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Faz parte de uma coleção de revistas que fala sobre o desenvolvimento da Biotecnologia no Brasil e no mundo, com entrevista de pesquisadores e cientistas, diversos assuntos sobre saúde, agricultura e pesquisa de transgênicos, clonagem de plantas, etc. Para quem tem curiosidade ou interesse em fazer este curso é uma literatura muito boa.
Titre original
Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 2
Faz parte de uma coleção de revistas que fala sobre o desenvolvimento da Biotecnologia no Brasil e no mundo, com entrevista de pesquisadores e cientistas, diversos assuntos sobre saúde, agricultura e pesquisa de transgênicos, clonagem de plantas, etc. Para quem tem curiosidade ou interesse em fazer este curso é uma literatura muito boa.
Droits d'auteur :
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Faz parte de uma coleção de revistas que fala sobre o desenvolvimento da Biotecnologia no Brasil e no mundo, com entrevista de pesquisadores e cientistas, diversos assuntos sobre saúde, agricultura e pesquisa de transgênicos, clonagem de plantas, etc. Para quem tem curiosidade ou interesse em fazer este curso é uma literatura muito boa.
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ENTREVISTA Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 3 ARLINDO PORTO, senador da Repblica Arlindo Porto, senador da Repblica, eleito pelo PTB-MG, em 1994, est licenciado para ocupar o cargo de ministro de Estado da Agricultura e do Abastecimento no governo Fernando Henrique Cardoso. natural do municpio de Patos de Minas - MG, onde iniciou sua carreira como prefeito em 1982, com grande apoio popular (97% de aprovao no final do mandato, segundo pesquisa do Vox Populi). Em 1990, foi eleito vice-governador de Minas Gerais, onde, por diversas vezes, exerceu o governo daquele estado. No incio deste ano, o ministro Arlindo Porto esteve no Vaticano, onde recebeu uma bno do papa Joo Paulo II, especialmente para a agricultura brasileira. A sua atuao como ministro de Estado da Agricultura do governo FHC est mais voltada para garantir maior produtividade e lucro para o produtor rural, com nfase na modernizao da agricultura familiar, principal fonte de gerao de emprego e renda no campo, alm de estimular e incentivar o agronegcio brasileiro como um todo. Para falar das polticas agrcolas do seu ministrio e das potencialidades e aplicaes da biotecnologia, o ministro Arlindo Porto concedeu esta entrevista revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento. BC&D - O Governo Federal, atravs do Ministrio da Agricultura e do Abasteci- mento, divulgou que, para o custeio da safra agrcola de 1997/98, sero libera- dos, para fins de crdito, mais de 8 bi- lhes de reais. O senhor poderia explicitar quais as atividades e que pro- dutos agrcolas tero prioridade para obter financiamento? Arlindo Porto - Pelo segundo ano conse- cutivo, haver mais crdito disposio do produtor a custos menores (9,5%, con- tra 12% na safra passada). Todas as ativida- des agropecurias, incluindo pesca e extrativismo, tero acesso ao financiamen- to da safra 1997/98. No valor destinado para o custeio e investimentos esto inclu- das todas as lavouras, a pecuria e o financiamento para o calcrio, necessrio para a correo do solo. Outra novidade que o produtor poder financiar diversas culturas, mas sem ultrapassar o limite m- ximo de financiamento no qual est enqua- drado. O volume de recursos para o cus- teio, investimento e comercializao da safra 1997/98 ultrapassa R$ 11 bilhes. Para o Programa Nacional de Fortalecimento da Agricultura Familiar (Pronaf), so R$ 1,65 bilho, ao custo de 6,5% ao ano, o que beneficiar cerca de 500 mil famlias. BC&D - Qual o limite de financiamento que o governo vai destinar aos pequenos, mdios e grandes produtores rurais, quais taxas de juros sero praticadas e que garantias eles tero que oferecer aos bancos? Arlindo Porto - Os produtores que planta- rem arroz, feijo, mandioca, milho, trigo e sorgo (na Regio Centro-Sul) tero um limite de financiamento de at R$ 150 mil, com taxas de juros de 9,5%. Para os produ- tores de algodo, foi mantido o limite de R$ 300 mil, com as mesmas taxas de juros; e para os produtores de soja nos estados das 4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento regies Norte e Centro-Oeste, o financia- mento de at R$ 100 mil (at a safra passada era R$ 30 mil). O limite mnimo para investimento de R$ 40 mil. As garantias que os produtores tero que oferecer aos bancos so aquel as estabelecidas nas normas do crdito rural, que inclui a equivalncia-produto e pe- nhora dos bens dos produtores. BC&D - Alm disso, quais as exigncias do Ministrio da Agricultura, atravs dos bancos que operam o crdito rural, para que as lavouras tenham a cobertura do seguro agrcola? Arlindo Porto - A Resoluo do Banco Central n 2.259, de 15 de maro de 1996, determina como causas de coberturas do Programa de Garantia da Atividade Agr- cola (Proagro) a ocorrncia de geada, granizo, tromba d'gua e vendaval. Desde a safra passada, os produtores que seguem as indicaes do zoneamento agrcola para plantio de milho, arroz, feijo, soja e trigo tm a alquota do seguro agrcola reduzido, passando de 11,7% para 7%. O sistema de zoneamento permite que o produtor faa um planejamento mais ade- quado da atividade agrcola, pois indica o que plantar, quando e onde, de acordo com recomendaes t cni cas do cronograma de plantio. Para a safra 1997/ 98, o governo pretende incentivar a tcni- ca do plantio direto. Por isso, haver reduo de 1% na taxa do Proagro para quem utilizar a tcnica no plantio das culturas de feijo, milho e soja, dentro do zoneamento. BC&D - Nos pases do chamado Primei- ro Mundo, notadamente nos EUA, o segu- ro agrcola contratado diretamente pelos produtores rurais aos bancos privados, sem nenhuma interveno do governo e sob as condies e riscos de mercado. O Ministrio da Agricultura que o senhor dirige pretende desenvol- ver algum estudo ou realizar experin- cias neste sentido, no Brasil, para isen- tar o governo deste nus e tornar a agri- cultura mais dinmica, moderna e com- petitiva? Arlindo Porto - O governo j estuda a criao de um seguro privado para agri- cultura. A proposta est sendo discutida por uma comisso de tcnicos do Minist- rio da Agricultura. A idia autorizar as empresas de seguro a fazer contrataes com os produtores rurais, j que esse mecanismo ainda no existe no Brasil. O novo seguro seria mais amplo que o atual Proagro (Programa de Garantia da Ativida- de Agrcola), que se limita a cobrir danos causados por fenmenos climticos. Po- deria cobrir, por exemplo, prejuzos provovados por pragas ou outros aciden- tes naturais que no so garantidos no Proagro. A cobertura seria negociada livre- mente entre o produtor e a companhia. Mas o novo seguro s funcionar quando o setor agrcola estiver mais estabilizado, sem mudanas significativas no plano de safra. Com regras claras, o mercado pode- r colocar em prtica alguns mecanismos de proteo das lavouras, e as companhi- as de seguro podero investir com confi- ana. BC&D - No Plano Real, a agricultura tida como a "ncora verde" da estabilizao da moeda. Os preos dos produtos agr- colas vm se mantendo estveis. Mas, se de um lado a agricultura fez a festa dos brasileiros, especialmente das camadas mais pobres, de outro deixa os agricul- tores bastante insatisfeitos. Est haven- do, sob certos aspectos, uma transfe- rncia de renda dos produtores para os consumidores pobres. O que o governo pretende fazer para manter a "ncora verde" e aumentar os lucros dos produ- tores agrcolas? Arlindo Porto - Nestes trs anos de Plano Real, houve aumento na renda dos produ- tores agrcolas. Em 1996, o acrscimo foi de 12%, e para este ano a expectativa de um incremento de 11% na renda agrcola. A produo de soja e milho alcanou um valor total de R$ 11 bilhes e o caf chegou a R$ 4,2 bilhes. O suco de laranja atingiu R$ 2 bilhes e o leite R$ 4 bilhes. O mercado de carnes (bovina, suna e aves) movimentou R$ 15 bilhes. Uma das ra- zes para o aumento da produo e da produtividade agrcola que os produto- res tm mais tecnologia sua disposio. Entre as alternativas disponveis est o zoneamento agroclimtico, com indica- es tcnicas sobre as melhores condi- es para plantio, e sementes melhoradas, desenvolvidas pelos centros de pesquisa da Embrapa. O financiamento para a com- pra de fertilizantes, defensivos e equipa- mentos agrcolas, alm do anncio anteci- pado das regras para custeio e investimen- to, tambm tem sido fator fundamental de apoio aos produtores. Paralelamente ao aumento da renda dos agricultores, au- mentou o poder de compra do salrio mnimo. Aps o Plano Real, mais de 13 milhes de pessoas ingressaram no merca- do de consumo, causado por um aumento de 24% na renda dos trabalhadores e estabilizao no custo da cesta bsica. BC&D - O Plano Real elevou a safra anual de gros de 76 milhes de toneladas para mais de 80 milhes este ano. O peso da agricultura no volume total das ex- portaes subiu de 26% em 1993, antes do Plano Real, para mais de 30% em 1997. A que o senhor atribui o aumento dos produtos agrcolas nas exportaes brasileiras nos ltimos quatro anos? Arlindo Porto - Entre as razes para o aumento da participao da agricultura nas exportaes brasileiras, est a abertura econmica iniciada h sete anos. Entre 1990 e 1996, o supervit da balana agrco- la saltou de US$ 5,9 bilhes para US$ 8,5 bilhes. Outros setores da economia no tiveram o mesmo desempenho, sendo que a indstria, por exemplo, apresentou um saldo negativo de US$ 9,3 bilhes em 1996. O processo de abertura ao comrcio exte- rior encontrou um sistema produtivo ca- paz de gerar resultados positivos. O bom resultado da agropecuria tambm refle- xo da alta internacional dos preos da soja e do caf. Para o ano de 1997, as expecta- tivas so bastante otimistas, e a agricultura deve continuar com um crescimento bem acima de outros setores da economia. As projees indicam um aumento de 7,5% do Produto Interno Bruto (PIB) do setor este ano, contra uma mdia de 3,3% do pas em geral, podendo se transformar no carro-chefe da economia brasileira. O Ins- tituto de Pesquisas Econmicas Aplicadas (IPEA) j trabalha com a expectativa de uma expanso da lavoura de 6,7% e da pecuria, 8,3%. Mesmo com o bom desem- penho da balana comercial agrcola, estamos trabalhando para o setor tornar-se mais eficiente na busca da qualidade e competitividade, com reduo de custos, que ainda so barreiras a serem elimina- das. Quando atingirmos este objetivo, ser possvel melhorar nosso desempenho em relao balana comercial com os par- ceiros do Mercosul, e conquistar merca- dos externos mais exigentes. BC&D - A modernizao da agricultura estabilizou o nmero de postos de traba- lho no campo e a rea total cultivada. Por outro lado, a produo vem crescendo porque os agricultores aumentaram a produtividade, com o uso de mais tecnologias, fetilizantes, sementes, adu- bos, defensivos etc. Como o governo pretende manter o crescimento da pro- dutividade, aumentando, ao mesmo tem- po, a oferta de empregos no campo? Arlindo Porto - A agricultura detentora de 20 milhes de empregos, e o agronegcio responsvel por quase 40% do PIB nacional. Sua importncia econmica e social incontestvel, e encontrar a fr- mula para incentivar o uso de tecnologias que aumentem a produtividade sem impe- dir o xodo rural um desafio. Uma "Estamos trabalhando para o setor tornar-se mais eficiente na busca da qualidade e competitividade." Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 5 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 5 alternativa trabalhar com culturas que utilizam mo-de-obra, como a cultura do algodo, que j desempregou 345 mil pessoas em todo o pas. Alguns estados, como Gois, Mato Grosso e Minas Gerais, esto incentivado o plantio do algodo. No Mato Grosso, o governo lanou o Programa de Incentivo Fiscal ao Plantio de Algodo, cujo objetivo aumentar a pro- duo de 77 mil toneladas este ano, para 263 mil toneladas nos prximos trs anos. A idia atrair a indstria txtil, com garantia de produo. No Estado de Gois, milho e pastagens devero ceder ao plan- tio de algodo. O que tem estimulado os produt ores goi anos a i nvest i r na cotonicultura no estado so a retomada do preo no mercado interno (o melhor dos ltimos trs anos) e a diminuio da rea plantada em outros estados, sobretudo em So Paulo e Paran. Em Minas Gerais, a Emater lanou programas para revitalizar a cultura. A princpio, o programa espera reduzir o ciclo da cultura nas regies Norte e Nordeste - de forma a diminuir os efeitos do clima semi-rido - e implantar unidades demonstrativas com base em variedades adequadas ao solo e tecnologias especfi- cas na regio central do estado. O projeto j atingiu 7 mil pequenos produtores em 51 comunidades dos municpios que plan- tam algodo. Na rea federal, o governo dever utilizar um mecanismo oficial de comercializao de algodo para garantir o preo do produto. Provavelmente have- r Prmio de Escoamento de Produo (PEP) j na prxima safra. O algodo uma cultura que gera emprego e renda quatro vezes mais do que a soja; portanto o trabalho em conjunto na busca de solues para o setor sempre ter o apoio do Ministrio da Agricultura. Numa viso globalizada, o desemprego um desafio mundial diante da abertura econmica. So 18 milhes de desempregados na Europa, 4 milhes na Alemanha, 3,5 mi- lhes na Frana. A crescente automatizao e programas de reduo de custos pesam significativamente na mo-de-obra. H menos trabalhador na indstria que h dez anos. Mas a agricultura, ao contrrio, est absorvendo gente. De 1990 para c, criou 4 milhes de empregos, mesmo que de subsistncia. S no Brasil temos a alternativa da terra. Para usufruir desse privilgio, preciso tornar a agricultura atraente para os jovens, que hoje migram para as cidades. Um campo que pode ser explorado o da energia, cujo consumo aumentar 50% em 13 anos. Para no depender da energia fssil, o Brasil precisa de biomassa como fonte energtica, o que s pode vir da agricultura. Agricultura para fins energticos abre grandes possibilida- des para o Terceiro Mundo, e para o Brasil em particular, onde j temos a experincia do Prolcool. Os setores mais eficientes para aliar gerao de emprego com cres- cimento econmico esto, quase todos, na agroindstria. Por isso, a importncia de se elaborar polticas permanentes para o setor. BC&D - Uma das mais eficientes manei- ras de aumentar a produo de alimen- tos evitar o desperdcio da colheita, armazenamento e transporte de cereais e gros. Foi divulgado na mdia que, anu- almente, so perdidas no Brasil dois milhes de toneladas de milho e dois milhes de toneladas de soja, alm de mais de 600 milhes de litros de leite. O Ministrio da Agricultura est realizan- do algum estudo para evitar estes des- perdcios e, com isso, melhorar a renda do produtor? Arlindo Porto - No incio deste ano, o Ministrio da Agricultura lanou a Campa- nha Nacional de Reduo de Perdas nas Colheitas de Milho e Soja. A campanha alerta o produtor sobre todos os cuidados a serem adotados antes e durante a colhei- ta. Levantamentos realizados em campo indicam que a maior parte das perdas se deve a regul agens mal fei t as nas colheitadeiras, e ao uso inadequado das mquinas, que no Brasil tm, em mdia, dez anos, e precisam de manuteno constante. Alm disso, os operadores das mquinas no trabalham com a velocida- de adequada para a colheita de cada cultura. As empresas de mquinas agrco- las esto trabalhando na campanha, dan- do treinamento para a regulagem das mquinas. Com a campanha, pretende-se recuperar 5 milhes de toneladas de milho e 1,68 milho de toneladas de soja que se perdem, anualmente, entre a colheita e a armazenagem em oito estados da Regio Centro-Sul (Gois, Minas Gerais, Mato Gros- so, Mato Grosso do Sul, Paran, Rio Gran- de do Sul, Santa Catarina e So Paulo). Estes estados respondem por 90% da pro- duo nacional destes gros, e a recupe- rao da perdas representar um acrsci- mo de R$ 1 bilho na renda dos agriculto- res. BC&D - A biotecnologia, hoje, no mundo, vem se mostrando como uma ferramen- ta importante para a redeno da agri- cultura, com o aumento da produtivida- de, melhoria da qualidade dos alimen- tos, desenvolvimento de novas varieda- des resistentes a pragas e doenas e reduo das perdas de ps-colheita. O seu mercado potencial, em nvel mundi- al, estimado em 30 bilhes de dlares, somente na agricultura. De que forma o Ministrio da Agricultura pretende esti- mular as pesquisas e o desenvolvimento da biotecnologia aplicada agropecuria no Brasil? Arlindo Porto - O Ministrio da Agricultura, atravs da Embrapa, vem desenvolven- do projetos de pesquisa e desenvolvi- mento em biotecnologia, aplicados agricultura e pecuria. As atividades so coordenadas por um Programa de De- senvolvimento de Pesquisas Bsicas em Biotecnologia, que, hoje, conta com 30 projetos de pesquisa aprovados, com financiamento de R$ 1,7 milho para este ano. O programa tem por objetivos compreender os processos biolgicos fundamentais e desenvolver mtodos avanados de biotecnologia, importan- t es para a compet i t i vi dade, sustentabilidade e qualidade da produ- o agropecuria e agroflorestal. Dentro deste contexto, o programa visa tambm a desenvolver e promover cooperao entre as instituies nacionais e interna- cionais, para agilizar a transferncia de conhecimentos e tecnologias em biotecnologia e tambm incentivar o desenvolvimento e utilizao de tcni- cas modernas de biotecnologia. As prin- cipais linhas de pesquisa esto relacio- nadas reproduo de plantas, contro- le de porte, controle de pragas e melho- ramento gentico e sanidade animal e vegetal. Alm disso, a Embrapa est publicando um edital de convocao para o financiamento conjunto com o Banco Mundial de projetos competiti- vos na rea de biotecnologia avanada. Acreditamos que estes projetos tero grande impacto no desenvolvimento de novas biotecnologias para a agricultura e a pecuria. BC&D - A engenharia gentica revo- lucionou o processo de melhoramen- to de plantas, animais e microrganis- mos porque permite a construo de novas variedades que jamais seriam obtidas pelos mtodos tradicionais de cruzamento e melhoramento gen- tico. Com essas novas tcnicas de en- genharia gentica, genes de espcies absolutamente diferentes, como, por exemplo, de bactrias x plantas, de animais x microrganismos, podem ser compartilhadas num nico orga- nismo geneticamente modificado. Em que setores da agricultura o senhor acha que a biotecnologia tem que dar respostas mais rpidas, de forma a atender aos mercados interno e exter- no? Arlindo Porto - As plantas geneticamen- te modificadas so hoje uma realidade. Podem ser facilmente obtidas plantas com um contedo nutricional superior s tradicionais, plantas com resistncia a insetos e doenas. Assim, pode-se obter plantas mais saudveis e reduzir o custo de produo pela reduo de i nsumos e qu mi cos. Pl ant as transgnicas estaro em breve no mer- 6 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 6 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento cado nacional, pois algumas empresas j solicitaram autorizao junto Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana (CTNBio), para experimentao em campo de plantas transgnicas. Em associao com a Embrapa, algumas empresas esta- ro introduzindo genes de resistncia em cultivares brasileiras, o que as tornar competitivas em nvel internacional, prin- cipalmente nas commodities. Na rea ani- mal, os avanos sero obtidos nos campos de sanidade, atravs do desenvolvimento de kits-diagnstico, na rea de vacinas e atravs do uso de marcadores moleculares como ferramentas de auxlio no melhora- mento animal. BC&D - Na Europa, a resistncia dos consumidores aos produtos transgnicos foi to forte que o Parla- mento europeu chegou a exigir a sus- penso das vendas de milho transgnico norte-americano, at que se discuta ade- quadamente os efeitos a longo prazo das manipulaes genticas. Na sua avalia- o, o Ministrio da Agricultura brasi- leiro est preparado para realizar estra- tgias de campanha publicitria para conscientizar a populao quanto acei- tao, utilidade e potencialidade dos pro- dutos geneticamente modificados, ou esta atribuio ficar a cargo das empre- sas interessadas? Arlindo Porto - A Embrapa est preparan- do uma srie de vdeos instrutivos para a conscientizao da populao brasileira. O primeiro vdeo da srie, intitulado Plan- tas Transgnicas, est pronto e ser distri- budo em instituies de pesquisa e ensi- no, estando tambm disponsvel para a populao interessada. Esta a forma mais fcil de colocar os pesquisadores, responsveis pelo desenvolvimento destas tecnologias, para conversar em linguagem acessvel ao pblico, explicando o que vem a ser biotecnologia. BC&D - O Brasil, atravs do Ministrio da Agricultura e do Abastecimento, tem um forte e eficiente trabalho de defesa sani- tria vegetal e animal. Os produtos gene- ticamente modificados que forem de- senvolvidos em outros pases e exporta- dos para o Brasil tero que ser submeti- dos a esses mesmos procedimentos de defesa sanitria, ou sero submetidos a outro tipo de inspeo no MA? Arlindo Porto - No Brasil, a Lei 8.974/95 (Lei de Biossegurana) estabelece normas para uso de tcnica de engenharia genti- ca e liberao, no meio ambiente, de Organismos Geneticamente Modificados (OGMs). De acordo com o artigo 7 da Lei de Biossegurana, a fiscalizao de OGMs cabe aos ministrios da Agricultura, Sade e Meio Ambiente, cada qual no mbito da sua competncia. Ns j estamos prepa- rando os fiscais das Delegacias Federais de Agricultura, em todo o Brasil, para atuarem na rea de biossegurana. Para isso, foi criado, em abril deste ano, o Ncleo de Biossegurana Vegetal, com- posto por representantes do Ministrio da Agricultura e da Embrapa. Atravs de cur- sos e treinamentos, os tcnicos podero avaliar o nvel de risco sade do consu- midor e ao meio ambiente, com a introdu- o dos vegetais transgnicos. A criao do Ncleo de Biossegurana um dos primeiros passos para viabilizar a fiscaliza- o e o monitoramento de plantas e orga- nismos vegetais transgnicos e estabelecer as bases para a emisso, pelo Ministrio da Agri cul t ura, de Cert i fi cados de Biossegurana. Nossa preocupao com a importao de soja transgnica de pases vizinhos, devido inexistncia, no Brasil, de normas de comercializao para vege- tais geneticamente modificados. Atualmen- te, a fiscalizao de OGMs realizada pela Comi sso Tcni ca Naci onal de Biossegurana (CTNBio). Como s temos informaes de plantas transgnicas de clima temperado (Europa e Estados Uni- dos), a CTNBio permite a importao de pequenas quantidades de sementes, para trabalhos em conteno e algumas libera- es no campo, no sentido de obter dados obre o comportamento destas plantas em clima tropical e sua interao com espci- es nativas. BC&D - No d para falar em pesquisa biotecnolgica sem enfocar a Lei de Pa- tentes e a Lei de Proteo de Cultivares. Com estas leis, que foram recentemente aprovadas pelo Congresso Nacional e sancionadas pelo presidente da Rep- blica, de que forma o melhorista, produ- tor rural e o agronegcio, de um modo geral, vo contabilizar maiores ganhos e lucro com suas atividades? Arlindo Porto - A Lei de Patentes e a Lei de Proteo de Cultivares tm como objetivo aumentar os investimentos em pesquisa agrcola no Brasil. A grande vantagem da Lei de Cultivares o maior retorno finan- ceiro dos investimentos, tanto pelas em- presas nacionais quanto multinacionais, estimulando o setor de pesquisas e au- mentando a capacidade de gerao de cultivares. Para os produtores e para o agronegcio, a vantagem que, com o estmulo pesquisa, o mercado ser aque- cido com a oferta de sementes melhora- das, que possibilitaro ganhos na produ- tividade e, conseqentemente, na renda agrcola. ainda um avano em relao aos pases do Mercosul, pois o Brasil era o nico que no oferecia este tipo de proteo. Com a regulamentao da lei, o pesquisador, cientista ou empresa que trabalhar com o melhoramento de plantas, criando novas variedades, receber royalties de 3% a 5% sobre o que for comercializado ou multiplicado a partir de sua pesquisa. Inicialmente, a lei valer para arroz, algodo, batata, feijo, milho, soja, sorgo e trigo, e, gradativamente, ser estendida para outros produtos. Conforme determina a nova lei que protege as culti- vares, o Ministrio da Agricultura criar o Servio Nacional de Proteo de Cultivares (SNPC), que avaliar vrios requisitos que o melhorista deve apresentar para ser beneficiado pela lei. Os produtores de sementes podero negociar livremente com empresas ou pesquisadores que desen- volverem novas cultivares, sem interfern- cia do ministrio, mas o no-pagamento da porcentagem estabelecida implicar indenizao parte lesada, apreenso do material comprado, multa e at mesmo processo por violao dos direitos dos melhoristas. BC&D - O Brasil detentor da maior biodiversidade do planeta. A biodiversi- dade a grande provedora de genes para a pesquisa e desenvolvimento de produ- tos biotecnolgicos. A mdia tem divul- gado, com certa freqncia, que est havendo uma verdadeira "pirataria" dos recursos genticos brasileiros, especi- almente da Amaznia. O Ministrio da Agricultura tem algum papel na defesa dos nossos recursos biotecnolgicos? Arlindo Porto - O Ministrio da Agricultura, assim como todo o governo, tem consci- ncia da importncia e do valor da nossa biodiversidade. Temos participado ativa- mente de discusses nacionais e interna- cionais para a regulamentao da explora- o e uso de recursos biolgicos, no s na Amaznia, mas tambm nas reas de cerrado, tambm muito rica em recursos biolgicos. Atravs da Secretaria de Defe- sa Agropecuria, estamos atuando na fis- calizao da introduo de patgenos e pragas de importncia agrcola, evitando a contaminao do nosso territrio com doenas e insetos. Atravs da Embrapa, estamos discutindo a lei de acesso a recur- sos biolgicos, da senadora Marina Silva. Quanto "pirataria", o Conselho Nacional de Pesquisa Cientfica (CNPq) o rgo responsvel pela permisso oficial para misses estrangeiras de coleta de material gentico no territrio brasileiro. No entan- to, apesar dos esforos, muito difcil fiscalizar a nossa enorme extenso territorial sem a ajuda do pblico e das instituies dos diversos ministrios. "O agronegcio responsvel por quase 40% do PIB nacional" Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 7 8 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 9 O gafanhoto citado no Velho Tes- tamento como uma das dez pragas lanadas sobre o Egito para castigar o fara, por no ter permitido que os judeus praticassem o xodo e seguissem em direo Terra Prometida. Hoje, passados mais de trs mil anos, o mundo evoluiu, o homem conquistou o espao, descobriu a fisso nuclear, desenvolveu equipamentos e artefatos sofisticados, a informtica e a engenharia gentica, entre muitas outras conquistas da cincia e da tecnologia que vm sendo usadas pela humanidade ao longo de sua histria. Mas nem todos os avanos foram sufici- entes o bastante para conter e erradicar a praga milenar do gafanhoto, que con- tinua sendo uma das piores ameaas s lavouras e plantaes enfrentadas pelo homem, em quase todo o planeta. No mundo atual, esse castigo foi transfor- mado em perdas de milhes de dlares em alimentos e no combate a esse inseto. "Parceiro" indesejvel do homem na busca de alimentos, o gafanhoto conso- me, por dia, o equivalente a seu peso, em massa verde. Uma nuvem de gafanho- tos-praga, que pode pesar de 70 a 100 toneladas e medir 30km de comprimento e 2,5km de largura, em apenas um ata- que, invadiu cerca de dois milhes de hectares de lavoura no Estado do Mato Grosso, no ano de 1992. E esse apenas um exemplo, j que os ataques devasta- dores desse inseto tm-se tornado cada vez mais freqentes e abrangentes em vrios estados brasileiros, inclusive na Regio Centro-Oeste. A dieta alimentar desse inseto muito variada e inclui desde gramneas e pastagens - seus pra- tos prediletos - at roupas no varal, quando no encontram plantaes para devorar. Regies brasileiras afetadas Vinte e trs espcies de gafanhoto causam danos economicamente expres- sivos agricultura brasileira. Trs dessas espci es so as mai s prej udi ci ai s: Schistocerca pallens (Nordeste e DF), St i phr a r obust a ( Nor dest e) e Rhammatocerus schistocercoides (Mato Grosso, Rondnia e Gois). No sul do Brasil, nos anos de 1938, 1942 e 1946, infestaes de Schistocerca cancellata causaram srios prejuzos produo agrcola, quando