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Figura 2 Resultados de longitud promedio de la raz (cm) vs diferentes concentraciones de
extracto de ptalos obtenido por la tcnica de maceracin y agitador rotatorio aplicadas para
semillas de albahaca (Ocimum basilicum L) para pruebas de germinacin in vitro.
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Figura 3 Resultados de la longitud promedio del tallo (cm) vs diferentes concentraciones de
extracto de ptalos obtenido por la tcnica de maceracin y agitador rotatorio aplicadas para
semillas de albahaca (Ocimum basilicum L) para pruebas de germinacin in vitro.
6.4. Observacin de poblacin microbiana en medios especficos en
muestras de suelo inicial durante el proceso de elaboracin de Bokashi
tradicional y ptalos
Al analizar las muestras del suelo inicial en el estudio, (ver anexo 10) antes de
aplicar los diferentes tratamientos se observo una baja poblacin
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ufc/g) y baja poblaciones microbianas en comparacin con los datos
obtenidos al aplicar los diferentes tratamientos a las camas, las cuales indican
que el suelo era deficiente en riqueza microbiana debido a la baja fertilizacin
y la poca interaccin microbiana que presentaba este suelo, segn Viterii
(2002). La falta de incorporacin de materia orgnica y el uso excesivo de
agroqumicos, han conducido a la degradacin de las propiedades fsica,
qumica y biolgica que determina la capacidad productiva de los suelos.
6.4.1. Recuento de enterobacterias en agar SS (Salmonella Shigella)
El medio de cultivo SS es empleado para la deteccin de enterobacterias que
por sus caractersticas es medianamente selectivo. Los coliformes son
fcilmente determinables y su presencia es habitual en los residuos empleados
60
en la elaboracin de abono tipo bokashi (Kelley y Walker, 1999). Tambin se
utilizan como indicadores de contaminacin fecal en los ambientes
relacionados con el suelo y el agua (Hassen et al., 2001; Tallon et al.,2005).
Salmonella es considerado como el principal problema especfico y de la
calidad higinica de compost (Brinton y Droffner, 1994; Yanko, 1995; Hay,
1996), razn por la cual se evalu la presencia de la poblacin de
enterobacterias, en los dos abonos tipo Bokashi y se observo
microscpicamente bacterias Gram. negativas para el da cinco
evidencindose una alta poblacin para el tratamiento de bokashi tradicional
(anexo 11) notndose una disminucin a medida que maduraba el material
orgnico, no hubo presencia de cepas de Salmonella en el da 15 las cuales se
evidencian en el agar S.S (Salmonella, Shigella) que presentan colonias con
color transparente con centro negro. Las colonias que se presentaron se
observaron macroscpicamente de color rosadas y fucsias, forma redonda,
borde definido y cremosas, lo que corresponde con la descripcin del Manual
de Merck (2005) en donde se define a E.coli .como colonias rosadas hasta de
color cremoso, y a Enterobacter aerogenes como colonias blanquecinas,
opacas, mucosas.
No se observo viraje del medio S.S, y las colonias rosadas hasta roja son
lactosa positiva indicando presencia de E.coli. Entre los tratamientos de
bokashi a base de ptalos de rosa y bokashi tradicional no se observaron
diferencias significativas segn la prueba del rango mltiple de Duncan con
un valor p>0.05) tal vez a condiciones como pH bsico, temperatura
mantenindose constantes.
Comparando ambos tratamientos, ver (figura 4), en cuanto a los datos del da
cinco, diez y quince se evidencia diferencias muy marcadas ya que en el da
cinco el recuento de bacterias fue alto (anexo 11) respecto al da diez y
quince que iba disminuyendo gradualmente, a medida que pasaba los das, la
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poblacin patgena disminua considerablemente, lo cual se debe a que para
la elaboracin de los abonos tipo bokashi se utiliz como materia prima
residuos de plantas aromticas (Bokashi tradicional y bokashi modificado a
base de ptalos de rosa), que contienen sustancias antimicrobianas que
inhiben el crecimiento de microorganismos; los residuos utilizados fueron
tomillo perteneciente a la familia Labiatae que contienen sustancias como
carvacrol (2-hidroxi-p.cimeno),P-cimenol (Isopropil-Tolueno) a las cuales se
les ha encontrado propiedades antifngicas, y albahaca perteneciente a la
familia Lamiaceae que se caracteriza por poseer monoterpenos como
carvacrol y timol (Espitia, 2004).
El proceso de degradacin con las condiciones ambientales tales como
sustrato, temperatura y humedad, tambin favorecen la disminucin de
microorganismos patgenos ya que al mezclarse todos los materiales para
obtener bokashi se estimula microorganismos benficos permitiendo
establecer relaciones de competencia posiblemente por nutrientes inhibiendo
el crecimiento de estos patgenos. Cuando empieza a liberarse las sustancias
antimicrobianas que poseen los residuos de plantas aromticas y los ptalos,
las bacterias patgenas posiblemente pueden ser inhibidas por estas y las
condiciones ambientales no son las mas apropiadas para multiplicarse, segn
Tortora (2006) se necesita un ambiente propicio para Salmonella y al ser una
bacteria proteoltica tendra que desarrollarse en agar leche pero no hubo
recuento de microorganismos proteolticos.
Uno de los factores que influyo considerablemente, es el tiempo de
degradacin debido a que a medida que pasaba el tiempo la concentracin de
microorganismos disminua considerablemente (ver anexo 11).
Segn Tonner K (2006), los agentes patgenos son eliminados despus de 2
semanas a una temperatura relativa de 55 C pero otros factores tales como la
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desecacin y pH tambin pueden desempear un papel significativo en la
reduccin de patgenos.
