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GASTIASORO, Francisco; SANTINI, Carlos

SCAFFOLDS DE HIDROGELES REABSORBIBLES

A. INDICE
A. NDICE......................................................................................................................1 B. OBJETIVOS..............................................................................................................3 C. ACTIVIDADES.........................................................................................................4 D. RESUMEN.................................................................................................................8 E. INTRODUCCIN..................................................................................................12 F. DESARROLLO.......................................................................................................13 Captulo 1: CONCEPTOS GENERALES SOBRE HIDROGELES.......................13 1.1. Definicin y estructura de los Hidrogeles ............................................................13 1.2. Sntesis de los Hidrogeles......................................................................................14 1.3. Factores que afectan al hinchamiento....................................................................16 1.4. Hidrogeles sensibles al medio.............................................................................17 1.4.1. Sensibilidad al PH................................................................................................17 1.4.2. Sensibilidad a la Temperatura..............................................................................18 1.4.3. Sensibilidad a la Luz.............................................................................................19 1.4.4. Sensibilidad al Campo Elctrico...........................................................................20 1.5. Propiedades de los Hidrogeles............................................................................20 1.5.1. Estabilidad Dimensional........................................................................................20 1.5.2. Humectabilidad superficial y tensin superficial crtica.......................................20 1.5.3. Permeabilidad al Oxgeno.....................................................................................20 1.5.4. Permoselectividad..................................................................................................21 1.5.5. Propiedades Mecnicas.........................................................................................21 1.6. Mecanismo de Degradacin................................................................................22 1.6.1. Degradacin Hidroltica........................................................................................22 1.6.2. Biodegradacin......................................................................................................23 1.7. Biocompatibilidad y Biofuncionalidad..................................................................23 Captulo 2: APLICACIONES BIOMDICAS DE HIDROGELES........................24 2.1. 2.2. 2.3. 2.4. 2.5. 2.6. 2.7. Ingeniera de Tejidos.............................................................................................24 Transporte y liberacin de Frmacos....................................................................24 Lentes de contacto.................................................................................................26 Correccin de problemas oculares.........................................................................27 Revestimiento de suturas.......................................................................................27 Prtesis de tejidos blandos.....................................................................................27 Filtros para Hemodilisis.......................................................................................27

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Captulo 3: HIDROGELES REABSORBIBLES.......................................................28 3.1. Hidrogeles Naturales...........................................................................................28 3.1.1. Colgeno................................................................................................................28 3.1.2. Acido Hialurnico.................................................................................................29 3.1.3. Quitosn.................................................................................................................29 3.1.4. Alginato.................................................................................................................31 3.1.5. Polihidroxialcanoatos (PHA).................................................................................31 3.2. Hidrogeles Sintticos...........................................................................................33 3.2.1. Poli(N-vinil pirrolidona)........................................................................................33 3.2.2. Alcohol Polivinlico...............................................................................................33 3.2.3. cido polilctico (PLA)........................................................................................34 3.2.4. Polietilenglicol.......................................................................................................35 Captulo 4: CARACTERISTICAS Y METODOS DE FABRICACION DE ANDAMIOS EN INGENIERA DE TEJIDOS.........................................................36 4.1. Caractersticas de los Andamios........................................................................36 4.1.1. Porosidad...............................................................................................................36 4.1.2. Tamao de Poro.....................................................................................................36 4.1.3. Propiedades Superficiales......................................................................................36 4.1.4. Propiedades mecnicas y biodegradacin.............................................................37 4.2. Mtodos de fabricacin de andamios.................................................................38 4.2.1. Gel Casting............................................................................................................38 4.2.2. Disolucin y colada con liberacin de partculas..................................................38 4.2.3. Liofilizacin..........................................................................................................38 4.2.4. Separacin de fases................................................................................................38 4.2.5. Saturacin con gas ................................................................................................39 4.2.6. Laminacin de membranas....................................................................................39 Captulo 5: APLICACIONES DE LOS ANDAMIOS EN INGENIERA DE TEJIDOS.......................................................................................................................41 5.1. Andamios para Ingeniera de Tejido Heptico.................................................41 5.1.1. Andamios hbrido de quitosano y gelatina............................................................42 5.1.2. Andamios de quitosano con agregado de fructosa................................................44 5.2. Andamios para Ingeniera de Tejido seo............................................................44 5.3. Andamios para Ingeniera de Cartlago.................................................................46 G. CONCLUSIONES...................................................................................................47 H. BIBLIOGRAFA....................................................................................................48 I. ANEXOS.................................................................................................................54 I.1 GLOSARIO.............................................................................................................54 I.2 CLAVES DE BUSQUEDA.....................................................................................57 I.3 PUBLICACIONES..................................................................................................58

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B. OBJETIVOS
B.1. Conocer y comprender, desde la perspectiva de una revisin bibliogrfica, ms acerca del rol que puede desempear un Bioingenero dentro de la disciplina de los biomateriales. Conocer y comprender la terminologa bsica castellana e inglesa utilizada en el tema. Aplicar los conocimientos generales aprendidos durante el cursado de las asignaturas Biomateriales I y Biomateriales II a un trabajo de revisin bibliogrfica. Analizar caractersticas y conceptos generales de hidrogeles. Analizar las aplicaciones de los hidrogeles en el mbito de la medicina. Analizar la composicin y propiedades de los hidrogeles sintticos y naturales reabsorbibles en aplicaciones biomdicas. Analizar la estructura, propiedades y sntesis de los andamios reabsorbibles. Analizar las aplicaciones de los andamios para ingeniera tisular y liberacin controlada de frmacos.

B.2. B.3.

B.4. B.5 B.6. B.7. B.8.

B.10. Analizar los ltimos avances en la realizacin y aplicaciones de Andamios de hidrogeles reabsorbibles. B.11. Sintetizar lo expuesto a travs de la confeccin de un resumen. B.12. Evaluar los conocimientos adquiridos a travs de la elaboracin de conclusiones.

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C. ACTIVIDADES
2009-08-14 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Ingeniera+de+tejidos+scaffold+cartlago+andamios Direccin Obtenida: http://www.doyma.es/reuma/ctl_servlet?_f=45&ident=13111163 Resultado: Clemente Ibarra, David Garciadiego, Valentn Martnez y Cristina Velasquillo. Unidad de Ingeniera de Tejidos, Terapia Celular y Medicina Regenerativa. 2009-08-14 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: ingenieria+cartilago Direccin Obtenida: http://www.aebt.org%2Fcongreso2008%2FDocumentacion %2FPrograma_Cientifico%2FSesion_V%2FComunicaciones%2Fealegre-cp.pdf Resultado: INGENIERA TISULAR DE CARTLAGO: CLULAS MESENQUIMALES OBTENIDAS DE TEJIDO ADIPOSO Y LQUIDO SINOVIAL OVINO.Elena Alegre-Aguarn, Felicito Garca-Alvrez, Mara Royo-Caas, Paula Desportes, TomsCastiella, Luis Larrad y Mara Jos MartnezLorenzo. 2009-08-30 Domicilio Particular del alumno Francisco Ezequiel Gastiasoro. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: nuevo+scaffold+cartlago Direccin Obtenida: http://www.aebt.org%2Fcongreso2008%2FDocumentacion %2FPrograma_Cientifico%2FSesion_V%2FComunicaciones%2Fegarcia-co.pdf Resultado: DESARROLLO DE UN NUEVO SCAFFOLD BASADO EN ALBMINA. Garca-Prez E., Llames S., Garca V, Pevida M. Martnez R. ,Caal P. lvarez-Viejo M., Holgun A, Duarte B, Del Ro M. Menndez-Tvar F. Meana A. Centro de Sangre y Tejidos del Principado de Asturias. CIBERER U714. Fundacin INCLNICA. Hospital Central de Asturias. CIEMAT. 2009-09-10 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: chitosan+hepatocyte+scaffold Direccin Obtenida: http://www3.interscience.wiley.com/journal/106560128/abstract? CRETRY=1&SRETRY=0 Resultado: Culture of hepatocytes on fructose-modified chitosan scaffolds Jieliang Li, Jilun Pan*, Liguo Zhang, Yaoting Yu 2009-09-10 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar
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Clave de bsqueda: chitosan+hepatocyte+scaffold Direccin Obtenida: http://www.jvir.org/article/S1742-7061(08)00190-6/abstract Resultado: Culture of hepatocytes on fructose-modified chitosan scaffolds Jieliang Li, Jilun Pan*, Liguo Zhang, Yaoting Yu 2009-09-10 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: ingenieria+tejido+oseo+andamios+scaffold Direccin Obtenida: http://revista.eia.edu.co%2Farticulos5%2Fart75.pdf Resultado: Revista EIA, ISSN 1794-1237 Nmero 5 p. 93-100. Junio 2006 Escuela de Ingeniera de Antioquia, Medelln (Colombia) INGENIERA DE TEJIDO SEO: Consideraciones Bsicas 2009-09-22 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: ingenieria+tejido+oseo+andamios Direccin Obtenida: www.pue.itesm.mx/cima/publicaciones/Tejidososeos.pdf Resultado: Journal de Investigacin de la Escuela de Graduados e Innovacin Tec de Monterrey Campus Puebla .La Ingeniera de Tejidos seos. Roberto Benito Palma Corts, S. Valdez, Said Robles Casolco 2009-09-22 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Hidrogeles + caracteristicas Direccin Obtenida: www.ehu.es/reviberpol/pdf/publicados/escobar2.pdf Resultado: Revista Iberoamericana Polmeros Volumen 3(3) Julio 2002 Escobar et al. Hidrogeles. Principales caractersticas HIDROGELES. PRINCIPALES CARACTERSTICAS EN EL DISEO DE SISTEMAS DE LIBERACIN CONTROLADA DE FRMACOS 2009-09-22 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Hidrogel + degradables Direccin Obtenida: www.espatentes.com/pdf/2281925_t3.pdf Resultado: HIDROGELES DE POLIETILENGLICOL DEGRADABLES CON SEMIVIDA CONTROLADA Y PRECURSORES DE LOS MISMOS. PATENTE EUROPEA. 2009-09-25 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar
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Clave de bsqueda: Hidrogel + degradables Direccin Obtenida: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1810634X2007000300005&script=sci_arttext Resultado: REVISTA DE LA SOCIEDAD QUMICA DE PER - 2007 2009-09-25 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Hidrogeles+de+quitosano Direccin Obtenida: http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=2382070 Resultado: REVISTA IBEROAMERICANA DE POLMEROS SINTESIS Y CARACTERIZACIN DE HIDROGELES DE QUITOSANO
(SEPTIEMBRE DE 2007)

2009-09-25 UNER - Facultad de bioingeniera - Biblioteca Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Hidrogeles + inteligentes Direccin Obtenida: http://biblioteca.universia.net/ficha.do?id=32924446 Resultado: Materiales inteligentes: Hidrogeles macromoleculares. Algunas aplicaciones biomdicas (Katime, Issa, Katime, Oscar, Katime, Daniel) 2009-10-02 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: PEG+hidrogel+scaffold Direccin Obtenida: http://www.sciencedirect.com/science? _ob=ArticleURL&_udi=2&_user=10&_rdo10&md5=fd399fcd01d3570002186ba47a04 43f6 Resultado: In vitro and in vivo test of PEG/PCL-based hydrogel scaffold for cell delivery application (Ji Sun Park, Dae Gyun Woo, Bo Kyung Sun, Hyung-Min Chung, Su Jin Im, You Mee Choi, Kinam Park, Kang Moo Huh, Keun-Hong Park) (20 june 2007) 2009-10-02 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: SCAFFOLD+FABRICATION+TECHNIQUES Direccin Obtenida: http://www.tcd.ie/bioengineering/documents/ChapterV_000.pdf Resultado: REGULAR SCAFFOLD FABRICATION TECHNIQUES FOR
INVESTIGATIONS IN TISSUE ENGINEERING (C.T. Buckley, K.U. OKelly)

2009-10-02 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini.


