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Free T3

IMMULITE 2000 Free T3


English
Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Analyzer for the quantitative measurement of free T3 in serum, as an aid in the clinical assessment of thyroid status.
Catalog Numbers: L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3,000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6,000 tests)

Principle of the Procedure


Competitive, analog-based 25,26 immunoassay. Incubation Cycles: 2 30 minutes.

Specimen Collection
Because EDTA would affect results, it should not be used as an anticoagulant. Lipemic or grossly contaminated samples may give erroneous results. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Free T3 has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 100 L serum. Storage: 2 days at 28C, or 2 months at 20C.

Test Code: FT3 Color: Aqua

Summary and Explanation


Under normal physiological conditions triiodothyronine (T3) represents approximately 5 percent of the thyroid hormone in plasma. Although present in lower concentration than thyroxine (T4), T3 has greater metabolic activity, faster turnover and a larger volume of distribution. It is produced largely through extrathyroidal conversion of T4. Like T4, it circulates almost entirely bound to the carrier proteins TBG, pre-albumin and albumin. Free T3 constitutes only about 0.25% of the total T3 in circulation. Measurement of total T3 by immunoassay has a number of well-established uses. In the presence of elevated free or total T4, total T3 measurements help confirm a hyperthyroidism diagnosis. Abnormal elevation of total T3 may also occur when the total T4 concentration is normal a condition known as "T3 toxicosis." For the most part, free T3 levels correlate closely with total T3 levels. Total T3, however, depends not only on thyroid status and the peripheral conversion of T4 to T3, but also on the concentration of thyroid hormone-binding proteins. Free T3, on the other hand, is largely unaffected by variations in these carrier proteins. Thus, the TBG elevations typical of pregnancy, oral contraceptive use, and estrogen therapy effects an increase in the total T3 level while leaving the free T3 concentration basically unchanged. The free T3 concentration typically reflects a patient's actual thyroid status more reliably than the total T3 concentration.
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Warnings and Precautions


For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 28C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C.
IMMULITE 2000 Free T3 (PIL2KF3-13, 2006-09-08)

Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dL, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water.

Kit Components Supplied Separately


L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) CON6: Tri-level, multi-constituent control Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls.

Materials Supplied
Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Free T3 Bead Pack (L2F312) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-T3. Stable at 28C until expiration date.
L2KF32: 1 pack. L2KF33M: 15 packs. L2KF36: 3 packs. L2KF36M: 30 packs.

Assay Procedure
Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Operator's Manual for: preparation, setup, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks. Quality Control Samples: Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of free T3.

Free T3 Reagent Wedge (L2F3A2) With barcode. 18.5 mL ligand-labeled T3 analog in buffer, with preservative. 11.5 mL alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to anti-ligand in buffer. Stable at 28C until expiration date.
L2KF32: 1 wedge. L2KF33M: 15 wedges. L2KF36: 3 wedges. L2KF36M: 30 wedges.

Expected Values
A reference range study for IMMULITE 2000 Free T3 was performed on 212 apparently healthy adults yielding a central 95% range of: 1.8 4.2 pg/mL for euthyroid adults. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges.

Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Free T3 Adjustors (LF3L, LF3H) 2 vials (Low and High), of lyophilized free T3 in processed human serum, with preservative. Reconstitute each vial with 4.0 mL distilled or deionized water. Stable at 28C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20C.
L2KF32: 1 set. L2KF33M: 3 sets. L2KF36: 2 sets. L2KF36M: 4 sets.

Limitations
The free T3 assay serves primarily as a confirmatory test for hyperthyroidism and is of very limited value in the context of hypothyroidism. There may be some overlap between the euthyroid and hyperthyroid ranges. The interpretation of free T3 results is complicated by a variety of drugs which can affect the binding of T3 to the thyroid hormone carrier proteins. In severe nonthyroidal illness, the assessment of thyroid status becomes especially difficult. Since some patients in

Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader.

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this category may suffer from concomitant primary hypothyroidism or from a compensatory secondary hypothyroidism, TSH immunoassay has been recommended as a confirmatory test in this context. In rare conditions associated with extreme variations in the albumin-binding capacity such as familial dysalbuminemic hyperthyroxinemia (FDH) direct free thyroid hormone assays may yield misleading results. Circulating autoantibodies to T3, and hormone-binding inhibitors, may interfere 2,3,12 with the assay. Heparin has been reported to have both in vivo and in vitro effects on free thyroid 8 hormones. Hence, samples should not be collected during or soon after the administration of this anticoagulant. Since dilution shifts the equilibrium between free and protein-bound T3, the assay cannot be expected to maintain linearity under dilution. Accordingly, no attempt should be made to dilute samples with high free T3 results. In particular, any sample with a result greater than the upper limit of the assay's calibration range should simply be reported as such. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:2733.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings.

serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: pg/mL 1.536 pmol/L Calibration Range: 1.0 40 pg/mL (1.5 61 pmol/L). Analytical Sensitivity: 1.0 pg/mL (1.5 pmol/L). Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Specificity: The antibody is highly specific for free T3. (See "Specificity" table.) Effect of TBG: The assay's zero calibrator was spiked with T3-stripped TBG resin (20, 40 and 80 g/mL) and assayed. The results showed no interference. (See "Effect of TBG" table.) Effect of Albumin: Samples spiked with charcoal-absorbed human serum albumin (10, 20 and 50 mg/mL) were assayed. (See "Effect of Albumin" table.) Effect of Nonesterified Fatty Acids (NEFA): Samples spiked with oleic acid (2.5 and 5.0 mmol/L) were assayed. Results show no significant effect at 2.5 mmol/L, but decreased values at the higher level. (See "Effect of Nonesterified Fatty Acids" table. Increased levels of NEFA may be encountered in late pregnancy and in heparin therapy.) Other Compounds: Results for samples assayed after spiking with phenylbutazone (10, 100 and 1,000 g/dL), or phenytoin (5, 10, 25, and 50 g/mL), or salicylate (10, 25, 50 and 100 mg/dL) showed no effect from these compounds. (See "Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin" and "Effect of Salicylate" tables.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/L has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 384 mg/dL has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Highly lipemic samples may interfere with the assay. (See Effect of Lipemia table.)

Performance Data
See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in pg/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on
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IMMULITE 2000 Free T3 (PIL2KF3-13, 2006-09-08)

Method Comparison: The assay was compared to DPC's IMMULITE Free T3 on 105 samples. (Concentration range: approximately 1 to 14 pg/mL.) By linear regression:
(IML 2000) = 1.05 (IML) + 0.41 pg/mL r = 0.977 Means: 3.5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3.0 pg/mL (IMMULITE)

References
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Technical Assistance
In the United States, contact DPC's Technical Services department. Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828 Fax: 973.927.4101. Outside the United States, contact your National Distributor.
The Quality System of Diagnostic Products Corporation is registered to ISO 13485:2003.

Effect of TBG (pg/mL)

Tables and Graphs


Precision (pg/mL)
Within-Run1 Mean3 1 2 3 4 5 6 7 2.5 3.2 3.8 4.2 5.7 6.5 13 SD4 0.21 0.29 0.34 0.24 0.31 0.38 0.56 CV5 8.4% 9.1% 9.0% 5.7% 5.4% 5.9% 4.3% Total2 SD 0.25 0.30 0.38 0.34 0.40 0.48 0.70 CV 10% 9.4% 10% 8.1% 7.0% 7.4% 5.4%

TBG (g/mL Added)1 0 20 40 80

Binding (%B/B0)2 100% 92% 95% 90%

Effect of Nonesterified Fatty Acids (pg/mL)


Oleic Acid (mmol/L Added)1 Unspiked2 1 2 3 2.1 2.4 2.8 2.9 3.0 3.5 2.5 2.6 2.9 2.9 2.7 3.2 3.8 5.0 1.3 1.7 1.5 1.6 1.9 2.4

Effect of Albumin (pg/mL)


Albumin (mg/mL Added)1 Unspiked2 1 2 3 4 5 6 2.0 2.0 2.9 3.0 3.0 3.8 10 1.8 2.3 2.9 3.0 3.1 3.9 20 1.9 2.0 2.9 3.5 3.4 4.1 50 2.4 1.7 3.0 3.1 3.0 3.8 1 2 3

4 5 6

Effect of Phenylbutazone (pg/mL)


Phenylbutazone (g/dL Added)1 Unspiked 2.2 2.5 2.6 3.1 3.3 3.6
2

10 2.0 2.4 2.6 3.3 3.3 3.4

100 2.3 2.7 2.8 3.2 3.3 3.2

1000 2.5 2.8 2.6 3.2 3.2 3.7

Method Comparison

4 5 6

(IML 2000) = 1.05 (IML) + 0.41 pg/mL r = 0.977

IMMULITE 2000 Free T3 (PIL2KF3-13, 2006-09-08)

Effect of Salicylate (pg/mL)


Salicylate (mg/dL Added) Unspiked2 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 2.2 2.7 2.8 3.6 4.0 4.0 4.2 4.4 6.9 9.7 12.4 16 10 2.9 2.9 2.6 3.2 3.7 4.5 4.5 3.7 8.0 9.4 12.2 15 25 2.7 3.0 2.4 4.1 3.9 4.3 4.2 4.0 7.7 9.3 12.0 15 50 2.9 2.6 2.5 3.8 3.7 4.1 4.0 3.3 7.6 8.7 11.0 15
1

Effect of Lipemia
100 2.8 2.3 2.6 3.0 3.5 3.7 3.3 3.5 6.7 8.8 10.8 14 3 2 1 Triglycerides Added mg/dL Observed1 Expected2 %O/E3 250 500 1,000 2,000 3,000 250 500 1,000 2,000 3,000 250 500 1,000 2,000 3,000 4 250 500 1,000 2,000 3,000 5 250 500 1,000 2,000 3,000 6 250 500 1,000 2,000 3,000 2.0 2.1 2.1 1.8 1.7 1.6 2.1 1.8 2.1 1.9 1.9 2.1 2.6 2.4 2.3 2.4 1.7 1.4 2.7 2.7 2.3 2.5 2.2 2.3 2.9 2.8 2.6 2.3 2.3 1.9 3.3 2.8 3.3 2.7 2.6 2.4 3.3 3.2 3.1 3.0 2.8 85% 103% 87% 87% 86% 2.9 2.8 2.8 2.6 2.5 97% 93% 82% 88% 76% 2.7 2.7 2.6 2.5 2.3 100% 85% 96% 88% 100% 2.6 2.6 2.5 2.4 2.2 92% 88% 96% 71% 64% 2.1 2.1 2.0 1.9 1.8 86% 100% 95% 100% 117% 2.0 1.9 1.9 1.8 1.7 105% 111% 95% 94% 94%

