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Introduccin
La calidad microbiolgica de las materias primas utilizadas en el proceso de fermentacin causado por los microorganismos presentes en ellas entre otros, bacterias mesfilas, aerobias, bacterias cido lcticas y cido acticas y levaduras salvajes es quiz el factor ms importante para el desempeo, estabilidad, eficiencia y los costos asociados de transformacin. Desde el inicio de la operacin de la destilera de alcohol en el ao 2005 se evidenci un material extrao presente en las materias primas, principalmente en la Miel B, que posteriormente se denomin con el nombre genrico de lodos. En enero de 2006 se inici una investigacin cuyo objetivo fue determinar qu tipo de material contenan principalmente los lodos y cmo afectaban la fermentacin.
1. Antecedentes
Los lodos ingresan a la fbrica con la caa, posteriormente forman parte de los jugos y pasan por todo el proceso de elaboracin de azcar. Su concentracin aumenta a medida que se extrae la sacarosa y se concentran los jugos, y alcanza valores hasta de 7,5% p/p medido en Miel B. Despus de la identificacin de los lodos en la Miel B, la fbrica de azcar inici un fuerte trabajo en la seccin de clarificacin para buscar disminuir este material en las materias primas que enviaba a Destilera. Como resultado de este esfuerzo, se modernizaron dos clarificadores dando como resultado la disminucin de los lodos de 7,5% a un promedio de 2,5% p/p a partir del 2009 con algunos datos puntuales superiores a 4% p/p. Por otro lado, en la seccin de Destilera, se llev a cabo una investigacin con el objetivo de demostrar que este material de lodos y la materia prima eran la principal causa de contaminacin microbiolgica del sistema fermentativo.
2. Justificacin
Los lodos contenidos en la Miel B son un mecanismo que asla y protege la flora microbiana. Este sistema de proteccin se evidencia en la etapa previa a la fermentacin, en la cual el lodo asla trmicamente las bacterias y las protege as de las altas temperaturas (120 C) que se alcanzan en el proceso de pasteurizacin.
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Una situacin anloga se presenta en el tanque de propagacin celular, el cual adems de las condiciones ideales antes mencionadas utiliza aire, que intensifica aun ms el efecto multiplicador de los diferentes microorganismos que afectan la fermentacin. Este efecto Cuando los lodos llegan a los es exponencial, pues a los 20 minufermentadores los microbios pretos alcanza una poblacin que slo sentes en ellos encuentran un medio logra la levadura a las 3 horas, lo cual ptimo para su desarrollo: condiciodificulta enormemente la operacin nes ideales de pH, de temperatura y de produccin Acido Lctico por Lactobacillus Pentosus estable del sistema fermentativo. deCurva macro y micronutrientes, as como En la Grfica 1 se presenta la cinun contenido ideal de azcares. Este 5000 4500 tica de produccin de cido actico medio de cultivo se convierte en un 4000 de la especie Gluconobacter sp y multiplicador de la carga contami3500 se observa que en slo diez horas nante3000 que en cuestin de minutos 2500 alcanza 3753 ppm e inhibe el desse reproduce y alcanza poblaciones 2000 empeo de la levadura propia del superiores a las poblaciones de 1500 proceso. En la Grfica 2 se muestra la levadura propia del proceso o 1000 500 la produccin de cido lctico por la alcoholera, y finalmente colonizan 0 Lactobacillus pentosus, que el sistema. que 0 Es 2 tal 4 su 6 impacto 8 10 12 14 se 16 18 especie 20 22 24 en 24 horas alcanza 4550 ppm. Estos puede observar el incremento de la Tiempo (h)
(ppm)
Con el objetivo de cuantificar la contaminacin microbiolgica presente en los lodos de las materias primas se decidi realizar un estricto seguimiento de carcter microbiolgico a este material y hacer los recuentos de: (a) bacterias mesfilas aerobias, (b) bacterias cido lcticas, (c) levadura salvaje, (d) mohos, (e) coliformes totales. En este estudio se hallaron mayores recuentos de Unidades Formadoras de Colonia (UFC/g) dentro de los lodos que en las materias primas sin la previa extraccin de los lodos.