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Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Polymer+Scaffold+Engineering Direccin Obtenida: http://www.staff.science.nus.edu.sg/~scilooe/.../lau_yao_loong_calvin.pdf Resultado: POLYMER SCAFFOLD STRUCTURE FOR TISSUE ENGINEERING (Lau Yao
Loong Calvin1, Tong Yen Wah)

2009-10-11 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: scaffolds+tissue+engineering Direccin Obtenida: http://www.emeraldinsight.com/Insight/viewContentItem.do;jsessionid=6FF9815CC66 6F8DC2E057C841CA48208? contentType=Article&hdAction=lnkhtml&contentId=875563 Resultado: DESIGNING HYDROGEL COATED TEXTILE SCAFFOLDS FOR TISSUE
ENGINEERING:EFFECT OF CASTING CONDITIONS AND DEGRADATION BEHAVIOR STUDIED ATMICROSTRUCTURE LEVEL
(M. V. RISBUD, E. KARAMUK, J. MAYER)

2009-10-11 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: Scaffolds+bone+cartilage Direccin Obtenida: http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=821920 Resultado: SCAFFOLDS IN TISSUE ENGINEERING BONE AND CARTILAGE
(Dietmar W. Hutmacher)

2009-10-15 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: soporte+heptico+extracorpreo Direccin Obtenida: www.revistanefrologia.com/mostrarfile.asp?ID=1737 Resultado: SISTEMAS DE SOPORTE HEPTICO EXTRACORPREO:
UN PASO MS HACIA LAS TCNICAS DE DEPURACIN INTEGRAL
(J. F. Avils, M. Maca*,** y J. Garca*)

2009-10-15 Domicilio Particular del alumno Carlos Ariel Santini. Bsqueda en Internet Buscador: www.google.com.ar Clave de bsqueda: regeneracion+hepatica Direccin Obtenida: http://eprints.ucm.es/tesis/far/ucm-t28401.pdf Resultado: MECANISMOS DE REGENERACIN HEPTICA REGULACIN POR
XIDO NTRICO Y PROSTAGLANDINAS - Zeini Moreno, Miriam (2006)

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D.

RESUMEN

Los Hidrogeles son polmeros entrecruzados en forma de red tridimensional, hidroflicos, insolubles en agua, que tienen la capacidad de absorber agua y sufren cambios de volumen en respuesta a cambios de temperatura, pH, campo elctrico, luz y composicin del disolvente. Debido a su buena biocompatibilidad, propiedades y mecanismos de degradacin se utilizan como biomateriales. Se asemejan a los tejidos vivos por su contenido en agua relativamente alto, su consistencia blanda y elstica y su baja tensin superficial. Su campo de aplicacin biomdica ha crecido y promete una enorme expansin en cuanto a su uso en la fabricacin de andamios para ingeniera de tejidos seo, cartilaginoso, heptico, epitelial y su utilizacin para la liberacin controlada de frmacos contra el tratamiento de enfermedades. Otras Aplicaciones ms comerciales son la fabricacin de lentes de contacto, correccin de glaucomas, revestimiento de suturas y prtesis de tejidos blandos. Los hidrogeles pueden ser de origen natural como el colgeno (polmero protenico presente en la piel y los tendones), cido hialurnico (presente en humor vtreo y tejido conjuntivo), quitosano (obtenido por deacetilacin de la quitina presente en los caparazones de camarones y gambas), alginato (polisacrido lineal que se obtiene a partir de algas pardas) y polihidroxialcanatos (sintetizados por microorganismos en un medio de cultivo rico en hidratos de carbono bajo condiciones de estrs nutricional). Entre los hidrogeles sintticos se destacan la poli N-vinil pirrolidona, el polivinil alcohol, el polietilenglicol y el cido polilctico (PLA). Los hidrogeles se utilizan para fabricar matrices o andamios sobre las cuales las clulas se reorganizan y forman un tejido nuevo. La matriz debe ser tridimensional, altamente porosa, biocompatible, absorbible y tener una superficie qumicamente adecuada para permitir la adhesin celular. Los andamios pueden obtenerse por los mtodos: gel casting, disolucin y colada con liberacin de partculas, laminacin de membranas, separacin de fases, saturacin con gas, y liofilizacin. La ingeniera de tejido heptico presenta complicaciones debido a la diversidad de tipos celulares que lo componen, un 80 % de hepatocitos, y un 20 % de clulas de Kupffer, endoteliales, epiteliales biliares y esteladas. La sobrevida de los hepatocitos, la secrecin de albmina y la sntesis de Urea se relacionan con la tcnica de obtencin, la geometra y el material del andamio utilizado. Se han obtenidos andamios hbridos de quitosano y gelatina mediante prototipado rpido (esterolitografa) seguido de liofilizacin con tamao de poro medio de 100 m. El agregado de solucin de fructosa al andamio produce mayor eficiencia en la secrecin celular de albmina y Urea. En ingeniera de tejido seo (ITO) se utilizan andamios cermicos de hidroxiapatita y fosfato triclcico, polimricos naturales de colgeno, quitosano y sintticos de policarbonatos, cido polilctico (PLA) y cido poligliclico (PGA), con tamao de poro entre 200 y 900 m. En ingeniera de tejido cartilaginoso se usan andamios de colgeno, alginato, agarosa, PGA, PLA, con tamao de poro entre 100 y 300 m. Las superficies de los materiales son modificadas con protenas y factores de crecimiento que estimulan la respuesta celular, en ITO se utilizan protenas morfognicas seas (BMP), el factor insulinoide de crecimiento (IGF), el factor transformante del crecimiento de tipo b (TGFb), el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y
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el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF). En ingeniera de tejido cartilaginoso los mejores resultados se obtuvieron con BMP2, BMP4 y el TGF1. Este trabajo ampli la visin de los autores con respecto al desarrollo y sntesis de hidrogeles reabsorbibles utilizados en la fabricacin de andamios para ingeniera de tejidos. Adems permiti integrar los conocimientos obtenidos en el cursado de Biomateriales I y II, como as tambin el rol que puede desempear un bioingeniero en un grupo interdisciplinario de profesionales

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ABSTRACT
Hydrogels are cross linked polymers that resemble a three-dimensional web, hydrophilic, insoluble in water, that have the capacity of absorving water and suffer changes in volume as a result of the changes in temperature, pH, electric field, light, and the composition of the solvent. Owing to their good biocompatibility, characteristics and degradation mechanisms they are used as biomaterials. They are like alive tissues due to their relatively high content of water, soft and elastic consistency and low surface tension. Its field of biomedical application has grown and promises a huge expansion in the use and creation of scaffolds for the osseous engineering, cartilaginous, hepatic and epithelial tissues and its usage in the controlled freedom of medicines and drugs against diseases treatment. Other and more comercial applications are the creation of contact lens, glaucoma correction, covering of scar tissues and prothesis for soft tissues. Hydrogels can be of natural origin, as collagen (protein polymers that is present in the skin and tendons), hyaluronic acid (present in vitreous humor, and conjunctive tissue), chitosan (obtained through the deacetylation of the chitin present in the shells of some sea animals as gambas), alginate (linear polysaccharide obtained from algaes) and polyhydroxyalkanoate (synthesized by microorganisms in a special plantaron rich in carbohydrates under feeding stressed conditions). Among synthetic hydrogels, the poly N vinyl pirrolidone, the polyvinyl alcohol, the polyethylene glycol and the polylactic acid (PLA). Hydrogeles are used to create matrices or scaffolds on which cells are reorganized and make up a new tissue. The matrix must be three-dimensional, highly porous, biocompatible, absorvent and with a chemical adecuate surface to allow cell adhesion. Scaffolds can be obtained through different methods: gel casting, disolution and permeation with particles release, layer lamination, phase separation, gas saturation and lyophilization. The hepatic tissue engineering presents some complications due to the diversity of the different kinds of cells that make up it, an 80 % of hepatocyte, and a 20% of Kupffer cells, endothelial, epithelial biliary and starwort. The hepatocyte life expectancy, the albumin secretion and the Urea synthesis are related to the obtainable technique, the geometry and the scaffolds material used. Hybrid scaffolds have been gotten from quitosano and gelatina through esterolitography followed by lyophilization with a medium porous size of 100um. The adding of fructose solution to the scaffold produces a high efficiency in the albumin and Urea cell secretion. Osseous tissue engineering (ITO) uses scaffolds ceramic of hydroxyapatite and three-calcium phosphate, natural polymers of collagen, chitosan and synthetic policarbons, polylactic acid, and polyglycolic acid, with a porous size ranged between 200 and 900um. Cartilaginous tissue engineering uses scaffolds of collagen, alginate, agarose, PGA, PLA, with a porous size between 100 and 300um. The materials surfaces are modified with proteins and growing factors that stimulate the cell answer, ITO uses morphogenics osseous proteins (BMP), the insulinoid factor of growth (IGF), the changing factor of growth of type b (TGFb), the growth factor derived from blood disk (PDGF) and the 10

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growth factor of fibroblast (FGF). In cartilaginous engineering the best results were obtained with BMP2, BMP4 and TGF1. This work broaden the view of the authors in respecto f the development and synthesis of the reabsorbable hydrogeles used in the creation of scaffolds for tissue engineering. Moreover, it allowed to integrate the obtained knowledge in the attending of Biomaterial I and II, as well as the role a bioengineer can have in an interdisciplinary group of professionals.

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E.

INTRODUCCION

Desde finales del siglo XIX, se han producido muchos avances en el estudio de las propiedades de los hidrogeles, consiguindose desarrollar materiales de gran importancia en la ingeniera biomdica. Estos materiales tienen la capacidad de ser compatible con el tejido y degradarse cierto tiempo despus de su uso, dando lugar a productos que no son txicos y que pueden ser eliminados por el organismo o metabolizado por ste. Los recientes avances en el campo biomdico se debe especialmente al desarrollo de materiales polimricos tridimensionales (andamios) para su utilizacin en ingeniera de tejidos. La meta de la ingeniera tisular es superar las limitaciones de los tratamientos convencionales basados en el trasplante de rganos y la utilizacin de biomateriales para producir una fuente de rganos artificiales inmunologicamnte tolerantes y sustitutos de tejidos que puedan regenerar tejidos u rganos. Normalmente, el andamio es construido con materiales biodegradables, para que pueda ser eliminado una vez cumplida su funcin. En el mbito farmacolgico, los hidrogeles se han reconocido como matrices polimricas de elevada biocompatibilidad y atractiva capacidad de hinchamiento en medio acuoso, lo cual facilita la liberacin de medicamentos de manera controlada. Los hidrogeles denominados inteligentes son aquellos que pueden responder a diferentes estmulos del medio. As, se pueden crear dispositivos polimricos capaces de generar una respuesta a estmulos fsicos, qumicos y elctricos del medio. Debido a las ventajas que presentan los hidrogeles para su uso como biomaterial hacen que se trabaje mucho en la bsqueda de nuevos hidrogeles biocompatibles. El desarrollo de hidrogeles artificiales para su uso como biomateriales resulta complejo, largo y costoso, y adems debe llevarse a cabo por un equipo de investigacin multidisciplinario. Despus de que se obtiene el material con las peculiaridades deseadas, siguen las etapas de diseo y fabricacin de prototipos y de evaluacin toxicolgica mediante ensayos in vitro e in vivo. Al final se efectan protocolos de ensayos y se estudia su efectividad en humanos. Toda la etapa de investigacin puede prolongarse hasta ms de diez aos antes de que un nuevo biomaterial salga al mercado.

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F.