Effect of Phenytoin (pg/mL)


Phenytoin (g/mL Added)1 Unspiked1 1 2 3 4 5 6 2.5 2.9 3.0 3.0 6.4 7.7 5 2.5 2.6 2.9 2.9 6.8 7.6 10 2.6 2.5 2.5 2.9 6.9 7.5 25 2.5 2.6 2.7 3.2 7.2 7.0 50 2.8 2.7 2.7 3.1 7.1 7.6

IMMULITE 2000 Free T3 (PIL2KF3-13, 2006-09-08)

Specificity
Compound1
L-Thyroxine D-Thyroxine

pg/mL % CrossAdded2 reactivity3 (T4) 50,000 50,000 5,000 200,000 10,000,000 ND ND 0.073% ND ND

Salicylate (mg/dl ajout), 2Pur. Effect of Lipemia: 1Triglycrides ajout, 2Observ (O), 3 Attendu (A). Specificity: 1Compos, 2ajout, 3 Raction croise%. 4ND: non dtectable. Method Comparison. Free T3: T3 libre. Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3 Media, 4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente di Variazione). Effect of Albumin. 1 Albumina (mg/ml aggiunti). 2Unspiked. Effect of TBG. 1TBG (g/ml aggiunti), 2Legame (%L/L0). Effect of Nonesterified Fatty Acids. 1 Acido oleico (mmol/l aggiunti), 2Unspiked. Effect of Phenylbutazone. 1Fenilbutazone (g/dl aggiunti), 2Unspiked. Effect of Phenytoin. 1Fenitoina (g/ml aggiunti), 2 Unspiked. Effect of Salicylate. 1Salicilato (mg/dl aggiunti), 2Unspiked. Effect of Lipemia: 1 Trigliceridi aggiunti, 2Osservato (O), 3Atteso (A). Specificity: 1Composto, 2quantit aggiunta, 3 Percentuale di Crossreattivit, 4ND: non determinabile. Method Comparison. Free T3: T3 Libero. Portugus. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total, 3 Mdia, 4Desvio padro, 5Coeficiente de variao. Effect of Albumin. 1Albumina (mg/ml adicionados). 2No adicionada. Effect of TBG. 1 TBG (g/ml adicionados), 2Ligao (%L/L0). Effect of Nonesterified Fatty Acids. 1cido olico (mmol/l adicionados), 2No adicionada. Effect of Phenylbutazone. 1Fenilbutazona (g/dl adicionados), 2No adicionada. Effect of Phenytoin. 1Fenitona (g/ml adicionados), 2 No adicionada. Effect of Salicylate. 1 Salicilato (mg/dl adicionados), 2No adicionada. Effect of Lipemia: 1Trigliceridos adicionados, 2 Observado (O), 3Esperado (E). Specificity: 1 Composto, 2Quantidade adicionada, 3 Percentagem de reaco cruzada, 4ND: no detectvel. Method Comparison. Free T3: T3 livre.

Triiodothyroacetic acid Tetraiodothyroacetic acid Diiodo-L-tyrosine Methimazole 5,5'-Diphenylhydantoin Phenylbutazone 6-n-Propyl-2-thiouracil Triido-L-tyrosine ND: Not detectable.4

10,000,000 0.00002% 10,000,000 10,000,000 10,000,000 ND ND ND

10,000,000 0.00002%

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt, 3 Mittelwert, 4S (Standardbereich), 5CV (Variationskoeffizient). Effect of Albumin. 1 Albumin (mg/ml zugefgt). 2ohne Zugabe von. Effect of TBG. 1TBG (g/ml zugefgt), 2Bindung (%B/B0). Effect of Nonesterified Fatty Acids. 1 lsure (mmol/l zugefgt), 2Ohne Zugabe von. Effect of Phenylbutazone. 1Phenylbutazon (g/dl zugefgt), 2Ohne Zugabe von. Effect of Phenytoin. 1Phenytoin (g/ml zugefgt), 2Ohne Zugabe von. Effect of Salicylate. 1Salizylat (mg/dl zugefgt), 2Ohne Zugabe von. Effect of Lipemia: 1 Triglyceride zugefgt, 2Beobachtet (B), 3Erwartet (E). Specificity: 1Verbindung, 2 zugesetzte Menge, 3% Kreuzreaktivitt, 4NN: Nicht nachweisbar. Method Comparison. Free T3: Freies T3. Espaol. Precision: 1Intraensayo, 2Total, Media, 4DS, 5CV. Effect of Albumin. 1 Albmina (mg/ml aadidos). 2Sin aadir. Effect of TBG. 1TBG (g/ml aadidos), 2Unin (%U/U0). Effect of Nonesterified Fatty Acids. 1 cido oleico (mmol/l aadidos), 2Sin aadir. Effect of Phenylbutazone. 1Fenilbutazona (g/dl aadidos), 2Sin aadir. Effect of Phenytoin. 1Fenitona (g/ml aadidos), 2Sin aadir. Effect of Salicylate. 1Salicilato (mg/dl aadidos), 2Sin aadir. Effect of Lipemia: 1 Triglicridos aadidos, 2Observado (O), 3 Esperado (E). Specificity: 1Compuesto, 2 Cantidad aadidos, 3% Reaccin cruzada, 4ND: no detectable. Method Comparison. Free T3: T3 libre.
3

Deutsch
IMMULITE 2000 - Freies T3
Anwendung: Fr in-vitro-diagnostische Tests mit dem Analysegert IMMULITE zur quantitativen Messung von freiem T3 im Serum, zur klinischen Beurteilung des Schilddrsenzustandes. Artikelnummern:
L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3 000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6 000 tests)

Franais. Precision: 1Intraessai, 2Total, 3 Moyenne, 4SD, 5CV. Effect of Albumin. 1 Albumine (mg/ml ajout). 2Pur. Effect of TBG. 1 TBG (g/ml ajout), 2Liaison (L/L0%). Effect of Nonesterified Fatty Acids. 1Acide olique (mmol/l ajout), 2Pur. Effect of Phenylbutazone. 1Phnylbutazone (g/dl ajout), 2Pur. Effect of Phenytoin. 1Phnytone (g/ml ajout), 2Pur. Effect of Salicylate.
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Testcode: FT3 Farbe: trkis

Klinische Relevanz
Unter physiologischen Bedingungen betrgt der Anteil von Trijodothyroxin (T3) circa 5% an den Schilddrsenhormonen
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im Plasma. Obwohl das T3 in deutlich geringerer Konzentration vorliegt als das T4, zeigt es eine grere metabolische Aktivitt, einen schnelleren Umsatz und eine breitere Verteilung im Organismus. Der grte Anteil T3 wird durch die Konversion aus T4 gebildet. Wie das T4, ist der Haupteil des T3 im Plasma an die Trgerproteine TBG, Pralbumin und Albumin gebunden. Die ungebundene Fraktion, das Freie T3, hat nur einen Anteil von circa 0,25% an der gesamten T3-Konzentration im Plasma. Bei verschiedenen, gut beschriebenen klinischen Fragestellungen, ist die Bestimmung des T3 von Bedeutung. Werden erhhte Freie- oder Gesamt-T4 Werte gefunden, untersttzt die Messung des T3 die Diagnosestellung des Hyperthyreoidismus. Deutlich erhhte T3Werte, bei normalen T4-Konzentrationen, werden bei der T3-Toxikose (T3Hyperthyreose) gefunden. Normalerweise korreliert die Freie T3Konzentration mit der totalen T3Konzentration. Die T3-Konzentration ist aber nicht nur vom Schilddrsenstatus und von der periphren Umsetzung T4 zu T3 abhngig sondern zustzlich von der Konzentration der Trgerproteine. Die Freie T3-Konzentration ist von diesen Schwankungen der Trgerproteinkonzentration unabhngig. Besonders die TBG-Konzentration ist unter verschiedenen Bedingungen wie Schwangerschaft, Einnahme oraler Kontrazeptiva und strogen-Therapie erhht, was zu einer Erhhung des Gesamt-T3 Spiegels fhrt, whrend die Konzentration des freien T3 unverndert bleibt. Normalerweise beschreibt die freie T3Konzentration den aktuellen Schilddrsenstatus des Patienten besser als die Gesamt-T3 Konzentration.

Lipmische oder grob kontaminierte Proben knnen zu fehlerhaften Ergebnissen fhren. Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zur Klrung von lipmischen Proben empfohlen. Bei hmolysierten Proben besteht die Mglichkeit einer unsachgemen Handhabung vor Eintreffen im Labor, daher sind die Ergebnisse zurckhaltend zu interpretieren. Die Zentrifugation der Serumproben vor dem vlligen Abschluss der Gerinnung kann zu Fibringerinnseln fhren. Um fehlerhaften Analysenergebnissen infolge von Gerinnseln vorzubeugen, ist sicherzustellen, dass die Gerinnung vor der Zentrifugation der Proben vollstndig abgeschlossen ist. Insbesondere Proben von Patienten unter Antikoagulantientherapie knnen eine verlngerte Gerinnungszeit aufweisen. Blutentnahmerhrchen von verschiedenen Herstellern knnen differierende Werte verursachen. Dies hngt von den verwendeten Materialien und Additiven (Gel oder physische Trennbarrieren, Gerinnungsaktivatoren und /oder Antikoagulantien) ab. IMMULITE 2000 Freies T3 sind nicht mit allen mglichen Rhrchenvariationen ausgetestet worden. Erforderliche Menge: 100 l Serum. Lagerung: 2 Tage bei 28C oder 2 Monate bei 20C.