concentracin del cido lctico en los fermentadores en slo un par de horas despus de ingresar la materia prima con lodos, y se corrobora dos das despus cuando se obtienen los resultados de los recuentos en placa de la contaminacin en los fermentadores.
valores superan las concentraciones tolerables para los dos metabolitos. Se ha encontrado en la destilera que la levadura Saccharomyces cerevisiae tolera slo hasta 2500 ppm de cido lctico y actico. Como se dijo, las materias primas contienen microorganismos tales como bacterias cido lcticas (BAL), cido acticas (BAA), y numerosas levaduras salvajes (LS), tambin conocidas como levaduras nativas o silvestres, que se caracterizan por tener baja capacidad de producir alcohol; sin embargo, facilitan la formacin de espuma sobre la parte superior de los fermentadores y generan grandes cantidades de subproductos, que a su vez inhiben el desempeo de la levadura propia del proceso. Por su parte, las bacterias utilizan las fuentes de azcares, incluso el etanol presente en el medio, y los transforman en cido lctico o en cido actico, segn sea el caso. Con la inhibicin de la levadura alcoholera se afecta su capacidad productora de etanol y disminuye la eficiencia del proceso fermentativo. Para el ao 2007 el principal contaminante del sistema fermentativo
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Acidez voltil (ppm)
Tiemo (horas)
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eran las levaduras salvajes, cuya consecuencia sobre la fermentacin fueron tiempos cortos de operacin (slo 18 das), con la subsecuente renovacin del sistema e incrementos en la generacin de vinaza y en el consumo de productos qumicos como antiespumantes.
salen de la seccin de fermentacin. En la Grfica 15 se muestra la acumulacin de los lodos en las tuberas, y la Grfica 16, su colmatacin en los platos de la columna mostera. En las Grficas 5, 6 y 7 se puede ver la carga microbiana aislada de los lodos presentes en la Miel B. Una vez la materia prima alimenta el proceso de fermentacin, los lodos contaminan todo el sistema e igualmente el tanque de reproduccin celular.
4. Primeros trabajos
Como primera medida de control para disminuir la carga contaminante presente en las materias primas, desde el 15 de septiembre de 2007 se aplic vapor vivo (150 Psig) sobre ellas, hasta alcanzar una temperatura de 120 C. Para ello se inyect vapor directamente a la corriente de materia prima previamente diluida de 78% Brix a 51% Brix. El resultado fue una disminucin sustancial en los valores de contaminacin. Sin embargo, debido a la proteccin que brindan los lodos a los microorganismos, estos lograron resistir la alta temperatura y los recuentos microbiolgicos continuaron altos: Contenido de bacterias viables: 40 x 103 UFC/ml
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Contenido de levaduras salvajes: 13 x 103 UFC/ml Contenido de bacterias cido lcticas: 55 x 103 UFC/ml
Con el ingreso en operacin de la etapa de pasteurizacin se logr disminuir el impacto de la produccin excesiva de espuma en los fermentadores causado por la levadura salvaje. El beneficio econmico de esta medida se refleja en la reduccin del consumo de antiespumantes, como se observa en la Grfica 8. Despus de analizar los resultados obtenidos, la primera conclusin fue que para alcanzar una reduccin significativa de la calidad microbiolgica de las materias primas, adems de calentarlas hasta 120 C, era necesario previamente disminuir la concentracin de lodos presentes en ella para maximizar el efecto del vapor y obtener una adecuada pasteurizacin al alcanzar una temperatura ms homognea. En la Grfica 9 se muestra un medio de fermentacin en