este gafanhoto, saindo da Argentina, migrou para o sul e centro- sul do Brasil, do Rio Grande do Sul a Minas Gerais. Em 1969, registrou-se infestao de Rhammatocerus pictus na regio sorocabana de So Paulo. De 1971 a 1974, o Dichropolus bergii e o Staurorhectus longicornis infestaram milharais e pastagens no norte de Minas Gerais. Em 1984, ocorreu a exploso populacional de gafanhotos da espcie Rhammatocerus schistocercoides que, saindo da reserva indgena Parecis- Nhambiquara, infestaram lavouras de cana-de-acar, arroz e pastagens. Na ltima dcada, tm ocorrido muitas infestaes de gafanhotos em, pelo menos, sete estados: Mato Grosso, Gois, Minas Gerais, Rondnia, Paraba, Rio Grande do Norte e Pernambuco. Acredita-se que estas infestaes esto relacionadas com fatores climticos ad- versos, manejo de solo com a introdu- o de novas culturas, e o abandono do cultivo de variedades tradicionalmente utilizadas pelos agricultores nestas regi- es. Hbitos e preferncia alimentar Na Regio Centro-Oeste, especial- mente no Mato Grosso, os gafanhotos Rhammatocerus schistocercoides, na fase jovem, quando ainda no conseguem voar, renem-se em bandos compactos, logo aps o nascimento, e passam a se alimentar de gramneas. Depois, come- am a se movimentar, aumentando o dimetro da rea ocupada pelo bando e, por serem muito gregrios, a densidade populacional alcana at 500 insetos por metro quadrado na parte central do ban- do. medida que os insetos crescem, a movimentao aumenta e os danos cres- cem na mesma proporo. Quando se tornam adultos, geralmente nos meses de abril e maio, formam pequenas nu- vens que se movimentam sem direo definida, entre a vegetao nativa e as culturas agrcolas, causando grandes danos sobretudo nas plantaes de mi- lho, arroz e cana-de-acar. Depois, as nuvens comeam a se mover numa dire- o definida, oeste-leste, de acordo com os ventos predominantes. Quando as nuvens chegam ao local de pouso, os gafanhotos separam-se em grupos me- nores, preparando-se para a postura e r epr oduo. O Rhammat ocer us schistocercoides ataca, em primeiro lu- gar, gramneas nativas, seguindo-se a cultura do arroz - que a mais visada pela praga. Em seguida, atacam a cana- de-acar, o milho, o sorgo, as pasta- gens, a soja e o feijo. Na Regio Nordeste, as espcies mais conhecidas so a Schistocerca pallens e a Stiphra robusta, que ainda se encontram na fase solitria, mas j apre- sentando tendncia fase gregria, reu- nindo-se em bandos compactos, apre- sentando semelhana com nuvens. Os gafanhotos dessas espcies alimentam- se de gramneas nativas, como o timbete e o capim-milha, passando a danificar depois culturas de milho, feijo e algo- do. Quando adultos, realizam vos de disperso e atacam as culturas e pasta- gens, causando grandes prejuzos. Controle qumico Na dcada de 40, quando os inseti- cidas organoclorados ainda no haviam sido lanados, usava-se muito o controle fsico para combater o gafanhoto. Esse controle era feito atravs de valas cava- das no solo, para onde os gafanhotos jovens, que ainda no conseguiam voar, eram atrados para, em seguida, serem esmagados e cremados. Utilizou-se tam- bm iscas base de arsnico, sem gran- de sucesso. Em 1946, foi feita a primeira polvilhao area de BHC no sul do Brasil, para controlar o gafanhoto 10 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Schistocerca cancellata, que estava in- festando as lavouras dessa regio. Em 1969, foi usada pela primeira vez a pul- verizao area em ultrabaixo volume par a cont r ol ar o gaf anhot o Rhammat ocer us pi ct us na r egi o sorocabana, no Estado de So Paulo. Em 1972, chegou-se concluso de que a polvilhao area, quando comparada com o ultrabaixo volume, era muito lenta e onerosa para combater pragas que se estendiam por mais de 100 mil hectares, como as espcies Dichoplus bergii e Staurorhectus longicornis. Hoje, toneladas e mais toneladas de inseticidas qumicos, especialmente os mais disponveis no mercado, so utili- zadas no controle dessa praga sem, con- tudo, alcanarem 100% do xito deseja- do. E como conseqncia dessa prtica, h, hoje, uma reinfestao de gafanho- tos migratrios no Mato Grosso e de gafanhotos no-migratrios no Nordes- te. Contudo, no existe registro de resis- tncia de gafanhoto a inseticidas qumi- cos. Nos ltimos anos, a cada safra, o governo brasileiro vem gastando cerca de um milho de dlares na aquisio de inseticidas qumicos para controlar o gafanhoto, e para a safra de 1997/8, estima-se que esse valor possa chegar a mais de trs milhes de dlares. Controle biolgico Uma das alternativas encontradas pelos tcnicos e pesquisadores para ten- tar controlar esta praga foi buscar na prpria natureza um "predador" do gafa- nhoto, j que os produtos qumicos no se mostraram eficazes, quando utiliza- dos isoladamente. Dessa forma, em 1992, o Ministrio da Agricultura e do Abaste- cimento, atravs da Embrapa - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria, e com assistncia tcnico-financeira da FAO - Organizao das Naes Unidas para Agricultura e Alimentao, iniciou um projeto integrado de pesquisa, visan- do ao controle biolgico do gafanhoto no Mato Grosso, Rio Grande do Norte, Paraba e Rio Grande do Sul. A Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia, situada em Braslia, DF, e com o apoio da Empresa Agropecuria do Rio Grande do Norte - EMPARN, da Universidade Federal do Mato Grosso - UFMT e da Delegacia de Agricultura do Mato Grosso, vem desenvolvendo um projeto de pesquisa para controlar bio- logicamente o gafanhoto, atravs do uso de inimigos naturais da praga, principal- mente fungos, que so capazes de control-la, integrados a produtos qu- micos, minimizando os danos ao meio ambiente, e reduzindo significativamen- te os gastos isolados com os produtos qumicos. O pr oj et o desenvol vi do pel a Embrapa consiste basicamente no se- guinte: os pesquisadores coletam os mi- crorganismos na natureza, isolando-os e caracterizando-os em laboratrio, para depois testar a sua patogenicidade sobre os insetos. Atualmente, a equipe da rea de Controle Biolgico da Embrapa Re- cursos Genticos e Biotecnologia, lide- rada pelo pesquisador Bonifcio Maga- lhes, mantm trs espcies de gafanho- t os, col et adas no Di st ri t o Federal ( S. pal l ens) , Mat o Gr osso (R.schistocercoides) e Rio Grande do Norte (Stiphra robusta). Fungos de vrias espcies tm sido testados para controlar o gafanhoto, como o Metarhizium anisopliae, Metarhizium flavoviride e Beauveria bassiana e, entre esses, o que vem apresentando melhores resultados o Metarhizium flavoviride, no s por sua virulncia elevada e pela resistncia a altas temperaturas, como tambm pelo fato de ser facilmente pro- duzido em condies de laboratrio. O objetivo da Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia foi desenvol- ver um produto biolgico, que contm, na sua formulao, o fungo Metarhizium flavoviride diludo em leo vegetal. Esse produto permite a utilizao na lavoura a ultrabaixo volume (cerca de 2 a 3 litros por hectare) e faz parte de uma nova concepo adotada para o combate ao gafanhoto, que se baseia no controle dos insetos ainda jovens. "A aplicao pode ser feita por um nico operador em uma rea de 25 a 30 hectares, por dia", ressalta o pesquisador. Foram realizados vrios testes de campo no Mato Grosso e o ndice de mortalidade da praga foi considerado satisfatrio: cerca de 54%. J est progra- mada a realizao de testes desse produ- to biolgico tambm no DF e no Rio Grande do Norte. O objetivo da Embrapa, daqui para frente, desenvolver a produo massal desse inseticida base de microrganis- mos em laboratrio, para que possa ser utilizado no campo, em larga escala, a exemplo do que vm fazendo pases da frica, o Canad e a Austrlia. No entan- to, apesar desses pases j utilizarem os microrganismos em condies de cam- po, apenas nos Estados Unidos existe um produto biolgico para controlar gafanhotos j registrado e em fase de comercializao. Alm disso, a Embrapa pretende aperfeioar uma forma de controle inte- grado de pragas que tem dado resulta- dos bast ant e sat i sf at r i os: a compatibilizao de inseticidas biolgi- cos com os produtos qumicos, sendo estes ltimos em doses bem menores (aproximadamente dosagens de 10 a 20 vezes menos do que as normalmente utilizadas na agricultura). De acordo com o pesquisador, os inseticidas qumicos, em doses subletais, tm a capacidade de estressar os insetos, permitindo assim que o microrganismo atue de forma ainda mais eficiente. Mas existem produ- tos que podem inibir os fungos e, por isso, vrios inseticidas j foram testados pela Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia. "Os testes realizados com os fungos e os produtos qumicos Teflubenzuron e Difubenzuron, que so os que menos i ni bem a entomopatogenicidade dos fungos, tm demonstrado excelentes resultados", res- salta Bonifcio, lembrando que a conju- gao dos produtos qumicos com os biolgicos uma das prioridades de pesquisa da Embrapa este ano. Bioinseticida: situao atual Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 11 Bioinseticida em escala comercial Desenvolvidos os formulados do bioinseticida, a Embrapa Recursos Ge- nticos e Biotecnologia est em vias de firmar acordo comercial com uma em- presa privada do Estado de Alagoas para produo, em larga escala, do inseticida biolgico. Comprovada a viabilidade tc- nica e comercial do produto objeto do acordo, e cumpri das as cl usul as contratuais pertinentes, a Embrapa esta- r aberta para desenvolver novas parce- rias com outras instituies e empresas i nt er essadas na pr oduo e comercializao do bioinseticida. Ramss II e todas as geraes que o sucederam vm sofrendo com os ataques devasta- dores da praga do gafanhoto, em todo o mundo. De l para c, muitas tcnicas, produtos e formas de combate vm sen- do implementados, na tentativa de livrar a produo de alimentos desse "inimigo" voraz. Com o manejo integrado de pra- gas, espera-se que, num futuro prximo, os resultados das pesquisas desenvolvi- das pela Embrapa, em conjunto com a iniciativa privada, consigam controlar o gafanhoto e, assim, livrar a agricultura moderna dessa praga bblica. Os t rabal hos de pesqui sa do bioinseticida realizados pela Embrapa permitiram a obteno de 12 isolados de fungos patognicos a gafanhotos, que j foram incorporados ao acervo de fungos entomopatognicos conhecido pela co- munidade cientfica. Um desses isolados do fungo Metarhizium flavoviride mos- trou-se bastante virulento contra duas espcies de gafanhotos: Rhammatocerus schistocercoides e S.robusta. Quanto viabilidade do formulado desenvolvido pela Embrapa, o que se mostrou mais eficiente foi feito base de leos vege- tais. Em geral, os formulados convenci- onais so produzidos a partir de meios aquosos. Assim, a Embrapa teve que desenvolver um mtodo especfico para determinao da viabilidade da formula- o oleosa. O processo infectivo do Metarhizium f l avovi r i de sobr e S. r obust a e R. schistocercoides foi totalmente elucidado pelas pesquisas. Foi demonstrada tam- bm a capacidade infectiva simultnea de M.flavoviride e Beauveria bassiana sobre o gafanhoto Rhammatocerus schistocercoides. H indicao de ao conjunta entre esses dois fungos, quan- do inoculados no mesmo gafanhoto. 12 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Novas Tecnologias CONTROLE BIOLGICO POR Bacillus thuringiensis Expresso de genes de Bacillus thuringiensis codificadores de protenas inseticidas, em plantas transgnicas de importncia econmica. s pesticidas biolgicos pro- duzi dos pel a bact r i a Bacillus thuringiensis e vendidos sob nomes co- merciais, tais como DiPel, Thuricide, Delfin, Bactimos, Teknar etc., so encontrados sob a forma de formu- laes de p molhvel ou mesmo gis com esporos e blocos de protenas cris- tal e so bem conhecidos pelas pessoas que de alguma maneira esto envolvidas com o controle biolgico de insetos (Aronson, 1986). As aplicaes podem ser feitas como do modo tradicional, tal qual o usado para os pesticidas qumi- cos, mas h alternativas. A mais interes- sant e del as a que vi sa ao empacotamento das toxinas de Bt nas prprias plantas de interesse agrcola, tornando-as mais bem equipadas para controlar as pragas. Conceitualmente, esta alternativa bastante simples. O agente ativo do DiPel, por exemplo, uma protena inseticida produzida pelas bact r i as dur ant e o pr ocesso de esporulao. Pelo fato de a toxina ser codificada por um nico gene, as tcni- cas modernas de ADN recombinante podem ser usadas para isolar este gene e transferi-lo para o genoma da planta de interesse de modo que suas clulas ago- ra passem a produzir as protenas inse- ticidas. H inmeras vantagens tanto de ordem econmica como ambientais na utilizao de plantas transgnicas, entre elas a possvel reduo substancial no uso de pesticidas qumicos, o que resulta em considervel economia para os agri- cultores, j que no haver gastos com as freqentes aplicaes. Alm disso, h que se considerar a preservao do meio ambi ent e, uma vez que pel a al t a especificidade de ao s os insetos- praga daquela cultura sero efetivamen- te os alvos expostos ao biopesticida. Embora a idia de expressar toxinas de Bt nas plantas seja to velha quanto a tecnologia que permite manipular e introduzir genes nelas, a concretizao desta idia tem sido lenta. Dois fatores tm limitado a implementao deste con- ceito: i) est sendo mais difcil introduzir estes genes nas plantas de importncia econmica do que o foi nas plantas consideradas modelos experimentais, tais como o tabaco (N.tabaccum); e ii) as dificuldades tcnicas de fazer com que haja a expresso de tais genes em nveis suficientemente altos ainda requerem muito trabalho e criatividade por parte dos pesquisadores. Transferncia de genes para plantas cultivveis A primeira planta a conter um "gene estrangeiro" foi obtida por Zambryski et al. (1983), atravs da estratgia de intro- duo em clulas de plantas de tabaco, plasmdeos especiais encontrados na bactria Agrobacterium tumefaciens cau- sadora da galha, um tipo de "cncer que surge em algumas espcies de plantas" (Gheysen et al.., 1985). Estas bactrias constituem-se numa via natural atravs da qual alguns de seus genes so trans- feridos para as clulas das plantas infectadas. Alguns pesquisadores j fo- ram capazes de transferir marcadores genticos especiais para clulas de plan- tas (transgnese), fazendo uso de linha- gens de A.tumefaciens modificadas, no- patognicas, e posteriormente consegui- ram plantas inteiras regeneradas conten- do t ai s genes. A pri mei ra pl ant a transgnica de tabaco expressou um gene de A.tumefaciens (opalina) em todas as suas clulas. Posteriormente, outras ex- perincias foram realizadas nas quais os genes selecionados eram responsveis pela resistncia a antibiticos fitotxicos. Estes avanos permitiram a seleo rpi- da de clulas transgnicas e a produo rotineira de plantas geneticamente modi- ficadas, tais como: plantas de tabaco, petnia, tomate e batata (Herrera-Estrela et al., 1983). Mais recentemente, surgiram siste- mas fsicos de transferncia de genes, tais como a microinjeo (Reich et al., 1986) e o bombardeamento de clulas Manoel Victor Franco Lemos Universidade Estadual Paulista - Unesp Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias Departamento de Biologia Aplicada Agricultura Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 13 com pequenas partculas de ouro ou tungstnio recobertas com ADN (Finer and McMullen, 1990). Estas novas alter- nativas fsicas dependem da disponibili- dade de culturas de clulas dos tecidos das plantas a serem transformadas e de marcadores genticos confiveis. O tabaco e a petnia tornaram-se sistemas-modelo para ensaios de monta- gens genticas devido rapidez de de- senvolvimento dos tecidos transgnicos (de seis a oito semanas) e tambm pela facilidade com que a anlise gentica da herana dos genes introduzidos pode ser realizada. As primeiras plantas resis- tentes a vrus (Powell-Abel et al., 1986), as tolerantes a herbicidas (Comai et al., 1987) e as resistentes aos insetos-praga foram obtidas em plantas do tabaco (N.tabaccum). To logo estes resultados foram revelados, os pesquisadores inici- aram seus estudos procurando repetir os mesmos sucessos com plantas de inte- resse econmico; entretanto as mesmas estratgias no produziram os resultados esperados. Transferncia de genes para o algodo Desconsiderando o mtodo de t r ansf er nci a usado t ant o vi a Agrobacterium como via introduo fsi- ca, um critrio importante o de que, uma vez que uma clula tenha sido transformada (tenha recebido um peda- o de ADN estrangeiro), deva existir disponvel um eficiente sistema de cultu- ra de clulas de modo a ser possvel a regenerao de toda uma planta a partir daquela clula inicialmente transforma- da. Desafortunadamente, esta parece no ser uma caracterstica favorvel presente nas plantas cultivveis atuais, e portanto esta habilidade passa a ser dependente dos gentipos de cada uma delas (caso a caso). O sucesso ento em se obter plantas modificadas geneticamente, de modo correto, passa pela oportunidade de ser possvel a obteno de culturas de clulas das mesmas com facilidade. Os problemas de introduo de novos genes em plantas de importncia econmica sero ilustrados nos casos de transfor- mao de clulas de algodo. Eles so muito semelhantes aos encontrados nas dicotiledneas, tais como a soja, o giras- sol , a bet er r aba e a col za. As monocotiledneas e em particular os cereais, tais como o milho, o arroz o trigo, provaram ser recalcitrantes rapi- dez de expanso das tcnicas biolgicas de manipulao de genomas atuais, mas desde alguns anos atrs tambm para estes j se encontraram alternativas de pr oduo das pr i mei r as pl ant as t r ansgni cas; o caso do ar r oz (Shimimoto et al., 1989) e do milho (Rhodes et al., 1988). No algodo, Trolinder and Goodin (l987) identifica- ram vrias linhas Coker (Coker 312 ou Coker 315) com excelentes nveis de desempenho em cultura de tecidos, e logo aps estes relatos seguiu-se a trans- formao mediada por Agrobacterium de var i edades Coker de al godo (Firoozabody et al., 1987 - Umbeck et al., 1987). As variedades Coker no so exa- tamente as melhores, mas so facilmente transformveis, podendo posteriormen- te transferir os novos genes aos cultiva- res agronomicamente superiores por cru- zamentos genticos clssicos. Vrios autores j relataram a obten- o de cultivares comerciais de algodo que apresentam uma relativa habilidade em desenvolver clulas em cultura. Como exemplo, destaca-se o cultivar Siokra I-3, no qual foi possvel a introduo de genes para tolerncia a insetos-praga e a 14 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento herbicidas (Cousins et al., 1991). Este cultivar tido como de elite, embora no esteja disponvel no mercado. Por outro lado, o cultivar Siokra I-4, importante para os cotonicultores dos pases desen- volvidos, sendo que seu cultivo repre- senta ganhos da ordem de 900 milhes de dlares em exportaes, provavel- mente um tanto inacessvel s ma- nipulaes gen- ticas por ser fra- c a m e n t e r e g e n e r v e l quando em cul- tura de tecidos. O processo de introduo de novos genes nas variedades Coker e Siokra atualmen- te pode ser con- siderado de roti- na, mas no rpi- do. O processo todo desde um p e q u e n o explante at a ob- teno de uma p l a n t a transgnica cres- cendo no sol o pode demorar de 9 a 12 meses (Cousins et al., 1991). O processo pode ser resumido nas seguintes etapas: peda- os de hipoctilos ou cotildones so incubados por dois dias com clulas de uma linhagem de Agrobacterium geneti- camente modificada e portadora de genes de Bt e de um marcador gentico para o antibitico canamicina. Durante o cha- mado co-cultivo ocorre a transferncia do material gentico entre as clulas de Agrobacterium e algumas clulas dos tecidos de algodo. Posteriormente, h a transferncia para um meio de cultura contendo hormnios em concentraes adequadas que encorajam as divises celulares e a resistncia aos antibiticos canamicina e cefotaxime. A canamicina seleciona a proliferao de clulas que receberam tambm os genes de Bt e a cefotaxime elimina as clulas residuais de Agrobacterium. Durante os meses subseqentes, as clulas geneticamente modificadas transformam-se em calos friveis (uma massa desorganizada de clulas que se separam por agitao com facilidade) que por fim so postos para cr escer em cul t ur a l qui da sem hormnios. Esta etapa induz a produo de muitos embries bastante semelhan- tes aos que so produzidos no interior das sementes. Isto pode levar de 2 a 4 meses. Os embries obtidos so postos para crescer em meios adequados que aps germinao geram plntulas que por sua vez so desenvolvidas com cui- dados adequados em casa de vegetao e posteriormente so transferidas para ensaios em solo. Cada uma destas plan- tas contm genes de Bt que so ento transmitidos aos descendentes da mes- ma forma como so transmitidos os outros genes de importncia para as plantas, tais como os relativos s cores das flores, ao vigor das sementes, produo etc. Mtodos alternativos ao da transfor- mao mediada por Agrobacterium es- to sendo investigados por outros auto- res (Finer & McMullen, 1990), mas o sucesso da via natural de transformao, pela ao de linhagens no-patognicas de Agrobacterium, parece ser realmente a nica forma garantida, atualmente, de introduzir os genes de toxina de Bt ou mesmo outros genes em clulas de algo- do e outras dicotiledneas. Llewellyn et al., 1994, na Austrlia, utilizaram-se de um vetor desenvolvido pelo grupo da Monsanto, para introduzir genes de Bt nas linhas de algodo Siokra I-3 e S324. Em bioensaios empregando clulas de calos de plantas transgnicas ou mesmo fragmentos de folhas destas plantas foi observado um nvel significativo de ex- presso dos genes para toxinas que atu- am contra formas imaturas de insetos da ordem Lepdoptera. A expresso das protenas de Bt em plantas Como indicado anteriormente, as dificuldades tcnicas para a expresso dos genes das toxinas de Bt em clulas de plantas no so triviais. Decorreram- se 12 anos desde que se teve pela primei- ra vez a idia de transferir tais genes para plantas especficas at se ter no mercado disposio dos comerciantes/agricul- tores as referidas plantas geneticamente modificadas de modo correto. Muitos fatores tiveram que ser explorados, e assim outras dificuldades foram se so- mando s anteriormente previstas, e so consideradas a seguir: Quais linhagens de B.thuringiensis utilizar? A escolha da linhagem de Bt apro- priada para se usar em experimentos de transgnese com plantas dependente do tipo de praga-alvo que se quer atingir, bem como da disponibilidade de um gene codificador de uma toxina adequa- da a cada situao. Os produtos dos genes ativos contra Lepidoptera, deriva- dos da subespcie kurstaki, que foram descritos no incio dos anos 60, denomi- nados genericamente cryIa, e seus deri- vativos isolados em meados da dcada de 80 so, de longe, os mais caracteriza- dos (Hfte and Whiteley, 1989). Tambm devido ao fato de, coincidentemente, a maioria das pragas de lavoura pertence- rem ordem Lepidoptera, no de se surpreender que a maior parte dos traba- lhos de transgnese tenha sido feita com este grupo de genes (Barton et al., 1987; Fischoff et al., 1987; Vaeck et al., 1987). Os genes e seus produtos retirados de linhagens de Bt que atuam sobre as ordens Coleopera e Diptera foram isola- dos e caracterizados alguns anos mais tarde, e somente agora comeam a rece- ber a ateno dos grupos de pesquisa- dores que empregam as tcnicas de recombinao gentica naturalmente Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 15 no-convencionais, e assim podero passar tambm a oferecer possibilidades de controle de outras classes de pragas economicamente to ou mais importan- tes do que as j contempladas. No mun- do todo, muitos esforos esto sendo realizados na busca de novas linhagens de Bt que sejam efetivas contra outras pragas especficas. No Brasil, o grupo da dra. Olivia Arantes, da UEL, isolou a subespcie de B.thuringiensis denomi- nada londrina, que aparentemente pare- ce atuar sobre lagartas da soja (Anticarsia gematalis). Atingindo nveis adequados de expresso das toxinas de Bt nas plantas A abordagem inicial de expressar genes para toxinas de Bt em plantas foi a de simplesmente colocar regies de promoo de bactrias ao lado dos genes de Bt, entre os outros genes do genoma das plantas, assim como incluir uma regio de terminao e poliadenilao (Barton et al., 1987 - Fischoff et al., 1987). Na maioria dos casos, o promotor usado envolve a regio do genoma do vrus do mosaico da couve-flor, relativa expres- so de ARN 35S, em abundncia (Odell et al., 1985). Este promotor tem sido relatado como um dos preferidos para a expresso de vrios outros produtos gnicos em plantas geneticamente modi- ficadas. Os primeiros exemplos de plan- tas de tabaco e tomate transgnicas pro- duziram quantidades to nfimas das protenas de Bt que no era possvel sua deteco (mesmo com o emprego de mtodos bioqumicos bastante sensveis), e conseqentemente exibindo nveis insatisfatrios de proteo contra as pra- gas destas lavouras. Houve uma melhora significativa quando apenas a parte N- terminal das toxinas foi levada expres- so em clulas de plantas, mas mesmo assim era insuficiente para trabalhos de campo. Tais plantas geneticamente mo- dificadas eram recomendadas apenas para regies com pragas altamente sen- sveis s toxinas envolvidas. O grupo da Blgica da Plant Genetics Systems (PGS) conseguiu substanciais incrementos da expresso de genes de Bt atravs da explorao de um sistema de seleo acoplada. Neste caso, associou-se ex- presso dos genes de interesse um outro gene responsvel pela resistncia a um antibitico (Vaeck et al., 1987). Em casos particulares de expresso de genes di- versos, pode ocorrer uma distribuio normal dos nveis de expresso devido influncia da localizao dos genes em diferentes locais de cromossomos dife- rentes da planta hospedeira. Apenas um pequeno nmero de transformantes fo- ram produtores de nveis altos das toxi- nas e os pesquisadores belgas elabora- ram uma estratgia para selecionar tais clones. Eles elevaram a concentrao do antibitico nos meios de seleo, e com isso selecionaram os melhores clones produtores do antibitico, e, por conse- guinte, tambm estes clones foram os melhores produtores das toxinas de Bt, uma vez que os genes para ambos pro- dutos esto fundidos (regio N-terminal do produto do Bt com o gene da neomicina fosfotransferase (NptII). Deve ser l embr ado que as cl ul as de B.thuringiensis produzem as molculas de protena cristal na forma de pr- toxinas, que s sero ativadas quando no trato digestivo dos insetos-alvo, aps a remoo da parte relativa ao C-termi- nal. Assim sendo, as montagens que se 16 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento utilizam da fuso do N-terminal com genes codificadores de antibiticos so mais eficientes. Embora a expresso des- sa montagem gentica resulte em nveis de toxinas detectveis apenas por ensai- os de ELISA, nveis estes que, na prtica, so eficientes apenas contra lagartas de Manduca sexta, uma espcie extrema- mente suscetvel ao das toxinas de Bt, esses resultados so tidos como um ponto de partida para a obteo de plantas transgncias mais eficientes. No incio dos anos 90, os pesquisa- dores da Monsanto conseguiram em avano significativo na expresso de genes de Bt nas clulas de plantas (Perlak et al., 1990). Estes pesquisadores nota- ram que as regies codificadoras dos genes de Bt para suas toxinas so exces- sivamente ricas em pares A=T quando comparados com os outros genes nor- mais das plantas. Em plantas transgnicas, est a di f erena na composi o de nucleotdeos do ADN pode ter inmeras conseqncias prejudiciais para a ex- presso de tais genes. Isto porque, nos genes das plantas, as regies ricas em pares A=T so correspondentes aos ntrons ou esto relacionadas com a poliadenilao de molculas de mRNAs. H inclusive relatos, em alguns animais, de situaes em que as ditas regies ricas em pares A=T sinalizam pontos de degradao rpida de molculas de mARNs. Alm disso, as plantas tm a tendncia de utilizar C ou G como tercei- ra base de codons redundantes, sendo portanto os nucleotdeos A e T menos freqentes. Como para os genes de Bt h uma tendncia inversa, ou seja, empre- gada uma maior quantidade de pares A=T do que C=G, alm do uso mais do que esperado de determinados codons (preferncia de codons), haver, por conseguinte, nos citoplasmas das clu- las hospedeiras, menores quantidades destes correspondentes