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Royaume du Maroc Office National de lEau Potable

DIRECTION CONTRLE QUALITE DES EAUX

Procdure de la qualit du matriel du secteur de la bactriologie et de la toxicologie

12 PQ 03

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PROCEDURE DE LA QUALITE 12 PQ Procdure de la qualit du matriel du secteur de la bactriologie et de la toxicologie

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REDIGEE PAR S. Benabdallah M. El Alami

VERIFIEE PAR L. Hammoussah N. Fathi

APPROUVEE PAR M.T. Elmghari A. Belhaj

EXEMPLAIRE N : ATTRIBUE A : ENREGISTREMENT : 12 PQ INDICE DE REVISION : 0 2 DATE DE REVISION : Dc 2004 DIFFUSEE LE : PARTIES REVISEES :

Cf Historique de rvision

Observation : Cette procdure a t rdige lusage exclusif de la Direction Contrle Qualit des Eaux de lONEP et peut ne pas tre applicable dautres activits. Photocopie interdite. Pour toute copie, sadresser au Responsable Qualit de DCE.

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PROCEDURE DE LA QUALITE 12 PQ Procdure de la qualit du matriel du secteur de la bactriologie et de la toxicologie SOMMAIRE 1. Prsentation 2. Mode de diffusion 3. Rvision 4. Archivage 5. Rfrences, terminologie et dfinitions 6. Objet et domaine d'application 7. Personnel concern . Responsabilits 8. Description de la procdure 9. Annexes

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Historique de rvision

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1.0 PRESENTATION

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Cette procdure dcrit les mthodes employes afin de sassurer que le matriel et les ractifs utiliss rpondent des besoins spcifiques afin de produire des rsultats de qualit. 2. MODE DE DIFFUSION La diffusion est contrle 3. REVISION La rvision de cette procdure se fera en tant que de besoin. Elle sera effectue par le rdacteur initial ou par une personne dsigne par le chef du service de microbiologie. 4. ARCHIVAGE En cas de rvision de cette procdure, la version prcdente sera retire des endroits dutilisation sur la base de la liste de diffusion initiale. Un exemplaire sera archiv par le responsable qualit durant 5 ans avant transfert aux archives de la DCE. Les autres exemplaires seront dtruits. 5. REFERENCES, TERMINOLOGIE ET DEFINITIONS Lignes directrices concernant lapplication des contrles de qualit en microbiologie, SCA-02. Association Franaise de Normalisation, AFNOR; Conservation et contrle des souches bactriennes utilises pour la dtermination de lactivit bactricide , T 72-140, aot 1988. Lignes directrices concernant lapplication des contrles de qualit en toxicologie, SCA-03. 6. OBJET ET DOMAINE D'APLLICATION Cette procdure dcrit : SECTUR DE LA BACTERIOLOGIE Les mthodes de vrification des membranes filtrantes; Les mthodes de calibrage, de vrification de la strilit des entonnoirs de filtration; Les mthodes de vrification de lefficacit de la strilisation des flacons de prlvement; Les mthodes de vrification et dentreposage des milieux de culture commerciaux; Les mthodes de vrification de leau de rinage et de dilution; La conservation et la manipulation des souches contrles; Les contrles effectus sur les ractifs de confirmation SECTUR DE LA TOXICOLOGIE Le contrle de la qualit de leau distille/dminaralie Le contrle de la qualit de keau de dilution et de leau dlevage 7. PERSONNEL CONCERNE. RESPONSABILITES Le chef de service du secteur de la bactriologie et de la toxicologie est responsable de veiller une application adquate du contrle de la qualit interne lintrieur mme de son groupe respectif. Les techniciens sont responsables dappliquer le contrle de la qualit dcrit dans cette procdure et de conserver toute la documentation relative aux contrles effectus. Le chef de service doit dassurer que tout le personnel technique comprend et suit cette procdure et assigne les tches de vrification des membranes filtrantes, des entonnoirs, des flacons de prlvements, des milieux de culture utiliss et de conservation des souches de rfrence. Il doit sassurer que les vrifications sont effectues.

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8. DESCRIPTION DE LA PROCEDURE A SECTEUR DE LA BACTERIOLOGIE 8.1 Membranes filtrantes 8.1.1 Fiche technique

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Conserver une copie de la fiche technique de chaque lot utilis et enregistrer le numro de lot ainsi que la date de la premire utilisation. (12 PQ-01). 8.1.2 Conformit des colonies Vrifier et enregistrer la conformit des colonies obtenus sur chacun des milieux de culture utilis lors de la technique de filtration laide des souches de rfrence respective. (12 PQ01). Il est recommand de vrifier aussi les caractristiques suivantes: a) Bonne diffusion du milieu de culture Vrifier la bonne diffusion du milieu de culture. Le filtre doit tre compltement humect aprs 15 secondes de contact avec le milieu de culture. b) Non-diffusion de l'encre du quadrill Lencre ne doit pas diffuser la surface de la membrane aprs un contact de 24 heures dincubation 44C. c) Absence de rgion hydrophobe Il doit y avoir absence de rgion hydrophobe. Les colonies doivent avoir une forme ronde caractristique et non tre dform par le quadrill du filtre. 8.1.3 Test de rcupration Frquence: chaque rception de membranes filtrantes. Nous valuons les membranes filtrantes l'aide de bactries coliformes d'origine fcale (E. coli) par comparaison de deux mthodes soit filtration et talement. Nous devons alterner la mthode par filtration et par talement pour ne pas introduire d'erreur due au laps de temps coul entre le dbut et la fin de l'analyse. 8.1.3.2 Milieux de culture et ractifs: Glose Tergitol-7 TTC Prparation selon les directives du fabricant. Glose "Plate Count Agar" Prparation selon les directives du fabricant. Bouillon Trypticase Soya Eau peptone ou tryptone. 8.1.3.2 Protocole analytique. La journe prcdent le test:

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Inoculer un bouillon trypticase soya (10 mL) avec une souche de E. coli . Incuber 4 heures 37oC. Effectuer le dnombrement de la culture l'aide de dilutions dcimales sries par la mthode d'incorporation la glose "Plate Count Agar". Incuber 24 heures 37oC. Placer l'inoculum 4oC au maximum 24 heures. La suspension idale doit tre de 200 600 UFC 1mL 8.1.3.3 Dnombrement par filtration. Choisissez 5 membranes filtrantes d'un mme lot. l'aide de la dilution approprie de la culture de E. coli , filtrer 1 mL sur chaque membrane filtrante en prenant soin de mettre peu prs 20 mL d'eau peptone ou tryptone dans l'entonnoir pour une bonne dispersion des bactries. Rincer avec de l'eau peptone ou tryptone. Dposer les membranes sur des gloses Tegitol-7 TTC. Mettre les botes de Petri l'tuve ou dans un sac de type Wirl pak si incubes dans un bain-marie. Placer les botes de Petri lenvers au bain-marie ou l'tuve 44 oC 0,5C pour 24 heures. 8.1.3.4 Dnombrement par talement. l'aide de la dilution approprie, inoculer 5 gloses Tergitol- TTC avec 0,2 mL de la dilution approprie de cette suspension. taler l'aide d'une tige de verre recourbe ou du fil boucle. Laisser la glose absorber l'inoculum quelques minutes (5 minutes). Mettre les botes de Petri l'tuve ou dans un sac de plastique hermtique de type "Wirl pak" si incubes dans un bain-marie. Placer les botes de Petri lenvers au bain-marie ou l'tuve 44 oC 0,5C pour 24 heures. 8.1.3.5 Rsultats Dnombrer les colonies sur les membranes et calculer la moyenne. Dnombrer les colonies par talement et calculer la moyenne. NOTE: ramener le volume 1 mL et la mme dilution que la membrane filtrante. Calculer la rcupration avec la formule suivante: moyenne des rsultats par filtration moyenne des rsultats par talement x 100

Un rsultat d'au moins 80% est attendu pour ce test. Si les critres dacceptabilit sont dpasss, une reprise est effectue en vrifiant chacune des tapes et des appareils servant au test. Si encore une fois les critres d'acceptabilit sont dpasses prvenir immdiatement le fournisseurs et retirer le lot concern du stock de produits consommables utiliser. 8.2 Entonnoirs de filtration Enregistrer les numros de lot ainsi que la date de la premire utilisation (12 PQ-02). 8.2.1 Calibration

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Les entonnoirs gradus jetables utiliss lors de la filtration des chantillons deau doivent tre vrifis laide dune fiole jaug de 100ml. Vrifier la calibration de cinq entonnoirs par lot. Le niveau de leau doit tre gal au trait prdtermin de lentonnoir. Si ce n'est pas le cas; on rejette tout lot dont les entonnoirs ne sont pas conformes. 8.2.2 Contrle de strilit Les entonnoirs jetables doivent tre striles au moment de leur utilisation au laboratoire. Nous valuons la strilit par une filtration deau de dilution strile. Vrifier la strilit de cinq entonnoirs par nouveau lot. 8.2.2.1 Milieux de culture et matriel Eau tryptone ou peptone Bouillon tryticase soya Membrane filtrante 8.2.2.2 Protocole analytique Filtrer environ 100 mL deau tryptone ou peptone strile. Dposer les filtres dans des bouillons trypticase soya striles. Incuber les bouillons pendant 48 heures 37C. 8.2.2.3 Rsultat Aprs incubation, une absence de turbidit dans le bouillon indique une strilisation adquate. Si une turbidit est remarque sur un lot dentonnoir, une reprise est effectue en vrifiant chacune des tapes et des appareils servant au test. Si encore une fois les critres d'acceptabilit sont dpasses prvenir immdiatement le fournisseurs et retirer le lot concern du stock de produits consommables utiliser. 8.3 Botes de Petri Enregistrer les numros de lot ainsi que la date de la premire utilisation (12 PQ-03). 8.3.1 Contrle de strilit Les botes de Petri doivent tre striles au moment de leur utilisation au laboratoire. Nous valuons la strilit par une incorporation de la glose. Vrifier la strilit de dix botes de Petri par nouveau lot.

8.3.2.1 Milieux de culture et matriel Plate count agar- PCA 8.3.2.2 Protocole analytique Introduire dans chaque bote de la glose PCA Incuber les botes pendant 3 jours 37C et 22C 8.3.3.3 Rsultat

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Aprs incubation, une absence de colonies indique des botes de Petri striles. Si une prsence de colonies est remarque sur un lot de bote; une reprise est effectue en vrifiant chacune des tapes. Si encore une fois les critres d'acceptabilits sont dpasses; prvenir immdiatement le fournisseur et retirer le lot concern du stock de produits consommables utiliser. 8.4 Pipettes jetables Enregistrer les numros de lot ainsi que la date de la premire utilisation (12 PQ-04). 8.4.1 contrle de strilit Les pipettes jetables doivent tre striles au moment de leur utilisation au laboratoire. Nous valuons la strilit par l'introduction d'un bouillon de culture nutritif. Vrifier la strilit de cinq pipettes par nouveau lot. 8.4.2.1 Milieux de culture et matriel Bouillon trypticase soya - TSB 8.4.2.2 Protocole analytique Pipetter l'aide d'un pipetteur automatique, le bouillon TSB et le rintroduire dans le tube. Refaire l'opration 5 fois. N'utiliser qu'une seule pipette par tube. Incuber les tubes 37C pendant 3 jours. 8.4.2.3 Rsultat Aprs incubation; une absence de turbidit dans le bouillon indique des pipettes adquates. Si une turbidit est remarque sur un lot de pipette, une reprise est effectue en vrifiant chacune des tapes. Si encore une fois les critres d'acceptabilits sont dpasses; prvenir immdiatement le fournisseur et retirer le lot concern du stock de produits consommables utiliser. 8.5 Vrification de l'efficacit de la strilisation de la verrerie et des flacons de prlvement. Frquence: chaque lot strilis. Ce contrle s'applique la verrerie (12 PQ-05) et aux flacons de prlvement (12 PQ-06). Nous utilisons un volume dtermin de bouillon trypticase soya avec lequel nous mouillons les parois intrieures du flacon ou de la verrerie. Une absence de turbidit du bouillon indique une strilisation adquate. 8.5.1 Milieux et ractifs. Bouillon trypticase soya. Prparation selon les directives du fabricant. 8.5.2 Protocole analytique. chaque srie de flacons ou verrerie striliss, il faut verser 10 mL d'un bouillon trypticase soya. Mouiller la paroi du rcipient et incuber 37 oC et 22oC pendant 3 jours. 8.5.3 Rsultats. Vrifier la strilit d'un lot en observant l'absence ou la prsence d'une croissance bactrienne. Une

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absence de turbidit du bouillon indique une strilisation adquate. Si une turbidit observe sur un lot de flacon ou verrerie, refaire striliser le lot et re-vrifier une deuxime fois. 8.6 Milieux de culture, ractifs et solutions Deux types de contrles sont raliss sur les milieux de culture. Les contrles des nouveaux lots du fabricant concernent les tests effectus pour vrifier la qualit des milieux deshydrats alors que les contrles des prparations concerent les tests effectus pour vrifier la qualit des milieux prpars qui servoront aux analyses. 8.6.1 contrle des milieux dshydrats A chaque rception dun nouveau lot de milieu de culture vrifier : - tat physiquedu contenant (bien ferm, absence de dformation, prsence danneau de scurit) - milieu non pris en masse ( vrification en secouant le flacon) - date de peremption - n du lot - n du code Les milieux de culture et ractifs doivent tre correctement entreposs dans un endroit sec. Un contrle de performance, c--d pourcentage de rcupration et test de slectivit , doit tre effectu la rception dun nouveau numro de lot de milieu de culture et refait tous les 6 mois aprs louverture du produit. Tableau n 1 : Milieu Plate count agar Glose content test Glose nutritive TSA et TSB Lauryl sulfate de Na Rothe Tergitol-7 TTC B. lactos vert brillant EC medium Bouillon A1 Glose EMB Glose Slanetz Bouillon Litsky Frquence de contrle louverture Tous les 6 mois

