Boletn del Archivo Nacional, 18-19-20: 104-118; 2012

Cladosporium: gnero fngico que deteriora soportes documentales y afecta a la salud del hombre
SOFA FLAVIA BORREGO ALONSO

l biodeterioro de un soporte de valor patrimonial es un fenmeno complejo, que implica alteraciones de las propiedades fsico-qumicas y mecnicas del material por la accin de organismos biolgicos (Pinzari et. al., 2006). A ello hay que aadir las modificaciones del aspecto esttico que se producen en los materiales afectados. La intensidad de las alteraciones, se produce en funcin de los componentes de los soportes y de las condiciones ambientales (Valentn, 2004). Gran parte de los soportes documentales son de naturaleza orgnica y se caracterizan por su alta higroscopicidad. Ello implica un significativo incremento del contenido de humedad del soporte, especialmente cuando los objetos son expuestos a una insuficiente ventilacin y a una humedad relativa superior a 65 %. Bajo estas condiciones, numerosos materiales quedan expuestos al desarrollo de especies de microorganismos que los utilizan como nutriente y, por tanto, se favorece su crecimiento y colonizacin (Florian, 2004). Esto es muy evidente en pases de clima tropical, debido a la influencia de las altas temperaturas y humedad relativa ambiental, lo que propicia que los microorganismos (hongos filamentosos y bacterias) generen grandes problemas

Doctora en Ciencias Biolgicas. Investigadora Auxiliar y Profesora Titular. Investigadora del Laboratorio de Conservacin Preventiva del Archivo Nacional de la Repblica de Cuba. E-mail: sofia@arnac.cu, sborrego62@aol.com

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en los archivos, bibliotecas y museos, provocando un serio dao a las colecciones y a la salud del personal (Vaillant, 1996; Rojas et, al., 2002; Valentn, 2004).

LOS HONGOS FILAMENTOSOS COMO CONTAMINANTES MICROBIOLGICOS MS FRECUENTES

Desde el punto de vista evolutivo, los hongos son organismos ms desarrollados que las bacterias. Son estructuras normalmente pluricelulares con un metabolismo complejo. Los hongos filamentosos o mohos forman, a partir de las esporas o conidios una vez que germinan, filamentos llamados hifas que, a su vez, dan lugar al micelio o cuerpo vegetativo, este da lugar a las colonias. Se desarrollan fcilmente a un pH cido entre 4 - 6, a una humedad relativa superior a 65 % y temperatura entre 25 - 30 C (Florian, 2004). Los hongos colonizan, tanto a los materiales de naturaleza orgnica, como inorgnica, y desempean un papel muy activo en los procesos de biodeterioro y producen manchas de diferentes tonalidades, a resultas de los productos que excretan. Entre ellos, se reconocen enzimas como la celulasa o diferentes tipos de proteasas y cidos orgnicos (oxlico, fumrico, actico, lctico, glucnico, glucurnico, por solo mencionar algunos), los cuales se depositan sobre el soporte modificando sus propiedades qumicas y, en consecuencia, deteriorndolo (Florian, 2004; Valentn, 2010; Michaelsen et. al., 2010; Gutarowska et. al., 2012). La actividad de las diferentes especies de hongos se ve favorecida por varios factores que incluyen: la humedad relativa, las fluctuaciones de la temperatura, la luz, la naturaleza de los nutrientes del soporte, el contenido de humedad del mismo, las propiedades fsicas de la superficie del objeto, el mecanismo de absorcin-emisin de la humedad del material, el pH, la presencia de polvo, el movimiento del aire ambiental y su grado de penetracin en el documento, y las concentraciones de oxgeno y dixido de carbono en la atmsfera (Florian, 2004; Rakotonirainy and Lavdrine, 2005; Valentn, 2010; Michaelsen et. al., 2010).

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El contenido de humedad en un material es uno de los factores ms importantes en el crecimiento microbiano, pues determina la cantidad de agua presente para la germinacin de las esporas microbianas actividad de agua, a w (Florian, 2004; Pinzari et. al., 2006; Cappitelli and Sorlini, 2010). Los hongos y las bacterias comienzan su desarrollo en funcin del contenido de humedad sobre la superficie de un soporte. Asimismo, ha de tenerse en cuenta que los muchos hongos, durante su desarrollo, producen agua metablica, la cual incrementa el contenido en humedad del material, favoreciendo a su vez la multiplicacin celular (Valentn, 2004).