tARNs, e, por- tanto, uma menor taxa de produo de protenas. Para eliminar este problema, os pesquisadores da Monsanto recons- truram os genes de Bt mantendo as seqncias codificadoras, mas retirando as regies ricas em pares A=T (Perlak et al., 1991). Este gene sinttico, quando levado expresso ligado a um promo- tor 35S CAMV, tanto em plantas de taba- co como tomate e algodo, produziu quantidades excepcionalmente altas das toxinas de Bt, atingindo mais de 0,2% do total de protena solvel das clulas geneticamente modificadas. Esse aumen- to de produo de toxinas resultou em um melhor controle das pragas destas culturas quando em situao de campo (Perlak et al., 1990). Os testes preliminares com estas plantas indicaram um grau efetivo de combate s pragas de campo, sem que tenha havido a necessidade da colabo- rao de outros defensivos agrcolas. As modificaes genticas feitas nos genes de Bt para que se atingisse estes nveis de expresso em transgnese indicam que provavelmente esta no ser uma prtica recomendvel para os outros genes das outras linhagens de Bt. H outros grupos buscando outras alternativas mais eco- nmicas e de realizao menos compli- cada, como a de buscar um local ou compar t i ment o i nt r acel ul ar par a estocagem das toxinas quando produzi- das em transgnese, de maneira a funci- onar como um almoxarifado de toxinas para serem usadas quando forem neces- srias. Tecidos-alvo para a expresso das Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 17 toxinas de Bt Entre os promotores mais usados para expressar as protenas de Bt nas clulas das plantas, pode-se citar o pr- prio 35S CAMV ou qualquer derivativo dele. Embora no se trate de um promo- tor absolutamente constitutivo, ele induz a expresso de muitos genes diferentes quando em transgnese dentro de clu- las das plantas hospedeiras. Uma abor- dagem elegante para detectar a atividade de tais montagens genticas envolve a ligao de um gene reprter, por exem- plo o GUS (b-glicuronidase), aos promo- tores destas montagens. Os produtos destes genes podem ser detectados hi st oqui mi cament e em t eci dos vascularizados, tais como folhas, razes, caules, brcteas florais, filamentos, ov- rios e estigmas, porm no em tecidos maduros de ptalas ou plen (Cousins et al., 1991), permitindo desta maneira a observao de expresso dos genes trans- feridos para as plantas hospedeiras. H uma certa preocupao com relao resistncia dos insetos ao baixo nvel de toxinas produzidas, especialmente nos tecidos em que no h a presena delas, como por exemplo nas mas florais do algodo. No milho, a lagarta do cartucho (Heliothis zea) busca exatamente estes locais para se alimentar, e estes fatos podero gerar um caminho para o de- senvolvimento de resistncia s toxinas do Bt, pouco produzidas nestas partes das plantas transgnicas. A fase atual est relacionada exatamente com a bus- ca de promotores ativos nestes locais, nos tecidos que so alvo das pragas, de maneira que l exista um aporte localiza- do de toxinas prontas para exterminar com as lagartas e/ou outras formas ima- turas dos insetos (Llewellyn et al., 1994). Estabilidade dos genes introduzidos Os novos genes introduzidos nas plantas pelas tcnicas de engenharia gentica so integrados aos cromossomas das clulas destas plantas, e, portanto, so herdados como todos os outros genes l presentes. H exemplos, entre- tanto, em que a atividade do gene intro- duzido no aparece. No h perda do material gentico, mas apenas o gene encontra-se desligado (inativo) devido a fatos como, por exemplo, a metilao de seus nucleotdeos (John and Amasino, 1989). Todas as clulas de uma planta tm o mesmo material gentico, porm nem todos os genes potencialmente ati- vos expressam-se ao mesmo tempo. A metilao parece ser o mecanismo natu- ral pelo qual os organismos superiores modulam a atividade de seus genes, e assim quando genes estrangeiros so introduzidos em clulas superiores e so metilados podem tambm tornar-se ina- tivos. O desenvolvimento de resistncia pela praga-alvo Parece claro, no presente momento, que plantas transgnicas expressando nveis razoveis de protenas de Bt sejam tolerantes pragas-alvo destas mesmas protenas inseticidas. Mas at quando estas tolerncias por parte das plantas iro se manifestar? Que os insetos pos- sam contornar este tipo de obstculo e tornarem-se resistentes s toxinas do Bt j foi relatado em meados dos anos 80, como nos casos de pragas de gros estocados e mais recentemente com as aplicaes de bioinseticidas em forma de spray para controle de pragas hortcolas (McGaughey, 1985; Dixon, 1991; Harris, 1991). No h, ainda, rela- tos de surgimento de resistncia s toxi- nas produzidas por plantas transgnicas, at porque este tipo de planta no se encontra por enquanto com ampla dis- tribuio pelo planeta. Embora haja no mercado mel hores f ormul aes e t ecnol ogi as de apl i cao dos bioinseticidas, a prpria biodegradao ambiental e a inabilidade de penetrao dos sprays em atingir todas as partes das plantas deixam oportunidade de que alguns insetos ou suas formas de vida ainda imaturas possam sobreviver a es- tas doses subletais. Este se caracteriza como o cenrio clssico de desenvolvi- mento de resistncia s toxinas de Bt tanto em ensaios de laboratrio como no campo. Portanto, h restries quanto ao uso de plantas transgnicas, de modo a evitar o surgimento de resistncias que levem perda da tolerncia das plantas s espcies de insetos consideradas pra- gas de lavouras (McGauhey, 1985). Como parte de uma proposta de manejo inte- grado de bioinseticidas/pesticidas qu- micos, sugere-se o uso de produtos sin- tticos menos txicos/poluentes em con- j unto com a utilizao de plantas transgnicas. Tambm sugere-se o em- prego ora de plantas transgnicas, ora de no transgnicas em mosaico ou em rotao de culturas, de maneira a no circunscrever possveis surgimentos de resistncias a determinadas reas, dilu- indo-se assim as chances de seleo de linhas de insetos resistentes. Haver com isso uma certa perda nas lavouras, mas isto no ser muito significativo ao longo do tempo. Ainda h a possibilidade de em uma mesma planta, de importncia agronmica, serem transferidos dois genes diferentes (ex.: cryIa e cryIc), ex- pressando duas toxinas de Bt que apre- sentem diferentes mecanismos de ao. Este conjunto de aes dever postergar o surgimento de resistncia s toxinas de Bt tanto numa perspectiva de trabalho com plantas transgnicas como empre- gando os bioinseticidas propriamente ditos a nvel de campo como sprays. As pesquisas em desenvolvimento na UNESP/Jaboticabal O Laboratrio de Gentica de Bac- trias do Departamento de Biologia Apli- cada Agropecuria, da UNESP/Campus de Jaboticabal, tambm vem participan- do deste cenrio. Dois trabalhos de transgnese envolvendo organismos endofticos foram desenvolvidos utili- zando a tcnica de eletrotransformao, com plasmdeos contendo cpias de um gene cryIA obtido de uma linhagem de B. thuringiensis denominada SPL 407. Numa primeira tentativa, foram conse- guidos transformantes de clulas da bac- t r i a per t encent e ao gner o Br adyr hi zobi um sp SEMI A 6033, comumente encontrado em leguminosas, enquanto que, em outra, objetivou-se a obteno de eletrotransformantes de bactrias do gnero Erwinia, microrga- nismo endoftico encontrado na maioria da variedades de cana-de-acar planta- das atualmente no Estado de So Paulo, com amostras do mesmo plasmdeo an- t er i or ment e r ef er i do. Os eletrotransformantes obtidos em ambas situaes expressaram o gene da toxina codificada pelo gene cryIA, usado po- rm em nveis detectveis apenas por "imunodot". Esto sendo realizadas pes- quisas no sentido de melhorar os nveis de expresso do gene envolvido atravs de modificaes genticas abrangendo outros plasmdeos portadores de genes promotores mais bem adaptados para atuar nas bactrias consideradas. 18 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Emmanuel Dias Neto Laboratrio de Parasitologia Celular e Molecular. Centro de Pesquisas Ren Ra- chou, Fiocruz e Departamento de Bioqumi- ca e Imunologia, Instituto de Cincias Biol- gicas, Universidade Federal de Minas Ge- rais. s parasitas so encontrados ao redor do mundo, devas- tando plantaes e causan- do doenas em criaes de animais e no homem. O seu controle difcil devido a uma longa e bem-sucedi- da adaptao aos seus hospedeiros, ad- quirida durante dezenas de milhares de anos de co-evoluo. Esta co-evoluo permitiu o desenvolvimento de eficien- tes mecanismos de escape das defesas imunolgicas dos hospedeiros, e mais recentemente o surgimento de mecanis- mos de resistncia diversas drogas. Estes fatores fazem com que, ainda nos dias de hoje, as doenas parasitrias estejam entre os mais graves problemas de sade pblica que atingem o homem. Seu crescimento pode ser demonstrado pelos milhes de casos novos que sur- gem a cada ano, e a sua gravidade refletida nos milhes de bitos anuais em todo o mundo, principalmente nas regies menos desenvolvidas do globo. O desenvolvimento de mtodos de an- lises moleculares que permitam conhe- cer a fundo as caractersticas biolgicas dos parasitas dever possibilitar o de- senvolvimento de abordagens eficazes e de baixo custo, teis no controle destas endemias. A maneira mais precisa de compre- enso da estrutura e do funcionamento de um organismo o seqenciamento dos seus genes, o objetivo maior dos denominados Projetos Genoma (PG). O cdigo gentico, a unidade bsica do genoma, composto apenas por quatro nucleotdeos agrupados em genes ou seqncias de DNA. A ordenao destes nucleotdeos oferece a diversidade de informaes necessria para gerar todas as formas de vida existentes no planeta. Deste modo, o seqenciamento dos genes permite a leitura, a compreenso e a utilizao destas informaes. A ltima dcada assistiu ao surgimento de diver- sos PG visando obteno de uma amostragem total ou parcial de seqn- cias de DNA dos mais diversos organis- mos. Tais projetos tm como objetivos Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 19 pri nci pai s o seqenci ament o e o mapeamento (determinao da localiza- o dentro dos cromossomas) de todos os genes expressos pelo organismo em estudo. O primeiro PG lanado neste contex- to foi o humano, iniciado oficialmente em 1990 nos Estados Unidos e rapida- mente seguido por outros pases do Primeiro Mundo. O pleno conhecimento do genoma humano, com cerca de cem mil genes expressos, possibilitar um melhor conhecimento da diversidade gentica humana, permitir o desenvol- vimento de testes diag- nsticos e prognsti- cos e guiar o desen- volvimento de novas drogas efetivas para as mais diversas doenas. A concluso deste pro- jeto representar, sem dvida, a maior revo- luo biotecnolgica do prximo sculo. Uma conseqncia ex- tremamente benfica que vem acompanhan- do este projeto o de- senvolvimento de no- vas tecnologias relaci- onadas anlise gen- tica, que so imediata- mente repassadas para o estudo dos mais di- versos organismos. Ao PG humano surgiram vrios outros PG dos mais diversos organis- mos, e dentre eles os PG de parasitas. Os primeiros PG de parasitas foram de imediato financiados por laboratrios privados e entidades governamentais, com bvios interesses financeiros e estratgicos. Um exemplo neste sentido pode ser dado pelo PG de malria, que objetiva o seqenciamento do genoma dos protozorios causadores desta doena. Atualmente, este projeto financiado com cerca de 20 milhes de dlares recebidos de um consrcio for- mado pela Wellcome Trust, Burroughs- Wellcome Fund, Departamento de Defe- sa e Instituto Nacional de Alergia e Do- enas Infecciosas dos Estados Unidos. Um outro PG financiado por laboratri- os privados o de Toxoplasma gondii, causador da toxoplasmose. Impulsiona- do pela crescente importncia da infec- o pelo T.gondii em pacientes aidticos ou imunodeprimidos em geral, o projeto financiado pela Wellcome Trust e Glaxo Research Group foi um dos que mais cresceram nos ltimos dois anos. Em 1994, na tentativa de estimular o progres- so de PG de parasitas extremamente relevantes na sade pblica, mas sem um financiamento substancial de entida- des privadas, a Organizao Mundial da Sade (OMS), atravs do seu Programa Especial de Pesquisa e Treinamento em Doenas Tropicais (TDR), comeou a apoiar e financiar parcialmente alguns destes PG. Foram escolhidos os parasitas relacionados a cinco grupos de doen- as: esquistossomoses (Schistosoma spp), filarioses (Brugia malayi, Wuchereria ban- crofti e Onchocerca volvulus), leishma- nioses (Leishmania spp), doena de Cha- gas (Trypanosoma cruzi) e tripanosom- ase africana (Trypanosoma brucei), que junto com a malria e a toxoplasmose constituem as parasitoses mais graves e de maior prevalncia no mundo (tabela I). A iniciativa da OMS tinha como obje- tivos principais o desenvolvimento de mapas detalhados do genoma de parasi- t as, a i mpl ement ao de novas tecnologias, o desenvolvimento de ban- cos de dados acessveis aos pesquisado- res interessados, o desenvolvimento de mtodos de anlise gentica de parasitas e o envolvimento e treinamento de pes- quisadores de pases do Terceiro Mun- do, onde estas parasitoses so endmicas. Infelizmente, a verba disponvel foi pe- quena (US$ 800.000/ano), tendo de ser dividida entre os 30 laboratrios envolvi- dos nos 22 projetos aprovados. Um dos aspectos mais fascinantes dos diversos PG so os programas de descobertas de genes. Nos PG de parasi- tas, estes programas oferecem a possibi- lidade da descoberta de mecanismos de resistncia a drogas, escape ao sistema imune do hospedeiro, novos alvos para quimioterapia ou produo de vacinas. A descoberta de genes tambm permite uma melhor compreenso da histria evolutiva do parasita e das suas relaes com seus hospedeiros. Com exceo de alguns projetos financiados por empre- sas privadas, os PG em geral depositam as novas descobertas em bancos de dados de acesso pblico, como o dbEST (subdiviso do GenBank - o principal banco mundial de seqncias de DNA). A evoluo da descoberta de genes em diversos organismos pode ser observada na tabela II. Esta tabela mostra o nmero de seqncias disponveis para os cinco organismos mais seqenciados, e tam- bm para os parasitas. Pode-se perceber que, alm do rpido crescimento do nmero de seqncias disponveis (o dbEST cresceu 2,7 vezes em 18 meses), a imensa maioria das seqncias dispo- nveis de origem humana, seguidas por organismos-modelo, como o nematdeo Caenorhabiditis elegans e vegetais. O nmero de seqncias de parasitas, ape- sar de ainda ser pouco representativo, cresceu 5,5 vezes, num ritmo ainda mais acelerado que o restante do dbEST. Como pode ser observado, este crescimento foi devido principalmente ao trabalho dos grupos de Brugia malayi, Toxoplasma gondii e Trypanosoma brucei. A varieda- de do tamanho dos genomas dos dife- rentes parasitas, de 30-50 milhes de bases (parasitas causadores das malrias e tripanosomases) at cerca de 300 mi- lhes de bases (para os causadores das esquistossomoses), faz com que diferen- tes estratgias de seqenciamento ve- nham a ser empregadas. Nos genomas de protozorios parasitas, o pequeno tamanho e a densidade relativamente 20 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento al t a de genes f azem com que o seqenciamento do DNA total seja uma opo vivel. Esta estratgia foi a abor- dagem pioneira utilizada ao redor dos anos 70, e permitiu a concluso de projetos extremamente ambiciosos que permitiram a construo de um quadro detalhado da "anatomia molecular" de vrios microrganismos. O recorde destes projetos foi atingido em 1996 com o seqenciamento completo dos mais de 12 milhes de pares de bases do genoma da levedura (Saccharomyces cerevisae), resultado de um esforo conjunto de cerca de 600 pesquisadores da Europa, Japo e Estados Unidos. Nos PG de parasitas esta estratgia est em anda- mento para o Plasmodium falciparum (um dos agentes causadores da malria humana) e para Leishmania major (cau- sador da leishmaniose tegumentar). Em bancos de dados especficos, no caso de P.falciparum, j se encontram dispon- veis 21.807 seqncias, todas derivadas do cromossomo 2 (www.tigr.org/), e tam- bm seqncias dos cromossomos 1, 3 e 4 (www.sanger.ac.uk). Dados gerais so- bre o PG de Leishmania podem ser encontrados em www.dbbm.fiocruz.br/ genome/LGN/leishseq.html, e informa- es sobre outros PG de parasitas po- dem ser obt i das em www. d b b m. f i o c r u z . b r / g e n o me / genome.html e www.ebi.ac.uk/parasites/ parasite-genome.html. Diante do imenso tamanho dos genomas de certos organismos, foi ado- tada uma segunda estratgia, que prioriza o seqenciamento apenas da frao do DNA total (5 a 10%) que codifica os genes. Esta estratgia baseada no seqenciamento de poucas centenas de pares de bases de genes expressos con- tidos em bibliotecas de cDNA. Estas bibliotecas so basicamente colees de genes expressos inseridos em vetores artificiais de DNA que permitem o seu seqenciamento. Os fragmentos de se- qncias obtidos so denominados "eti- quetas de seqncias expressas" ou EST (denominao empregada no dbEST), uma ferramenta extremamente til na busca de similaridades, identificao e descoberta de genes. Esta abordagem oferece a maneira mais rpida de obten- o de seqncias geneespecficas de um grande nmero de molculas de cDNA, sendo atualmente a estratgia mais utilizada nos PG de parasitas. Atualmen- te, mais de 1 milho de ESTs, de 80 diferentes espcies, se encontram dispo- n vei s nos bancos de dados ( www. n c b i . n l m. n i h . g o v / d b E S T/ index.html), e, em mdia, cerca de 1.000 novas seqncias so depositadas diari- amente. A concluso dos Projetos Genoma apenas ser al canada com o seqenciamento de todos os genes ex- pressos. O advento dos seqenciadores automticos de DNA representou um grande avano neste sentido, permitindo um aumento da produtividade para cer- ca de 150.000 bases/pessoa/ano a um custo final ao redor de US$ 1,00/base. No entanto, para que todos os genes expres- sos sejam seqenciados, torna-se neces- srio o desenvolvimento de protocolos que permitam contornar as limitaes das atuais metodologias, como o repeti- do seqenciamento de genes altamente expressos, a dificuldade de obteno de ESTs de genes raros ou a freqente presena de artefatos de tcnica que juntos podem atingir nveis acima de 60% das ESTs, conforme a biblioteca usada. Tais protocolos vm sendo de- senvolvidos, inclusive por laboratrios brasileiros envolvidos em PG de parasi- tas, e imediatamente oferecidos comu- nidade cientfica internacional. UMA INICIATIVA BRASILEIRA: O Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 21 PROJETO GENOMA DE SCHISTOSOMA MANSONI A primeira iniciativa de um PG no Brasil envolveu o seqenciamento dos genes expressos pelo parasita causador da esqui st ossomose no Br asi l , o Schistosoma mansoni. O projeto foi ini- ciado em 1992 pelos drs. Andrew Simpson (Fiocruz) e Srgio Pena (UFMG), em colaborao com o dr. J. Craig Venter, do Institute for Genomic Research, nos Es- tados Unidos. O projeto se iniciou com a construo de uma biblioteca de cDNA deste parasita e a gerao das primeiras ESTs. Posteriormente, grupos de outros pases (Japo, Inglaterra, Egito, Frana e Estados Unidos) se uniram ao grupo brasileiro, trabalhando na construo de bibliotecas de cDNA, gerao de ESTs e mapeamento utilizando cromossomos artificiais de leveduras. Todas as se- qncias obtidas so depositadas em bancos de dados pblicos e se encon- tram disponveis a todos os interessados. Desde o incio do projeto, j foram produzidas mais de 2.500 ESTs que de- vem representar fragmentos de aproxi- madamente 10% dos genes deste parasi- ta. Dentre os genes de interesse j desco- bertos, podemos ressaltar genes simila- res a fatores de transcrio, protenas reguladoras e enzimas. Um dos maiores objetivos do PG de S.mansoni encon- trar genes que possam explicar a sua sobrevivncia por tantos anos no hospe- deiro. Neste sentido, cabe ressaltar o encontro, por nosso grupo, de uma EST similar a um receptor de lipoprotenas de baixa densidade (LDL), pela primeira vez encontrado neste parasita. Alm de utili- zar este receptor para a captao de LDL do hospedeiro, fundamental para a sua sobrevivncia, trabalhos anteriores de- monstraram que este LDL ligado ao re- ceptor forma uma capa ao redor de 85% do parasita, permitindo o seu escape ao sistema imune. Vrios outros genes de interesse j foram etiquetados pelos di- versos grupos do projeto, e maiores informaes podem ser encontradas na home-page www.nhm.ac.uk/schisto/. Pode- se concl ui r que a disponibilizao de tecnologias de genoma em nosso pas representa uma das contribuies mais importantes da implantao de PG no Brasil. A existn- cia de grupos brasileiros profundamente envol vi dos com PG como os de Schistosoma mansoni, Trypansoma cruzi e Leishmania uma garantia da fixao e domnio de tecnologias de ponta na rea da biotecnologia no cenrio nacio- nal, um aspecto de fundamental impor- tncia para que possamos usufruir dos benefcios gerados pelos outros PG e alcanar uma independncia cientfico- tecnolgica nesta rea. 22 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 23 24 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento ATENUAO DA TOXICIDADE DE VENENOS OFDICOS POR MEIO DA RADIAO IONIZANTE s serpentes surgiram pela primeira vez durante o Cretceo inferior, cer- ca de 100 a 130 milhes de anos atrs, e pertencem classe Reptilia (rpteis), subclasse Lepdosauria, ordem Squamata, subordem Serpentes, grupo Vertebrata (vertebrados). Os ancestrais das serpentes so os lagartos, dos quais elas foram perdendo os membros ao longo do percurso da evolu- o biolgica. As serpentes compreendem cerca de 3.200 espcies, das quais quase 50% so venenosas. A distribuio das serpentes venenosas vasta; esto ausentes na Antrtida, Chile, algumas ilhas do Caribe, Madagscar, Nova Zelndia e algumas ilhas do Pacfico e do Brasil (Trindade, Fernando de Noronha) (Bruno Soerensen). Os venenos das serpentes so usados tanto para o ataque como para a defesa. Assim, eles contm componentes que ser- vem para imobilizar a presa, mas que tambm facilitam a digesto. Mais de 90% do peso seco do veneno so polipeptdeos, os quais incluem enzimas, toxinas e pe- quenos peptdeos (W.C.Bowman - Snake Toxins). Devido a esta alta complexidade dos venenos, os acidentes por animais peonhentos constituem problema de sa- de pblica (Soerensen), nos pases em desenvolvimento, dadas a incidncia, a gravidade e as seqelas deixadas nos acidentados. No Brasil, das 69 espcies venenosas existentes, 32 pertencem ao gnero Bothrops, representado pelas jararacas, 6 ao gnero Crotalus (cascavis), 2 ao gne- ro Lachesis (surucucus) e 29 ao gnero Micrurus (corais), sendo que a maior inci- dncia de acidentes atribuda ao gnero Bothrops (87,5%), seguida pelos gneros Crotalus (8,5%), Lachesis (3,2%) e Micrurus (0,8%), (Jorge & Ribeiro, 1990), resultando em um alto ndice de acidentes ofdicos, que ocorrem principalmente na rea rural e na periferia dos grandes centros (20.000 casos/ano). O nico tratamento de eficcia com- provada nos casos de acidentes envolven- do serpentes a soroterapia (Barraviera, 1994), que consiste na administrao, em tempo hbil, de anti-soros utilizando-se via e doses adequadas. (Cupo et al., 1991). Os anti-soros consistem de uma solu- o rica em anticorpos antiveneno, con- centrada e ampolada, obtida a partir do plasma tratado com pepsina, seguido de purificao por precipitao com sulfato de amni o (Manual de Vi gi l nci a Epidemiolgica, IMESP, 1993). Estes anticorpos so obtidos a partir de inculo, em cavalos, de amostras contra as quais se deseja uma resposta imune. Por ocasio do acidente, o tratamento consiste da administrao do anti-soro antiveneno monoespecfico, por via endovenosa, o que garante maior rapidez e eficincia na neutralizao das toxinas circulantes (Cupo et al., 1991; Ribeiro et al., 1993). O nmero de ampolas a ser admi- nistrado, em geral, calculado de acordo com o quadro clnico desenvolvido, ou seja, de 10 a 20 ampolas para os casos leves e moderados e acima de 20 para os casos severos. Porm, quando a soroterapia tardia ou a quantidade de anti-soro no suficiente para neutralizar todo o veneno circulante, as leses e danos podem se tornar irreversveis, podendo resultar em bi t o (Manual de Vi gi l nci a Epidemiolgica, IMESP, 1993). Os soros antiofdicos so produzidos em animais, geralmente cavalos, utilizan- do-se o veneno bruto como imungeno. O cavalo, pelo seu grande porte, permite a coleta de grandes volumes de plasma, ri cos em ant i corpos ant i veneno (Schvartsman, 1992). Contudo, estes ani- mais apresentam decaimento de sua resis- tncia orgnica que pode resultar em bito (10% dos animais utilizados na produo de soro morrem durante o processo de imunizao) devido alta toxicidade do veneno e tambm pela utilizao de adjuvantes (Ribeiro et al., 1993). Considerando-se que o rebanho eqino destinado para esta finalidade escasso, e que a sua manuteno onero- sa, qualquer perda econmica e clinica- mente significativa. Uma outra alternativa que se tem estudado o emprego de ovinos na produo de soros, que tm apresent ado uma mel hor respost a imunolgica quando comparados com os eqinos (Sjostrom et al., 1994). Deve-se ressaltar tambm que, no caso da imunizao com veneno de ser- pentes do gnero Bothrops, ocorre leso no local do inculo, debilitando o animal. Tal efeito, entretanto, no observado quando o animal imunizado com o veneno submetido radiao gama. Fonte de Cobalto-60, Gammacell 220 (Atomic Energy of Canada Ltd.), onde A Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 25 feita a irradiao do veneno. Assim, estamos testando um novo esquema de imunizao, em carneiros, e que envolve toxinas irradiadas. Com isto, poderemos diminuir o sofrimento do ani- mal, obter uma melhor resposta e ainda continuar utilizando os carneiros imuniza- dos para a extrao da l, uma vez que o veneno irradiado no promove qualquer dano tecidual no local do inculo. Nossos estudos tiveram incio na d- cada de 80, quando a produo de anti- soros, no Brasil, sofreu uma queda consi- dervel. Este declnio foi resultado da suspenso da produo de imunobiolgicos por laboratrios da rede privada em 1984. Desde ento, o Estado de So Paulo comprou toda a produo na- cional e responsabilizou-se pela distribui- o s secretarias estaduais. As secretarias, por sua vez, passaram a ser responsveis pela distribuio em seu municpio e no- tificao dos acidentes ao Ministrio da Sade, e os pacientes passaram a receber o tratamento gratuitamente, quando aten- didos nos centros de atendimento credenciados (Ribeiro et al., 1993). Contudo, a escassez de anti-soros para uso veterinrio continua sendo um grave problema. Os animais de raa, gado leiteiro, de corte etc. ficam merc dos acidentes, uma vez que, no Brasil, a pro- duo de antivenenos ofdicos que rea- lizada pelo Instituto Butantan (SP), Funda- o Ezequiel Dias (MG) e Instituto Vital Brazil (RJ), sendo distribudo para todo o pas pelo Ministrio da Sade, destina-se exclusivamente ao uso humano. Com isto, tornou-se necessrio o de- senvolvimento de tcnicas que melhoras- sem a produo de anti-soros, no sentido de diminuir o sofrimento do animal soroprodutor, assim como maneiras de se aumentar a produo destes anti-soros para que seu uso pudesse ser estendido a todos aqueles sujeitos s picadas de ser- pentes, inclusive os animais domsticos. Vrios trabalhos tm sido realizados com toxinas com o intuito de se obter um produto menos txico, mas que preserve, no ent ant o, suas propri edades imunognicas e antignicas originais, e, neste sentido, a radiao ionizante vem sendo empregada com muito sucesso. RADIAO GAMA A passagem de uma radiao eletro- magntica ou mesmo um fton causa projeo de um eltron de um tomo, resultando na criao de um par de ons, positivo e negativo. Esse fenmeno, cha- mado ionizao, o principal meio pelo qual a energia da radiao ionizante transferida para tecidos biolgicos, sem, no entanto, produzir radioatividade. Sabe- se que a energia absorvida a partir da radiao ionizante (raios gama) pode inativar material biolgico por dois cami- nhos: direta ou indiretamente. O efeito direto ocorre quando o even- to primrio, isto , a ionizao, produzi- do na prpria molcula e tem maior pro- babilidade de ocorrer quando a substn- cia irradiada no estado seco. No efeito indireto, observa-se a reao entre as molculas estudadas e os produtos de interao da radiao com a gua e outros solventes. Desta maneira, quando um com- posto irradiado em soluo, o efeito i ndi ret o se associ a ao di ret o. Exemplificando, enzimas