MICROSCOPA MARTHA ITSEL CAYETANO MARCIAL

RESUMEN
La microscopa es la tcnica de producir imgenes visibles de estructuras o detalles demasiado pequeos para ser percibidos a simple vista. Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopa, el uso del mismo se requiere para producir las imgenes adecuadas, de todo un conjunto de mtodos y tcnicas afines pero extrnsecas al aparato. En este trabajo se presenta los diversos tipos de microscopios que existen en la actualidad con sus respectivas descripciones. Hay varios tipos de microscopios disponibles en el mercado. Seleccionar un tipo adecuado no es una tarea simple, ya que tienes la necesidad de determinar para qu fin ser utilizado exactamente. El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa. El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulacin sangunea al mirar al microscopio los capilares sanguneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia. En 1665 Robert Hooke observ con un microscopio un delgado corte de corcho y not que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llam clulas. Se trataba de la primera observacin de clulas muertas. Unos aos ms tarde, Marcello Malpighi, anatomista y bilogo italiano, observ clulas vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio. A mediados del siglo XVII un holands, Anton van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin propia, describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos. El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparacin cientfica, puede considerarse el fundador de la bacteriologa.

Fluorocromo Fluorforo Ocular Objetivo Condensador Revolver Tornillo macro y micromtrico Platina Clula Zacharias Janssen Robert Hooke Anton van Leeuwenhoek

ptico
Compuesto

INTRODUCCIN
Desde el inicio de los tiempos el hombre han sentido curiosidad por explorar y conocer lo desconocido para eso con el paso del tiempo ha tenido que ir recurriendo a diversas herramientas lo que lo ha llevado a conocer nuevos mundos, nuevas formas de vida y el desarrollo de las mismas. Y as el hombre ha ido explorando el mundo que lo rodea. Por ejemplo en el mundo de la microscopia fueron los pioneros en ella Zacharias Janssen, Robert Hooke y Anton van Leeuwenhoek. Sin embargo el primer microscopio compuesto fue desarrollado por Robert Hooke. A partir de ste, los avances tecnolgicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro tiempo, los que existen de varios tipos y son usados con diferentes fines. Con el nico objetivo de tener una mayor informacin sobre este instrumento se elabora este ensayo en donde se concentra algunos tipos de microscopios y sus descripciones respectivas ya que como es de suponerse el microscopio es el elemento central de la microscopia. Se pretende conocer sus partes, para que se utiliza, manejo y cuidado del microscopio. El microscopio se ha convertido en la herramienta clave para el estudio de la vida ya que este puede aumentar varias veces el tamao de los objetos observados a travs de sus lentes y as obtener una mejor resolucin por esta misma razn a partir del descubrimiento del microscopio se ha ido revolucionando y cambiando constantemente con la finalidad de mejorar dicho

PALABRAS CLAVES
Microscopio Microscopa

instrumento para as poder apreciar objetos que con determinado microscopio no se eran posibles observar. El microscopio ptico se ha convertido en uno de los medios ms importantes para generar investigaciones en la medicina, anlisis y observacin de los microorganismos. Con su ayuda se han generado gran parte de los descubrimientos conocidos hasta nuestros das. As la curiosidad del hombre lo ha llevado y guiado a la evolucin.

abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios para un enfoque inicial y el micromtrico desplazamientos muy cortos, para el enfoque ms preciso. Pueden llevar incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el tubo a una determinada altura. 9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparacin de adelante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque. 10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La unin con la base puede ser articulada o fija. 11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que ste se mantenga de pie. Sistema de iluminacin La fuente de luz (1), con la ayuda de una lente (o sistema) (2), llamada colector, se representa en el plano del diafragma iris de abertura (5) del condensador (6). Este diagrama se instala en el plano focal anterior del condensador (6) y puede variar su abertura numrica. El diagrama iris (3) dispuesto junto al colector (2) es el diafragma de campo. La variacin del dimetro del diafragma de campo permite obtener su imagen igual al campo visual lineal del microscopio. La abertura numrica del condensador (6) supera, generalmente la de la abertura del objetivo microscpico: es la iluminacin que permite ver mejor lo que queremos observar como las clulas o las membranas celulares entre otros.