el cual se puede observar claramente cmo los diferentes tipos de contaminacin (Bacterias BAA y BAL) colonizaron el sistema, encapsularon la levadura y con la muerte celular impidieron la fermentacin. Posterior al ao 2007, cuando el problema de la levadura salvaje se encontraba bajo control, en la fermentacin se agudiz la contaminacin con bacterias cido lcticas (BAL). Adicional a las altas poblaciones de bacterias cido lcticas en las materias primas y como consecuencia de ellas (8480 ppm en la Miel B el 24 de julio de 2008), en la seccin de fermentacin se alcanzaron valores de cido lctico superiores a 10.000
ppm. Estas altas concentraciones de sustancias inhibitorias afectan el desempeo de la levadura e influyen en la produccin continua de etanol. Para citar un ejemplo, los ltimos das de julio de 2008 fue necesario disminuir el balance de produccin de alcohol y la recirculacin de la vinaza. A pesar de las medidas de control, se present una alta concentracin
de cido lctico (>10100 ppm) y fue necesario renovar nuevamente el tren de fermentacin. En agosto del mismo ao se registraron valores superiores a 11500 ppm en el tercer fermentador. Las bacterias cido lcticas se convirtieron en el principal contaminante del sistema fermentativo por su alta capacidad de inhibir los proce-
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sos de reproduccin y fermentacin de la levadura. En agosto de 2008 los recuentos de contaminacin del sistema fermentativo alcanzaron los siguientes valores: Tanque de activacin de Levadura (R-305) 90,0 x 10 6 UFC/ ml: 11 Agosto 2008 Primer fermentador (R-311) 42,0 x 108 UFC/ml: 19 Agosto 2008 Segundo fermentador (R-312) 26,0 x 107 UFC/ml: 11 Agosto 2008 Tercer fermentador (R-313) 30,0 x 108 UFC/ml: 15 Agosto 2008 Tanque de sedimentacin de levadura (S-331): 14,0 x 108 UFC/ ml: 20 Agosto 2008
lodos contenidos en la materia prima y el nivel de cido lctico de la misma, la planta slo funcion por ocho das. En tan corto periodo de operacin ingresaron a la destilera 288,5 Ton de lodo, que saturaron el sistema y afectaron la transferencia de nutrientes entre el medio y la levadura, con lo cual se incrementaron los factores de estrs y consecuentemente disminuy la viabilidad y la capacidad de fermentacin de la levadura. Como consecuencia de ello se determin liquidar la planta de alcohol, que slo funcion esos pocos das (Grfica 11). Para conocer la cantidad de bacterias y levaduras nativas que
ingresaron al sistema, se analizaron muestras de materia prima y de los lodos presentes en la misma corriente y se comprob que las poblaciones de bacterias cido lcticas fueron considerablemente altas: hasta dos exponentes ms en comparacin con la contaminacin en las materias primas sin la extraccin de los lodos. El recuento de estos microorganismos especficos en las materias primas en enero de 2009 fue: Bacterias mesfilas aerobias: 16 X 103 UFC/g Mohos y levaduras: 44 X 102 UFC/g Bacterias cido lcticas: 16 X 103 UFC/g
Despus de 2008 y hasta el presente con las etapas adicionales, como la pasteurizacin de las mieles, se logr estabilizar el proceso de fermentacin con menores niveles de contaminacin. Sin embargo, como se explicar adelante, estos valores de contaminacin continan siendo altos, pero se espera disminuirlos drsticamente al poner en marcha el sistema de separacin de lodos. En la Tabla 1 se presentan los valores actuales del sistema fermentativo.
Recuento (UFC/ml) lti mo Fermentador Tanque de Sedimentacin (R-314) (S-331) BAL BAA 63 x 10
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Miel B
Slidos Miel B
Grfica 10. Comportamiento del porcentaje de Lodos y el cido lctico en la Miel B en enero de 2009.
