FISIOLOGIA LEUCOCITARIA Cmo clasificamos a los leucocitos? Hay varias posibilidades de clasificarlos: 1.

- por la presencia de grnulos: granulocitos (neutrfilo, basfilo, eosinfilo) y agranulocitos (monocitos y linfocitos). 2.- por su origen: mieloide o linfoide. 3.- por las caractersticas del ncleo: Mononucleares y polimorfonucleares. 4.- segn su funcin: si participan en procesos fagocitarios o si participan en procesos inmunitarios. Dentro de los Mononucleares, tenemos los linfocitos y los monocitos, que presentan un citoplasma prcticamente libre de todo, excepto en algunos caso en que pueden aparecer granulaciones azurofilas pero son bastante pocas y no tienen mayor significancia ni qumica ni morfolgicamente.

Dentro de los granulocitos, tenemos las 3 series: neutrfilos, eosinfilos y basfilos. Que se diferencian en las granulaciones especficas, que les dan afinidad tintorial que nos permiten diferenciarlos morfolgicamente, adems estas granulaciones los hacen diferenciarse en su funcin. - Neutrfilo: sus granulaciones tienen pH neutro y se tien poco con la eosina y el azul de metileno.

- Basfilo: sus granulaciones se tien a pH cidos (acurdense que las tinciones actan por contraste, lo acido se tie con lo bsico y viceversa), se tien azul/purpura con el colorante bsico azul de metileno.

- Eosinfilos: sus granulaciones tienen pH bsico y se tien rojos con el colorante acido eosina.

La funcin principal de la clula granulocitica es la defensa del organismo en infecciones, principalmente bacterianas, son los primeros que acuden a la defensa del organismo. Estos granulociticos tienen patrones cinticos de proliferacin, diferenciacin y divisin similares, solo difieren en sus funciones y en su nmero.

CINTICA DE LOS NEUTRFILOS La dividimos en 3 etapas: 1.- Fase medular: se refiere a la formacin en medula osea a partir de las unidades formadoras de colonias de colonias granulociticas (UFC-G) y a su regulacin por medio del control local del estroma (microambiente inductivo) y del control que ejercen las molculas reguladoras de largo alcance como son los factores de crecimiento hematopoytico e interleuquinas. Los juveniles, baciliformes y segmentados en mdula sea constituyen el pool de reserva medular, que en caso de ser necesario es rpidamente liberado a circulacin. 2.- Fase sangunea: una vez que pasan de medula sea a la sangre, hay un reingreso poco significativo en medula sea. Dentro de este compartimiento tenemos dos pool, el pool circulante y el pool marginal. El pool marginal son los neutrfilos que estn adheridos al endotelio de los vasos y se desmarginan rpidamente en situaciones de estrs y el ejercicio, y con liberacin de adrenalina como en un susto. Estos dos pool pueden ir cambiando, los neutrfilos que estn en el pool circulante pueden pasar a al pool marginal y viceversa. El tiempo medio de los neutrfilos en la circulacin es de 7 horas luego de lo cual emigran a los tejidos y no regresan al lecho vascular, es decir que tiene un flujo unidireccional. 3.- Fase tisular: una vez que los neutrfilos pasan a los tejidos, se van a los pulmones, cavidad oral, tubo digestivo, hgado y bazo. Se pueden perder en las superficies mucosas o ser secuestrados por es sistema retculo endotelial. Su funcin en los tejidos normales es incierta, aun no est claro que pasa. La vida media de los neutrfilos en circulacin es aproximadamente de 7 horas, lo cual despus pasan a los tejidos y ah es de 1 a 5 das.

La produccin de neutrfilos es muy alta, bsicamente por el alto recambio que tienen, la vida media de 7 horas es muy corta por lo tanto estn constantemente producindose y la produccin diaria es de 16 x clulas/Kg/24hrs, lo que es una brutalidad. Aqu tenemos como un resumen de todos los pool que tenemos en medula osea, el pool mittico, de maduracin, el pool de reserva medular: juveniles, baciliformes y segmentados, y tenemos el pool circulante y el marginal que pasan al tisular. ETAPAS DE MADURACION

Juveniles, baciliformes y segmentados que estn en medula sea constituyen la reserva granulocitica medular.