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Figura 4 Promedio recuentos UFC x 10
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de enterobacterias en agar SS en tres tiempos
de elaboracin de bokashi ptalos y tradicional.
6.4.2. Recuento de microorganismos en agar SMRS1 para hongos en el
proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi
En este medio se observ una mayor poblacin de hongos solubilizadores de
fsforo, en el da 10 para ambos tratamientos aplicados (ver figura 5),
mientras que el da cinco y quince los valores fueron mas bajos en bokashi
ptalos (ver anexo 15) debido a que posiblemente en el da cinco se esta
iniciando el proceso de degradacin lo cual permite una menor competencia
por nutrientes con otros microorganismos habitantes.
En el da quince se observo una menor poblacin de hongos en medio smrs1
esto se present posiblemente por la degradacin total de los sustratos
empleados en el bokashi generando una competencia entre los
microorganismos por nutrientes. Mayea et al., 1991 encontr que los abonos
orgnicos tienen un efecto marcado sobre la microflora del suelo y por lo
general es de esperar que los abonos orgnicos aumenten la microflora
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hetertrofa de los suelos. Sin embargo la heterogeneidad de estos
microorganismos puede estar influida por la cantidad de los productos
aplicados, las condiciones fsicas del suelo.
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Figura 5 Promedio recuentos UFC x 10
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de hongos fosfato solubilizadores en agar
SMRS1 en tres tiempos de elaboracin de bokashi ptalos y tradicional.
6.4.3. Recuento de microorganismos en agar SMRS1 para bacterias en el
proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi.
En el medio agar SMRS1 para el recuento de bacterias solubilizadoras de
fosforo, se evidencia un mayor crecimiento en el tratamiento correspondiente
a bokashi ptalos, mientras que se observa una menor poblacin para el
tratamiento de bokashi tradicional (ver figura 6), aunque no hubo diferencias
estadsticamente significativas con un valor de p <0.001, las poblaciones
presentaron una disminucin, esto tal vez se debe a condiciones de
temperatura y pH que se iban presentando en el proceso de degradacin de la
materia y elaboracin del abono y las sustancia que tienen dichos ptalos
como son esteres grasos (terpenil), que representan del 14 al 64% y alcoholes
como (etanol-b-fenilo y alcohol bencil) posiblemente inhiben el crecimiento
de las bacterias. Espitia (2004) encontr que las plantas aromticas al tener
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sustancias antimicrobianas, posiblemente no permitieron el crecimiento de
estas bacterias
Figura 6 Promedio recuentos UFC x 10
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de bacterias fosfato solubilizadoras en agar
SMRS1 en tres tiempos de elaboracin de bokashi ptalos y tradicional.
6.4.4 Recuento de microorganismos amiloliticos en agar almidn en el
proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi
Se encontr gran poblacin de microorganismos amilolticos ver (figura 7),
presentndose halos de dimetro mayor de 5 mm, posiblemente se presento
por la materia prima empleada que fue material vegetal (ptalos de rosa)
presenta altas concentraciones de almidn siendo la reserva natural de las
plantas la cual es una sustancia considerada como un hidrato de carbono
Stryer, (2003).
Estudios realizados por Bailey han demostrado que el almidn se encuentra
en la naturaleza localizado en las clulas vegetales en grnulos pequeos lo
cual le permite ser insoluble en agua a una temperatura ambiente. Los
grnulos de almidn son muy resistentes a la penetracin del agua y al ser
hidrolizado forman uniones de hidrogeno dentro la misma molcula y con
otras molculas vecinas. Sin embargo, estas uniones se debilitan cuando
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aumenta la temperatura lo cual proporciona un ambiente propicio para que los
microorganismos amilolticos se desarrollen.
El almidn despus de la celulosa es un polmero comn en el reino vegetal.
Las amilasas son enzimas extracelulares que hidrolizan el almidn en uniones
-1,4 al azar a lo largo de las molculas de amilosa y amilopectina (Crueger
1993).
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Figura 7 Promedio recuento UFC x 10
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material de bacterias amilolticas en agar almidn
en tres tiempos de elaboracin de bokashi ptalos y tradicional
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6.5. ANALISIS DE RESULTADOS DE LAS CAMAS CON COBERTURAS
PLASTICAS Y TRATAMIENTOS DE ABONO TIPO BOKASHI
6.5.1. Recuento de poblaciones de microorganismos en Agar nutritivo
De acuerdo a los tratamientos (ver figura 8), el mas efectivo fue el de la cama
correspondiente a bokashi ptalos y plstico negro, estudios realizados por Gelsomino
et al.,(2006) muestran que la cobertura del suelo, estimula el crecimiento de la poblacin
microbiana favoreciendo el crecimiento de Bacillus spp., Pseudomonas fluorescentes y
hongos, los cuales pueden suprimir patgenos por parte de microorganismos que son
ms competitivos y a menudo antagonistas de los patgenos y plagas de las plantas.
Segn Tamietti.G (2006) la mayor parte de los microorganismos tolerantes a las
coberturas, son conocidos como agentes de control biolgico o estimulantes del
crecimiento de las plantas.
Estudios realizados por (Chellemi, 2006) han demostrado que al comparar la cobertura
plstica del polietileno claro, con polietileno negro, este ltimo absorbe la radiacin
solar, reduce el calentamiento del suelo en varios grados, es ms estable y durable en
condiciones de campo.
Figura 8 Promedio recuentos UFC x 10
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de poblaciones microbianas en agar nutritivo bajo coberturas
plsticas.