8.6.2 Contrle des milieux prpars Une mesure du pH et un contrle de strilit doivent tre effectus chaque prparation de milieu de culture et inscrit dans un registre. Nous valuons galement la slectivit des milieux, chaque prparation dun nouveau lot, l'aide de souches de contrle positives et ngatives. 8.6.3 Registre d'inventaire des produits dshydrats Ce rfrer la ( 06 PQ-03) relative linventaire des produits consommables 8.6.4 Procdures dassurance qualit effectues pour les milieux de culture 8.6.4.1 Pourcentage de rcupration

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Nous valuons le Pourcentage de rcupration des milieux selon la mthode du NCCLS. 1 (12 PQ08) a - Milieu de culture Prparer les milieux de culture analyser selon les directives du fabricant Eau peptone ou tryptone Glose "Plate count agar" Bouillon trypticase soya (10mL) b - Protocole analytique Deux jours avant le test, dnombrement pralable de la culture bactrienne : Inoculer la ou les souche(s) du contrle dans le bouillon trypticase soya (voir tableau 1) Incuber 24 heures 37oC Le lendemain, effectuer le dnombrement de la culture l'aide de dilutions dcimales sries par la mthode d'incorporation en glose "Plate count agar". Incuber 24 heures 37oC. Lecture des boites Petri. Utiliser la dilution o lon peut compter entre 30 et 300 colonies de manire ce que la suspension bactrienne contien environ 1 2 x 108 UFC/mL pour procder au test. Placer l'inoculum 4oC pour 24 heures La journe du test: a) Pourcentage de rcupration des milieux nutritifs ou d'enrichissement: Protocole Effectuer des dilutions dcimales sries partir de la suspension bactrienne. Ensemencer une boucle (ou 0,01 mL) sur le milieu les dilutions 10 -2, 10-3, 10-4 par striation sur glose ou par ensemencement pour les milieux liquides. Incuber selon les conditions dcrites au tableau 1. Rsultats Le milieu est dit performant si on retrouve des colonies caractristiques ou s'il permet la croissance du micro-organisme par l'apparition d'une turbidit du milieu de culture (voir Tableau 1). Un milieu qui ne permet pas la croissance d'une population minimale de 1 x 10 4 UFC/mL est rejet. b) Pourcentage de rcupration des milieux slectifs et confirmatifs (glos ou bouillon (10 mL)): Protocoles Effectuer des dilutions dcimales sries partir de la suspension bactrienne. Ensemencer une boucle du contrle positif (ou 0,01 mL) sur le milieu les dilutions 10 -3, 10-4 et 10-5 par striation ou par ensemencement pour les milieux liquides. Ensemencer une boucle du contrle ngatif (ou 0,01 mL) sur le milieu glos la dilution 10 1 par striation ou par ensemencement pour les milieux liquides. Incuber selon les conditions indiques dans le Tableau 1. Rsultats 1 NCCLS. 1996. Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. 2nd ed. Approuved Standard : M22-A2 16(16). NCCLS. Villanova, PA.

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Le milieu est dit performant si on retrouve les colonies caractristiques du contrle positif et que le milieu inhibe la croissance du contrle ngatif (voir Tableau 1). Un milieu qui ne permet pas la croissance d'une population de 1 x 10 3 UFC/mL (positif) et qui ne peut inhiber une population de 1 x 10 5 UFC/mL (ngatif) est rejet.

Test de slectivit
Vrifier la slectivit des milieux de cultures laide de souches de contrle positives et ngatives appropries (voir tableau ci-dessous la liste des souches de contrle suggres) de la facon suivante : - Inoculer trois boites de milieux gloss ou trois tubes de milieux liquides par souche de contrle et incuber la temprature requise pendant 24 ou 48 heures. - Aprs la priode dincubation, les souches de contrle positives de varient produire des colonies caractriqtiques alors que les souches de contrle ngatives ne devraient avoir aucune ou trs peu de croissance. - Noter les observations sur la fiche 12PQ-09 Tableau 2 : Liste des milieux de culture et des souches contrles Souche contrle Dure et T dincubation MILIEU NUTRITIFS ET DENRICHISSEMENT Plate count agar 24 H 37C + : E.coli ou S.aureus Glose content test Glose nutritive TSA et TSB Lauryl sulfate de Na 48 H 37C + : E.coli Bouillon glucose lazide de sodium 48 H 37C : S. faecalis + : S. faecalis : E.coli + : E.coli : S. aureus + : E.coli : S. aureus EC medium Bouillon A1 Glose EMB 24 H 44C 24 H 44C 24 H 37C + : E.coli : S. feacalis + : E.coli : S. faecalis +: E.coli ou Salmonelle : S. aureus + : S. faecalis : E.coli ou S.aureus + : S. faecalis : S. aureus Milieu Rsultat attendu

Croissance Croissance avec gaz Inhibition Dpt blanc et/ou trouble Inhibition Colonie jaune avec halo Inhibition Croissance avec gaz Inhibition Croissance avec gaz Inhibition Croissance avec gaz Inhibition Colonie verte mtallique Inhibition Colonie rouge rose marron Inhibition Pastille violette et/ou trouble Inhibition

MILIEU SELECTIFS ET CONFIRMATIFS Tergitol-7 TTC 24 H 37C B. lactos vert brillant 24 H 37C

Glose Slanetz Bouillon Litsky

48 H 37C 48 H 37C

Test de strilit Lors de chaque nouvelle prparation de milieu de culture, contrler la strilit en incubant une boite de milieux gloss ou un tube de milieux liquides la temprature et pendant la dure fixes au tableau n 2

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Lorsque la nouvelle prparation de milieu de culture ne semble pas strile aprs un premier test, le test de strilit est repris sur trois boites de milieux gloss ou trois tubes de milieux liquides. Lorsque le seconde rsultat confirme que la prparation nest pas strile, cette dernire est rejete .