En condiciones normales, con cada neutrfilo que est en circulacin hay de 10 a 15 precursores suyos en medula sea. En condiciones en que se requiere rpidamente, salen a circulacin como en caso de infeccin, por ejemplo, donde aumentan mucho los neutrfilos y los leucocitos en general, se produce una leucocitosis y (no le escucho bien) se desmarginan al marginal. Importante del pool marginal, en qu sentido, como se liberan en casos de estrs o de aumentos de adrenalina y el paciente sufre una puncin traumtica, hay que tener ojo con los recuentos porque saldr alterado, si hay puncin traumtica, se debe pedir nueva muestra y que sea lo ms tranquilo posible, esto ocurre por desmarginacin del pool marginal. FUNCIONES DE LOS NEUTROFILOS Cules son las funciones de los neutrfilos? Bsicamente en la defensa del organismo pero adems participan en las respuestas inflamatorias, forman parte de la inmunidad innata y son los primeros es actuar frente a un agente extrao. Los neutrfilos son los ms abundantes en sangre perifrica de los leucocitos en general. Participan en la defensa del organismo frente a infecciones pigenas (bacterianas) por medio de la fagocitosis y posterior destruccin del agente extrao. En los neutrfilos, los grnulos primarios o azurofilos que se forman en el estadio de promielocito tiene agentes microbicidas, proteasas y hidrolasas acidas. *Agentes microbicidas: la mayora afectan a la membrana de las bacterias, pueden afectar protenas, lpidos, distintas cosas de la membrana por su mecanismo de accin. Las defensinas y los agentes microbicidas permeabilizantes pertenecen a un grupo llamado perforinas. La mieloperoxidasa transforman el perxido de oxigeno en acido hipocloroso, que es el ms potente microbicida que tienen los neutrfilos. El perxido de oxigeno (no ser de hidrogeno? Pero dice oxigeno la profe) se forma a partir del in superoxido que se forma con la (algo)fosfato reducido oxidasa que por la oxido dimutasa se transforma en perxido de oxigeno. La defensina es un potente agente microbiano y ataca a bacterias, virus, hongos. Es como el ms completo porque el agente microbicida permeabilizante tiene gran especificidad por las bacterias gram negativas, no tanto as con las gran positivas ni hongos. Lisosima y protenas catinicas *Las proteasas (elastasa y catepsina G) y las hidrolasas (N-acetilglucoronidas, catepsinas B y D, glucoronidasa y -glicrofosfatasa) participan en la destruccin final del agente extrao que entra al organismo. Dentro de los granulos secundarios o especficos que se forman en el estadio de mielocito tenemos lisosimas de nuevo, colagensas que degradan colgeno de huesos, cartlagos y tendn, estos productos de degradacin tiene efecto quimiotactico sobre los neutrfilos, macrfagos y linfocitos. Y dentro de las otras sustancias importantes tenemos: la lactoferrina que secuetra el hierro libre para no dejarlo a disposicin de las bacterias que pueden haberse salvado del primer ataque de los neutrfilos y adems sensibiliza las membranas para el ataque de linfocitos. El citocromo b que es parte de una (algo)fosfato reducido oxidasa que es la que nos va a formar la unin superoxido a partir del cual finalmente vamos a obtener el acido hipocloroso a partir de la mieloperoxidasa. Histaminasa que degrada la histamina que generalmente liberan los basfilos. Protena ligante de vitamina B12 Activador del plasminogeno Complejo CD11/18