puras em solu- es muito diludas so inativadas por uma menor exposio aos raios gama do que a necessria para inativar preparaes secas ou contendo outros constituintes. Assim, a irradiao de protenas em soluo aquosa tem sido utilizada, com muita freqncia, por proporcionar os mesmos efeitos da irradiao a seco, com o uso de doses menores de radiao. Nestas condies, o efeito indireto pre- dominante, tornando as espcies reativas da gua particularmente importantes. A irradiao da gua pura ou de solues muito diludas gera espcies moleculares e radicais livres conforme as seguintes equaes: A reatividade das espcies radical hidroxila (OH.) e eltron aquoso (e-aq) formadas to grande que, entre 10 -14 e 10-12 segundos, podero colidir, forman- do espcies reativas secundrias. O radical hidroxila destacado como importante promotor dos danos s macromolculas. Este reage com prote- nas, principalmente pela abstrao dos hidrognios do carbono alfa e de grupos sulfidrilas, alm de reagir com anis aro- mt i cos do t ri pt of ano, t i rosi na e fenilalanina, formando radicais altamente reativos. Os eltrons hidratados reagem com os hidrognios dos aminocidos aromti- cos da mesma maneira que os radicais hidroxila, alm de promover a desaminao de aminocidos como alanina, arginina, glicina, histidina, cistena, cistina e arom- ticos. As leses primrias, produzidas pela absoro de energia da radiao, embora distribudas ao acaso atravs de toda a molcula protica, podem estabilizar-se em stios favorveis por transferncia de energia intramolecular e rearranjo. As reaes iniciadas pelas espcies reativas (OH. e e-aq) podem induzir mu- danas na estrutura primria pela destrui- o de aminocidos especficos e quebra de cadeias polipeptdicas; estruturas se- cundria e terciria, pela desestabilizao de pontes de hidrognio e sulfidrila, agre- gao e desdobramento da molcula; e quat ernri a, pel a di ssoci ao de subunidades. Estas mudanas estruturais podem levar a modificaes nas proprie- dades txicas, enzimticas e imunolgicas com conseqente perda de atividade bio- lgica das protenas (Butler et al., 1987). Os radicais livres, dentre os produtos oriundos do processo de absoro de energia, tm importncia particular. Um radical livre um tomo ou uma molcula com um ni co el t ron do orbi t al desemparelhado, tem vida curta e alta probabilidade de reagir com outro tomo, quer combi nando seu el t ron desemparelhado com um eltron de outro tomo, quer pela liberao de um eltron desemparelhado a outro tomo. Cada uma destas interaes podem gerar ons adicionais ou radicais livres, e a maioria dos danos da radiao s molcu- las orgnicas est associada com tais ca- deias de interaes de radicais livres se- cundrios (Butler et al., 1987) Estes radi- cais livres, extremamente danosos s macromolculas, podem entretanto ser capturados por substncias denominadas scavengers, que conseguem seqestr-los do meio onde se encontram, protegendo assim as macromolculas. Dentre as espcies reativas produzi- das durante a irradiao, o radical hidroxila e o eltron hidratado tm maior importn- cia por possurem alto rendimento quando se utiliza a radiao gama de 60Co. O efeito final da irradiao de prote- nas diferente quantitativa e qualitativa- mente, de acordo com as condies de irradiao empregadas. Assim, ao se sub- meter uma amostra aos efeitos da radiao gama, alguns parmetros devem ser anali- sados: condies fsicas: fonte, dose, taxa de dose, temperatura, amostras lquidas ou cristalizadas. condies qumicas: tipo de solvente, concentrao da amostra, 26 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento presena de gases e presena de radiomodificadores. caractersticas biol- gicas: toxicidade, antigenicidade e conte- do enzimtico. Alexander & Hamilton, 1960, mostra- ram que a irradiao de protenas promove danos na cadeia lateral dos aminocidos, aparecimento de novos grupos, quebras de ligaes peptdicas e formao de ligaes inter e intramoleculares. Considerando-se que os venenos so ricos em protenas, vislumbrou-se a possi- bilidade de submet-los aos efeitos da radiao ionizante, na tentativa de sanar um dos nossos problemas de sade pbli- ca que o acidente ofdico. Assim, para aumentar a vida til dos animais utilizados na soroproduo e me- lhorar a produo de antivenenos para tornar o tratamento hoje apenas disponvel para uso humano acessvel tambm aos animais domsticos, tm sido feitos estu- dos envolvendo a irradiao de venenos com o objetivo de destoxic-los. A Superviso de Radiobiologia do IPEN vem, desde o incio da dcada de 80, estudando os dois principais gneros en- volvidos nos acidentes ofdicos: o gnero Bothrops, devido a sua alta incidncia, e o gnero Crotalus, devido a sua alta letalidade. Murata et al., 1990, irradiando o vene- no da Crotalus durissus terrificus, a casca- vel brasileira, com diversas doses de radi- ao, mostrou que a dose de 2.000Gy era a adequada no sentido de combinar dimi- nuio de toxicidade com manuteno das propriedades imunolgicas, quando testadas em camundongos, coelhos e ca- valos. Ainda nesta linha de pesquisa, Guarnieri, em 1992, usou os raios gama para destoxicar o veneno de B.jararaca, e, semelhana do que foi encontrado para cascavel, a dose de 2.000Gy foi a ideal para destoxicar este veneno com manu- teno de suas propriedades imunolgicas, conforme mostraram os experimentos bioqumicos, biolgicos e imunolgicos. Recentemente, Nascimento et al., es- tudando a crotoxina, principal toxina do veneno de cascavel, tanto pela prevalncia quanto pela toxicidade, mostrou que a irradiao desta toxina isolada resultou na formao de agregados de alto peso molecular, assim como produtos de baixo peso molecular em funo das quebras promovidas pela radiao. Aps estudos especficos sobre estes agregados, comprovou-se que eles so os responsveis pela diminuio da toxicidade da crotoxina, que aps a irradiao se mostrou duas vezes menos txica que a toxina no-irradiada (nativa). Alm do mai s, por apresent arem al t o peso molecular, estes agregados tm sido utili- zados para imunizao de animais, sem, entretanto, acrescentar-se qualquer adjuvante mistura a ser inoculada. Isto uma grande vantagem, pois sabe-se que os adjuvantes at hoje utilizados so alta- mente txicos aos animais (Bennett et al., 1992). Estes produtos de alto peso molecular, quando isolados por mtodos bioqumicos, se mostraram totalmente atxicos, e o que melhor, capazes de induzir formao de anticorpos quando injetados em animais. Cabe ressaltar, ainda, que os anticorpos formados contra estes agregados so ca- pazes de neutralizar tanto os efeitos da crotoxina isolada quanto aqueles promo- vidos pelo veneno total de cascavel. Estes achados apontam a radiao ionizante como uma excelente ferramenta a ser empregada na destoxicao de vene- nos, por ser uma metodologia capaz de modificar um componente sem acrescen- tar qualquer substncia ao mesmo, como ocorre com a maioria das metodologias que vm sendo empregadas com o intuito de atenuar a toxicidade de venenos, como, por exemplo, adio de glutaraldedo, inibidores de centro ativo etc. Por outro lado, a radiao ionizante ainda apresenta uma outra vantagem que a possibilidade de ter seus efeitos modu- lados atravs da utilizao de scavengers, conforme mostrado por Andriani em 1995. Estes produtos, conforme descritos anteri- ormente, tm a capacidade de interagir com as espcies reativas formadas durante o processo de irradiao, impedindo-as de reagir com a amostra que est sendo irradiada. Exemplificando, de acordo com os achados da autora supracitada, a espcie reativa eltron aquoso no alterou a ativi- dade enzimtica da toxina estudada (crotoxina), porm causou modificaes estruturais na protena irradiada; enquanto que o radical hidroxila alterou a atividade enzimtica, mantendo, entretanto, a estru- tura protica intacta. Nenhuma das espci- es reativas, neste experimento, estavam envolvidas com a atividade txica do ve- neno. Estas informaes reforam a possi- bilidade de um controle dirigido do efeito da radiao, por meio do uso de scavengers e estimulam ainda mais o uso da radiao ionizante para destoxicar venenos que, uma vez desprovidos de toxicidade, pode- riam inclusive ser usados em um esquema de vacinao dos animais expostos aos riscos de acidentes ofdicos. A biomdica Nanci do Nascimento inoculando um camundongo com veneno de cascave'irradiado, para testar a atividade txica do veneno. Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 27 28 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Novas Tecnologias SUNOS Biotecnologia aplicada ao melhoramento gentico de sunos Robson Carlos Antunes e Maurcio Borges Departamento de Gentica e Bioqumica, Universidade Federal de Uberlndia/MG carne suna a mais consumida no mundo na atualidade. No Brasil ainda persiste o mito de que a mesma rica em colesterol e transmite doenas parasitrias ao homem. Em criaes modernas de suinocultura os animais so confinados sobre pisos de cimento, o que pratica- mente impede que os mesmos ingiram ovos de Taenia solium (solitria), e por- tanto este problema est resolvido. Para que a carne suna tenha uma melhor aceitao pelos brasileiros, deve-se en- to quebrar a imagem "negativa" que relaciona a mesma a uma carne "gorda". Pesquisas recentes conduzidas pelo Ins- tituto de Tecnologia de Alimentos - ITAL, em Campinas, mostram que a carne suna possui nveis de colesterol semelhantes carne bovina e de ave. Mas por outro lado, o consumidor impressiona-se ao examinar uma carcaa suna, com a espessura de tecido adiposo subcutneo (toucinho). Portanto, o grande desafio da suinocultura atual reduzir a espes- sura de toucinho e aumentar o rendi- mento de carne nas carcaas. Para isso, pode-se contar com as melhorias de manejos nutricionais e de ambincia, com a gen- tica clssica e, mais re- centemente, tambm com a gent i ca mol ec ul a r , que pode de- tectar direta- ment e os genes responsveis pela deposio de gordura e de msculo, aplicando-se tc- nicas e conhecimentos de biotecnologia. O GENE DA "CARNE MAGRA" Existem algumas raas de sunos que apresentam carcaas extremamente magras, com a espessura de toucinho na altura da ltima costela de apenas 10 a A 12mm, com uma musculatura abundante e muito exuberante, distribuda tanto na regio posterior do animal quanto na regio anterior (figura 1) resultando no abate em carcaas com rendimento de carne superior a 60%. Estudos de gentica clssica, con- duzidos com prognies oriundas do cru- zamento entre raas musculosas, mos- t r am que a car act er st i ca de musculosidade est ligada susceptibi- lidade do suno a apresentar rigidez muscular quando submetido ao anest- sico inalatrio halotano. Baseado nesta evidncia, os geneticistas de- senvolveram um teste, com o anestsico halotano, que per- mite a separao dos animais em susceptveis ou no, em relao anestesia por este gs, o que levou os pesquisa- dores a batizarem este gene de gene HAL, que se convencionou chamar, neste artigo, de o gene da "carne magra". Mas esta caracterstica herdvel do tipo autossmica recessiva, o que um grande inconveniente, pois no per- mite detectar os animais heterozigotos, aqueles que no reagem ao teste, foran- do os geneticistas a testarem os filhos dos animais no-reagentes, para conhe- cer o verdadeiro gentipo dos pais, em um cr uzament o com um ani mal sabidamente recessivo, gastando tempo, atrasando a seleo e o melhoramento gentico. AS CARACTERSTICAS INDESEJVEIS Os diversos trabalhos desenvolvi- dos nos ltimos anos mostram que o gene da "carne magra", quando em homozigose recessiva, tambm est liga- do predisposio dos animais a apre- sentarem um problema de qualidade de carne denominado P.S.E. (pale-soft and exudative), principalmente quando os mesmos so submetidos a manejos ina- dequados de transporte e pr-abate, afe- tando a cor, a textura e a capacidade de reteno de gua desta carne, causando srios prejuzos indstria de embuti- dos. Alm deste inconveniente, o gene da " car ne magr a" t ambm est correlacionado negativamente com a performance reprodutiva das fmeas sunas. Qual estratgia os suinocultores devem adotar, ento, com relao a esse gene? Partindo do princpio de que as carcaas de sunos no Brasil ainda no alcanaram, em mdia, um bom rendi- mento de "carne magra", quando com- parado a outros pases de suinoculturas fortes, como por exemplo a Dinamarca e EUA, a mel hor est rat gi a para a suinocultura brasileira com relao a Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 29 este gene a manuteno do mesmo nas raas onde sua freqncia bastante alta, utilizando essas raas como "raas- pai", buscando implementar um incre- mento na taxa de crescimento e ganho de peso em carne magra e ao mesmo tempo eliminar completamente o gene das "raas-me", beneficiando-se da complementariedade entre essas raas e explorando os hbridos provenientes do cruzamento entre elas. APLICAO DA BIOTECNOLOGIA Aqui entra a biotecnologia, ajudan- do a detectar os animais adequados a permanecerem nos plantis. No incio desta dcada, pesquisadores da Univer- sidade de Toronto, no Canad, clonaram, mapearam e seqenciaram um gene que codifica uma protena fazendo parte do canal de clcio que controla a homostasia desse mineral no msculo dos sunos. Este gene possui uma mutao que leva produo de uma protena altera- da, permitindo uma maior passagem de clcio atravs do canal, o que provoca, na carne, os inconvenientes citados no tpico anterior e parece ser o mes- mo gene HAL (gene da "carne magra"). Mas o impor- tante que, com o gene seqenciado e com a determi- nao e localiza- o da mutao, pde-se desenvol- ver uma tcnica que permite a per- feita genotipagem dos animais. Para ser realizada, os animais tm o san- gue coletado (fi- gura 2) e enviado a um laboratrio de gentica molecular, onde procede-se extrao do DNA. O DNA amplificado na regio da mutao, em milhes de cpias, atravs de uma tcnica denominada Reao em Cadeia de Polimerase, em um aparelho simples e automatizado denominado termocilador. A regio amplificada ento corta- da com uma enzima de restrio ade- quada, que so as "ferramentas" da bio- logia molecular usadas para cortar o DNA na regio mutada. Aps o corte, o mesmo separado por eletroforese em um gel de agarose. O padro de bandeamento do DNA no gel (figura 3) permite a perfeita genotipagem, contor- nando-se a limitao do teste do halotano, detectando tanto os animais homozigotos quanto os heterozigotos. Em um recente trabalho conduzido na Universidade Federal de Uberlndia, sunos hbridos foram genotipados por essa tcnica e tiveram suas carcaas completamente dissecadas em pele, osso, gordura e carne (figura 4). Este trabalho mostrou que os sunos heterozigotos, para o gene da "carne magra", so superiores aos homozigotos normais, quanto composio da carca- a, produzindo carcaas com maior de- posio de msculos e menor deposio de gordura. Este trabalho tambm mos- trou que a expresso do gene da "carne magra" diferente ao longo da carcaa, sendo maior no pernil e paleta, seguidos das partes posterior e anterior do costa- do, e menor na barriga, e finalmente produziram em mdia 1,5% a mais de carne do que os animais normais, mos- trando vantagens do ponto de vista eco- nmico. SUINOCULTORES E CONSUMIDORES BENEFICIAM-SE DA BIOTECNOLOGIA A utilizao desta tcnica para de- tectar os animais aptos a produzirem mais carne, e portanto mais lucrativos e que produzam menos P.S.E., um bom exemplo do quanto a biotecnologia re- volucionar o mundo no prximo scu- lo, influenciando o nosso modo de agir, pensar, comprar, trabalhar e alimentar- se, proporcionando uma evoluo as- sustadora, onde todos os seguimentos da sociedade lucraro. 30 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento BRASIL E RSSIA A unio faz a fora na agricultura e na biotecnologia Maria Fernanda Diniz Avidos e Lucas Tadeu Ferreira Traduo: Roberto W.S.Ferreira, Braslia-DF A Academia de Cincias Agrcolas da Rssia foi criada em 1992 com o objetivo de desenvolver pesquisas bsicas e aplicadas, visando acelerar o progresso cientfico e tecnolgico da agropecuria e agroindstria daquele pas. A Academia, com sede em Moscou, uma instituio pblica mista, que conta com a participao macia da iniciativa privada Atualmente, a Academia composta de cerca de 270 membros, alm de cientistas convidados de 32 pases, e congrega 225 institutos de pesquisa e desenvolvimento, sendo 39 de melhoramento de plantas, oito de melho- ramento animal, quatro de biotecnologia e 405 estaes experimentais. O presidente da Academia e vice-ministro da Agricultura da Rssia, G.A. Romanenko, esteve no Brasil, acompanhado dos diretores dos insti- tutos de Fruticultura e Horticultura, A.M. Sapiev e I.I. Ltvinov, respecti- vamente, e do diretor do Centro Experimental Krasnaia Poima, N.I. Issaenkov, para firmar acordo de cooperao tcnico-cientfica com a Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - Embrapa, nos campos de biotecnologia aplicada agricultura e agroindstria, de recursos genticos de plantas e animais, de horticultura, fruticultura e medicina veterinria. Romanenko engenheiro agrnomo, formado no Instituto de Agronomia da cidade de Krasnodar, e possui doutorado em economia pela Universidade da Ucrnia. Acompanhado do conselheiro da Embai- xada da Federao da Rssia, Wladimir Makhanov, Romanenko concedeu esta entrevista revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento, na qual ressaltou os avanos da Rssia proporcionados pelos conhecimentos gerados pela Academia que dirige, nos ltimos anos, nas reas de agricultura, pecuria e biotecnologia, e tambm a oportunidade de ter o Brasil como mais um aliado na corrida da pesquisa cientfica e tecnolgica. BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento - Em primeiro lugar, gostaramos que falasse quais so as principais ativi- dades da Academia de Cincias Agrco- las. Romanenko - A Academia atua em todas as reas da agricultura, que podem ser agru- padas em trs grandes blocos. O primeiro refere-se ao quadro de cientistas que composto de 270 membros da Rssia e Unio Sovitica e 99 representantes de 32 pases, dentre os quais Inglaterra, EUA, China, Japo, Irlanda; o segundo bloco representa os 225 institutos de pesquisa que esto ligados Academia; e o terceiro congrega a produo experimental e a transferncia de tecnologia. Atualmente, fazem parte da Academia 405 estaes experimentais, que possuem uma rea de cinco milhes de hectares, dos quais 1,7 milho j foram cultivados e esto em pleno processo de produo, alm de 100 mil animais utilizados para o melhoramen- to gentico e cerca de 300 mil animais de pequeno porte. Os centros experimentais produzem, anualmente 1.467 mil toneladas de gros; mais de 40 mil toneladas de carne; 400 mil toneladas de leite; 200 mil toneladas de sementes de alta qualidade de gros para produo alimentcia e agroindustrial. BC&D - O senhor poderia explicitar quais so os principais produtos pesquisados pela Academia? Romanenko - Entre os principais produtos pesquisados pela Academia, posso citar a soja, o milho, o girassol e o trigo, gado de corte e de leite, alm de outros que tm aplicao direta na alimentao humana, na produo de rao animal e na agroindstria, como um todo. As pesquisas desenvolvidas com esses produtos permi- tiram a melhoria de qualidade, resistncia a pragas e doenas e um aumento substan- cial na produo e produtividade. BC&D - Alm desses produtos, que ou- tros assuntos fazem parte do programa de pesquisa da Academia? Romanenko - A Academia engloba tambm cerca de 30 instituies que desenvolvem pesquisas bsicas nas reas de gentica, biotecnologia e energia nuclear aplicadas agricultura, alm de centros de especializa- o em melhoramento gentico de plantas e animais; estudo do uso, mapeamento e conservao de solos; monitoramento ambiental por satlites; mecanizao agr- cola; economia agrcola; medicina veteri- nria; piscicultura; temos ainda bancos genticos de conservao de raas de animais de interesse zootcnico, que inclu- em bovinos, caprinos, ovinos e tambm animais silvestres como o urso e a raposa, entre outros. Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 31 BC&D - Quais so os principais pases com os quais a Academia desenvolve acor- dos de cooperao tcnica e cientfica? Romanenko - Temos, atualmente, 120 acor- dos de cooperao tcnica com ministrios da agricultura de muitos pases, como, por exemplo, EUA e Alemanha, entre outros. A Academia mantm ainda acordos de coo- perao cientfica com a Frana, Sucia e China, alm de acordos de cooperao celebrados diretamente com universidades de diversos pases e com empresas priva- das, como a Monsanto, Pioneer, por exem- plo. BC&D - Como a relao, hoje, entre a Academia de Cincias Agrcolas da Rssia e o governo brasileiro? J existem proje- tos de cooperao tcnica sendo implementados com alguma instituio do Brasil? Romanenko - At o momento, no tnha- mos nenhum acordo de cooperao tcni- ca com o Brasil. E esse foi justamente o motivo da nossa vinda ao pas. Acabamos de assinar com o Ministrio da Agricultura e do Abastecimento brasileiro um protoco- lo de intenes do primeiro acordo de cooperao tcnica, que ser desenvolvi- do com a Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria - Embrapa, nas reas de recursos genticos de plantas e animais, horticultura (especialmente de culturas subtropicais), fruticultura, monitoramento ambiental e medicina veterinria, principal- mente na produo de vacinas. O acordo contempla ainda pesquisas de biotecnologia com plantas, animais e microrganismos. BC&D - E por falar em biotecnologia, como esto as pesquisas com plantas e animais nessa rea na Rssia? Romanenko - Na Rssia, temos um instituto de biotecnologia de plantas e dois de biotecnologia animal, alm de institutos especializados em microbiologia e virologia. Na rea vegetal, firmamos acordo de coo- perao tcnica e de transferncia de tecnologia com a Monsanto e estamos testando variedades de batatas resistentes a vrus, e de canola (colza) resistente a herbicida. Com animais, desenvolvemos um tipo de ovelha transgnica que j tem, no seu leite, um fermento especial para o fabrico de queijo. O leite e o queijo oriun- dos dessa ovelha j foram testados em laboratrio e com seres humanos para verificao de toxidez, pureza, valor nutri- tivo e protico, e, atualmente, esto sendo produzidos em pequena escala. Eu mesmo j provei esses produtos, achei-os delicio- sos e, como podem ver, estou aqui bastante saudvel! Desenvolvemos tambm, atravs de processos biotecnolgicos, um tipo de codorna que produz ovos grandes, quase do tamanho dos de galinha e muito sabo- rosos. Tambm j os provei e recomendo. BC&D - A Academia desenvolve tambm pesquisas biotecnolgicas a partir de microrganismos? Romanenko - Sim. E nesse campo, temos obtido avanos significativos em nosso pas, como o desenvolvimento de um tipo de cerveja que pode ser conservada por at 180 dias, sem o uso de conservantes, graas ao emprego de microrganismos. Essa cer- veja j exportada para os EUA, Israel e, at mesmo, para a Alemanha, a terra da cerve- ja. H tambm uma tecnologia base de microrganismos que permite a produo de cido de limo, que tem ampla aplica- o alimentcia, quer seja na produo de sucos, como no emprego industrial. A demanda por microrganismos nas pesqui- sas biotecnolgicas tem sido to grande que a Academia resolveu investir na cria- o de um banco de germoplasma microbiano. Esse banco conta com espci- es microbianas utilizadas na fermentao de iogurtes, leite e queijo e na conservao de salsichas. Mantemos conservadas nesse banco, por muitos anos, em condies adequadas de iluminao, temperatura e umidade, muitas variedades de fungos que, depois de catalogadas e caracterizadas, apresentam caractersticas e potencial de uso e emprego na agricultura, na biotecnologia, na agroindstria, tanto hoje como no futuro. BC&D - E com relao sade animal, quais os avanos que vm sendo obtidos a partir de pesquisas biotecnolgicas? Romanenko - A sade animal uma grande preocupao na Rssia, apesar de o nosso plantel ser muito resistente a doenas. Contudo, o nosso rebanho constante- mente submetido a cruzamentos com o gado europeu, e isso, potencialmente, pode causar srios problemas de suscetibilidade a doenas que no conhecemos em nosso pas. Assim, temos investido muito no con- trole preventivo e erradicao de focos dessas enfermidades, e, com isso, obtido muitos avanos na produo de medica- mentos veterinrios base de pesquisas biotecnolgicas com o emprego de micror- ganismos. A brucelose, por exemplo, desa- pareceu da Unio Sovitica, graas a esse esforo de pesquisa. Quanto febre aftosa, nunca foi um problema para ns, graas ao trabalho de preveno permanente. BC&D - Para desenvolver esse amplo trabalho de biotecnologia com plantas, animais e microrganismos, a Academia de Cincias Agrcolas da Rssia tem como preocupao a conservao de recursos genticos? Romanenko - Sim. Os cientistas russos tm tradio secular na realizao de atividades de coleta, classificao e conservao de material gentico. Um dos pioneiros desse trabalho, no mundo, foi o russo Vavilov que, hoje, empresta seu nome ao nosso Instituto Vavilov de Conservao e Uso de Recursos Genticos, que mundialmente conhecido. Esse instituto conta com uma coleo de mais de 360 mil amostras de plantas de importncia socioeconmica, como cereais, oleaginosas, algodo, borra- cha, ctricos, forrageiras, entre outras. Alm do Instituto Vavilov, existem ainda cinco estaes experimentais de conservao e uso de recursos genticos, nas quais so conservados de cinco a dez mil exemplares de sementes e plantas in vivo e in vitro. Essas estaes conservam ainda, a longo prazo, espcies de animais de interesse zootcnico e aquelas ameaadas de extino, atravs da preservao de ani- mais vivos e do congelamento de embri- es, smen e vulos. Os animais que correm risco de extino so catalogados no "livro vermelho" da nossa Academia. Existem algumas espcies animais na Unio Sovitica que no esto ameaadas de extino, mas que tm caractersticas zootcnicas, de resistncia a condies adversas e rusticidade, devido a nossa grande extenso territorial e diversidade climtica, que esto sendo estudadas pelos nossos cientistas. o caso do cavalo yakutig, que sobrevive e produz muito bem em temperaturas de 50 a 55C abaixo de zero. E tambm de um tipo de gado leiteiro que produz a temperaturas de 30C negativos. Nossos cientistas esto tentando caracteri- zar e isolar os genes desses animais que determinam essas caractersticas para, atra- vs de processos biotecnolgicos, tentar transferi-las para outros animais domsti- cos e de interesse zootcnico. BC&D - A Academia realiza, sistematica- mente, expedies de coleta de germoplasma para aumentar o acervo e a variabilidade gentica dos produtos? Romanenko - Sim. J realizamos expedi- es de coleta em toda a Unio Sovitica e 32 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento em outros pases. Apenas nos ltimos trs anos, foram coletadas mais de 36 mil novas espcies de plantas, sendo 2.500 da antiga Unio Sovitica e 34 mil de 92 pases do mundo. Alm disso, mantemos intercm- bio e troca de material gentico com vrios pases. Todo o material obtido atravs de expedies de coleta e intercmbio est sendo exaustivamente caracterizado e iden- tificado para uso da pesquisa agrcola e biotecnolgica, com aplicao imediata e no futuro. BC&D - Existem, na Rssia, restries legais ou burocrticas para a pesquisa, o desenvolvimento e a comercializao de produtos geneticamente modificados? Em linhas gerais, quais so os trmites legais para a liberao desses produtos? Romanenko - Sim. Existe uma comisso de vrios representantes de distintos rgos do governo, composta de especialistas em agricultura, medicina veterinria, meio ambiente e ecologia, que controla e d permisso para que os produtos genetica- mente modificados sejam pesquisados, li- berados no campo e, futuramente, comercializados, segundo um protocolo especfico para anlise desses organismos geneticamente modificados. Entretanto, no existe, na Rssia, uma legislao especfica para biossegurana. Aqueles produtos que no oferecem riscos ao meio ambiente e sade humana no precisam passar pelo crivo dessa comisso. BC&D - E com relao entrada, na Rssia, de produtos transgnicos desenvolvidos em outros pases. H restries legais? Romanenko - No. A Rssia no restringe a entrada de produtos transgnicos desen- volvidos em outros pases. Contudo, eles so devidamente testados e avaliados quanto aos riscos ambientais e sade humana, alm de serem submetidos aos procedi- mentos quarentenrios de praxe, como qualquer outro produto que entra no pas. A nica restrio prevista na legislao russa quanto a produtos base de hormnios de crescimento. Esses, o gover- no russo no admite o ingresso em nosso territrio. BC&D - O Brasil aprovou, recentemente, a Lei de Propriedade Intelectual, conhe- cida tambm como Lei de Patentes, e a Lei de Proteo de Cultivares. Na Rssia exis- tem tambm leis similares? Romanenko - Sim. A Lei de Patentes j existe h muitos anos, na Rssia, e a Lei de Proteo de Cultivares foi aprovada h cerca de um ano e meio. Com a Lei de Proteo de Cultivares, a Rssia pretende entrar fortemente no comrcio exterior de produtos agrcolas e, para tanto, est fazen- do um enorme esforo nesse sentido. Es- pera, com isso, que outros pases realizem macios investimentos nas reas de pes- quisa, produo e desenvolvimento de novas cultivares, j que as regras, agora, esto claramente definidas, e elas permitem a formao de parcerias. Esses investimen- tos podero ser feitos diretamente pelas empresas interessadas ou atravs de parce- rias que podero ser firmadas com as instituies vinculadas Academia de Ci- ncias Agrcolas. Nesse sentido, estamos na expectativa de realizar acordos de coope- rao tcnica com outros pases e de realizar negcios com as empresas do exterior que tenham interesse em investir na Rssia e nos nossos produtos. Temos um grande mercado consumidor, hoje, e as previses so muito otimistas para o merca- do futuro da agricultura e da biotecnologia na Rssia. Com o emprego dos genes das defenzinas vegetais de sementes de rbano (Raphanus sativus), clonados no Instituto de Pesquisas Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 33 Cientficas de Biotecnologia Agrcola da Academia de Cincias Agrcolas da Rssia, foi obtido um sistema binrio vetorial e realizada com sucesso a transformao gentica da ma e da pra. O trabalho foi realizado em conjunto com o Instituto de Qumica Bioorgnica da Academia de Ci- ncias da Rssia. As defenzinas so as protenas do sistema de proteo das plan- tas, que as defendem das infeces por bactrias e fungos. No presente trabalho, foram utilizados os genes de defenzinas potentes de rbano para a obteno de plantas transgnicas de rvores frutferas com elevada resistncia infeco por fungos. 