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En la Grfica 10 se presenta el comportamiento de la concentracin del cido lctico en la Miel B y el contenido de lodos, principales variables que afectaron el sistema fermentativo y responsables de su desestabilizacin y posterior liquidacin. La contaminacin bacteriana alcanz valores de 12x108 y 13x107 UFC/ml en el segundo (R-312) y tercer fermentador (R-313), respectivamente. El resultado final de la utilizacin de los azcares por parte de los microorganismos presentes en los lodos es el incremento exponencial en la concentracin de cido lctico, como se muestra en la Grfica 11. En la Grfica 12 se muestra la disminucin de la produccin por liquidacin de la planta. Despus del arranque, el 17 de enero de 2009, se
observa la continuidad de la produccin con valores superiores a 250 m3/ da. Al comparar el grfico de produccin con el grfico porcentaje slidos Miel B vs cido lctico Miel B (ppm), se puede concluir que la Destilera puede operar de forma continua y estable cuando el cido lctico en la Miel B se encuentra en valores de 1800 ppm, y con contenido de lodos inferiores a 1%. La eficiencia global de la planta tambin se afect por el alto contenido de lodos, puesto que, como se vio, se tuvo que liquidar el sistema de fermentacin y posteriormente renovarlo. Para este caso en particular, en los primeros das de enero, desde el arranque del sistema hasta el da 18 de enero de 2009, la eficiencia global de la planta fue 84,362%, en tanto en 2011 es 89,427%.
Despus de la liquidacin y posterior arranque de la destilera la materia prima ingres al sistema con menor contenido de lodos (promedio 1.094% p/p), con lo cual se logr estabilizar la fermentacin, la produccin fue continua (un promedio de 260,439 litros/da de etanol anhidro) y la eficiencia global de produccin al final del mes se increment a 86,508%
6. Sistema instalado
Con los trabajos realizados desde 2006 hasta 2010 se mejor la estabilidad de la operacin y consecuentemente la produccin de la planta. La estabilidad se reflej en el incremento de los das de operacin continua. Para 2007 la fermentacin deba renovarse cada 18 das, y en 2010 se realizaron slo 5 paradas con periodos de operacin promedio de 82 das. A pesar del incremento en la operacin y su continuidad, luego de cinco aos de investigacin se decidi invertir en un sistema para retirar los lodos de las materias primas y posteriormente someterlas eficientemente al proceso de pasteurizacin y con ello reducir a niveles tolerables la carga microbiana que aportan las mieles al proceso fermentativo. Para ello se instal el equipo Decanter,1 que se muestra en la Grfica 13, en la cual tambin se pueden observar los lodos despus del proceso de separacin y extraccin en las mieles. Una vez extrados los lodos de la Miel B se enviaron diferentes muestras para anlisis de elementos.
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Primer Fermentador
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1. Decanter: Equipo de separacin de slidos o lodos por efecto de fuerza centrfuga sobre el tamao de partcula.
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reflej en mejores condiciones de operacin de equipos como bombas centrfugas, intercambiadores de placas, tuberas y columna mostera, as como equipos de destilacin y de concentracin de vinazas como rehervidores y evaporadores Flubex; hubo mejor control de las vlvulas y su deterioro fue menor. En la Grfica 14 se puede observar la acumulacin en los intercambiadores de placa. La Grfica 15 muestra la tubera de la vinaza que se recircula a la seccin de fermentacin. El lodo acumulado en las tuberas es responsable del incremento de la contaminacin de las corrientes que circulan por dichas tuberas. Para citar un ejemplo, la vinaza que recircula hacia fermentacin tiene una carga microbiana mnima a la salida de la columna mostera, pero se incrementa hasta en dos exponentes de BAA y BAL por efecto de la acumulacin de los lodos en las tuberas. Los anlisis de contaminacin de la vinaza hacia fermentacin resultaron en:
Produccin Alcohol
Slidos Miel B
Los resultados consolidados se presentan en las Tablas 2 y 3. El contenido de humedad en los lodos fue 22,62%, lo cual facilita su transporte como slido hacia la planta de compostaje, donde se utilizarn como materia prima para el proceso de biotransfomacin. Otro de los beneficios econmicos de las medidas que se adoptaron es la reduccin de los costos de operacin y mantenimiento, al impedir que ingresaran 406,42 Ton de lodos (Caso Enero de 2009) en el sistema de fermentacin, lo que se
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16 Mayo 2011: BAA 71 x 102 UFC/ml 30 Mayo 2011: BAL 89 x 10 3 UFC/ml 30 Mayo 2011: BM 68 x 10 3 UFC/ml
El lodo se estanca tambin a lo largo de la columna mostera: en los bajantes, en el rea activa (perforaciones), en los rebosaderos de entrada y salida. Como resultado la columna disminuye su eficiencia de separacin del alcohol, se incrementan las prdidas de etanol por el fondo de la columna, lo que obliga a reducir el flujo de vino (lo que afecta la capacidad de produccin) y finalmente obliga a parar la operacin para limpiar la columna. En la Grfica 16 se observa la columna despus de dos meses de operacin y despus de la limpieza.
El proyecto de acondicionamiento de la materia prima incluye la extraccin de los lodos presentes en mieles, meladura y jugos, para lo cual se utiliza un decantador centrfugo Decanter, de la firma GEA Westfalia Separator, con capacidad de extraer 1.100 kg/h de slidos. El lquido clarificado se pasteuriza a 120 C con el objetivo de disminuir la contaminacin de las materias primas. El equipo instalado en la etapa de pasteurizacin es un inyector Steam Jet Heater Type L, de la firma GEA Wiegand. En la Grfica 18 se presenta el plano isomtrico del sistema instalado. Antes de enviarse la materia prima para la extraccin de los lodos se hace pasar a travs del sedimentador de materia prima, en el cual los lodos se preconcentran desde 1 3% p/p a 10% p/p. En este equipo
el tiempo de residencia es de una hora; la corriente, con 10% de lodos, se enva al Decanter para recuperar el lquido clarificado que contiene los lodos e incrementar la recuperacin de azcares. Con el sistema propuesto se garantiza que las prdidas de azcares sern inferiores a 0,5% respecto a todo el contenido de azcares que alimentan el sistema. Posterior a la extraccin de lodos en la materia prima, este material se enva a la etapa de pasteurizacin a 120 C por un minuto. Con la implementacin del sistema de separacin de lodos y posterior pasteurizacin de la materia prima se espera igualmente disminuir el consumo de insumos qumicos, entre ellos los antibiticos. En la Grfica 19 se presenta el costo especfico de los antibiticos desde el 2007.
Grfica 16. Columna de vino con dos meses de operacin y despus del proceso de limpieza.
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7. Conclusiones
Al realizar un anlisis detallado de toda la informacin presentada se puede concluir que la principal corriente de contaminacin microbiolgica son los lodos dentro de la materia prima proveniente de la fbrica de azcar. El efecto del crecimiento exponencial de las bacterias cido lcticas y cido acticas en los mostos de fermentacin es directamente proporcional a las toneladas de lodos que ingresan diariamente, y se potencializa debido al efecto de concentracin en el tren de fermentacin por las operaciones de recirculacin de levadura y recirculacin de vinaza. Los beneficios en el sistema fermentativo por la operacin de extraccin de lodos sern: (a) Estabilizacin e incremento de la recirculacin de la crema de levadura hacia los fermentadores. (b) Mejoramiento de las condiciones y disminucin de los factores de estrs en el sistema fermentativo. (c) Incremento de la poblacin de levadura alcoholera en los fermentadores. (d) Incremento de la capacidad de recirculacin de vinaza y la consecuente disminucin en la generacin de vinaza hacia la planta de compostaje. (e) Mayor estabilidad en la operacin de la planta de alcohol. (f) Disminucin de costos por concepto de insumos qumicos. (g) Incremento de la eficiencia global de la destilera. (h) Disminucin de los costos de operacin por concepto de mantenimiento en las reas de fermentacin y destilacin.
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Ene-07 Feb-07 Mar-07 Abr-07 May-07 Jun-07 Jul-07 Ago-07 Sep-07 Oct-07 Nov-07 Dic-07 Ene-08 Feb-08 Mar-08 Abr-08 May-08 Jun-08 Jul-08 Ago-08 Sep-08 Oct-08 Nov-08 Dic-08 Ene-09 Feb-09 Mar-09 Abr-09 May-09 Jun-09 Jul-09 Ago-09 Sep-09 Oct-09
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