DESARROLLO

Captulo 1: HIDROGELES CONCEPTOS GENERALES 1.1 Definicin y estructura de los Hidrogeles Definicin: Materiales polimricos (compuesto qumico formado por la combinacin de unidades estructurales repetidas (monmero) o cadenas lineales de la misma molcula) entrecruzados en forma de red tridimensional de origen natural o sinttico, que se hinchan en contacto con el agua formando materiales blandos y elsticos, y que retienen una fraccin significativa de la misma en su estructura sin disolverse. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Los slidos polimricos son especialmente aptos para formar geles gracias a su estructura de largas cadenas. La flexibilidad de estas cadenas hace posible que se deformen para permitir la entrada de molculas de disolvente dentro de su estructura tridimensional (Diez Pea-2002 [11]). Clasificacin en funcin de la naturaleza de las uniones de la red tridimensional que los constituyen: Geles fsicos: Presentan una red tridimensional formada por uniones que no son completamente estables. Generalmente, las uniones son del tipo de Van der Waals, muchos ms dbiles que las uniones covalentes. Dan origen a las mallas no entrecruzadas. Geles qumicos: que son aquellos en los que la red est formada a travs de enlaces covalentes. Este tipo de enlace es muy fuerte y su ruptura conduce a la degradacin del gel. Dan lugar a las mallas entrecruzadas. La diferencia fundamental entre polmeros entrecruzados y no entrecruzados reside en que, en los primeros, la entrada de lquido no puede separar las cadenas por estar covalentemente unidas mientras que en los segundos, la entrada de lquido puede desenmaraar las cadenas, separndolas, debido a que las fuerzas que las mantienen unidas son de origen fsico. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) La apariencia externa que tiene un gel depende de su proporcin lquido / slido. En el caso de los polmeros entrecruzados, los geles mantienen su aspecto de slidos elsticos. Pero en el caso de polmeros no entrecruzados, a medida que aumenta la proporcin de lquido se va pasando desde dicho aspecto de slido elstico al de lquido viscoso. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42])

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Fig 1.1 Estructura de un gel polimrico (Saez-2004 [42])

Los Hidrogeles presentan una serie de caractersticas particulares como son: - Carcter hidrfilo: debido a la presencia en la estructura de grupos solubles en agua (-OH, -COOH, -CONH2, -CONH, SO3H). - Insolubles en agua: debido a la existencia de una red polimrica tridimensional en su estructura. - Presentan una consistencia suave y elstica la cual est determinada por el monmero hidrfilo de partida y la baja densidad de entrecruzamiento del polmero. - Se hinchan en agua aumentando considerablemente su volumen hasta alcanzar un equilibrio qumico-fsico, pero sin perder su forma. La forma no hidratada se denomina xerogel. Los hidrogeles pueden clasificarse de varias formas dependiendo de qu caractersticas y propiedades particulares se tomen como referencia. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) -En base a la naturaleza de los grupos laterales pueden clasificarse en neutros o inicos (aninicos, catinicos, anfolticos). -De acuerdo a sus caractersticas mecnicas y estructurales : Se pueden clasificar en redes afines o redes fantasma. -Dependiendo del mtodo de preparacin : Red homopolimrica, copolimrica, multipolimrica, o red polimrica interpenetrada. -En base a la estructura fsica de la red: En hidrogeles amorfos, semicristalinos, estructuras por enlaces de hidrgeno y agregados hidrocoloidales.

1.2 Sntesis de los Hidrogeles En la sntesis de un hidrogel, junto a los elementos habituales de cualquier reaccin de polimerizacin, tales como el disolvente, monmero o monmeros y el iniciador, se necesita de un agente entrecruzante, que va a ser el responsable de la estructura reticulada del gel. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Al sintetizar un hidrogel se puede elegir entre un gran nmero de monmeros, que dividiremos en tres categoras: 1) Monmero con sustituyentes laterales no ionizables : En esta categora pueden incluirse la acrilamida, la N-vinilpirrolidona, el metacrilato de 2-hidroxietilo, etc.

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2) Monmeros con grupos funcionales ionizables : Como, por ejemplo, los cidos acrlicos, metacrlicos, itacnico, sulfnicos y aminas; de los cuales se obtienen hidrogeles que absorben gran cantidad de agua y tienen pobres propiedades mecnicas. Para los polmeros preparados a partir de estos monmeros, el hinchamiento en disolucin acuosa de sales disminuye como consecuencia del apantallamiento de las cargas por los iones salinos (efecto polielectroltico). 3) Monmeros switerinicos o sales internas: El sustituyente lateral consiste en dos grupos cargados y unidos a la cadena principal. Su caracterstica primordial es que para el polmero entrecruzado el hinchamiento de la red es mayor en disolucin salina que en agua. Los hidrogeles se preparan mediante el hinchamiento de una estructura entrecruzada en agua o fluidos biolgicos que contienen grandes cantidades de sta. En muchas ocasiones el fluido puede estar presente durante la formacin de la estructura entrecruzada. Existen varios mtodos de preparar hidrogeles entrecruzados como son: -Entrecruzamiento por radiacin: Esta reaccin utiliza la emisin de electrones, rayos gamma, rayos X o luz ultravioleta para excitar el polmero y producir la estructura entrecruzada. -Reaccin qumica: Este mtodo es una reaccin de copolimerizacin y entrecruzamiento entre uno o ms monmeros y un monmero multifuncional el cual est presente en muy pequeas cantidades, este ltimo se denomina agente entrecruzante y presenta una masa molecular pequea, se une a cadenas de peso molecular grande a travs de sus grupos multifuncionales. En la sntesis de hidrogeles, la prctica ms habitual consiste en copolimerizar distintos monmeros para obtener propiedades finales adecuadas a la aplicacin deseada. Por lo general, a un monmero hidrfilo (que asegurar una mayor entrada de agua en la red molecular y, por tanto, un mayor contenido de agua) se le aade uno hidrfobo (que mejora sensiblemente las propiedades mecnicas del hidrogel resultante).Por otro lado, se pueden obtener diferentes tipos de hidrogeles variando la estructura molecular o el grado de entrecruzamiento del material. (Diez Pea-2002 [11] , Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Independientemente del tipo de polimerizacin y de los monmeros que se utilicen, es necesario emplear un agente desencadenante de la reaccin de polimerizacin o iniciador. Los sistemas de iniciacin que pueden emplearse son los habituales en la sntesis de polmeros: radicales libres, temperatura, iniciadores inicos, radiacin gamma o par redox. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) En general, el grado de entrecruzamiento determina la solubilidad, el grado de hinchamiento, el tamao de poro del material, el rea total superficial y la resistencia mecnica del polmero. La eleccin del agente entrecruzante y de otros monmeros modificadores de propiedades, depende del tipo de monmero base elegido y es fundamental a la hora de optimizar las propiedades del hidrogel a sintetizar.

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La densidad de entrecruzamiento es una expresin del nmero promedio de unidades de monmeros repetidas entre nudos. Una densidad de entrecruzamiento baja permite tener una red ms abierta, un valor mayor de este parmetro permite un hinchamiento potencial, pero a su vez el gel es menos deformable. El caso ms simple de entrecruzamiento es la formacin de enlaces covalentes entre cadenas de polmeros individuales formando una red tridimensional infinita. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) El entrecruzamiento covalente puede obtenerse por una variedad de tcnicas, por ejemplo, la polimerizacin de una disolucin concentrada de cido acrlico puede causar auto-entrecruzamiento a travs de la eliminacin de tomos de hidrgeno del esqueleto del polmero, seguida de combinaciones radicales. Tambin es posible obtener entrecruzamiento covalente mediante radiacin ionizante y puede ser controlada a travs de la dosis y la velocidad de la radiacin aplicada al sistema. Sin embargo, la ruta ms comn para obtener este tipo de entrecruzamiento es la copolimerizacin del monmero principal con una pequea cantidad de un comonmero multifuncional. (Diez Pea2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Las fuerzas cohesivas que permiten el entrecruzamiento no son tan slo de carcter covalente. Tambin intervienen otras fuerzas, como por ejemplo, las electrostticas, hidrfobas, interacciones dipolo-dipolo o enlaces de hidrgeno.

1.3 Factores que afectan al hinchamiento La relacin de entrecruzamiento es uno de los factores ms importantes que afectan al hinchamiento de los hidrogeles y se define como la relacin entre los moles de agente entrecruzante y los de las unidades repetidas de monmero. A mayor entrecruzamiento, mayor cantidad de agente entrecruzante es incorporado en la estructura del hidrogel. Los hidrogeles muy entrecruzados tienen una estructura ms compacta y se hinchan mucho menos comparndolos con el mismo hidrogel con un entrecruzamiento menor. La estructura molecular del polmero tambin puede afectar al hinchamiento. Aquellos hidrogeles que contienen grupos hidrfilos en su estructura se hinchan en mayor grado que aquellos que contienen grupos hidrfobos, los cuales se colapsan en presencia de agua, minimizando su interaccin con las molculas de agua y dando como resultado hidrogeles mucho menos hinchados. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Una red polimrica tridimensional puede absorber una gran cantidad de agua o fluido con el que se ponga en contacto. Durante el hinchamiento, las cadenas que conforman la red asumen una configuracin elongada y esta dilatacin va acompaada de la aparicin de una fuerza retrctil en oposicin al proceso de hinchamiento, que acta como una presin que las cadenas de la malla ejercen sobre el disolvente contenido en ella. A medida que la malla se hincha con el disolvente aumenta dicha presin elstica y el hinchamiento alcanza su valor mximo o de equilibrio cuando se obtiene un balance entre ambas fuerzas. Similar analoga existe entre el equilibrio de hinchamiento y el equilibrio osmtico. La reaccin elstica de la red puede ser interpretada como una presin actuando en la disolucin
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o el gel hinchado. En el estado de equilibrio esta presin es suficiente para incrementar el potencial qumico del disolvente en la disolucin de forma tal que compense el valor debido al exceso de disolvente alrededor del gel hinchado. 1.4 Hidrogeles sensibles al medio Los hidrogeles a veces sufren cambios de volumen en respuesta a cambios en las condiciones externas. La red polimrica puede cambiar su volumen en respuesta a un cambio en el medio como la temperatura, composicin del disolvente, campo elctrico, luz , pH, presin, etc. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) En particular la mayora de los trabajos de investigacin han estado centrados en el efecto del pH y la temperatura debido a la importancia de estas variables en sistemas fisiolgicos, biolgicos y qumicos. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42])

Tabla 1 Ejemplos de posibles estmulos ambientales y respuesta de los biomateriales polimricos (especialmente hidrogeles).

1.4.1

Sensibilidad al PH

Los geles sensibles al pH pueden sintetizarse por copolimerizacin con electrolitos dbilmente ionizados. La variacin del pH del medio de hinchamiento induce cambios en el grado de ionizacin de los electrolitos y, por tanto, un cambio en el grado de hinchamiento del hidrogel. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime2003[13], Saez-2004 [42]) Si un gel contiene grupos ionizables, es un gel sensible al pH, dado que la ionizacin est determinada por el pH en trminos de ionizacin de equilibrio (ecuacin de Henderson-Hasselbach ). (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime2003[13], Saez-2004 [42])
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Tabla 2 Grupos sensibles a cambio de PH

Las redes polimricas que contienen estos grupos ionizables experimentan un cambio brusco o gradual en la dinmica y en el comportamiento de hinchamiento como resultado del cambio en el pH del medio. En los geles que contienen grupos ionizables como cidos carboxlicos, la ionizacin ocurre cuando el pH del medio est por encima de pKa del grupo ionizable. Al aumentar el grado de ionizacin (al aumentar el pH) el nmero de cargas fijadas a la red tambin lo hace provocando un incremento de las repulsiones electrostticas entre las cadenas. Esto produce un aumento de la hidroflia de la red y, por tanto, un mayor hinchamiento del material. (Diez Pea-2002 [11] , Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Por el contrario, los materiales que contienen grupos funcionales como aminas unidas a la red se ionizan a pH por debajo del valor del pKb de las especies ionizables. As, cuando el pH del medio disminuye, se incrementa la ionizacin del gel y, por tanto, el hinchamiento. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 1.4.2 Sensibilidad a la Temperatura