34 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento VACINA POLIVALENTE ANTI-HELMINTOS? Naftale Katz, pesquisador titular da Fiocruz, diretor do Centro de Pesquisas Ren Rachou - Fiocruz e perito da Organizao Mundial de Sade esquistossomose uma endemia parasitria causada por helmintos do gnero Schistosoma que aco- mete 200 milhes de pessoas em mais de 70 pases. No Brasil, 8 milhes so infectados, com dis- tribuio em vastas regies, desde Belm do Par at o norte do Paran, com dois focos isolados em Santa Catarina. As prin- cipais zonas endmicas esto situadas na Regio Nordeste e em Minas Gerais (figura 1). Apenas uma espcie responsvel por esta parasitose no Brasil - o Schistosoma mansoni. O ciclo evolutivo mantido por seu principal hospedeiro definitivo, o ho- mem (embora acometa tambm roedores silvestres, gado etc.), e por hospedeiros intermedirios, caramujos do gnero Biomphalaria. Em todos os estados brasi- leiros h pelo menos uma das trs espcies hospedeiras do S.mansoni, a saber: B.glabrata, B.straminea e B.tenagophila (fi- gura 2). Portanto, potencialmente a esquistossomose ainda poder expandir- se muito. Admite-se que a esquistossomose tenha sido introduzida no Brasil pelos escravos africanos. Embora os mesmos estivessem infectados pelo S.mansoni e pelo S.haematobium, a falta do hospedeiro intermedirio para esta segunda espcie impossibilitou que o S.haematobium se instalasse nas Amricas. atravs das fezes do homem infectado que saem os ovos do S.mansoni (cada fmea pe aproximada- mente 300 ovos por dia, podendo ser eliminados at 15.000 ovos por grama de fezes). Estes ovos em contato com gua eclodem liberando o miracdeo, embrio que nada velozmente em busca do caramujo. Aps penetr-lo, transforma-se em esporocisto primrio e, depois, secun- drio. Trinta dias aps a infeco do molusco, larvas bifurcadas chamadas cercrias saem e nadam muito ativamente. Encontrando o homem, penetram pela pele, caem na circulao sangunea e/ou linftica e aps 30 dias vo se alojar nos vasos mesentricos. No hospedeiro defini- tivo, ocorre diferenciao dos sexos, sendo que a fmea, de maior tamanho (1,2mm) e mais fina, vai se alojar no cano ginecfaro do macho para, ento, iniciar a postura nos vasos sanguneos na submucosa do intes- tino. Os ovos atravessam a parede do intestino (por via mecnica e auxilados por enzimas proteolticas) e caem na luz, onde misturados s fezes saem para o ambiente, fechando o ciclo do parasita. J na fase de penetrao das cercrias, o homem pode apresentar o quadro de dermatite cercariana, representado por co- ceiras e urticrias. Com o passar das sema- nas, aparecem febre, tosse seca e posterior- mente diarria, inapetncia e emagreci- mento. Esta forma aguda pode ser branda, moderada, ou mesmo muito severa, levan- do o paciente a perder muitos quilos e ficar adinmico. A semelhana do quadro clni- co com vrias outras doenas dificulta muito o diagnstico. Na fase crnica, a infeco acomete principalmente intesti- nos e fgado, e na forma grave, intestinos, fgado e bao (hepatoesplenomegalia). Devido fibrose, no fgado se desenvolve circulao colateral, que leva ao apareci- mento de varizes esofgenas, que no raramente rompem, levando hemorragias intensas, que podem ser fatais. Embora estas trs formas, a intestinal, hepatointestinal e hepatoesplnica, sejam as mais freqentes, ovos e/ou vermes do S.mansoni j foram encontrados em prati- camente todos os rgos e tecidos do corpo humano, como testculos, ovrios, medula espinhal, cerbro, rins, pulmes, pncreas etc. Como pode ser facilmente depreendido do ciclo evolutivo acima descrito, a esquistossomose s se instala onde as condies de saneamento bsico so pre- crias. Infelizmente, no Brasil apenas 80% dos municpios tm gua e menos de 40% tm esgotos em condies satisfatrias. A esquistossomose portanto uma doena criada por maus hbitos do homem e por condies socioeconmicas desfavorveis. O diagnstico relativamente fcil e rpido, utilizando-se o mtodo de Kato- Katz (Katz e cols., 1972) para o exame microscpico das fezes. Este mtodo, reco- mendado pela Organizao Mundial da Sade, amplamente utilizado em inme- ros pases da frica, sia e das Amricas. Entretanto, em muitos municpios das regi- es brasileiras mais carentes, a inexistncia do microscpio limita a realizao do diag- nstico parasitolgico das fezes. Para o tratamento, hoje em dia, esto disponveis duas drogas (oxamniquine e praziquantel), ambas administradas por via oral em dose nica, que so relativamente bem tolera- das, com baixa toxicidade, e que apresen- tam bom percentual de cura (em torno de 80% para adultos e de 70% para crianas abaixo de 15 anos). Dito isto, e se o diagnstico relativa- mente fcil e as drogas existentes ativas, por que a esquistossomose continua a ser problema sanitrio importante? Seria necessrio que o Sistema de Sa- de do pas reconhecesse que o controle desta endemia merece prioridade e inves- timentos de monta e de longo prazo. O controle deve ser considerado sob dois aspectos, ou seja, o da morbidade e o da transmisso. Para o controle da morbidade, que visa a diminuir o apareci- mento de casos de formas graves (hepatoesplnica), o diagnstico e o trata- mento so suficentes. J para o controle da transmisso, que o ideal a ser buscado, pois visa a interromper o ciclo evolutivo do parasita, apenas o tratamento das popula- es infectadas no suficiente. So ne- cessrias obras de engenharia sanitria, levando gua para as casas e possibilitando adequada eliminao dos dejetos, impe- dindo que os mesmos contaminem os recursos hdricos, alm de obras que mo- difiquem o meio ambiente. Outra medida importante a educao para sade, fa- zendo com que as populaes residentes em zonas endmicas no apenas tenham conscincia do problema, mas que modi- fiquem o comportamento (Katz, 1980). O argumento "economicista", para no priorizar obras do saneamento bsico, que somos um pas em desenvolvimento e sem recursos financeiros para esta emprei- tada. Esta apenas uma "meia" verdade. Embora, o investimento inicial seja real- mente de grande monta para fornecer s populaes gua e esgoto em boas condi- es, o resultado obtido a mdio e longo prazos ser muito melhor e mais barato do que o diagnstico e tratamento repetidos, pois as pessoas tratadas e curadas podem se reinfectar. Considere-se ainda que as obras de engenharia sanitria previnem no apenas a esquistossomose, mas muitas outras doenas de veiculao hdrica, como, por exemplo, hepatites, gastroenterites, salmoneloses, giardoses etc. No fim, resul- tados melhores e com menos custo. Nos ltimos anos, grandes esforos (e verbas) vm sendo despendidos pelos or- ganismos internacionais (a OMS includa) e institutos de pesquisa visando a descobrir Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 35 uma vacina que poderia, atravs da imuni- zao preventiva, impedir que as pessoas se infectassem durante o contato com guas poludas, seja para o trabalho dirio, lazer, manobras militares etc. Embora consideremos que o caminho mais adequado seja o do saneamento bsico associado ao tratamento especfico para o controle da esquistossomose, fomos (e somos) obrigados a reconhecer a dificul- dade poltica e econmica no momento do uso destas medidas nos pases subdesen- volvidos, e assim sendo, a vacina seria uma alternativa como instrumento complemen- tar de controle. Recordo-me quando h quase 20 anos, em visita ao laboratrio da dra. Mriam Tendler no Instituto Oswaldo Cruz (Fiocruz), no Rio de Janeiro, a mesma ofereceu-me um coelho que, segundo ela, estava "quen- te", isto , estava produzindo uma grande quantidade de anticorpos, pois havia sido inoculado com antgenos de vermes adul- tos de S.mansoni. Como o animal iria ser sacrificado, pois j havia sido sangrado vrias vezes para obteno de anti-soro que ela estava utlizando para conhecer os antgenos existentes nos vermes, sugeri que fosse inoculado com cercrias, a fim de verificar se estava "vacinado". Qual no foi nossa agradvel surpresa quando, 60 dias aps a infeco experimental, nenhum verme foi recuperado. Este foi o incio de uma longa jornada, de muitos trabalhos publicados, de duas teses que a dra. Tendler defendeu sob minha orientao, de cente- nas de experincias, de marchas e contra- marchas, at chegarmos ao pedido de patente feito em 1995 de um antgeno recombinante, denominado Sm 14: Sm de Schistosoma mansoni e 14 representando o peso molecular aproximado em quilodaltons. Os primeiros trabalhos (incio da dca- da de 80) foram feitos com os antgenos denominados SE que eram obtidos colo- cando os vermes adultos em uma soluo salina tamponada por dez dias. Aps centrifugao, o SE foi administrado, em trs doses, associado ao antgeno completo de Freund (ACF) e induziu uma proteo acima de 90% em coelhos e em torno de 50% em camundongos albinos suos. O fracionamento do SE em cromotografia em coluna de Sephadex G-100 permitiu o isolamento de uma frao F1, que associ- ado ao ACF tambm apresentou alto percentual de proteo em coelhos, seme- lhante ao obtido com SE. Atravs da tcnica de "western blot", soros de coelhos imuni- zados com F1 reconheceram vrias fraes antignicas de pesos moleculares entre 60 e 116kda (Tendler e cols., 1982). Alguns anos mais tarde, Mriam Tendler vai aos Estados Unidos da Amrica fazer um curso de imunologia, organizado pelo dr. Alan Sher, importante pesquisador no campo da esquistossomose, que tambm descreveu um antgeno protetor, a paramiosina (Sm 97). Neste curso, havia como exerccio em uma das aulas prticas fazer clonagem de antgenos. Junto com a dra. Mo Klinkert, Mriam fez vrias clonagens, sendo que uma foi posteriormente seqenciada e des- crita como Sm 14 (Moser et al., 1991). Trata- se de uma protena da famlia FABP ("fatty acid-binding protein") que parece ser co- mum em invertebrados. Com a chegada do dr. Andrew Simpson, vindo da Inglaterra para trabalhar no Cen- tro de Pesquisas Ren Rachou - Fiocruz, tornou-se possvel a expresso do Sm 14. As muitas experincias feitas com dife- rentes linhagens de camundongos mostra- ram que a rSM 14 (Sm 14 recombinante) apresentava taxa de proteo infeco desafiante em torno de 50-60% (figura 3). Em 1992, Hillyer e colaboradores, pes- quisadores radicados em Porto Rico, demostraram que uma frao antignica de baixo peso molecular (Fh 15) isolada da Fasciola hepatica apresentava proteo contra as infeces por S.mansoni ou F.hepatica (Rodrigues e cols., 1992) A fasciolose uma das mais importan- tes doenas parasitrias de ruminantes domsticos, causando perdas econmicas severas em dezenas de pases em todo o mundo, devido mortalidade e reduo na produo de carne e de leite. O homem apenas ocasionalmente infectado. Dado o grau de homologia entre a Sm 14 e a Fh 15 ( 44%), a sugesto lgica foi ensaiar a imunizao com o rSm 14 na infeco experimental de F.hepatica em camundongos. Os resultados repetidamen- te mostraram proteo total. De fato, em nenhum dos camundongos imunizados com rSm 14 as metacercrias de F.hepatica desenvolveram-se at vermes adultos, e no houve alterao no fgado dos animais vacinados, ao contrrio do encontrado no grupo de camundongos-controle (no-imu- nizados), cuja infeco produziu intenso desarranjo na estrutura heptica. Em 1994, foram iniciados processos visando a patentear este antgeno promis- sor. Com o apoio do dr. Carlos Morel, ento presidente da Fiocruz, e sob a coordena- o tcnica de Maria Celeste Emerick, da Gesto Tecnolgica da Fiocruz, foram en- caminhados ao INPI no Brasil e a mais dez pases os pedidos de patente. As patentes j foram concedidas na Nova Zelndia, Espanha e Itlia. Como "efeito colateral", e aps mais de dez anos de discusso, conseguimos tambm um Ato da Presidn- cia da Fiocruz que prev para os inventores de produtos patenteados participao nos lucros auferidos pela instituio. Este deve- r ser um grande incentivo para que os pesquisadores despertem para a importn- cia de terem patenteadas suas descobertas. Mais recentemente, um grupo de pes- quisadores de Montevidu, liderado pelo dr. Alberto Nieto, descreveu outro antgeno de peso molecular semelhante, com homologia ao Sm 14, no helminto Echinococus granulosus, importante cau- sador da hidatidose, doena que acomete ovinos, bovinos, porcinos e tambm o homem. Ensaios sero realizados na Austrlia em ovinos e em gado infectados experi- mentalmente com F.hepatica. Caso os re- sultados sejam semelhantes queles obti- dos em camundongos, ser confirmada a disponibilidade de uma vacina de grande importncia sanitria e econmica. Como prosseguimento, estudos deve- ro ser realizados em voluntrios humanos e posteriormente em zonas endmicas de esquistossomose. Os ensaios experimentais at agora re- alizados evidenciam que o Sm 14 imunognico e capaz de estimular a imuni- dade protetora contra a infeco pelo S.mansoni e F.hepatica. Seria interessante determinar se o Sm 14 tambm protegeria contra outras espcies de Schistosoma (japonicum, haematobium, bovis). De fato, a possibilidade de uma vacina que tenha mltipla atividade contra helmintos, e que possa ser utilizada na veterinria e no homem, apresenta-se como importante progresso na imunoprofilaxia. 36 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento upe-se que h bilhes de anos sur- giu a Terra. Milhes se passaram at que surgiu a vida no planeta. Outros milhares de anos foram necessrios para que a nossa espcie tivesse incio. Menores perodos foram exigidos para que a espcie humana evolusse e chegas- se ao momento atual. Percebe-se, facilmente, duas situa- es: 1 . Que a evoluo ocorre indepen- dentemente da nossa vontade. natural, obra do Criador; e 2 . Que a cada passo que se d, mais rpido ocorrem os dois prximos e, assim, conseqentemente. Evolumos, na primeira metade deste sculo, mais do que em toda a histria conhecida do homem, e, em termos rela- tivos, nos ltimos trinta anos, adquirimos um estoque de conhecimentos sequer imaginvel nos anos 50. Isso nos obriga a acreditar que a cada mudana novas adaptaes so necess- rias. Quanto mais rpido elas vierem, mais rpido necessitamos nos adequar a elas. O Brasil, at to pouco tempo esqueci- do pelo resto do mundo, desperta hoje para uma nova realidade. , sem dvida, o pas mais vivel do prximo sculo, tendo em vista sua extenso territorial, clima, solo, homogeneidade da lngua, carter pacifista do povo e sobretudo sua biodiversidade. No entanto, at ento, nos vimos con- finados ao nosso continente acompanhan- do, apenas de muito longe, os avanos tecnolgicos que ocorriam no restante do mundo. Agora, acordados, percebemos que muito foi feito e que, inevitavelmente, teremos de acelerar nosso desenvolvi- mento, se quisermos fazer parte deste novo momento. No que diz respeito a desenvolvimento tecnolgico, diga-se que o atual governo muito tem procurado fazer no sentido de colocar o Brasil no conceito de nao desenvolvida. A Lei de Biossegurana (1995), Lei de Patentes (1996) e a Lei de Proteo de Cultivares (1997) bem retratam todo esse esforo. Aliado a esses aspectos legislativos, o plano plurianual 1996/1999 fixa a meta de elevar os atuais 0,7% do PIB para 1,5% os investimentos nacionais em cincia e tecnologia. nessa hora que toda a sociedade, independente de filiao poltico-partid- ria, precisa compreender que o desenvol- vimento de um povo no mais ocorre isoladamente. Ele deve estar, necessaria- mente, inserido no contexto mundial. Muita controvrsia tem havido com relao LPC, muitas delas, com certeza, por pura falta de conhecimento da popu- lao brasileira. Vejamos: Em primeiro lugar, um pas, no mo- mento atual, precisa ter uma lei de patentes que proteja a capacidade inventiva dos cidados. Felizmente, demos um grande passo promulgando a referida lei. Esta lei permite o patenteamento de microrganismos, quando geradores de um produto especfico, o que equivale a dizer obter variedades transgnicas. Nesse caso, como proteger o esforo que nossos pes- quisadores vm desenvolvendo ao longo de dezenas de anos na obteno de novas variedades? Com a LPC, porm, quando forem utilizados os materiais clssicos j obtidos pelas instituies de pesquisas, estes esta- ro perfeitamente resguardados. Em segundo lugar, at os dias atuais, temos visto uma completa descontinuidade em nossos programas de pesquisas que visam ao melhoramento de plantas, prin- cipalmente de autgamas. Isto porque a pesquisa, notadamente nessa rea, na sua quase totalidade realizada por institui- es pblicas. Assim, tais programas tm sido conduzidos ao sabor do maior ou menor interesse dos nossos governos, notadamente os estaduais. No s os baixssimos salrios de nossos pesquisa- dores, como a absoluta falta de incentivos tm provocado, ao longo de muitos anos, um verdadeiro xodo da equipe cientfica das nossas instituies para outras inicia- tivas, at mesmo para aquelas no-perti- nentes prpria formao acadmica. Estando as obtenes vegetais protegi- das, seus usurios devero retornar parte dos lucros auferidos com sua utilizao queles que as obtiveram. Com absoluta certeza, desta forma as instituies de pesquisa no s tero condies de plane- jar suas atividades, como tambm recom- pensar seus cientistas, incentivando-os em suas descobertas. A iniciativa privada que j trabalha no melhoramento de hbridos, naturalmente protegidos, poder tambm desenvolver trabalhos na rea das plantas autgamas. Sem dvida, a exemplo do milho, varieda- des de soja, feijo, arroz, batata etc. deve- ro surgir com espetaculares produes por rea cultivada. Durante muitos anos, uma equipe de notveis cientistas trabalhou na confeco desta lei. O resultado foi um trabalho ao nvel dos melhores existentes no mundo, onde podem ser destacados dois impor- tantes pontos: * 1 As instituies nacionais, quer da rea pblica ou privada, foram correta- mente preservadas, resguardando seus direitos, mesmo sobre os cultivares j criados. Isto significa dizer que se uma determinada empresa, digamos uma multinacional, desejar introduzir uma ca- racterstica transgnica em um cultivar j em comercializao h at dez anos no Brasil, esta necessitar ter a devida licena de seu obtentor. * 2 - Qualquer produtor poder utilizar sementes de um novo cultivar protegido, sem pagamento de qualquer espcie de taxa ou royalty, para sua prpria produo de alimentos ou matria- prima industrial. No lhe permitido, apenas, a produo comercial de sementes. Alm disso, todos os cultivares conhe- cidos e j comercializados no Brasil, antes de julho de 1996, so de domnio pblico, podendo ser utilizados por qualquer agri- cultor, at mesmo para a produo de sementes. Finalmente, uma nova questo poderia ser levantada a respeito do preo das novas sementes. Ora, estamos numa po- ca de economia de livre mercado, muito competitiva. Todos os produtos, quer se- jam de origem animal, vegetal ou industri- al, tm seus preos regulados pelo meca- nismo fundamental da oferta e procura. Especuladores no tm mais espao. Ade- mais, nenhum agricultor adquire seus insumos sem conhecer as suas relaes de custo/benefcio. Portanto, no existe pre- o caro ou barato. Tudo depende dos benefcios que aquele insumo vai lhe trazer. A base cientfica e tecnolgica de uma nao que determina o seu desenvolvi- mento. Para que seja sustentado, mister se faz que esta base seja suficientemente forte e com expressiva capacidade de expanso. O Brasil preocupa-se agora, como nun- ca, com o estabelecimento concreto des- tas bases. preciso, portanto, que se acredite e que se tenha mais viso de futuro. O grande beneficirio de todo avano tecnolgico ser sempre a sociedade. Lei de Proteo de Cultivares Foto: Eugnio Pacelli Cludio Manuel da Silva, diretor da Associao Brasileira de Sementes - Abrasem Reflexos na Pesquisa - Economia - Sociedade s Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 37 38 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento PEIXE-DO-PARASO Macropodus opercularis O controle biolgico de larvas e pupas de mosquitos em bacias hidrogrficas artificiais poludas Marcia Jones da Costa, mdica veterinria sanitarista, mestre em parasitologia e assistente tcnico da diretoria do Departamento de Controle da Qualidade Ambiental - Decont, da Secretaria Municipal do Verde e do Meio Ambiente da Prefeitura do Municpio de So Paulo. controle biolgico um instru- mento presente na natureza, porm nem sempre conhecido ou disponvel em determina- dos momentos. As formas de vida envolvidas nessa ao so as mais variveis possveis, constituindo-se des- de microrganismos at formas conside- radas altamente evoludas nos reinos vegetal e animal. Pode-se dizer o mes- mo das formas controladas. Como conseqncia do crescimen- to descontrolado dos grandes centros urbanos, da necessidade de expanso da populao e da explorao econ- mica das regies silvestres, a fauna de insetos que adapta-se s condies de urbanizao torna-se cada vez mais diversificada, ao mesmo tempo que os animais j adaptados sofrem presses mais intensas de seleo, apresentan- do caractersticas mais resistentes com relao aos mtodos de controle qu- mico, largamente utilizados nas lti- mas cinco dcadas. Os mosquitos, dpteros tambm conhecidos regionalmente pelas de- nominaes de muriocas, pernilongos e outros, vm apresentando este com- portamento adaptativo de forma cada vez mais intensa e presente, causando grande preocupao nas questes de sade pblica, seja pelo seu papel como vetor biolgico de inmeras do- enas, ou ainda como potenciais agen- tes de incmodo, proporcionando qua- dros alrgicos, noites de insnia ou acidentes de trabalho. As f ormas de cont rol e mai s comumente empregadas, ou seja, o controle qumico dirigido s formas larvrias ou ala- das, no tm apresentado a eficcia deseja- da, apesar do de s e nv ol v i - m e n t o t e c nol g i c o aplicado neste setor, em es- pecial o con- trole dirigido aos culicdeos. Alm da sele- o de mosqui- tos resistentes aos larvicidas e insetici- das, ainda h obstculos tais como a presena de vegetao aqutica flutu- ante, a qual atua como barreira fsica quando da pulverizao ou aplicao de larvicidas, ou ainda a condio de altos teores de matria orgnica em decomposio, o que inibe ou acelera a degradao do agente de controle utilizado. Estas condies esto pre- sentes principalmente nas bacias hidrogrficas artificiais, como reserva- trios, represas, audes, lagos, e cole- es hdricas que recebem descargas orgnicas animais ou vegetais. Nas condies citadas, h intensa proliferao de culicdeos, diminuio dos teores de oxignio dissolvido, va- riaes abruptas de temperatura, pH e demais parmetros da gua. Ao mesmo tempo, a fauna aqutica tambm apre- senta-se reduzida, bem como a possi- bilidade de controle das larvas e pupas por organismos onvoros ou carnvo- ros, que no encontram condies fa- vorveis sua adaptao e sobrevi- vncia, principalmente com relao aos peixes. Em 1983, com vistas a este pano- rama na cidade de So Paulo, foi inici- ada uma pesquisa de espcies de pei- xes larvfagos, que apresentassem re- sistncia s guas poludas. Assim, o Macropodus opercularis, peixe-do-pa- raso, de origem asitica, comeou a ser estudado. Conhecido desde o scu- lo XVI na Europa, tido como exem- plar ornamental no muito popular, uma vez que suas caractersticas, como colorido e comportamento, alteram-se em ambientes extremamente confina- dos com gua limpa. Este peixe de pequeno porte - o macho adulto pode chegar a at 10cm de comprimento - dot ado, como out ros da f am l i a Bel ont i dae, de um acessr i o intracraniano denominado de labirinto. Este rgo permite o armazenamento de oxignio retirado da superfcie pela boca, distribuindo-o lentamente pela corrente sangnea, quando no for possvel a respirao pelas guelras O Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 39 devido aos baixos ndices de oxignio dissolvido na gua (ilustrao c). Durante onze anos, o peixe-do- paraso foi submetido a inmeros estu- dos de observao, sobrevivncia, adap- tao e reproduo em guas altamen- te poludas e eutrofizadas, com inten- sas e sbitas variaes de pH, oxignio di ssol vi do e t emper at ur a, como parmetros principais (vide tabela). Estes estudos foram realizados em rea-teste adjacente ao reservatrio Billings (ilustrao a), Usina Elevatria de Pedreira, So Paulo, em caixas teladas den- tro do prprio reserva- trio (fotos 1 e 2) e em laboratrio (ilustrao b). Tendo-se obtido resultados favorveis, foi realizado um estudo comportamental com algumas outras espci- es encontradas no lo- cal, para avaliao pre- liminar do risco de predao de ovos e alevinos das espcies envolvidas, du- rante treze meses (foto 3 e quadro). De posse dos resultados altamen- te favorveis, a espcie foi submetida avaliao proposta pela Organizao Mundial de Sade para anlise do po- tencial de peixes como agentes de controle biolgico para larvas e pupas de mosquitos. Novamente, as respos- tas mostraram-se encorajadoras, quan- to capacidade larvfaga, adaptao s condies adversas, adaptao e reproduo da referida espcie. No entanto, importante salientar que, at o momento, os estudos reali- zados possibilitam a indicao do Macropodus opercularis como agente de controle de larvas e pupas de culicdeos em bacias hdricas artificiais poludas. Torna-se de fundamental impor- t nci a a r eal i zao de est udos comportamentais de maior abrangncia, a fim de avaliar a capacidade de predao pelo peixe de outros orga- nismos presentes em colees natu- rais, e o grau de desequilbrio repre- sentado, evitando-se assim a repetio de captulos de desastres ecolgicos ocasionados em ambientes terrestres e aquticos, devido introduo de es- pcies insuficientemente estudadas. 