Tcnico

n.9
Publicacin de Novartis de Colombia S.A. Sanidad Animal Bogot Mayo de 2013

Diagnstico y Bioseguridad en Leptospirosis Bovina

Robert Valeris, MSc.*

Introduccin

La leptospirosis es una enfermedad infectocontagiosa de amplia distribucin mundial, clasificada como una zoonosis, su transmisin por lo general va de los animales al hombre. Afecta a diferentes especies animales y al humano en forma accidental. Es causada por alguna de las siete especies patgenas del gnero Leptospira: L. interrogans en sentido estricto, L. borgpetersenii, L. noguchii, L. santarosai, L. weillii, L. kirschneri y L. alexanderi (Bharti y col., 2003; Morey y col., 2006; Lilenbaum y col., 2007). Rodrguez-Martnez (2000) reporta que las serovariedades ms frecuentes en bovinos en Colombia son hardjo, pomona, canicola, grippotyphosa. En la regin Caribe este autor reporta una seropositividad del 38.2%, en Pie de Monte Llanero 24.8%, y en la Regin Andina 14.4%. El promedio para el pas se estima en 21.7% de seroprevalencia. En el Zulia, estado fronterizo con Colombia, las serovariedades ms detectadas en laboratorio han sido icterohaemorrhagiae, hardjo y hebdomadis (Van-Balen y col., 2009), lo que implica que la prevalencia de las diferentes serovariedades de leptospira no debe asumirse por estudios realizados en otras regiones, ya que su distribucin es muy particular de cada nicho ecolgico. Sin embargo, hay que tener presente que estas cifras son solo ilustrativas de la abundancia de la bacteria en nuestro medio y cada finca presenta una situacin particular. La seroprevalencia de leptospirosis tiene una muy buena correlacin con la pluviometra, ya que el nivel de agua en el ambiente es un factor que determina la
*Ctedra de Infectologa Veterinaria Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad del Zulia robert.valeris@fcv.luz.edu.ve

supervivencia de la bacteria. As hay zonas secas donde se pueden encontrar niveles bajos de seroprevalencia de leptospirosis (cercanos al 10%) en contraste con niveles muy altos (cercanos al 80%) que pueden encontrarse en algunas explotaciones de zonas hmedas. Cabe acotar que en casos de lluvias profusas o inundaciones, hay una alta probabilidad de que estos niveles de seroprevalencia aumenten significativamente en las zonas secas afectadas. Esto conlleva a que la leptospirosis sea una de las enfermedades reproductivas de mayor presencia en la ganadera de doble propsito en la regin (PalomaresNaveda, 2005), especialmente en los ltimos aos debido al cambio climtico. La epidemiologa de la leptospirosis dentro de un ecosistema es compleja, ya que las leptospiras de varios se-

Fotografa archivo Novartis.

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rogrupos pueden ser mantenidas por diferentes especies animales, incluyendo especies domsticas y silvestres que comparten el mismo hbitat. Las diferentes cepas patgenas de leptospiras afectan potencialmente a un gran nmero de especies animales, que actan como hospedadores de mantenimiento o accidentales, en funcin de la adaptacin o preferencia de la serovariedad involucrada (Bharti y col., 2003; Alfaro y col., 2004). Cuando la infeccin se produce en un hospedador adaptado a una serovariedad de Leptospira, el animal slo sufre manifestaciones reproductivas y se convierte en un hospedador de mantenimiento o reservorio, eliminndola a travs de la orina. La infeccin en un hospedador accidental, no adaptado a una serovariedad de Leptospira spp. causa una manifestacin aguda o enfermedad clnica (Bharti y col., 2003). Se considera que los bovinos son hospedadores de mantenimiento de las serovariedades hardjo y pomona, mientras que son hospedadores accidentales de la serovariedad grippotyphosa (Alfaro y col., 2004). La leptospirosis en bovinos puede presentarse clnicamente en forma aguda /subaguda (fase leptospirmica) o crnica (fase leptospirrica), esta ltima asociada a abortos, becerros dbiles e infertilidad. Los signos clnicos varan de acuerdo a la serovariedad que est ocasionando la enfermedad. En la leptospirosis causada por la serovariedad hardjo, una de las serovariedades ms comunes que afectan al ganado, los signos clnicos son inaparentes; la infeccin generalmente es crnica, existiendo infeccin fetal seguida de aborto, nacimiento de becerros prematuros, dbiles o clnicamente normales pero infectados; en general, la vaca que aborta presenta retencin de membranas placentarias. Se puede observar un sndrome de infertilidad en hembras que presentan infeccin persistente del tracto reproductivo o en aqullas que se infectan cerca o en el momento del servicio (Alfaro y col., 2004).