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6.5.2. Recuento de bacterias y hongos fosfato solubilizadoras en agar SMRS1 de
bajo coberturas plsticas y abonos tipo bokashi.
Se encontraron mejores resultados en el tratamiento con plstico transparente y bokashi
tradicional fue mas efectivo para las poblaciones de hongos en agar SMRS1, en
comparacin con los dems tratamientos (ver figura 9) se evidencian en un mayor
crecimiento de bacterias fosfato solubilizadoras, en las camas cubiertas con plstico
transparente, observndose en la grafica 12. Segn Grassano et al., (2002)
probablemente el plstico trasparente permite un mejor desarrollo para el cultivo y una
mejor relacin entre las races de las plantas y las poblaciones de microorganismos,
estos tienen un rol importante en la movilizacin del fosforo para las plantas.
La participacin de los microorganismos fosfato solubilizadores dependen del tipo de
suelo, pero generalmente las bacterias constituyen del 0.1 al 0.5 % de la poblacin total.
Muchas de las bacterias fosfato solubilizadoras son conocidas por su gran actividad
metablica para solubilizar, sin embargo, se ha reportado que los hongos poseen una
mayor actividad solubilizadora que las bacterias (Gyanneshwar, 2002).
Segn estudios de Beltrn y Torrado (2002), esta clase de bacterias se puede desarrollar
gracias a los macronutrientes presentes en el suelo como el fosforo. Los
microorganismos de la rizosfera poseen la capacidad de liberar iones fosfato de sus
diversas combinaciones y participar en distintas fases del ciclo del fosforo en el suelo.
Con un adecuado suministro de fosfato, los microorganismos son benficos
especialmente para las plantas jvenes que en presencia de bacterias fosfato
solubilizadoras.
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Plstico Negro Plstico Transparente Sin Plstico
Figura 9 Promedio recuentos UFC x 10
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de hongos fosfato solubilizadores en agar SMRS1 bajo
coberturas plsticas (plstico negro, transparente y sin plstico) combinado con bokashi tradicional cama 1
y 3 y ptalos de rosa cama 2 y 4.
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Plstico Negro Plstico Transparente Sin Plstico
Figura 10 Promedio recuentos UFC x 10
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de bacterias fosfato solubilizadoras en agar SMRS1 bajo
coberturas plsticas (plstico negro, transparente y sin plstico) combinado con bokashi tradicional cama
1,3 y ptalos de rosa cama 2,4.
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6.5.3 Recuento de poblacin microbiana en agar Almidn de acuerdo a las camas
Teniendo en cuenta los resultados presentados en la figura 11 y (ver anexo 19), se
observo una diferencia estadsticamente significativa p<0.05, evidencindose una leve
tendencia de mayor poblacin de microorganismos amilolticos para el tratamiento de
bokashi ptalos con cobertura de plstico negro, se observa una mayor actividad de estos
microorganismos presentndose halos de degradacin superiores a 5mm de dimetro;
segn estudios realizados por Pachn y Posada (2003), los microorganismos encuentran
gran disponibilidad de almidn para ser degradado siendo la mayor reserva encontrada
en material vegetal a nivel celular.
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Plstico Negro Plstico Transparente Sin Plstico
Figura 11 Promedio recuentos UFC x 10
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de bacterias amiloliticas en agar almidn bajo coberturas
plsticas (plstico negro, transparente y sin plstico) combinado con bokashi tradicional cama 1,3 y
ptalos de rosa cama 2,4.
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6.5.4 Recuento de poblaciones de enterobacterias en agar .S.S en las camas con
plsticos y tratamientos
Para los plsticos se presentaron diferencias significativas (ver anexo 29). Se observo
diferencias en la cobertura que no tenia plstico en comparacin a los que si estaban
cubiertos (ver figura 12). Tanto la variable de bokashi y plstico, influyen
considerablemente en la disminucin de la concentracin de microorganismos patgenos
evidenciando un mejor resultado con cobertura de plstico negro debido a que se
presenta una mayor absorcin de los rayos solares estimulando la produccin de
sustancias que inhiben flora patgena. Se hizo anteriormente en el proceso de
elaboracin que al abono al final de su elaboracin no present alta concentracin de
microorganismos patgenos, y los patgenos que se encontraban al estar a 24C se
inhibi su crecimiento ya que crecen solo a 37C. En estudios realizados por. Stapleton
(2000), se observo que durante el proceso de empleo de las coberturas plsticas, se
produce un calentamiento de la materia orgnica liberndose compuestos voltiles al
suelo. Diferentes tipos de materia orgnica tales como el abono animal y los residuos de
los cultivos especialmente los residuos vegetales, podran combinarse con la cobertura
del suelo para incrementar la temperatura por medio del calor generado por la
descomposicin de esos materiales e incrementar la capacidad del suelo para mantener
el calor aumentando la actividad biocida para enterobacterias por medio de la
produccin de compuestos voltiles, razn por la cual en los resultados obtenidos, la
poblacin patgeno disminuy considerablemente (ver anexo 28).
Segn Misle (2001) la radiacin solar puede fcilmente penetrar la cobertura de plstico
pero la radiacin emitida por el suelo (normalmente a una longitud de onda ms larga)
no puede pasar a travs de esa cobertura. Consecuentemente, la mayor parte de esa
radiacin ser retenida debajo de la cobertura plstica. Durante este proceso la
temperatura del suelo podra elevarse a niveles letales para muchos de los organismos
del suelo, incluyendo enterobacterias lo cual fue observado para este estudio.
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Figura 12 Promedio recuentos UFC x 10
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de enterobacterias en agar SS bajo coberturas plsticas
(plstico negro, transparente y sin plstico) combinado con bokashi tradicional cama 1,3 y ptalos de rosa
cama 2,4.