El efecto de la temperatura sobre los polmeros es relativamente complejo y de una importancia fundamental en las propiedades fsicas de los mismos. La denominada temperatura de transicin vtrea (Tg), caracterstica de la fase amorfa, que vara de un polmero a otro y es uno de los parmetros que ms influencia tiene en su comportamiento y propiedades. Como consecuencia de esta transicin el polmero sufre
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un cambio abrupto en propiedades como: el coeficiente de expansin, la permeabilidad, el ndice de refraccin, la dureza, etc. Los polmeros por encima de la Tg son elsticos, pero cuando la temperatura disminuye al valor de la Tg el polmero se transforma en un slido rgido y tiende a ser duro y quebradizo. En el fenmeno de la transicin vtrea no tiene lugar un cambio abrupto en el volumen como sucede en la cristalizacin, sino que ocurre un cambio de pendiente en la curva del volumen especfico frente a la temperatura (de un valor bajo en el estado vtreo pasa a un valor mayor en el estado gomoso). Se interpreta en trminos de procesos de relajacin intermolecular. Por encima de la Tg tienen lugar movimientos moleculares cooperativos en segmentos de la cadena principal del polmero. Por debajo de la Tg, estos movimientos se congelan y tan slo tienen lugar movimientos moleculares localizados a menor escala en los que estn implicados grupos pequeos de tomos. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) El factor ms importante que determina el valor de la Tg es la flexibilidad de la cadena Polimrica. Esto es debido a que su valor depende de la fraccin de volumen libre en el estado amorfo. Con esta base pueden explicarse fcilmente ciertos efectos de la estructura qumica o el peso molecular sobre la Tg .Sustituyentes voluminosos aumentan el volumen libre y disminuyen su valor y estructuras poco flexibles o con pocas posibilidades de conformacin muestran valores de Tg altos. Las interacciones entre las cadenas y, por tanto, la compatibilidad de un sistema formado por ms de un componente, tambin ejercen una gran influencia por lo que pueden ser estudiadas mediante la determinacin de la Tg. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Por otro lado, resulta indispensable llevar a cabo un estudio previo de la estabilidad trmica de los sistemas. Adems de ser una caracterstica de los materiales, los estudios de estabilidad trmica son un dato preliminar importante para llevar a cabo un estudio de la Tg en condiciones adecuadas. Desde un punto de vista prctico son necesarios para conocer la temperatura de uso del polmero y asegurarnos que no se estn produciendo procesos de tipo degradativo durante otras medidas en las que se emplee la temperatura como variable. Por otra parte, tambin pueden reflejar interacciones moleculares. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez2004 [42]) 1.4.3 Sensibilidad a la Luz

Con respecto a otros parmetros que inducen transiciones de fase en geles, la luz es un parmetro fcil de controlar. Se han empleado dos mtodos que inducen transiciones de fase en volumen en respuesta a la luz: 1) Ionizacin por iluminacin con luz ultravioleta: En ausencia de radiacin ultravioleta existen geles que sufren un continuo cambio de volumen, mientras que con irradiacin ultravioleta muestran una transicin de fase en volumen. A una temperatura apropiada los geles se hinchan discontinuamente en respuesta a la irradiacin de luz ultravioleta y colapsan cuando dejan de iluminarse. 2) Calentamiento local por iluminacin con luz visible : Este fenmeno se caracteriza por un incremento de la temperatura dentro de un gel termosensible. En ausencia de luz el gel cambia de volumen de forma continua al variar la temperatura, en tanto que con iluminacin la temperatura de
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transicin disminuye y ms all de cierto umbral de irradiacin la transicin de fase en volumen se hace discontinua. La transicin de fase presumiblemente es inducida por un calentamiento local de las cadenas de polmero, debido a la absorcin y la consiguiente disipacin trmica de la energa lumnica cromforo. 1.4.4 Sensibilidad al Campo Elctrico

La intensidad de la corriente elctrica y la composicin del gel influyen en el mecanismo de liberacin de un frmaco. El efecto ms importante parece ser la migracin y redistribucin de los contraiones e iones aadidos dentro del gel . (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42])

1.5 Propiedades de los Hidrogeles Existe una relacin directa entre las propiedades de un hidrogel (o un polmero en general) y su estructura, de tal forma que ambas caractersticas no pueden considerarse de forma aislada, ya que el mtodo de sntesis influye de manera decisiva sobre ellas. Por lo tanto, cuando se exponen las propiedades de los hidrogeles ha de hacerse referencia a los parmetros estructurales que las condicionan. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 1.5.1 Estabilidad Dimensional

Tanto el hinchamiento lineal como el hinchamiento en volumen, dependen de la cantidad de agua absorbida, por tanto, cualquier fenmeno que d lugar a cambios en el contenido de agua absorbida, dar lugar a cambios dimensionales. Teniendo en cuenta que el contenido de agua absorbida depende de la estructura del material, la composicin del hidrogel tendr un marcado efecto sobre la estabilidad del mismo. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42] ) 1.5.2 Humectabilidad superficial y tensin superficial crtica Las propiedades superficiales de un material son importantes para establecer su biocompatibilidad. La humectabilidad superficial se obtiene determinando la tensin superficial crtica, que a su vez se determina midiendo el ngulo de contacto de un lquido con la superficie. La medida del ngulo de contacto de una serie de lquidos con diferente tensin superficial conduce a la determinacin de la tensin superficial crtica. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 1.5.3 Permeabilidad al Oxgeno La velocidad de transporte de compuestos de bajo peso molecular a travs de hidrogeles es un importante parmetro para muchas aplicaciones. En los hidrogeles la permeabilidad al oxgeno est gobernada por el contenido de agua en equilibrio. Cuando los hidrogeles presentan contenidos de agua menores o iguales al
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30% la permeabilidad al oxgeno depende de la estructura polimrica que condiciona la proporcin de agua unida y de agua libre. Sin embargo, con contenidos de agua en equilibrio superiores, la permeabilidad al oxgeno est en proporcin logartmica al contenido de agua del hidrogel. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 1.5.4 Permoselectividad

Las membranas de hidrogeles presentan una baja tensin superficial con los fluidos acuosos o biolgicos y su contenido en agua asociada permite controlar la permeabilidad. As, se ha observado que el transporte de iones a travs de la membrana no solamente depende de su tamao, sino del contenido de agua que es el factor que condiciona el tamao del poro. Teniendo en cuenta que el contenido de agua depende de la estructura molecular, pueden disearse membranas de diferente tamao de poro y que, por tanto, permitan el paso selectivo de diferentes iones. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 1.5.5 Propiedades Mecnicas La resistencia mecnica representa la capacidad de un material para soportar la accin de una fuerza sin romperse y generalmente se caracteriza por el esfuerzo que induce dicha ruptura. La respuesta de un material a la accin de una fuerza puede oscilar entre dos comportamientos extremos: - Viscoso: Toda la fuerza aplicada al cuerpo, lo deforma, y al dejar de actuar, permanece la deformacin. La energa suministrada se pierde en forma de calor. - Elstico: Una vez que cesa la aplicacin de la fuerza, desaparece la deformacin inducida, recuperndose el trabajo correspondiente. Los materiales polimricos poseen la capacidad de sufrir deformaciones temporales cuando se les aplica un esfuerzo externo de intensidad limitada. Dicha deformacin desaparece cuando el esfuerzo cesa. A este comportamiento se le denomina elasticidad y esta relacionado con la flexibilidad molecular de los polmeros. Cuando el material se encuentra entrecruzado (ya sea mediante enlaces qumicos o fsicos) formando una malla o red tridimensional, puede resistir esfuerzos mucho mayores sin perder su forma original, puesto que los enlaces intermoleculares evitan el desplazamiento de unas cadenas con respecto a otras. Nos hallamos entonces frente a un elastmero. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Se denomina densidad de nudos al nmero de puntos de entrecruzamiento que hay por unidad de volumen en el material. Si la densidad de nudos es pequea, la malla resulta muy abierta, los tramos de cadena que unen dos nudos consecutivos son grandes y su flexibilidad se ve apenas limitada, por lo que el material exhibe comportamiento elstico. Si la densidad de nudos es grande, la malla resulta tupida. En este caso los tramos de cadena entre nudos son cortos, las cadenas estn ancladas por muchos puntos, por lo que el material pierde flexibilidad y resulta ms rgido. (Diez Pea-2002 [11] , Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) 21

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Cuando un hidrogel est hinchado se convierte en un material blando que presenta baja resistencia a la traccin y al desgarro. Aunque el contenido de agua tiene una gran influencia en las propiedades mecnicas, el comportamiento elstico y la rigidez de los hidrogeles depende de su estructura molecular, de la densidad de entrecruzamiento, de la formacin de enlaces covalentes y de las fuerzas de interaccin inica, polares y/o estricas. Las propiedades mecnicas de un hidrogel mejoran cuando el monmero es capaz de formar enlaces de hidrgeno, aunque como contrapartida sea ms sensible. (Diez Pea-2002 [11], Escobar, Garca, Zaldivar1Katime-2003[13], Saez-2004 [42]) Estas propiedades pueden ser controladas por tres diferentes vas: - Alterando la composicin monomrica del polmero , con slo incrementar la cantidad relativa del componente hidrfobo se aumentar la fuerza mecnica del producto final. - Aumentando o disminuyendo la densidad de entrecruzamiento , la fuerza mecnica aumenta drsticamente cuando se incrementa la densidad de entrecruzamiento. - Variando las condiciones bajo las que el hidrogel es sintetizado , como el tiempo de reaccin, temperatura, cantidad y tipo de disolvente, teniendo en cuenta que cualquier cambio en el polmero afecta no slo a las propiedades mecnicas de un hidrogel sino tambin a cualquier otro tipo de comportamiento del material. sensible a los cambios de temperatura y de pH del medio.

1.6 1.6.1

Mecanismo de Degradacin Degradacin Hidroltica

La mayora de los polmeros biodegradables son diseados para degradarse como resultado de la hidrlisis de las cadenas polimricas biolgicamente aceptable. En una primera fase el agua penetra en los dominios amorfos del material atacando los enlaces qumicos y convirtiendo las cadenas polimricas en fragmentos ms soluble sen agua. En esta primera etapa, el material no pierde sus propiedades porque la matriz del material esta soportada an con las regiones cristalinas. Una posterior hidrlisis con la consecuente reduccin del peso molecular da lugar a una perdida de propiedades fsicas, cuando el agua empieza a fragmentar el material. (Martinez Palau-2008 [32], Katime Amashta-2005 [28]). Factores que influyen en la degradacin hidroltica de los polmeros: A) Naturaleza de los grupos funcionales. Existe una relacin directa entre la sensibilidad del grupo a la hidrlisis y la degradabilidad del polmero. Sin embargo, otros factores tienen una influencia considerable y pueden alterar el comportamiento de un material polimrico predecible.

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B) Permeabilidad al agua y solubilidad (hidroflicos-hidrofbicos). Depende del carcter hidroflico de los grupos funcionales, del nmero de stos, y de su accesibilidad (factor de vital importancia). Cuando la velocidad de absorcin de agua es superior a la velocidad de hidrlisis, ocurre una degradacin en masa, y al revs, tiene lugar una degradacin superficial. C) Factores fsico-qumicos: intercambio inico, fuerza inica, pH. La velocidad de degradacin de un polmero es funcin del medio de incubacin. Generalmente el proceso de degradacin puede ser activado o ralentizado por un cambio en el pH del medio. D) Cristalino-amorfo. La morfologa del polmero es de gran importancia, ya que la fase amorfa es mucho ms accesible al agua que la cristalina. As, los polmeros biodegradables suelen ser semicristalinos, y es frecuente que en las primeras fases de degradacin aumente el porcentaje de cristalinidad del polmero. F) Peso molecular y estructura qumica. 1.6.2 Biodegradacin Se aplica este trmino cuando las transformaciones y el deterioro del polmero se debe a la accin de organismos vivos: el proceso est catalizado por la accin de hongos, bacterias, etc. y enzimas segregados por stos. Al suceder en medios acuosos, en ocasiones biodegradacin y degradacin hidroltica van de la mano. La biodegradacin comienza por la colonizacin de la superficie del polmero por bacterias y hongos. La unin a su superficie depende de factores tales como la tensin superficial, porosidad y textura superficial. Los polmeros compactos (p.e. sintticos estereoregulares y con unidades repetitivas pequeas) son menos biodegradables, puesto que las enzimas son menos accesibles a los grupos hidrolizables. (Ramos-2005[38]).

1.7

Biocompatibilidad y Biofuncionalidad

Generalmente la funcionalidad se cubre satisfactoriamente con las caractersticas mecnicas que poseen los materiales, sin embargo lo primordial es que un material sea compatible, es decir que no desencadene una respuesta inmunolgica en le organismo. Los hidrogeles poseen un gran potencial como biomateriales, debido a su buena biocompatibilidad. Esta caracterstica se debe a que las propiedades fsicas de los hidrogeles se asemejan a las de los tejidos vivos ms que cualquier otra clase de biomateriales sintticos, particularmente, en lo referente a su contenido en agua relativamente alto, su consistencia blanda y elstica y su baja tensin superficial. (Martinez Palau-2008 [32]).