DESARROLLO MICROSCOPIO PTICO CARACTERSTICAS

Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos. Los microscopios pticos son antiguos y simples de utilizar y fabricar. Partes del microscopio ptico y sus funciones 1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen formada en los objetivos. 2 * Objetivo: lente situada en el revlver. Ampla la imagen, es un elemento vital que permite ver a travs de los oculares. 3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. 4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador. 5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador. 6 * Tubo: es la cmara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque. 7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro, alinendolos con el ocular. 8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y hacia

UTILIDAD
Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia en donde la estructura y la organizacin microscpica es importante, incorporndose con xito a investigaciones dentro del rea de la qumica (en el estudio de cristales), la fsica (en la investigacin de las propiedades fsicas de los materiales), la geologa (en el anlisis de la composicin mineralgica y textural de las rocas) y, por supuesto, en el campo de la biologa (en el estudio de estructuras microscpicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas de la ciencia. Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histologa y anatoma patolgica, donde la microscopa permite determinadas aplicaciones diagnsticas, entre ellas el diagnstico de certeza del cncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos, depsitos de amiloide, etctera.

PRECIO De $19,000.00 a $12,000.00, marca OLYMPUS modelo cx21fs1-5

Tubo, cremallera de enfoque y tornillo macromtrico.

Microscopio ptico. Descripcin: A) ocular, B) objetivo, C) portador del objeto, D) lentes de la iluminacin, E) sujecin del objeto, F) espejo de la iluminacin.

Tornillos macro y micromtrico.

Revlver.

Oculares intercambiables de diferentes aumentos.

Platina y base

Objetivos desmontados.

Diafragma - Condensador.

MICROSCOPIO COMPUESTO CARACTERSTICAS

Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas: El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar. El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz. El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de anti gel subsecuente".

Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran en la platina. El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija. Sistema de lentes

Parte mecnica del microscopio La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla. El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de medir el tamao del objeto observado. Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin. Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es plana cromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular. La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie. El tubo: tiene forma cilndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos. El tornillo macromtrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin. El tornillo micromtrico o microscpico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin.

objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior. Sistema de iluminacin

Condensador: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.

UTILIDAD
El microscopio compuesto es utilizado en multitud de sitios, desde un laboratorio de investigacin mdica hasta una casa particular, pasando por un centro de investigacin criminal. Sirve para diagnosticar daos en clulas y tejidos humanos, para identificar muestras de drogas o, simplemente, para revelar la estructura de las flores o plantas que hayamos recogido durante un paseo por el campo.

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos: Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno sobre voltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas. El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo. Diafragma: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera

10

PRECIO Microscopio Compuesto Binocular Barska 00 40x, 100x, 400x, 1000x $ 8,499

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA CARACTERSTICAS

Descubierto en 1908 por Khler y Siedentopf, y se basa en que una sustancia natural en las clulas o un colorante fluorescente aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energa absorbida como rayas luminosos. Siendo escasas las molculas autofluorecentes, su aplicacin ms difundida es para revelar una fluorescencia agregada, como en la deteccin de antgenos o anticuerpos. Tambin se puede inyectar molculas fluorescentes especficas en un animal o directamente en clulas y usarlas como marcadores. El microscopio de fluorescencia es una variacin del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiacin electromagntica emitida por las molculas que han absorbido la excitacin primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar slo la emisin secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos. El fenmeno de la fluorescencia se produce cuando un electrn de un tomo absorbe toda la energa de una determinada longitud de onda de la luz, saltando a otros orbitales. Es una situacin inestable durante la cual se emite la mayor parte de la energa que se ha absorbido (con mayor longitud de onda) y vuelve a desplazarse a su orbital. Aprovechando este fenmeno, se han creado los flurocromos. Para utilizarlos necesitamos una bombilla que emita luz ultravioleta y luz visible. Para excitar el flurocromo necesitamos un filtro de excitacin que seleccione la longitud de onda que excita nuestro flurocromo. Los ms comunes son el DAPI que tie el ncleo de las clulas y el GFP. Requerimientos para el microscopio de fluorescencia Fuente de luz: Se necesita una intensa fuente de luz para excitar la fluorescencia en el espectro especfico de cada fluorocromo. Hay que tomar en cuenta que la fluorescencia es pasajera y la iluminacin produce un efecto de fotoblanqueo en el fluorocromo; adems, las clulas vivas pueden ser daadas por la intensa radiacin. La luz debe ser de una longitud de onda corta. Se emplean lmparas de mercurio a alta presin que funcionan de un modo diferente a las lmparas de filamentos incandescentes. Tambin se utiliza luz ultravioleta y rayos laser. Muchos modelos funcionan con epi-iluminacin. Filtros: Son los que permiten el paso de luz de una determinada longitud de onda, la del rango y color necesario para excitar al fluorocromo y bloquean las longitudes no deseadas. Una vez filtrada, la luz incide sobre el espcimen por reflexin de un espejo dicroico (epi-iluminacin) y es nuevamente filtrada para poder ser observada. Objetivos: Deben tener gran capacidad para transmitir la luz y proveer una imagen de alta calidad. De igual manera deben poseer una gran apertura numrica.

UTILIDAD
Este microscopio hace uso de la fluorescencia y se convierte en una herramienta de inestimable valor para la investigacin cientfica, ya que permite alcanzar altos niveles de sensibilidad y resolucin microscpica, permitiendo una apreciacin diferente de la informacin que se puede obtener de los especmenes y que generalmente pasa desapercibida. Son numerosas las aplicaciones de la microscopa de fluorescencia, notablemente en biologa y medicina. Marcaje de molculas en clulas y tejidos para su caracterizacin e identificacin. Estudio de clulas normales y patolgicas. Estudios inmunolgicos. Mineraloga.

El microscopio de fluorescencia Olympus BX61, acoplado con una cmara digital.

Estructura de un microscopio de fluorescencia

MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO CARACTERSTICAS

El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace as visible contra el fondo oscuro que tiene detrs, como las partculas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitacin cerrada. Por ello las porciones transparentes del espcimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partculas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje ptico que conecta el espcimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminacin normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. Tambin es bastante utilizado en la observacin de muestras metalogrficas para la observacin de detalles en superficies con alta reflectancia. El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espcimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro est equipado con un condensador

especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa detrs de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeas partculas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo. El efecto es similar a las partculas de polvo que se ven en el haz de luz emanado de un proyector de diapositivas en una habitacin oscura. La luz reflejada por las partculas de polvo llegan hasta la retina del ojo, lo que las hace visibles. La luz dispersa permite incluso distinguir partculas ms pequeas que el poder separador del sistema ptico usado por transparencia. Los condensadores que se emplean en Microscopa de campo oscuro son de dos tipos: del tipo paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo cardioide, con dos superficies espejadas. El empleo de uno u otro es indistinto, mediante cualquiera de ambos, la luz no incide directamente en el objetivo (este es el objetivo de estos condensadores), sino que incide con una apertura numrica mayor al del objetivo. La microscopia de campo oscuro es una tcnica de contraste donde solo la luz difractada desde el

