GENETICA FORENSE

La informacin gentica proviene la mitad del padre y la otra mitad de la madre Los caracteres se expresan en las nuevas generaciones segn el Principio de Segregacin Conceptos de: Alelo, dominancia y recesividad

Anlisis del cromosoma Y Se han creado cebadores especficos para regiones del cromosoma Y que amplifican secuencias solo heredadas por parte paterna. Por ello, este tipo de anlisis slo sirve para comparar familiares por parte del padre y varones.
Anlisis mitocondrial Se usa en muestras muy degradadas, ya que el DNA mitocondrial posee ms copias que el nuclear. Se amplifican las regiones HV1 y HV2 y se comparan siempre con familiares por parte materna ya que las mitocondrias son herencia exclusiva de la madre. Los cientficos forenses amplan la regin HV1 y HV2 del ADNmt y luego cada regin es secuenciada en un nico nucletido y se compara las diferencias con la referencia.

DNA no Codificante y Regiones Hipervariables:

Se denomina tambin no esencial, pero para la investigacin forense es esencial por sus caractersticas y particularidades que lo convierten en un instrumento para la individualizacin de los seres humanos.

GENOTIPO
El ADN de cada persona proviene, mitad de su padre y mitad de su madre. Cada persona tiene dos alelos para cada locus (Marcador), uno en la regin D5S818 del cromosoma de la madre y otro en esa misma regin pero del cromosoma del padre.

POLIMORFISMO Variabilidad dentro de un fragmento de ADN. A mayor cantidad de alelos, mayor polimorfismo y mayor poder de discriminacin.

Variaciones de la longitud del alelo VNTR en seis individuos

 RFLP: variacin en la secuencia de DNA entre individuos en que

se conoce por la distinta longitud de los fragmentos de restriccin VNTR: nmero variable de repeticiones en tandem. Locus cromosmico en el que el nmero de repeticiones de una determinada secuencia difiere en individuos distintos o en los dos cromosomas homlogos de un individuo diploide SSLP: polimorfismo de longitud de secuencia simple. Existencia en una poblacin de individuos que presentan diferente nmero de copias de una secuencia de DNA simple y corta en un locus cromosmico SNP: polimorfismo de un nico nucletido. Variacin natural en un nico par de nucletidos en una posicin determinada del genoma de dos o mas individuos

Polimorfismos de tamao:
Teniendo en cuenta la alta variabilidad de

estos sistemas Jeffreys sostuvo que la probabilidad de encontrar dos individuos con el mismo perfil multilocus de ADN, en el planeta era casi nula por lo que se denomino al sistema el DNA fingerprinting o huellas de ADN y lo propuso como una marca individual que podra ser utilizado con fines de identificacin de personas.

DNA fingerprinting

Marker
Suspect A Semen (clothing) Suspect B Marker Vaginal swab

Victim
Control DNA

Marker No DNA

PORQUE USAR STRs?

1. Gran nmero de STRs existentes (3-4n). 2. Gran variabilidad: Por el gran nmero de alelos y la alta heterocigocidad. 3. Loci de STRs estn distribuidos en todo el genoma. 4. Fcil interpretacin de resultados. No dudosos. 5. Uso de PCR. 6. Muestras degradadas y antiguas.

MICROSATLITES MS UTILIZADOS COMO MARCADORES GENTICOS

SISTEMA O LOCUS UNIDAD REPETIDA LOCALIZACIN CROMOSMICA

FGA TPOX
ACPP F13B CSF1PO F13A1 LPL THO1

(TTTC) n (AATG) n
(AAAT) n AAAT (AGAT) n (AAAT) n (AAA) n (AATG) n

4q28 2p23-pter
3q21-qter Iq31-q32.1 5q 33.3-q34 6p24-p25 8p22 11p 15.5

D16S539 D3S1744 VWA D12S1090 FPS

AGAT AGTT (AGAT) n (TAAT) n (AAAT) n

16q24-qter 3q24 12q 13.3-q13.2 12q 12 15q25-ter

GENOMA MITOCONDRIAL
Secuenciado por Anderson y

cols. en 1981 Representa el 1-2% del DNA celular. Localizado en la matriz mitocondrial. Presente en mltiples copias por organela. Constituido por un solo cromosoma. Molcula circular de doble cadena. No se encuentra asociado a histonas.

GENOMA MITOCONDRIAL
No es genticamente autosuficiente. Mide 5 um de longitud. Tamao: 16569 pb. Codifica 37 genes. Posee cdigo gentico

propio. 10% de genoma no codificante. Vara en longitud en las diferentes especies.

Caractersticas Tamao Nro molculas distintas Nro copias x cel. Organizacin Nucleosoma Nro de genes Densidad
% DNA codif.

Nuclear 6x109 pb 23 mujer 24 hombre 2 lineal si 50000 a 100000 1gen cada 30 a 60Kb.
2%

Mitocondrial 16569 pb 1 crs circular 1000 0 mas Circular No 37 1 gen cada 0.45 Kb
95%

Presencia de intrones Secuencias rep. Herencia

si Mayor de 1 por crs sufre meiosis mendeliana

No No Va materna

Conclusin DNAmt
anlisis antropolgico como gentico

forense. Se presenta en grandes cantidades. menor riesgo de degradacin mayor tasa de mutacin. Herencia matrilineal Permite estudios de evolucin y patrones de migracin a lo largo de la historia. La heteroplasmia se debe tener en cuenta a la hora de emitir un dictamen.

Cromosoma Y
-Estructura: Cromosoma pequeo -Parte del brazo largo: Heterocromatina -Eucromatina: 30Mb, mayor inters gentico (Regin NRY: non-recombinant Y) -Hereda de padre a hijo varn en bloque -Partes distales (PAR1 y PAR2) homlogas con el X y recombinan (1 cada meiosis) -6 x 107 pares de bases

Cromosoma Y

DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13 DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24, DYS391=10, DYS393=13

Tcnica o Procedimiento por medio del cual se fabrican copias de fragmentos de ADN (Generalmente hasta 108 veces). Concebido por Kary Mullis en 1983.

 Tres pasos: 1. Desnaturalizacin del DNA 2. Alineamiento de los Primers o cebadores 3. Extensin de los primers por la Polimerasa

Reaccin en cadena de la polimerasa.

 VENTAJAS
1. Amplificacin de ADN en indicios muy pequeos y afectados por procesos degradativos y contaminantes. 2. Facilidad de interpretacin de resultados 3 Rapidez 4. Disminucin probabilidad de error

Electroforesis.

Analisis de ADN

ANLISIS DE ADN MINISATLITES

Coincidencia de las bandas del hijo con el padre que no

hubieran sido detectadas en la madre.

Madre __ Hijo __ P.padre 1

P.padre 2

__ __

__ __

__
Desventaja: los clculos de probabilidad de paternidad se

realizan sobre supuestos genticos no comprobados en cada uno de los diferentes loci detectados.

ANLISIS DE PATERNIDAD POR MICROSATLITES

SISTEMAS P. PADRE MADRE HIJO

STRs
D16S539 9-11 5-10 9-10

D7S820
D13S317

10-11
8-12

10-10
11-12

10-10
11-12

FESPS
TPOX

10-10
9-11

10-11
8-11

10-10
11-11

TH01
FGA

7-7
13-13

6-7
7-8

6-7
7-13

INCLUSIN de la paternidad con un 99.999999% de confiabilidad.