Vibrio cholerae

Caracterizacin fenotpica y molecular

Programa de Microbiologa y Micologa ICBM-Facultad de Medicina Universidad de Chile Mara Teresa Ulloa Flores TM. MsCs, Ph.D (c). Profesor Asistente

Vibrio cholerae

Taxonoma Caractersticas fenotpicas

Taxonoma Microbiana: clasificacin filogentica

Dominios de seres vivos

Bacteria Eukarya Archaea

Phylum Proteobacteria

Woese et al, 1990

Taxonoma Microbiana: Phylum Proteobacteria

Vibrio cholerae
Escherichia coli

Clase GammaProteobacteria

Pseudomonas aeruginosa

Taxonoma Microbiana: familia Vibrionaceae

Familia Vibrionaceae Nmero especies 1981: 20 spp 2002: 47 spp 2004: 63 spp

coral

peces peces

humanos humanos humanos humanos/peces humanos humanos camarones

simbionte

Epidemiologa de Vibrio cholerae

Transmisin: Ingestin de comida o agua contaminada Reservorio: Agua. Se sabe que persiste en ambientes acuticos, especialmente en estuarios. Vive asociado a animales, algas y plankton

Epidemiologa de Vibrio cholerae

1866 1912

2010
Hait. Brote epidmico. Pacientes en el CTC de MSF en el Hospital Choscal del barrio de Cit Soleil, Puerto Prncipe.

Epidemiologa de Vibrio cholerae

Patrn estacional ( [T]) Epidemias y pandemias (7)

Trends in Microbiology, 2009. Vol.18 No.1

Caractersticas de Vibrio cholerae

Bacilo Gram negativo corto y curvo, 0.5 a 0.8 um

de dimetro , 1.4 a 2.6 um de largo.

Mtil, flagelo polar cubierto por membrana externa Oxidasa positivo Haloflicos (1-3%) Reduce nitrato

V. cholerae

Crece en la mayora de los Medios de Cultivo

Agar T.C.B.S.
Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio spp Inhibidor para la mayora de las enterobacterias. Esta inhibicin se basa en las altas concentraciones de tiosulfato y citrato, la presencia de las sales biliares y un pH fuertemente alcalino.

Colonias amarillas

V.cholerae V. alginolyticus V. fluvialis V. Furnisii V. metchnikovii V. mimicus V. hollisae V. parahaemolyticus V. damsela V. vulnificus

Colonias verde-azules

V. cholerae

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Identificacin bioqumica V. cholerae

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Diagnstico de Vibrio spp: Batera Bioqumica

Especie V. cholerae V. parahaem

TSI

LIA

MIO

VP

Cit + -

Arab +

Sac + -

A/A-,- K/K-,- +++ + K/A K/A-,- K/K-,- ++(+/-) -

V. cholerae, caractersticas antignicas

Lipopolisacrido

V. cholerae, caractersticas antignicas

B C

Antgeno O g. A (+) Ag. A (-)

Ag. O

Serogrupos O1 y O139 No O1-No 0139

Cepas O1 Lipopolisacrido

Ag. B Ag. C Ag. B+C

Serotipo Ogawa Inaba Hikojima

Caracterizacin serolgica de V. cholerae

V. cholerae: Biotipo
V. cholerae O1 Biotipo CLSICO Biotipo EL TOR
CLSICO (mod severo) Hemlisis sangre de cordero Hemaglutinacin GR de pollo Voges Proskauer Sensibilidad Polimixina B Sensibilidad a Fago IV Sensibilidad a Fago V S S R EL TOR (asintom leve) + + + R R S

Caractersticas de Vibrio cholerae: biotipos y serotipos

1. Serogrupos: O1, O139 y [no-O1, no-O139]

Phylogenetic relationship of Vibrio cholerae strains

More than 200 serogroups (O1O200) of Vibrio cholerae exist in aquatic environments. Only a subset of O1 and O139 serogroup strains are toxigenic (Tox+) and therefore capable of causing cholera Other strains are non-toxigenic (Tox) and are selected against. Different O antigen types are indicated by the colour of the outer membrane and sheathed flagellum (the periplasmic space and the inner membrane are not shown). Capsules are present in a subset of strains. Different strain genotypes are indicated by the colour of the cytoplasm; note that Tox+ O1 and O139 have essentially the same genotype, with the exception of the O antigen genes. OCTOBER 2009 | vol7 www.nature.