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Captulo 2: APLICACIONES BIOMDICAS DE HIDROGELES 2.1 Ingeniera de tejidos

Las estrategias que utiliza la bioingeniera para crear nuevos tejidos y rganos se fundamentan en la combinacin de materiales artificiales con molculas bioactivas que inducen la formacin tisular o el crecimiento de clulas. Las molculas bioactivas usadas ms frecuentemente son factores de crecimiento o protenas de matriz extracelular. Esta combinacin puede ser realizada mediante procedimientos conductivos, inductivos y de transplante de clulas (Callen Palacio 2009.[8]) Estrategias conductivas: Utilizacin de materiales de manera pasiva como las membranas para guiar la regeneracin tisular. Esta estrategia se basa en la colocacin de un molde, de manera de darle a las clulas un lugar y forma especifica a seguir. (Sesman 2007[46]) Estrategias inductivas: colocacin de clulas o factores como las protenas morfogenticas seas (BMPs) que se activan en el sitio del defecto induciendo la formacin de los tejidos. Aqu a diferencia de la estrategia anterior, las matrices o moldes estn dopados con sustancias que activan las clulas cuando llegan al lugar. (Sesman 2007[46]) Estrategias de trasplante celular: trasplante directo de clulas producidas en el laboratorio. Se toma una biopsia, luego se la enva al laboratorio y all es colocada en moldes prefabricados, que generan tejido para implantarlo posteriormente en el paciente. (Sesman 2007[46]) El uso del material polimrico es de importante utilidad ya que sirve como medio de transporte de las clulas o tejidos fabricados. Los polmeros sintticos, como los hidrogeles, han sido utilizados de gran manera como materiales para los modelos debido a sus buenas caractersticas de procesamiento. Estos materiales tienen un rango de degradacin corto (das), o largo (meses). Aplicaciones de estas tcnicas se ha desarrollado en las siguientes ramas (Callen Palacio 2009.[8]): Ingeniera de tejido seo Ingeniera de cartlago Ingeniera heptica 2.2 Transporte y liberacin de Frmacos

Las formas convencionales de administracin de medicamentos (inyecciones y tabletas orales) normalmente permiten muy poco control sobre las concentraciones de dichas sustancias en los sitios donde se requiere que acten. Adems, muchos tienen tiempo de permanencia o de actividad muy corto cuando se encuentran en el sitio de accin. Por ejemplo, al dosificar medicamento en los ojos mediante gotas, debido al parpadeo y flujo de las glndulas lacrimales la concentracin disminuye en pocos minutos. Por lo tanto, un sistema de dosificacin que permita mantener niveles ideales y constantes por un tiempo suficiente para que un compuesto acte es muy deseable. Esto se puede lograr incorporando el agente activo en una matriz polimrica, que puede ser
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biodegradable y desde la cual el medicamento se libera a una velocidad adecuada (Katime 2005[27]) . Los hidrogeles, se han reconocido como matrices polimricas de elevada biocompatibilidad y atractiva capacidad de hinchamiento en medio acuoso lo cual facilita la liberacin de medicamentos de manera controlada (Diez-2002[11]). Este esquema, muestra un proceso general para obtener un sistema frmaco-hidrogel por medio de la unin fsica de ambos, es decir, el frmaco en disolucin es atrapado en la matriz polimrica, por su propiedad hidroflica, la cual acta como soporte de almacenamiento y dosicacin. Sin embargo otro sistema frmaco hidrogel puede ser obtenido cuando el principio farmacologicamente activo est unido qumicamente a la matriz polimrica (Diez-2002[11]). Los hidrogeles denominados inteligentes son aquellos que pueden responder a diferentes estmulos del medio. As, se pueden crear dispositivos polimricos que responden a estmulos fsicos, qumicos y elctricos del medio: polmeros sensibles a condiciones qumicas de pH o a la presencia de un disolvente o enzima, polmeros que responden a la temperatura, a un campo magntico, al ultrasonido o fotoirradiacin o polmeros sensibles a estmulos elctricos. Una caracterstica interesante de muchos hidrogeles sensibles a estos estmulos es que el mecanismo que causa el cambio estructural es completamente reversible (Arredondo-Lpez-2009[3]).

Fig 2.1 . Esquema de la obtencin de un Hidrogel para la liberacin de medicamentos (Arredondo-Lpez-2009[3]).


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Estas posibilidades de estimulacin permiten que el problema de la liberacin de medicamento pueda ser abordado con diferentes mecanismos. Sin embrago los efectos del pH y la temperatura se consideran los ms relevantes debido a que son variables inherentes a los sistemas siolgicos. En el rea de liberacin controlada de frmacos se han estudiado sistemas de liberacin de antibiticos, analgsicos, antineoplsicos, etctera. Uno de los principales retos es el desarrollo de sistemas (hidrogel-medicamento) que permitan la liberacin de frmacos de modo constante y en la dosis deseada durante un perodo determinado, ya que se ha demostrado que hay una relacin directa entre la cantidad de droga liberada y su accin farmacolgica. (Arredondo-Lpez-2009[3]).

Tabla 4 Factores que influye en el Hinchamiento del los Hidrogeles (Arredondo-Lpez-2009[3]).

2.3

Lentes de contacto

Es preciso que el material con el que se fabrique la lente permita la llegada de oxgeno a la cornea, la presencia de una pelcula de fluido lacrimal entre la cornea y la lente, y que resista las fuerzas que se generan al abrir y cerrar los prpados. Se fabrican lentes de contacto utilizando hidrogeles de baja hidratacin (38 a 45% de contenido de agua, media hidratacin (50 a 60% de agua) y de alta hidratacin (contenido mayor de 65% de agua). Los primeros hidrogeles utilizados para fabricar lentes de contacto fueron de
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poli(metacrilato de 2-hidroxietilo), phema, entrecruzado ligeramente con dimetacrilato de etilenglicol. Sin embargo, se utilizan hidrogeles fabricados con ms de un polmero, los cuales poseen mejores propiedades, aunque el material base sigue siendo un polmero acrlico. (Santodomingo-2008[44]) 2.4 Correccin de problemas oculares

Los hidrogeles se han aprovechado en la correccin del glaucoma, enfermedad que produce una elevacin de la tensin ocular y destruye las fibras del nervio visual. En este caso se inserta una tira del hidrogel en la cmara ocular, que al hidratarse se hincha y reblandece tapando la incisin quirrgica y permitiendo al mismo tiempo un lento drenaje del fluido, con la consiguiente disminucin de la presin ocular. (Durn de la Colina-2002 [12]) 2.5 Revestimiento de suturas

Aunque los hidrogeles no poseen las propiedades mecnicas adecuadas para utilizarlos en suturas quirrgicas, su biocompatibilidad, ha permitido su empleo como revestimiento de las suturas. Como beneficios se obtienen una ms rpida regeneracin de clulas y la eliminacin de algunos efectos nocivos que producen las suturas tradicionales. As, cuando se usa hilo de sutura de poli(tereftalato de etileno) se provocan reacciones de los tejidos adyacentes y se observa la formacin de cogulos, efectos que desaparecen recubriendo la sutura con un hidrogel. (UVa 2005 [50]). 2.6 Prtesis de tejidos blandos

Debido a sus propiedades fsicas es posible utilizar los hidrogeles como prtesis de tejidos blandos. As, el phema ha sido empleado como prtesis de senos, ya que tiene algunas ventajas sobre otros materiales sintticos, por ejemplo, el ser permeable a algunos fluidos del cuerpo. (UVa 2005 [50]). 2.7 Filtros para Hemodilisis

La hemodilisis es una tcnica teraputica que permite la eliminacin de toxinas de la sangre en los enfermos del rin. Aunque en la hemodilisis se utilizan membranas de celulosa regenerada, se han ensayado membranas basadas en hidrogeles preparados con polmeros o copolmeros de phema, n-vinilpirrolidona y de cido acrlico los cuales presentan buena permeabilidad y selectividad. (UVa 2005 [50]).

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Captulo 3: HIDROGELES REABSORBIBLES 3.1 Hidrogeles Naturales 3.1.1 Colgeno

El colgeno es una protena fibrosa que forma el tejido conectivo. Existen varios tipos de colgeno siendo el ms abundante el denominado Tipo I., la unidad estructural constituyente es el tropocolgeno, una protena de alrededor de 300.000 de peso molecular, constituida por tres cadenas del mismo tamao, dos de ellas idnticas, las llamadas alfa1, y otra ligeramente distinta, la alfa2. Las tres cadenas estn unidas entre s por puentes de hidrgeno entre los grupos amino y carboxilo de los restos de glicina, y por puentes de hidrgeno con las cadenas laterales de la hidroxiprolina, formando una hlice triple, estructura peculiar del colgeno. (Martinez Palau-2008 [32], Serra-2005 [45] ).

Fig 3.1.1.1 Micrografa electrnica de fibrillas de colgeno (Martinez Palau-2008 [32])

La utilizacin del colgeno en el mbito mdico: - Contribucin a la mejora de las propiedades mecnicas tisulares. - Poder hemosttico: las placas y los polvos de colgeno se utilizan en ciruga para provocar la hemostasia. - Crecimiento celular: los soportes de colgeno se utilizan como sustrato para desarrollar cultivos celulares. Estos cultivos pueden conducir hacia la formacin de nuevos tejidos.

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- Coadyuvante de la cicatrizacin: el colgeno bajo la forma de film, se utiliza en el tratamiento de quema-duras y lceras. Es biocompatible y biodegradable. En comparacin con otras protenas es algo inmungenos y los telopptidos del colgeno humano son prcticamente superponibles a los de colgeno bovino. Es esencial que la antigenicidad se evale de forma independiente para cada tipo de producto. (Martinez Palau-2008 [32]) Los determinantes antignicos principales estn localizados a nivel de los telopptidos. Es importante destacar que el colgeno desnaturalizado es ms antignico, de ah la importancia de utilizar colgeno nativo para las aplicaciones mdicas. (Martinez Palau-2008 [32]). La biodegrabilidad del colgeno y sus derivados es un punto importante en su utilizacin en el campo de los implantes. En los implantes, el nmero de Crosslink es un factor importante en la revascularizacin, regeneracin celular y en la persistencia del implante. (Martinez Palau-2008 [32]). El colgeno puede implantarse en heridas con prdida de piel con el fin de impedir la retraccin y de minimizar el desarrollo del tejido de granulacin. (Martinez Palau-2008 [32] ). 3.1.2 cido Hialurnico

El cido hialurnico es uno glucosaminoglucano formado por una cadena de disacridos constituidos por cido D-glucornico y N-acetil-D-glucosamina. Presente en la sinovia, humor vtreo y tejido conjuntivo. (Martinez Palau-2008 [32], Cant Martnez-2009 [9]).

Fig 3.1.2.1 Disacrido del cido hialurnico. (Martinez Palau-2008 [32])

El cido hialurnico puede ser modificado qumicamente con facilidad. Su inters como biomaterial radica en el hecho de no ser antignico. 3.1.3 Quitosn

El quitosano es el nico polisacrido catinico natural, ello le confiere caractersticas especiales que lo hacen tiles en numerosas aplicaciones. En su estructura el nitrgeno
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se encuentra una amina aliftica primaria y origina reaccione tpicas de ese grupo funcional. (Espinoza-2007[16]) El quitosano a ser una base forma, sales con cidos y origina polielectrolitos cuyas solubilidades son funcin de la naturaleza del anin involucrado, del grado de deacetilacin (grupos de amino libres que posee la cadena principal), del peso molecular del polmero y de la temperatura. El quitosano es soluble en diferentes medios, en cidos inorgnicos como, clorhdrico, bromhdrico, yodhdrico, ntrico y perclrico diluido. (Espinoza-2007[16]) El quitosano se obtiene por deacetilacin de la quitina presente en los caparazones de camarones y gambas La quitina a lo largo de sus cadena posee grupos N - acetilos y cuando se somete a un medio alcalino muy concentrado y a temperaturas superiores a 60 C, se produce una reaccin de deacetilacin. Esta reaccin consiste en la perdida del resto acetilo del grupo amino del carbono 2, mientras queda un grupo en esa posicin. La velocidad de degradacin de este polmero, viene determinada por el contenido residual del acetilo, que es un parmetro fcilmente controlable. (Espinoza-2007[16], Martinez Palau-2008 [32]).

Fig 3.1.3.1 Estructura de la quinina y quitosano. ( Espinoza-2007[16]).