40 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento VACINAS NO LIMIAR DO SCULO Hermann G.Schatzmayr, Ph.D. em virologia - UFRJ, presidente da Fundao Oswaldo Cruz - Fiocruz (1990/92) INTRODUO A observao de que os sobreviven- tes de uma doena raramente sofriam um segundo ataque da mesma infeco contitua a base de metodologias usadas desde a antigidade para prevenir doen- as, como, por exemplo, a varola. De fato, antigos documentos descrevem a prtica de inocular deliberadamente em adultos e crianas material obtido das leses de pele em casos de varola de menor gravidade. Esta prtica obvia- mente era perigosa e uma parte dos inoculados vinha a falecer pela doena, em cifras, no entanto, bem menores que os 20 a 30% observados na infeco natural. Benjamin Franklin, o grande inventor americano, descreveu em sua autobiografia a perda de um de seus filhos pela varola, lamentando no ter utilizado a prtica da inoculao propo- sital, chamada de variolizao, ento bastante comum. J na segunda metade do sculo 18, era reconhecido em vrios pases da Europa que ordenhadores de gado rara- mente apresentavam leses de varola, ento uma das mais importantes doen- as do mundo, e se acreditava que eles se protegiam por adquirirem uma doen- a que causava leses semelhantes s da varola, na pele dos animais com que trabalhavam. Coube a Jenner, mdico ingls com uma slida reputao de investigador, alcanada com suas publicaes sobre pssaros, demonstrar em 1796 que pes- soas inoculadas (hoje diramos vacina- das) com o material destes animais resis- tiam at mesmo a inoculao posterior de material coletado de casos graves de varola. Em pouco tempo, a nova metodologia se disseminou, e a vacina- o contra varola foi tornada at obriga- tria em 1807, na Bavria. Em torno de 1840, o baro de Barbacena trouxe para o Brasil amostras vacinais e introduziu o mtodo de imunizao, em especial nas Brasil: Auto-suficincia ou dependncia? famlias nobres da poca. A palavra vacina origina-se exatamente de vaca, animal doador do vrus chamado vaccinia e que, por estar muito relacionado com o agente da varola, induz imunidade contra este vrus. Em 1958, a Assemblia da Organiza- o Mundial da Sade aprovou uma proposta da ento Unio Sovitica, no sentido de se erradicar a varola do mundo, o que foi alcanado ao final da dcada de 70, aps esforos de muitos pases, dentre eles o Brasil, e de muitas pessoas, inclusive brasileiros que parti- ciparam das campanhas nacionais e in- ternacionais de vacinao. Em 8 de maio de 1980, a varola foi declarada extinta no mundo, sendo at o momento a nica doena eliminada pela ao do homem, principalmente pela vacinao univer- sal. O Brasil contribuiu ainda na fabrica- o de toda a vacina antivarilica utiliza- da no pas e ainda forneceu o produto para vrios outros pases das Amricas, frica e sia. Na segunda metade do sculo passa- do, coube a Louis Pasteur lanar as bases metodolgicas do preparo de va- cinas. Sucessivamente, vrios novos pro- dutos foram sendo descritos, como as vacinas contra a clera aviria, o carbnculo e a raiva, pelo prprio Pasteur, e a vacina contra a difteria, por Roux e Yersin, esta ltima utilizando no a bactria total, mas sim a toxina por ela produzida, e que em laboratrio era tornada no-patognica por ao de agentes qumicos como o formol. Reco- nheceu-se a existncia e o papel dos anticorpos, produzidos como uma res- posta vacina, e se introduziu o uso de anticorpos (soros imunes) preparados em animais como um mtodo de cura de infeces, quando aplicados no incio da doena. No final do sculo dezenove, foram obtidas ainda as vacinas contra a febre tifide, peste e clera, assinalan- do-se que at ento todas as vacinas usadas eram inativadas, ou seja, conti- nham microrganismos mortos ou seus produtos modificados pela ao de agen- tes qumicos ou fsicos. A resposta do organismo s vacina- es e s doenas naturais comeou a ser entendida igualmente ao final do sculo dezenove, quando se reconhe- ceu a existncia das duas faces da res- posta imune, quais sejam, a formao de anticorpos (resposta humoral) e a imuni- dade ligada a clulas (imunidade celu- lar). Finalmente, uma longa srie de des- cobertas surgidas ao longo deste sculo nos permitiu entender com bastante cla- reza os fenmenos imunolgicos envol- vidos na resposta s infeces e apli- cao de vacinas e soros imunes. Particularmente importantes foram as descries dos diversos tipos de clulas envolvidos nesta resposta e os produtos por ela secretados, bem como o papel Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 41 relativo da resposta humoral e/ou celu- lar, dependendo do agente envolvido. VACINAS DISPONVEIS E EM DESEN- VOLVIMENTO Na tabela 1, so relacionadas as vaci- nas virais para uso humano mais utiliza- das. Verifica-se que trs tipos de vacina esto representados, as inativadas que contm vrus mortos por agentes qumi- cos, as vacinas vivas contendo vrus modificados, os quais geram anticorpos e/ou resposta celular nos vacinados, mas no a doena original (exceto em rarssimas ocasies) e as vacinas que contm apenas subunidades ou fraes dos vrus para os quais se deseja obter imunidade. As vacinas vivas normal- mente induzem imunidade duradoura, enquanto as duas outras em geral neces- sitam de revacinaes peridicas. Na mesma tabela, observa-se ainda o gran- de nmero de vacinas virais hoje prepa- radas em cultura de tecidos; por esta tecnologia so mantidas em laboratrio clulas vivas obtidas de animais ou mes- mo do homem, nas quais possvel obter suspenses virais de maior pureza do que aquelas derivadas de animais ou ovos embrionados. Em realidade, esta tcnica revolucionou a virologia na se- gunda metade deste sculo, pois a gran- de maioria dos novos vrus que se con- seguiu isolar e caracterizar utilizou este substrato para sua identificao. A vaci- na contra a hepatite B o exemplo nico, at o momento, de um imunizante humano de largo uso, preparado atravs de tcnicas de biologia molecular, com a expresso em leveduras de um segmento do genoma viral, responsvel pela for- mao de anticorpos no indivduo. Com o advento deste produto, eliminou-se na maioria dos pases, inclusive no Brasil, a utilizao da vacina pioneira contra a hepatite B, preparada a partir do plasma de indivduos portadores do vrus. Sendo o v r us da hepat i t e B comprovadamente agente do cncer pri- mrio do fgado, este produto represen- ta, portanto, a primeira vacina contra uma forma de cncer humano, e sua ampla utilizao em reas de alta inci- dncia de hepatite B, como no Japo e em Taiwan, levou a uma drstica redu- o de novos casos de hepatomas nestes pases. Embora possua o Brasil reas de alta prevalncia de infeces por hepa- tite B (Amaznia ocidental, por exem- plo), infelizmente ainda no se conse- guiu implantar um continuado programa de vacinao contra esta virose, em es- pecial por falta de uma forte definio poltica, ao longo dos anos. Na tabela 2, so apresentadas as va- cinas virais em fase avanada de testes e em provvel utilizao em futuro prxi- mo. Dos produtos em teste, destacam-se as futuras vacinas de dengue e rotavrus, ambos problemas graves de sade p- blica. O dengue causado por 4 tipos sorolgicos denominados tipos 1 a 4, os quais induzem uma slida imunidade homloga, porm baixa proteo contra os outros tipos. Havendo infeces seqenciais com mais de um tipo de vrus, especialmente se ocorrer um inter- valo de alguns anos entre as infeces, h uma clara tendncia de surgirem quadros hemorrgicos mais graves e freqentemente fatais, quando da se- gunda infeco. A vacina, portanto, de- ver ser polivalente, contra todos os quatro tipos de dengue, o que tem acar- retado problemas tcnicos, em especial com o tipo 3 de dengue. Os rotavrus so agentes de diarria presentes em todo o mundo e responsveis por quadros gra- ves e fatais em crianas, e cuja vacina vem sendo tentada h vrios anos com resultados variveis de regio a regio, demonstrando que amostras locais de- vem ser includas no produto, a exemplo da vacina contra a influenza. As vacinas bacterianas mais tradicio- nalmente utilizadas so apresentadas na tabela 3. Vrias delas foram desenvolvi- das h vrias dcadas, e a tecnologia respectiva disponvel em todo o mun- do, inclusive em instituies governa- mentais de produo nos pases em desenvolvimento. A vacina contra a tuberculose (BCG ou Bacilo de Calmette-Guerin) constitui o nico exemplo de uso de bactria viva, modificada como vacina. Sua eficcia tem sido avaliada em vrios pases, com resultados contrastantes, porm a Orga- nizao Mundial da Sade recomendou que se mantivesse sua utilizao especi- almente em crianas. A aplicao de mais de uma dose desta vacina ao longo da vida tem sido recomendada, no sen- tido de se obter uma mais slida imuni- dade. Dentre as vacinas bacterianas inativadas, destaca-se por sua larga apli- cao a associao trplice contra difte- ria, ttano e coqueluche. As duas primei- r as ut i l i zam t oxi nas modi f i cadas (toxides), enquanto a vacina contra a coqueluche poder conter a bactria integral ou apenas subunidades, sendo ento denominada acelular, de melhor qualidade, porm de maior custo. Utilizam-se ainda vacinas preparadas com a cpsula bacteriana, estrutura ex- terna existente em muitas espcies patognicas, e que foi reconhecida inici- almente por Pasteur. Dentre as bactrias encapsul adas, dest acam- se os est r ept ococos, est af i l ococos, meningococos, Hemophylus influenzae e Klebsiella pneumoniae. As vacinas contra pneumococos tm-se mostrado efetivas em adultos, e devem incluir as amostras circulantes mais comuns na regio. Como os polissacardeos da cp- sula bacteriana apresentam baixa capa- cidade imunognica isoladamente, po- dem ser associados (conjugados) a pro- tenas, como os toxides antitetnico e diftrico, resultando em uma melhor res- posta no vacinado, como demonstrado com H.influenzae tipo B. Dentre as novas vacinas bacterianas em fase de desenvolvimento, destacam- se as vacinas contra lepra (Mycobacterium leprae) e a novas vacinas contra clera, febre tifide e meningites, causadas pelo sorotipo B de Neisseria meningitidis. 42 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Alm das tecnologias tradicionais, surgiu nas ltimas dcadas uma srie de novas possibilidades de se obter resposta imune. Dentre estas, destacam-se o pre- paro de peptdeos sintticos, reproduzin- do as estruturas dos antgenos contidos nos microrganismos e as tcnicas de DNA-recombinante Estas novas tcnicas surgiram em funo da necessidade de se obter vacinas contra vrios agentes, tais como o vrus do HIV, o agente da hansenase, Chlamydia e protozorios, para os quais os mtodos de preparo de vacinas at ento utilizados no produzi- ram resultados satisfatrios. No caso dos peptdeos sintticos, so selecionados os segmentos "essenciais" das protenas indutoras da resposta imu- ne no vacinado e se prepara em labora- trio estes segmentos. Os resultados ob- tidos foram bastante variveis, de acordo com o agente estudado, e uma extensa literatura acumulada ao longo dos anos demonstra os problemas surgidos e as possveis solues. Dentre as dificulda- des, podem ser destacadas a presena de estruturas espaciais nas protenas, de di- fcil reproduo ao nvel laboratorial, a presena de carboidratos como elemen- tos estruturais essenciais em muitas glicoprotenas de origem viral e a neces- sidade de incluir na possvel vacina vri- os segmentos indutores de resposta humoral e celular, o que pode tornar invivel o produto pelo alto custo. At o momento, nenhuma vacina de peptdeos sintticos est sendo usada de forma generalizada, sendo um produto propos- to como vacina contra malria aquele em que se acumulou maior nmero de infor- maes. O consenso no entanto de que este produto ainda no est em condi- es de ser utilizado. A tecnologia de DNA-recombinante, surgida no incio dos anos 70, permite a adio de fragmento de cido nuclico em um hospedeiro e a expresso poste- rior pelo hospedeiro das protenas codi- ficadas pelo fragmento introduzido. Den- tre suas mltiplas aplicaes, a produ- o de vacinas atraiu o interesse de pesquisadores, e, em relativamente pou- co tempo, obteve-se a expresso de parte do genoma do vrus da hepatite B em leveduras, o que veio a se constituir na primeira vacina de DNA-recombinante, como j assinalado. Vrios tipos de substratos celulares tm sido usados para a transfeco dos segmentos escolhidos: bactrias como E.coli, leveduras e clu- las de mamferos. Em geral, o fragmento inserido em um plasmdeo, e este repassado clula, a qual se torna ento capaz de gerar as protenas a serem usadas na imunizao. Alm de clulas, podemos usar vrus como receptores de fragmentos de cido nuclico, e dentre os vrus humanos que tm sido usados, destacam-se os da vaccinia, poliovrus, herpesvrus, varice- la, adenovrus, influenza, papiloma bo- vino, SV-40 e retrovrus. Entre os vrus animais, assinala-se o vrus do grupo pox de aves, e entre os vrus de insetos, o baculovrus tem sido utilizado em larga escala. Com isto, tornou-se possvel ob- ter uma resposta vacinal contra as prote- nas codificadas pelo fragmento de ou- tro agente, previamente inserido no v- rus. Tem sido ainda descrita a deleo (ou inativao) de segmentos genmicos como um mtodo de eliminar ou reduzir a virulncia de microrganismos, o que permitiria utiliz-los para imunizao, sem o risco de causar doena no hospe- deiro. Estas tecnologias tm sido descri- tas principalmente em bactrias do gne- ro Salmonella e com o vibrio colrico. Uma outra tecnologia merece ser men- cionada, que a inoculao, no indiv- duo a ser imunizado, do cido nuclico do microrganismo contra o qual se quer imunizar, ligado a um plasmdeo. Atra- vs mecanismos ainda no perfeitamen- te conhecidos, possvel obter uma excelente resposta humoral e celular, e, pelo menos, com o vrus da influenza, espera-se brevemente um produto para avaliao a nvel de campo. REALIDADES E PERSPECTIVAS NO BRASIL No incio do sculo, e at a dcada de 60, o Brasil foi capaz de absorver as tecnologias existentes de preparo de va- cinas e chegou a ser modelo de pas em desenvolvimento, neste setor. Os institu- tos Oswaldo Cruz, Butantan, Tecnolgico do Paran, Vital Brazil e as fundaes Ataulfo de Paiva e Ezequiel Dias foram capazes de fabricar praticamente a tota- lidade das vacinas que eram utilizadas no pas contra tuberculose (B.C.G.), va- rola, raiva, sarampo, trplice bacteriana (difteria, ttano, coqueluche) e febre amarela, esta ltima como o maior pro- dutor mundial, alm dos soros contra animais peonhentos. Uma vacina de- senvolvida no Instituto Oswaldo Cruz, contra a manqueira, doena animal e que esteve disponvel para o pblico por muitos anos, gerou recursos to impor- tantes que a proibio de sua venda, nos anos 30, contribuiu para uma crise fi- nanceira grave na instituio. O advento de novas vacinas, em especial a utiliza- o de novas tecnologias, como a cultu- ra de tecidos e as tcnicas de preparo de grandes volumes em fermentadores, le- vou a uma gradual perda de nvel tecnolgico, e passamos a importar vaci- nas em escala crescente. Conseguimos manter nossa auto-suficincia apenas em relao s vacinas contra febre ama- rela, anti-rbica e B.C.G., e mesmo a trplice bacteriana, de tecnologia perfei- tamente conhecida, vem sendo importa- da desde a dcada de 80, principalmente por problemas no componente coquelu- che, o que reduziu fortemente nossa produo. O Programa de Auto-suficincia Na- cional em Imunobiolgicos, lanado em 1982, em momento de grave crise, quan- do estavam faltando at mesmo soros antiofdicos no pas, os quais no po- dem ser importados porque so espec- ficos para nossas espcies de cobras, representou um substancial investimen- to nos produtores nacionais. Em torno de 70 milhes de dlares foram alocados em nossas instituies governamentais, para recuperar pelo menos parte da capacidade de produo perdida. O Pro- grama recuperou laboratrios e permitiu a construo de novas unidades de pro- Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 43 duo, como aquela em construo na Fi ocruz, para preparo de vaci nas bacterianas, centralizando ainda todas as fases finais de produo das demais vacinas produzidas na instituio. Con- seguiu-se implantar uma unidade para produo de vacina contra o sarampo, com tecnologia japonesa, e moderniza- ram-se, entre outras, as produes da vacina anti-rbica, no Paran, e da vaci- na B.C.G., no Rio de Janeiro. Uma unida- de de produo de vacina contra hepa- tite B com uso de engenharia gentica foi implantada em So Paulo com tecnologia obtida na Rssia, embora as quantidades previstas do produto sejam ainda inferi- ores s nossas necessidades. Por outro lado, como se pode verificar da rpida reviso apresentada, chegamos ao final do sculo com uma srie de novos produtos em desenvolvimento e uma grande mobilizao internacional para que se alcancem altos ndices de vacina- o no mundo, no prximo sculo. Como podemos avaliar hoje a situa- o de nosso parque produtor de vaci- nas de uso humano? O balano no favorvel, a veloci- dade das transformaes tecnolgicas e do surgimento de novos produtos con- trasta com a lentido do sistema pblico em decidir e em implantar suas decises, esvaziando o poder dos gerentes dos processos; os sistemas de manuteno e reposio de equipamentos so buro- cratizados, atrasando compras e paran- do setores e mquinas, e no h tradio na negociao de patentes nem na im- plantao de projetos associados a pro- dutores privados. Estas associaes, co- muns na indstria de vacinas no setor privado, tm-se mostrado de difcil im- plantao no setor pblico. A produo de vacinas no prximo sculo ser sem dvida regido pela biotecnologia, e ns no estamos prepa- rados para participar desta produo, na rea de vacinas humanas, com a mesma capacidade que tivemos por mais da metade deste sculo que se encerra. Apesar do investimento em instala- es e mquinas do Programa de Auto- suficincia, falhamos no preparo de novos recursos humanos que deveriam ter sido estimulados por programas de desenvolvimento de mdio e longo pra- zos, pela concesso de bolsas de treina- mento e programas de desenvolvimento profissional. Faltou igualmente atrair para o setor de desenvolvimento de vacinas novos pesquisadores e tecnolgos, atra- vs programas de financiamento de mais pr oj et os espec f i cos par a a r ea tecnolgica, a qual precisou disputar recursos com outras reas mais acad- micas, com evidente desvantagem. Por outro lado, o mercado brasileiro de vacinas, acrescido pelo Mercosul, amplo, e temos uma grande tradio em executar campanhas de vacinao de alta qualidade, como as aes anuais contra a poliomielite, que chegam a vacinar mais de 15 milhes de crianas, em um nico dia. Correes no setor podem ser feitas, em especial com nfa- se no preparo de recursos humanos e a disponibilidade de recursos financeiros especficos para projetos sobre novos produtos e avanos tecnolgicos nas vacinas existentes. A vacinao universal compromis- so fundamental a ser alcanado no pr- ximo sculo, existindo, portanto, amplo mercado a ser conquistado. No pode- mos aceitar o papel de importadores de vacina, aps termos sido auto-suficien- tes por dcadas e investido tantos recur- sos da sociedade em nossos produtores do setor pblico. 44 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento A riqueza brasileira Brasil possui a maior biodiversidade do planeta, o que, sem dvida, uma ddiva divina. A natureza, alm de sua beleza plstica, oferece recursos para a soluo de muitos problemas que afligem a humanidade neste final de milnio. Doenas consideradas incurveis, como o cncer e a AIDS, por exemplo, podem ser erradicadas a partir dos recursos disponveis na biodiversidade. S que esse tesouro precisa ser bem conhecido e conservado para ser utilizado. Preocupada com a proteo da biodiversidade brasileira, a senadora Marina Silva, do PT do Acre, elaborou um projeto de lei para regulamentar o uso e o acesso aos recursos biolgicos. O embrio desse projeto foi apresentado em 1995 e, hoje, j recebeu vrias emendas no Senado Federal, depois de passar por audincias pblicas e discusses com segmentos representativos da sociedade brasileira, incluindo cientistas, polticos, professores, sindicalistas, lideranas indgenas, povos da floresta etc. A senadora Marina Silva nasceu no Estado do Acre e conhece bem de perto a explorao ilegal da biodiversidade e dos povos da floresta. E, por isso, a luta em defesa da biodiversidade e das comunidades da Amaznia sempre fez parte de sua vida, desde o incio de sua carreira como professora, vereadora, deputada esta- dual e, hoje, como senadora da Repblica. Para falar sobre o projeto de lei e outros assuntos, a senadora Marina Silva concedeu esta entrevista exclusiva revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento, na qual ressaltou, entre outros aspectos, que o conhecimento dos povos da floresta e das comunidades indgenas de fundamental importncia para a conservao e o uso sustentado dos recursos biolgicos do nosso pas. BC&D - A senhora autora do projeto de lei do Senado n 306, de 1995, que est tramitando no Congresso Nacional, o qual visa a estabelecer normas e demais instrumentos legais de controle e acesso aos recursos da biodiversidade brasilei- ra. O que a motivou a apresentar este projeto de lei? Marina Silva - As motivaes so de ordem interna e tm razes histricas. Eu nasci e me criei ouvindo histrias de coisas que eram retiradas dos seringais da floresta. No incio, eu no entendia o porqu das pessoas levarem pedaos de pau, lama e outros materiais, e achava que essas pesso- as eram malucas. Com o passar do tempo, quando passei a ter acesso a informaes, eu percebi que elas eram malucas por dinheiro. Alm disso, fui motivada tambm pelo meu compromisso com a luta social e ambiental e com os interesses das popula- es tradicionais de seringueiros e ndios. Passei a perceber que as informaes e as coisas que a gente utilizava no cotidiano, digamos, em nossa medicina tradicional, eram repassadas e patenteadas sob a forma de remdios e outros produtos. Essa preo- cupao marcou a minha vida, desde que eu comecei como professora e vereadora. Quando eu cheguei aqui no Senado, me vi diante da possibilidade de solucionar essas questes. Uma das primeiras iniciativas foi pegar a Conveno da Biodiversidade, as- sinada durante a Rio-92, da qual o Brasil signatrio junto com outros 143 pases, e, a partir da, fazer uma referncia para apre- sentar o projeto de lei que desse uma resposta ao problema secular do Brasil da explorao indevida dos nossos recursos naturais. O projeto foi concebido com a participao de representantes da comuni- dade cientfica, de organizaes no-go- vernamentais - ONGs, de consultores do Senado e de populaes tradicionais da floresta. BC&D - A Conveno da Diversidade Biolgica estabelece que a diversidade biolgica deve trazer benefcios para a humanidade, reconhecendo ainda a so- berania dos Estados sobre o uso e a dis- ponibilidade dos recursos biolgicos en- contrados em seus territrios. Como conciliar os interesses do Brasil com os dos outros pases, no tocante ao uso e a disponibilidade da biodiversidade? Marina Silva - No processo de discus- so da lei, foi levantado o interesse da humanidade. Se ns tivermos, por exem- plo, o remdio que vai curar a AIDS, no temos por que evitar esse benefcio. O conheci ment o ci ent fi co deve ser disponibilizado sob a forma de capital. Por outro lado, ns no podemos fazer isso de uma forma despreocupada. Historicamen- te, o Brasil sempre assumiu uma posio de Maria Fernanda Diniz Avidos e Lucas Tadeu Ferreira Recursos Biolgicos Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 45 pas colonizado, onde seus recursos natu- rais so retirados de forma indiscriminada. Com relao aos recursos da biodiversidade, muito importante que sejam utilizados para promover o desenvolvimento econ- mico e social do pas. Outra preocupao que a lei no seja marcada por um nacionalismo primitivo, j que temos cons- cincia de que o mundo vive, hoje, em uma economia globalizada, na qual o relaciona- mento do Brasil com outros pases funda- mental. Para elaborar o projeto de lei, foram considerados acordos de comercializao internacional, como o GATT, por exemplo. Ns levamos em conta ainda que o Brasil dependente de outros pases em termos de recursos genticos. Cerca de 70% dos produtos utilizados em nossa alimentao so oriundos de outros pases. Por isso, no poderamos ter uma lei que fosse excessivamente restritiva, j que dificultaria o intercmbio de material gen- tico, que somos obrigados a fazer com outros pases. BC&D - A Constituio Brasileira in- cumbe o Estado de preservar a diversida- de e a integridade do patrimnio genti- co e de fiscalizar as entidades dedicadas pesquisa e manipulao gentica. Como preservar a integridade dos recur- sos biolgicos, em um pas de dimenses continentais, onde a Amaznia ocupa quase a metade do territrio nacional e onde a "biopirataria" um fato? Marina Silva - J discutimos essa ques- to com pesquisadores do Peru e da Bol- via, e o objetivo chegar a um acordo de regulamentao de acesso aos recursos biolgicos da Amaznia, que estabelea pontos comuns de interesse entre os pases do Pacto Amaznico. Para que esse acordo tenha efetividade, todos os pases tm que participar levando em conta os seus res- pectivos domnios fronteirios e o interesse de conservao e uso dos recursos biol- gicos da Amaznia como um todo. BC&D - No seu projeto de lei de acesso aos recursos biolgicos proposto ao Congresso Nacional, a senhora quer ga- rantir a participao das comunidades locais e dos povos indgenas nas deci- ses que tenham por objetivo o acesso aos recursos genticos nas reas que ocupam. A senhora poderia explicitar de que forma se dar essa participao e se essas comunidades tero algum ganho econmico? Marina Silva - Pelo o que diz a Conven- o da Biodiversidade, as populaes tra- dicionais tm direito remunerao, quan- do seus recursos biolgicos e conhecimen- tos forem utilizados. O pagamento pode ser feito atravs de royalties, pelo direito inte- lectual coletivo. A questo de patentes no se aplica s comunidades tradicionais, por ser uma forma sui generis de conhecimen- to valioso. Sabe-se, hoje, que, de cada mil indicaes de uso feitas pelas populaes tradicionais, h retorno econmico de pelo menos uma. Se no tivessem essas indica- es, os pesquisadores teriam que investi- gar um universo muito maior de amostras para chegarem a resultados promissores. Durante muitos anos, o conhecimento emprico e o senso comum foram tratados de forma preconceituosa pela cincia, e, na verdade, deve ser altamente valorizado e remunerado atravs de um fundo de apoio a todas as populaes tradicionais. A idia que este fundo seja gerido pelo Estado e pelos representantes dessas populaes. BC&D - O seu projeto de lei prev que dever ser dada prioridade, no acesso aos recursos genticos, para os empre- endimentos que se realizem no territ- rio nacional. Quais os limites que a lei pretende estabelecer para as expedies de estrangeiros realizadas na Amaznia brasileira? Marina Silva - A lei prev que a auto- ridade competente conceder uma espcie de licena para a realizao de expedies estrangeiras, mediante o cumprimento de alguns requisitos. Na medida do possvel, os investimentos e a fixao de tecnologias oriundas dos recursos biolgicos e dos conhecimentos tm que ser realizados no Brasil. Alm disso, todas as expedies estrangeiras devem ser acompanhadas de cientistas brasileiros vinculados a institui- es de ensino e de pesquisa nacionais, para que o Brasil possa incorporar o mate- rial biolgico e o conhecimento obtidos. Para tanto, ser criada uma comisso naci- onal para assegurar o cumprimento da lei e gerir o processo como um todo. BC&D - O Brasil, at hoje, no conhe- ce, adequadamente, os recursos florsticos de seus parques florestais. No seu projeto, a senhora prev algu- ma ao mais contundente, por parte do Estado, no conhecimento da fauna, da flora e dos microrganismos brasileiros? Marina Silva - A lei prev que parte dos recursos oriundos da aplicao de multas e de penalidades, bem como o pagamento de royalties, seja destinada a promover o desenvolvimento cientfico de conhecimen- to da biodiversidade. BC&D - Algumas correntes de econo- mistas tm defendido que os recursos biolgicos devem fazer parte do clculo da riqueza dos pases, ou seja, do Produto Interno Bruto - PIB; o chamado "biocapital". Sendo o Brasil um pas rico em biodiversidade e pobre em riqueza econmica, o seu projeto de lei pretende considerar, no clculo do PIB, as rique- zas biolgicas? Marina Silva - A biodiversidade do nosso pas vem sendo devastada, ao longo do tempo, com a viso de que as reas de florestas que no sofrem ao antrpica so consideradas improdutivas. Para valo- rizar suas propriedades, as pessoas derru- bavam as florestas e faziam queimadas e "benfeitorias". No entanto, a biodiversidade tem seu valor, e temos que ser capazes de mensur-lo. Hoje, sabemos que cada ele- mento da diversidade biolgica representa uma riqueza e deve ser computado como patrimnio. A purificao do ar pela flores- ta Amaznica, por exemplo, tem um valor imensurvel para a humanidade. Alis, o Brasil quando aparece como pas emer- gente no mundo, no pela nossa capaci- dade de disputar tecnologias de ponta, como a indstria automobilstica, a informtica etc. Se temos alguma voz porque somos detentores de megadiversidade e, por isso, devemos usar essa riqueza para participar de negocia- es internacionais. BC&D - O Estado do Acre, com base no seu projeto de lei, j aprovou uma lei de acesso aos recursos biolgicos locais. A senhora acha que essa medida deve ser estimulada e encampada pelos demais estados da Federao? Marina Silva - Eu acho positivo que os estados procurem regulamentar a Conven- o da Biodiversidade, em nvel local, na competncia do estado, mas tendo como referncia a lei que ser aprovada no Congresso Nacional. Representantes dos estados tm solicitado informaes nesse sentido e ns sempre fornecemos, mas com a observao de que qualquer medida s pode ser tomada depois da aprovao da lei federal. BC&D - comum ouvirmos que exis- tem dois tipos de lei no Brasil: "as que pegam" e "as que no pegam". Para que a Lei de Acesso aos Recursos Biolgicos no se enquadre no segundo grupo, que medidas de conscientizao que o seu projeto prev para serem desenvolvidas com os diferentes segmentos represen- tativos da sociedade brasileira? Marina Silva - Um dos pontos funda- mentais para que a lei seja aceita e incorpo- rada pela populao a informao para pblicos em nveis diferenciados, segundo as peculiaridades de cada segmento da sociedade. Eu acho que essa uma lei de importncia estratgica para o Brasil, por ser detentor de megadiversidade. Estamos pensando em desenvolver vrias estratgi- as de divulgao, entre as quais uma cartilha, com linguagem bem acessvel, para popu- larizar a lei, a partir da sua aprovao. Essa cartilha vai ser distribuda, principalmente, para populaes tradicionais. A lei tem tambm carter educativo. 