FORMAS DE TRANSMISIN DE LOS HONGOS EN LA NATURALEZA

Los hongos se transmiten por el aire, el agua, a travs del suelo, de las personas y de los animales. En su propagacin por el aire, el aerosol atmosfrico cumple un importante papel, pues posee un gran nmero de partculas de diferentes orgenes, formas y tamaos, suspendidas en el aire. Por su origen, el aerosol atmosfrico puede ser biolgico, orgnico e inorgnico, atendiendo a la localizacin puede ser marino, continental, rural, industrial y urbano, y a tenor de los efectos que causa, el aerosol atmosfrico puede ser qumico, txico, patognico, degradativo, o ambos (Mandrioli, 2002; Minussi and Gambale, 2008). Dentro de las partculas biolgicas que son transportadas por el aire y que, eventualmente se asientan en el polvo, se encuentran bacterias, esporas fngicas, algas, virus, protozoos y granos de plenes (Mandrioli, 2002). De hecho, pueden ser arrastrados hacia el aire interior de locales por la ventilacin y por los visitantes (Nevalainen and Morawaska, 2009). La colonizacin y el crecimiento sobre la superficie de objetos que se encuentran en el interior, tambin puede ser una importante fuente de contaminacin del aire interior (Sterflinger, 2010; Cappitelli and Sorlini, 2010; Karbowska-Berent et. al., 2011).

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El polvo presente en archivos, bibliotecas y museos, vara en cantidad y calidad, en dependencia de la situacin del edificio, de las actividades que ocurran en su interior, de la estacin del ao y del estado de conservacin de sus libros y documentos (Maggi et. al., 2000), y constituye no solo el elemento transportador de las partculas (hongos), sino tambin una fuente de nutrientes y agua importante, que crea un microambiente sobre la superficie de los materiales, impidiendo el flujo normal del aire, propiciando el desarrollo de los hongos y facilitando la proliferacin de plagas (Florian, 2004; Cappitelli and Sorlini, 2010). Las esporas de los hongos presentes en el polvo son elementos de dao potencial, que se convierte en dao real cuando las condiciones microclimticas y el porcentaje relativo de agua de la actividad del agua (a w) de los materiales, o ambos, exceden los niveles de riesgo (temperatura 20 C, humedad relativa 65 %, contenido de agua 10 % y a w = 0.65 en los materiales), lo que les permite germinar.

EL GNERO FNGICO CLADOSPORIUM

El gnero Cladosporium es considerado por muchos especialistas como uno de los gneros fngicos prevaleciente en el mundo (Levetin, 2002a,b), puesto que puede aislarse, tanto del aire, como de diferentes soportes. Su nombre latino se deriva del griego y quiere decir esporas encadenadas formando ramas (Payam and Ramanathan, 2004). Se han descrito alrededor de 500 especies (Abbott, 2002). A nivel de laboratorio, se caracteriza por un crecimiento rpido en los medios de cultivo para hongos como Agar Extracto Malta, Agar Papa Dextrosa, Agar Sabouraud, Agar Czapek y otros. Sus colonias son caractersticas porque tienen una apariencia velvtica u algodonosa y un color que va desde el olivo grisceo hasta el olivo carmelitoso (Fig. 1). Muchas especies son patgenos de plantas o saprofticas, aunque algunas otras producen cladosporiosis, aunque la especie Cladosporium carrionii es conocida como

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patgena al hombre, pues causa la cromoblastomicosis, que es una lesin en la piel (Payam and Ramanathan, 2004) y Cladosporodium cladosporoides generalmente se asocia con infecciones cutneas, oculares y nasales (Vaillant, 1996). La mayora de especies se consideran alrgenos importantes, ya que los conidios o esporas y fragmentos de hifas son capaces de provocar estados alrgicos del Tipo I (asma y fiebre del heno) y del Tipo III (neumona por hipersensibilidad), de ah que se plantee que aproximadamente 10 % de la poblacin es sensible a este hongo (Abbott, 2002).

Fig. 1. Colonia de Cladosporium sp. crecida en medio Agar Czapek, con 7 das de incubacin a 28 C.

