ABSORBANCIA.

INTRODUCCION Debido a que un gran nmero de enfermedades son transmitidas por va fecal-oral utilizando como vehculo los alimentos y el agua, es necesario contar con microorganismos que funcionen como indicador de contaminacin fecal. Estos deben de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener una sobrevivencia similar a la de los patgenos intestinales y deben ser capaces de desarrollarse extra intestinal mente. El grupo coliforme constituyen un grupo heterogneo con hbitat primordialmente intestinal para la mayora de las especies que involucra, es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal, su capacidad de sobrevivencia y multiplicacin fuera del intestino tambin se observan en aguas potables, por lo que este grupo se utiliza como indicador de contaminacin fecal en agua; encontrndose que mientras mayor sea el nmero de coliformes en agua, mayor ser la probabilidad de estar frente a una contaminacin reciente. Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no slo sobreviven, sino que se multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado distinto al que recibe en el agua. Cuando los productos alimenticios han recibido un tratamiento trmico (pasteurizacin, horneado, coccin, etc.), estos microorganismos se utilizan como indicadores de malas prcticas sanitarias. Para su estudio, se dividen en dos grupos. El grupo de bacterias coliformes totales el cual comprende a todos los bacilos Gram-negativos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados, que fermentan la lactosa con produccin de gas en un lapso mximo de 48 h. a 35C 1C. Este grupo est conformado por 4 gneros principalmente: Enterobacter, Escherichia, Citrobacter y Klebsiella. El grupo de coliformes fecales, est constituido por bacterias Gram-negativas capaces de fermentar la lactosa con produccin de gas a las 48 h de incubacin a

44.5 0.1C. Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la ms prominente es Escherichia coli. La demostracin y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivo lquidos y slidos con caractersticas selectivas y diferenciales.Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentra clasificado dentro de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entricas), existe como comensal en el intestino del gado de humanos y animales. Sin embargo, existen algunas cepas de E. coli patgenas que provocan enfermedades diarreicas. Estas se clasifican con base en las caractersticas que presentan sus factores de virulencia nicos, cada grupo provoca enfermedad mediante un mecanismo diferente. Se sabe que sus propiedades de adherencia a las clulas epiteliales de los intestinos grueso y delgado son codificadas por genes situados en plsmidos. De manera similar las toxinas son mediadas por plsmidos o fagos.

Objetivos: Obtener la absorcin de los colorantes ciba y anilina mediante un espectrofotmetro. Las soluciones stock son La anilina es un compuesto orgnico, lquido entre incoloro y ligeramente amarillo de olor caracterstico. No se evapora fcilmente a temperatura ambiente. La anilina es levemente soluble en agua y se disuelve fcilmente en la mayora de los solventes orgnicos. La anilina es usada para fabricar una amplia variedad de productos como por ejemplo la espuma de poliuretano, productos qumicos agrcolas, pinturas sintticas, antioxidantes, estabilizadores para la industria del caucho, herbicidas, barnices y explosivos.

CIBA: MATERIALES Y REACTIVOS: -tubos de ensaye -micropipeta -pipetas -probeta -espectofotometro -gradilla -ciba -Anilina

Metodologa 1.- Se prepara una solucin de anilina de 1 litro con 0.15x10-3M. 2.- En un vaso de precipitado se prepara la solucin ciba de 1 litro con 0.03x10-3M. 3.- Una vez preparadas nuestras soluciones se preparan 2 soluciones de 20 ml en tubos de ensaye de anilina con concentraciones diferentes

A1=0.02x10-3M A2=0.05x10-3M 4.-En 2 tubos de ensaye se prepara 2 soluciones de CIBA de 20 ml cada uno con diferentes concentraciones. C1=0.02X10-3M C2=0.05X10-3M 5.- Las 4 soluciones que se preparo Se lee la absorbancia en una longitud de onda de 440nm a las dos soluciones de anilina 6.- En nuestra segunda muestra de ciba tambin se lee la absorbancia en una longitud de onda de 470nm. 7.- Un vez preparadas las 4 disoluciones se mesclan 4 ml de cada una A1+ C1 A1+ C2 A2 + C1 A2+ C2 8.- Se tomo con una micro pipeta 1 micro litro de muestra y se deposito en una celda para tomar lectura de su grado de absorbancia en una longitud de onda de 440nm-475nm. 9.- se anotan los resultados de cada una de las muestras

Resultados y discusin: Se anot el colorante y la longitud usada. Colorante Anilina Ciba Longitud de onda 440nm 470nm

muestra A1 A2 C1 C2

Longitud de onda 440 440 470 470

absorbancia 0.639 1.399 0.149 0.141

concentracin 0.02x10-3M 0.05x10-3M 0.02X10-3M 0.05X10-3M

Se tom la absorbancia de cada una de las diluciones de cada colorante. Al combinarse las diluciones se obtuvieron los siguientes resultados de cada combinacin; se utiliz un rango de longitud de onda de 440nm-475nm. Colorantes A1+C1 A1+C2 A2+C1 A2+C2 Absorbancia 0.401 0.523 0.343 0.912 Repeticin 0.273 0.313 0.185 0.513

Con estos datos se pudo calcular la absortividad de estos compuestos mediante a la siguiente formula: [ ]

[ ]

K= 34000M-1 cm-1 Absortividad a = (3,4000M-1) (1.5 X 10-4) (1cm) = 5.1

Absortividad a=(0.02 mM) (1000)(34000) = 0.68 Conclusin: Se pudo observar la absortivedad de las muestras y as de la funcin del mtodo.