46 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Prezados leitores (as), Queremos agradecer as milhares de mensagens de felicitaes enviadas atravs de cartas, e-mails e telefonemas para nossa Redao. Por absoluta falta de espao, estamos publicando somente algumas poucas. Os leitores que desejarem entrar em contato com BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento podero enviar sua correspondncia via Internet, fax ou carta para esta seo. Nossos endereos so: Redao de BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento SRTV/Sul - Quadra 701 - Ed. Palcio do Rdio II, sala 215 - Cep 70340-902 - Braslia - DF - Tel.: (061) 225- 1512 (061) 225-0976 Fax (061) 224-2830 Home-page: http://www.biotecnologia.com.br E-mail: biotecnologia@biotecnologia.com.br A Cartilha, em anexo, faz parte de um projeto intitulado "As plantas medicinais como instrumento de educao ambiental" que estamos iniciando. (...) As escolas e organizaes interessadas recebero um certo nmero de Cartilhas gratuitamente. (...) Caso seja possvel, solicito que seja divulgado este nosso trabalho na Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento. Profa. Maria das Graas Lins Brando Faculdade de Farmcia da UFMG Belo Horizonte - MG branlins@oraculo.lcc.ufmg.br Agradeo o recebimento deste maravilho- so suporte cientfico/Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento. (...) Acredito que muito contribuir pelo desenvolvimento cientfico e tecnolgico de nosso Pas. Prof. Dr. Silvio Silvrio da Silva Dep. de Biotecnologia/FAENQUIL Lorena - SP silvioss@fastnet.com.br Sou estudante de Agronomia na Universi- dade de Braslia e fao estgio no CENARGEN/EMBRAPA, tambm em Braslia. (...) Gostaria de saber como adqui- rir um exemplar da revista. Agradeo a ateno e parabenizo pela qualidade da revista. Juliano S. Malty. Braslia - DF figueira@brnet.com.br Agradeo pelo envio do 1 exemplar, para- benizo pela brilhante idia de publicao deste peridico. Acredito que esta ser uma fonte slida de informaes (...). Gostaria de receber informaes quanto assinatu- ra e a forma de contribuir com artigos. Profa. Dra. Maria das Graas A. Felipe Dep. de Biotecnologia - FAENQUIL Lorena - SP feqlps@eu.ansp.br Foi com grande satisfao que li o nmero 1 da Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento. (...) Como eu fui um dos introdutores no Brasil, em 1971, das tcnicas de cultivo e multiplicao in vitro de plantas, sinto-me completamente reali- zado ao abrir a Revista e tomar conheci- mento do seu contedo/divulgao cient- fica em alto nvel e de elevada qualidade. Prof. Dr. Otto J. Crocomo - Coord. Cientfico CEBTEC-FEALQ/ESALQ-USP Piracicaba - SP ojcrocom@carpa.ciagri.usp.br Congratulo (...) pelo lanamento da Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento, tanto pela bela apresentao como pelo excelente nvel tcnico. (...) Parabns. Nilce O. Costa uai@cenpes.petrobras.com.br Estou-lhes escrevendo em nome do grupo de professores de Gentica do Dep. de Biologia Celular, Embriologia e Gentica da UFSC. Os artigos nos so muito teis no ensino de gentica. Nadir Ferrari Dep. de Biologia Celular, Embriologia e Gentica, BEG - CCB - UFSC. Florianpolis - SC ccb1naf@ccb.ufsc.br Recebi hoje o primeiro nmero da Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento. Aproveito a oportunidade para parabeniz-los pela iniciativa de lanar uma revista. Tem tudo para ser um marco na biotecnologia brasileira. Eng. Agr. MSc Marcelo Henrique vila Braslia - DF mhavila@mre.gov.br Recebemos a Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento. (...) Ser de grande importncia para os leitores desta biblioteca. Agradeceramos se pudssemos continuar recebendo os prximos nme- ros. Miramar R. O. Bistene UFMG - Biblioteca Central - Servio de Peridicos e Comutao Bibliogrfica miramar@bu.ufmg.br mirobis@dedalus.lcc.ufmg.br Prezados responsveis pela composio e editorao da Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento, desejamos parabenizar a iniciativa de disponibilizar mais este veiculo de divulgao para a comunidade cientfica e empresariado. tima apresentao, excelente contedo (...) Parabns. Esperamos poder continuar recebendo este veculo to importante. Deise M.F. Capalbo Pesquisadora Embrapa/ CNPMA deise@cnpma.embrapa.br Temos interesse em adquirir a Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvi- mento. (...), para enriquecimento do acer- vo da Biblioteca do CNPA-EMBRAPA. Elisabete de Oliveira Serrano - Bibliotecria EMBRAPA - Centro Nacional de Pesquisa de Algodo - Biblioteca Campina Grande - PB serrano@cnpa.embrapa.br Venho parabeniz-los pela excelente edi- o da Revista BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento. Gostaria de saber se posso pautar algumas matrias da Univer- sidade Federal de Viosa para serem publicadas. Giovanni Weber Scarascia Coordenador de Comunicao Social Universidade Federal de Viosa - MG gweber@mail.ufv.br Tivemos acesso revista por meio da SUDENE, e como trabalhamos com biotecnologia ligada agricultura, ficamos com muito interesse em assin-la. Anglica Virgnia Valois Montarroyos Maria do Carmo Catanho Pereira de Lyra Recife - PE burity@ipa.br Gostaria de (...) cumpriment-los pela mag- nfica revista que lanaram. Minhas felicita- es e boa sorte na empreitada. Prof. Dr. Manoel Victor Lemos Dep. de Biologia Aplicada Agropecuria UNESP/Campus de Jaboticabal (SP) mvictor@convex.com.br Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 47 ps profundas anlises e discusses na Cmara dos Deputados e no Senado Federal, o Congresso Nacional aprovou a Lei de Proteo de Cultivares, sancionada, sem vetos, pelo presidente da Repblica, em 25 de abril do corrente ano. Trabalho realizado com muita seriedade, competncia e dedicao, contou com a colaborao, como autor e relator da Cmara dos Deputados, dos deputados Renato Jonhsson e Carlos Melles e, no Senado Federal, dos senadores Jonas Pinheiro e Lcio Alcntara, respectivamente, nas Comisses de Assuntos Econmicos e de Assuntos Sociais. O Congresso Nacional Aprovou e o presidente da Repblica sancionou a Lei de Proteo de Cultivares (n 9.456, de 25 de abril de 1997). Estamos convencidos de que a aprovao desta lei foi uma iniciativa necessria e opotuna, pelos reflexos positivos ao setor agropecurio nacional, no momento que o Brasil promove a crescente abertura da sua economia, acelera as relaes de troca e expe os diversos setores produtivos do pas a um processo mais acirrado de competio. A expectativa que a Lei de Proteo de Cultivares provocar um incremento nos nveis de investimentos, principalmente do setor privado e, como consequncia, o desenvolvimento de novas cultivares mais adaptadas s exigncias dos agricultores e da sociedade. Ampliar, tambm, as possibilidades de intercmbio tecnolgico entre os pases, dando, com a proteo, maior credibilidade mtua, pelas restries "pirataria" e ao uso inadequado de materiais genticos intercambiados. Possibilitar, ainda, que o Brasil aumente a sua insero no campo internacional e avance mais um passo em direo modernizao das suas estruturas produtivas e ao aprimoramento das suas regulamentaes, colocando-se em igualdade com alguns pases desenvolvidos e com os parceiros do Mercosul. PROTEO DE CULTIVARES A 48 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 1. O que cultivar? Cultivar uma variedade de qualquer gnero vegetal claramente distinta de ou- tras cultivares conhecidas e que resulta do melhoramento gentico realizado pelo melhorista. 2. Quais cultivares podem ser prote- gidas ? Podero ser protegidas todas as esp- cies vegetais que sejam distintas, homog- neas e estveis e que integrem a lista oficial de cultivares passveis de proteo elabo- rada pelo Ministrio da Agricultura e do Abastecimento. distinta: caractersticas claras que per- mitam identific-la como diferente das demais por margem mnima de descritores (ex: resistncia ou no a uma determinada doena X; produo de gros em menor perodo de tempo - precocidade); homognea: considerando-se que uma planta seja multiplicada por semente ou por outra parte vegetativa (por ex.: esta- cas), as plantas de uma mesma cultivar devem se apresentar iguais em relao quelas caractersticas que a diferenciam (ex.: se uma das caractersticas da cultivar for resistncia doena X, todas as plantas originrias de sementes (ou estacas) da- quela cultivar devem apresentar o mesmo grau de resistncia); estvel: levando-se em conta as mes- mas caractersticas que a diferenciam das demais, necessrio que elas se mante- nham ao longo dos ciclos de multiplica- o da planta (ex. : se a cultivar resistente doena X na safra deste ano, as sementes por ela produzidas e plantadas nas safras seguintes devem tambm ser resistentes doena X). 3. Quem o melhorista? O que faz? a pessoa jurdica ou fsica respons- vel pelo processo de melhoramento gen- tico das cultivares e pela descrio das caractersticas (descritores) que iro dife- renciar uma nova cultivar das demais cultivares j conhecidas da mesma esp- cie de planta. 4. O que a Lei de Proteo de Cultiva- res proteger? A Lei de Proteo de Cultivares prote- ger as obtenes de novas variedades vegetais produzidas pelos programas de melhoramento gentico, conduzidos por instituies pblicas e privadas de pesqui- sa. 5. As plantas retiradas diretamente da Floresta Amaznica, da Mata Atlnti- ca, da Caatinga e de outros ecossistemas brasileiros so passveis de proteo? No. Tais plantas devero passar por processos de domesticao e melhora- mento gentico e apresentar grande po- tencial de mercado para que eventual- mente tenham seus descritores prepara- dos pela autoridade aplicadora da lei e ento passem a ter possibilidades de se- rem protegidas. 6. Qual a relao da Lei de Proprieda- de Industrial (Lei de Patentes) com a Lei de Proteo de Cultivares? A Lei de Proteo de Cultivares e a Lei de Propriedade Industrial (Lei de Patentes) so mecanismos distintos de proteo propriedade intelectual. Proteo de culti- vares no , portanto, patente de plantas. Os direitos de exclusividade concedi- dos por uma Lei de Proteo de Cultivares no impedem o uso, pela pesquisa, da cultivar protegida para obteno de nova cultivar por terceiro, mesmo sem a autori- zao do detentor do direito. Da a importncia de proteo, por uma lei especfica, das variedades brasilei- ras. Isso permitir uma negociao equili- brada entre aqueles que investiram maci- amente na obteno de variedades adap- tadas s condies ecolgicas do Brasil e aqueles detentores de patentes de proces- sos biotecnolgicos e de genes, quando do desenvol vi ment o de cul t i vares transgnicas. clara, portanto, a necessidade da entrada em vigor da Lei de Proteo de Cultivares, visto que as variedades j lanadas no pas esto correndo o risco de virem a ser apropriadas por detentores de patentes de genes. 7. Qual o valor de royalties que ser cobrado do material de reproduo ou multiplicao (sementes, mudas) das cultivares protegidas? O preo da semente ou da muda de determinada cultivar, protegida ou no, formado independentemente da proteo e determinado com base no seu poten- cial produtivo e na sua qualidade intrnse- ca. Segundo padres internacionais, o valor do royalties a ser cobrado situa-se na faixa de 3 a 5% sobre o preo da semente ou da muda. 8. Qual seria o impacto da proteo da cultivar no custo da semente, da muda e da produo agrcola? O impacto da cobrana de royalties no aumento do custo da semente ou da muda, na maioria dos casos, ser bastante baixo e no preo ao consumidor, ser mnimo. O impacto da cobrana de royalties no custo de produo ser baixo porque o gasto com sementes e mudas em relao aos outros gastos (preparo do solo, plan- tio, fertilizantes, transporte etc.) relativa- mente baixo, j que esse fator influi pouco no custo total da produo agrcola. Por exemplo, no Distrito Federal, o custo da batata-semente na composio do custo de produo final de 35,3% (caso de cultura onde o custo da semente um dos mais altos). Assim, com royalties de 3%, a serem cobrados no preo da batata-semente, essa participao iria para 36%, significan- do um aumento do custo de produo de R$ 63,00/ha. Quando tal acrscimo for diludo no custo/quilo do produto final (24 toneladas/ha, no DF), teremos um acrscimo de R$ 0,002 (dois milsimos de real) ou 10 a 15 centavos por saca de 50 quilos. Vejamos outros exemplos sobre a par- ticipao do custo da semente no custo de produo e possveis impactos, com hip- teses de pagamento de 3% ou 5% de royalties no custo da semente. Por outro lado, se, num primeiro mo- mento, ocorrerem aumentos, podero, num segundo momento, ser compensados pe- los incrementos de produtividade e lucratividade que as novas cultivares lanadas podero provocar, at mesmo como condio para que elas tenham maior aceitao pelos agricultores. 9. Todos os produtores que utiliza- rem material de reproduo vegetativa de cultivares protegidas pagaro royalties? Informaes sobre a LEI DE PROTEO DE CULTIVARES (Lei n 9.456, de 25 de abril de 1997) Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 49 No. A Lei de Proteo de Cultivares assegurou que no fere o direto de propri- edade aquele que: a) reserva e planta sementes para uso prprio, em seu estabelecimento, ou em estabelecimento de terceiros, cuja posse detenha; b) usa ou vende como alimento ou matria-prima o produto obtido do seu plantio, exceto para fins reprodutivos; c) utiliza a cultivar como fonte de variao no melhoramento gentico ou na pesquisa cientfica; d) multiplica material vegetativo de cana-de-acar destinados produo para fins de processamento industrial, em reas de at 4 mdulos fiscais; e) sendo pequeno produtor rural, mul- tiplica sementes, para doao ou troca, exclusivamente para outros pequenos pro- dutores rurais, no mbito de programas de financiamento e de apoio a pequenos produtores rurais, conduzidos por rgos pblicos ou organizaes no-governa- mentais, autorizadas pelo Poder Pblico. 10. Qual o prazo do direito de prote- o das cultivares previsto na lei? A proteo vigorar pelo prazo de 15 anos, excetuando-se as videiras, as rvo- res frutferas, as rvores florestais e as rvores ornamentais, para as quais a dura- o de 18 anos. Aps esses prazos a cultivar cair em domnio pblico. 11. Quem poder solicitar a proteo de cultivar? Qualquer pessoa fsica ou jurdica que detiver nova cultivar. No caso de pedidos de proteo de cultivar provenientes do exterior, somente para aqueles domiciliados em pas que tenha proteo assegurada por tratado em vigor no Brasil e que assegure aos brasilei- ros a reciprocidade de direitos iguais ou equivalentes. 12. Como ser formulado o pedido de proteo de cultivar? Dever ser formulado, atravs de for- mulrio prprio e de documentos espec- ficos exigidos, ao Servio Nacional de Proteo de Cultivares - SNPC, a ser criado no Ministrio da Agricultura e do Abaste- cimento. 13. Como ser formalizada a conces- so de proteo de cultivar? O Servio Nacional de Proteo de Cultivares - SNPC emitir um Certificado de Proteo de Cultivar; o qual, inclusive, poder ser transferido a terceiros. 14. Os pesquisadores contratados por empresas pblicas ou privadas ou por prestao de servios tero direitos sobre a cultivar protegida? A lei estabelece que, se no houver expressa disposio contratual em contr- rio, pertence exclusivamente ao emprega- dor ou ao tomador dos servios os direitos sobre as novas cultivares, desenvolvidas ou obtidas pelo empregado ou prestador de servios, durante a vigncia do Contra- to de Trabalho ou de Prestao de Servi- os. 15. O Certificado de Proteo de Cul- tivar poder ser cancelado ou extinto? Sim. A lei prev o cancelamento ou a extino do Certificado de Proteo de Cultivar antes do prazo, por deciso do SNPC ou a requerimento de qualquer pessoa com legtimo interesse, pelo no cumprimento das exigncias legais e pela perda da homogeneidade e estabilidade da cultivar. Poder ser cancelado tambm pela comprovao de que a cultivar tenha causado, aps a sua comercializao, impacto desfavorvel ao meio ambiente e sade humana. 16. Existem salvaguardas na lei para evitar e punir eventuais "manobras" no mercado e abuso do poder econmico? Sim. A lei prev que a cultivar protegi- da pode ser objeto de "licena compuls- ria", para assegurar a sua disponibilidade no mercado, a preos razoveis, quando houver, injustificadamente, impedimentos ao seu fornecimento regular e abuso do poder econmico. A cultivar protegida ser declarada, pelo Ministrio da Agricultura e do Abas- tecimento, de "uso pblico restrito", e autorizada sua multiplicao por terceiros, para atender s necessidades da poltica agrcola, nos casos de emergncia nacio- nal, abuso de poder econmico, ou outras circunstncias de extrema urgncia e em casos de uso pblico no-comercial. 17. Quais so as sanes e multas previstas na lei? A lei estabelece que aquele que ven- der, oferecer venda, reproduzir, impor- tar, exportar, bem como embalar ou arma- zenar para esses fins ou ceder a qualquer ttulo, material de propagao da cultivar protegida, com denominao correta ou com outra, sem autorizao do titular, fica obrigado a indeniz-lo, alm de ter o material apreendido. Alm disso, pagar multa de 20% do valor comercial do material apreendido, sem prejuzo das sanes legais previstas. E, no caso de reincidncia, o valor da multa ser duplicado. Neste caso, no se enquadram as excees mencionadas no item 9. 18. Qual o reflexo da Lei de Proteo de Cultivares no campo internacional? Com a Lei de Proteo de Cultivares, o Brasil est dando cumprimento a acordos internacionais firmados e viabilizando con- dies para que possa aderir Conveno de 1978 da Unio Internacional para a Obteno de Proteo de Obtenes Ve- getais - UPOV. Com a adeso UPOV, o Brasil ter a garantia de que os direitos dos obtentores brasileiros de novas cultivares sero res- peitados pelos pases que tenham aderido UPOV, da mesma forma como so protegidos os direitos dos nacionais des- ses pases. Isso significa que as cultivares desen- volvidas no Brasil no podero ser explo- radas comercialmente no exterior, nos pases filiados UPOV, sem o pagamento de direitos aos melhoristas. Caso o Brasil no venha a aderir UPOV, acordos de reciprocidade devero, necessariamente, ser negociados com cada pas para o reconhecimento da proteo das cultiva- res brasileiras nos mesmos. Na rea de propriedade industrial e de direitos autorais ocorre situao seme- lhante. Essas duas matrias so tratadas em dois tratados especficos, respectiva- mente a Conveno de Paris e a Conven- o de Berna, da dcada de 1880. Com o mesmo objetivo de garantir reciprocidade de direitos, o Brasil participa das duas convenes desde seus primrdios. 19. O que a UPOV? A UPOV (Unio Internacional para Proteo das Obtenes Vegetais) uma organizao internacional com sede em Genebra (Su a), responsvel pel a implementao da Conveno Internacio- nal de Proteo de Novas Variedades de Plantas, cuja primeira verso data de 1961 e que sofreu trs revises: em 1972, em 1978 e em 1991. 20. Como est a situao do Brasil em relao aos demais pases do Mercosul e da Amrica Latina? Se no aderir UPOV, o Brasil ficar em situao de desvantagem no Mercosul, pois Argentina, Paraguai e Uruguai ou participam ou esto em fase de adeso Conveno da UPOV/78, para que as suas cultivares sejam protegidas em todos os pases signatrios desta Conveno. Dentre os demais pases da Amrica Latina, o Chile e o Equador j pertencem UPOV/78. A Colmbia, Bolvia e Venezuela j possuem legislaes aprova- das e esto em processo de adeso UPOV. O Peru vem tramitando sua legisla- o no Congresso. Cuba e Panam esto em processo de definio de suas legisla- es, no modelo UPOV. Como um dos 11 pases integrantes da Associao Latino Americana de Desen- volvimento (ALADI), o Brasil vem sendo oficialmente solicitado a ratificar docu- mento de harmonizao na rea de prote- o de cultivares. O mesmo vem ocorren- do nas negociaes da ALCA (rea de Livre Comrcio das Amricas), pois um grupo de trabalho intergovernamental est analisando as convergncias e divergnci- as das legislaes dos pases que compo- ro a rea de livre comrcio a partir de 2005. 21. Quando a Lei de Proteo de Cul- tivares entra em vigor ? A Lei de Proteo de Cultivares entrou em vigor em 28 de abril de 1997. Caso queira outras informaes, escreva, um e-mail para: BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento. 50 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento LEI N 9.456, DE 25 DE ABRIL DE 1997 Institui a Lei de Proteo de Cultivares e d outras providncias. O PRESIDENTE DA REPBLICA Fao saber que o Congresso Nacio- nal decreta e eu sanciono a seguinte Lei: TTULO I DAS DISPOSIES PRELIMINARES Art. 1. Fica institudo o direito de Proteo de Cultivares, de acordo com o estabelecido nesta Lei. Art. 2. A proteo dos direitos rela- tivos propriedade intelectual referente a cultivar se efetua mediante a conces- so de Certificado de Proteo de Culti- var, considerado bem mvel para todos os efeitos legais e nica forma de prote- o de cultivares e de direito que poder obstar a livre utilizao de plantas ou de suas partes de reproduo ou de multi- plicao vegetativa, no Pas. Art. 3. Considera-se, para os efeitos desta Lei: I - melhorista: a pessoa fsica que obtiver cultivar e estabelecer descritores que a diferenciem das demais; II - descri t or: a caract er st i ca morfolgica, fisiolgica, bioqumica ou molecular que seja herdada genetica- mente, utilizada na identificao de cul- tivar; III - margem mnima: o conjunto mnimo de descritores, a critrio do r- go competente, suficiente para diferen- ciar uma nova cultivar ou uma cultivar essencialmente derivada das demais cul- tivares conhecidas; IV - cultivar: a variedade de qual- quer gnero ou espcie vegetal superior que seja claramente distinguvel de ou- tras cultivares conhecidas por margem mnima de descritores, por sua denomi- nao prpria, que seja homognea e estvel quanto aos descritores atravs de geraes sucessivas e seja de espcie pass vel de uso pel o compl exo agroflorestal, descrita em publicao especializada disponvel e acessvel ao pblico, bem como a linhagem compo- nente de hbridos; V - nova cultivar: a cultivar que no tenha sido oferecida venda no Brasil h mais de doze meses em relao data do pedido de proteo e que, observado o prazo de comercializao no Brasil, no tenha sido oferecida venda em outros pases, com o consentimento do obtentor, h mais de seis anos para espcies de rvores e videiras e h mais de quatro anos para as demais espcies; VI - cultivar distinta: a cultivar que se distingue claramente de qualquer outra cuja existncia na data do pedido de proteo seja reconhecida; VII - cultivar homognea: a cultivar que, utilizada em plantio, em escala comercial, apresente variabilidade mni- ma quanto aos descritores que a identi- fiquem, segundo critrios estabelecidos pelo rgo competente; VIII - cultivar estvel: a cultivar que, reproduzida em escala comercial, man- tenha a sua homogeneidade atravs de geraes sucessivas; IX - cultivar essencialmente deriva- da: a essencialmente derivada de outra cultivar se, cumulativamente, for: a) predominantemente derivada da cultivar inicial ou de outra cultivar essen- cialmente derivada, sem perder a expres- so das caractersticas essenciais que resultem do gentipo ou da combinao de gentipos da cultivar da qual derivou, exceto no que diz respeito s diferenas resultantes da derivao; b) claramente distinta da cultivar da qual derivou, por margem mnima de descritores, de acordo com critrios es- tabelecidos pelo rgo competente; Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 51 c) no tenha sido oferecida venda no Brasil h mais de doze meses em relao data do pedido de proteo e que, obser vado o pr azo de comercializao no Brasil, no tenha sido oferecida venda em outros pases, com o consentimento do obtentor, h mais de seis anos para espcies de rvo- res e videiras e h mais de quatro anos para as demais espcies; X - linhagens: os materiais genticos homogneos, obtidos por algum proces- so autogmico continuado; XI - hbrido: o produto imediato do cruzamento entre linhagens genetica- mente diferentes; XII - teste de distinguibilidade, homogeneidade e estabilidade (DHE): o procedimento tcnico de comprovao de que a nova cultivar ou a cultivar essencialmente derivada so distinguveis de outra cujos descritores sejam conhe- cidos, homogneas quanto s suas ca- ractersticas em cada ciclo reprodutivo e estveis quanto repetio das mesmas caractersticas ao longo de geraes su- cessivas; XIII - amostra viva: a fornecida pelo requerente do direito de proteo que, se utilizada na propagao da cultivar, confirme os descritores apresentados; XIV - semente: toda e qualquer estrutura vegetal utilizada na propaga- o de uma cultivar; XV - propagao: a reproduo e a multiplicao de uma cultivar, ou a concomitncia dessas aes; XVI - material propagativo: toda e qualquer parte da planta ou estrutura vegetal utilizada na sua reproduo e multiplicao; XVII - planta inteira: a planta com todas as suas partes passveis de serem utilizadas na propagao de uma culti- var; XVIII - complexo agroflorestal: o conjunto de atividades relativas ao culti- vo de gneros e espcies vegetais visan- do, entre outras, alimentao humana ou animal, produo de combustveis, leos, corantes, fibras e demais insumos para fins industrial, medicinal, florestal e ornamental. TTULO II DA PROPRIEDADE INTELECTUAL CAPTULO I DA PROTEO Seo I Da Cultivar Passvel de Proteo Art. 4. passvel de proteo a nova cultivar ou a cultivar essencialmen- te derivada, de qualquer gnero ou esp- cie vegetal. 1. So tambm passveis de prote- o as cultivares no enquadrveis no disposto no caput e que j tenham sido oferecidas venda at a data do pedido, obedecidas as seguintes condies cu- mulativas: I - que o pedido de proteo seja apresentado at doze meses aps cum- prido o disposto no 2 deste artigo, para cada espcie ou cultivar; II - que a primeira comercializao da cultivar haja ocorrido h, no mximo, dez anos da data do pedido de proteo; III - a proteo produzir efeitos to somente para fins de utilizao da culti- var para obteno de cultivares essenci- almente derivadas; IV - a proteo ser concedida pelo perodo remanescente aos prazos pre- vistos no art. 11, considerada, para tanto, a data da primeira comercializao. 2. Cabe ao rgo responsvel pela proteo de cultivares divulgar, progres- sivamente, as espcies vegetais e respec- tivos descritores mnimos necessrios abertura de pedidos de proteo, bem como as respectivas datas-limite para efeito do inciso I do pargrafo anterior. 3. A divulgao de que trata o pargrafo anterior obedecer a uma es- cala de espcies, observado o seguinte cronograma, expresso em total cumula- tivo de espcies protegidas: I - na data de entrada em vigor da regulamentao desta Lei: pelo menos 5 espcies; II - aps 3 anos: pelo menos 10 espcies; III - aps 6 anos: pelo menos 18 espcies; IV - aps 8 anos: pelo menos 24 espcies. Seo II Dos Obtentores Art. 5. pessoa fsica ou jurdica que obtiver nova cultivar ou cultivar essencialmente derivada no Pas ser assegurada a proteo que lhe garanta o direito de propriedade nas condies estabelecidas nesta Lei. 1. A proteo poder ser requerida por pessoa fsica ou jurdica que tiver obtido cultivar, por seus herdeiros ou sucessores ou por eventuais cessionrios mediante apresentao de documento hbil. 2. Quando o processo de obten- o for realizado por duas ou mais pessoas, em cooperao, a proteo poder ser requerida em conjunto ou isoladamente, mediante nomeao e qualificao de cada uma, para garantia dos respectivos direitos. 