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Cap. 13
Ley de Beer
Potencia radiante
Es la energia (joules) de la radiacion incidente en el detector, por m2 y por segundo.
La potencia del haz se atenua de Po hasta P por la interaccin entre los fotones y las
partculas absorbentes.
Transmitancia
Es la fraccion de radiacion incidente transmitida por la solucion.
P T Po
P %T x 100 PO
Absorbancia
A abc
A abc
Donde a es la absortividad (constante de proporcionalidad).
La magnitud de a depende de las unidades para b y c. Si b esta en cm y c en g/L, a esta en L g-1 cm-1.
A ebc
Algunos iones o molculas orgnicas de gran tamano no cumplen estrictamente la Ley de Beer aun en soluciones diluidas.
H In HIn color2
color1
radiaciones policromticas
Desviaciones instrumentales en
presencia de luz parsita
Radiacin proveniente del dispositivo seleccionador esta contaminada con radiacin dispersada o parasita (por dispersin y reflexin en superficies interiores del aparato). Se obtienen absorbancias menores a las tericas.
Para conseguir espectros complejos bien resueltos se requieren anchuras de rendija estrechas.
Ancho de banda: se define como el espacio de ajuste del monocromador necesario para mover la imagen de la rendija de entrada a travs de la rendija de salida. Se expresa en unidades de . Ejemplo: 0.5 nm, 9.0 nm, 20 nm.
Anchura de banda efectiva: es la mitad de la anchura de banda cuando las dos anchuras de las rendijas son iguales; se aprecia que es el intervalo de longitudes de onda que salen del monocromador para un ajuste dado de longitud de onda. Tambin se expresa en unidades de . Ejemplo: 0.5 nm, 9.0 nm, 20 nm.
Instrumentacin
Fotmetros: utlizan filtros como selectores de , son sencillos y econmicos, hay de haz simple y de doble haz.
Fotmetros
Sencillos Econmicos Filtros (cada uno para distinta regin del espectro: sol roja, filtro verde) Buena relacion senal/ruido Cuando la pureza espectral no es importante Uno y doble haces
Espectrofotmetros
Regin visible (380-800 nm)
Sencillos Un haz Monocromador de red Anlisis cuantitativo Spectronic 20 $1000 - 3000
Haz sencillo
Calibrar cubetas para detedctar diferencias por rayaduras y desgaste 0.1-10 cm (1 cm + comn)
Planas (perpendiculares al haz) mejores que cilndricas (minimizan prdidas por reflexin) Limpieza
Eliminar huellas dactilares, grasa y otras manchas Limpiar antes y despues superficie externa con papel para lentes empapado con MeOH grado espectromtrico No tocar ventanas
FUENTES DE RADIACION
Continua Potencia no debe variar en el intervalo de l
Lmpara de D2 o H2
Deben tener ventanas de cuarzo (el vidrio absorbe fuertemente las l menores a 350 nm). La lmpara de deuterio produce una esfera de radiacin algo ms grande e intensa (> 1 a 1.5 mm de dimetro) que el hidrgeno.
LAMPARAS DE FILAMENTO DE W
PROBLEMA: La furosemida, peso molecular 330.7 g/mol, es un diurtico, derivado del cido antranlico, que se administra en casos de hipertensin, enfermedades renales, cirrosis heptica, etc. En disolucin alcalina presenta en espectro de absorcin UV/VIS con mximo de absorcin centrado en 271 nm. Se analiz la cantidad de furosemida en una tableta disolviendo su contenido en disolucin de NaOH 0.1 molar aforando en un baln de 100 ml. Un volumen de 1.0 ml de esta disolucin se transfiri a un baln de 50 y se midi en un espectrofotmetro UV/VIS a 271 nm, dando una absorbancia de 0.475 en una cubeta de 1.0 cm.
Para hacer la curva de calibracin se prepararon una serie de disoluciones patrn de este frmaco, y se midieron a la misma longitud de onda en una cubeta de 1.0 cm. Obtener la ecuacin de la curva de calibracin concentracin versus absorbancia. Determinar la absortividad molar de la furosemida en las condiciones dadas. Determinar la cantidad de frmaco presente en la tableta expresada en miligramos. La sensibilidad del mtodo. El lmite de deteccin del mtodo. El porcentaje de transmitancia para una tableta de dicho frmaco con un contenido de furosemida igual al doble de la cantidad calculada en el inciso c).
Seal (A, absorbancia a =271 nm) 0.035 0.197 0.395 0.59 0.79 0.985