliclico (PLGA),15-17 polydioxane e seus copolmeros so polmeros sintticos e biodegradveis com um extenso histrico de uso em produtos que foram apuradas pela Food and Drug Administration EUA (FDA).18 Cermica / polmero compsitos tm sido considerados para uso como a engenharia de tecidos do osso scaffolds devido s suas vantagens combinadas de melhor fsico, biolgico, e as propriedades mecnicas e, em particular, a capacidade que oferecer na adaptao da sua estrutura e taxa de degradao com a necessidade especfica no local do implante.19-22 Exemplos tpicos destes compostos so descritos por vrios autores. 23-25 No geral, quanto a tecnologia de engenharia continua a evoluir, futuro sinandaimes anestsica s pode ser esperado para um melhor desempenho.

5.520.1.1. Limitaes de enxertos sseos naturais

O padro ouro atual para enxerto sseo auto-enxerto usando osso esponjoso ou enxertos vascularizados da fbula ou crista ilaca.2 Isto porque autoenxertos fornecer clulas osteognicas, assim como factores essenciais necessrios para o osso osteoindutoras

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

257

5.520.2.

Requisitos Andaime

Para o sucesso do tratamento de defeitos sseos, andaimes para osso engenharia de tecidos devem cumprir trs funes principais. Primeiro, o andaime deve ser mecanicamente competente para resistir em tenses in vivo e de carga durante a neoformao de tecidos. Em segundo lugar, o andaime deve degradar em uma taxa previsvel sem interfer-o para o crescimento interno de tecido e do processo de regenerao. Em terceiro lugar, o micostructure interno e propriedades da superfcie do andaime tem de ser capaz de guiar as clulas a crescer na forma fsica desejada, e deve ser permevel aos nutrientes e neovascular izao. A exigncia de preencher as funes acima mencionadas primrios coloca frequentemente requisitos de concepo em conflito. Por exemplo, a fim de alcanar a fora mecnica do osso equivalente, preciso scaffolds porosos minimamente. No entanto, um alto grau de porosidade essencial para garantir clula migrao, vascularizao, e bem relacionado formao de tecido dentro do andaime. A questo do melhor projeto e fabricao de um andaime que pode cumprir as funes primrias ainda est em uma extensa pesquisa.26

vrias razes. Durante as fases iniciais da cicatrizao do tecido, o andaime biodegradvel mantm o tecido de cicatrizao no local.32 crucial que a taxa de degradao do andaime paralela taxa de crescimento do osso a fim de manter o desejado me- propriedades mecnicas da construo. Se ocorre a reabsoro demasiado rapidamente, pseudoartrose pode ocorrer. Inversamente, se a reabsoro ocorre muito lentamente, esta interfere com o crescimento sseo, conduzindo tambm a pseudo-artrose ou, alternativamente, para o enfraquecimento do osso recentemente formado.1 Ao ritmo ptimo, a reabsoro conduz a uma transferncia gradual de tenses ao tecido de cicatrizao, evitando os efeitos de blindagem stress. Ao mesmo tempo, reabsoro ssea, tais no necessita de uma operao de remoo dos dispositivos cirrgicos, o que um benefcio substancial, tanto economicamente e para o paciente a ser tratado. 32 Finalmente, tambm ser vantajoso para utilizar esta propriedade de degradao de qualquer factor de crescimento de efecery destinada a aumentar a formao de osso e de integrao.

5.520.2.3. Andaime Arquitetura para crescimento sseo e Permeabilidade de nutrientes e neovascularizao

No caso dos andaimes baseados engenharia de tecidos abordagens, importante focar tanto a arquitetura eo material do andaime como elas influenciam a regenerao ssea em combinao. Em particular, ela est relacionada com o efeito do tamanho dos poros e da porosidade. A microestrutura deve assegurar andaime migrao de clulas, bem como a diferenciao em anexo e as superfcies dos poros. Alm disso, para a fcil migrao de clulas dentro do SCAF dobras, os poros deve ser suficientemente grande.33 As porosidades ptimas tamanhos superiores a 80% e de poro na gama de 100-500 mm so adequados para aplicaes em engenharia de tecidos, como uma maior poros tamanho resulta em crescimento do tecido fibroso.34 A dimenso de poro exacta depende da aplicao especfica.35-40 A fim de permitir o crescimento sseo e funes, uma vez que as clulas esto ligadas superfcie do material, pode no haver espao suficiente para permitir que os canais e as principais funes metablicas, tais como o transporte de nutrientes para as clulas que migram atravs dos andaimes, evacuao de resduos,27,40 transporte de protenas, e a vascularizao aps a implantao, que podem ser obtidos com uma rede interligada de poros. O grau de interconectividade dos poros determina a permeabilidade de andaimes, o que , assim, um outro fator chave que influencia a capacidade dos andaimes "para melhorar a regenerao de tecidos. Estudos descobriram uma correlao directa entre o crescimento celular e a permeao de nutrientes atravs da estrutura porosa durante o processo de cultura de clulas em um andaime.33,41-43

5.520.2.1. Propriedades de carga

Em defeitos sseos de tamanho crtico, a meta de utilizao de andaimes ssea principalmente para implantar estes em defeitos sseos que no cicatrizam espontaneamente. Como carga mecnica sustentada necessrio na maioria dos casos, um ideal de carga andaime deve fornecer sufi-ciente apoio mecnica inicial para substituir a funo mecnica-cal at o transplante de tecido de engenharia totalmente remodelado pelo tecido hospedeiro.27 Ele tambm deve corresponder, tanto quanto possvel comportamento sseo mecnica como questes surgiram com a maioria dos materiais em virtude da sua maior rigidez do que a de qualquer osso trabecular ou cortical. Esta incapacidade para corresponder ness-rgida resultados no fenmeno chamado de "stress-blindagem", em que o osso no suficientemente loaded comparao com o andaime, levando interrupo da remodelao ssea desejado. Enquanto mximospropriedades mecnicas podem ser obtidas com um controle de microarquitetura dos andaimes, a escolha materiais ainda um dos aspectos mais importantes na concepo de andaimes. Isto acontece porque, dependendo das propriedades do material, alguns biomateriais so ou muito fraco ou muito forte para ser providenciado na arquitectura desejada. Tanto o tecido e os nveis de arquitectura deve ser projetado para atingir tanto a distribuio espacial e um materiais que fornecem a fora suficiente para sustentar a carga.28

5.520.2.2. Degradao e reabsoro Cintica

Biodegradao de implantes de cermica utilizado para regenerao ssea, o regulada no s pelas caractersticas materiais, mas tambm pelas condies do ambiente biolgico. Ou dissoluo fsico-qumica ou degradao por celular, isto , osteo-clstica atividade, ou por uma combinao de ambos so os principais mecanismos para a biodegradao. Fosfato triclcico29,30 e BG 31 degradar principalmente por dissoluo fsico-qumicas, a sua degradao por osteoclastos mostrou ser menor. Outras cermicas, tais como a hidroxiapatite densa (HA), no entanto, parecem degradar sobretudo, pela atividade osteoclstica.11 Scaffolds biodegradveis so a melhor alternativa para a tempefixao porrio para muitos tipos diferentes de defeitos sseos para

5.520.3.

