CITOLOGA

Citologa: ciencia que estudia la clula: Su organizacin ultraestructural. Su composicin macromolecular. La funcin bioqumica y metablica de sus componentes La relacin y comunicacin intercelular. Clula: unidad estructural y funcional de los seres vivos. Su estudio depende de la invencin de los instrumentos pticos diseados por Hooke y Leeuwenhoek. Ellos crearon instrumentos para estudiar las clulas: Microscopios. Microscopio ptico: (campo claro) estudia la morfologa de la clula. Microscopio electrnico de transmisin: estudia la ultraestructura de la clula. Microscopio de scanning o de barrido: imagen tridimensional de la superficie del tejido celular. Otros microscopios: de polarizacin, de interferencia, campo oscuro, de alro voltaje, de efecto tunel. NIVELES DE ORGANIZACIN DE SERES VIVOS 1. Seres vivos acelulares-virus 2. Seres vivos celulares-clulas Clulas procariotas: bacterias, cianobacterias y micoplasmas. Clulas eucariotas: seres vivos, animales y vegetales Existen otros organismos no considerados seres vivos, estos son los priones: agentes patgenos formados por protenas. CELULAS PROCARIOTAS O PROCARIONTES Tamao de 1 a 60 micras Rodeadas de membrana plasmtica que se invagina formando mesosomas (caractersticos de bacterias). Por encima de la membrana esta la pared (no existente en micoplasmas). Algunas procariotas pueden presentar flagelos y casi todas poseen ribosomas El material gentico se encuentra formando el nucleoide y no esta rodeado por la envoltura nuclear. Algunos como las cianobacterias presentan metabolismo fotosinttico. CELULAS EUCARIOTAS Tamao de 10 a 100 micras. El material gentico esta localizado en el ncleo rodeado por la envoltura nuclear. Presentan citoplasma en el interior del cual estn los orgnulos celulares cada uno con funciones determinadas: Ret. Endoplasmatico. Sntesis de lpidos y protenas. Ribosomas: sntesis de protenas. Complejo de Golgi: procesos de secrecin. Lisosomas: digestin celular Mitocondrias: obtencin de energa (respiracin). Citoesqueleto: filamentos que dan forma y movilidad a la clula. Otros: centrolos, cilios, peroxisomas

Adems las clulas vegetales presentan pared celular y cloroplastos. Tambin tienen vacuolas que poseen la misma funcin que los lisosomas. MICROSCOPIO PTICO DE CAMPO CLARO Limite de resolucin entre 100 y 10 micras. Este lmite de resolucin es la distancia mnima entre 2puntos para que puedan distinguirse como tales. Depende del poder de resolucin que es la capacidad de distinguir 2imagenes distintas de puntos situados muy cerca. Se basa en una bombilla que produce un haz de luz que llega a un condensador que condensa y dirige el haz hacia la muestra que debe ser fina. Seguidamente la luz pasa a una lente objetivo despus a una lente ocular y al ojo humano. La imagen aparece aumentada y coloreada debido a la aplicacin de colorantes y solo veremos la morfologa de la clula no se podrn ver sus orgnulos. MICROSCOPIO DE TRANSMISIN Se basa en un filamento de tungsteno incandescente que emite un haz de electrones que pasa a una columna al vacio con bobinas Electromagnticas que actan como lentes condensadoras haciendo que los electrones atraviesen la muestra. La muestra debe ser fina tb. En este lugar del proceso aparece ya la imagen agrandada que pasa a bobinas electromagneticas que la aumentan todava ms. La imagen pasa a verse en una pantalla fluorescente. Con este microscopio no se ven colores, solo se ven blancos, grises y negros. En este microscopio hay que realizar un contraste de la muestra con metales pesados, de forma que las zonas sin metales pesados son atravesadas dando color blanco, en cambio si hay metales los electrones chocan dando colores negros y grises. Zonas blancas: electrolcidas Zonas negras o grises: electrondensas. Adems de verse la morfologa de la clula se pueden ver los orgnulos (la ultraestructura). MICROSCOPIO DE BARRIDO El filamento de tungsteno emite el haz de electrones que pasan a bobinas electromagnticas. El haz de electrones no es fijo, es mvil y va de un lado a otro de la muestra barriendo su superficie sin atravesarla. Los electrones chocan contra la muestra transformndose en electrones secundarios que son recogidos por un detector y un amplificador que transforman estos electrones en luz que es recogida por una pantalla de televisin. Se observaran superficies celulares. No se utilizaran colorantes, la muestra se deber cubrir con metales pesados superficialmente (platino, oro, carbono). Se vern colores grises, negros y blancos. Cada colorante es especfico y colorea una zona determinada. Ej. Las clulas caliciformes del estomago deben ser teidas con azul alcian que se une a polisacridos.