Hinweise und Vorsichtsmanahmen


Zur In-vitro-Diagnostik. Reagenzien: Bei 28C lagern. Unter Einhaltung der geltenden gesetzlichen Vorschriften entsorgen. Die generell geltenden Vorsichtsmanahmen sind einzuhalten und alle Komponenten als potenziell infektis zu behandeln. Alle aus menschlichem Blut gewonnenen Materialien wurden auf Syphilis, Antikrper gegen HIV-1 und HIV-2, Hepatitis-B-Oberflchenantigen und Hepatitis-C-Antikrper untersucht und negativ befundet. Bestimmten Komponenten wurde Natriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefgt. Um die Bildung von explosiven Metallaziden in Blei- und Kupferrohren zu verhindern,
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Methodik
Kompetitiver Immunoassay mit 25,26 Verwendung eines Analogons. Inkubationszyklen: 2 30 minuten.

Probengewinnung
Da EDTA die Ergebnisse beeinflussen wrde, sollte es nicht als Antikoagulanz verwendet werden.
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sollten die Reagenzien nur zusammen mit groen Wassermengen in die Kanalisation gesplt werden. Chemilumineszenz-Substrat: Kontamination und direkte Sonneneinstrahlung vermeiden (Siehe Packungsbeilage). Wasser: Destilliertes oder deionisiertes Wasser verwenden.

Barcodes vom Barcodereader des Systems gelesen werden knnen.

Separat erhltliche TestsystemKomponenten


L2SUBM: ChemilumineszenzSubstratmodul L2PWSM: Waschmodul L2KPM: Reinigungsmodul LRXT: (Einmal-) Reaktionsgefe CON6: 3 Konzentrationen, Multikontrolle Ebenfalls bentigt: Destilliertes bzw. deionisiertes Wasser; Rhrchen; Kontrollen.

Im Lieferumfang enthalten
Die Bestandteile sind aufeinander abgestimmt. Die Aufkleber auf der Innenverpackung werden zur Testdurchfhrung gebraucht. Freies T3 Kugel-Container (L2F312) Der barcodierte Kugel-Container enthlt 200 Kugeln, beschichtet mit monoklonalen T3-Antikrper (Maus). Bei 28C bis zum Verfallsdatum haltbar.
L2KF32: 1 Container. L2KF33M: 15 Container. L2KF36: 3 Container. L2KF36M: 30 Container.

Testdurchfhrung
Fr eine optimale Funktion des Gertes ist unbedingt zu beachten, dass die Wartungen, wie im IMMULITE 2000Handbuch beschrieben, regelmig durchgefhrt werden. Hinweise zur Vorbereitung, tglichen Inbetriebnahme des Systems, der Kalibrierung sowie Verfahren zur Testund Qualittskontrolle entnehmen Sie bitte dem IMMULITE 2000-Handbuch. Empfohlenes Kalibrationsintervall: 2 Wochen. Proben zur Qualittskontrolle: Kontrollen oder Seren mit freiem T3 in zumindest zwei Konzentrationen (niedrige und hohe) verwenden.

Freies T3 Reagenzbehlter (L2F3A2) Mit Barcode. Der Reagenzbehlter enthlt 18,5 ml ligand-markiertes T3 Analog in einem Puffer, mit Konservierungsmittel. 11,5 ml alkalische Phosphatase konjugiert mit Anti-Ligand in einem Puffer. Bei 28C bis zum Verfallsdatum haltbar.
L2KF32: 1 Behlter. L2KF33M: 15 Behlter. L2KF36: 3 Behlter. L2KF36M: 30 Behlter.

Vor Gebrauch den Aufkleber an der Perforation abreien, ohne dabei die Barcodierung zu beschdigen. Die Folie von der Oberseite des Containers entfernen. Den Schiebedeckel nach unten in die Fhrung des Reagenziendeckels einrasten lassen. Freies T3 Kalibratoren (LF3L, LF3H) Zwei Flschchen (niedrig und hoch) mit lyophilisiertem freien T3 in behandelten humanem Serum, mit Konservierungsmittel. Jedes Flschchen jeweils mit 4,0 ml destilliertem bzw. deionisiertem Wasser auflsen. Nach Rekonstituierung 30 Tage bei 28C, sonst 6 Monate (aliquotiert) bei 20C haltbar.
L2KF32: 1 Set. L2KF33M: 3 Sets. L2KF36: 2 Sets. L2KF36M: 4 Sets.

Referenzwerte
In einer Studie des Herstellers mit 212 gesunden Probanden, wurde mit dem IMMULITE 2000 - Freies T3 folgende Referenzwerte ermittelt: 1,8 4,2 pg/ml fr euthyreote Erwachsene. Betrachten Sie diese Grenzwerte nur als Richtlinien. Jedes Labor sollte eigene Referenzbereiche ermitteln.

Grenzen der Methode


Der Assay zur Bestimmung der freien T3Konzentration ist ein Besttigungstest der Hyperthyreose und hat nur eine eingeschrnkte Aussagekraft im Zusammenhang mit der Hypothyreose. Es ist davon auszugehen, da es

Vor der Kalibrierung die entsprechenden Aufkleber (dem Kit beiliegend) auf Glasrhrchen kleben, so da die
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berschneidungen zwischen euthyreotem und hyperthyreoten Bereichen gibt. Die Interpretation der Freien T3 Ergebnisse wird durch eine Vielzahl von Medikamenten erschwert, die die T3Bindung an die entsprechenden Bindeproteine beeinflussen. Besonders schwierig ist die Untersuchung der Schilddrsenfunktion bei nicht thyreoidalen Erkrankungen. Einige Patienten mit diesem Krankheitsbild leiden unter einer begleitenden primren Hypothyreose oder einer kompensatorischen sekundren Hypothyreose. In seltenen Fllen starker Variation der Albuminbindungskapazitt, wie familirer dysalbuminmischer Hyperthyroxinmie, werden fehlerhafte Bestimmungen der freien Hormone beobachtet. Zirkulierende T3-Autoantikrper und Inhibitoren fr Hormonbindung knnen mit 2,3,12 dem Assay interferieren. Es wurde gezeigt, da Heparin in vitro wie auch in vivo einen Einflu auf freie 8 Schilddrsenhormone hat. Aus diesem Grund sollten whrend oder kurz nach Heparin-Gabe keine Proben entnommen werden. Da eine Verdnnung das Gleichgewicht zwischen freiem und gebundenem T3 beeinflut, wird keine Verdnnungslinearitt gefunden. Aus diesem Grund sollten die Proben mit hohen freien T3-Konzentrationen nicht verdnnt werden. Die Ergebnisse oberhalb des Mebereichs sollten als solche angegeben werden. Heterophile Antikrper in Humanseren knnen mit Immunglobulinen aus den Assaykomponenten reagieren und Interferenzerscheinungen innerhalb des in vitro Immunoassays verursachen. (Clin. Chem. 1988:34:27-33) Proben von Patienten, die hufig mit Tier- bzw. Tierserumprodukten zu tun haben, knnen die erwhnten Interferenzen verursachen und zu anomalen Resultaten fhren. Die verwendeten Reagenzien sind so konzipiert, dass das Risiko einer Interferenz mit den zu messenden Proben minimiert ist. Dennoch knnen potentiell Interaktionen zwischen seltenen Seren und den Testkomponenten auftreten. Zu diagnostischen Zwecken sollten die mit
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dem Assay erhaltenen Ergebnisse immer in Kombination mit der klinischen Untersuchung, der Patientenanamnese und anderen Befunden gesehen werden.

Leistungsdaten
Siehe Tabellen und Grafiken mit reprsentativen Daten fr den Assay. Die Ergebnisse sind als pg/ml ausgedrckt. (Alle Daten wurden sofern nicht anders angegeben aus Serumproben in Rhrchen ohne Gelbarrieren oder gerinnungsfrdernde Zustze gewonnen.) Umrechnungsfaktor: pg/ml 1,536 pmol/l Messbereich: 1,0 40 pg/ml (1,5 61 pmol/l). Analytische Sensitivitt: 1,0 pg/ml (1,5 pmol/l). Przision: Proben wurden innerhalb von 20 Tagen mit jeweils zwei Testanstzen in Doppelbestimmung gemessen (insgesamt 40 Bestimmungen und 80 Einzelmessungen). (Siehe Tabelle Precision.) Spezifitt: Der Assay ist hochspezifisch fr freies T3. (Siehe Tabelle Specificity.) Effekt von TBG: Der Null-Kalibrator wurde mit einem T3 freien TBG-Resin (20, 40 und 80 g/ml) versehen und gemessen. Die Ergebnisse zeigten keine Interferenz. (Siehe Tabelle "Effect of TBG".) Effekt von Albumin: Proben gespiked mit humanem Albumin (10, 20 und 50 mg/ml), wurden untersucht. (Siehe Tablelle "Effect of Albumin".) Effekt nicht veresterter Fettsuren (NEFA): Proben wurden nach Zugabe verschiedener Konzentrationen lsure (2,5 und 5,0 mmol/l) bestimmt. Bis zu einer Konzentration von 2,5 mmol/l wurde kein signifikanter Einflu beobachtet, whrend hhere Konzentrationen zu niedrigeren fT3-Werten fhrten. (Siehe Tabelle "Effect of Nonesterified Fatty Acids". Erhhte NEFA-Konzentrationen sind in der Schwangerschaft und unter Heparin-Gabe mglich. Sonstige Verbindungen: Untersuchung von Proben nach Zugabe von Phenylbutazon (10, 100 und 1 000 g/dl), oder Phenytoin (5, 10, 25 und 50 g/ml), oder Salizylat (10, 25, 50 und 100 mg/dl),
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zeigten keinen Einflu dieser Verbindungen. (Siehe Tabellen "Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin" und "Effect of Salicylate".) Bilirubin: Bilirubin hat in Konzentrationen bis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf die Ergebnisse, der grer als die Imprzision des Assays selbst ist. Hmolyse: Hmoglobin hat in Konzentrationen bis zu 384 mg/dl keinen Einfluss auf die Ergebnisse, der grer als die Imprzision des Assays selbst ist. Lipmie: hoch lipmische Proben knnen mit dem Assay interferieren (siehe Tabelle Lipmie). Methodenvergleich: Der Assay wurde auf der Basis von 105 Patientenproben mit dem IMMULITE Freies T3 Assay der DPC verglichen (Konzentrationsbereich: ca. 1 bis 14 pg/ml. Siehe Grafik.) Durch lineare Regression:
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/ml r = 0,977 Mittelwert: 3,5 pg/ml (IMMULITE 2000) 3,0 pg/ml (IMMULITE)