Las esporas de Cladosporium (Fig. 2) son fcilmente aerotransportadas y pueden viajar grandes distancias por mucho tiempo, pues se encuentran y se transportan junto con las partculas de polvo. El hongo es capaz de crecer en un rango amplio de temperaturas (18 - 28 C y tan bajo como - 6 C), algunas especies se caracterizan por su capacidad de soportar determinados niveles de sequedad, considerndolas ligeramente xerfilas, aunque de manera general requiere de humedad para crecer porque tiene una actividad de agua (aw) elevada (aw entre 0.8 y 0.9) lo que indica que requiere valores de humedad relativa, iguales o mayores a 80 %

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(Nielsen 2003; Grny, 2004). Es uno de los primeros gneros fngicos que se encuentra en los ambientes interiores, incluyendo el ambiente de almacenes colecciones y fondos documentales de archivos, bibliotecas y museos (Maggi et. al., 2000; Abbott, 2002; Aira et. al., 2006; Lignell, 2008; Minussi and Gambale, 2008; Giraldo et. al., 2009; Borrego y Perdomo, 2011).

Fig. 2. Hifas y conidios de dos especies diferentes de Cladosporium sp.

Fig. 3. Apariencia de un papel afectado por hongo del gnero Cladosporium.

Bajo las condiciones ambientales ideales de temperatura y humedad relativa, este hongo puede crecer y colonizar una amplia variedad de sustratos como papel, cartn, fotografas, madera, textil, metales, plsticos y hormign [Figs. 3, 4 y 5]. (Breuker et. al., 2003; Shirakawa et. al., 2003; Cappitelli and Sorlini, 2005, 2010; Giannantonio et al., 2009a, 2009b; Michaelsen et al., 2010; Cappitelli et. al., 2007a, 2007b;

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Garside, 2010.) Esto es posible cuando la condensacin ocurre en la superficie de los sustratos lo, que garantiza un correcto nivel de agua, nutriente esencial para su crecimiento y desarrollo. Una vez que las esporas se establecen en una superficie hmeda (si todava es viable), ellas pueden germinar formando una red de fragFig. 4. Conidiforo y conidios de mentos llamadas hifas, que Cladosporium desarrollados sobre siguen creciendo, y si las consuperficie de metal pintada. Microscopia electrnica de barrido (barra = 10 m). Tomado de Ahearn y cols., 1991.

diciones son convenientes, se produce la esporulacin. En muestreos ambientales que se realizaron en archivos de diferentes pases, incluyendo Cuba, este gnero ha estado presente (Maggi et. al., 2000; Borrego et. al., 2010a, 2010b, Fig. 5. Colonizacin 2011a, 2011b; Guiamet et. de un fragmento de acrlico al., 2011; Borrego y Perdomo, por Cladosporium (barra = 10 m). 2011). Otros autores que han Tomado de Ahearn y cols., 1996. realizado muestreos ambientales en locales que tambin conservan patrimonio cultural, como bibliotecas, criptas, capillas y catedrales, han aislado este hongo (Bueno y cols., 2003). En muestreos ambientales que se realizaron en depsitos del Archivo Nacional de la Repblica de Cuba (ARNAC) empleando, tanto un mtodo de sedimentacin, como de impactacin, con el fin de determinar la concentracin microbiana en el ambiente (Unidades Formadoras de Colonias

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por m3 de aire, UFC/m ), se detect que este gnero se encontraba en una proporcin elevada en relacin con otros gneros fngicos, formando parte de los tres ms importantes, junto a Aspergillus y Penicillium [Fig. 6, Tabla 1]. (Borrego et. al., 2008; 2010a, 2010b; 2011a, 2011b; Guiamet et. al., 2011; Borrego y Perdomo, 2011.)

Fig. 6. Distribucin porcentual de los gneros fngicos aislados en tres depsitos del Archivo Nacional de Cuba. El muestreo se realiz en placas de Petri con medio Agar Malta ms cloruro de sodio (7 %). Incubacin 7 das a 28 C 2 C.