espcimen se usa para formar la imagen. El espcimen aparece brillante contra un fondo oscuro. La microscopia de campo oscuro crea contraste en especimenes transparentes sin tincin como clulas vivas. Este depende de controlar la iluminacin del espcimen para que la luz central que normalmente pasa a travs y alrededor del espcimen se bloquee. En lugar de iluminar la muestra con un cono de luz completo (como en microscopia de campo claro) el condensador forma un cono hueco con luz que pasa alrededor del cono en lugar de pasar a travs de este. Esta forma de iluminacin permite que solamente los rayos de luz oblicuos peguen en el espcimen la platina del microscopio y se forme la imagen con rayos de luz dispersados por la muestras y capturados por el objetivo. Cuando no hay muestra en la platina del microscopio la observacin es completamente oscura. Se debe tener cuidado al preparar especimenes ya que las caractersticas de los planos de foco superior e inferior tambin dispersan luz y comprometen la calidad de la imagen (por ejemplo, polvo, huellas dactilares). En general, los especimenes delgados son mejore ya que la posibilidad de difraccin por artefactos se reduce.

UTILIDAD
En microscopa de campo oscuro, el contraste se crea por un espcimen brillante sobre fondo oscuro. Esta es ideal para revelar contornos, bordes, fronteras y gradientes de ndice de refraccin pero no brinda mucha informacin sobre la estructura interna. Los objetos ideales incluyen clulas vivas sin tincin (donde el campo oscuro brinda informacin no visible con otras tcnicas), aunque tambin se pueden observar exitosamente clulas fijas teidas. Las imgenes de campo oscuro son particularmente tiles en hematologa para examinar sangre fresca. Los especimenes no biolgicos incluyen minerales, cristales qumicos, partculas coloidales, inclusiones y porosidad en vidrio, cermicas, y secciones delgadas de polmeros.

PRECIO Microscopio de Campo Oscuro de alta calidad, $97,500.00 Pesos

MICROSCOPIO CONFOCAL CARACTERSTICAS

Fue inventado a mediado de 1950 por Marvin Lee Minsky con el objetivo de visualizar las redes neuronales y observar los eventos biolgicos en sistemas vivos. Debido a problemas en la intensidad de las fuentes de luz y a la escasez de potencia de clculo de las computadoras de la poca, el invento pas desapercibido por mucho tiempo. El primer instrumento comercial apareci en 1987, y se desarroll durante los aos '90 debido al avance en ptica y en electrnica. En este tipo de microscopio la fuente de luz es un lser que ilumina el preparado a diferentes alturas, generando secciones pticas. Uno de sus componentes fundamentales es el pinhole, que filtra la luz proveniente de planos fuera de foco. El microscopio confocal es un microscopio que emplea una tcnica ptica de imagen para incrementar el contraste y/o reconstruir imgenes tridimensionales utilizando un "pinhole" espacial (colimador de orificio delimitante) para eliminar la luz desenfocada o destellos de la lente en especmenes que son ms gruesos que el plano focal.1 El pinhole es una apertura localizada delante del fotomultiplicador que evita el pasaje de fluorescencia de las regiones de la muestra que no estn en foco, la luz que proviene de regiones localizadas por encima o por debajo del plano focal no converge en el pinhole y no es detectada por el fotomultiplicador. Esta tcnica ha ido adquiriendo cada vez mayor popularidad entre las comunidades cientfica e industrial. Se aplica tpicamente en las ciencias biolgicas y en la inspeccin de semiconductores. La Microscopa Confocal es una tecnologa que permite observaciones a una resolucin mayor que la que se puede lograr con la microscopa ptica convencional. Emplea un sistema lser que aplica el haz de luz en forma de barrido, en una pequea parte del espcimen. El laser aplicado a una longitud de onda determinada en la muestra, hace que molculas excitadas de la misma, emitan fluorescencia a una longitud de onda mayor a la aplicada. La fluorescencia en una muestra puede ser debida a molculas que se encuentran de forma natural (autofluorescencia como en el caso de la clorofila) o puede ser producida por molculas aplicadas artificialmente a la muestra llamadas fluorocromos. Hay una gran cantidad de fluorocromos especficos en el mercado usados para diferentes estructuras celulares y para diferente emisin de fluorescencia. El uso de varias combinaciones de laser capaces de detectar y producir fluorescencia a diferentes longitudes de onda, permite un escaneo de la muestra en un amplio rango del espectro de luz, permitiendo la observacin de estructuras teidas con tal detalle como no se puede lograr con tcnicas convencionales.Debido a que penetra fcilmente la muestra, el microscopio confocal logra imgenes en diferentes planos focales que ligados a un programa de