aproximadamente el 5 porciento de las hormonas tiroideas en plasma. Aunque presente en menor concentracin que la tiroxina (T4), la T3 tiene una mayor actividad metablica, un turnover ms rpido y una distribucin ms amplia. Se produce mayoritariamente como resultado de la conversin extratiroidea de la T4. Como ella, circula unida casi en su totalidad a proteinas transportadoras TBG, pre-albumina y albumina. La T3 Libre constituye slo el 0,25% de la T3 total en circulacin. La determinacin de T3 total por inmunoensayo tiene una amplio nmero de usuarios. En presencia de T4 total o libre elevada, la determinacin de T3 total ayuda a confrimar el diagnstico de hipertiroidismo. Una elevacin anormal de T3 total puede darse incluso cuando la concentracin de T4 total es normal una condicin conocida como "toxicosisT3." En la mayora de los casos, los niveles de T3 libre estn estrechamente correlacionados con los niveles de T3 total. La T3 total, no obstante, no slo depende del estado tiroideo y de la conversin perifrica de T4 a T3, sino incluso de la concentracin de las proteinas transportadoras de hormonas tiroideas. La T3 libre, por otro lado, no se ve afectada por las variaciones en esas proteinas transportadoras. As, las elevaciones tpicas de TBG durante el embarazo, utilizacin de anticonceptivos orales y terapia con estrgenos tienen un efecto al alza en los niveles de T3 total mientras que la concentracin de T3 libre se mantiene prcticamente invariable. La concentracin de T3 libre refleja el estado tiroideo actual de un paciente de una manera ms real que la concentracin de T3 total.

Anwendungsberatung
Bei Rckfragen wenden Sie sich bitte an Ihre DPC Niederlassung.
Das Qualittssystem der Diagnostic Products Corporation ist nach ISO 13485:2003 registriert.

Espaol
IMMULITE 2000 T3 Libre
Utilidad del anlisis: Para el diagnstico in vitro usado con el Analizador IMMULITE 2000, para la medicin cuantitativa de T3 libre en suero, como una ayuda para la evaluacin clnica del estado tiroideo.
Nmeros de Catlogo: L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3 000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6 000 tests)

Principio del anlisis


Inmunoensayo competitivo basado en un 25,26 anlogo. Ciclos de incubacin: 2 30 minutos.

Cdigo del Test: FT3 Color: Agua

Resumen y Explicacin del Test


Bajo condiciones fisiolgicas normales la triiodotironina (T3) representa
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Recogida de la muestra
Debido a que el EDTA puede afectar a los resultados, no debe usarse como anticoagulante.

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Las muestras lipmicas o ampliamente contaminadas pueden dar resultados errneos. Se recomienda el uso de una ultracentrfuga para aclarar las muestras lipmicas. Las muestras hemolizadas podran indicar una mala manipulacin de la muestra antes de ser recibida por el laboratorio; en este caso, los resultados deben interpretarse con precaucin. La centrifugacion de las muestras de suero antes de que se forme el coagulo puede ocasionar la presencia de fibrina. Para evitar resultados erroneos debidos a la presencia de fibrina, asegurarse que se ha formado el coagulo completamente antes de centrifugar las muestras. Algunas muestras, particularmente aquellas de pacientes sometidos a terapia anticoagulante, pueden requerir mayor tiempo de coagulacion. Los tubos para recoger sangre de distintos fabricantes pueden producir valores diferentes, dependiendo del material del tubo y de los aditivos, incluyendo barreras de gel o barreras fsicas, activadores de la coagulacin y/o anticoagulantes. El T3 Libre IMMULITE 2000 no ha sido analizado con todos los distintos tipos de tubos. Volumen Requerido: 100 l de suero. Conservacin: 2 das a 28C, o 2 meses a 20C.

explosivas, en las canerias de cobre y plomo. Substrato quimioluminiscente: Evitar la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. (Ver el prospecto). Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales Suministrados
Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Cartucho de bolas de T3 Libre (L2F312) Con cdigos de barras. 200 bolas, recubiertas con anticuerpo monoclonal murino anti-T3. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad.
L2KF32: 1 cartucho. L2KF33M: 15 cartuchos. L2KF36: 3 cartuchos. L2KF36M: 30 cartuchos.

Vial de reactivo de T3 Libre (L2F3A2) Con cdigos de barras. 18,5 ml de un anlogo de T3 marcado con un ligando en solucin tampn, con conservante. 11,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con un anti-ligando en solucin tampn. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad.
L2KF32: 1 vial. L2KF33M: 15 viales. L2KF36: 3 viales. L2KF36M: 30 viales.

Advertencias y Precauciones
Para uso diagnstico in vitro. Reactivos: Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sodica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacion, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la constitucion de residuos de azidas metalicas, potencialmente

Antes de usar, cortar la parte superior de la etiqueta en la perforacin, sin daar el cdigo de barras. Quitar el precinto del orificio del vial; encajar la cubierta deslizante en las rampas de la tapa del reactivo. Ajustadores de T3 Libre (LF3L, LF3H) Dos viales (bajo y alto) de T3 libre liofilizada en en suero humano procesado, con conservante. Reconstituir cada vial, aadiendo 4,0 ml de agua destilada o desionizada. Estable a 28C durante 30 das despus de la reconstitucin, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C.
L2KF32: 1 juego. L2KF33M: 3 juegos. L2KF36: 2 juegos. L2KF36M: 4 juegos.

Antes de hacer un ajuste, colocar las etiquetas a las alcuotas apropiadas (suministradas con el kit) sobre tubos de ensayo, de forma tal que los cdigos de barras puedan ser ledos por el lector.

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Componentes del kit que se suministran por separado


L2SUBM: Substrato quimioluminiscente L2PWSM: Lavado de sonda L2KPM: Kit de limpieza de sonda LRXT: Tubos de reaccin (desechables) CON6: control multiconstituyente de tres niveles Tambin necesarios Agua destilada o desionizada; tubos de ensayo; controles.

la T3 a las protenas transportadoras de la hormona tiroidea. En varias enfermedades no tiroideas, la evaluacin del estado tiroideo se hace especialmente difcil. Debido a que algunos pacientes que pertenecen a esta categora pueden sufrir un hipotiroidismo primario concomitante o un hipotiroidismo secundario compensatorio, en este contexto se ha recomendado el inmunoensayo de TSH como un test de verificacin. En algunas condiciones raras, asociadas con variaciones extremas en la capacidad de unin de la albmina como la hipertiroxinemia disalbuminmica familiar (FDH) los ensayos directos de la hormona tiroidea libre pueden dar resultados engaosos. Los anticuerpos circulantes contra T3 y los inhibidores de la unin de la hormona 2,3,12 pueden interferir con el ensayo. Se ha determinado que la heparina tiene efectos sobre las hormonas tiroideas 8 libres tanto in vivo como in vitro. Por ello, no se debern obtener muestras durante la administracin de este anticoagulante o inmediatamente despus de la misma. Debido a que la dilucin altera el equilibrio entre la T3 libre y la T3 unida a protenas, no se puede esperar que el ensayo mantenga la linealidad durante la dilucin. Consiguientemente, no se deber intentar diluir las muestras que den resultados altos de T3 libre. En particular, cualquier muestra que d un resultado mayor al lmite superior del rango de calibracin del ensayo deber informarse como tal. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro. [Ver Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con
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Ensayo
Aviso: para obtener el funcionamiento ptimo, es importante realizar todos los procedimientos del mantenimiento general segn lo definido en el manual del operador de IMMULITE 2000. Consulte el Manual del operador de IMMULITE 2000 para: la preparacin, instalacin, ajuste, ensayo y procedimientos de control de calidad. Intervalo de ajuste recomendado: 2 semanas. Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de T3 libre (bajo y alto).

Valores Esperados
Un estudio de valores normales de T3 libre en el IMMULITE 2000, llevado a cabo en 212 adultos, aparentemente sanos, di como resultado un intervalo de normalidad dell 95% los valores comprendidos entre 1,8 4,2 pg/ml para adultos eutiroideos. Estos lmites han de considerarse slo como una gua. Cada Laboratorio deber establecer sus propios rangos de referencia.

Limitaciones
El ensayo de T3 libre sirve principalmente para verificar la presencia de hipertiroidismo, y tiene un valor muy limitado para el hipotiroidismo. Puede haber algo de superposicin entre los rangos eutiroideos e hipertiroideos. La interpretacin de los resultados de T3 libre se ve complicada por una variedad de drogas que pueden afectar la unin de
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este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante.

Caractersticas Analticas
Para ver resultados representativos de las cualidades del ensayo ver las tablas y los grficos. Los resultados se expresan en pg/ml. (A no ser que se indique lo contrario, todos los resultados fueron generados en muestras de suero recogidas en tubos sin geles o activadores de la coagulacin). Factor de Conversin: pg/ml 1,536 pmol/l Rango de Calibracin: 1,0 40 pg/ml (1,5 61 pmol/l). Sensibilidad: 1,0 pg/ml (1,5 pmol/l). Precisin: Las muestras fueron analizadas por duplicado durante 20 das, en dos tandas de trabajo por da, para un total de 40 tandas y 80 replicados. (Ver la tabla de Precision.) Especificidad: El ensayo es altamente especfico para T3 libre. (Ver la tabla de Specificity.) Efecto de la TBG: El calibrador a cero del ensayo fue sobrecargado con una resina a la cual se le ha quitado la T3 (20, 40 y 80 g/ml) y analizado. Los resultados de la TBG no mostraron ninguna interferencia. (Ver la tabla de Effect of TBG.) Efecto de la albmina: Se ensayaron muestras sobrecargadas con albmina de suero humano absorbida en carbn (10, 20 y 50 mg/ml). (Ver la tabla de Effect of Albumin.) Efecto de los cidos grasos no esterificados (NEFA): Se ensayaron muestras sobrecargadas con cido oleico (2,5 y 5,0 mmol/l). Los resultados no muestran un efecto significativo a la concentracin de 2,5 mmol/l, pero s muestran valores menores a niveles mayores. (Ver la tabla de Effect of Nonesterified Fatty Acids. Pueden encontrarse niveles aumentados de NEFA en el embarazo y en el tratamiento con heparina.) Otros compuestos: Los resultados de las muestras ensayadas despus de
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sobrecargarlas con fenilbutazona (10, 100 y 1 000 g/dl), con fenitona (5, 10, 25 y 50 g/ml) o con salicilato (10, 25, 50 y 100 mg/dl) no mostraron ningn efecto de estos compuestos. (Ver las tablas de Effect of Phenylbutazone, Effect of Phenytoin y Effect of Salicylate.) Bilirrubina: La presencia de bilirrubina, en concentraciones hasta 200 mg/l, no tienen ningn efecto sobre los resultados en trminos de precisin. Hemolisis: La presencia de hemoglobina, en concentraciones hasta 384 mg/dl,no tienen ningn efecto sobre los resultados en trminos de precisin. Lipemia: Las muestras altamente lipmicas pueden interferir con el ensayo. (Ver la tabla de Lipemia.) Comparacin del Mtodo: El ensayo fue comparado con el IMMULITE T3 Libre de DPC en 105 muestras de pacientes. (Rango de Concentracin: aproximadamente 1 a 14 pg/ml. Ver el grfico). Por regresin linear:
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/ml r = 0,977 Medias: 3,5 pg/ml (IMMULITE 2000) 3,0 pg/ml (IMMULITE)

Asistencia tcnica
Contctese con su Distribuidor Nacional.
El Sistema de Calidad de Diagnostic Products Corporation est registrado para la ISO 13485:2003.

Franais
IMMULITE 2000 T3 libre
Domaine d'utilisation : Pour le dosage quantitatif de la T3 libre dans le srum. Ce test est rserv un usage diagnostique in vitro avec l'Analyseur IMMULITE 2000 et constitue une aide au bilan thyrodien. Ce ractif est enregistr auprs de l'Agence du Mdicament. Rfrence catalogue :
L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3 000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6 000 tests)

Code produit : FT3. Code couleur : bleu vert.


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Introduction
Dans les conditions physiologiques normales, la T3 reprsente approximativement 5% des hormones thyrodiennes dans le plasma. Bien que prsente en trs faible quantit comparativement la T4, la T3 a une plus grande activit mtabolique, un renouvellement plus rapide et un plus grand volume de distribution. La T3 est produite en grande quantit par la conversion de la T4 en dehors de la glande thyrode. Comme pour la T4, elle circule presque entirement lie des protines de transport, la TBG, la pralbumine et l'albumine. La T3 libre constitue seulement 0,25% de la T3 totale circulante. La dtermination de la T3 totale par immunoanalyse a des indications bien tablies. En prsence d'une lvation de T4 totale ou de T4 libre, le dosage de la T3 aide confirmer le diagnostic d'hyperthyrodie. Une augmentation anormale de T3 peut galement se voir alors que la T4 est normale en cas de T3 toxicose . Dans la plupart des cas, les taux de T3 libre sont parfaitement corrls aux taux de T3 totale. Cependant les taux de T3 totale ne dpendent pas seulement de l'tat thyrodien et de la conversion priphrique de la T4 en T3, mais aussi de la concentration des protines porteuses. D'autre part, la T3 libre est peu affecte par les variations de ces protines porteuses. Ainsi, l'lvation typique de la TBG au cours de la grossesse, de la prise de contraceptifs oraux ou d'estrognothrapie, entrane une augmentation de la T3 totale, mais ne modifie pas la concentration basale de T3 libre. La concentration de T3 libre reflte de faon beaucoup plus fiable le statut thyrodien actuel du patient que la T3 totale.

Recueil des chantillons


Il est recommand de ne pas utiliser l'EDTA comme anticoagulant car cela pourrait altrer les rsultats. Des chantillons lipmiques ou fortement contamins peuvent donner des rsultats rrons. Il est recommand de clarifier les chantillons hyperlipmiques par ultracentrifugation. Des chantillons hmolyss peuvent tre rvlateurs d'une prparation inadquate du prlvement avant son envoi au laboratoire ; il faudra donc interprter les rsultats avec prudence. La centrifugation des chantillons sriques avant la formation complte du caillot peut entraner la prsence de fibrine. Pour viter les rsultats errons ds la prsence de fibrine, s'assurer de la formation complte du caillot avant de centrifuger les chantillons. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous anti-coagulants, peuvent ncessiter un temps plus long pour la formation du caillot. Des tubes pour prlvements sanguins provenant de fabricants diffrents peuvent donner des rsultats diffrents, selon les matriaux et additifs utiliss, y compris gels ou barrires physiques, activateurs de la coagulation et/ou anticoagulants. Le coffret T3 Libre IMMULITE 2000 n'a pas t test sur tous les types de tubes possibles. Volume ncessaire : 100 l de srum. Conservation : 2 jours +2C/+8C ou 2 mois 20C.

Prcautions demploi
Rserv un usage diagnostique in vitro. Ractifs : conserver les ractifs +2/ +8 C. Eliminer les dchets conformment la rglementation en vigueur. Respecter les prcautions d'emploi et manipuler tous les composants du coffret comme des produits potentiellement infectieux. Les ractifs drivs de produits humains et utiliss dans ce coffret ont subi un test srologique pour la Syphilis et des tests de dpistage pour les anticorps antiVIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigne de surface de l'hpatite B, qui se sont tous avrs ngatifs.
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Principe du test
Immunodosage comptitif sur un principe 25,26 analogue. Cycles d'incubation : 2 30 minutes.

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De lazide de sodium des concentrations infrieures 0,1 g/dl a t ajout comme conservateur ; lors de llimination, lvacuer avec de grandes quantits deau pour viter une accumulation dazides mtalliques explosifs dans les canalisations. Substrat chimiluminescent : viter la contamination et l'exposition directe au soleil. (Voir notice). Eau : utiliser de l'eau distille ou dsionise.

Avant de procder un ajustement, placer les tiquettes correspondant l'aliquot (fournies avec le coffret) sur des tubes en verre de sorte que les code-barres soient lisibles par le lecteur.

Composants du coffret fournis sparment


L2SUBM : Substrat chimiluminescent L2PWSM : Solution de lavage L2KPM : Coffret de dcontamination de l'aiguille de prlvement LRXT : Godets ractionnels (jetables) CON6 : Contrle multiparamtrique trois niveaux Egalement requis Eau distille ou dsionise ; tubes en verre ; contrles

Matriel fourni
Les composants de la trousse ne peuvent tre utiliss que conjointement. Les tiquettes l'intrieur du coffret sont ncessaires au dosage. Cartouche de billes T3 Libre (L2F312) Avec code-barres. 200 billes revtues d'un anticorps monoclonal murin anti-T3. Stable +2C/+8C jusqu' la date de premption.
L2KF32: 1 cartouche. L2KF33M: 15 cartouches. L2KF36: 3 cartouches. L2KF36M: 30 cartouches.

Protocole de dosage
Noter que pour des performances optimales, il est important de raliser toutes les procdures de maintenance de routine selon les instructions du Manuel d'Utilisation IMMULITE 2000. Se reporter au manuel d'utilisation de l'IMMULITE 2000 pour : la prparation, le dmarrage du systme, les ajustements, le dosage et les procdures de contrle de qualit. Intervalle d'ajustement recommand : 2 semaines. Echantillons pour le contrle de qualit : Utiliser des contrles ou des pools de srums avec au moins deux niveaux de concentration (faible ou lev) de T3 libre.

Cartouche ractif T3 Libre (L2F3A2) Avec code-barres. 18,5 ml d'un analogue T3 marqu par un ligand dans un tampon, avec conservateur. 11,5 ml d'anti-ligand marqu la phosphatase alcaline (provenant des intestins de veau) dans un tampon. Stable +2C/+8C jusqu' la date de premption.
L2KF32: 1 cartouche. L2KF33M: 15 cartouches. L2KF36: 3 cartouches. L2KF36M: 30 cartouches.

Avant l'emploi, retirer la partie suprieure de l'tiquette au niveau des perforations en ayant soin de ne pas endommager le code-barres. Retirer le film protecteur situ sur la partie suprieure de la cartouche-ractif ; insrer le couvercle coulissant entre les glissires sur le dessus de la cartouche-ractif. Ajusteurs T3 Libre (LF3L, LF3H) 2 flacons d'ajusteurs ("haut" et "bas") lyophiliss contenant de la T3 libre dans un srum humain prtrait, avec conservateur. Reconstituer chaque flacon avec 4,0 ml d'eau distille ou dsionise. Stable 30 jours aprs reconstitution +2C/+8C ou 6 mois (aliquots) 20C.
L2KF32: 1 jeu. L2KF33M: 3 jeux. L2KF36: 2 jeux. L2KF36M: 4 jeux.

Valeurs attendues
Une tude sur les valeurs de rfrence pour le test IMMULITE 2000 T3 libre a t ralise sur 212 adultes apparemment en bonne sant et a donn un domaine centr a 95% de : 1,8 4,2 pg/ml pour adultes euthyrodiques. Utiliser ces valeurs titre indicatif uniquement. Chaque laboratoire devrait tablir ses propres valeurs de rfrence.

Limites
Le test de T3 libre sert principalement confirmer l'hyperthyrodie et possde une
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IMMULITE 2000 Free T3 (PIL2KF3-13, 2006-09-08)

valeur trs limite dans un contexte d'hypothyrodie. Il peut y avoir des chevauchements entre les domaines de mesure de l'euthyrodie et de l'hyperthyrodie. L'interprtation des rsultats de la T3 libre est complique du fait de la varit de mdicaments pouvant affecter la liaison entre la T3 et les protines vhiculant l'hormone thyrodienne. L'valuation de la condition de la thyrode s'avre particulirement difficile dans le cas de maladies non thyrodiennes graves. tant donn que certains patients appartenant cette catgorie peuvent souffrir d'hypothyrodie primaire concomitante, il est recommand alors de pratiquer un dosage de TSH pour confirmation. Dans certaines maladies rares associes des variations extrmes de la capacit de liaison de l'albumine telles que l'hyperthyroxinmie dysalbuminmique familiale (HDF) un dosage direct de la T3 libre peut donner des rsultats errons. Les auto-anticorps dirigs contre la T3 circulante et les inhibiteurs de liaison avec cette hormone peuvent interfrer avec le 2,3,12 test. On a signal galement que l'hparine ragissait la fois in vivo et in vitro sur les 8 hormones thyrodiennes libres. Il convient donc de ne pas prlever d'chantillons pendant ou aussitt aprs l'administration de cet anticoagulant. tant donn que la dilution perturbe l'quilibre entre la T3 libre et la T3 lie des protines, on ne peut esprer que le test garde sa linarit lors de la dilution. En consquence, il faut s'abstenir de diluer les chantillons lorsque les rsultats de la T3 sont levs. En l'occurrence, si un chantillon donne un rsultat suprieur la limite maximum du domaine de mesure du test, il doit tre simplement report tel quel. Les anticorps htrophiles du srum humain peuvent ragir avec les immunoglobulines faisant partie des composants du coffret et interfrer avec les immunodosages in vitro. [Voir Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Les chantillons provenant de patients frquemment
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exposs aux animaux ou aux produits sriques d'origine animale peuvent prsenter ce type d'interfrence pouvant potentiellement donner un rsultat anormal. Ces ractifs ont t mis au point afin de minimiser le risque d'interfrence, cependant des interactions potentielles entre des srums rares et les composants du test peuvent se produire. Dans un but diagnostique, les rsultats obtenus avec ce dosage doivent toujours tre utiliss en association avec un examen clinique, l'histoire mdicale du patient et d'autres rsultats.

Performances du test
Consulter les tableaux et graphiques pour obtenir les donnes reprsentatives des performances du test. Les rsultats sont donns en pg/ml. (En l'absence de prcision supplmentaire, tous les rsultats ont t obtenus sur des chantillons sriques prlevs sur tubes sans anticoagulant, ni gel, ni activateur de la coagulation). Facteur de conversion : pg/ml 1,536 pmol/l Domaine de mesure : 1,0 40 pg/ml (1,5 61 pmol/l). Sensibilit analytique : 1,0 pg/ml (1,5 pmol/l). Prcision : les valeurs ont t tablies partir de doublets doss dans deux sries diffrentes chaque jour pendant 20 jours soit au total 40 sries et 80 doublets. (Voir le tableau Precision .) Spcificit : le test est hautement spcifique de la T3 libre. (Voir le tableau Specificity .) Effets de la TBG : de la TBG purifie de toute T3 apparente a t ajoute au calibrateur zro (20, 40 et 80 g/ml) puis teste. Les rsultats de la TBG n'ont montr aucune interfrence. (Voir tableau "Effect of TBG".) Effets de l'albumine : De la srum albumine humaine t ajoute aux chantillons tests (10, 20 et 50 mg/ml). (Voir tableau "Effect of Albumin".) Effets des acides gras non estrifis (AGNE) : De l'acide olique a t ajout aux chantillons tests (2,5 et 5,0 mmol/l). Les rsultats n'ont indiqu aucun effet significatif 2,5 mmol/l, mais une
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diminution des valeurs au niveau le plus haut. (Voir tableau "Effect of Nonesterified Fatty Acids ". Le taux des AGNE peut tre plus lev au cours de la grossesse ou lors d'un traitement l'hparine.) Autres composs : les rsultats des chantillons tests aprs ajout de phnylbutazone (10, 100 and 1 000 g/dl), ou phnytone (5, 10, 25, and 50 g/ml), ou salicylate (10, 25, 50 and 100 mg/dl) n'ont indiqu aucun effet pour ces composs. (Voir tableaux " Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin " et "Effect of Salicylate".) Bilirubine : La prsence de bilirubine ne prsente aucun effet sur les rsultats ni sur la prcision du dosage si la concentration ne dpasse pas 200 mg/l. Hmolyse : La prsence d'hmoglobine ne prsente aucun effet sur les rsultats ni sur la prcision du dosage si la concentration ne dpasse pas 384 mg/dl. Effets de la lipmie : Des chantillons fortement lipmiques peuvent interfrer sur le test. (Voir tableau "Lipemia".) Comparaison de mthode : le test a t compar au test IMMULITE T3 libre de DPC sur 105 chantillons de patients (dont les concentrations allaient d'environ 1 14 pg/ml. Voir graphique). Par rgression linaire :
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/ml r = 0,977 Moyennes : 3,5 pg/ml (IMMULITE 2000) 3,0 pg/ml (IMMULITE)

Numero di Codice: L2KF32 (200 test) L2KF33M (3 000 test) L2KF36 (600 test) L2KF36M (6 000 test) Codice del Test: FT3 Colore: acqua

Riassunto e spiegazione del Test


In condizioni fisiologiche normali la triiodotironina (T3) rappresenta circa il 5% degli ormoni tiroidei nel plasma. Bench presente in concentrazioni pi basse della tiroxina (T4), la T3 ha un'attivit metabolica pi elevata, un turnover pi veloce ed una distribuzione pi ampia. Viene prodotta in massima parte attraverso la conversione extratiroidea della T4. Come la T4, circola quasi completamente legata alle proteine carrier della TBG, pre-albumina ed albumina. La T3 libera costituisce solo circa lo 0,25% della T3 totale in circolo. La misurazione della T3 totale attraverso immunodosaggio conta un numero ben preciso di utilizzi. In presenza di T4 libera o totale elevata, i dosaggi della T3 aiutano a confermare una diagnosi di ipertiroidismo. Aumenti anomali di T3 totale possono verificarsi anche quando la concentrazione di T4 totale normale una condizione conosciuta come T3 tossicosi . Nella maggior parte dei casi, i livelli di T3 libera correlano strettamente con i livelli di T3 totale. La T3 totale, tuttavia, dipende non solo dallo stato tiroideo e dalla conversione periferica della T4 in T3, ma anche dalla concentrazione delle proteine leganti l'ormone tiroideo. La T3 libera, d'altra parte, non viene influenzata dalle variazioni di questi carrier. Quindi, gli innalzamenti della TBG tipici della gravidanza, dell'uso di contraccettivi orali, e della terapia estrogenica comportano un innalzamento dei livelli di T3 totale, mentre lasciano immutate le concentrazioni di T3 libera. La concentrazione di T3 libera riflette tipicamente lo stato tiroideo presente nel paziente in maniera pi affidabile di quanto non avvenga per la concentrazione di T3 totale.

Assistance technique
Contacter votre distributeur national. En France distribu par DPC France 90 bd National 92257 La Garenne-Colombes.
Le systme d'assurance qualit de DPC est certifi ISO 13485 (2003).

Italiano
IMMULITE 2000 T3 Libero
Uso: A solo uso diagnostico in vitro con l'analizzatore del sistema IMMULITE 2000 per la determinazione quantitativa di T3 Libero nel siero, quale ausilio nella diagnosi clinica della tiroide.
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Principio del procedimento


Immunodosaggio competitivo a base 25,26 analogica.
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Cicli d'incubazione: 2 30 minuti.

Raccolta del Campione


Poich L'EDTA altera i risultati, non deve essere utilizzato come anticoagulante. I campioni lipemici o grossolamente contaminati possono produrre risultati errati. Si consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifuga per schiarire i campioni lipemici. I campioni emolizzati posson indicare il trattamento non idoneo del campione prima dell'arrivo al laboratorio; per questo motivo, i risultati devono essere interpretati con prudenza. La centrifugazione dei campioni del siero prima che la coagulazione sia completa pu produrre fibrina. Per evitare risultati errati dovuti alla presenza di fibrina, assicurarsi che il processo di coagulazione sia completo prima di centrifugare i campioni. Alcuni campioni, in modo particolare quelli di pazienti sottoposti a terapia con anticoagulanti, possono richiedere tempi di coagulazione pi lunghi. Provette per il prelievo di sangue di produttori diversi possono dare valori differenti, a seconda dei materiali e degli additivi usati, incluso gel o barriere fisiche, attivatori di coaguli e/o anticoagulanti. L'IMMULITE 2000 T3 libero non stato verificato con tutte le possibili variazioni di tipi di provette. Volume richiesto: 100 L di siero. Conservazione: 2 giorni a 28C o 2 mesi a 20C.

conservante. Al momento dell'eliminazione, irrorare con molta acqua per evitare la formazione di azidi metalliche potenzialmente esplosive nelle tubature di piombo e di rame. Substrato Chemiluminescente: Evitare la contaminazione e l'esposizione alla luce solare diretta. (Vedi metodica.) Acqua: Utilizzare solo acqua distillata o deionizzata.

Materiali Forniti
I componenti costituiscono un unico set. Le etichette all'interno della confezione sono necessarie per eseguire i dosaggi. Contenitore di Sferette T3 libera (L2F312) Con codice a barre. 200 biglie coattate con monoclonale di ratto anti-T3. Stabile a 28C fino alla data di scadenza.
L2KF32: 1 confezione.L2KF33M: 15 confezioni. L2KF36: 3 confezioni. L2KF36M: 30 confezioni.

Porta Reagente T3 libera (L2F3A2) Con codice a barre. 18,5 mL di T3 analogico marcato legante in una soluzione tampone, con conservanti. 11,5 mL di fosfatasi alcalina (intestino di vitello) coniugata con antilegante in in un tampone. Stabile a 28C fino alla data di scadenza.
L2KF32: 1 Porta Reagente. L2KF36: 3 Porta Reagenti. L2KF33M: 15 Porta Reagenti. L2KF36M: 30 Porta Reagenti.

Avvertenze e Precauzioni
Per uso diagnostico in vitro. Reagenti: Conservare i reagenti a 28C. Eliminare in conformit alle leggi pertinenti. Seguire le precauzioni generali e manipolare tutti i componenti come se fossero potenzialmente infetti. I materiali derivati dal sangue umano sono stati testati con esito negativo per la sifilide, gli anticorpi anti-HIV 1 e 2, l'antigene di superficie dell'Epatite B e gli anticorpi dell'Epatite C. E' stata aggiunta Sodio Azide a concentrazioni inferiori a 0,1 g/dL come
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Prima dell'utilizzo rimuovere la parte superiore dell'etichetta lungo la perforazione senza danneggiare il codice a barre. Togliere il foglio protettivo dalla parte superiore del flacone. Far scattare nella corretta posizione il coperchio scorrevole lungo le guide del coperchio del reagente. Calibratori T3 libero (LF3L, LF3H) Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno con T3 libero liofila in siero umano processato, con conservanti. Ricostistuire ogni flacone con 4,0 mL di acqua distillata o deionizzata. Stabile a 28C per 30 giorni dopo la ricostituzione a 20C per 6 mesi (aliquotato).
L2KF32: 1 set. L2KF33M: 3 set. L2KF36: 2 set. L2KF36M: 4 set.

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Prima di ricalibrare collocare le etichette giuste (fornite col kit) sulle provette delle aliquote cosicch i codici a barre possano essere registrati dal lettore.

sovrapposizioni di range di valori fra pazienti eutiroidei ed ipertiroidei. L'interpretazione dei risultati relativi alla T3 Libera resa pi difficile da una variet di farmaci che possono influenzare il legame della T3 alle proteine che trasportano l'ormone tiroideo. In gravi malattie non tiroidee, la diagnosi dello stato tiroideo diventa particolarmente difficile. Poich pazienti di questa categoria potrebbero soffrire di ipotiroidismo concomitante primario o di un ipotiroidismo compensatore secondario, si suggerisce di procedere con una immuno-analisi, come esame di conferma in tale contesto. In condizioni rare, abbinate a eccessive variazioni nella capacit legante dell'albumina quali l'ipertiroxinemia disalbuminica familiare (FDH) i dosaggi diretti dell'ormone tiroideo libero potrebbero dare risultati erronei. La circolazione di autoanticorpi anti T3 e la presenza di inibitori della capacit legante ormonale, potrebbero interferire 2, 3, 12 nel dosaggio. E' stato notato che l'Eparina, sia in vivo che in vitro influisce sugli ormoni tiroidei 8 liberi. Pertanto, non si dovrebbero prelevare campioni durante o subito dopo la somministrazione di tale anticoagulante. Poich la diluizione sposta l'equilibrio tra la T3 libera e la T3 legata, ci si attende che la linearit non venga mantenuta durante il processo di diluizione. Pertanto, non si dovrebbero diluire campioni che presentino risultati elevati di T3 libera. In particolare, campioni con risultati che eccedano il limite superiore della range di calibrazione del dosaggio, dovrebbero semplicemente essere riportati come tali. Gli anticorpi eterofili presenti nel siero umano possono reagire con le immunoglobuline presenti nelle componenti del dosaggio provocando un'interferenza con i dosaggi in vitro. [Vedi Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:2733.] Campioni di pazienti routinariamente esposti agli animali o a prodotti derivati da siero di animali possono presentare questo tipo di interferenza causa potenziale di risultati anomali. Questi reagenti sono stati formulati per
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I componenti dei kit sono forniti separatamente


L2SUBM: Substrato Chemiluminescente L2PWSM: Tampone di lavaggio dell'Ago L2KPM: Kit di Pulizia dell'Ago LRXT: Tubi di Reazione (monouso) CON6: 3 livelli, controllo multicostituito Materiali richiesti Acqua distillata o deionizzata; provette; controlli.

Procedura del Dosaggio


Attenzione: per avere prestazioni ottimali, importante effettuare le procedure di manutenzione di routine cosiccome definito nel Manuale dell'Operatore dell'IMMULITE 2000. Vedere il manuale dell'operatore IMMULITE 2000 per: la preparazione, la messa a punto, la regolazione, la prova ed i procedimenti per il controllo della qualit. Intervallo di Calibrazione Consigliato: 2 settimane. Controllo di Qualit: Utilizzare controlli o pool di sieri con almeno due livelli (alto e basso) di T3 libera.

Valori Attesi
E' stato effettuato uno studio su 212 donatori sul range di riferimento per la T3 libera IMMULITE 2000. Dallo studio risultato un valore medio al 95percentile di: 1,8 4,2 pg/mL per pazienti eutiroidei adulti. Detti valori dovrebbero essere considerati solo come suggerimento. Ogni laboratorio dovrebbe stabilire i propri range di riferimento.

Limiti
L'analisi della T3 Libera serve principalmente come esame di conferma per l'ipertiroidismo, ma di valore molto limitato nell'ambito dell'ipotiroidismo stesso. Si potrebbero presentare delle

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minimizzare il rischio di interferenze, tuttavia, possono verificarsi interazioni potenziali tra sieri rari e componenti del test. A scopo diagnostico, i risultati ottenuti da questo dosaggio devono sempre essere utilizzati unitamente all'esame clinico, all'anamnesi del paziente e ad altre indagini di laboratorio.

50 g/mL), o salicilato (10, 25, 50 e 100 mg/dL) non hanno presentato alcun effetto. (Vedere le tavole "Effect of Phenylbutazone", " Effect Phenytoin" e "Effect of Salicylate".) Bilirubina: La presenza di bilirubina in concentrazioni fino a 200 mg/L non ha nessun effetto sui risultati entro il range di precisione del dosaggio. Emolisi: La presenza di emoglobina in concentrazioni fino a 384 mg/dL non ha nessun effetto sui risultati entro il range di precisione del dosaggio. Lipemia: Campioni grossolanamante lipemici possono interferire nel dosaggio. (Vedi la Tabella Lipemia.) Confronto di Metodi: Il dosaggio stato paragonato alla T3 Libera IMMULITE della DPC su 105 campioni di pazienti. (Range di concentrazione: da 1 fino a 14 pg/mL. Vedi grafico.) Con regressione lineare:
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/mL r = 0,977 Valore medio: 3,5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3,0 pg/mL (IMMULITE)

Prestazioni del Dosaggio


Vedi tavole e grafici per i dati rappresentativi. I risultati sono indicati in pg/mL. (Laddove non diversamente specificato, tutti i dati sono stati ottenuti su campioni di siero raccolti in provette senza gel separatore o additivi che favoriscano la formazione di coaguli.) Fattore di Conversione: pg/mL 1,536 pmol/L Range di calibrazione: 1,0 40 pg/mL (1,5 61 pmol/L). Sensibilit analitica: 1,0 pg/mL (1,5 pmol/L). Precisione: Sono stati dosati campioni in doppio in 20 giorni, due sedute al giorno, per un totale di 40 sedute ed 80 replicati. (Vedi la Tabella Precision.) Specificit: Il dosaggio estremamente specifico per la T3 libera. (Vedi la Tabella "Specificity".) Effetti della TBG: Il calibratore zero stato corretto con resina T3-assorbente (20, 40 e 80 g/mL) e dosato. I risultati della TBG non hanno indicato alcuna interferenza. (Vedere la tavola "Effect of TBG".) Effetti dell'Albumina: Sono stati dosati campioni corretti con albumina al carbone in siero umano (10, 20 e 50 mg/mL). (Vedere la tavola "Effect of Albumin".) Effetti degli Acidi Grassi Non Esterificati (NEFA): Sono stati dosati campioni corretti con acido oleico (2,5 e 5,0 mmol/L). I risultati non hanno indicato effetti significativi al valore di 2,5 mmol/L, ma valori decrescenti a livelli pi alti. (Vedere la tavola "Effect of Nonesterified Fatty Acids". In gravidanza o in caso di terapie a base di eparina, si potrebbero presentare livelli di NEFA in crescita.) Altri Composti: Campioni analizzati dopo essere stati corretti con fenilbutazone (10, 100 e 1 000 g/dL), o fenitoina (5, 10, 25 e
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Assistenza Tecnica
All'estero: Si prega di contattare il proprio Distributore DPC Nazionale.
Il Sistema Qualit della Diagnostic Products Corporation certificato secondo le norme ISO 13485:2003.

Portugus
IMMULITE 2000 T3 livre
Utilizao: Doseamento quantitativo da T3 livre em soro. Para uso diagnstico in vitro em conjunto com o analisador IMMULITE 2000, para a avaliao clnica da funo tiroideia. Nmeros de catlogo:
L2KF32 (200 testes) L2KF36 (600 testes) L2KF33M (3 000 testes) L2KF36M (6 000 testes)

Cdigo do teste: FT3. Cor: Verde gua

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Sumrio e explicao do teste


Em condies fisiolgicas normais a triiodotironina (T3) representa perto de 5% das hormonas tiroideias no plasma. Embora esteja presente em menor concentrao do que a tiroxina (T4), a T3 tem maior actividade metablica, um turnover mais rpido e um volume de distribuio maior. A maioria da T3 produzida a partir da converso extratiroidal da T4. Como a T4, a T3 circula quase na totalidade ligada s protenas transportadoras: TBG, pralbumina e albumina. A T3 livre constitui apenas 0,25% da T3 circulante total. O doseamento da T3 total por imunoensaio tem uma grande variedade de utilidades bem definidas. Na presena de valores elevados de T4 total ou livre, o doseamento de T3 total ajuda a confirmar o diagnstico de hipertiroidismo. Um aumento anormal de T3 total tambm poder ocorrer com concentraes normais de T4 total - condio conhecida como toxicose da T3. Na maioria dos casos, os nveis de T3 livre esto correlacionados com os de T3 total. No entanto, os nveis de T3 total no s dependem do estado da tiroide e da converso perifrica da T4 em T3 mas tambm da concentrao das protenas transportadoras das hormonas tiroideias. A T3 livre, por sua vez, largamente insensvel s variaes nestas protenas transportadoras. Assim, as elevaes de TBG tpicas da gravidez, do uso de contraceptivos orais, e da terapia com estrogneos, tm como efeito um aumento nos valores de T3 total, enquanto que a T3 livre se mantm invarivel. A concentrao de T3 livre reflecte tipicamente o estado actual da tiroide de um paciente de forma mais fidedigna do que a de T3 total.