riedad de ensayos basados en la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) (Morey y col., 2006). Los ensayos de PCR son sensibles, pero los procedimientos de control de calidad y el procesamiento de la muestra para PCR son crticos y deben ajustarse al tejido, fluido y especie utilizada. La mayora de los ensayos de PCR no identifican a la serovariedad infectante (Morey y col., 2006; OIE, 2008). Cabe destacar que se han realizado importante progresos en este campo y hay protocolos de PCR como el LSSPPCR que permite discriminar la genomoespecie y la serovariedad presente en una muestra clnica con una buena especificidad (Bomfim y col., 2006). A pesar de la potente sensibilidad analtica de las tcnicas moleculares para la deteccin del ADN de Leptospira spp, las pruebas serolgicas continan siendo los mtodos ms ampliamente utilizados para el diagnstico de leptospirosis a nivel mundial. La prueba de microaglutinacin de antgenos vivos (MAT) es la prueba serolgica estndar para leptospirosis (Bharti y col., 2003; OIE, 2008). Los antgenos seleccionados para su uso en la prueba MAT deberan incluir cepas representativas de los serogrupos cuya existencia se ha identificado en la regin en cuestin, junto con aquellos que se sabe que son mantenidos por la especie que se estudia en todas aquellas zonas donde sta se encuentre (MSDS y col., 1999). La prueba MAT se utiliza principalmente como una prueba de rebao. Para obtener informacin til, al menos el 10% del rebao debera ser muestreado y se debera tener un registro de las vacunaciones (OIE, 2008). En esta muestra deben incluirse vacas que hayan abortado y otras que no hayan presentado abortos. Asimismo, en caso de ser posible debe tomarse una muestra de suero de los fetos abortados. Como una prueba para diagnosticar leptospirosis a nivel del individuo, la MAT es muy til para detectar la infeccin aguda: un aumento cudruple de los ttulos en una muestra pareada de sueros agudo y convaleciente (con un intervalo de 15 das aproximadamente entre las muestras) tiene carcter diagnstico (MSDS y col., 1999). La prueba MAT tiene sus limitaciones en el diagnstico de individuos con infecciones crnicas y en el diagnstico de infecciones endmicas en el rebao (OIE, 2008). Los animales infectados pueden abortar o convertirse en portadores con excrecin renal y/o genital y tener ttulos en la prueba MAT inferiores al ttulo considerado normalmente como significativo (dilucin final de 1:100) (OIE, 2008), adems que no se puede detectar la serovariedad infectante debido a respuestas serolgicas paradjicas (Levett, 2003). La tcnica de ELISA puede tambin ser til en la deteccin de anticuerpos anti-Leptospira spp. Se han desa-

Diagnstico de laboratorio

El aislamiento de leptospiras en muestras clnicas y la identificacin de los aislamientos son procedimientos largos y slo se pueden hacer en Laboratorios de Referencia. Por otro lado, el aislamiento seguido de la tipificacin a partir de portadores (con infeccin renal) es una herramienta muy til en los estudios epidemiolgicos para determinar la serovariedad o las serovariedades que estn presentes en un grupo particular de animales, una especie animal o en una regin geogrfica determinada (OIE, 2008). El material gentico de las leptospiras puede demostrarse en tejidos y en fluidos corporales utilizando una va-

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rrollado muchos ensayos y se utiliza la prueba principalmente para la deteccin de infecciones recientes y el screening de animales experimentales en los estudios de desafo (Bharti y col., 2003; Bomfim y col., 2005; Srimanote y col., 2008). Los animales que se han vacunado contra una serovariedad especfica podran dar reacciones positivas con muchos protocolos de ELISA, complicando la interpretacin de los resultados (OIE, 2008). Se ha desarrollado un kit comercial de ELISA para la deteccin de anticuerpos contra la serovariedad hardjo (Linnodee Leptospira Hardjo ELISA) bastante til en la identificacin de rebaos infectados con esta serovariedad; sin embargo, su utilidad se reduce en los rebaos vacunados puesto que las vacunas comerciales contra leptospira contienen la serovariedad hardjo, lo cual interfiere con la interpretacin de los resultados (OIE, 2008).

celular Th1 con una proteccin eficaz contra la serovariedad hardjo, a diferencia de lo que se observa en otras especies donde la proteccin se correlaciona con la respuesta humoral (Adler y col., 2010). En los casos de una tormenta de abortos, se recomienda la vacunacin junto con el tratamiento con dihidroestreptomicina de los animales en riesgo (Alfaro y col., 2004).

Referencias Bibliogrficas

Adler B, De La Pea Moctezuma A. 2010. Leptospira and leptospirosis. Vet Microb 140: 287. Alfaro C, Aranguren Y, Clavijo A. 2004. Epidemiologa y diagnstico de la leptospirosis como fundamentos para el diseo de estrategias de control. Rev Digit CENIAP HOY N 6 SeptiembreDiciembre. Bharti A, Nally J, Ricaldi J, Matthias M, Diaz M, Lovett M, Levett P, Gilman R, Willig M, Gottuzzo E, Vinetz J. 2003. Leptospirosis: a zoonotic disease of global importance. Lancet Infect Dis 3: 751. Bomfim MRQ, Koury MC. 2006. Evaluation of LSSP-PCR for identification of Leptospira spp in urine samples of cattle with clinical suspicion of leptospirosis. Vet Microbiol 118:278. Bomfim MRQ, Ko A, Koury MC. 2005. Evaluation of recombinant LipL32 in enzyme-linked immunosorbent assay for the serodiagnosis of bovine leptospirosis. Vet Microb 109: 89. Levett P. 2003. Usefulness of serologic analysis as a predictor of the infecting serovar in patients with severe leptospirosis. CID 36:447. Lilenbaum W, Nunes De Souza G, Ristow P, Cortez Moreira M, Frguas S, Da Silva-Cardoso V, Roland-Oelemann WM. 2007. A serological study on Brucella abortus, caprine arthritis-encephalitis virus and Leptospira in dairy goats in Rio de Janeiro, Brazil. Vet J 173 (2): 408 Morey R, Galloway RL, Bragg S, Steigerwalt AG, Mayer L, Levett P. 2006. Species-specific identification of Leptospiraceae by 16S rRNA Gene Sequencing. J Clin Microb 44 (10): 3510. MSDS, INHRR, MPC, SASA, OMS-OPS. 1999. Gua de Procedimientos tcnicos y operacionales para el diagnstico, tratamiento, vigilancia y control de la Leptospirosis en Venezuela. CaracasVenezuela: 67. OIE. 2008. Leptospirosis. In: Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. Chapter 2.1.9: 251. Palomares-Naveda R. Cmo prevenir el problema de las vacas repetidoras. En: Manual de Ganadera de Doble Propsito. C. Gonzalez-Stagnaro, E. Soto-Belloso (eds). Fundacin GIRARZ. Ediciones Astro Data S.A. Maracaibo-Venezuela. Artculo 16: 3003006. 2005. Rodrguez-Martinez G. 2000. Estado Actual de la Leptospirosis. MVZ-CORDOBA 5(1): 61-63. Srimanote P, Wongdeethai N, Jieanampunkul P, Samonkiert S, Leepiyasakulchai C, Kalambaheti T, Prachayasittikul V. 2008. Recombinant ligA for leptospirosis diagnosis and ligA among the Leptospira spp clinical isolates. J Microb Meth 72: 73 Van-Balen J, Hoet A, DPool G, Gil M, Escalona F, Daz D.2009. Anlisis retrospectivo de las pruebas diagnsticas de leptospirosis bovina procesadas en la Unidad de Investigacin y Diagnstico de Leptospirosis de la Universidad del Zulia, 1998-2001. REVISTA CIENTIFICA, FCV-LUZ XIX(6):598.

Medidas de bioseguridad

Entre las medidas de bioseguridad tiles para prevenir y controlar la leptospirosis en un rebao bovino se pueden mencionar: mantener un buen sistema de desage, limpieza y desinfeccin de las instalaciones, control de roedores, evitar el uso de fuentes de agua comunales, reduccin del pastoreo conjunto con otras especies, una poltica de sistema de produccin cerrado, control de la entrada de animales al sistema y evitar el uso de reproductores posiblemente infectados sin diagnstico de laboratorio (Alfaro y col., 2004). Es importante realizar la prueba de leptospirosis a las otras especies susceptibles en caso de estar presentes en la explotacin (pequeos rumiantes y cerdos principalmente), puesto que pudieran jugar un papel epidemiolgico relevante en el mantenimiento de la bacteria en la finca. Sin embargo, la medida de prevencin ms efectiva para leptospirosis a nivel del rebao bovino es la vacunacin. La vacunacin de los bovinos puede reducir la excrecin urinaria de leptospiras y el riesgo al contagio del personal de la finca. La vacunacin contra leptospirosis es slo parcialmente efectiva, debido en parte a la inmunidad inducida por la vacuna que es especfica para las serovariedades que incluye la vacuna. Ello implica que si las serovariedades presentes en el rebao difieren significativamente de las serovariedades presentes en la vacuna, la inmunidad ser insuficiente. Se ha comprobado que la proteccin contra la infeccin de la serovariedad hardjo en bovinos es subptima. Por esta razn, se debe vacunar con una frecuencia hasta de cada 3 meses en zonas con una alta incidencia de leptospirosis por esta serovariedad. Se ha correlacionado la habilidad de la vacuna de estimular una respuesta

LA CORRECTA ELECCIN EN EL CONTROL DE LEPTOSPIROSIS BOVINA

Protege efectivamente contra Leptospira, evitando estrs innecesario.
Bacterina de Leptospira canicola-grippotyphosahardjo-icterohaemorrhagiae-pomona.

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