computo, puede reproducir una imagen tridimensional del material observado. Las siguientes caractersticas han hecho de la microscopia con focal una de las herramientas de trabajo predilectas por cientficos de las ciencias biolgicas mdicas y de materiales de todo el mundo:

Alta sensibilidad en la observacin. Especificidad en la emisin de la fluorescencia. Mayor Resolucin. Tridimensionalidad de las imgenes.

UTILIDAD
Las aplicaciones de la Microscopa Confocal son muy numerosas principalmente dentro de las ciencias biolgicas (biologa celular y molecular, fisiologa, etc) ya que permite identificar y localizar componentes moleculares especficos con la particularidad de no ser una tcnica destructiva . Las principales aplicaciones de la microscopa confocal son entre otras: 1-Anlisis de colocalizacin. Mediante microscopa Confocal son posibles estudios de coexpresin de protenas u otro tipo de molculas en una misma clula /preparacin. Usando un mximo de 4 marcajes/canales simultneos: -Rojo -Verde -Infrarrojo -Dapi(azul) La colocalizacin permite determinar si una molcula de inters se expresa simultneamente en una misma regin de nuestra preparacin y se pone de manifiesto mediante la visin de la mezcla de colores de los diferentes fluorocromos/marcadores(canales -dapi, 2verde y 3-rojo) en un mismo canal (canal 4-mezcla). 2-Inmunofluorescencias y deteccin de sondas. Mediante ensayos multicolor basados en el uso de fluorocromos/marcadores especficos para hasta 4 marcajes simultneos (ej: fluorocromos Rojo,Verde,Infrarrojo, Dapi ) y aplicables a numerosos estudios( apoptosis y proliferacin celular, localizaciones celulares y subcelulares, estudios de difusin,expresin de protenas,etc) 3-Series Z ( Reconstrucciones 3-D).

Mediante Microscopa Confocal es posible la recogida de una secuencia de cortes pticos como un lote de imgenes y su posterior procesamiento digital lo que presenta la ventaja de que este bloque de datos de varias dimensiones permite generar una imagen bidimensional calculada (proyeccin) o una representacin reducida en 3 dimensiones de la muestra con el software apropiado. 4-Time Series (Series Temporales). La Microscopa Confocal permite la captura de imgenes de la preparacin a intervalos definidos (ms,seg,min) y el posterior procesado de las imgenes para la obtencin de una pelcula que permita observar la evolucin de la muestra en el intervalo de tiempo definido. 5-FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching). 6-FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer).