Cul es el proceso de eliminacin que siguen los neutrfilos? Consta de las siguientes etapas: adhesin, migracin, fagocitosis, degranulacin y metabolismo oxidativo, estas dos ltimas favorecen la destruccin final. - Adhesin: primero, para que el neutrfilo llegue al sitio de infeccin es requisito que haya inflamacin, se produce una vasodilatacin por efecto de: histamina, serotonina, fraccin C3a y C5a del complemento y trombina; disminuye el flujo sanguneo y los neutrfilos se aproximan al endotelio. Luego expresan molculas de adhesin transitorias (L-selectinas) que se unen a molculas de adhesin del endotelio que son las E y P-selectinas y se produce un rolling, que es un rodamiento del neutrfilo por el vaso por el endotelio. Hay un cambio de velocidad y hay un cambio morfolgico desde una esfera inerte para a ser una esfera ameboide. Migracin: luego migran a los tejidos y eso lo hacen mediante diapdesis, para ello los neutrfilos aproximan los grnulos a sus bordes citoplasmaticos (nos los eliminan ni liberan solo los aproximan a sus bordes) y eso manda seales al endotelio para que separe un poquitito, adems hay factores quimiotacticos que tambin tienen influencia en esta apertura del endotelio para que el neutrfilo pueda pasar a los tejidos. *La quimiotaxis es el movimiento de los neutrfilos hacia el sitio de la infeccin y esto ocurre por varios factores para los cuales los leucocitos presentan receptores, dentro de los receptores hay: - protenas del complemento (C3a y C5a) que participaban en la vasodilatacin. - para pptidos y lpidos de las bacterias - factor plaquetario 4 (FP4) - leucotrieno B4 (metabolismo aa) - quimioquinas (IL8) Son muchos los receptores que tiene. La respuesta leucocitaria a los factores quimiotcticos es regulada positiva o negativamente por estimulos fisiolgicos y farmacolgicos como las citoquinas TNF e INF favorecen la quimiotaxis. Fagocitosis, Degranulacin y secrecin: despus de que llegan a los tejidos, vamos a ir a atacar al agente extrao. En primer lugar, previo a fagocitar el agente extrao debe ser recubierto o bien por IgG o por la fraccin C3bl del complemento que como una mquina que los deja ms sensible a los neutrfilos. Aqu tenemos el receptor del neutrfilo que es un receptor de la porcin Fc de la IgG, es el anticuerpo que esta opsonizado con IgG, este es el primer paso. Una vez que este neutrfilo tiene a este agente extrao la membrana tiende a extenderse y se empieza a juntar, hasta que forma una verdadera vescula y se junta. Se forma lo que se llama fagosoma que ingresa al interior de la clula.

Una vez formado el fagosoma, se produce la liberacin de los grnulos, primero los especficos y despus los azurofilos. Este primer mecanismo es no oxidativo, despus se liberan los grnulos azurofilos que liberan toda esa serie de enzimas proteolticas para ir a destruir al agente extrao. Y finalmente se destruye.

Aqu est el proceso que sigue la fagocitosis. El neutrfilo est transitando tranquilamente, hasta que tiene un estimulo quimiotactico, sale a los tejidos, migra hacia donde estn las bacterias, las engloba, forma el fagosoma y las mata. Resumiendo estn en el endotelio, se marginan, diapdesis (pasan a los tejidos), quimiotaxis (se van dirigiendo a donde estn las bacterias), se produce la adherencia, se forma el fagosoma, hay una secrecin intrafagosomal de todos los grnulos y la apoptosis porque se destruye la clula. EOSINOFILOS Son escasos en sangre perifrica, de 1 5%. 100 veces ms abundantes a nivel de los tejidos principalmente piel, pulmn y tracto gastrointestinal que son las maderas (eso escuche) epitelial del organismo. Su vida media en sangre perifrica es de alrededor de 18 horas y en tejidos de 6-10 dias. Los factores de crecimiento factor estimulador de colonias granulocitico monocitico (CSF-GM), IL3, IL-5, producidos por los linfocitos T influencian el desarrollo de los eosinfilos, principalmente la IL-5 como es la maduracin, activacin y previene la apoptosis en los eosinfilos, y expresan CD16 y CD32. Funcionan en forma similar a los neutrfilos, pero tienen otra caracterstica: atacan bsicamente a los helmintos. En cuanto a las granulaciones tenemos: - Protena bsica mayor: que es toxica para parasitos y clulas. - Hidrolasa acida, peroxidasa, fosfolipasa, catepsina: principalmente atacan membranas. - Protena cationica eosinofilica (ECP), neurotoxina derivada del eosinfilo (EDN) y protena X del eosinfilo (EPX): son potentes neurotoxinas que generalemente atacan helmintos. Por esto encontramos un aumento en parasitosis, porque los eosinfilos atacan bsicamente a los helmintos. Dentro de los granulos pequeos tenemos: - Arilsulfatasa, peroxidasa y fosfatasa acida. FUNCIONES DE LOS EOSINOFILOS 1.- fagocitaria: actan de manera similar a los neutrfilos en lo pprofundo de los tejidos. 2.- antiparasitaria: destruyen helmintos por medio de la generacin de potentes oxidantes y la liberacin de protenas catinicas que son neurotoxinas. 3.- participan en algunas condiciones inflamatorias: reacciones alrgicas, asma, algunas enfermedades cardiacas, hay un aumento de eosinfilos.