6.6 PESO SECO DE LAS ALBAHACAS CULTIVADAS BAJO LOS
TRATAMIENTOS CON ABONOS TIPO BOKASHI Y PLASTICOS
Segn los resultados obtenidos para la toma de peso seco de las plantas de albahaca en la
(anexo 34), se observ diferencias entre los tratamientos segn la grfica 15.los
resultados arrojados en cuanto a peso seco, el mejor tratamiento estadsticamente
significativo fue el correspondiente a bokashi con ptalos de rosa y plstico negro; de
acuerdo a estudios en campo realizados por Loughrin y Kaspebauer, (2001) con
cobertura en albahaca se ha demostrado que coberturas coloreadas optimizan el tamao,
aroma sabor e incrementa la produccin de compuestos voltiles. Segn estudios
realizados por la USDA las, hojas de albahaca tratadas con coberturas coloreadas son
ms grandes, ms suculentas, y ms pesadas. Las hojas de albahaca desarrollan
concentraciones de compuestos fenlicos y de olor significativamente ms altas que
aquellas plantas cultivadas con cobertura blanca. (USDA,2005).
El plstico negro genero una buen efecto en la biomasa de la albahaca ya que esta
tonalidad de plstico permiten absorber los rayos solares y se de un incremento de
temperatura para el crecimiento de la albahaca. Mientras que con el plstico transparente
72
permite el paso de los rayos solares y generando una evaporacin del agua del suelo ms
marcada y propiciando valores de temperatura ms altos, lo cual pude interferir con la
fisiologa de la planta y con el cambio de las poblaciones microbianas del suelo. Al
aumentar la temperatura en las coberturas de plstico transparente, se estara
promoviendo el crecimiento de malezas y por ende afectando el crecimiento de la
albahaca por competencia de nutrientes (Diaz-Perez et al., 2007)
Figura 13 Peso seco promedio tratamiento Bokashi ptalos de rosa plstico negro (BPPN) Bokashi
ptalos de rosa plstico transparente (BPPB) Bokashi ptalos de rosa sin plstico (BPSP), Bokashi
tradicional plstico negro (BTPN), Bokashi tradicional plstico transparente (BTPB) y Bokashi tradicional
sin plstico (BTSP).
6.7. ALTURAS ALBAHACAS MEDIDA DEL TALLO
De acuerdo a los resultados, no existen diferencias significativas entre los tratamientos
observando una tendencia en los tratamientos que corresponde a BPPNC4, (ver grafica
16). El proceso de las coberturas plsticas de suelo abarca un complejo sistema de
cambios fsicos, qumicos y biolgicos asociados con el calentamiento solar que permite
la estimulacin de las races de las plantas para su crecimiento reflejndose en los
resultados obtenidos (ver anexo 30) El suelo y la cobertura tambin fue utilizada para
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limitar la evaporacin de agua del suelo, para controlar malezas, para mejorar la
estructura del suelo y para combatir la erosin (Misle E. 2001)
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Figura 14 Alturas promedio del tallo (cm) de Albahaca, tratamiento Bokashi ptalos de rosa plstico
negro (BPPN) Bokashi ptalos de rosa plstico transparente (BPPB) Bokashi ptalos de rosa sin plstico
(BPSP), Bokashi tradicional plstico negro (BTPN), Bokashi tradicional plstico transparente (BTPB) y
Bokashi tradicional sin plstico (BTSP).
TABLA 5 Anlisis fisicoqumico de los tratamientos aplicados (abono tipo bokashi
ptalos y tradicional)
Bokashi
C/N MO
%
CO
% NT%
Nitrgeno
disponible %
Nitrgeno
disponible
ppm
PTALOS
11.6:1
30,25 17,55 1,5125 0,022 220
TRADICIONAL
11.6:1 13,7 7,95 0,685 0,01 100
El carbono y el nitrgeno son constituyentes bsicos de la materia orgnica. Para obtener
un compost de buena calidad debe existir una relacin equilibrada entre ambos
elementos. Tericamente la relacin de C/N adecuada es de 25-35 pero vara segn las
materias primar que se utilicen.
74
Al ser muy elevada la relacin C/N disminuye la actividad biolgica. Mientras que al ser
muy baja no afecta el proceso de compostaje, perdiendo el exceso de nitrgeno en
amoniaco. Es importante realizar una mezcla adecuada de los distintos residuos con las
diferentes relaciones C/N para obtener un abono equilibrado. Los materiales orgnicos
ricos en carbono y pobres en nitrgeno son la paja, el heno seco, las hojas, las ramas, la
turba y el aserrn. Los pobres en carbono y ricos en nitrgeno son los vegetales jvenes,
las deyecciones animales y los residuos de matadero (Vsquez 2003).
Segn Pare et al.,(1998), el carbono orgnico puede servir como fuente de energa y de
carbn celular, por lo tanto los requerimientos de carbn(C) son mayores que los de
nitrgeno(N).La proporcin de estos dos elementos, necesaria oscila entre 25:1 y 30:1
(C/N). Si hay demasiado nitrgeno en relacin con el carbono, este se perder en forma
de amoniaco. Las relaciones muy estrechas (<20:1) inducen a perdidas de nitrgeno en
forma de amoniaco, adems, valores altos de pH (>8.5) pueden favorecer perdida de
nitrgeno, y relaciones muy amplias convierten al nitrgeno en un nutriente limitante.
Por otro lado un nivel elevado de C:N no permite que se forme una poblacin
microbiana extensa sin nutrientes adicionales. El resultado es un nivel de
descomposicin ms lento.