PRECIO 29,1020

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE BARRIDO CARACTERSTICAS

El Microscopio electrnico de barrido o SEM (Scanning Electron Microscope), es aquel que utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidad de campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra. Tambin produce imgenes de alta resolucin, que significa que caractersticas espacialmente cercanas en la muestra pueden ser examinadas a una alta magnificacin. La preparacin de las muestras es relativamente fcil pues la mayora de SEM slo requieren que estas sean conductoras. En el microscopio electrnico de barrido la muestra generalmente es recubierta con una capa de carbono o una capa delgada de un metal como el oro para darle propiedades conductoras a la muestra. Posteriormente, se barre la muestra con electrones acelerados que viajan a travs del can. Un detector mide la cantidad de electrones enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz de mostrar figuras en tres dimensiones, proyectados en una imagen de TV o una imagen digital. Su resolucin est entre 4 y 20 nm, dependiendo del microscopio. Fue inventado en 1937 por Manfred von Ardenne. Permite obtener imgenes de gran resolucin en materiales ptreos, metlicos y orgnicos. La luz se sustituye por un haz de electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen conductoras metalizando su superficie. En el microscopio electrnico de barrido es necesario acelerar los electrones en un campo elctrico, para aprovechar de esta manera su comportamiento ondulatorio, lo cual se lleva a cabo en la columna del microscopio, donde se aceleran mediante una diferencia de potencial de 1000 a 30000 voltios. Los electrones acelerados por un voltaje pequeo se utilizan para muestras muy sensibles, como podran ser las muestras biolgicas sin preparacin adicional o muestras muy aislantes. Los voltajes elevados se utilizan para muestras metlicas, ya que stas en general no sufren daos como las biolgicas y de esta manera se aprovecha la menor longitud de onda para tener una mejor resolucin. Los electrones acelerados salen del can, y se enfocan mediante las lentes condensadora y objetiva, cuya funcin es reducir la imagen del filamento, de manera que incida en la muestra un haz de electrones lo ms pequeo posible (para as tener una mejor resolucin). Con las bobinas deflectoras se barre este fino haz de electrones sobre la muestra, punto por punto y lnea por lnea. El microscopio electrnico de barrido es, actualmente, uno de los instrumentos ms utilizados por investigadores en ciencias naturales y de materiales de manera rutinaria. Su principio se basa en el uso de electrones como fuente de observacin, esto, permite observar muestras con aumentos de hasta un milln veces (resolucin menor de 5nm), caractersticas que se

logran por las propiedades de oscilacin de los electrones. Cuando el haz incide sobre la muestra, se producen muchas interacciones entre los electrones del mismo haz, y los tomos de la muestra; puede haber, por ejemplo, electrones que reboten como las bolas de billar. Por otra parte, la energa que pierden los electrones al "chocar" contra la muestra puede hacer que otros electrones salgan despedidos (electrones secundarios), y producir rayos X, electrones Auger, etc. El ms comn de stos es el que detecta electrones secundarios, y es con l que se hace la mayora de las imgenes de microscopios de barrido. Tambin podemos adquirir la seal de rayos X que se produce cuando se desprenden estos mismos de la muestra, y posteriormente hacer un anlisis espectrogrfico de la composicin de la muestra.

UTILIDAD
Se utilizan ampliamente en la biologa celular. Aunque permite una menor capacidad de aumento que el microscopio electrnico de transmisin, ste permite apreciar con mayor facilidad texturas y objetos en tres dimensiones que se hayan pulverizado metlicamente antes de su observacin. Por esta razn solamente pueden observarse organismos muertos, y no se puede ir ms all de la textura externa que se quiera ver. Los microscopios electrnicos slo pueden ofrecer imgenes en blanco y negro puesto que no utilizan la luz visible. Este instrumento permite la observacin y caracterizacin superficial de materiales inorgnicos y orgnicos, entregando informacin morfolgica del material analizado. A partir de l se producen distintos tipos de seal que se generan desde la muestra y se utilizan para examinar muchas de sus caractersticas. Con l se pueden observar los aspectos morfolgicos de zonas microscpicas de diversos materiales, adems del procesamiento y anlisis de las imgenes obtenidas.

PRECIO $ 24,990,0

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE TRANSMISIN CARACTERSTICAS

Un microscopio electrnico de transmisin (TEM, por sus siglas en ingls, o MET, en espaol) es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto, debido a que la potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la longitud de onda de la luz visible. Lo caracterstico de este microscopio es el uso de una muestra ultrafina y que la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto hasta un milln de veces. Para utilizar un microscopio electrnico de transmisin debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de ngstroms. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto hasta un milln de veces. El primer microscopio electrnico de transmisin fue desarrollado entre 1931 y 1933 por Ernst Ruska y sus colaboradores. La ptica bsica de ese primer microscopio electrnico se mantiene hasta nuestros