3. Quando se tratar de obteno decorrente de contrato de trabalho, pres- tao de servios ou outra atividade laboral, o pedido de proteo dever indicar o nome de todos os melhoristas que, nas condies de empregados ou de prestadores de servio, obtive- ram a nova cultivar ou a cultivar essencialmente derivada. Art. 6. Aplica-se, tambm, o dis- posto nesta Lei: I - aos pedidos de proteo de cultivar proveniente do exterior e de- positados no Pas por quem tenha proteo assegurada por Tratado em vigor no Brasil; II - aos nacionais ou pessoas domiciliadas em pas que assegure aos brasileiros ou pessoas domiciliadas no Brasil a reciprocidade de direitos iguais ou equivalentes. Art. 7. Os dispositivos dos Trata- dos em vigor no Brasil so aplicveis, em igualdade de condies, s pes- soas fsicas ou jurdicas nacionais ou domiciliadas no Pas. Seo III Do Direito de Proteo Art. 8. A proteo da cultivar recair sobre o material de reprodu- o ou de multiplicao vegetativa da planta inteira. Art. 9. A proteo assegura a seu titular o direito reproduo comer- cial no territrio brasileiro, ficando vedados a terceiros, durante o prazo de proteo, a produo com fins comerciais, o oferecimento venda ou a comercializao, do material de propagao da cultivar, sem sua au- torizao. Art. 10. No fere o direito de propriedade sobre a cultivar protegi- da aquele que: I - reserva e planta sementes para uso prprio, em seu estabelecimento ou em estabelecimento de terceiros cuja posse detenha; II - usa ou vende como alimento ou matria-prima o produto obtido do seu plantio, exceto para fins reprodutivos; III - utiliza a cultivar como fonte de variao no melhoramento genti- co ou na pesquisa cientfica; IV - sendo pequeno produtor rural, multiplica sementes, para doa- o ou troca, exclusivamente para outros pequenos produtores rurais, no mbito de programas de financia- mento ou de apoio a pequenos pro- dutores rurais, conduzidos por r- gos pblicos ou organizaes no- governamentais, autorizados pelo Po- der Pblico. 1. No se aplicam as disposi- es do caput especificamente para a cultura da cana-de-acar, hiptese em que sero observadas as seguin- tes disposies adicionais, relativa- 52 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento mente ao direito de propriedade sobre a cultivar: I - par a mul t i pl i car mat er i al vegetativo, mesmo que para uso prprio, o produtor obrigar-se- a obter a autori- zao do titular do direito sobre a culti- var; II - quando, para a concesso de autorizao, for exigido pagamento, no poder este ferir o equilbrio econmi- co-financeiro da lavoura desenvolvida pelo produtor; III - somente se aplica o disposto no inciso I s lavouras conduzidas por pro- dutores que detenham a posse ou o domnio de propriedades rurais com rea equivalente a, no mnimo, quatro mdulos fiscais, calculados de acordo com o estabelecido na Lei n 4.504, de 30 de novembro de 1964, quando destina- das pr oduo par a f i ns de processamento industrial; IV - as disposies deste pargrafo no se aplicam aos produtores que, comprovadamente, tenham iniciado, antes da data de promulgao desta Lei, processo de multiplicao, para uso pr- prio, de cultivar que venha a ser protegi- da. 2. Para os efeitos do inciso III do caput, sempre que: I - for indispensvel a utilizao repetida da cultivar protegida para pro- duo comercial de outra cultivar ou de hbrido, fica o titular da segunda obriga- do a obter a autorizao do titular do direito de proteo da primeira; II - uma cultivar venha a ser carac- terizada como essencialmente derivada de uma cultivar protegida, sua explora- o comercial estar condicionada autorizao do titular da proteo desta mesma cultivar protegida. 3. Considera-se pequeno produ- tor rural, para fins do disposto no inciso IV do caput, aquele que, simultanea- mente, atenda os seguintes requisitos: I - explore parcela de terra na con- dio de proprietrio, posseiro, arrenda- trio ou parceiro; II - mantenha at dois empregados permanentes, sendo admitido ainda o recurso eventual ajuda de terceiros, quando a natureza sazonal da atividade agropecuria o exigir; III - no detenha, a qualquer ttulo, rea superior a quatro mdulos fiscais, quantificados segundo a legislao em vigor; IV - tenha , no mnimo, oitenta por cento de sua renda bruta anual proveni- ente da explorao agropecuria ou extrativa; e V - resida na propriedade ou em aglomerado urbano ou rural prximo. Seo IV Da Durao da Proteo Art. 11. A proteo da cultivar vigo- rar, a partir da data da concesso do Certificado Provisrio de Proteo, pelo prazo de quinze anos, excetuadas as videiras, as rvores frutferas, as rvores florestais e as rvores ornamentais, in- clusive, em cada caso, o seu porta- enxerto, para as quais a durao ser de dezoito anos. Art. 12. Decorrido o prazo de vign- cia do direito de proteo, a cultivar cair em domnio pblico e nenhum outro direito poder obstar sua livre utilizao. Seo V Do Pedido de Proteo Art. 13. O pedido de proteo ser formalizado mediante requerimento as- sinado pela pessoa fsica ou jurdica que obtiver cultivar, ou por seu procurador, e protocolado no rgo competente. Pargrafo nico. A proteo, no territrio nacional, de cultivar obtida por pessoa fsica ou jurdica domiciliada no exterior, nos termos dos incisos I e II do art. 6, dever ser solicitada diretamente por seu procurador, com domiclio no Brasil, nos termos do art. 50 desta Lei. Art. 14. Alm do requerimento, o pedido de proteo, que s poder se referir a uma nica cultivar, conter: I - a espcie botnica; II - o nome da cultivar; III - a origem gentica; IV - relatrio descritivo mediante preenchimento de todos os descritores exigidos; V - declarao garantindo a existn- cia de amostra viva disposio do rgo competente e sua localizao para eventual exame; VI - o nome e o endereo do requerente e dos melhoristas; VII - comprovao das caractersti- cas de DHE, para as cultivares nacionais e estrangeiras; VIII - relatrio de outros descritores indicativos de sua distinguibilidade, homogeneidade e estabilidade, ou a com- provao da efetivao, pelo requeren- te, de ensaios com a cultivar junto com controles especficos ou designados pelo rgo competente; IX - prova do pagamento da taxa de pedido de proteo; X - declarao quanto existncia de comercializao da cultivar no Pas ou no exterior; XI - declarao quanto existncia, em outro pas, de proteo, ou de pedi- do de proteo, ou de qualquer requeri- mento de direito de prioridade, referente cultivar cuja proteo esteja sendo requerida; XII - extrato capaz de identificar o objeto do pedido. 1. O requerimento, o preenchi- mento dos descritores definidos e a indi- cao dos novos descritores devero satisfazer as condies estabelecidas pelo rgo competente. 2. Os documentos a que se refere este artigo devero ser apresentados em lngua portuguesa. Art. 15. Toda cultivar dever possuir denominao que a iden- tifique, destinada a ser sua denominao genrica, devendo para fins de proteo, obedecer aos seguintes critrios: I - ser nica, no podendo ser expressa apenas de forma numrica; II - ter denominao diferente de cultivar preexistente; III - no induzir a erro quanto s suas caractersticas intrnsecas ou quan- to sua procedncia. Art. 16. O pedido de proteo, em extrato capaz de identificar o objeto do pedido, ser publicado, no prazo de at sessenta dias corridos, contados da sua apresentao. Pargrafo nico. Publicado o pedi- do de proteo, correr o prazo de noventa dias para apresentao de even- tuais impugnaes, dando-se cincia ao requerente. Art. 17. O relatrio descritivo e os descr i t or es i ndi cat i vos de sua distinguibilidade, homogeneidade e es- tabilidade no podero ser modificados pelo requerente, exceto: I - para retificar erros de impresso ou datilogrficos; II - se imprescindvel para esclare- cer ou precisar o pedido e somente at a data da publicao do mesmo; III - se cair em exigncia por no atender o disposto no 2 do art. 18. Art. 18. No ato de apresentao do pedido de proteo, proceder-se- ve- rificao formal preliminar quanto exis- tncia de sinonmia e, se inexistente, ser protocolado, desde que devidamente ins- trudo. 1. Do protocolo de pedido de proteo de cultivar constaro hora, dia, ms, ano e nmero de apresentao do pedido, nome e endereo completo do interessado e de seu procurador, se hou- ver. 2. O exame, que no ficar con- dicionado a eventuais impugnaes ofe- recidas, verificar se o pedido de prote- o est de acordo com as prescries legais, se est tecnicamente bem defini- do e se no h anterioridade, ainda que com denominao diferente. 3. O pedido ser indeferido se a cultivar contrariar as disposies do art. 4. 4. Se necessrio, sero formula- das exigncias adicionais julgadas con- venientes, inclusive no que se refere apresentao do novo relatrio descriti- vo, sua complementao e outras infor- Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 53 maes consideradas relevantes para con- cluso do exame do pedido. 5. A exigncia no cumprida ou no contestada no prazo de sessenta dias, contados da cincia da notificao acarretar o arquivamento do pedido, encerrando-se a instncia administrati- va. 6. O pedido ser arquivado se for considerada improcedente a contesta- o oferecida exigncia. 7. Salvo o disposto no 5 deste artigo, da deciso que denegar ou deferir o pedido de proteo caber recurso no prazo de sessenta dias a contar da data de sua publicao. 8. Interposto o recurso, o rgo competente ter o prazo de at sessenta dias para decidir sobre o mesmo. Art. 19. Publicado o pedido de pro- teo, ser concedido, a ttulo precrio, Certificado Provisrio de Proteo, asse- gurando, ao titular, o direito de explora- o comercial da cultivar, nos termos desta Lei. Seo VI Da Concesso do Certificado de Proteo de Cultivar Art. 20. O Certificado de Proteo de Cultivar ser imediatamente expedido depois de decorrido o prazo para recur- so ou, se este interposto, aps a publica- o oficial de sua deciso. 1. Deferido o pedido e no ha- vendo recurso tempestivo, na forma do 7 do art. 18, a publicao ser efetuada no prazo de at quinze dias. 2. Do Certificado de Proteo de Cultivar devero constar o nmero res- pectivo, nome e nacionalidade do titular ou, se for o caso, de seu herdeiro, sucessor ou cessionrio, bem como o prazo de durao da proteo. 3. Alm dos dados indicados no pargrafo anterior, constaro do Certifi- cado de Proteo de Cultivar o nome do melhorista e, se for o caso, a circunstn- cia de que a obteno resultou de con- trato de trabalho ou de prestao de servios ou outra atividade laboral, fato que dever ser esclarecido no respectivo pedido de proteo. Art. 21. A proteo concedida ter divulgao, mediante publicao oficial, no prazo de at quinze dias a partir da data de sua concesso. Art. 22. Obtido o Certificado Provi- srio de Proteo ou o Certificado de Proteo de Cultivar, o titular fica obriga- do a manter, durante o perodo de pro- teo, amostra viva da cultivar protegida disposio do rgo competente, sob pena de cancelamento do respectivo Certificado se, notificado, no a apre- sentar no prazo de sessenta dias. Pargrafo nico. Sem prejuzo do disposto no caput deste artigo, quando da obteno do Certificado Provisrio de Proteo ou do Certificado de Prote- o de Cultivar, o titular fica obrigado a enviar ao rgo competente duas amos- tras vivas da cultivar protegida, uma para manipulao e exame, outra para inte- grar a coleo de germoplasma. Seo VII Das Alteraes no Certificado de Proteo de Cultivar Art. 23. A titularidade da proteo de cultivar poder ser transferida por ato inter vivos ou em virtude de sucesso legtima ou testamentria. Art. 24. A transferncia, por ato inter vivos ou sucesso legtima ou testamen- tria de Certificado de Proteo de Cul- tivar, a alterao de nome, domiclio ou sede de seu titular, as condies de licenciamento compulsrio ou de uso pblico restrito, suspenso transitria ou cancelamento da proteo, aps anota- o no respectivo processo, devero ser averbados no Certificado de Proteo. 1. Sem prejuzo de outras exign- cias cabveis, o documento original de transferncia conter a qualificao com- pleta do cedente e do cessionrio, bem como das testemunhas e a indicao precisa da cultivar protegida. 2. Sero igualmente anotados e publicados os atos que se refiram, entre outros, declarao de licenciamento compulsrio ou de uso pblico restrito, suspenso transitria, extino da prote- o ou cancelamento do certificado, por deciso de autoridade administrativa ou judiciria. 3. A averbao no produzir qualquer efeito quanto remunerao devida por terceiros ao titular, pela ex- plorao da cultivar protegida, quando se referir a cultivar cujo direito de prote- o esteja extinto ou em processo de nulidade ou cancelamento. 4. A transferncia s produzir efeito em relao a terceiros, depois de publicado o ato de deferimento. 5. Da denegao da anotao ou averbao caber recurso, no prazo de sessenta dias, contados da cincia do respectivo despacho. Art. 25. A requerimento de qualquer pessoa, com legtimo interesse, que te- nha ajuizado ao judicial relativa ineficcia dos atos referentes a pedido de prot eo, de t ransf ernci a de titularidade ou alterao de nome, ende- reo ou sede de titular, poder o juiz ordenar a suspenso do processo de proteo, de anotao ou averbao, at deciso final. Art. 26. O pagamento das anuidades pela proteo da cultivar, a serem defini- das em regulamento, dever ser feito a partir do exerccio seguinte ao da data da concesso do Certificado de Proteo. Seo VIII Do Direito de Prioridade Art. 27. s pessoas fsicas ou jurdi- cas que tiverem requerido um pedido de proteo em pas que mantenha acordo com o Brasil ou em organizao interna- cional da qual o Brasil faa parte e que produza efeito de depsito nacional, ser assegurado direito de prioridade durante um prazo de at doze meses. 1. Os fatos ocorridos no prazo previsto no caput, tais como a apresen- tao de outro pedido de proteo, a publicao ou a utilizao da cultivar objeto do primeiro pedido de proteo, no constituem motivo de rejeio do pedido posterior e no daro origem a direito a favor de terceiros. 2. O prazo previsto no caput ser contado a partir da data de apresentao do primeiro pedido, excludo o dia de apresentao. 3. Para beneficiar-se das disposi- es do caput, o requerente dever: I - mencionar, expressamente, no requerimento posterior de proteo, a reivindicao de prioridade do primeiro pedido; II - apresentar, no prazo de at trs meses, cpias dos documentos que ins- truram o primeiro pedido, devidamente certificadas pelo rgo ou autoridade ante a qual tenham sido apresentados, assim como a prova suficiente de que a cultivar objeto dos dois pedidos a mesma. 4. As pessoas fsicas ou jurdicas mencionadas no caput deste artigo tero um prazo de at dois anos aps a expirao do prazo de prioridade para fornecer informaes, documentos com- plementares ou amostra viva, caso sejam exigidos. CAPTULO II DA LICENA COMPULSRIA Art. 28. A cultivar protegida nos termos desta Lei poder ser objeto de licena compulsria, que assegurar: I - a disponibilidade da cultivar no mercado, a preos razoveis, quando a manuteno de fornecimento regular esteja sendo injustificadamente impedi- da pelo titular do direito de proteo sobre a cultivar; II - a regular distribuio da cultivar e manuteno de sua qualidade; III - remunerao razovel ao titular do direito de proteo da cultivar. Pargrafo nico. Na apurao da restrio injustificada concorrncia, a autoridade observar, no que couber, o disposto no art. 21 da Lei n 8.884, de 11 54 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento de junho de 1994. Art. 29. Entende-se por licena com- pulsria o ato da autoridade competente que, a requerimento de legtimo interes- sado, autorizar a explorao da cultivar independentemente da autorizao de seu titular, por prazo de trs anos pror- rogvel por iguais perodos, sem exclu- sividade e mediante remunerao na forma a ser definida em regulamento. Art. 30. O requerimento de licena compulsria conter, dentre outros: I - qualificao do requerente; II - qualificao do titular do direito sobre a cultivar; III - descrio suficiente da cultivar; IV - os motivos do requerimento, observado o disposto no art. 28 desta Lei; V - prova de que o requerente diligenciou, sem sucesso, junto ao titular da cultivar no sentido de obter licena voluntria; VI - prova de que o requerente goza de capacidade financeira e tcnica para explorar a cultivar. Art. 31. O requerimento de licena ser dirigido ao Ministrio da Agricultura e do Abastecimento e decidido pelo Conselho Administrativo de Defesa Eco- nmica - CADE, criado pela Lei n 8.884, de 11 de junho de 1994. 1. Recebido o requerimento, o Ministrio intimar o titular do direito de proteo a se manifestar, querendo, no prazo de dez dias. 2. Com ou sem a manifestao de que trata o pargrafo anterior, o Minist- rio encaminhar o processo ao CADE, com parecer tcnico do rgo compe- tente e no prazo mximo de quinze dias, recomendando ou no a concesso da licena compulsria. 3. Se no houver necessidade de diligncias complementares, o CADE apreciar o requerimento no prazo m- ximo de trinta dias. Art. 32. O Ministrio da Agricultura e do Abastecimento e o Ministrio da Justia, no mbito das respectivas atri- buies, disporo de forma complemen- tar sobre o procedimento e as condies para apreciao e concesso da licena compulsria, observadas as exigncias procedimentais inerentes ampla defesa e proteo ao direito de propriedade institudo por esta Lei. Art. 33. Da deciso do CADE que conceder licena requerida no caber recurso no mbito da Administrao nem medida liminar judicial, salvo, quanto ltima, ofensa ao devido processo legal. Art. 34. Aplica-se licena compul- sria, no que couber, as disposies previstas na Lei n 9.279, de 14 de maio de 1996. Art. 35. A licena compulsria so- mente poder ser requerida aps decor- ridos trs anos da concesso do Certifi- cado Provisrio de Proteo, exceto na hiptese de abuso do poder econmico. CAPTULO III DO USO PBLICO RESTRITO Art. 36. A cultivar protegida ser declarada de uso pblico restrito, ex officio pelo Ministro da Agricultura e do Abastecimento, com base em parecer tcnico dos respectivos rgos compe- tentes, no exclusivo interesse pblico, para atender s necessidades da poltica agrcola, nos casos de emergncia naci- onal, abuso do poder econmico, ou outras circunstncias de extrema urgn- cia e em casos de uso pblico no comercial. 1. Considera-se de uso pblico restrito a cultivar que, por ato do Ministro da Agricultura e do Abastecimento, pu- der ser explorada diretamente pela Unio Federal ou por terceiros por ela designa- dos, sem exclusividade, sem autorizao de seu titular, pelo prazo de trs anos, prorrogvel por iguais perodos, desde que notificado e remunerado o titular na forma a ser definida em regulamento. CAPTULO IV DAS SANES Art. 37. Aquele que vender, oferecer venda, reproduzir, importar, exportar, bem como embalar ou armazenar para esses fins, ou ceder a qualquer ttulo, material de propagao de cultivar pro- tegida, com denominao correta ou com outra, sem autorizao do titular, fica obrigado a indeniz-lo, em valores a serem determinados em regulamento, alm de ter o material apreendido, assim como pagar multa equivalente a vinte por cento do valor comercial do material apreendido, incorrendo, ainda, em cri- me de violao dos direitos do melhorista, sem prejuzo das demais sanes penais cabveis. 1. Havendo reincidncia quanto ao mesmo ou outro material, ser dupli- cado o percentual da multa em relao aplicada na ltima punio, sem preju- zo das demais sanes cabveis. 2. O rgo competente destinar gratuitamente o material apreendido - se de adequada qualidade - para distribui- o, como semente para plantio, a agri- cultores assentados em programas de Reforma Agrria ou em reas onde se desenvolvam programas pblicos de apoio agricultura familiar, vedada sua comercializao. 3. O disposto no caput e no 1 deste artigo no se aplica aos casos previstos no art. 10. CAPTULO V DA OBTENO OCORRIDA NA VI- GNCIA DO CONTRATO DE TRABALHO OU DE PRESTAO DE SERVIOS OU OUTRA ATIVIDADE LABORAL Art. 38. Pertencero exclusivamente ao empregador ou ao tomador dos ser- vios os direitos sobre as novas cultiva- res, bem como as cultivares essencial- mente derivadas, desenvolvidas ou obti- das pelo empregado ou prestador de servios durante a vigncia do Contrato de Trabalho ou de Prestao de Servios ou outra atividade laboral, resultantes de cumprimento de dever funcional ou de execuo de contrato, cujo objeto seja a atividade de pesquisa no Brasil, deven- do constar obrigatoriamente do pedido e do Certificado de Proteo o nome do melhorista. 1. Salvo expressa disposio contratual em contrrio, a contraprestao do empregado ou do prestador de servi- o ou outra atividade laboral, na hipte- se prevista neste artigo, ser limitada ao salrio ou remunerao ajustada. 2. Salvo conveno em contrrio, ser considerada obtida durante a vign- cia do Contrato de Trabalho ou de Pres- tao de Servios ou outra atividade laboral, a nova cultivar ou a cultivar essencialmente derivada, cujo Certifica- do de Proteo seja requerido pelo em- pregado ou prestador de servios at trinta e seis meses aps a extino do respectivo contrato. Art. 39. Pertencero a ambas as partes, salvo expressa estipulao em contrrio, as novas cultivares, bem como as cultivares essencialmente derivadas, obtidas pelo empregado ou prestador de servios ou outra atividade laboral, no compreendidas no disposto no art. 38, quando decorrentes de contribuio pessoal e mediante a utilizao de recur- sos, dados, meios, materiais, instalaes ou equipamentos do empregador ou do tomador dos servios. 1. Para os fins deste artigo, fica assegurado ao empregador ou tomador dos servios ou outra atividade laboral, o direito exclusivo de explorao da nova cultivar ou da cultivar essencial- mente derivada e garantida ao emprega- do ou prestador de servios ou outra atividade laboral a remunerao que for acordada entre as partes, sem prejuzo do pagamento do salrio ou da remune- rao ajustada. 2. Sendo mais de um empregado ou prestador de servios ou outra ativi- dade laboral, a parte que lhes couber ser dividida igualmente entre todos, salvo ajuste em contrrio. CAPTULO VI DA EXTINO DO DIREITO DE PROTEO Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 55 Art. 40. A proteo da cultivar extin- gue-se: I - pela expirao do prazo de proteo estabelecido nesta Lei; II - pela renncia do respectivo titular ou de seus sucessores; III - pelo cancelamento do Certifica- do de Proteo nos termos do art. 42. Pargrafo nico. A renncia pro- teo somente ser admitida se no pre- judicar direitos de terceiros. Art. 41. Extinta a proteo, seu ob- jeto cai em domnio pblico. Art. 42. O Certificado de Proteo ser cancelado administrativamente ex officio ou a requerimento de qualquer pessoa com legtimo interesse, em qual- quer das seguintes hipteses: I - pela perda de homogeneidade ou estabilidade; II - na ausncia de pagamento da respectiva anuidade; III - quando no forem cumpridas as exigncias do art. 49; IV - pela no apresentao da amos- tra viva, conforme estabelece o art. 22; V - pela comprovao de que a cultivar tenha causado, aps a sua comercializao, impacto desfavorvel ao meio ambiente ou sade humana. 1. O titular ser notificado da abertura do processo de cancelamento, sendo-lhe assegurado o prazo de ses- senta dias para contestao, a contar da data da notificao. 2. Da deciso que conceder ou denegar o cancelamento, caber recurso no prazo de sessenta dias corridos, con- tados de sua publicao. 3. A deciso pelo cancelamento produzir efeitos a partir da data do requerimento ou da publicao de ins- taurao ex officio do processo. CAPTULO VII DA NULIDADE DA PROTEO Art. 43. nula a proteo quando: I - no tenham sido observadas as condi es de novi dade e distinguibilidade da cultivar, de acordo com os incisos V e VI do art. 3 desta Lei; II - tiver sido concedida contrarian- do direitos de terceiros; III - o ttulo no corresponder a seu verdadeiro objeto; IV - no seu processamento tiver sido omitida qualquer das providncias determinadas por esta Lei, necessrias apreciao do pedido e expedio do Certificado de Proteo. Pargrafo nico. A nulidade do Cer- tificado produzir efeitos a partir da data do pedido. Art. 44. O processo de nulidade poder ser instaurado ex officio ou a pedido de qualquer pessoa com legtimo interesse. TTULO III DO SERVIO NACIONAL DE PRO- TEO DE CULTIVARES CAPTULO I DA CRIAO Art. 45. Fica criado, no mbito do Ministrio da Agricultura e do Abasteci- mento, o Servio Nacional de Proteo de Cultivares - SNPC, a quem compete a proteo de cultivares. 1. A estrutura, as atribuies e as finalidades do SNPC sero definidas em regulamento. 2. O Servio Nacional de Proteo de Cultivares - SNPC manter o Cadastro Nacional de Cultivares Protegidas. TTULO IV DAS DISPOSIES GERAIS CAPTULO I DOS ATOS, DOS DESPACHOS E DOS PRAZOS Art. 46. Os atos, despachos e deci- ses nos processos administrativos refe- rentes proteo de cultivares s produ- ziro efeito aps sua publicao no Dirio Oficial da Unio, exceto: I - despachos interlocutrios que no necessitam ser do conhecimento das partes; II - pareceres tcnicos, a cuja vista, no entanto, tero acesso as partes, caso requeiram; III - outros que o Decreto de regu- lamentao indicar. Art. 47. O Servio Nacional de Pro- teo de Cultivares - SNPC editar publi- cao peridica especializada para di- vulgao do Cadastro Nacional de Culti- vares Protegidas, previsto no 2 do art. 45 e no disposto no caput, e seus incisos I, II, e III, do art. 46. Art. 48. Os prazos referidos nesta Lei contam-se a partir da data de sua publi- cao. CAPTULO II DAS CERTIDES Art. 49. Ser assegurado, no prazo de trinta dias a contar da data da protocolizao do requerimento, o for- necimento de certides relativas s ma- trias de que trata esta Lei, desde que regularmente requeridas e comprovado o recolhimento das taxas respectivas. CAPTULO III DA PROCURAO DE DOMICILIA- DO NO EXTERIOR Art. 50. A pessoa fsica ou jurdica domiciliada no exterior dever constituir e manter procurador, devidamente qua- lificado e domiciliado no Brasil, com poderes para represent-la e receber notificaes administrativas e citaes judiciais referentes matria desta Lei, desde a data do pedido da proteo e durante a vigncia do mesmo, sob pena de extino do direito de proteo. 1. A procurao dever outorgar poderes para efetuar pedido de proteo e sua manuteno junto ao SNPC e ser especfica para cada caso. 2. Quando o pedido de proteo no for efetuado pessoalmente, dever ser instrudo com procurao, contendo os poderes necessrios, devidamente t r aduzi da por t r adut or pbl i co juramentado, caso lavrada no exterior. CAPTULO IV DAS DISPOSIES FINAIS Art. 51. O pedido de proteo de cultivar essencialmente derivada de cul- tivar passvel de ser protegida nos termos do 1 do Art. 4 somente ser apreciado e, se for o caso, concedidos os respec- tivos Certificados, aps decorrido o pra- zo previsto no inciso I do mesmo par- grafo, respeitando-se a ordem cronol- gica de apresentao dos pedidos. Pargrafo nico. Poder o SNPC dispensar o cumprimento do prazo men- cionado no caput nas hipteses em que, em relao cultivar passvel de prote- o nos termos do 1 do art. 4: I - houver sido concedido Certifica- do de Proteo; ou II - houver expressa autorizao de seu obtentor. Ar t . 52. As cul t i var es j comercializadas no Brasil cujo pedido de proteo, devidamente instrudo, no for protocolizado no prazo previsto no Inciso I do 1 do art. 4 sero conside- radas automaticamente de domnio p- blico. Art. 53. Os servios de que trata esta Lei, sero remunerados pelo regime de preos de servios pblicos especficos, cabendo ao Ministrio da Agricultura e do Abastecimento fixar os respectivos valores e forma de arrecadao. Art. 54. O Poder Executivo regula- mentar esta Lei no prazo de noventa dias aps sua publicao. Art. 55. Esta Lei entra em vigor na data de sua publicao. Art. 56. Revogam-se as disposies em contrrio. Braslia, 25 de abril de 1997, 176 da Independncia e 109 da Repblica. FERNANDO HENRIQUE CARDOSO Ailton Barcelos Fernandes 56 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento