Universidad Andrs Bello Facultad de Ciencias de la Salud Departamento de Ciencias Biolgicas Laboratorio de Biologa Celular BIO 035

TRABAJO PRCTICO N 3 Microscopa

Alumnos: Nicolle Rey Andreia Villarroel Yaritza Torres . Seccin: 12 Profesores: Gabriela Oleas Mauricio Valdivia Fecha de entrega: 03/05/2013

2013

ndice

1234567-

Introduccin Objetivos Materiales y mtodos Resultados Discusin Conclusin Bibliografa

Introduccin

La clula es la unidad fundamental de la vida debido a este concepto, nace la necesidad por el estudio de la composicin y la estructura de sta. El trmino fue utilizado por primera vez por Hooke, cuando observo un trozo de corcho en un microscopio (1). El tamao y complejidad de los distintos tipos de clulas dificulta su observacin a simple vista, y su estudio fue posible gracias al microscopio. El microscopio es un aparato que permite observar pequeos detalles de una muestra; adems, es un sistema de lentes montados en un tubo (1), que forman imgenes pticas aumentadas a travs de lentes convergentes.

Objetivos

En el prctico de laboratorio que realizaremos llamado Microscopa . Aprenderemos: 1.-las partes del microscopio. 2.-las funciones del microscopio. 3.-Ccomo utilizar un microscopio. 4.- tcnicas de uso del microscopio. 5.-preparar material para ser observado en un microscopio. Lo que se busca conseguir en este prctico es demostrar el funcionamiento del microscopio y observar diferentes tipos de clulas y poder identificar sus comportamientos, estructuras, y sus diferencias.

Materiales y mtodos

Lo primero que realizamos fueron los clculos de poder de resolucin, lmite de resolucin observamos las caractersticas del microscopio como la aperturas numricas del lente, condensador e interfase de aire.

Una vez calculado todo lo necesario de los microscopios pticos usados, realizamos actividad para relacionarnos con el microscopio y sus partes con la observacin de una letra "e" impresa puesta en un portaobjetos. Luego colocamos un papel milimetrado en el portaobjeto, lo mojamos con agua destilada y lo tapamos con un cubreobjetos para as observarlo y calcular el dimetro del campo visual de los dems lentes objetivos.

Para la observacin de muestras biolgicas fijas permanentes, ocupamos las muestras ya asignada y fijada que en este caso era intestino delgado de rata y frotis sanguneo. Para continuar con nuestras actividades preparamos una muestra fresca, colocando una gota de la muestra A (tomando el resguardo de hacer esto con guantes) en un portaobjetos y adems cubrindola con un cubreobjetos para as observarla a distintos aumentos. Luego repetimos l mismo procedimiento de la muestra A, pero ahora con una muestra B.

Continuando con la observacin de muestras frescas tomamos una hoja de la planta de Elodea sp, para ponerla en un portaobjeto y cubrirla con el cubreobjetos para as observar aumentando gradualmente las estructuras de esta planta.

Por ultimo realizamos la observacin de muestras vegetales con y sin tincin, para esto ocupamos una cebolla, colocando una gota de agua destilada con la pizeta en el cubreobjetos sobre esta pusimos una capa muy delgada de cebolla, la cubrimos y observamos. Luego esta misma muestra la teimos con azul de metileno para ahora observar con mayor determinacin las estructuras de la cebolla.

Resultados
Actividad N1: Clculo del aumento y lmite de resolucin del microscopio. Para poder calcular el aumento y el lmite de resolucin del microscopio. Tenemos que saber que el poder de resolucin es la capacidad que permite hacer perceptible por separado, dos puntos situados muy prximos entre s en el objeto observado, y est dado por: Poder de resolucin = NA/0.61 El lmite de resolucin es la distancia mnima que debe existir entre dos puntos para poder distinguirlos por separados y est dado por: Lmite de resolucin = 0,61 /NA Donde NA es la apertura numrica.

Aumento 10x 4x 40x

Apertura numrica 0,25 0,10 0,65

100x 1,25 Estos valores se encuentran en la parte cilndrica o can de los lentes. Anotar el aumento y la apertura numrica de l o los lentes oculares.

aumento 10x

Apertura numrica 18

Anotar apertura numrica del condensador.

Apertura Numrica (NA) 1,25 Apertura del lente 100x = 1,25. Apertura numrica del condensador = 1,25. Apertura numrica de la interfase del aire = 1,0. Apertura numrica de la interfase de aceite = 1,3 1,5.

La apertura numrica efectiva mxima es el valor ms bajo de los anteriores. Calcular. Donde :( = 400nm) - El valor ms bajo de los anteriores = 1,0 El lmite de resolucin nos permite observar con mayor claridad, los objetos bajo el microscopio.

Lmite de resolucin : 0,61 400nm = 244 1,0 Resolucin : 1,0 =40 0,61 400nm 10

Actividad N2 : Manejo del microscopio. -> observacin de preparacin de letra e impresa.