4.- disminuyen las reacciones de hipersensibilidad e inflamatoria: porque modulan la reaccin que se produce por la degranulacin de basfilos y mastocitos que liberan grnulos de histamina. BASOFILOS Su maduracin en medula sea es alrededor de 7 das, tiene una vida media similar a los eosinfilos y son escasos en sangre perifrica de 0-1%. Los constituyentes principales que tienen son: 1.- dentro de las especficas: - histamina, sumamente importante porque es parte de reaccin inflamatoria. - Heparina - peroxidasa - y tienen un factor quimiotactico eosinofilico-A (ECF-A) qe lo libera y atrae eosinfilos. El eosinfilo tiene una caracterstica de modular la respuesta de los eosinfilos, es un feed-back negativo es decir que el mismo basfilo se esta frenando, llama al eosinfilo para que module su respuesta. 2.- dentro de los constituyentes celulares: - sustancia analtica de reaccin lenta (SRS-A) - factor activador plaquetario (PAF) 3.- y sus funciones: - fagocitosis - reacciones de hipersensibilidad inmediata - reacciones de hipersensibilidad tarda Qu pasa con los basfilos cuando pasan a los tejidos? Se transforman en clulas cebadas o mastocitos que estn en todos los tejidos incluyendo medula sea, timo y bazo. Y algo muy importante es que presentan enzimas proteolticas y serotonina. El basfilo no tiene serotonina. MONOCITO Se forman en medula osea, son transportados por la sangre, donde se distribuyen en un pool circulante y un pool marginal en una razn de 1(circulante):3,5 (adosaso al epitelo), con una vida media promedio de 8,4 horas, luego de lo cual migran a los tejidos donde se transforman en histiocitos o macrfagos, donde tienen una vida media de meses. Monocito + Macrfagos = sistema fagocitario mononuclear S.R.E Dentro de este sistema fagocitario mononuclear, tenemos las clulas de kupffer del hgado. Son parte integral tanto de la inmunidad humoral como de la mediada por clulas. FUNCIONES DEL SISTEMA FAGOCITICO MONONUCLEAR 1.- fagocitosis: de bacterias, desechos celulares, clulas senescentes o viejas. 2.- procesamiento de antgenos: presentan los antgenos o la informacin antignica a los linfocitos T y B. por lo tanto son mediadores de la respuesta inmune celular y humoral. 3.- respuesta inmune mediada por clulas: actan como efectores (ej. Citotoxicidad) 4.- sntesis de molculas bioactivas: como enzimas, componentes del complemento (C), protenas de unin, factores de la coagulacin, citoquinas y factores de crecimiento, factores angiognicos y lpidos bioactivos. * Sus mltiples funciones principales son: - defensa del husped - control de la hematopoyesis - vigilancia del medio ambiente interno del cuerpo.

LINFOCITOS Desde el punto morfolgico los podemos dividir en 3 tipos: Generalmente son B y/o T. Que tienen algunos grnulos azurofilos. Genralmente son T. Que van en respuesta a alguna infeccin viral, se les llama tambin virocitos. Pueden ser cualquiera de las dos estirpes. *pero no se queden con que si es mediano es T, nosotros no podemos decir eso, porque morfolgicamente son indistinguibles, se diferencian por marcadores. Para nosotros son linfocitos. FUNCION DE LOS LINFOCITOS Se les divide en: - linfocito B, son del 10-20% entre los linfocitos que circulan en sangre perifrica. Inmunidad adquirida de tipo humoral, produccin de anticuerpos. - linfocitos T que son entre el 80-90%. Inmunidad adquirida de tipo celular. - linfocitos NK que no expresan marcadores de clulas B oT. Son indistinguibles morfolgicamente y participan activamente en la respuestainmune frente a diversos antgenos. Los linfocitos andan circulando, pero para activarse se unen con receptores especficos de la celula que activa al linfocito por un delicado proceso bioqumico que implica transduccin de seales al interior de la celula, generacin de segundos mensajeros y fosforilacion de protenas; como consecuencia de esto el linfocito tiene un proceso de transformacin blastica lo que ocaciona una serie de cambios estructurales y bioqumicos en la clula misma. Cul es la diferencia de la repsuesta celular inmune de los linfocitos T y B, dondeparticipan los macrofagos? El macrfago capta las bacterias y presenta los antgenos en su superficie, en el caso de que sean los linfocitos T, el linfocito T recnoce el antgeno y va a activar al linfocito B ah necesitamos respuesta humoral. Qu pasa con el linfocito B? con el linfocito B igual el macrfago capta la bacteria, presenta los antgenos y el linfocito B se transforma en un plasmacell que directamente va a empezar a producir anticuerpos para ir a atacar a las bacterias. Los plasmacell tienen un gran contenido de inmunoglobulinas y producen anticuerpos en gran cantidad.

Linfocitos T

Linfocitos B