mesure du pH
A chaque prparation et aprs strilisation, mesurer le pH final du milieu hydrat et vrifier la conformit du pH par rapport aux valeurs recommandes. Inscrire la valeur sur la fiche 12 PQ 09. Si le pH du milieu hydrat est non-conforme au pH recommand, le lot est rejet . 8.6.5 Registre de prparation 8.6.5.1 Milieux de culture commerciaux Ce registre doit contenir les informations suivantes (12 PQ-09): dnomination du milieu; pH recommand; numro de lot; date de prparation; date dexpiration; contrle de la strilit; pH aprs strilisation; croissance positive; croissance ngative; lot interne; visa de l'oprateur. 8.6.5.2 Milieux de culture compos Ce registre doit contenir les informations suivantes (12 PQ-10): dnomination du milieu; pH recommand; milieux et ractifs utiliss; numros de lot des produits utiliss; date de prparation; date dexpiration; contrle de strilit; pH aprs strilisation; croissance positive; croissance ngative; lot interne; visa de l'oprateur. 8.6.5.3 Ractifs et solutions Ce registre doit contenir les informations suivantes (12 PQ-11): Dnomination de la solution; les composants; volume ou masse; volume final; date de prparation; date de premption; lot interne; visa de l'oprateur.

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8.6.6 Entreposage des milieux de culture, des ractifs et des solutions Les renseignements suivants doivent tre inscrits sur chacun des produits : Identification du contenu; la concentration (sil y a lieu); no de lot interne; date de prparation; date dexpiration; visa de loprateur. Les milieux de culture, ractifs et solutions doivent tre entreposs selon les recommandations du fournisseur ou de la mthode analytique. De plus, ils doivent tre utiliss dans les dlais acceptables prescrits. 8.7 Eau de rinage et de dilution Contrler l'eau peptone ou tryptone en compltant la fiche 12 PQ-12. Les renseignements suivants doivent tre inscrits: date de prparation; date dexpiration; no lot interne; test de strilit; le pH recommand; le pH final; visa de loprateur. 8.7.1 Contrle de strilit L'eau de rinage et de dilution doit tre strile au moment de son utilisation au laboratoire. Vrifier la strilit d'un flacon ou d'un tube par nouveau lot. L'eau de rinage et de dilution peuvent tre conserves entre 4C 2C au maximum 2 mois. 8.7.2.1 Milieux de culture et matriel Glose Plate count agar Prparation selon les directives du fabricant 8.7.2.2 Protocole analytique Mettre 1 mL de l'eau de rinage contrler dans deux Petri. Couler de la glose PCA dans les Petri Incuber l'un des Petri 37C et l'autre 22C pendant 3 jours 8.7.2.3 Rsultat Aprs incubation; une absence de bactrie dans l'eau de dilution ou de rinage indique une eau adquate. S'il y a prsence de bactrie dans le lot; une reprise est effectue en vrifiant chacune des tapes. 8.8 Souches de contrle La liste des souches de rfrence est disponible (12 PQ-13). Lors de la rception, les souches

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lyophilises sont conserves jusqu utilisation au rfrigrateur et labri de la lumire. Les cultures congeles sont places au conglateur -80 C. Elles sont dcongeles, caractrises et recongeles tous les deux ans. Les souches conserves au rfrigrateur sont repiques aux deux semaines sur glose trypticase soya. La caractrisation biochimique de ces souches est effectue tous les deux mois. 8.8.1 Ouverture de lampoule et/ ou flacons L'ouverture des ampoules ou des flacons de souches lyophilises est effectue selon les instructions de l'ATCC. Aprs avoir dsinfect la surface du verre leau de Javel, bien limer tout autour de ltranglement. Provoquer un choc thermique en appliquant une pipette Pasteur coupe court et chauffe au rouge sur le trait de lime. Ouvrir lampoule ou le flacon, dans des conditions dasepsie usuelles, en appuyant lgrement sur la partie suprieure de lampoule ou en ouvrant le flacon. 8.8.2 Rhydratation de souche lyophilise 8.8.2.1 Milieux utilises Bouillon Trypticase soya Glose Trypticase soya 8.8.2.2 Protocoles laide dune pipette strile, introduire 0.5 mL 1.0 mL de bouillon trypticase soya (TSB) dans le flacon contenant la souche lyophilise. Agiter doucement pour dissoudre. Transfrer la suspension dans un tube contenant 5 mL de TSB. Verser la goutte restante sur la glose trypticase soya (TSA) et taler par striation. Incuber le tube et la glose 37C pendant 24 heures. Faire le test de puret et didentit partir de la glose. Utiliser le tube de TSB pour ltape de la conglation. 8.8.3 Conglation des souches de rfrences Toutes les souches sont congels en double. Maintenir un registre d'identification (12 PQ-14). Effectuer la caractrisation biochimique des souches tous les deux ans. 8.8.3.1 Milieux de culture Glose TSA Bouillon TSB glycrin 15% strile 8.8.3.2 Protocoles Ensemencer par striation une glose trypticase soya. Vrifier aprs 24 heures la puret et la croissance de la bactrie. Repiquer un bouillon trypticase soya glycrin 15% strile. Incuber 37C pendant 3 6 heures. Rpartir la culture dans des tubes conglation de 1.5 mL en plastique strile, en volume de 1 mL. Placer les tubes dans une bote et donner un numro. Congeler -80C. 8.8.4 Dconglation des souches de rfrences

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8.8.4.1 Milieux de culture Glose trypticase soya 8.8.4.2 Protocole

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Bien identifier les souches tre dcongeles sur les gloses et bouillons trypticase ncessaire cette dconglation. Dcongeler rapidement le tube en roulant entre les 2 mains. Bien agiter le tube au vortex et dposer 1 goutte sur deux gloses trypticase soya bien identifis. Ensemencer par striation les deux botes de glose TSA. Incuber 37C pendant 24 48 heures. Une souche ne peut tre dcongele plus de 3 4 fois. Contrler le nombre de dconglation en marquant d'un point le bouchon du tube chaque fois que la procdure est effectue. 8.8.5 Puret et identification des souches usage courant: (tous les deux mois et toutes les deux semaines) 8.8.5.1 Milieux de culture Glose TSA Coloration de Gram Galerie didentification API

8.8.5.1 Protocole Vrifier la puret d'une souche sur glose TSA. Faire une coloration de Gram. Utiliser une galerie didentification API (Analytical Profile Index) pour confirmer l'espce. Cette caractrisation biochimique est faite tous les deux mois. (12 PQ-15). Toutes les souches utilises pour le contrle de la qualit sont conserves sur glose TSA au rfrigrateur. Repiquer toules les 2 semaines sur le mme milieu pour maintenir la croissance (12 PQ-16). 8.9 Contrle des ractifs de confirmation Les ractifs utiliss lors de la confirmation des bactries doivent tre contrls chaque lot. Remplir la fiche 12 PQ-17. 8.9.1 Ractifs API Lors de la sortie des API, aprs incubation de 24 heures, certains ractifs sont ncessaires pour l'obtention de certains rsultats. Pour le contrle de qualit de ces ractifs, l'utilisation d'une souche donnant une raction positive et une donnant une raction ngative est ncessaire. Ainsi, pour les API20E et API Strep nous utilisons: Ractifs Contrle + et contrle chlorure ferrique 10% (pour le raction positive = Proteus vulgaris ATCC 13315;