Obs.: Con el aumento de 4x, se logra apreciar que hay pequeas partes de la letra que se encuentran sin tinta, adems la posicin en la que se ve la letra desde los lentes del microscopio es la opuesta a la que esta puesta en el portaobjetos. Al cambiar el aumento a 10x, las observaciones son las mismas la letra sigue en la posicin contraria a la que esta puesta en el portaobjetos, y se puede ver con mayor claridad que las partes que estn sin tinta se ven como pequeos cuadraditos corridos de uno al lado del otro.

Actividad n 4 : Observacin de preparaciones biolgicas permanentes .

Obs.: (corte intestino delgado de rata) con aumento de 40x se observa una estructura circular de color rosado, con lneas moradas dirigidas hacia el centro. stas corresponden a las clulas epiteliales ubicadas en el intestino delgado.

(3)(bibliografa) .Obs tejido heptico de rata. Aumentado en 10X Obs: Frotis sangunea .

Actividad N5: Observacion de preparaciones biolgica permanentes.

Muestra A Observando primeramente con el aumento de 4x se lograban observar no ms de 5 paramecios y observar su movimiento rtmico, al cambiar el aumento 10x se logra observar que estos poseen un cuerpo cilndrico, que su movimiento adems de ser rtmico es igual que onda, que su color es verde muy claro y que son muchos ms de los que se lograban ver con el aumento anterior llegando a un numeroaproximado de 50 paramecios. Con un mayor aumento se lograba ver no con claridad pero si se vean algunosde los partes interiores que conforman a estos protozoos. Muestra B Los protozoos que logramos observar en esta muestra son de color verde claro, de cuerpo alargado y cilndrico con un movimiento ondular. Eran muchos ms al observarlos con el aumento de 10x que los de la muestra A. Adems al subir el aumento a 40x y 100x se lograban ver las partes ms oscuras o pequeas manchitas que estos tenan las cuales corresponden a las partes interiores que lo conforman.

Activivad N6: Determinacin del tamao celular (TC).

Actividad N7

Los protozoos observados en las muetras A y B de la actividad numero 5 corresponden a paramecios encontrados en el agua de lagos, rios, etc o tambien pueden vivir en animales(bib 1), estos tienen un cuerpo cilindrico en el cual poseen una celula.(bio 2) Al Observar estos protozoos con el microscopio se podia observar q estos tenian un movimiento ondular y ritmico, el cual dejaba de ocurrir transcurridos unos minutos ya que se vian afectados por el calor emanado por la luz del microscopio, era ahi cuando terminaba su ciclo.

Las imagenen de la letra "e" se ve invertida ya que el objetivo crea la imagen aumentada e invertida. y el ocular nos permite ver una imagen aumentada pero no invertida. Es debido a la combinacion de estos dos elementos (el objetivo y el ocular), vemos una imagen aumentada e invertida.(bio 3)

bio 1 http://www.fcps.edu/islandcreekes/ecology/paramecium.htm bio 2 http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1080047484_C/1080044027_T7/1080044027_110.pdf bio 3 http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosfera/web/profesor/practicas/biologia1/Microscopio.pdf

Actividad n3: determinacin del dimetro del campo visual Calcular dimetro del campo visual .Contando la cantidad de cuadros. Resultados En aumento con 4x los cuadros se aprecian con facilidad. En aumento con 10x solo se logra ver 1 cuadro, los dems quedan fuera de la imagen.

Aumento microscopio 4X 10X 40X 100X

N de cuadros observados 9 1 No se observa No se observa

DCV

Medida en micrmetro cuadrado (m) 9x10^8 3.6x10^8 9x10^7 3.610^7 9x10^8 1 x10^8 -

Medida en micrmetro 900.00m 100.00m -

Aumento de : 4x : se calcula el dimetro del campo visual contando la mayor cantidad de cuadros .En este caso 9 cuadros ; cada cuadro es igual a 1 centmetro cuadrado. Para calcular el Dimetro del campo visual de los otros aumentos se utiliza la siguiente formula. DCV obj.x: DCV obj.4X *aumento obj.4X Aumento obj.X Siendo DCV: dimetro del campo visual del lente objetivo que se est averiguando, aument obj.x del lente con el que se est trabajando. DCV obj.10X: 9x10^8*4/10: 3.6x10^8 DCV obj 40X: 9x10^8*4/40: 9x10^7 DCV obj 100X: 9x10^8*4/100: 3.610^7 OBSERVACION AL MICROSCOPIO CON AUMENTO DE 4X

Actividad n6: Determinacin del tamao celular (tc). Estimar el tamao celular utilizando el DVC de cada uno de los lentes de los objetivos.

TC: (DVC obj X) / n de clulas. Donde DVC obj x: corresponde al DVC del lente objetivo que estamos ocupando en mirar las clulas; n de clulas: el nmero de clulas que se observan a travs del dimetro del campo visual. Al observar Frotis sangunea solo fue visible con los siguientes aumentos: 4x, 10x, 40x.

Imagen observada con aumento de 4x TC: (DVC de 4x)/ 90 n de clulas : 1x10^7