75
7. CONCLUSIONES
Los ptalos son una alternativa para la preparacin de abonos orgnicos en
produccin de albahaca.
Se elabor un abono fermentado tipo Bokashi a base de ptalos de rosa para su
uso como sustrato en produccin de albahaca observando resultados favorables
en cuanto al crecimiento del cultivo en condiciones como coberturas plsticas en
combinacin con abonos tipo bokashi, evidenciado para altura y peso seco de las
plantas dado por los microorganismos benficos posibles y el efecto de los
tratamientos.
Se evalu la efectividad de dos coberturas plsticas en combinacin con los
abonos tipo bokashi para el mejoramiento de la produccin de albahaca
encontrndose que la cobertura plstica negra fue mas efectiva durante el proceso
de estudio probablemente por el aumento de la poblacin microbiana y la mayor
diversidad biolgica que ayuda a la degradacin de materia orgnica y liberacin
sustancias que estimulan su crecimiento.
Se evalu la capacidad promotora de desarrollo de extractos de ptalos de rosa
aplicando las diferentes metodologas para la elaboracin del extracto en la
germinacin de semillas de albahaca evidencindose baja efectividad frente al
control utilizado.
Se estableci la capacidad antimicrobiana de los extractos obtenidos de los
ptalos de rosa observndose que la concentracin efectiva fue la
correspondiente a 500 g/l del extracto de rosa para Salmonella sp y E coli.
No fue efectiva ninguna de las concentraciones evaluadas para Shigella sp
presentando resistencia.
76
El bokashi es una alternativa en los sistemas de fertilizacin en los diferentes
cultivos, debido a su facilidad de manejo en un tiempo corto de elaboracin lo
que le permite al agricultor realizar un mejor y prctico aprovechamiento de los
residuos generados de otros cultivos, solucionando tambin el problema de
contaminacin ambiental.
Al realizar bokashi utilizando como materia prima residuos de plantas
aromticas, se observa una disminucin significativa en las poblaciones
bacterianas patgenas como Salmonella sp y E coli. y Shigella sp, por las
sustancias antimicrobianas que estas poseen.
77
8. RECOMENDACIONES
Hacer un monitoreo de plagas y enfermedades comparando los dos tipos de
bokashi
Evaluar concentraciones ms altas de extracto ptalos de rosa para Shigellag sp
Emplear tcnicas para la determinacin e identificacin de enterobacterias como
NMP, Crystal o API
78
9. BIBLIOGRAFIA
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86
ANEXOS
Anexo 1 Resultados de los halos de inhibicin del extracto de ptalos de rosa a
diferentes concentraciones y los microorganismos evaluados bajo la tcnica Kirby
Bauer
Microorganismo
evaluado
[] del extracto
de ptalos de
rosa
(Triplicado) g/L
Tratamiento tamao
mm de zona de
inhibicin
Control
positivo
(penicilina)
Control
negativo
(Agua
destilada)
150 10 mm 9mm 10mm 12 mm
0 mm
E.coli
200 10 mm 8 mm 9 mm 14 mm
0 mm
500 14mm 15 mm 14 mm 13 mm
0 mm
150 10 mm 9 mm 10 mm 11 mm
0 mm
Salmonella
enteritidis 200 0 mm 1 mm 3 mm 16 mm
0 mm
500 15 mm 16 mm 15 mm 14 mm
0 mm
150 10mm 8 mm 9 mm 40 mm
0 mm
Shigella sp
200 0 mm 2 mm 1 mm 25 mm
0 mm
500 10 mm 9 mm 8 mm
30 mm 0 mm
87
Anexo 2 Anlisis estadstico tcnica macerado longitud raz (cm) (T0=testigo;T1=2.5
L;T2=5L;T3=10L;T4=30L;T5=60L;T6=90L)
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
5 (60L) 3.9717 A
6 (90L) 3.9074 A
4 (30L) 3.7647 A
1 (2.5 L) 3.7455 A
3 (10L) 3.6268 B A
2 (5L) 3.4345 B A
0 (testigo) 3.1404 B
Anexo 3 Anlisis estadstico, Tcnica macerado longitud tallo (cm) (T0=testigo; T1=2.5
L;T2=5L;T3=10L;T4=30L;T5=60L;T6=90L)
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
1 (2.5 L) 1.53333 A
4 (30L) 1.51034 A
6 (90L) 1.30000 B
3 (10L) 1.24915 CB
5 (60L) 1.09677 CD
2 (5L) 1.05357 D
0 (testigo) 0.98649 D
88
Anexo 4 Resultados tcnica agitador rotatorio longitud raz (cm (T0=testigo;T1=2.5
L;T2=5L;T3=10L;T4=30L;T5=60L;T6=90L)