Aplicaciones Biomdicas Existen estudios que demuestra que el quitosano puede ser usado para inhibir fibroplasias y promover el crecimiento celular; por tal razn el quitosano es un polmero para el rea de los biomateriales. ( Espinoza-2007[16], Snchez-Sibaja-Vega-BaudritMadrigal-2007 [43]). Entre las aplicaciones Biomdicas el quitosano se destaca uso en los siguientes campos:

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Preparacin de apsitos y vendajes para el tratamiento de heridas dado su carcter hemosttico y su efecto acelerador de la curacin. Preparacin de diferentes soportes, andamiajes para la regeneracin tisular y reparacin tisular.

Fig 3.1.3.2 Andamios de quitosano hidratado (20 x 20 x 8,3 mm) (a) y Secado ( 14,8 x 15 x 5,8 mm ) (b) ( Martinez Palau-2008 [32])

3.1.4

Alginato

Es un polisacrido lineal que se obtiene a partir de algas pardas como la Laminaria hyperborea y la Lessonia. Esta formado por homopolmeros en bloques de dos tipos de monosacridos, el acido manurnico (M) y el cido glucornico (G). (Yabur Pacheco2005[54], Martinez Palau-2008 [32])

Fig 3.1.4.1 Estructura del Alginato ( Martinez Palau-2008

[32]

Las ventajas de estos polmeros son su biocompatibilidad y su no inmunogenicidad. Adems se caracteriza por una elevada hidrofilicidad que le confiere una naturaleza de gel y lo hace idneo para encapsulacin de principios activos. Se emplea en liberacin controlada de frmacos. (Diez -2002[11], Martinez Palau-2008 [32]). 3.1.5 Polihidroxialcanoatos (PHA)

Los polihidroxialcanoatos son polmeros de origen natural sintetizados por microorganismos. Obtenidos mediante fermentacin aerbica en un medio de cultivo rico en hidratos de carbono, bajo condiciones de estrs nutricional. Si durante su crecimiento la bacteria detecta falta o reduccin de algn nutriente (N, P, Mg, K, O, S) entonces genera una reserva de energa mediante la acumulacin en el citoplsma de PHAs en forma de grnulos. (Hermida-Daz-2004 [22], Almeida-Ruiz-Lpez-Pettinari2004 [2]).
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Fig 3.1.5.1. Micrografa de grnulos de PHA en el interior de una clula. (Hermida-Daz-2004 [22])

Los PHA son polmeros lineales de (R)-3-hidroxicidos en los cuales el grupo carboxilo de un monmero forma un enlace tipo ster con el grupo hidroxilo del monmero siguiente (Hermida-Daz-2004 [22], Almeida-Ruiz-Lpez-Pettinari-2004 [2]):

Fig 3.1.5.2 Estructura general de los polihidroxialcanoatos.


(Almeida-Ruiz-Lpez-Pettinari-2004 [2])

Dado que son biodegradables, presentan una buena biocompatibilidad y resultan interesantes para aplicaciones en ingeniera de tejidos. En los ltimos aos, los PHA han sido utilizados en una amplia gama de dispositivos como suturas, dispositivos de regeneracin de tejidos, sistemas de liberacin de frmacos. El PHA ms ampliamente estudiado es el poli (3-hidroxibutirato) que es altamente cristalino frgil y relativamente hidrofbico. Estos polmeros presentan degradacin hidroltica y enzimtica. (Hermida-Daz-2004 [22], Almeida-Ruiz-LpezPettinari-2004 [2]).

Fig 3.1.5.3 estructura del poli (3-hidroxibutirato) (PHB). (Hermida-Daz-2004

[22]

).

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3.2 Hidrogeles Sintticos 3.2.1 Poli(N-vinil pirrolidona) Sinnimos: Polividona; PVP. Formula emprica:(C6H9ON)n. Peso molecular: 111.1. La polivinil pirrolidona esta formada por aproximadamente 11500 a 25000 unidades de este monmero y no contiene menos de 95% de (C6H9ON)n.

Fig 3.2.1.1 Estructura del poli(N-vinil pirrolidona) (PVP). (INCHEM

[24]

Una de las aplicaciones de este hidrogel es su utilizacin junto con la silicona como bioimplantes para lograr el aumento de tejidos blandos en el rostro, y para tratamientos urolgicos de incontinencia por estrs, etc. No produce reacciones alergnicas, y luego de un tiempo se degrada, se transporta por el torrente sanguneo y se elimina al exterior. (INCHEM [24]) 3.2.2 Alcohol Polivnilico

Sinonimos: Polivinil alcohol; PVA; Polivinol; Homopolmero de Etenol Formula emprica:(C2H4O)n Peso especfico: 1.19 - 1.31 1,19 a 1,31 Frmula qumica: [-CH2CHOH-] n

Fig3.2.2.1 Estructura del poli(N-vinil alcohol).

El alcohol polivinlico posee una excelente formacin de pelcula y propiedades adhesivas. Tambin es resistente al aceite, grasa y solventes. Es inodoro y no txico. Tiene una alta resistencia a la traccin y la flexibilidad. El agua, reduce su resistencia a la traccin, y aumenta su elongacin y resistencia al desgarro. PVA es totalmente biodegradable. (MSDS-2008 [35]). Se utiliza junto al quitosano para tratamiento de heridas de difcil cicatrizacin quemaduras, ulceras, etc. El quitosano le confiere caractersticas antimicrobianas debido al grupo amino cargado positivamente que interacciona con la membrana de la bacteria cargada negativamente (Kety Lena-2007[29]).

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3.2.3

cido Polilctico (PLA)

El cido polilctico, PLA, es un polmero termoplstico, amorfo o semicristalino, que ha sido ampliamente estudiado en aplicaciones como la liberacin controlada de frmacos, suturas biodegradables y diferentes implantes para la fijacin de fracturas y para la elaboracin de dispositivos vasculares (UVa 2005 [51]).

Fig3.2.3.1 Estructura qumica del cido polilctico (UVa 2005 [51]).

El PLA se degrada inicialmente por hidrlisis, lo cual conlleva a la liberacin de sus respectivos monmeros (cido lctico en este caso). Estos monmeros son incorporados dentro de los procesos fisiolgicos a nivel celular, donde contina su degradacin y da inicio a la ruta metablica. (UVa 2005 [51]). Ac. lctico->lactato->piruvato->Acetilcoenzima A -> ciclo del cido ctrico -> ATP. Los desechos de este ciclo son eliminados en la respiracin y excretados por los riones. El PLA es actualmente utilizado en clavos para la unin de ligamentos y reparacin de meniscos, suturas, tornillos y clavos para la fijacin de fracturas y ciruga maxilofacial, liberacin de frmacos y stents para ciruga cardiovascular. Una de las aplicaciones ms recientes del PLA es en el campo de la Ingeniera de Tejidos, la cual se basa en generar tejidos a partir de clulas del mismo paciente cuyo crecimiento es guiado in situ mediante andamios reabsorbibles. Este tipo de terapia ha sido estudiada para la regeneracin de diferentes tejidos como lo son el tejido cutneo, cardiovascular y ms recientemente, el cartilaginoso, el tejido seo y heptico. (UVa 2005 [51]).

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3.2.4

Polietilenglicol

Sinnimos: 1,2-Etanodiol, glicol de etileno, xido de etileno, polioxido de etileno, polmero de oxietileno, polmeros de xido de etileno; Polihdroxiethileno; polioxietileno; Polyoxyethilenodiol. PEO: xido de polietileno, POE: Polioxietileno (MINDFULLY - 2009 [34]). Peso molecular: 44n+18 (n=500.000 to 10.000.000) Frmula qumica: C2nH4n+2On+1

Fig 3.2.4.1 Estructura del polietilenglicol (Javeriana-2009 [25])

El polietilenglicol (PEG) puede representarse en forma abreviada como HO-PEG-OH, en la que se entiende que -PEG- representa la siguiente unidad estructural:

CH2CH2O (CH2CH2O)n CH2CH2


n vara tpicamente desde aproximadamente 10 hasta 2000.

Para hacerlos degradables se introducen enlaces qumicos dbiles en el hidrogel, que proporcionan una descomposicin hidroltica de las reticulaciones y la liberacin de molculas de frmaco que pueden estar atrapadas dentro de la matriz. Los geles se descomponen en fragmentos de PEG atxicos, que se eliminan del cuerpo. El PEG es de gran utilidad en biotecnologa, y en aplicaciones, como la administracin de frmacos y para cubrir heridas. El PEG no es txico, no tiende a favorecer una respuesta inmunitaria, y es soluble en agua y en muchos disolventes orgnicos . (Milton2007 [33])

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Captulo 4: CONCEPTOS GENERALES DE ANDAMIOS EN INGENIERA DE TEJIDOS 4.1 Caractersticas de los Andamios Las estrategias en ingeniera de tejidos generalmente emplean estructuras tridimensionales o matrices sobre las cuales las clulas se reorganizan y forman un tejido nuevo. (Atala-Money[4], Lizarbe-2007[31], Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd2009[19]) La matriz ideal para ingeniera de tejidos debe: (i) (ii) (iii) (iv) (v) Ser tridimensional y altamente poroso con una red de poros interconectada para el crecimiento de las clulas y el transporte de alimentos. Ser biocompatible y absorbible con una velocidad de degradacin y de resorcin controlable para emparejar el crecimiento de las clulas/ del tejido in vitro e in vivo. Tener una superficie qumicamente adecuada para el acceso, la proliferacin, y la diferenciacin de las clulas. Poseer caractersticas mecnicas parecidas a las del tejido en el sitio de la implantacin. Permitir la adhesin celular.

4.1.1 Porosidad El material debe poseer una gran estructura porosa, con dichos poros interconectados y de tamao adecuados para permitir la adhesin y proliferacin celular, permitiendo la neo-vascularizacin del tejido circundante. Adems, los scaffolds pueden tener una microporosidad que permita la capilaridad. La porosidad y la interconectividad son factores importantes a tener en cuenta en el momento de disear un scaffold. No obstante, el grado de porosidad influye en otras propiedades tales como la estabilidad mecnica, por lo que dependiendo del sitio de aplicacin se debe establecer un balance entre ellas. (Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd-2009[19]) 4.1.2 Tamao de poro Esta propiedad es una de las ms importantes, por el simple hecho de que si el poro es muy pequeo, habr una oclusin del poro por las clulas. Esto puede prevenir la penetracin celular, produccin de matriz extracelular y la neo-vascularizacin de las reas internas del andamio. El tamao de poro afecta directamente las propiedades mecnicas del andamio. (Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd-2009[19]). 4.1.3 Propiedades Superficiales Propiedades como la estructura qumica de la superficie del material o la topografa, afectan a la adhesin y proliferacin celular. Las propiedades qumicas estn relacionadas con la capacidad de las clulas de adherirse al material. ( Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd-2009[19]).

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4.1.4 Propiedades mecnicas y biodegradacin : En condiciones in vitro, el scaffold debe tener una fuerza mecnica suficiente para resistir las presiones hidrostticas y mantener su forma porosa que permita el crecimiento celular y la produccin de matriz extracelular. Por otro lado, los tiempos de degradacin del scaffold deben estar en el rango de los tiempos de crecimiento celular. (Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd-2009[19]). Los soportes se construyen con materiales cuya naturaleza est acorde con la funcin de la estructura del rgano o tejido donde se vayan a implantar. Aunque los polmeros sintticos son los que ms se emplean hoy en da, tambin, segn el uso, se fabrican soportes metlicos, de cermicas, de polmeros naturales (colgeno, alginatos y quitosn) y materiales compuestos. (Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd-2009[19]). La funcin primaria de un andamio, es la de permitir la unin de clulas dentro y fuera de ellos, as como la proliferacin y la diferenciacin de clulas. Tambin debe proveer un ambiente en la cual las clulas puedan mantener su fenotipo y sintetizar molculas y protenas que requiera. (Escobar-2008 [14], Fossard-Arnaurd2009[19]). Mientras el andamio aporta la estructura o consistencia al rgano, las clulas empiezan a multiplicarse en el soporte si reciben las seales qumicas que favorecen su crecimiento. Las clulas proliferan y a la vez se organizan adaptndose a la forma del armazn que, a su vez, imita la estructura del rgano diana. Estos soportes se construyen con molculas permeables para permitir el paso del oxgeno y de los nutrientes necesarios para el crecimiento de las clulas. En el caso de un sistema biodegradable, la degradacin del soporte debe ir asociada a la integracin de las clulas en el rgano de forma concomitante a su regeneracin. (Escobar-2008 [14], FossardArnaurd-2009[19]).