Fundamentos da Cermica Bioatividade

5.520.3.1. Transformao de superfcie

A natureza do biomaterial e as suas caractersticas de superfcie desempenham um papel importante na determinao da adequao de osso para o material do implante. Reactividade superficial uma das caractersticas comuns dos ossos cermicas bioactivas, e este atributos para biomineralizao de uma fina camada de fosfato de clcio, na interface entre a cermica e do tecido sseo que hospedeira fornece a interface de ligao com os tecidos. Dependentes do tempo de avaliaes em modelos animais sugerem que aps a implantao da camada de apatite biologicamente equivalente de carbonato formada sobre a superfcie bioactiva em um breve perodo, e depois disso medeia

258

Engenharia de Tecidos - Musculoesqueltica, craniana e Maxilofacial

interaces celulares entre osteoblastos e o biomaterial superfcie,68-71 e, assim, podem resultar em ligao selectiva dos diferentes tipos e / ou combinaes de integrinas (por exemplo, um5b1 ou umvb3).67 Descobertas recentes sugerem que a ligao selectiva do um5b1 integrina leva sobre-regulao da mineralizao diferenciao e matriz osteoblstica.72 Para alm do seu papel como receptores de adeso, integrinas esto tambm envolvidos na transduo de sinais a partir da ECM para o interior da clula, 73,74 resultando em a activao de molculas de sinalizao e regulao da expresso do gene, modulando a migrao celular, a proliferao, diferenciao e apoptose.75-80 No entanto, pouco se sabe sobre os eventos intracelulares que se seguem fixao dos osteoblastos destas cermicas bioactivas, levando a diferenas na actividade dos osteoblastos. Para obter uma compreenso fundamental do mecanismos pelos quais a formao de tecido sseo estimulado, os fenmenos atmicos e moleculares induzidos por interaes osteoblastos-implante materiais e seus efeitos sobre as vias de sinalizao de clulas e tecidos deve ser investigado.55

integrao da matriz ssea para metabolizar como uma parte de tisprocessar.44-46 BG com a sua superfcie transformada em fosfato de clcio foi o primeiro material para o qual esta propriedade foi descrito. 47 O fosfato de clcio formados na cermica bioactiva deficiente em clcio nanocristalinos HA (Ca10 (PO4) 6 (OH) 2) (CDHA), contendo sdio, magnsio, cloro, e car-carbonatos, e hibridado com a biomacromolculas. 48 Este hidroxilo apatite carbonatada fase (HCA) que se forma na bioac-tiva implantes semelhante fase mineral do osso e diferente de HA sinttica. O fosfato de clcio, com as suas osso mineral caractersticas semelhantes recruta clulas sseas e leva-as a proliferar em preferncia a fibroblastos, diferenciao e a produo de um composto de clcio ECM biolgica phosdiclcico e colgeno.46,49 O fluido intersticial do corpo, a forma que um primeiro bioativos interfaces de cermicas com depois de ser inserido em um defeito sseo. O desenvolvimento de uma camada de CA biologicamente equivalente iniciada atravs de uma soluo mediada reaces de superfcie que ocorrem aps a imerso das cermicas bioactivas em fluidos biolgicos.46 A sequncia de reaces que conduzem camada tal inclui dissoluo, precipitao e de troca inica, phe- nomena, adsoro simultnea de Ca-P em combinao com os eventos de adsoro de protenas que ocorrem na superfcie bioactiva cermica. 49-54 Em trabalhos de reviso anteriores, resumiu estes acontecimentos que foram relatados para ocorrer na interface cermica-tecido bioativo. 49,50,55 A lista a seguir no implica um rank- o, em termos de sequncia de tempo ou importncia: (1) dissoluo da cermica50,52,56-59 , (2) a precipitao a partir da soluo para a cermica 50,52,58-60 , (3) de permuta inica e estrutural rearranjo na interface cermicatecido 50,52,58,59, (4) a interdifuso da camada de limite de superfcie para a cermica61, (5) a soluo sobre os efeitos mediados celular activ- dade62,63, (6) a deposio de um ou outro mineral de fase (a) ou da fase orgnica (b), sem integrao no cermico sur-face 56,64; Deposio (7) com a integrao na cermica56; e quimiotaxia (8) para a superfcie da cermica.11

5.520.4. Caractersticas de Cermicas Bioativas e bioactivos compsito de cermica baseados em andaimes para engenharia de tecido sseo-Scaffold
5.520.4.1. Biocermica e vidros bioativos 5.520.4.1.1. Vidros bioativos e cermicas de vidro
Vidros bioactivos (BG) so um grupo de superfcie reactivos vidrocermica biomateriais e incluem o vidro original bioactivo, Bioglass. Ele tem uma excelente biocompatibilidade, assim como a capacidade de se ligar ao osso e de outros tecidos, tal como foi descrita pela primeira vez por Hench no incio de 1970. 47 Ele pode ser sintetizado como convencional de vidro, mas com os componentes de SiO2, Na2O, CaO, P2O5 e. BG possui um efeito estimulante excelente em clulas sseas fun- o.11,49,66,81,82,83 Tem sido demonstrado que a BG crescimento sseo acele-ates significativamente mais do que uma baixa reactividade HA, quando implantados no osso.84,85 Excelente bioatividade desses materiais resultou em sua aplicao bemsucedida como osso substituto de material para no-cargarolamento aplicaes em ortopdica e cirurgia dentria.7,82,86-88 A razo por trs da capacidade de ligao do BG o produto qumico reatividade do BG atravs de reaes interfaciais e mediada por clulas em que as ligaes de silcio so quebradas e um bon rica camada formada na parte superior do vidro que cristaliza para HCA. BGs tambm apoiar bioatividade muitos outros, tais como a atividade enzimtica89,90, Vascularizao91,92; Promovem a adeso dos osteoblastos, crescimento, diferenciao, e induzem a diferenciao das mes-enchymal clulas em osteoblastos. 11,93-96 Bioactividade, no entanto, no uma propriedade exclusiva de BGs. Vrias formas de HA e relacionadas CAP tambm mostram uma excelente condutividade ssea, que fundamental na eliminao de afrouxamento andaime.96 A fim de ter aplicao em engenharia de tecidos, ao longo com a bioactividade, a BG dever ser degradvel e poroso. O BG poroso pode ser preparado por um mtodo semelhante ao poroso Cermica PAC. Yuan et al.97 utilizado um mtodo de H2O2 para se obter uma espuma macroporosa BG com tamanhos de poros variando 100-600 mm. Chen et ai.85 foram capazes de preparar uma BG 86-93% poroso por utilizao de uma matriz de poliuretano que foi imerso em uma pasta de vidro, e o polmero foi queimado para fora, aps o que o andaime foi sinterizado. Kaufmann et al. 98 polietileno usado

5.520.3.2. Adsoro de protenas para o biomineralized Superfcie e ligao seletiva de integrinas

tambm um aspecto importante que a transformada biocermico composio da superfcie e estrutura influencia FN adsoro. No h suporte para a ideia de que o celular melhorada e respostas teciduais cermica bioativos esto relacionadas com maior FN adsoro nas suas superfcies.49,65 NF um dos principais componentes da ECM e tambm secretada pelos osteoblastos. Quando adsorvido biomateriais, FN desempenha um papel crucial na ligao de clulas de osso, proliferao e diferenciao. Tem sido documentado por Garcia et al. 66 que a formao de cermicas bioactivas de uma camada de superfcie do fosfato de clcio, com caractersticas semelhantes s da fase mineral de fosfato de clcio no osso resulta em maior adeso celular mediada por FN, em comparao com o que transpira sobre os materiais de controlo e uma forma reactiva de HA. Este efeito no foi devido a diferenas na fibronectina adsorvida (FN) concentrao, mas surgiram diferenas na conformao FN. Na verdade, a qumica da superfcie de biomaterial foi relatada para modular a estrutura e actividade de FN adsorvida. 67 Estas diferenas na estrutura de FN, por sua vez, influenciar a ligao de integrina, receptores de membrana associadas a adeso que medeiam a