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tryptophane) ractif de Kovak (pour l'Indole) hydroxyde de potassium 40% et alpha-napthol (pour VogesProskauer) ractif NIN, ZYM B et ZYM A

raction ngative = E. coli ATCC 25922 raction positive = E. coli ATCC 25922; raction ngative = Klebsiella pmeumonia ATCC 10031 raction positive = Klebsiella pneumoniae ATCC 10031; raction ngative = E. coli ATCC 25922. raction positive = Enterococcus gallinarum raction ngative= Streptococcus equi

8.9.2 Test d'oxydase: Le test d'oxydase est effectu dans l'identification des entrobactries. Pour le contrle de qualit de ce ractif, nous utilisons: contrle positif = E. coli ATCC 25922; contrle ngatif = Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. * 8.9.3 Coloration de Gram On doit effectuer une coloration de Gram laide dune souche Gram ngative et une souche Gram positive afin de sassurer de lefficacit des solutions. Utiliser pour la coloration ngative une souche de Escherichia coli et pour la coloration positive une souche de Staphylococcus aureus.

B SECTEUR DE LA TOXICOLGIE 1 - Ractifs et solutions Les ractifs doivent tre correctement entreposs dans des endroits sec. Registre dinventaire : Ce rfrer la ( 06 PQ-03) relative linventaire des produits consommables Registre de prparation des ractifs et solutions : Ce registre doit contenir les informations suivantes (12 PQ-18) Dsignation de la solution; Nlot interne; date de prparation; date de premption; les composants; volume ou masse; volume final; visa de l'oprateur Registre de prparation des solutions de travail : Ce registre doit contenir les informations suivantes (12 PQ-18) Dsignation de la solution; Nlot interne;

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date de prparation; date de premption; les composants; volume ou masse; volume final; pH de la solution visa de l'oprateur Une mesure du pH doit tre effectue chaque prparation dune solution de travail et inscrit dans un registre (12 PQ-18). 2 Eau distille / dminralise Leau distille/dminralise utilise pour la prparation deau dilution synthtique ou pour la prparation des ractifs utiliss dans les mthodes danalyses toxiologique doit tre vrifie rgulirement. Lefficacit du systme de purification doit tre vrifie intervalles rguliers et les mesures correctives doivent tre appliques losque requises. Il faut vrifier et enregister les rsultats des paramtres suivant selon les fquencestablies dans le tableau qui suit
Paramtre Conductivit pH Chlore rsiduel Mtaux BHAA
(1)

Frquence 1/semaine 1/semaine 1/mois 1/anne mois

Critre de qualit < 2 homs/cm 25C 5.5 7.5 < 0.1 mg/l < 1g/l individuel < 1000 UFC/ml

(1) Ag, Al, As, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Pb, Ni, Zn

3 - Eau dlevage ou de dilution 3.1 - Mode de prparation de leau dlevage ou de leau de dilution quipement : - Aquarium de grande capacit ; - Pompe air - Diffuseur ; - Tuyaux ; pH-mtre ; Oxymtre ; Conductivimtre ; Thermomtre ; Comparateur disque Mode de prparation - Remplir un aquarium vide avec leau du rseau, - La dchloration est ralise laide dune pompe air qui transmet lair travers un tuyau une pierre poreuse (diffuseur) entranant ainsi le barbotage de leau, - Laisser dchlorer pendant au moins 7 jours. - Avant utilisation, vrifier que leau est bien dchlore par la mthode colorimtrique utilisant le DPD (CF. MOND.)

3.2 Contrle de la qualit L'eau utilise pour llevage des daphnies est une eau naturelle. Il sagit de leau du rseau dchlore par bullage pendant au moins 24 heures pour les poissons et 7 jours pour les daphnies.

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Leau dlevage ou de dilution doit tre exempte de contaminant et possder des caractristiques physico-chimiques adquates et constantes pour le maintien de lespce (cf. tableau 1). noter que la temprature, l'oxygne dissous et le pH doivent tre galement mesurs directement dans les contenants dlevage une frquence plus leve (Cf. tableau 2 eau dlevage des daphnies, tableau 3 - eau dlevage des poissons). dfaut dune eau dchlore rpondant aux critres prcits, elle peut tre fait usage dune eau dlevage reconstitue (Cf. MOND de toxicologie).

Tableau 1 : frquence et critre de qualit des paramtres physico-chimique de leau dlevage.

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Paramtre Alcalinit (mg CaCO 3/l) Aluminium (mg/l) Argent (mg/l) Arsenic (mg/l) Azote ammoniacal (mg N/l) BHAA (UFC/ml) Cadmium (mg/l) Carbone organique total (mg C/l) Chlore rsiduel (mg Cl/l) Chlorure (mg Cl/l) Chrome (mg/l) Cobalt (mg/l) Conductivit (homs/cm 25C) Cuivre (mg/l) Cyanures (mg CN/l) Duret (mg CaCO 3/l) Fer (mg/l) Fluorures (mg F/l) Mercure (mg/l) Nickel (mg/l) Nitrates (mg N/l) Nitrites (mg N/l) Phosphore total (mg P/l) Plomb (mg/l) Potassium (mg/l) Sodium (mg/l) Sulfates (mg SO4/l) Zinc (mg/l)
(1) (2) (3) (4)

Frquence 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/6 mois 1/semaine 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 1/6 mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois mois

Critre de qualit (1) 20 200 < 0,09 < 0,0001 < 0,05 - - - (3) < 2 000 < 0,001 < 30 Non dtectable(4) < 230 < 0,002 < 0,005 100-800 < 0,002 < 0,005 50 200 < 0,3 <2 < 0,0001 < 0,16 < 40 < 0,02 < 0,2 < 0,003 < 10 < 25 < 80 < 0,005

Limite de dtection requise ou prcision (2) 2 0,01 0,0001 0,001 0,02 1 0,001 3 0.01-0.1(4) 20 0,002 0,01 10 0,001 0,003 5 0,03 0,2 0,0001 0,01 4 0,02 0,02 0,001 1 0,1 8 0,001

Critre de qualit pour la toxicit chrinique ou concentration maximale gnralement mesure dans les eaux de surface de lest du Canada (MENV, 2001; CCME, 1999) La limite de dtection de l'analyse doit permettre de quantifier au moins la concentration spcifie. Le critre de toxicit pour lazote ammoniacal varie beaucoup en fonction du pH et de la temprature. Les critres sont spcifiques aux types dessais. Leau dchlore devrait avoir une concentration dazote ammoniacal infrieure 0,5 mg/l de N. Meilleure limite de dtection disponible. Lensemble de dosage de la compagnie Hach permet le dosage dans une plage de basse concentration quivalente 0.07mg/l. le fabriquant ne rapporte pas de limite de dtection, mais elle se siturait entre 0.01 et 0.1 mg/l.

Tableau 2 : frquence et critre de qualit des paramtres physico-chimique de leau dlevage des daphnies contrler frquemment.
Paramtre Temprature Oxygne dissous pH Duret(1) Intensit lumineuse(2) Frquence 1/jour 2/semaine 2/semaine 1/semaine 1/2 semaines Critre de qualit 18 22 C

> 80 % de saturation 6,5 8,5


160 180 mg/l CaCO 3 10 20E/m/s

(1) Sauf si la duret est ajuste pralablement l'usage de l'eau. (2) L'intensit lumineuse est mesure la surface des cristallisoirs.

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Tableau 3 : frquence et critre de qualit des paramtres physico-chimique de leau dlevage des poissons contrler frquemment.
Paramtre Temprature Oxygne dissous pH Duret (1) Intensit lumineuse
(2)

Frquence 1/jour 3/semaine 2/semaine 1/semaine 1/2 semaines

Critre de qualit 21C 25C

> 80 % de saturation 6,5 8,5


160 - 300mg/l CaCO 3 10 20E/m/s

(1) Sauf si la duret est ajuste pralablement l'usage de l'eau. (2) L'intensit lumineuse est mesure la surface des aquariums

9.

ANNEXES 12 PQ-01: Registre du contrle de la qualit des membranes filtrantes ; 12 PQ-02 : Registre du contrle de la qualit des entonnoirs de filtration; 12 PQ-03: Registre du contrle de la qualit des botes de Petri; 12 PQ-04: Registre du contrle de la qualit des pipettes jetables; 12 PQ-05: Registre du contrle de la strilit de la verrerie; 12 PQ-06 : Registre du contrle de la strilit des flacons de prlvement; 12 PQ-08 : Registre du contrle de la performance et de la qualit des milieux de culture; 12 PQ-09 : Registre du contrle des milieux de culture commerciaux; 12 PQ-10: Registre du contrle des milieux de culture composs; 12 PQ-11: Registre du contrle de la prparation des ractifs et solutions; 12 PQ-12: Registre du contrle de la qualit de l'eau de rinage ou de dilution; 12 PQ-13: Liste des souches de rfrence; 12 PQ-14: Registre didentification des souches de rfrence; 12 PQ-15: Registre didentification des bactries partir des souches de rfrence; 12 PQ-16: Registre de suivi des souches de rfrence en utilisation courante; 12 PQ-17: Registre du contrle des ractifs de confirmation et d'identification. 12 PQ-18 : Contrle de la qualit de leau distille / dminralise 12 PQ-19 : contrle de la qualit de leau dlevage et de leau de dilution

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Contrle de la qualit des membranes filtrantes 12 PQ - 01

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Anne : _____________
1. No de l ot : ___ ___ __ ___ __ ___ __ ___ __ Date du contrle :________________________ Oprateur :_____________________________ Date de la 1re utilisation :__________________

frquence : chaque rception nouveau lot

Diffusion du milieu ______________________________________________________

2. Diffusion de lencre du quadrill :___________________________________________ 3. Rgion hydrophobe :_____________________________________________________ 4. Conformit des colonies : Milieu de culture Souche bactrienne C ou NC Observations /remarques

C : conforme

NC : non conforme

5. Test de rcupration des membranes : - Dnombrement des souches (donnes brutes obtenues) Souche bactrienne Dilutions

Dnombrement utilis : la suspension idale choisie de ( nom de la souche) est de . - Rsultats du test N des boites Dnombrement par filtration 1 2 3 4 5 Moyennes Dnombrement par talement (brute) Dnombrement par talement (x 5)

-X 100

% rcupration = Moyenne des rsultats par filtration Moyenne des rsultats par talement % rcupration : ________________________ % rcupration attendu : 80 % CONCLUSION

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Contrle de la qualit des entonnoirs de filtration 12 PQ - 02

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Anne : _____________

Frquence : chaque rception nouveau lot 5 entonnoirs/ lot

N de lot : _____________________________ Date de livraison : _______________________ Date du contrle : _______________________ Oprateur : ____________________________ Date de la 1ere utilisation :__________________

1. Contrle de la strilit des entonnoirs de filtration


N de lot de lot de l'eau de dilution N de lot du milieu de culture (TSB) N de lot des membranes utilises Rsultats (C ou NC)

2. Contrle de la calibration
Rsultats (C ou NC)

3. Observations ventuelles

C : conforme NC : non conforme

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Contrle de la qualit des botes de Petri 12 PQ-03


Anne : _____________

Version 01 du 21/12/03

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Frquence : chaque rception nouveau lot 10 botes/ lot : _____________________________ : _______________________ : _______________________ : ___________________________ : ___________________________

N de lot Date de livraison Date du contrle Oprateur Date de la premire utilisation

1. Contrle de la strilit des botes de Ptri


Type de bote de Ptri Milieu de culture utilis N de lot du milieu de culture Rsultats (C ou NC)

Incubation 37C

Incubation 22C

2. Observations ventuelles

C : conforme NC : non conforme

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Contrle de la qualit des pipettes usage unique 12 PQ-04


Anne : _____________

Version 01 du 21/12/03

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Frquence : chaque rception nouveau lot 5 pipettes/ lot

N de lot : _____________________________ Date de livraison : _______________________ Date du contrle : _______________________ Oprateur : ____________________________ Date de la premire utilisation : ___________________________

1. Contrle de la strilit des pipettes


Type de pipettes (10mL; 1mL) Milieu de culture utilis N de lot du milieu de culture Rsultats (C ou NC)

2. Observations ventuelles

C : conforme NC : non conforme

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Contrle de la strilit de la verrerie 12 PQ-05

Version 01 du 21/12/03

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Anne : _____________ Date No lot Date de premption

frquence : 1 fois par lot T dincubation 22C/ 3j 37C/3j Type de verrerie No lot du Oprateur TSB

CP : contrle positif CN : contrle ngatif

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Contrle de la strilit des flacons de prlvements 12 PQ-06

Version 01 du 21/12/03

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Anne : _____________ Date No lot Date de premption

frquence : 1 fois par lot T dincubation 22C/ 3j 37C/3j Volume No lot du Oprateur des TSB flacons

CP : contrle positif CN : contrle ngatif

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Contrle de la performance et de la qualit des milieux de culture 12 PQ-08