Vibrio cholerae

Caractersticas Moleculares y patogenicidad

Caractersticas de Vibrio cholerae: genoma

TC

Chromosoma I: DNA replicacin Divisin celular Transcripcin genes Traducin de protenas Biosntesis de pared celular
Chromosoma II Protenas ribosomales Transporte de azucares, iones metalicos y aniones. Metabolismo de azcares DNA reparacin
n engl j med 364;1 nejm.org january 6, 2011

Two Vibrio cholerae chromosomes

EPS, a protein-secretion system that is required for the export of CTX, cholera toxin and several proteases

hlyU, which encodes a transcriptional regulator that controls the expression of the haemolysinen coding gene hlyA

VPI encodes toxincoregulated pilus and a virulence regulator, ToxT7,8

VPI-2
bacteriophage CTXf4

VP2

The integron island is a gene-capture system yet to be associated with virulence.

Principales factores de virulencia de V.cholerae

Enterotoxina (CT) Factor de colonizacin (TCP)

Caractersticas de Vibrio cholerae: Fago

lisognico CTX

Bacteriofagos
Partculas virales que infectan bacterias Genoma DNA o RNA, encapsulado por protenas Absorcin: unin a receptores especficos de la pared celular

Pueden establecer un ciclo ltico o lisognico Para integrarse reconocen secuencias especficas en el genoma bacteriano Pueden transferir plsmidos, transposones y genes bacterianos

Patogenicidad de Vibrio cholerae: mecanismo de toxigenicidad

Si el fago integrado cambia el fenotipo de la bacteria, dicho fenmeno se denomina: conversin lisognica

Patogenicidad de Vibrio cholerae: mecanismo de toxigenicidad

Vibrio cholerae posee un fago lisognico en su genoma que codifiaca para la toxina colrica

Patogenicidad de Vibrio cholerae: adherencia y colonizacin: pilus TcpA

Confiere la habilidad de colonizar el intestino delgado. Receptor para el fago ctx, que contiene los genes para la sntesis de CT. La protena estructural de la fimbria TCP est codificada en el gen tcpA, que presenta alta variabilidad Esta hipervariabilidad en la superficie de la bacteria le permite escapar del reconocimiento por el sistema inmune del husped.

V. Cholerae CT y TCP

In response to undefined stimuli during colonization, two membrane-associated transcriptional activator complexes, ToxRS and TcpPH, initiate transcription of the toxT gene. The ToxT protein is a transcriptional activator of the AraC family that directly activates the transcription of the genes responsible for the production of cholera toxin (CT) and the toxin-coregulated pilus (TCP). The TCP is a type IV bundleforming pilus that is essential for colonization of the intestinal tract. CT is an A-B type enterotoxin that is responsible for the profuse diarrhea that is characteristic of cholera. Collectively, this regulatory system has been called the ToxR regulon.

Accin de la Toxina de V. cholerae

Manifestaciones clnicas de Vibrio cholerae

Barrera pH cido

Dosis infectante 105-106

Intestino delgado

Ciclo de vida de V. cholerae

Vibrio cholerae gene expression patterns at different stages of the life cycle
Establishment in the aquatic environment by finding suitable nutrient sources such as chitin

decay into an active but nonculturable

V. cholerae alters its gene expression again in order to detach from the epithelium the escape response and to prepare for transmission to another host (for example, household spread) or entry into the aquatic environment.

On ingestion, Vibrio cholerae uses motility and mucinases to penetrate the mucus gel and Nacetylglucosamine-binding protein A (GbpA) and other factors to colonize the small intestine epithelium

Caractersticas de Vibrio cholerae ambientales

1. Casos clnicos Vc no-O1, no-O139: Chile

Caractersticas de Vibrio cholerae no-O1, no-O139: isla de patogenicidad

Vibrio cholerae
Gamma Proteobacteria Posee 2 cromosomas Actualemente se describen 200 serogrupos A la fecha,sloV.c 01 y 0139 son toxignicos El clera es una infeccin por Vc toxignico TC y TCP son los principales factores de virulencia y estn corregulados La TGH es muy importante (presencia de fagos, islas e integrones ) V. cholerae presenta diversos patrones de expresin gnica (ambiental o Intestino del hombre)

Gracias MTU