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

glicol (PEG) de glicol-partculas de diferentes tamanhos e totaliza recuperar um substrato poroso BG, aps a sinterizao.81 Verificou-se que as reaces nas superfcies BG pode liberar Si solvel, Ca, P, e os ies de Na, dependendo da via de processamento e do tamanho das partculas, a induo de respostas intracelulares e extracelulares.99.100 Em investigaes recentes, BG 45S5 tambm tem sido demonstrado que o aumento da secreo de crescimento endotelial vascular factor (VEGF) e in vitro para aumentar a vascularizao in vivo, o que fundamental para as grandes construes de engenharia de tecidos.30 5.520.4.1.1.1. Composies e bioactividade Os componentes bsicos da maioria BGs so SiO2, Na2O, CaO, P2O5 e. BG 45S5 contm 45% de SiO2, Na2O 24,5%, 24,4% de CaO e 6% de P2O5, em percentagem em peso. Apesar da utilizao de um modelo de rato e ensaio pouco unsophisticated metodologia, Hench e colaboradores foram capazes de descrever o efeito da composi-cional variao nos sistemas de quatro componentes de vidro, com um peso constante de 6% de teor de P2O5. Eles resumiu estes dados em trabalhos de reviso.101102 Eles dividiram as composies em trs regies de acordo com a sua bioactividade. BGS (e.g. Bioglass, 45S5) Com as composies do sistema SiO2-Na2O-CaO-P2O5, tendo <55% de SiO2, exibem um ndice de bioactividade elevada (na regio A) e ligao a ambos macios e duros tecidos conjuntivos. culos de composies em regio B exibem apenas osteo-condutividade. As composies na regio C so reabsorvidos dentro 10-30 dias no tecido (Figura 1).103 A facilidade de controlo de toda a gama de propriedades qumicas e assim, a taxa de bioresorption faz BGs muito atraente materiais andaime. Alm disso, fazendo variar quer a composio, ou histria de processamento trmico ou do meio ambiente, a estrutura qumica dos vidros pode ser controlada a um nvel molecular. Esta flexibilidade no processo de sntese torna possvel projectar vidros com propriedades de degradao especficos para uma determinada aplicao de engenharia de tecido sseo.104105 No entanto, foi tambm relatado que o nvel de bioactividade diminui com o aumento da cristalinidade do BGs105 e ainda
SiO2

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transformado em material inerte. 106 Esta a principal desvantagem que limita a aplicao de BGs como materiais de andaime, tal como a cristalizao completa acontece antes da densificao por sinterizao107 e sinterizao extensa necessria para densificar as escoras de uma andaime para atingir a estabilidade mecnica necessria.

5.520.4.1.1.2. Propriedades mecnicas Duas propriedades importantes da BG, on libertao em fisiolgico As solues e as reaces subsequentes de bioactividade, so facilitado pela sua estrutura amorfa. 108 Por outro lado, a estrutura amorfa do BG prejudica a resistncia mecnica do material e reduz a sua resistncia fractura, em particular sob uma forma porosa. Resistncia traco da maior parte das composies de BG na gama de 40-60 MPa e no pode ser utilizado isoladamente em situaes de suporte de carga. Tabela 1 elabora a resistncia compresso, mdulo de elasticidade, e alguns valores de tenacidade fractura para densas e porosas cermica bioactiva. 103-117 Pode ser visto que particularmente scaffolds porosos que so essenciais para a engenharia de tecidos exibem muito baixas propriedades mecnicas em comparao de osso cortical e trabecular. No entanto, para algumas aplica-es, baixa resistncia compensada por o baixo mdulo de elasticidade do vidro de 30-35 GPa, que prximo do de osso cortical (7-25 GPa). Recentemente, demonstrou-se que a BG 45S5 pode parcialmente cristalizar quando aquecido a temperaturas elevadas ( >950 ffiC) andaime durante a fabricao e mecanicamente resistente fase cristalinos pode transformar a um fosfato de clcio biodegradvel, amorfo (ACP), temperatura corporal num ambiente biolgico.85.118 Esta transformao permite a prepa-rao de biodegradvel mecanicamente competente BG andaime. Esta descoberta promete ir de alguma forma para a otimizao de andaime e sua aplicao clnica. Alm disso, bioactivos materiais vitrocermicos exibem melhor proprie-dades mecnicas de fazer vidro amorfo e cermicas de fosfato de clcio (Tabela 1). Por esta razo, outros componentes cermicos so por vezes, adicionadas BG para reforo, referido como vitrocermicos compsitos.119120

5.520.4.1.2. Fosfatos de clcio

5.520.4.1.2.1. Composio de clcio e fosfatos bioatividade Devido grande abundncia de Ca10 (PO4) 6 (OH) 2 e HA em ossos, tanto HA e fosfatos de clcio relacionados (PAC) tm sido olhado como o componente principal do material de andaimes para engenharia de tecido sseo. Entre os diferentes tipos de Capcermica materiais so, principalmente, HA, b-TCP, fosfato de clcio bifsico (BCP), ACP, ou CDHA, e eles so classificados como til para o crescimento do tecido sseo. Em virtude da sua qumica e estrutura cristalina prximo semelhana com a fase mineral do osso, o fosfato de clcio exibe excelente biocompatibilidade.121 Fosfatos de clcio possuem propriedades de osteoconduo, no entanto, elas no tm mostrado osteoindutividade.122-124 Muitos in vivo e in vitro demonstraram fosfatos de clcio que, independentemente da forma (A granel, revestimento em p, ou porosas) e de fase (cristalina ou amorfa), sempre suportam a ligao, proliferao e diferenciao. No entanto, a fraca resistncia mecnica deste material limita a sua aplicao em engenharia de tecidos, especialmente carga locais de apoio.

C A

D CaO Na2O Figura 1 Comportamento de BG de diferentes composies. Regio (A) osso, colagem, (B) de encapsulamento de tecido fibroso, (C), dissoluo e (D) nonglass formando. Todas as composies tm uma constante de 6% P2O5 por peso. Reproduzido de Hench, L. L.; Wilson, J. Cincia 1984, 226(4675), 630-636, com permisso.

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Engenharia de Tecidos - Musculoesqueltica, craniana e Maxilofacial

Tabela 1 Cermica

Propriedades mecnicas de HA densa e altamente poroso, 45S5 BG, A / W de vidro cermico, e o osso cortical humano Resistncia compresso fratura Resistncia trao Mdulo de elasticidade Tenacidade Referncias 107112 107108200

HA 45S5 BG

(MPa) >400 $500 1080 2,25 0,21-0,41 130-180 4-12

(MPa) $40 42 215 50-151 -

(GPa) $100 35 118 0,83-1,6 103 12-18 0,1-0,5

(MPa m) $0,1 0,5-1 2,0 6-8 -

Vitrocermica A / W BG 70S30C poroso (82%) HA poroso (82-86%) Osso cortical Osso esponjoso

111 109 110 114201202 106113

Reproduzido de Rezwan, K.; Chen, de Q a Z; Blaker, JJ; Boccaccini, Biomateriais AR 2006, 27 (18), 3413-3431, com permisso.

5.520.4.1.2.2. Propriedades mecnicas Propriedades mecnicas de fosfatos de clcio sintticos so altamente dependentes da sua cristalinidade, tamanho de gro, a porosidade, a composio e. Em geral, as propriedades mecnicas dos fosfatos syn-anestsica clcio diminuir com o aumento da fase amorfa, a microporosidade e tamanho de gro. Alta cristalinidade, baixa porosidade, e resultado pequeno tamanho de gros em alta rigidez, comsive pontos fortes e de trao e tenacidade maior fratura. Em comparao, o osso cortical tem melhor compresso fora de HA e os fosfatos de clcio relacionados, ainda que menos denso do que a maioria tem. Alm disso, o osso tem maior tenacidade fratura do que HA mais densa. As propriedades mecnicas so mais baixos para as estruturas de HA porosas. As nicas estruturas de compsitos, elevada resistncia trao e tenacidade fratura de osso vm da presena de fibras colgenas difceis e flexvel reforado por HA. Assim, os fosfatos de clcio por si s no pode ser usado para suporte de carga andaimes apesar da sua excelente biocomcompatibilidade e osteocondutividade.96

5.520.4.2. Cermica / Polmeros Materiais Compsitos

Hoje em dia, os materiais compsitos de compostos orgnicos e inorgnicos fase so estudadas extensivamente, porque a combinao da degradabilidade costurado e libertao controlada do polmero com a osteocondutividade e libertao retardada / sustentada caracte-rsticas do material cermico pode cumprir os requisitos necessrios de um andaime ideal (Tabela 2).81 Alm disso, propriedades mecnicas dos materiais cermicos podem ser melhorados com a presena de polmero. Cermicas e compsitos cermicos / orgnicos esto resumidos nos pargrafos seguintes. A utilizao deste material para engenharia de tecido sseo, com libertao biomolculas conjunta discutida em vista do anteriormente formulado caractersticas ideais de andaime.

as vantagens de ambos os tipos de materiais e minimiza a sua deficincias. A combinao de polmeros e fases inorgnicas leva a materiais compsitos com melhores propriedades mecni-cas, explorando o bem conhecido mtodo de compsitos, por incorporao de partculas duras na matriz mais macia. 125 Alm disso, como mencionado anteriormente, a adio de fases bioactivas aos polmeros bioabsorvveis podem alterar o comportamento de degradao do polmero, permitindo a troca rpida de protes na fase aquosa por alcali no vidro ou cermica. 18 Enquanto liberao de degradao cida a partir de polmeros pode causar reaces inflamatrias, 126127 este mecanismo proporciona a degradao de base de fosfato de clcio ou BGs que podem tamponar o cido subprodutos de polmeros, contribuindo assim para evitar a for-mao de um ambiente desfavorvel para as clulas devido a baixos valores de pH.20 Desenvolvimento de materiais compsitos tambm atractiva, uma vez as suas propriedades podem ser manipuladas de acordo com as exigncias mecnicas e fisiolgicas do tecido do hospedeiro, atravs do controlo da estrutura da fraco do polmero e volume, e organizar-mento da fase de reforo.94 Recentemente, a incluso de BGs foi mostrado para modificar as propriedades de superfcie e em massa de andaimes compostos, aumentando a hidrofilia e absoro de gua do polmero hidrofbico da matriz,128 alterando assim a cintica de degradao do andaime.129 Alm disso, os com-compactveis so capazes de absorver gua devido s interfaces internas formada entre o polmero e as fases mais hidrfilos bioactivos. Tem sido relatado que os compsitos polimricos cheios com partculas de HA hidrolisados homogeneamente devido gua pen-etrating as regies interfaciais.130 Em geral, a cintica de degradao e reabsoro de scaffolds compsitos so concebidos para permitir que as clulas proliferam e secretam a sua prpria ECM enquanto os andaimes desaparecer gradualmente, deixando espao para a nova clula e crescimento de tecido. O suporte fsico fornecido pelo arcabouo 3D deve ser mantida at a engenharia de tecidos tem sufiintegridade mecnica suficientes para se sustentar.18

5.520.4.2.2. PLA / PGA com base de polmero / cermica compsitos

Os mais frequentemente utilizados polmeros sintticos biodegradveis para andaimes 3D em engenharia de tecidos a famlia dos poli (umHidroxi-ster) s e copolmeros do cido lctico e gli-clica cido. Os membros deste grupo de polmero de sterbackbone so poli (cido lctico) (PLA, PLLA) e PGA, bem como PLGA Copo-lymers e poli (caprolactona) (PCL). O PLA / PGA grupo interessante porque uma ampla gama de propriedades fsicas e tempos de degradao pode ser conseguida variando as propores de monmero em lactido / glicolido copolmeros. A estrutura qumica bsica de todos os materiais de polister aliftico o mesmo e

5.520.4.2.1. compsitos

Estratgia

de

materiais

Incluso de biocermica e vidros em polmeros proporciona a estabilidade mecnica para construes, antes da sntese de nova matriz ssea por clulas, uma vez que estes materiais tm uma maior resistncia mecnica do que o polmero. No entanto, cermica e vidros so caracterizados por falha sensibilidade e fragilidade inerente.81 Isso coloca em desvantagem cermicas como materiais de andaime. Por outro lado, os polmeros so facilmente fabricado de modo a formar formas complexas e estruturas, no entanto, em geral, falta-lhes a bioactividade (como definido acima), e so muito flexveis e fraco para atender a demandas mecnicas na cirurgia e no meio ambiente fisiolgico. Assim, a formao de compsitos capitaliza

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

261

Tabela 2 Andaime

Seleo de andaime compsitos projetados para a engenharia de tecido sseo e suas propriedades Percentual de Modulus (MPa) Porosidade Referncia (%) (mm) (T), resistncia flexo (F) (MPa) 203 204 2-10,5 (vol.) 10-70(empeso) 40-85 (vol.) 75 (em peso) 25 (em peso) 10-50 (vol.) 45 (F) 50-60(F) 22 (F) 51 (F) 7,5-7,7(C) 18-28(B) 50-150(T) 130-180(C) 1,75-2,47 103 6,4-12,8 103 1,1 103 5,18 103 191-134 0,9-5,7 103 12-18 103 205206 207 208 114201202 Tamanho dos poros Compresso (C) de traco,

composto

cermico

Cermico 1. Denso compsitos HA fibra

Polmero

A/W Osso cortical 2. Poroso compsitos CaP amorfo HA

PDLLA PLLA PLGA PLLA-coHPE PPF PE

BG

PLGA PLLA PLGA PLGA PLGA PLLA

28-75(empeso) 50 (em peso) 60-75(empeso) 75 (em peso) 20-50(empeso)

75 85-96 81-91 30-40 43 77-80

PLGA PDLLA

0,1-1(peso) 5-29(peso)

94

>100 100 300 800-1800 110-150 89 $100 (Macro) $10 (Micro) 50-300 $100 (Macro) 10-50 (Micro)

0,39 (C) 0,07-0,22 (C) 0,42 (C) 1,5-3,9(T)