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
6 4.4315 A
3 4.3438 A
5 4.1809 BA
1 3.7308 BC
2 3.6818 C
4 3.4583 DC
0 3.0370 D
Anexo 5 Tratamientos aplicados segn la tcnica por Agitador rotatorio longitud tallo
(cm) (T0=testigo;T1=2.5 L;T2=5L;T3=10L;T4=30L;T5=60L;T6=90L)
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
1 2.6818 A
4 2.6000 A
6 2.2826 BA
3 2.2674 BC
5 2.0750 C
2 2.0366 C
0 2.0000 C
89
Anexo 6
RESULTADOS OBTENIDOS POR TECNICA DE MACERACIN
TRATAMIENTO
CD DEL
TRATAMIENTO
PROMEDIO LONGITUD
RAIZ (cm)
DESVIACION
ESTANDAR
Testigo 0 3,14 1,56
2,5 L extracto 1 3,74 1,15
5 L extracto 2 3,76 0,9
10 L extracto 3 3,34 1,2
30 L extracto 4 3,76 1,16
60 L extracto 5 3,9 1,01
90 L extracto 6 3,95 1,3
Anexo 7
RESULTADOS OBTENIDOS POR TECNICA DE MACERACIN
TRATAMIENTO
CD DEL
TRATAMIENTO
PROMEDIO LONGITUD
TALLO (cm)
DESVIACION
ESTANDAR
Testigo 0 1,24 0,34
2,5 L extracto 1 0,98 0,08
5 L extracto 2 1,51 0,45
10 L extracto 3 1,51 0,48
30 L extracto 4 1,096 0,29
60 L extracto 5 1,23 0,42
90 L extracto 6 1,05 0,22
Anexo 8
RESULTADOS OBTENIDOS POR AGITADOR ROTATORIO (cm)
TRATAMIENTO
CD DEL
TRATAMIENTO
PROMEDIO LONGITUD
RAIZ (cm)
DESVIACION
ESTANDAR
Testigo 0 3,03 1,23
2,5 L extracto 1 3,73 0,99
5 L extracto 2 3,68 1,44
10 L extracto 3 4,34 1,35
30 L extracto 4 3,45 1,16
60 L extracto 5 4,18 1,08
90 L extracto 6 4,43 1,05
90
Anexo 9
RESULTADOS OBTENIDOS POR AGITADOR ROTATORIO (cm)
TRATAMIENTO
CD DEL
TRATAMIENTO
PROMEDIO LONGITUD
RAIZ (cm)
DESVIACION
ESTANDAR
Testigo 0 1.24 0,34
2,5 L extracto 1 1.23 0,42
5 L extracto 2 1.09 0,29
10 L extracto 3 1.51 0,45
30 L extracto 4 1.05 0,22
60 L extracto 5 1.51 0,48
90 L extracto 6 0.98 0,08
Anexo 10
RECUENTO DE POBLACION MICROBIANA EN SUELO INICIAL
AGAR PROMEDIO DESVIACION ESTANDAR
193x10
6
ufc/g 37,85 AGAR NUTRITIVO
115x10
6
ufc/g 37,74 AGAR SS
130x10
6
ufc/g 60,04 AGAR PDA
2x10
5
ufc/g 0,57 AGAR SMRS1
AGAR ALMIDN 0 ufc/g 0
Anexo 11
RECUENTO DE ENTEROBACTERIAS DURANTE LA
ELABORACION DE LOS ABONOS EN AGAR SS
Agar SS Bokashi ptalos
Bokashi tradicional
Dia Promedio
Desviacin
estndar Promedio
Desviacin
estandar
5
80x10
5
ufc/g
37,75 81x10
5
ufc/g 44,11
10
80x10
4
ufc/g
2,21 30x10
4
ufc/g 3,51
15
0 ufc/g
0,19 0 ufc/g 0,57
91
Anexo 12 Anlisis estadstico para el recuento de microorganismos en Agar SS en el
proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi tratamiento 1 Bokashi tradicional y
tratamiento 2 Bokashi ptalos de rosa.
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
2 20,167 A
1 15 A
Anexo 13 Recuento de enterobacterias en agar SS durante el tiempo de degradacin de
abonos tipo Bokashi
Duncan Media Da
A 50,25 5
A 2,917 10
A 0,333 15
Anexo 14
RECUENTO DE HONGOS EN AGAR SMRS1 DURANTE LA
ELABORACION DE LOS ABONOS TIPO BOKASHI
Agar
SMRS 1
Bokashi Ptalos
Bokashi Tradicional
Promedio
Desviacin
estndar Promedio
Desviacin
estndar
dia 5 30x10
4
ufc/g 0,57 40x10
4
ufc/g 2
dia 10 60x10
4
ufc/g 2 15x10
5
ufc/g 5
dia 15 30x10
4
ufc/g 60x10
4
ufc/g 1 2,5
92
Anexo 15 Anlisis estadstico para el recuento de hongos en agar SMRS1 para hongos
en el proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
2 6,222 A
1 2,833 B
Duncan Media Da
A 7,25 10
B 3,917 5
B 2,417 15
Anexo 16
RECUENTO DE BACTERIAS EN AGAR SMRS1 DURANTE LA
ELABORACION DE LOS ABONOS TIPO BOKASHI
Agar smrs 1
Bokashi Ptalos
Bokashi Tradicional
Promedio
Desviacin
estndar Promedio
Desviacin
estndar
dia 5 31x10
6
ufc/g 0,57 32x10
5
ufc/g 0.57
dia 10 18x10
5
ufc/g 2 12x10
5
ufc/g 4.5
dia 15 160x10
6
ufc/g 25x10
5
ufc/g 1 5
Anexo 17 Anlisis estadstico para el recuento de microorganismos en agar SMRS1 para
bacteria en el proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
1 107,06 A
2 23,33 B
93
Duncan Media Da
A 114,92 5
BA 67,58 15
B 13,08 10
Anexo 18
RECUENTO DE BACTERIAS EN AGAR ALMIDON DURANTE LA
ELABORACION DE LOS ABONOS TIPO BOKASHI
Agar
almidn
Bokashi Ptalos
Bokashi Tradicional
Promedio