Version 02 Date : Dc 2004

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Anne : ____________

frquence : chaque nouveau lot

Date de l'analyse :_______________________ No de lot : _____________________________ Nom du milieu :__________________________ Type de milieu :__________________________ Date d'expiration :_______________________ Oprateur :_____________________________

- Dnombrement des souches (donnes brutes obtenues) Souche bactrienne Dilutions

Pourcentage de rcupration : Population initiale /mL


Contrle positif Souche : Contrle ngatif Souche :

10

-1

10

-2

Dilutions 10-3

10-4

10-5

Le milieu permet la croissance du contrle positif : la population finale est de ___________ Le milieu inhibe la croissance du contrle ngatif : la population finale est de ___________ performant Non performant

Conclusion : le milieu test est


Qualit du milieu :

pH : __________________ strilit : _______________ Slectivit Souche positive : Souche ngative :

Conclusion : la qualit du milieu est :

bonne et adquate Pas bonne et non adquate

CP : Croissance positive ;

CN : Croissance ngative

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Contrle des milieux de culture commerciaux 12 PQ-09

Version 02 Date : Dc. 2004

Page 1/1

Anne : _____________
Dnomination et spcification du milieu de culture dshydrat : ______________________
Fabricant N code N lot PH recommand

Milieu prpar : _____________________________________


Date Volume en mL Pese en g N du lot de ladditif Mode de rpartition N du lot prpar Contrle de la strilit pH aprs strilisation Date dexpiration Souche positive utilise Contrle de la slectivit Croissance Souche ngative positive utilise Croissance ngative Oprateurs observations

CN : croissance ngative CP : croissance positive Date dexpiration : - 3 mois pour les flacons et tubes - 8 jours pour les boites de ptri

NA : non applicable

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Contrle des milieux de culture composs 12 PQ-10

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Anne : _____________ Dnomination et spcification du milieu de culture compos ______________________ pH recommand : _______________
Milieux et ractifs Fabricant NDu lot Composition (en g) pour l L

Milieu prpar : _____________________________________


Date Volume en mL Dsignation du Milieu ou du ractif Pese en g N du lot de ladditif Mode de rpartition N du lot prpar Contrle de la strilit pH aprs strilisation Date dexpiration Souche positive utilise Contrle de la slectivit Croissance Souche ngative positive utilise Oprateurs Croissance ngative Observation

CN : croissance ngative CP : croissance positive Date dexpiration : - 3 mois pour les flacons et tubes - 8 jours pour les boites de ptri

NA : non applicable

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Contrle de la prparation des ractifs et solutions 12 PQ-11

Version 02 Date : Dc 2004

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Anne : _____________
Dsignation solution finale No lot Date de prparation Date premption

frquence : 1 fois par lot


Composants
Noms N lot du constituant Pese (en g) Volume (en ml) Volume final (en ml) pH oprateur Observations

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Contrle de la qualit de l'eau de rinage et de dilution 12 PQ-12

Version 01 du 21/12/03

Page 1/1

Anne : _____________ Date de Date No lot prparation dexpiration No lot PCA

frquence : 1 fois par lot Test de strilit (C ou NC) 22C 37C pH oprateur

Eau de dilution: eau tryptone /eau peptone


Tryptone / Peptone : 1g Chlorure de sodium : 8 g Eau distille : 1 litre Le PH recommand : 7.0 + 0.2 Conforme ( C ) : Absence de UFC/ml 22 C et 37 C Non conforme ( NC ) : prsence de 1 UFC/ml ou plus 22 C et 37 C

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Liste des souches de rfrence 12 PQ-13

Version 02 Date : Dc 2004

Page 1/1

Dsignation
Salmonella ssp Escherichia coli Enteroccocus faecalis Clostridium perfringens Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Pseudomonas fluorescens Streptomyces albus Legionella pneumophila Lactobacillus acidophylus Candidas albicans Enterococcus gallirium Klebsiella pneumonia Proteus vulgaris Serratia Marcesens

Rfrence
ATCC ATCC 14028 25922

ATCC 29212 ATCC 13124 ATCC 27853 ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC 25923 13525 3004 33216 4356 10231

ATCC 49473 ATCC ATCC ATCC 10031 13315 8100

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Identification des souches de rfrence 12 PQ-14 Gestion et entretien

Version 02 Date : Dc 2004

Page 1/1

Nom de la souche Rfrence Date de rception Date de conglation Lieu de conglation Temprature de conglation No de la bote

Identification

Aspect macroscopique

Aspect microscopique

Identification biochimique

Type d'identification

Code d'identification

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Identification des bactries partir des souches de reference 12 PQ-15

Version 01 du 21/12/03

Page 1/1

Anne : _____________
Date d'isolement Rfrence de la souche

frquence : 1 fois par 2 mois


Code d'identification Identification biochimique Type d'identification Oprateur

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Suivi des souches de rfrence en utilisation courante 12 PQ-16

Version 01 du 21/12/03

Page 1/1

Anne : _____________

frquence : 1 fois tous les 2 semaines

Dsignation : _______________________ Rfrence : ________________________ Date de repiquage sur le milieu :

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Contrle des ractifs de confirmation et d'identification 12 PQ-17

Version 01 du 21/12/03

Page 1/1

Anne : _____________
Date Ractif N lot Date d'expiration

frquence : 1 fois par lot


Souche positive Souche ngative C/NC Oprateur

C : conforme

NC : non conforme

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Contrle de la qualit de leau distille /dminralise 12 PQ - 18


Anne : I Contrle du pH et de la conductivit de leau distille / dminralise Date paramtre pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit rsultats oprate ur Conformit Date

Version : 02 Date : Dc 2004

Page 1/2

Fquence : 1/semaine paramtre pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit pH Conductivit rsultats oprate ur Conformit

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Contrle de la qualit de leau distille /dminralise 12 PQ - 18

Version : 02 Date : Dc 2004

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pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit pH pH Conductivit Conductivit Exprsion des rsultats : pH en unit pH ; Conductivit en homs/cm 25C Rsultats attendus : 5,5 < pH < 7.5 ; Conductivit < 2 homs/cm 25C Conformit : C : conforme ; NC : Non-conforme

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Contrle de la qualit de leau distille /dminralise 12 PQ - 18


Anne : II Contrle du chlore rsiduel de leau distille / dminralise

Version : 02 Date : Dc 2004

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Fquence : 1/mois

Date

paramtre

Rsultat s (en mg/L)

oprateur

Date

paramtre

Rsultat s (en mg/L)

oprateur

Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel
Rsultat attendu : chlore rsiduel < 0,1mg/L

Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel

III Contrle de laqualit bactriologique de leau distille / dminralise

Fquence : 1/4mois

Date

paramtre

Rsultats (en UFC/ml)

oprate ur

Date

paramtre

Rsultats (en UFC/ml)

oprateur

BHAA BHAA
Rsultat attendu : BHAA < 1000 UFC/ml

BHAA BHAA

IV Contrle des Mtaux lourds de leau distille / dminralise Date danalyse :