das; los cambios en los microscopios modernos consisten en adicionar ms lentes para incrementar el mbito de aumentos y darle mayor versatilidad. El primer microscopio electrnico de transmisin comercial lo construy Siemens en 1939. El microscopio electrnico de transmisin es un instrumento que utiliza como fuente de iluminacin un haz de electrones que son generados por un filamento de tungsteno cuando este por efecto termoinico se pone incandescente. Estos electrones son acelerados y dirigidos hacia la muestra mediante lentes electromagnticas en condiciones de alto vaco. Con el fin de observar la muestra en el microscopio electrnico de transmisin hay que prepararla previamente segn mtodos especficos de fijacin, inclusin ultramicrotoma, o crioultramicrotoma. La imagen que se obtiene es plana y monocromtica (en blanco y negro) y se puede llegar a un lmite de resolucin de 0.3 nm.

UTILIDAD
La microscopia electrnica de transmisin (MET) aplicada a las ciencias de la vida permite estudiar a nivel celular y subcelular, citoqumico e immunocitoqumico muestras biolgicas, tejidos animales y vegetales,

cultivos celulares y bacterianos, virus, estructuras subcelulares, y macromolculas. Estudio ultraestructural de clulas y tejidos normales y patolgicos. Morfologa y ultraestructura de microorganismos. Localizacin y diagnstico de virus. Caracterizacin inmunocitoqumica e histoqumica de distintos tipos celulares. Comprobacin morfolgica de tratamientos teraputicos experimentales. Estudio ultraestructural de suspensiones celulares y orgnulos aislados. Estudios ultraestructurales en diferentes tejidos y clulas de los efectos que producen los tratamientos con diferentes frmacos en una experimentacin concreta. Estudios de ultraestructurales de de marcaje con tcnicas de hibridacin in situ. Estudios a nivel ultraestructural de los efectos producidos en una clula o un tejido determinado despus de realizar una experimentacin de tipo fisiolgico. Tipificacin de distintos tipos celulares en sus distintos estadios de desarrollo, en estado normal y patolgico. Estudios sobre ocupacin de los distintos orgnulos celulares en relacin al estado celular.

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CONCLUSIN
Hasta el da de hoy podemos decir que el descubrimiento del microscopio abri la posibilidad de observar objetos muy pequeos y tuvo a la vez el mrito enorme de haber estimulado la curiosidad de los humanos por conocer ms sobre las propiedades y caractersticas de tejidos y clulas. El microscopio es sin duda el elemento ms importante en cualquier laboratorio. Nos permite, por ejemplo, ver clulas, microorganismos y bacterias, lo cual es imposible de observar a simple vista. Con el microscopio hemos descubierto infinidades de cosas que nos han ayudado a evolucionar. El microscopio ha sido una de las herramientas esenciales para el estudio de las ciencias de la vida. Abri el ojo humano hacia una nueva dimensin. En la ciencia no solo son importantes los mtodos sino que tambin tienen gran papel los instrumentos que son utilizados para realizar las distintas investigaciones en los diversos campos de la vida en esta ocasin me refiero al microscopio que sin su ayuda el hombre no lo habra logrado los descubrimientos que esta el da de hoy son conocidos y reconocidos. Considero que por esa razn debemos darle crdito a este instrumento ya que sin su participacin el hombre no hubiera conseguido descubrir el mundo microscpico. Y as como a todo ser humano el microscopio se debe cuidar, conocer y valorar. Hay varios tipos de microscopios disponibles en el mercado en este ensayo solo mencione algunos pero existen muchos mas y seleccionar un tipo adecuado no es una tarea simple, ya que tienes la necesidad de determinar para qu fin ser utilizado exactamente todo se basa en eso por ejemplo si va ser utilizado para toda tarea cientfica o de hobby nada mas. Tambien hay marcas y asi varian sus precios. En fin puedo decir que este instrumento revoluciono la manera de ver el mundo. 1.

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