65 10-14 2-7,5 337-1459 51 137-260

133209 25 210 211 212213 22

0,07-0,08

0,65-1,2

212214 215-217

Fosfato de vidro A/W Osso esponjoso

PLA-PDLLA PDLLA

40 (em peso) 20-40(empeso)

93-97 85,5-95,2 98-154 0,017-0,020 (C) 4-12(C) 0,075-0,12 100-500 128218 113

Reproduzido de Rezwan, K.; Chen, de Q a Z; Blaker, JJ; Boccaccini, Biomateriais AR 2006, 27 (18), 3413-3431, com permisso.

a nica diferena os grupos pendentes. A degradao mecanismo uma reaco de hidrlise em que o resduo de cido gliclico se degrada mais rapidamente do que o PLA, enquanto o local de clivagem da PLA estereoquimicamente impedido. A combinao de base de clcio e de cermica-biodegradveis rendimentos capazes polmeros compsitos com propriedades desejveis, tais como degradao controlada, a integrao dos osteoblastos melhorado, e costurados propriedades mecnicas. Esta considerada como uma abordagem vivel para tornar o tecido de andaime para o crescimento sseo. Estes suportes podem ser tanto uma estrutura porosa ou densa usando BG, HA, ACP e BCP como um componente cermico num PLLA, PLGA, ou matriz de PCL. Navarro et al.131 sintetizado a-vidro partculas de cermica / PLA andaime pela mistura homognea da cermica vtrea em uma soluo de PLA e eles usaram H2O-solucionveis partculas de NaCl para criar macroporosidade em cadafalso. Demonstra-se que as propriedades mecnicas do PLA aumentou aps a adio de at 40% de partculas de cermica de vidro, mas a resistncia compresso foi muito baixa. Pelo contrrio, Niemela et al.132 observou-se que quando a BG foi adicionado a uma poli-L, DL-lactido (70/30) de flexo fora / mdulo, bem como a resistncia ao cisalhamento, compresso, toro e diminuiu significativamente. BG

torna a transportadora polmero bioativos, como foi observado por Yao et ai.63133134 Estes autores relataram que a adio de partculas de BG promoveu a diferenciao dos osteoblastos da medula stroclulas mal. No caso de PCL, um compsito poroso produzido por um 3D mtodo de impresso contendo partculas CAP 10/20%, a fora de com-pressivas aumentaram dramaticamente em comparao com PCL puro.135 Os estudos in vivo destes compsitos com humanos embrionrio palatais clulas mesenquimais mostrou um aumento proliferao nos compsitos CAP 20%. Juntamente com as partculas de cermica usuais / matriz polimrica, cermica / outros compsitos polilcticos tambm tm sido formuladas.136137 Por outro lado, materiais compsitos porosos de degradao lenta PCL ou PLLA com partculas cermicas no apresentam dificuldades para a adio de clulas, mas mais rpido que degradam polmeros, tais como baixo peso molecular PLGA ou PLA, pode provocar reaco citotxica, devido produo de produtos de degradao cida. Isto claramente evidente quando as clulas so implantadas, bem como em estudos in vivo, com estes polmeros / compsitos cermicos sem a adio de clulas. Resposta inflamatria forte foi observada por Ignatius et al.1 3 8 aps 24 meses de ovelhas quando

262

Engenharia de Tecidos - Musculoesqueltica, craniana e Maxilofacial

j sintetizados,143-145 especialmente os assim chamados esponjas de gelatina que so preparados por secagem por congelao de uma mistura de fosfato de gelatina / clcio. Muitas vezes, o colagnio / gelatina altamente reticulado para uma melhor estabilidade mecnica, no entanto este pode

compsitos de PLA e um -TCP ou uma cermica de vidro foram implantado. Esta resposta inflamatria foi acompanhada pela uma forte reduo do PLA e resistncia mecnica. A possibilidade de incorporar drogas em cermica-PGA PLA / implantes e usando-os como suportes intrigante. A droga quer incorporada no polmero139 ou absorvida pelo compsito. 140 Gentamicina foi incorporada em fosfato de clcio / mistura de PLA e cintica de libertao apresentaram uma libertao brusca seguida por uma libertao mais lenta sustentada, o que tpico para o PLA.139 No entanto, aps o revestimento de implantes com esses compostos, a libertao brusca foi reduzida e uma libertao sustentada ao longo de um perodo de 10 semanas, foi observado. Os aspectos de factores de crescimento que incorporam no seio desses compsitos 140 so discutido em detalhe no pargrafo cermica. PLA / PGA microesferas podem ser utilizadas para sintetizar PLA / PGA-CaP cimento. Nesse caso, Cap-cimentos so processados em temperatura ambiente, enquanto polmero microesferas so adicionados como porognio formao de poros aps a in vivo / in vitro da degradao , bem como um transportador possvel de factores de crescimento.96 Estes compsitos apresentaram uma pequena sustentada liberao in vitro (5-10%) de rhBMP-2 aps 4 semanas141 no meio. No entanto, no caso de compsitos com baixo e alto peso molecular, as microesferas de PLGA apresentou uma maior eficincia de libertao (25-50%) in vivo.142 A maior libertao foi observado para os compostos de baixo peso molecular de PLGA de microsferas, o que indica que o frmaco nesta formulao exibiu menos interaco com o cimento circundante. A discrepncia entre o in vitro e os resultados in vivo poderia ser devido a um fluxo mais dinmico e a ocorrncia de grandes quantidades de sais e protenas como a albumina, que in vivo influenciado positivamente as propriedades de liberao (Figura 2).96

5.520.4.2.3. base de protenas de polmero / compsitos cermicos

Devido a excelente biocompatibilidade e biolgicos caracters-ticas que so semelhantes ao osso humano, base de protenas polmeros e compsitos cermica-CAP so investigados extensivamente. Exemplos bem conhecidos deste grupo de biopolmeros so colagnio e gelatina. O colagnio tem sido amplamente utilizado para a regenerao de tisquestes, principalmente para o reparo de tecidos moles. Collagen favorece a clula adeso e fornece reconhecimento celular para regular a fixao das clulas e funo. Existem muitos tipos de colagnio e formas que so geralmente obtidas atravs do processamento de tecidos de animais diferentes. A gelatina um material natural derivado de colagnio atravs de hidrlise e tem composio quase idntico ao do colagnio. A gelatina uma forma processada do colagnio que normalmente derivado de pele de porco usando um processo de cido (tipo A) ou de origem bovina, com um processo (curado cal) bsico (tipo B). Ambos gelatina e colagnio sofrem degradao enzimtica, que ocorre no corpo atravs de enzimas, tais como colagenases, gelatinase, e as metaloproteinases, para originar os correspondentes aminocidos. As taxas de degradao, podem ser alterados por reticulao qumica das protenas. Uma combinao destes biopolmeros e cermica pode produzir um andaime composta com taxas de degradao sob medida, e tem a biolgica e mecnica / fsica adequadalaos de ambos os materiais. Porosas de gelatina / colgeno andaimes com partculas de cermica

Figura 2 PLGA microesfera / cimento CaP compsitos; close-up PLGA microesferas dentro cimento andaime (ampliao acima, original 300), 20% de microesferas de PLGA / CaP cimento andaime aps 12 semanas in vitro degradao (a seguir, ampliao original 50). Reproduzido de Rezwan, K.; Chen, de Q a Z; Blaker, JJ; Boccaccini, AR Biomateriais 2006, 27(18), 3413-3431, com permisso.