Desviacin
estndar Promedio
Desviacin
estndar
dia 5 30x10
4
ufc/g 0,57 40x10
4
ufc/g 0,57
dia 10 40x10
4
ufc/g 2 30x10
4
ufc/g 4,5
dia 15 50x10
4
ufc/g 20x10
4
ufc/g 1 5
Anexo 19 Anlisis estadstico para el recuento de microorganismos en agar almidn
para bacteria en el proceso de elaboracin de los abonos tipo Bokashi
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Bokashi ptalos 3,7222 A
Bokashi tradicional 3,2778 A
Duncan Media Dia
A 3,5833 5
A 3,5833 10
A 3,3333 15
94
Anexo 20
RECUENTO DE POBLACIN MICROBIANA EN AGAR NUTRITIVO BAJO
COBERTURAS PLSTICAS
Agar nutritivo Promedio Desviacin estandar
Plstico negro
cama 1 50x10
6
33
cama 2 40x10
6
94,5
cama 3 40x10
6
42,5
cama 4 34x10
6
6
Plstico transparente
cama 1 60x10
6
6
cama 2 64x10
6
7
cama 3 50x10
6
7
cama 4 31x10
6
53
Sin plstico
cama 1 14x10
6
103,7
cama 2 18x10
6
45,5
cama 3 27x10
6
11
cama 4 34x10
6
12
Anexo 21 Anlisis estadstico recuento de poblacin microbiana en agar nutritivo de
acuerdo a las camas
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 372,81 A
Cama 2:Bokashi ptalos 304,12 B A
Cama 3:Bokashi tradicional 291,47 BA
Cama 4:Bokashi ptalos 271,79
B
95
Anexo 22
RECUENTO DE HONGOS EN AGAR SMRS1 BAJO COBERTURAS PLSTICAS
Agar Smrs1 hongos Promedio Desviacin estndar
Plstico negro
cama 1 30x10
4
1
cama 2 40x10
4
3,51
cama 3 20x10
4
0,57
cama 4 50x10
4
3
Plstico transparente
cama 1 90x10
4
3
cama 2 20x10
4
0,57
cama 3 20x10
4
1
cama 4 10x10
4
0,57
Sin plstico
cama 1 10x10
4
0,57
cama 2 20x10
4
2
cama 3 20x10
4
1
cama 4 10x10
4
1
Anexo 23 Anlisis estadstico Anlisis estadstico recuento en agar SMRS1 (hongos) de
acuerdo a la cobertura y Cama
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 3.0000 A
Cama 2:Bokashi ptalos 1.4118 B
Cama 3:Bokashi tradicional 1.1765 B
Cama 4:Bokashi ptalos 1.2941 B
96
Anexo 24
RECUENTO DE BACTERIAS EN AGAR SMRS1 BAJO COBERTURAS
PLSTICAS
Agar smrs1 bacterias Promedio Desviacin estandar
Plstico negro
30x10
4
1 cama 1
40x10
4
0 cama 2
20x10
4
1.52 cama 3
50x10
4
cama 4 3
Plstico transparente
70x10
4
2 cama 1
20x10
4
1.52 cama 2
20x10
4
1.52 cama 3
10x10
4
cama 4 0.57
Sin plstico
10x10
4
0.57 cama 1
20x10
4
1.52 cama 2
20x10
4
1.52 cama 3
10x10
4
cama 4 0.57
Anexo 25 Recuento de poblacin microbiana en agar SMRS1 de bacterias
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 2.6875 A
Cama 2:Bokashi ptalos 1.8824 A
Cama 3:Bokashi tradicional 1.1176 A
Cama 4:Bokashi ptalos 2.0000 A
97
Anexo 26
RECUENTO DE BACTERIAS EN AGAR ALMIDN BAJO
COBERTURAS PLSTICAS
Agar Almidn Promedio Desviacin estndar
Plstico negro
40x10
4
0 cama 1
10x10
5
6 cama 2
40x10
4
3 cama 3
57x10
4
cama 4 0,57
Plstico transparente
40x10
4
0 cama 1
57x10
4
1,52 cama 2
70x10
4
2 cama 3
70x10
4
cama 4 1,15
Sin plstico
10x10
4
0,57 cama 1
20x10
4
1,52 cama 2
20x10
4
1,52 cama 3
10x10
4
cama 4 1,15
Anexo 27 Recuento de poblacin microbiana en agar Almidn
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 2,6875
Cama 2:Bokashi ptalos 4,5882 A
Cama 3:Bokashi tradicional 3,1176 A
Cama 4:Bokashi ptalos 4,1176 A
98
Anexo 28
RECUENTO DE BACTERIAS EN AGAR SS BAJO COBERTURAS
PLSTICAS
Agar SS Promedio Desviacin estndar
Plstico negro
11x10
5
19,05 cama 1
10x10
5
0,57 cama 2
40x10
4
6,92 cama 3
cama 4 0 0
Plstico transparente
10x10
4
0,57 cama 1
cama 2 0 0
cama 3 0 0
cama 4 0 0
Sin plstico
cama 1 0 0
cama 2 0 0
cama 3 0 0
cama 4 0 0
Anexo 29 Anlisis estadstico recuento de poblacin microbiana en agar S.S de acuerdo
a las camas
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 2,375 A
Cama 2:Bokashi ptalos 0,118 A
Cama 3:Bokashi tradicional 0,882 A
Cama 4:Bokashi ptalos 0,529 A
99
Anexo 30 Anlisis estadstico del peso seco de las albahacas bajo cobertura plstica sin
variable cama
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
1: Bokashi tradicional plstico negro 20.3000 A
2: Bokashi tradicional plstico transparente 15.5042 B