Las concentraciones oscilaron entre 26.1 UFC/m hasta 3 680 UFC/m . Las especies que se han identificado son C. sphaerospermum, C. oxysporum, C. elatum, C. macrocarpum, C. cladosporoides y C. herbarum Link y Fries, considerndose estas tres ltimas especies como las ms frecuentes, y las que ms se reportan por otros autores para ambientes de interiores (Anderson, 2003; Payam and Ramanathan, 2004). Adems, se detect que este gnero es capaz de degradar la celulosa del papel y de producir cidos que excreta, luego puede afectar sustrato por la acidez (Fig. 7, Tabla 2). Tambin se apreci que cuando crece sobre el papel es capaz de producir manchas pardas a verdes oscuras, dada la

TABLA 1. Concentracin y distribucin relativa (DR) del gnero Cladosporium as como de los gneros Aspergillus y Penicillium en determinaciones realizadas en el Archivo Nacional de la Repblica de Cuba en diferentes aos
Referencia de estudio 1 Concentracin de Cladosporium (UFC/m3) Cladosporium (DR, %) Aspergillus (DR, %) Penicillium (DR, %) 72,0 158,4 2 429,2 3 43,9 203,7 4 72,0 218,7 5 26,1 31,2 6 26,1 23,4 7 30,6 680,0

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27,6 40,0

87,1

14,3 83,5

27,6 87,2

10,0 40,0

10,0 30,0

17,0 85,0

30,0 41,3

13,0

3,9 57,1

12,8 41,3

20,0 42,0

20,0 40,0

5,0 48,0

10,3 13,0

3,4 35,0

0 10,3

10,0 40,0

10,0 40,0

8,0 40,0

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Borrego et. al., 2008. Borrego et. al., 2010a. Borrego et. al., 2010b. Borrego et. al., 2011a. Borrego et. al., 2011b. Guiamet et al., 2011. Borrego y Perdomo, 2011.

DR =

Nmero de colonias del gnero Nmero total de colonias de todos los gneros

x 100

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liberacin de pigmentos olivceos (melagenina), caractersticos de este gnero, y pueden formar colonias olivceas a negras que son imposibles de eliminar, si el hongo se encuentra en su fase activa de crecimiento.

Fig. 7. Produccin de cidos por cepas de Cladosporium sp. aisladas del aire de tres depsitos del Archivo Nacional de Cuba. Se emple el medio Caldo Czapek con glucosa (1 %) y pH inicial de 7. Incubacin por 72 horas a 28 C 2 C.

CONCLUSIN
El gnero fngico Cladosporium es un contaminante ambiental, potencialmente capaz de deteriorar documentos y materiales de archivo con facilidad, siempre que la temperatura y la humedad relativa sean favorables para su desarrollo. Asimismo, puede afectar la salud del personal que labora en archivos y locales que posean una elevada concentracin de este gnero fngico.

TABLA 2. Evaluacin cualitativa de la degradacin de la celulosa por hongos del gnero Cladosporium en medio Agar Czapek donde la sacarosa es sustituida por diferentes fuentes de carbono (1 %). Incubacin por 21 das a 28 C 2 C Cepas Cladosporium cladosporoides Cladosporium herbarum Cladosporium oxysporum Cladosporium sphaerospermum Cladosporium macrocarpum Cladosporium elatum Cladosporium sp. 1 Cladosporium sp. 2 Papel Filtro +++ +++ +++ ++++ +++ ++ ++ + Celulosa Cristalina + + ++ +++ ++ + + Carboximetilcelulosa ++ +++ +++ ++++ ++ ++ + + Celobiosa ++++ ++++ ++++ ++++ +++ +++ ++ ++ Glucosa ++++ ++++ +++ ++++ ++++ +++ +++ ++++ Pigmento + + + + + + + +

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Para Papel de Filtro (tiras de 4.8 x 1 cm): +: Crecimiento en la mitad del papel. + +: Crecimiento en todo el papel. + + +: Crecimiento en todo el papel y parte de la cua. Para Celulosa cristalina, Carboximetilcelulosa, Celobiosa y Glucosa (1 %): +: Crecimiento en 25 % de la cua. + +: Crecimiento en 50 % de la cua. + + +: Crecimiento en 75 % de la cua. + + + +: Crecimiento en 100 % de la cua. : Crecimiento ligero en cualquier fuente de carbono. : No crecimiento en la fuente de carbono. Sobre el papel de filtro se puede apreciar la liberacin de pigmento por parte de las cepas de Cladosporium.

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Bibliografa
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