XIX SIMPSIO NACIONAL DE BIOPROCESSOS

X SIMPSIO DE HIDRLISE ENZIMTICA DE BIOMASSAS

30 de julho-02 de agosto de 2013
Foz de Iguau, PR, Brasil



ESTIMATIVA DE PARMETROS CINTICOS DA PRODUO DE
BETACAROTENO A PARTIR DE RESDUOS AGROINDUSTRIAIS


A. M. SANTOS
1
, A. K. P. BASTOS
2
, A. P. OLIVEIRA
1
, R. L. G. SILVA
1
, G. F. SILVA
1
e
A. L.O. FERREIRA
1

Instituto Federal da Bahia, Engenharia Ambiental
Instituto Federal do Cear, Engenharia Ambiental e Sanitria
E-mail para contato: andreaferreira@ifba.edu.br

RESUMO Carotenides so pigmentos naturais responsveis pela colorao
amarela, laranja, vermelha e roxa que so encontrados em fungos, bactrias, animais,
em tecidos verdes de plantas e em rgos no fotossintticos como frutas, flores,
sementes e razes. So produtos de alto valor agregado com uma enorme expanso.
Sua funo biolgica mais fundamentada a atividade provitamnica A. Este trabalho
descreve a estimativa de parmetros cinticos para previso de produo de
carotenides atravs do cultivo submerso em manipueira. Foram testadas diferentes
concentraes iniciais do resduo como fonte de carbono para o cultivo da levedura
Rhodotorula glutinis. A cintica de fermentaes complexa e altamente no-linear.
Consequentemente, sua modelagem mecanstica para a obteno da equao de
velocidade de reao tem grande nmero de parmetros. Portanto, os mtodos
numricos para a resoluo de problemas de mnimos quadrados no lineares foram
de valiosa ajuda para representar a cintica da reao. Assim, utilizou-se o mtodo
numrico de resoluo de problemas de mnimos quadrados no lineares (ex.:
Levenberg-Marquardt, Gauss-Newton, etc) para estimar os parmetros cinticos da
produo de carotenides. Com isto foi possvel fazer uso da modelagem, e prever
resultados.

1. INTRODUO
O interesse por carotenides tem aumentado nos ltimos anos, devido a crescente
demanda destes compostos e diversos tipos de indstrias e, por conseguinte, a procura por
compostos com conotao natural tem resultado no aumento de pesquisas referentes
produo de carotenides por via fermentativa (ESTEVES et al., 2006). O desenvolvimento
de processos biotecnolgicos para a produo de carotenides visa um aumento do
rendimento da concentrao dos mesmos, assim como, a reduo de custos relativos ao
processo, atravs da utilizao de substratos industriais de baixo custo, ricos em acares e
matria orgnica (VALDUGA et al., 2009). O betacaroteno o carotenide mais abundante
nos alimentos e o mais interessante economicamente, pois apresenta maior atividade pr-
vitamnica (AMBROSIO et al., 2006).
A mandioca tem grande nmero de usos correntes e potenciais, classificados segundo o
tipo de raiz, em duas grandes categorias: mandioca de mesa e, mandioca para a indstria.
Alm dos processos que tm as razes como matria prima bsica, h produtos gerados a
partir da parte area (constituda de folhas e hastes) que so usados na alimentao animal e
humana. Na alimentao animal as folhas e as hastes so usadas na preparao de silagens e
fenos ou mesmo frescas. As hastes so tambm fonte de material de plantio (manivas) para as

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novas lavouras. Assim, o aproveitamento da manipueira, resduo de toda a indstria da
mandioca tem grande potencial tanto para o setor industrial quanto para cooperativas de
pequenos produtores de farinhas. Esses fatores tornam a manipueira um substrato interessante
e de baixo custo para produo de betacaroteno. Com o intuito de descrever a cintica de
produo de carotenides, e melhorar as condies de trabalho com a mesma, que nos
propusemos utilizar tcnicas de modelagem e simulao de processos bioqumicos. A
modelagem matemtica e a simulao de processos bioqumicos so ferramentas, versteis e
baratas que um engenheiro pode utilizar, para simular diversas situaes sem ir ao laboratrio
fazer vrios ensaios experimentais. Com os parmetros cinticos possvel fazer uso desta
ferramenta, e prever resultados, pois os modelos matemticos so formulaes que imitam um
fenmeno do real. O objetivo principal da pesquisa foi prever adequadamente a produo de
betacaroteno em escala industrial e obter parmetros cinticos de crescimento e de produo
de carotenides por Rhodotorula glutinis. Assim, a previso de produo desse carotenide
foi estabelecida sem a necessidade de laboriosos experimentos.

2. MATERIAL E METODO
Com o objetivo de obter parmetros e verificar a cintica de consumo de substrato,
produo de biomassa, evoluo de pH e produo de carotenides para o meio estudado foi
conduzido o cultivo submerso da levedura Rhodotorula glutinis. Os resultados foram
mostrados utilizando como varivel resposta a concentrao de betacaroteno e concentrao
de biomassa obtidas durante o cultivo. Para velocidade, esta foi determinada atravs do
coeficiente angular da melhor reta ajustada nas curvas que representa a cintica de
crescimento, consumo de substrato e produo de carotenides. Na parte de modelagem e
simulao, alm das concentraes de biomassa e produto, a concentrao de substrato teve
de ser usada para desenvolvimento do modelo.
* *
1 1
S S P
m
S S S P
C C C
K C C C

| || || |
=
| | |
+
\ . \ .\ .
(1)

A tcnica dos mnimos quadrados foi usada para prever os parmetros cinticos do
modelo mostrado na Equao 1 utilizando os mtodos numricos de Gauss-Newton e
Levenberg-Marquardt. Esses mtodos foram usados com os softwares MATLAB verso 7.0 e
Origin verso 7. No MATLAB, utilizou-se para estimar os parmetros o mtodo iterativo de
Gauss-Newton. Foi desenvolvido um programa dentro do MATLAB para que foi possvel
obter os parmetros do modelo cintico.
No Origin foram realizados os ajustes dos parmetros do modelo cintico com o mtodo
iterativo de Levenberg-Marquardt (MORE 1977). Foi realizado o ajuste dos parmetros para
comparar algum desvio devido ao processo de fermentao da manipueira. Todos os ajustes
foram realizados com um intervalo de confiana de 95 %. Para garantir que os parmetros do
modelo no haviam cado em mnimos locais durante o processo iterativo, foram realizados
testes de sensibilidade do modelo, assim, garantiu-se de forma aceitvel a previso de
comportamento do sistema reacional. A Figura 1 ilustra o comportamento de uma funo com
mnimos locais.

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Figura 1 Grfico de funo com mnimos locais.

4. RESULTADOS E DISCUSSES
Um programa computacional em Matlab foi desenvolvido para as futuras modelagens
cinticas. O programa estimou os parmetros cinticos para a fermentao. Devido natureza
dos dados experimentais, um algoritmo baseado na rotina matemtica Levenberg-Marquardt
foi utilizado junto rotina de integrao numrica Runge-Kutta de 5 ordem e este simulou a
produo de betacaroteno a partir dos parmetros estimados. Tambm utilizou-se o software
Origin para estimar os parmetros, de modo a comparar a sensibilidade e a robustez dos
parmetros estudados. A Figura 2(a) mostra os resultados da modelagem implementada no
software Origin 6.0, utilizando o mtodo de Levenberg-Marquardt, ou seja, mtodo de ajuste
no-linear de curvas.
(a) (b)
Figura 2 Ajuste dos parmetros do modelo para produo de betacaroteno, a)
Origin; b) Maltab.

Na Tabela 1 so apresentados os valores de parmetros iniciais que foram fornecidos ao
programa para que fossem obtidos os verdadeiros valores de
m
e K
S
usando o software
Origin. Resultados semelhantes e com maior preciso foram obtidos com os parmetros
originados no Matlab. Na Figura 2(b) apresentado os resultados do ajuste realizado no
software MATLAB, tambm utilizando ajuste no-linear de curvas.

Tabela 1: Teste de sensibilidade para o software origin.
P1 V
MAX
P2 K
M

0 0,30287 1,7 120,61698
10 0,30287 50 120,61698
20 0,30287 1000 120,61698
100 0,30286 1000 120,61697

0 5 10 15 20
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20


v
e
l
o
c
i
d
a
d
e

(
m
M
/
h
)
[S] mM 0 50 100 150
0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
0.12
0.14
0.16
0.18
Concentrao (mM)
V
e
l
o
c
i
d
a
d
e

(
m
M
/
h
)

Dados Experimentais
Dados do Modelo

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Os valores de
m
e K
S
, obtidos usando os dois mtodos de estimativa de parmetros so
apresentados na Tabela 2. Pode-se observar a boa concordncia dos parmetros obtidos
atravs de ambos os mtodos numricos de ajuste no-linear.
Tabela 2 Resultados dos parmetros.

Software
Origin
Software Matlab

m
0,30 0,36
K
S
120,62 138,86

5. CONCLUSES
Com os dados e os programas desenvolvidos possvel prever a produo de
betacaroteno, bem como buscar as melhores condies operacionais para o cultivo submerso
usando manipueira como fonte de carbono. Os ajustes dos parmetros
m
e K
S
foram obtidos
usando os softwares Origin e programao em Matlab. Os parmetros obtidos no
apresentaram diferenas significativas sendo, portanto, possvel estimar os parmetros pelos
dois mtodos estudados. Os testes de sensibilidade mostraram a boa convergncia de ambos
mtodos aplicados. O valor de
m
obtido foi de 0,30 mM/h usando ambos programas. O valor
de K
S
obtido usando o software Origin foi de 120 mMe de 139 mM usando o Matlab. Os
valores obtidos so de mesma grandeza tanto com o Origin quanto com o Matlab, indicando
que o programa desenvolvido em Matlab consegue prever de modo robusto parmetros
cinticos.

6. REFERNCIAS
AMBROSIO, C. L. B.; CAMPOS, F. A. C. S.; FARO, Z. P. (2006), Carotenides como
alternativa contra a hipovitaminose A. Revista de Nutrio, v. 19, p. 233-243.
ESTEVES, P. C. D.; ESTEVES, A. C.; BARLETA, V. C. N.. Extrao de -Caroteno por
Cromoterapia em Coluna em Cenouras (daucus carota l.) Cadernos UniFOA , Volta Redonda,
ano 1, n. 1, jul. 2006.
MOR, J.J., The levenberg-marquardt algorithm: Implementation and theory, numerical
Analysis 630 (1977), 105 -116.

VALDUGA, E.; TATSCH, P. H.; TIGGEMANN, L.; TREICHEL, H.; TONIAZZO, G.;
ZENI, J.; DI LUCCIO, M. (2009), Produo de carotenides: microrganismos como fonte de
pigmentos naturais. Qumica Nova, v. 32, n 9, p. 2429-2436.

7. AGRADECIMENTOS
Os autores agradecem a FAPESB, Fundao de Amparo Pesquisa do Estado da Bahia e ao
CNPq pelo apoio financeiro ao desenvolvimento deste trabalho.