3: Bokashi tradicional sin plstico; 15.4625 B
4:Bokashi ptalos plstico negro 12.7479 C
5: Bokashi petalos plstico blanco 10.2917 D
6: Bokashi ptalos sin plstico 8.5383 D
Anexo 31 Anlisis estadstico del peso seco de las albahacas bajo cobertura plstica
con variable cama
Tratamiento Valores de medias Agrupamiento Duncan
Cama 1:Bokashi tradicional 13.9250 A
Cama 2:Bokashi ptalos 13.1639 A
Cama 3:Bokashi tradicional 14.1111 A
Cama 4:Bokashi ptalos 14.0297 A
Anexo 32
PESO SECO (g) DE CULTIVO DE ALBAHACA EN BOKASHI TRADICIONAL
Tratamiento Peso seco Desv estndar
Bokashi tradicional plstico negro 15,504 2,53
Bokashi tradicional plstico trasparente 12,576 2,42
Bokashi tradicional sin plstico 10,304 3,15
Anexo 33
PESO SECO (g) DE CULTIVO DE ALBHAHACA EN BOKASHI PTALOS
Tratamiento Peso seco Desv estndar
Bokashi ptalos plstico negro 9,575 3,83
Bokashi ptalos plstico transparente 15,642 3,36
Bokashi ptalos sin plstico 8,538 2,26
100
Anexo 34
Altura de las Albahacas
Valores de
medias
Agrupamiento
Duncan Tratamiento
Tratamiento1: BPPNC2 :bokashi ptalos plstico negro
cama dos 21.933 CB
Tratamiento 2 BPPNC4 :bokashi ptalos plstico negro
cama cuatro 26.333 A
Tratamiento3: BPPTC2 bokashi ptalos plstico
transparente cama dos 22.633 B
Tratamiento 4 BPSPC2 bokashi ptalos sin plstico cama
dos 19.667 CD
Tratamiento 5: BPSPC4 bokashi ptalos sin plstico cama
cuatro, Tratamiento 5 18.444 D
Tratamiento 6: BTPNC1 bokashi tradicional plstico negro
cama uno 18.444 E
Tratamiento 7 BTPNC3 bokashi tradicional plstico negro
cama tres 25.444 A
Tratamiento 8: BTPTC1 bokashi tradicional plstico
transparente cama uno), 15.933 E
Tratamiento 9:BTPTC3 bokashi tradicional plstico
transparente cama tres 25.000 A
Tratamiento 10: BTSPC1 (bokashi tradicional sin plstico
cama uno 14.688 E
Tratamiento 11: BTSPC3 (bokashi tradicional sin plstico cama tres)
21.647 CB
Anexo 35
ALTURA DE CULTIVO DE ALBAHACA (cm) EN BOKASHI TRADICIONAL BAJO
COBERTURAS PLSTICAS
Tratamiento Altura (cm) Desv estndar
Bokashi tradicional plstico negro 20,25 4,99
Bokashi tradicional plstico trasparente 20,333 5,88
Bokashi tradicional sin plstico 17,375 6,25
101
Anexo 36
Altura del cultivo de albahaca (cm) en bokashi ptalos bajo coberturas plsticas
Tratamiento Altura (cm) Desv estndar
Bokashi ptalos plstico negro 24,0416667 3,38
Bokashi ptalos plstico trasparente 22,75 3,55
Bokashi ptalos sin plstico 19,625 2,20
Anexo 37
MEDIOS DE CULTIVO
MEDIO SMRS1 (LPEZ et al.,, 2006)
Glucosa 10 g/l
Ca
3
(PO
4
)
2
5 g/l
(NH
4
)
2
SO
4
0.5 g/l
KCL 0.2 g/l
Mg SO4.7H2O 0.3g/l
MnSO4 0.004 g/l
FeSO4 0.002 g/l
NaCl 20 g/l
Extracto levadura 0.5 g/l
Purpura de Bromocresol 0.1g/l
Agar-agar 15 g/l
AGAR LECHE (MERCK 1994)
Leche descremada suplementada con calcio al 1% (p/v)
Glucosa 1.0 g/l
CaCl 0.5 g/l
(NH
4
)
2
SO
4
1 g/l
102
Extracto de levadura 1 g/l
Fosfato monobsico de sodio 0.5 g/l
Fosfato dibsico de sodio 0.5 g/l
Agar-agar 15 g/l
pH 7
AGAR ALMIDON (MERCK 1994)
Almidn hidrosoluble 1%(p/v)
Cloruro de calcio 0.1 g/l
Sulfato de amonio 1 g/l
Extracto de levadura 2.5 g/l
Peptona 2.5 g/l
NaH
2
PO
4
0.1 g/l
Agar-agar 15 g/l
pH 7.0
Se disuelve todos los componentes lentamente y por ultimo se adiciona el almidn y se
calienta lentamente con agitacin constante, esterilizar por 7 minutos a 7 libras de
presin
AGAR CMC 1% p/v
Carboximetilcelulosa 10 g/l
Extracto de levadura 2.5 g/l
Peptona universal 2.5 g/l
Sulfato de amonio 0.5 g/l
Cloruro de calcio 0.5 g/l
Fosfato monobsico de potasio 0.1 g/l
103
Fosfato dibsico de potasio 0.1 g/l
Agar-agar 15g/l
Ajustar pH 7+/-2
AGAR PIKOVSKAYA
Glucosa 10g/l
Fosfato de calcio 5 g/l
Cloruro de sodio 0.2 g/l
Sulfato de amonio 0.5 g/l
Sulfato de magnesio heptahidratado 0.1 g/l
Extracto de levadura 0.5 g/l
Sulfato de manganeso 0.1 g/l
Agar agar 20 g/l
REACTIVOS:
Rojo Congo 1% (p/v); composicin Rojo congo, 10 g/l
NaCl 0.1 M; composicin NaCl, 200g/l
Lugol
104