tambm diminuir a biocompatibilidade, uma vez que agentes de ligao cruzada como glutaraldedo pode produzir uma reao citotxica. 146 Para evitar este inconveniente, Shibata et ai.144 preparada uma coloidal b-TCP / composta de colgeno, que no necessita de qualquer tratamento adicional. Colagnio do tipo I foi tambm utilizado como uma matriz para CaP mineraliza-o para se obter um composto de colagnio / CaP.147 Neste estudo, as propriedades do colagnio biomimticos foram exploradas e compsitos CAP 60-70% foram produzidos com uma resistncia traco elevada. Em outro estudo, um 10% de gelatina composto foi formado embebendo uma cermica macroporosas HA em que a gelatina penetraram a massa do material cermico.148 A fim de assegurar a biocompatibilidade, baixa concentrao de agente de reticulao foi usado para retardar a difuso de gelatina fora do andaime. PAC partcula / biopolmero compostos no tm sido amplamente investigada a libertao de factores de crescimento; at mesmo as propriedades de libertao de gelatina, em especial, bem investigada e depende de uma interaco electrosttica entre um positivamente / gelatina de carga negativa e uma droga de carga oposta.149 Takahashi et al.145 sintetizadas as esponjas de gelatina por qumica cruzada ligao da gelatina na presena de diferentes quantidades de b-TCP em grnulos. Protena morfogentica do osso-2 (BMP-2), foi carregado por simplesmente soltando uma soluo do factor de crescimento para congelar-secos esponjas. Estudo in vivo de libertao de BMP-2 marcado com 125I a partir destes compostos revelou uma elevada libertao inicial seguido de uma libertao mais sustentada. Para todos os tipos de compo-sites, a evidncia da formao do osso foi observada, mas quantidades elevadas de bTCP em grnulos feitos a esponja colapso durante a degradao, levando a estruturas mais densas e menos osso

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

formao. Kim et al.143 sintetizado a gentamicina-carregado Esponja composto HA-particle/gelatin e investigou o aprisionamento da droga in vitro e de libertao como uma funo da densidade de reticulao do montante, a gelatina de HA na esponja, e carga de frmaco. Eles encontraram que o aumento da reticulao den-sidade leva a uma maior reteno de drogas, diminuindo a libertao de frmaco inicial, e um padro de libertao mais sustentada. Um aumento da percentagem de partculas de HA diminuiu a percentagem de reteno da droga, embora aqui libertao tambm mais sustentada. Porque neste estudo nenhuma enzima degradante de gelatina foi adicionada, a degradao e libertao devido degradao do agente de reticulao utilizado (1-etil-(3,3-dimetilaminopropil-carbo diimida cloridrato), EDC). Um andaime de colgeno com nanopartculas de HA e rhBMP2 foi estudada in vivo e uma influncia positiva do frmaco adicionado foi observada num modelo de implante carregada em ces.150151 Compsitos de colagnio / gelatina com fosfato de clcio Os cimentos so formuladas para se obter melhores propriedades de manuseamento e para melhorar a resposta biolgica. Uma srie de estudos tm sido feitos sobre a resposta biolgica, bem como sobre as propriedades do cimento de fosfato de clcio e gelatina ( um-TCP) compo-sites.152-154 Uma acelerao da reaco de presa do cimento, bem como um aumento da fora de compresso, devido densidade elevada da gelatina foi observada. Para alm disso, uma excelente resposta biolgica foi observada com um aumento de acti-vidade de osteoblastos e de diferenciao. Fujishiro et al.155 preparado um material poroso composto de um 5% e 20%, contendo gelatina um-TCP com base em cimento. Poros de 20-100 mm foram preparadas atravs da mistura de um gel de gelatina com umP de TCP. Os resultados mostraram um aumento na mec-nicas propriedades ao longo do tempo com os compostos de 5%, quando comparado com o cimento original, embora com gelatina a 20%, a fora de compres-sivo foi menor. As habilidades biomimticos de gelatina que funciona como um ponto de nucleao de CaP cristal de crescimento esto por trs da boa resposta biolgica e aumento da resistncia mecnica destes compsitos. 156 Rammelt et al.157 investigou os laos adequada de colgeno / CAP-cimento de compsitos. Eles acrescentaram 3% de colgeno I cimento nanocristalino HA que levou a uma remodelao ssea em defeitos tbia de rato. Outro grupo de pesquisa 158 adicionado colagnio 1,02,5% I para um cimento comercial e apatite tambm observadas alteraes fsicas e mecnicas do cimento, especialmente quando a osteocalcina foi adicionado. O comportamento dos osteoblastos cultivados no mesmo 2,5% de colagnio contendo cimento foi investigada.159 Eles observaram que as alteraes no microambiente local, como o pH fortemente influenciada clula diferenciao e proliferao sobre estes compostos. Lode et al. investigada a libertao de VEGF a partir de um colagnio cimento contendo apatita e comparou-a com a liberao pat-tern e VEGF atividade do cimento normal.160 Tanto a liberao acumulada (25%) ea liberao de exploso foram maiores do os compsitos de cimento de colagnio, o que indica um perdedor ligao do VEGF para o colagnio. Alm disso, foi analisada a proliferao de clulas endoteliais aps exp-los para o meio de libertao diluda. Eles descobriram que a introduo de phospherine e citrato de sdio com o colagnio que contm cimento tem um impacto positivo sobre a actividade do VEGF. Alm da gelatina e do colagnio, com a base de protena de polimers foram exploradas para fazer material composto com CAPcermica e cimentos. Fibrina e, especialmente, a cola de fibrina foi aplicado para a introduo de partculas de cermica 161162 ou misturados com cimento de fosfato de clcio.163

263

Foram realizados estudos de alumina e introduzindo TCP-partculas em um casena e soja protena andaime, 164 e polipeptdeos em CaP-cimento.165 Mais uma vez, as razes principais para a utilizao destas protenas foram biodegradabilidade, biomimtica propdades, e reforo mecnico.