Fig 4.1. Herramientas bsicas para la formacin de tejidos: andamios (biomaterial) y clulas (Fossard-Arnaurd-2009[19]).
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4.2 Mtodos de fabricacin de andamios Las estructuras polimricas porosas pueden ser obtenidas a travs de numerosos mtodos. Cada tcnica de elaboracin le confiere al andamio final caractersticas estructurales diferentes, por lo que es muy importante elegir la tcnica correcta segn la aplicacin final del andamio (Atala-Money[4], Buckley-OKelly[7], Yao Loong-Yen Wah[55],Fossard-Arnaurd-2009[19]). 4.2.1 Gel Casting. Este mtodo consiste en disolver el polmero en un solvente orgnico como la acetona. La solucin polimrica es colocada en un molde hasta alcanzar consistencia de gel. Seguidamente el gel es procesado mediante diferentes concentraciones de acetona, etanol y agua para as obtener una estructura microporosa. (Fossard-Arnaurd-2009[19], Sachlos-Czernuszka[41]). 4.2.2 Disolucin y colada con liberacin de partculas. En este mtodo, se incorpora a la solucin polimrica una proporcin determinada de partculas minerales (cloruro de sodio) u orgnicas (sacarosa). La mezcla es luego colada en un molde donde el solvente se evapora o puede ser procesada por freezedrying. Una vez evaporado el solvente, las partculas son disueltas en agua dejando a su paso los diferentes poros. Con esta tcnica se pueden conseguir porcentajes de porosidad bastante elevados. El tamao de los poros depender de las partculas utilizadas. (Fossard-Arnaurd-2009[19], Sachlos-Czernuszka[41]). 4.2.3 Laminacin de membranas. Es similar a la tcnica conocida como laminated object manufacturing (LOM) usada en el prototipado rpido. Consiste en la utilizacin de diferentes films porosos generalmente obtenidos a partir de la tcnica de disolucin y colada con liberacin de partculas, y colocados uno sobre otro unidos con la ayuda de la impregnacin con cloroformo en la superficie, para obtener estructuras tridimensionales de forma compleja. (Fossard-Arnaurd-2009[19], Sachlos-Czernuszka[41])

4.2.4 Separacin de fases El polmero se disuelve en un solvente como el dioxano a una temperatura baja. La separacin lquido-lquido y luego slido-lquido es inducida al bajar la temperatura de la solucin. Subsecuentemente se elimina el solvente solidificado por medio de la sublimacin del mismo dejando as el andamio polimrico. La concentracin del polmero y la estrategia de enfriamiento juegan un papel fundamental en la morfologa final de los poros. (Fossard-Arnaurd-2009[19], Sachlos-Czernuszka[41]).

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4.2.5 Saturacin con gas Para esto se utilizan especimenes polimricos slidos previamente prensados, los cuales son expuestos a altas presiones (800 psi) de CO2 permitiendo as la saturacin del polmero con el gas. Se crea una inestabilidad termodinmica al reducir la presin del gas a niveles ambientales Esto conlleva la nucleacin y expansin del CO2 disuelto, generando as macroporos. La mayor ventaja de este proceso es que no utiliza solventes orgnicos. La mayor desventaja es que el producto final es poco poroso en la superficie y adems permanece un cierto porcentaje de porosidad cerrada en el interior del material. Para solucionar estos problemas se est utilizando esta tcnica en combinacin con partculas solubles en agua. (Fossard-Arnaurd-2009[19], Sachlos-Czernuszka[41]).

4.2.6 Liofilizacin Esta tcnica es similar a la separacin de fases, consiste en liofilizar soluciones congeladas del polmero con cido actico glacial o benceno. La morfologa de las esponjas depende notablemente del polmero y del solvente. Por ejemplo el benceno induce una estructura de tipo capilar, mientras que el cido actico produce una estructura de tipo librillo. Las etapas fundamentales del proceso son: i. La congelacin: El producto es congelado, es una condicin necesaria para la sequedad a baja temperatura. ii. El vaco: despus de la congelacin, el producto es colocado en un compartimiento donde se hace el vaco. Esto permite al solvente congelado en el producto, de vaporizarse sin pasar a travs de la fase lquida, un proceso conocido como sublimacin. iii. El calor: Se aplica al producto congelado para acelerar la sublimacin. iv. La condensacin: A baja temperatura las placas del condensador quitan el solvente vaporizado del compartimiento del vaco, convirtindolo de nuevo a un slido. Esto termina el proceso de la separacin. (Fossard-Arnaurd-2009[19],Sachlos-Czernuszka[41])

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Tabla 5. Tcnicas para la obtencin de andamios (Fossard-Arnaurd-2009[19])

Fig 4.2 Andamios preparados por liofilizacin. Matrices (A, E) Quitosano, (B, F) Colgeno, (C, G) Mezcla 7:3, (D, H) Mezcla 1:1.Escala de Barra A, B, D = 180 m, Escala de Barra C = 90 m, Escala de Barra E, F, G, H = 13 m.( RISBUD-KARAMUK-MAYE-2002[39] )

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Captulo 5: APLICACIONES DE LOS SCAFFOLDS EN INGENIERA DE TEJIDOS 5.1 Scaffold para Ingeniera de Tejido Heptico

El hgado es el rgano principal en la homeostasis metablica, ya que es responsable del metabolismo, sntesis, almacenamiento y redistribucin de nutrientes, carbohidratos, grasas y vitaminas. Adems, el hgado elimina los desechos y xenobiticos por conversin metablica y excrecin biliar. (Avils-Maca-Garca-2003 [5], Zeini-2007 [56]) El tipo celular principal en el hgado y que desempea la mayora de funciones descritas es el hepatocito, que constituye el 80% de las clulas hepticas. El otro 20% est integrado por clulas no parenquimticas, que incluyen a clulas de Kupffer, clulas endoteliales, clulas epiteliales biliares y clulas esteladas. En contraste con otros tejidos regenerativos (mdula sea, piel), la regeneracin heptica no depende de un grupo de clulas progenitoras o clulas madre. (Avils-MacaGarca-2003 [5], Zeini-2007 [56])

Figura 5.1.1. Sealizacin por citoquinas y factores de crecimiento en la regeneracin heptica. Molculas claves en inmunidad, como LPS, activan la produccin de TNF-a e IL-6 por clulas de Kupffer. TNF- a e IL-6 activan Stat-3(entre otras seales) y varias protenas que tambin participan en la sealizacin por factores de crecimiento. Asimismo, se activan seales que participan en la finalizacin de la regeneracin como TGF-b, Socs-3 y p27. El factor decrecimiento HGF se une al receptor Met, activando la va de PI3K y AKT y la liberacin de TGF-a y otras seales compartidas con la sealizacin porcitoquinas como AP1, JNK, ERKs, C/EBP-b e IGFBP1. Esta sealizacin lleva al aumento de la expresin de ciclinas D1 y E y a una disminucin de los niveles de p27.Adaptada de (Taub, 2004). ( Zeini-2007 [56])

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Andamios para regeneracin heptica Estudios recientes relacionan la sobrevida de los hepatocitos en directa proporcin no solo al polmero utilizado, sino a su geometra y organizacin celular en el mismo. Se han utilizados diversas sistemas tridimensionales de sembrado celular buscando la adhesin celular, tales como matrices de cido polilctico y esponjas conformadas por derivados de poliestireno. Estudios ms recientes utilizando Ratas del tipo Lewis, han logrado mantener hepatocitos en cultivos y con buena adhesin celular por un perodo de un ao utilizando un polmero sinttico a base de tipo alcohol Polivinilo. (JiankangDichen-Yaxiong-Bo-Qin-2008[26], Tan [48], Contreras-Poniachik-Oksenberg-2004 [10], Falke [18]) Se ha visto que los hepatocitos son capaces de repoblar la matriz utilizada y realizar funciones especficas del hgado como secrecin de albmina y sntesis de Urea. Sin embargo, existen ciertos problemas que, hasta la fecha, han impedido su utilizacin para utilizarlos en un sistema de soporte heptico bioartificial. (Jiankang-Dichen-YaxiongBo-Qin-2008[26], Li-Pan-Zhang-Yu [30], Escorsell-Mas-2009[15]) A. Dificultades de obtencin de hepatocitos en cantidades adecuadas. Deben proceder de hgados no adecuados para trasplante convencional B. Su capacidad regenerativa in Vitro parece muy inferior a la in vivo, a no ser que reciban un estmulo proliferativo. C. La capacidad funcional de los hepatocitos en cultivo parece inferior a la original. Se ha postulado el uso de hepatocitos de diverso origen: clulas de una lnea inmortalizada de hepatoblastoma, hepatocitos de origen porcino o hepatocitos humanos procedentes de rganos no apropiados para trasplante. Existen estudios clnicos con los dos primeros. Tanto los hepatocitos procedentes de hepatoblastoma como los de origen porcino presentan importantes problemas potenciales. As, los sistemas con clulas procedentes de hepatoblastoma tienen la ventaja de una multiplicacin ilimitada in vitro frente a un terico problema de seguridad: la transmisin de clulas tumorales al paciente. Por lo que respecta a las clulas de origen porcino, el principal riesgo deriva de la potencial transmisin del virus PERV (Porcine Endogenous Retrovirus) que podra desencadenar una epidemia similar a la producida por el VIH. (Escorsell-Mas-2009[15]) 5.1.1 Scaffold hbrido de quitosano y gelatina para ingeniera de tejido heptico

El quitosano debido a su excelente biocompatibilidad, biodegradacin y su estructura similar a los glicosaminoglicanos, componente de la matrix extracelular del tejido heptico hace que sea un material apropiado para la fabricacin de andamios en ingeniera de tejido. (Espinoza-Espritu-2007 [16], Li-Pan-Zhang-Yu [30], Tan [48]) Investigadores demostraron que funciones especficas del hgado como secrecin de albmina y la sntesis de Urea fueron mayores en el cultivo de hepatocitos in vitro en matrices porosas de quitosano y gelatina con estructuras bien organizadas. (JiankangDichen-Yaxiong-Bo-Qin-2008[26])
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Arquitectura del andamio La figura 5.1.1.1 esquematiza el modelo de un andamio bien organizado; arquitectura del lbulo heptico, incluyendo la vena porta, cmaras hepticas, y la vena central con tamao de poro medio de 100 m. Tcnicas de micro replicacin, prototipado rpido y liofilizacin utilizadas para la obtencin final del andamio. (Jiankang-Dichen-YaxiongBo-Qin-2008[26], Wang-2006 [52]).

Fig. 5.1.1.1Fabricacin andamio hbrido de quitosano-gelatina con caractersticas bien definidas y estructuras porosas. (A) Diseo utilizando software (CAD), (B) Molde del andamio construido por esterolitografa, (C) Andamio hbrido de quitosano gelatina. (Jiankang-Dichen-Yaxiong-Bo-Qin2008[26])

Fig. 5.1.1.2 Sembrado de hepatocitos en andamios de quitosano-gelatina proporcin 1:1 (grado desacetilacin: 92%). (A, C) 1 da, (B, D), 3 das. (Jiankang-Dichen-Yaxiong-Bo-Qin-2008[26])
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5.1.2 Scaffold de quitosano con agregado superficial de fructosa. Resultados experimentales indicaron que la aplicacin de solucin de fructosa en andamios de quitosano para regeneracin heptica produjo mayor eficiencia en la secrecin de albmina y urea de las colonias celulares debido a un aumento entre la interaccin de las mismas. La tasa de secrecin de la albmina fue examinada por el mtodo de spectrofotografa. (Li-Pan-Zhang-Yu [30])

Fig.5.1.2.1 Grficas. Secrecin de albmina y urea para diferentes andamios de quitosano.