Fquence : 1/anne

Paramtre Aluminium (Al) Argent (Ag) Arsenic (As ) Cadmium (Cd) Cobalt (Co) Chrome (Cr)
Rsultat attendu : < 1g/L individuel

Rsultats (en g/L)

Paramtre Cuivre (Cu) Mercure (Hg) Plomb (Pb) Nickel (Ni) Zinc (Zn)

Rsultats (en g/L)

OBSERVATIONS :

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Contrle de la qualit de leau distille /dminralise 12 PQ - 18

Version : 02 Date : Dc 2004

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OFFICE NATIONAL DE LEAU POTABLE DIRECTION CONTROLE QUALITE DES EAUX Contrle de la qualit de leau dlevage et de leau de Version 00/2 dilution Date : Dc 12 PQ 19 2004

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Anne : 1/semaine
Date paramtre Rsultat s (en mg/L) oprateur Date paramtre Rsultat s (en mg/L)

Fquence :
oprateur

Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel

Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel

OFFICE NATIONAL DE LEAU POTABLE DIRECTION CONTROLE QUALITE DES EAUX Contrle de la qualit de leau dlevage et de leau de Version 00/2 dilution Date : Dc 12 PQ 19 2004
Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel
Rsultats attendus : Chlore rsiduel < 0.1mg/l Conformit : C : conforme ; NC : Non-conforme

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Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel Chlore rsiduel

OFFICE NATIONAL DE LEAU POTABLE DIRECTION CONTROLE QUALITE DES EAUX Contrle de la qualit de leau dlevage et de leau de Version 00/2 dilution Date : Dc 12 PQ 19 2004

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Anne : Date danalyse : //


Paramtre Alcalinit (mg CaCO 3/l) Aluminium (mg/l) Argent (mg/l) Arsenic (mg/l) Azote ammoniacal (mg N/l) BHAA (UFC/ml) Cadmium (mg/l) Carbone organique total (mg C/l) Chlorure (mg Cl/l) Chrome (mg/l) Cobalt (mg/l) Conductivit (homs/cm 25C) Cuivre (mg/l) Cyanures (mg CN/l) Duret (mg CaCO 3/l) Fer (mg/l) Fluorures (mg F/l) Mercure (mg/l) Nickel (mg/l) Nitrates (mg N/l) Nitrites (mg N/l) Phosphore total (mg P/l) Plomb (mg/l) Potassium (mg/l) Sodium (mg/l) Sulfates (mg SO4/l) Zinc (mg/l) Rsultats Critre de qualit 20 200 Conformit C/NC

Frquence : 1/6 mois

observations

< 0,09 < 0,0001 < 0,05


---

< 2 000 < 0,001 < 30 < 230 < 0,002 < 0,005
100-800

< 0,002 < 0,005


160 - 300

< 0,3 <2 < 0,0001 < 0,16 < 40 < 0,02 < 0,2 < 0,003 < 10 < 25 < 80 < 0,005

Dcision : Conforme OBSERVATIONS : Non conforme

OFFICE NATIONAL DE LEAU POTABLE DIRECTION CONTROLE QUALITE DES EAUX HISTORIQUE DE REVISION 02 PQ-04 Procdure de la qualit du matriel du secteur de la bactriologie et de la toxicologie

Version 00/1 Date : Dc 2004

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HISTORIQUE DE REVISION
No Rvision 00 01 Date de Rvision 07/10/01 21/12/03 Modifications Premire version - Page 2/35 : Observations : Pour toute copie, sadresser au responsable Qualit de DCE au lieu de sadresser au Service Assurance Qualit de DCE - Page 4/35 : Chapitre 4 : Changement de la dure

de conservation : 5 ans au lieu de 3 ans

Page 8/35 : suppression au niveau du paragraphe 8.6.2.3 dune rptition - Page 10/35 : modification *Ajout de prcision au niveau du paragraphe 8.6 * Suppression du lannexe 12PQ-07 et se rfrer la 06PQ-03 - 12PQ-03 et 12PQ-04 : ajout de la date de la premire utilisation et des tempratures dincubations
02 Dc 2004 Ajout : 5. REFERENCES, TERMINOLOGIE ET DEFINITIONS Lignes directrices concernant lapplication des contrles de qualit en toxicologie, SCA03 (page 4) 6. OBJET ET DOMAINE D'APLLICATION SECTUR DE LA BACTERIOLOGIE (page 4) SECTUR DE LA TOXICOLOGIE (page 4) Le contrle de la qualit de leau distille/dminaralie (page 4) Le contrle de la qualit de keau de dilution et de leau dlevage (page 4) 8.6 Milieux de culture, ractifs et solutions Deux types de contrles sont raliss sur les milieux de culture. Les contrles des nouveaux lots du fabricant concernent les tests effectus pour vrifier la qualit des milieux deshydrats alors que les contrles des prparations concerent les tests effectus pour vrifier la qualit des milieux prpars qui servoront aux analyses. ( page 9) 8.6.1 contrle des milieux dshydrats (page 9) A chaque rception dun nouveau lot de milieu de culture vrifier : tat physiquedu contenant (bien ferm, absence de dformation, prsence danneau de scurit) milieu non pris en masse ( vrification en secouant le flacon) date de peremption n du lot n du code - Un contrle de performance, c--d pourcentage de rcupration et slectivit, (page 9) - Tableau 1 (page 9) test de

8.6.4.1 Pourcentage de rcupration


- Test de slectivit (page 11) - Test de strilit (page 12) - mesure du pH (page 12)

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8.6.5 Registre de prparation date dexpiration (ajout au niveau des milieu de culture commerciaux page 12) 8.7.1 Contrle de strilit
L'eau de rinage et de dilution peuvent tre conserves entre 4C 2C au maximum 2 mois. (page 13)

B SECTEUR DE LA TOXICOLGIE (page 17)


1 - Ractifs et solutions (page 17) 2 Eau distille / dminralise (page 17) 3 - Eau dlevage ou de dilution (page 18)

12 PQ-18 : Contrle de la qualit de leau distille / dminralise 12 PQ-19 : contrle de la qualit de leau dlevage et de leau de dilution
Modification au niveau

12 PQ-01: Registre du contrle de la qualit des membranes filtrantes ; 12 PQ-08 : Registre du contrle de la performance et de la qualit des milieux de culture; 12 PQ-09 : Registre du contrle des milieux de culture commerciaux; 12 PQ-10: Registre du contrle des milieux de culture composs; 12 PQ-11: Registre du contrle de la prparation des ractifs et solutions; 12 PQ-13: Liste des souches de rfrence;