5.520.5. Modificaes de Cermica bioativos e Bioactivos compsito de cermica baseados em andaimes

5.520.5.1. Entrega localizada de biomolculas e clulas
A funo adicional dos suportes o de permitir um controlo libertao de molculas como um transportador no local do tratamento para uma durao suficiente para ajudar a eficcia teraputica dos culs toupeira-lanado. O andaime como um material de suporte em engenharia de tecidos devem ser biocompatveis e no deve interferir fisicamente com os processos normais da osteognese ou provocar qualquer resposta inflamatria ou imunognica no corpo. Uma transportadora biomaterial ideal deve manter a actividade das molculas e tambm para permitir a infiltrao celular inicial e posterior integrao com o tecido nativo. BMP-2, factor de crescimento transformante- b (TGF-b), Bsicos fibrofactor de crescimento de exploso (bFGF), e factores de crescimento VEGF so comuns, mas vital que so introduzidos nos suportes devido as suas propriedades osteoindutoras e vascularizao.166-168 BMP entrega para sites localizados tem sido explorada para reparao de defeitos sseos e pseudartroses em diversos modelos experimentais. 169182 Muitos sistemas de distribuio tm sido exploradas, como matriz ssea desmineralizada, compsitos de colagnio, a fibrina, o fosfato de clcio, polilactida, poli (lactido-co-glicolido), polilactido-PEG, HA, gesso dental, e titnio.183-188 Vale ressaltar aqui que nenhum desses materiais atender a todas as exigncias para um sistema de entrega ideal. Cermica como HA so conhecidos pela sua interaco positiva com BMPs, devido afinidade de ligao forte com os fatores de crescimento / protenas. Devido a este fenmeno, elevadas quantidades destes factores de crescimento so adicionados em estudos in vivo, para garantir uma resposta positiva do tecido, o que resulta num aumento do nvel de BMPs em comparao com os valores clnicos relevantes no interior do corpo humano e aumenta o custo de um nico implante subsubstancialmente, portanto, diminuindo a possvel utilizao do material. Tem sido observado por muitos pesquisadores que incorincorporao de BMP em HA, 178187 HA / colgeno, 169 e HA / TCP compsitos 189190 acelera consideravelmente a formao de osso. No entanto, esses sistemas apresentam um alto grau de resistncia mecnica e bioresorption pobre, o que limita a aplicao eficaz desses substitutos sseos sintticos. Alm disso, aguda reaces inflamatrias e imunolgicas so observados com o composto de colgeno, quando cermica de fosfato de clcio foram usados como suportes para os factores osteoindutores. 191192 Alam e colegas impregnados diferentes doses de humano recombinante (rh) BMP-2 em BCP cermico com diferentes propores de HA a um (TCP HA / TCP ratios: 100/0 (puro HA, 75/25, 50/50, 25/75, e 0/100 (TCP puro)).193 As amostras foram implantados sob a pericrnio em ratos machos adultos Wistar foram colhidas e 8 semanas aps a implantao. A extenso da formao ssea e osso mar de linha e o grau de reabsoro da cermica partculas foram significativamente maiores nas amostras compostas de 25% de HA e TCP 75%. 193 O aumento na bioac tividade do 25HA/75TCP composto corresponde muito bem

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Engenharia de Tecidos - Musculoesqueltica, craniana e Maxilofacial

para entregar as clulas e molculas tem feito progressos notveis para abordar estas questes clnicas. Existem numerosos sistemas compsitos que compreendem polmeros sintticos biodegradveis e biofases ativas, como HA e BGs. Excelentes propriedades mecnicas e Osteocondutividade altamente porosa de polmero / cermico compsito andaime tornar um substrato promissor para a engenharia de tecidos. Biodegraduveis polmero andaime podem proporcionar um certo nmero de benefcios para a engenharia de tecidos de osso; ambiente melhorado para a sementeira de clulas, a sobrevivncia, crescimento e diferenciao de funo por causa da funo osteocondutor transmitida por HA, o que aumenta as propriedades mecnicas que so essenciais para a carga do rolamento. Alta porosidade tambm aumenta as taxas de reabsoro, no entanto, que pode diminuir as propriedades mecnicas. Um desafio a Brit tleness da cermica, o que faz com que o implante de carga aplicaes de rolamentos complexos. Cimentos CAP / cermica pode ser aplicado como transportadora promissor materiais para medicamentos em que os padres de libertao e eficincias dependem fortemente do tipo de cimento / cermico usado. Em geral, a cermica sofre de lanamento exploso inicial em comparao com cimentos que tm um padro de liberao mais sustentada. Alm disso, BG preparados por sol-gel pode ser utilizado como transportador para drogas. O polmero totalmente sinttico biodegradvel / inorgnicos biocompsitos fase ativa avaliao aqui so particularmente atractiva como engenharia de tecidos andaimes devido flexibilidade na adaptao de propriedades estruturais, o comportamento bioativo e biodeg-radation cintica. A partir da perspectiva da cincia dos materiais, o desafio presente na engenharia de tecidos projetar e fabricado reproduzveis bioativos e reabsorvvel andaimes 3D de adaptados estrutura porosidade e poros, que so capazes de manu-teno sua estrutura e integridade para os tempos previsveis, mesmo sob carga de rolamento condies. Resistncia compresso pobres e atividade biolgica dos polmeros adicionados muitas vezes minam as vantagens de compsitos de polmero / cermica. Para reforar a coeso e as propriedades in vivo de injeco do cimento, os biopolmeros, como quitosano, gelatina, colagnio e so frequentemente adicionados ao cimento de fosfato de clcio. Ocasioaliado, o objectivo reforar o cimento, o que um resultado da microestrutura compacta que formado aps a mistura, tanto inorgnicos e materiais orgnicos. A taxa de degradao e a porosidade de cimento tambm pode ser alterada com a adio de polmero de microsferas / partculas que degradam in vivo, tal como foi observado com as microesferas de PLGA. Alm disso, a microesfera PLGA e de colagnio contendo cimentos tm mostrado ser promissoras materiais para a liberao de drogas / arrastamento. Partculas cermicas podem tambm ser adicionados a um transportador polimrico para melhorar as propriedades mecnicas e de incorporar as caractersticas nanotopographic que imitam a nanoestrutura de osso natural. Em geral, os andaimes constituda por uma cermica em um poliltico protena transportadora, ou carboidrato, mostram taxas mais elevadas de degradao do que fazer cermica pura. Alm disso, alterando os parmetros de sntese, tais como peso molecular ou densidade de reticulao do polmero, a taxa de degradao pode ser controlada. A resistncia compresso de 100% de cermica com-compactveis muito mais elevado do que essas andaimes, mas a adio do polmero reduz a fragilidade do material cermico e torna aplicvel para fins de engenharia de tecidos. Em geral, os padres de liberao de drogas carregado polmero base de protenas / andaimes de cermica mostram uma liberao exploso inicial. Este problema pode ser reduzido pela adio de quantidades maiores de

com a elevada quantidade de pr-adsorvido rhBMP-2 no-mate rial superfcie. Existe uma possibilidade de que a elevada taxa de dissoluo-o do composto rico em TCP fornece espao vazio para crescer osso novo. A partir deste estudo, no possvel concluir se a adsoro melhorada-rhBMP-2 foi devida s variaes na composio qumica ou as variaes da rea da superfcie do substrato, j que no h quantificao da rea de superfcie e porosidade o material. Colgeno tipo IV tambm foi explorada para efetivamente adsorver BMP para o cermico.173 Eles enxertado cilindros carregados com TCP parcialmente purificada ovelhas BMP e colagnio do tipo IV nos defeitos da difise da tbia segmentados de ovelhas. 173 demonstrado que o TCP carregado com uma dose elevada (100 mg) de BMP parcialmente purificada tem uma capacidade superior para a cura segmentar defeitos sseos. Baseado em slica xerogel vidro poroso tambm foi explorada para o entrega de factor de crescimento como o TGF-b1 in vitro.194 Mostra-se que a libertao de TGF-b1 pode ser facilitada atravs da modificao do propriedades de andaime, tais como o grau de secagem e da rea de superfcie.194 O mesmo grupo de pesquisa avaliou os compsitos de xerogel de slica para a libertao de BMP-2 in vitro.192 Eles descobriram que quando as clulas estromais de medula de rato foram semeados sobre a superfcie de discos de xerogel com rhBMP-2, incorporada no vidro, adsorvido na superfcie do vidro, ou adicionado ao meio de cultura,195 diferenciao celular foi mais aumentado quando a BMP-2 foi incorporado, ou adsorvido sobre o vidro xerogel. 195 Estudos recentes relatados em um romance reabsorvvel bioativo ciclo de silicato (Slica-clcio nanocompsito fosfato, SCPC) nanocom compsito como um potencial tecido-engenharia andaime para as clulas e entrega de molcula biolgica. 196197 Quando o material SCPC foi carregado com rhBMP-2, fornecido um perfil de liberao de excelente biologicamente activo rhBMP-2 comparado com HA poroso de cermica (HA-200). Alm disso, as clulas da medula ssea anexado ao SCPC-rhBMP-2 hbrido produzido mineralizado ECM e de ossos como o tecido que cobria a superfcie do material e preenchido os poros ao longo de toda a espessura do molde depois de 3 semanas em cultura. Por outro lado, as clulas associadas HA-rhBMP-2 produziu uma quantidade limitado de unmineralized ECM aps o mesmo perodo de tempo. A partir dos resultados destes estudos, pode-se concluir que os materiais base de slica tm um potencial muito elevado para ser usado como um andaime para entrega BMP. Biocermica determinados, tais como BG, que tm de osso especfico afinidade, podem afectar o comportamento das clulas atravs da regulao da expresso das BMPs.173 Hibridizaes do Norte demonstraram tendncias semelhantes nos nveis de ARNm de colagnio do tipo I, fosfatase alcalina (ALP), e BMP-2 em Saos2cells crescido sobre os pratos e utenslios. No entanto, os nveis relativos de mRNAs, BMP-2, I colagnio e FA em clulas cultivadas em placas de BG foram 9 -, 6 -, e 1,2 vezes maior do que aquela em pratos de BG, respectivamente. No entanto, no presente estudo, os BGs preparadas no foram caracterizados, e difcil entender por que havia diferenas na actividade Cellu-lar de clulas cultivadas em placas de contra pratos quando ambos so feitos de BG.198