(Li-Pan-Zhang-Yu [30])

5.2

Scaffold para Ingeniera de Tejido seo

Clulas progenitoras Las clulas ideales para la ingeniera de tejido (IT) deben ser fciles de obtener y de expandir, conservar el fenotipo, mantener su funcin y ser multipotenciales para diferenciarse o transdiferenciarse a una variedad de clulas especializadas, especficas de tejidos u rganos y no deben generar respuestas inmunes. Lo anterior ha despertado un gran inters por las clulas madre, que se pueden replicar como clulas indiferenciadas que tienen la capacidad de diferenciarse en diferentes linajes de tejidos; en este sentido, las clulas madre mesenquimales (MSC), que muestran un fenotipo estable y
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permanecen en monocapa, han sido utilizadas con mayor frecuencia en ITO, tendn, cartlago y msculo, y pueden obtenerse a partir de tejido adiposo o mdula sea. Dos de las clases de clulas madre ms estudiadas hasta el momento son las de origen embrionario (botn embrionario) y adulto (mdula sea y tejido adiposo, entre otros). Las clulas madre embrionarias tienen el potencial de diferenciarse en cualquier tipo de tejido y de manera natural no son inmunognicas, pero a pesar de las ventajas que presentan, su utilizacin se ve muy limitada por los problemas de tipo tico y metodolgico que las rodean, adems an no se conocen los mecanismos particulares para su diferenciacin. Las clulas madre de los individuos adultos han mostrado la capacidad de formar algunos tipos de tejidos y actualmente es la fuente celular ms utilizada en la ITO, ya que su obtencin es relativamente fcil y pueden ser encontradas en la mdula sea y el tejido adiposo. (Estrada-Paz-Lpez2006[17], Palma-Valdez-Casolco-2008[36]). Matrices de sostn o andamios En la ltima dcada, se ha reportado la fabricacin de matrices porosas de materiales metlicos, cermicos (hidroxiapatita, fosfato triclcico) y polimricos, de origen natural (colgeno, cido hilurnico, fibringeno, quitosano) o sinttico (policarbonatos, polmeros de cido polilctico (PLA), cido poligliclico (PGA). De acuerdo con lo anterior, el reto de la ingeniera del tejido seo es disear matrices tridimensionales capaces de imitar las propiedades naturales del hueso, que proporcionan una ayuda temporal para la regeneracin del tejido, y balancear la degradacin y la prdida de las propiedades mecnicas con el crecimiento y la formacin del hueso. Si se optimizan estos aspectos, podramos esperar que las alternativas sintticas simulen de manera precisa las propiedades del hueso natural. El uso de matrices con las cuales se puedan controlar las funciones de las clulas osteoblsticas se encuentra todava en sus primeras etapas; se espera que la expansin de este campo permita desarrollar nuevas terapias y tecnologas para la reparacin y regeneracin del tejido seo. (Estrada-Paz-Lpez-2006[17], Palma-ValdezCasolco-2008[36]). Factores de crecimiento La informacin sobre ITO est creciendo de forma exponencial los nuevos conocimientos sobre el desarrollo embrionario del hueso han llevado al descubrimiento de factores que regulan la diferenciacin y la proliferacin celulares. Con la culminacin de la secuenciacin del genoma humano y el uso de tcnicas modernas de laboratorio ha sido posible identificar varias molculas de sealizacin involucradas en la proliferacin y diferenciacin celulares y la morfognesis del tejido seo durante la embriognesis, en el crecimiento postnatal y en la edad adulta. Los factores de crecimiento son molculas de sealizacin que pueden actuar como mitgenos promoviendo la proliferacin de ciertos tipos de clulas o como morfgenos
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induciendo el cambio en el fenotipo de las clulas blanco. Los factores de crecimiento ms relacionados con la osteognesis son: las protenas morfognicas seas (BMP), el factor insulinoide de crecimiento (IGF), el factor transformante del crecimiento de tipo b (TGFb), el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF). (Estrada-Paz-Lpez-2006[17], Palma-Valdez-Casolco-2008[36]).

5.3

Scaffold para Ingeniera de Cartlago

Clulas progenitoras Las clulas progenitoras, troncales o clulas madre mesenquimales tienen por definicin una alta tasa de proliferacin y capacidad de diferenciacin hacia tejidos del aparato locomotor, por lo que su uso en IT parece ser prometedor. Se han aislado clulas con caractersticas condrognicas a partir de tejidos como los del periostio, la mdula sea, la membrana sinovial, el msculo, el hueso, la piel y el tejido adiposo, entre otros. Una de las ventajas de utilizar clulas mesenquimales (CM) es que, a pesar de que en adultos las CM obtenidas de mdula sea son menos del 0,001% de las clulas nucleadas, stas se pueden multiplicar a grandes nmeros in vitro. Otra ventaja es que el mtodo de obtencin de las CM es menos agresivo que una biopsia de cartlago articular como fuente celular del tejido de reparacin. La diferenciacin hacia cartlago puede ser obtenida in vitro modificando las condiciones de los cultivos mediante el uso de factores de crecimiento durante su multiplicacin, o in vivo, en respuesta a un nuevo microambiente. (Ibarra-Garcia-Martnez-Velasquillo-2003 [23], Alegre-Aguarn- Royo-Caas- GarcaAlvrez-2008 [1]). Matrices de sostn o andamios Se ha estudiado diferentes tipos de materiales, tanto biolgicos como sintticos. Con las tcnicas de obtencin y procesamiento actuales, ambos tipos son similares en cuanto a su disponibilidad y compatibilidad con los condrocitos. Sin embargo, con los polmeros sintticos probablemente pueda controlarse con mayor facilidad el tiempo de degradacin, adems de que con ellos hay mnimo riesgo de respuesta inmunitaria en el ambiente articular. Sin embargo, se ha descrito respuestas inflamatorias inespecficas con algunos materiales. Entre los polmeros biolgicos se encuentran geles y esponjas de colgeno, pegamentos de fibrina, hialuronatos, alginato y agarosa. Entre los materiales sintticos ms utilizados se encuentran el cido poligliclico, el cido polilctico (PLA) y sus copolmeros (PGLA), la polidioxanona (PDS) y otros hidrogeles termopolimerizables y fotopolimerizables. Todos ellos han demostrado mantener el fenotipo de los condorcitos en cultivos tridimensionales, con lo que
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ofrecen una alternativa en la reparacin de las lesiones condrales. (Ibarra-Garcia-Martnez-Velasquillo-2003 [23], Alegre-Aguarn- Royo-Caas- GarcaAlvrez-2008 [1]). Factores de crecimiento Desde hace muchos aos se ha estudiado un amplio nmero de factores de crecimiento que coordinan la diferenciacin celular tanto de condrocitos adultos como de CM (clulas madres). Los mejores candidatos que podran proveer las sealizaciones para inducir la condrognesis son los miembros de la familia del factor de crecimiento transformador beta (TGF), entre ellos la BMP2, la BMP4 y el TGF1. Los estudios que han empleado TGF1 y BPM2 en condrocitos de periostio de rata muestran que el cultivo con BMP2 resulta en la hipertrofia de los condrocitos, mientras que la combinacin de factores promueve la formacin de matriz cartilaginosa extracelular. En condrocitos articulares humanos, la combinacin de factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) y TGF1 incrementa la proliferacin y promueve la rediferenciacin condral. La exposicin de CM de equino a TGF1 induce la expresin de colgeno tipo II en cultivos en una sola capa. Los cultivos de CM de alta densidad en presencia del TGF1 se diferencian rpidamente a condorcitos maduros. (Ibarra-Garcia-MartnezVelasquillo-2003 [23], Alegre-Aguarn- Royo-Caas- Garca-Alvrez-2008 [1]).

G. CONCLUSIONES
Despus de la revisin bibliogrfica realizada podemos afirmar que existe una cantidad importante de andamios de hidrogeles reabsorbibles para su utilizacin e ingenieras de tejidos. La utilizacin de andamios en ste mbito esta condicionada no solo por los materiales utilizados sino tambin por los mtodos de obtencin, los cuales le confieren caracterstica fsicas apropiadas de acuerdo a su utilizacin. Se ha visto que los hepatocitos son capaces de repoblar el andamio preservando sus funciones especficas disminuidas. La expectativa futura es desarrollar un hgado bioartificial capaz de reemplazar el rgano daado. Este trabajo ampli la visin de los autores respecto del rol que puede desempear un bioingeniero en un grupo interdisciplinario de profesionales para el desarrollo y anlisis de hidrogeles reabsorbibles para la fabricacin de andamios. Este trabajo nos proporcion nuevos conceptos y terminologas, inglesa y castellana lo que llevo a ampliar e integrar los conocimientos obtenidos en el cursado de Biomateriales I y II. La elaboracin del trabajo ha aportado una formacin til, que obliga a un desarrollo metdico y ordenado de actividades que permiten el

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procesamiento de informacin tcnica especfica para llevar a cabo un trabajo cientfico.

H.

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I. ANEXOS
I.1 GLOSARIO Glosario Espaol-Ingles

Andamio

Scaffold

Estructura tridimensional donde las clulas se reorganizan y forman un tejido nuevo

Biodegradable.

Biodegradable.

Material que puede ser descompuesto o sujeto a putrefaccin por bacterias u otros agentes naturales.

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SCAFFOLDS DE HIDROGELES REABSORBIBLES

Citoquinas

Citoquinas

Las citoquinas son un conjunto de protenas que regulan interacciones de las clulas del sistema inmune. Su funcin inmunorreguladora es clave en la respuesta inmune, en la inflamacin y en la hematopoyesis de distintos tipos celulares. Un monmero, que se mezcla con otro monmero diferente, en una reaccin de polimerizacin, el resultado de la cual es un copolmero.

Comonmero

Comonomer

Cromforo.

Chromophore

Grupo qumico de un compuesto orgnico, responsable de la absorcin selectiva de la luz y, por tanto, el que le comunica un color determinado.

Enlace cruzado

Cross-link

Vinculacin de las cadenas de un polmero con otro.

Esterolitografa

Esterolitography

Proceso que permite obtener modelos tridimensionales exactos de un polmero lquido.

Los glucosaminaglicanos, tambin llamados mucopolisacridos, son cadenas largas y no ramificadas de Glucosaminoglucano Glycosaminoglycan heteropolisacridos, compuestas generalmente por una unidad repetitiva de disacrido con la frmula general (azcar cido - amino azcar)n. Perdida del resto acetilo del grupo amino del carbono 2, mientras queda un grupo en esa posicin

Deacetilacin

Deacetylation

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Hepatoblastoma

Hepatoblastoma

El hepatoblastoma es un tumor canceroso muy raro que se origina en el hgado.

Inmunogenicidad.

Inmunogenicity

Capacidad que tiene un agente de estimular la produccin de clulas o anticuerpos del sistema de defensa inmunolgico, por ejemplo los antgenos.

Mitgenos

Mitogen

Los mitgenos son factores que actan en el ciclo celular estimulando la divisin celular. Pueden estimular la proliferacin de muchos tipos celulares o ser especficos.

Clulas Multipotenciales

Multipotent Cells

clulas que poseen la capacidad de diferenciarse en un limitado tipo de clulas que se encuentran en el organismo

rgano diana.

Target organ

rganos en donde tienen sus receptores algunas hormonas

Glosario Ingles-Espaol Biodegradable Cross-Linking Chromophore Citoquina Comonomer Deacetylation Biodegradable Enlace Cruzado Cromforo. Citoquina Comonmero Deacetilacin 56

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Esterolitography Glycosaminoglycan Hepatoblastoma Inmunogenicity Mitogen Multipotent Cells Scaffold Target organ

Esterolitografa Glucosaminoglucano Hepatoblastoma Inmunogenicidad. Mitgeno Clulas Multipotenciales Andamio rgano diana.

I.2 CLAVES DE BUSQUEDA [1]. Ingeniera+de+tejidos+scaffold+cartlago+andamios [2]. ingenieria+cartilago [3]. nuevo+scaffold+cartlago [4]. chitosan+hepatocyte+scaffold [5]. chitosan+hepatocyte+scaffold [6]. ingenieria+tejido+oseo+andamios+scaffold [7]. ingenieria+tejido+oseo+andamios [8]. Hidrogeles + caracteristicas [9]. Hidrogel + degradables [10]. Hidrogel + degradables [11]. Hidrogeles+de+quitosano [12]. Hidrogeles + inteligentes [13]. PEG+hidrogel+scaffold [14]. SCAFFOLD+FABRICATION+TECHNIQUES
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[15]. Polymer+Scaffold+Engineering

[16]. scaffolds+tissue+engineering [17]. Scaffolds+bone+cartilage [18]. soporte+heptico+extracorpreo [19]. regeneracion+hepatica

I.3 PUBLICACIONES

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