Amostras lipmicas ou totalmente contaminadas podem causar resultados errados. Recomenda-se o uso de uma ultra centrfuga para clarear amostras lipmicas. Amostras hemolisadas podem indicar tratamento incorrecto de uma amostra antes do envio para o laboratrio; portanto os resultados devem ser interpretados com cuidado. A centrifugao de amostras de soro antes da formao completa do cogulo pode resultar na presena de fibrina. Para prevenir resultados errados devido presena de fibrina, certifique-se que a formao do cogulo foi completa antes da centrifugao das amostras. Algumas amostras, em especial as de doentes que recebem terapia anticoagulante podem requerer um maior tempo de formao do cogulo. Os tubos para colheita sangunea de diferentes fabricantes, podem originar diferentes valores, dependendo dos materiais e aditivos, inclundo gel ou barreiras fisicas, activadores do cogulo e/ou anti coagulantes. IMMULITE 2000 T3 Livre no foram ainda testados com todas as possiveis variaes originadas pelos tipos de tubos. Volume de amostra: 100 L de soro Estabilidade: 2 dias a 28C, ou 2 meses a 20C

Precaues
Para uso de diagnstico in vitro. Reagentes: Manter a 28C. Elimine de acordo com as normas aplicadas. Manipule com as devidas precaues todos os materiais capazes de transmitir doenas infecciosas. As matrias primas obtidas de soro humano foram testadas, dando resultados negativos para a sfilis, para os anticorpos do vrus da imunodeficincia humana (HIV) 1 e 2; para o antignio de superfcie da hepatite B (HBsAg) e para os anticorpos do vrus da hepatite C. Azida de sdio foi adicionada como conservante; para evitar acumulaes de azidas metlicas explosivas em canalizaes de cobre e alumnio, os reagentes devem ser rejeitados no esgoto

Princpio do procedimento
Imunoensaio competitivo, baseado em 25,26 anlogo. Ciclos de incubao: 2 30 minutos.

Colheita
O EDTA no deve ser usado como anticoagulante, porque pode afectar os resultados.
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apenas se estiverem diludos e forem lavados com grandes volumes de gua. Substrato quimioluminescente: Evite contaminao e exposio luz directa (ver bula). gua: Utilize gua destilada ou desionizada.

barras possam ser lidos pelo dispositivo de leitura do aparelho.

Componentes do kit fornecidos separadamente


L2SUBM: Substrato quiomioluminescente L2PWSM: Soluo de lavagem L2KPM: Kit de limpeza do pipetador LRXT: Tubos de reaco (descartveis) CON6: Controlo multiparamtrico de trs nveis. Tambm necessrio gua destilada ou desionizada; tubos de amostra; controlos.

Materiais fornecidos
Os componentes formam um conjunto uno e indivisvel. As etiquetas no interior das caixas so necessrias para o ensaio. Embalagem de prolas de T3 Livre (L2F312) Com cdigo de barras. Contm 200 prolas revestidas com anticorpo monoclonal de rato anti-T3. Estvel at a data de validade a 28C.
L2KF32: 1 embalagem. L2KF33M: 15 embalagens. L2KF36: 3 embalagens. L2KF36M: 30 embalagens.

Procedimento do doseamento
Tr em ateno que para obter um desempenho ptimo, importante efectuar todos os procedimentos de manuteno de rotina conforme definido no Manual de Operador do IMMULITE 2000. Consulte o Manual do Operador de IMMULITE 2000 para para instrues sobre preparao, ajuste, doseamento e procedimentos de controlo de qualidade. Intervalo entre ajustes aconselhvel: 2 semanas. Amostras de controlo de qualidade: utilize controlos ou "pools" com, pelo menos, dois nveis (alto e baixo) de T3 livre.

Embalagem de reagentes de T3 Livre (L2F3A2) Com cdigo de barras. 18,5 mL de anlogo de T3 rotulado com ligando em tampo, com conservante. 11,5 mL de fosfatase alcalina (de intestino de vitela) conjugada com anti-ligando em tampo. Estvel at a data de validade a 28C.
L2KF32: 1 embalagem. L2KF33M: 15 embalagens. L2KF36: 3 embalagens. L2KF36M: 30 embalagens.

Antes de utilizar, retire a etiqueta de proteco da tampa deslizante; levante a tampa,remova o remanescente da etiqueta com o cuidado de no danificar o cdigo de barras. Remova o selo de alumnio do topo da embalagem, encaixe a tampa deslizante nas ranhuras e verifique se a tampa desliza. Ajustes T3 Livre (LF3L, LF3H) Contm dois frascos (nvel alto e baixo) de T3 livre liofilizada em matriz de soro humano, com conservante. Reconstituir cada frasco adicionando 4,0 mL de gua destilada ou desionizada. Estvel por 30 dias aps reconstituio a 28C, ou 6 meses (em alquotas) a 20C.
L2KF32: 1 conjunto. L2KF33M: 3 conjuntos. L2KF36: 2 conjuntos. L2KF36M: 4 conjuntos.

Valores de Referncia
Para determinar a gama de referncia do T3 Livre IMMULITE 2000, foi efectuado um estudo com 212 indivduos, aparentemente saudveis. Os resultados obtidos foram os seguintes com intervalo de confiana de: 1,8 4,2 pg/mL 95% para eutiroidismo em adultos. Estes valores devem ser considerados apenas como directrizes. Cada laboratrio deve estabelecer os seus prprios valores.

Antes de realizar qualquer ajuste, coloque as etiquetas da alquota apropriadas (fornecidas com o "kit") nos tubos de amostra de forma a que os cdigos de

Limitaes
O doseamento de T3 livre funciona prioritariamente como um teste de confirmao para o hipertiroidismo e possui um valor limitado no contexto de
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hipotiroidismo. Pode haver sobreposio entre os valores de eutiroidismo e hipertiroidismo. A interpretao dos resultados de T3 livre complicada por uma variedade de medicamentos que podem afectar a ligao da T3 s protenas de transporte da hormona tirideia. Em doenas severas no tirideias, a avaliao do estado da tiride torna-se particularmente difcil. J que alguns pacientes nesta categoria podem sofrer de hipotiroidismo primrio concomitante ou de um hipotiroidismo secundrio compensatrio, o imunoensaio de TSH recomendado como um teste de confirmao neste contexto. Em situaes raras associadas com variaes extremas na capacidade de ligao albumnica tais como hipertiroxinemia disalbuminemica familiar (FDH) o doseamento directo da hormona livre da tiride pode produzir resultados enganadores. Autoanticorpos em circulao para a T3, e inibidores de ligao de hormonas, podem 2,3,12 interferir com o doseamento. Estudos efectuados reportam que a heparina possui efeitos tanto in vivo como 8 in vitro em hormonas livres tirideias. Portanto, as amostras no devem ser colhidas durante ou logo aps a administrao deste anticoagulante. Como a diluio altera o equilbrio entre a T3 livre e o ligado s protenas, no de esperar que o doseamento mantenha linearidade sob condies de diluio. Conseqentemente, no se devem realizar tentativas de diluir amostras com resultados altos de T3 livre. Em particular, qualquer amostra com um resultado acima do limite superior da calibrao do doseamento deve simplesmente ser reportado como tal. Os anticorpos heterfilicos no soro humano podem reagir com as imunoglobulinas presentes no ensaio, causando interferncia com os imunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Amostras de doentes expostas em rotina a produtos ou soros de animais podem demonstrar este tipo de interferncia, potencial causador de
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resultados anmalos. Estes reagentes foram formulados para minimizar o risco de interferncia, contudo podem ocorrer potenciais interaces entre soros (raros) e componentes do teste. Para fins de diagnstico, os resultados obtidos neste ensaio devem ser sempre analisados em combinao com o exame clnico, histria de medicao do doente e outros achados que possam correlacionar.

Caractersticas do ensaio
Ver tabelas e grficos para dados representativos da performance do doseamento. Os resultados so apresentados em pg/mL. Salvo referncia em contrrio, todos os dados provm de amostras de soro colhidas em tubos sem anticoagulantes, barreiras de gel ou aditivos promotores da coagulao. Factor de converso: pg/mL 1,536 pmol/L Calibrao: 1,0 40 pg/mL (1,5 61 pmol/L). Sensibilidade Analtica: 1,0 pg/mL (1,5 pmol/L). Preciso: As amostras foram doseadas em duplicado durante 20 dias, 2 ensaios por dia, perfazendo um total de 40 ensaios e 80 rplicas. (Ver a tabela de "Precision".) Especificidade: O doseamento especfico para a T3 livre. (Ver tabela de "Specificity".) Efeito de TBG: O calibrador zero do doseamento foi adicionado com resina livre de T3 (20, 40 e 80 g/mL) e doseado. Os resultados de TBG no apresentam nenhuma interferncia. (Ver tabela "Effect of TBG".) Efeito de Albumina: Amostras adicionadas com albumina de soro humano absorvida por carvo (10, 20 e 50 mg/mL) foram doseadas. (Ver tabela "Effect of Albumin".) Efeitos de cidos gordos no esterificados (NEFA): Amostras adicionadas com cido olico (2,5 e 5,0 mmol/L) foram doseadas. Os resultados no apresentaram nenhum efeito significativo a 2,5 mmol/L, mas sim um decrscimo de valores num nvel superior. (Ver tabela "Effect of Nonesterified Fatty Acids. Nveis
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elevados de NEFA podem ser encontrados na gravidez e durante teraputica com heparina.) Outros Compostos: Resultados para amostras doseadas aps serem adicionadas com fenilbutazona (10, 100 e 1 000 g/dL), ou fenitona (5, 10, 25, e 50 g/mL), ou salicilato (10, 25, 50 e 100 mg/dL) no apresentaram nenhum efeito decorrente destes compostos. (Ver tabelas "Effect of Phenylbutazone, "Effect of Phenytoin e "Effect of Salicylate.) Bilirrubina: A presena de bilirrubina em concentraes at 200 mg/L no tem efeito em resultados, dentro da preciso do ensaio. Hemolise: A presena de hemoglobina em concentraes at 384 mg/dL no tem efeito em resultados, dentro da preciso do ensaio. Lipemia: Amostras altamente lipmicas podem interferir com o doseamento. (Ver Tabela Effect of Lipemia.) Comparao de mtodos: O doseamento foi comparado ao T3 Livre IMMULITE da DPC em 105 amostras de doentes. (Zona de trabalho: aproximadamente 1 a 14 pg/mL. Ver grfico.) Regresso linear:
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/mL r = 0,977 Mdias: 3,5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3,0 pg/mL (IMMULITE)

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