5.520.6.

Direes concluso e Futuro

O tratamento para reconstruir e reparar a perda ssea devido grande leso ou doena um dos principais problemas na cirurgia ortopdica e maxilofacial. O desenvolvimento de novos suportes

Cermica bioativos e bioativos compsito de cermica Baseados andaimes

partculas de cermica para os compsitos ou atravs do aumento dacruz ligao de polmero, o que pode proporcionar uma mais constante liberao de drogas / fatores de crescimento. A possibilidade de fatores de crescimento incorporando em compolocais formadas com o objectivo de acelerar a cura de osso local e vascularizao promissor e j comeou a ser explorado. Induzir o crescimento interno vascular rpida durante o desenvolvimento do tecido vai continuar a ser de grande importncia para a engenharia de tecidos. A incorporao de biomolculas durante andaime de processamento, no entanto, no simples, uma vez que no permite que as faixas de temperatura extremas (470 ffiC) ou condies qumicas extremamente agressivos durante o processamento, o que representa um desafio para o processo de fabricao de andaime. A imobilizao de protenas e factores de crescimento por meio da funcionalizao da superfcie do andaime pode ser uma estratgia promissora. Com mtodos como a adsoro de protenas ou de tratamento de plasma, h uma ampla margem na aplicao de modificao da superfcie para fornecer mais pistas para a fixao das clulas e resposta a, tornando assim o andaime mais biocompatvel. Adsoro de pro-tenas tais como FN e o colagnio deve provocar melhorias na molhabilidade de polmeros altamente hidrofbicos tais como o poli-DL-lctico (PDLLA). Pesquisas adicionais devem focar-standing sob clula materiais interaces a nvel da biologia molecular, em conjunto com a concepo de uma nova gerao de materiais bioactivos que activam a proliferao e diferenciao das clulas para aumentar a rpida formao de ECM e o crescimento de tecido in situ. Desenvolvimento bem sucedido de tecido pode ser alcanada atravs de modificaes qumicas, incluindo a incorporao de grupos funcionais, os factores quimiotticos, protena da matriz, ou pptidos. As propriedades nicas dos nanomateriais podem ser exploradas para melhorar as propriedades do andaime para engenharia de tecidos. Por exemplo, o uso de nanopartculas de cermica e nanotubos de carbono (CNT) tambm podem melhorar o ambiente para melhorar a fixao e proliferao celular, bem como adicionar funes de tionalities extras para o cadafalso de base, no entanto, questes crticas como a toxicidade associada com nanopartculas e nanotubos de carbono deve ser tambm enviada previamente. A nanotecnologia pode fornecer uma forma alter-nativa de processamento biocermica com fora meca-iCal alta e bioatividade melhorada e resorbability. Os tamanhos de gros nanmetros e fraco de superfcie elevada de limites de gro na nanoceramics funes de aumento de osteoblastos (por exemplo, adeso, diferenciao, proliferao e). A diminuio dos resultados de gros de tamanho em um aumento significativo nos contornos de gro, que modifica as caractersticas fsico-qumicas em geral e, em particular, aquelas relacionadas com a superfcie. Alm disso, as propriedades importantes, como a dissoluo e protena adsoroo, que so dependentes da composio qumica da superfcie, da energia e da rugosidade, podem ser optimizados para aumentar a adeso celular, proliferao, diferenciao e. Outros sistemas compostos de inte-resse so aquelas que combinam nanoestruturados fases inorgnicas (por exemplo, nanopartculas e nanofibras) e polmeros biodegradveis, recentemente discutidos nesta srie,109 , a fim de influenciar a resposta das clulas em contacto com o andaime imitando a superfcie nanotopografia de tecidos vivos. Existe uma falta de entendimento corrente na literatura sobre a longo prazo para a caracterizao in vitro dos componen-stios discutido aqui, especificamente, sobre o efeito a longo prazo da incorporao de fases inorgnicas bioactivos na degradao e cintica

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de libertao de ies destes sistemas altamente porosos. A este respeito, o desenvolvimento de apropriada

juntamente com tcnicas de caracterizao analtica preditiva modelos uma avenida importante da pesquisa, a fim de comprehensively avaliar a degradao desses sistemas com relao estrutura de poros, andaimes, geometria, fluxo de fluido, e da influncia das adies bioativos. Aqui, o uso de raios X de tomografia micro-como uma ferramenta fivel para a quantificao estrutura de poros 3D parmetros tende a ganhar importncia crescente.110 Alm disso, as propriedades de interfaces entre o polimer matriz e incluses inorgnicas tm de ser mais investigado em e caracterizados, uma vez que possuem propriedades interfaciais uma enorme influncia sobre a cintica de degradao, a concentrao de ons, e perfis de libertao, bem como os compostos eficazes meca-ical propriedades. O uso de mecanismos celulares melhorados de semeadura e biorreactores de perfuso deve permitir melhorado otimizao-o dos suportes, especialmente no que diz respeito influncia da concentrao de ies e cintica de libertao da resposta celular. Alm disso, a melhoria celulares modelos de avaliao de biologia so re-lacionados a entender melhor a influncia da mdia composio e volume, o que pode influenciar significativamente a liberao de ons cintica e da resposta celular. Em concluso, pode-se dizer que a cermica tm sido amplamente utilizado na engenharia biomdica e osso substituio / campo de regenerao, se compreende um 100% cermico compsito, uma composio de polmero com partculas de cermica, ou adi-o de aditivos polimricos / porognios para o fosfato de clcio. Mas ainda assim, melhorias significativas na concepo e estrutura de cermica porosos bioactivos so necessrios para superar inconvenientes importantes, tais como a sua actividade osteoclstica imprevisvel e degradao / taxas de dissoluo, bem como para facilitar controlada reabsoro material de enxerto e regenerao de tecidos.99

Referncias
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