METODOS DE ESTUDIO DE LAS CELULAS Y LOS TEJIDOS A) Mtodos de estudio de la morfologa celular B) Mtodos de estudio de la composicin qumica celular A) METODOS DE ESTUDIO DE LA MORFOLOGIA CELULAR 1. Estudio de las clulas vivas: Mtodo in vivo: se realiza a organismos o clulas vivas en su estado natural incluso orgnulos celulares (Ej. Protozoos, mitocondrias). Se utilizan colorantes llamados colorantes vitales, estos no causan dao al organismo o clula durante un tiempo corto, a largo tiempo son txicos y mortales. Mtodo in Vitro: estudia al organismo vivo pero colocado en condiciones artificiales. Se realiza en clulas aisladas y fciles de separar. Estas clulas se colocan sobre un sustrato adecuado que se llama medio de cultivo en el cual se mantienen con vida mientras dura el estudio conocido como cultivo celular. 2. Estudio de celulas muertas (posmorten): A) FIJACIN: cuando el animal muere es necesario detener sus procesos vitales antes de una autolisis de sus materiales. Este proceso es conocido como fijacin. Conserva las clulas y tejidos en un estado lo mas parecido posible en morfologa y composicin qumica al estado vivo. Modo de actuacin: 1. Se insolubilizan las protenas 2. Evita autolisis de los constituyentes de las clulas debido a sus propias enzimas desprendidas por los lisosomas de las clulas. 3. Protege a las clulas del ataque bacteriano. 4. el tejido para posteriores tratamientos como la tincin, el corte Fijacin fsica: Por calor: aplicamos calor de manera que se produce la coagulacin de las protenas. No es buena ya que las clulas se destruyen. Por fro: se congela el tejido con dixido de carbono o N liquido. Es mejor que la anterior pero se pueden formar cristales. Fijacin qumica: (por medio de sustancias qumicas disueltas) 1. Un solo liquido fijador: M. OPTICA: Formaldehdo produce la reticulacin de protenas Ac. Actico- cambia el estado coloidal de las protenas. Ac. Prico y dicromato potasico- actan formando sales. Alcoholes etlico y metlico- producen deshidratacin. M. ELECTRONICA: Glutaraldehido: reticulacin de protenas Tetraoxido de Osmio: reticulacin de protenas.

2. Mezclas fijadoras: M. OPTICA: Bouin: formado por una mezcla de formaldehdo, cido actico y cido prico. M. ELECTRONICA: Se utiliza glutaraldehido mezclado con paraformaldehido. Tipos de fijacin qumica: Perfusin: se coloca el fijador en una jeringuilla inyectndoselo al animal en el torrente sanguneo de manera que el fijador se distribuye por todo su organismo. Una vez fijado podemos abrirlo para obtener nuestro rgano. Inmersin: se mete el rgano en un recipiente con fijador. Esta tcnica depende del tamao de la muestra el volumen del fijador y todo esto influir en el tiempo de fijacin. La fijacin tb depende de la velocidad de penetracin del fijador (tetraxido de osmio lento, formaldehdo rapido). El tejido debe sacarse del fijador ya que el fijador puede estropearlo. Despus de sacar el tejido realizaremos la inclusin. B) INCLUSIN: consiste en colocar el tejido fijado en una sustancia que lo conserve y le de consistencia y volumen para poder cortarlo (en secciones finas y delgadas). Medios de inclusin: M. OPTICO: Utilizaremos parafina o paraplast que es un medio de inclusin no hidrosoluble. M. ELECTRONICO: Utilizaremos resinas epoxi como el epn, araldita y metacrilato o gelatinas y agar que son medios hidrosolubles. Etapas de inclusin: (deshidratacin, aclaramiento, y realizacin del bloque o inclusin) M. OPTICO, INCLUSIN EN PARAFINA: Deshidratacin: consiste en quitarle el agua al tejido ya que la parafina es no hidrosoluble. Para ello lavamos en agua el fijador. Se realizara con alcoholes de pureza ascendente hasta llegar a alcohol puro que no es soluble en parafina. Aclaramiento: se sustituye este alcohol por un lquido intermediario normalmente el hidrocarburo bencnico (silol, benceno, tolueno). Impregnacin: el tejido se coloca en parafina liquido, esta parafina es liquida a 60 grados (a t ambiente es slida). El tejido se impregna de parafina sustituyndola por el silol. Inclusin: se saca el tejido de la parafina y lo ponemos en el fondo de un molde metlico y lo rellenamos de parafina liquida colocndolo a t ambiente de manera que la parafina se solidifica quedando el bloque realizado y preparado para el corte.

M. ELECTRONICO, INCLUSIN: Deshidratacin: se realiza con alcoholes de concentraciones crecientes al igual que con el M.O. A veces se pueden utilizar acetonas. Aclaramiento: se utiliza un hidrocarburo bencenico en este caso el oxido de propileno. Impregnacin: se saca el tejido del oxido de propileno y se mete en un bote con la resina epoxi que a t ambiente es liquida y el tejido se impregna. Confeccin del bloque o inclusin: no se utilizan moldes metlicos sino las cpsulas de gelatina de los medicamentos. El tejido se saca de la resina y se mete en el fondo de la cpsula de gelatina. Seguidamente se introduce a 60 grados para que la resina epoxi se solidifique. Una vez tenemos el bloque realizado procedemos a realizar el corte. C) CORTE: M. OPTICO: el bloque hay que cortarlo en pequeas secciones finas. Estas se cortan en un micrtomo (que tiene una cuchilla metlica) donde se realizan secciones de un grosor de 3 a 5 micras. Las secciones obtenidas se colocan encima de un cristal alargado llamado porta. Una vez en el porta podemos teir la muestra. Para tejidos lquidos debemos realizar los frotis o extensin: se coloca encima del porta una gota de sangre y encima otro porta formando un ngulo perpendicular. Este porta se desplaza arrastrando la gota y formando en el otro porta una extensin de sangre. M. ELECTRONICO: los bloques para esta microscopa se colocan en el ultra micrtomo (que tiene cuchillas de diamante y vidrio) obteniendo as secciones muy finas llamadas ultrafinas de un espesor entre 200 y 500 manmetros. Estas secciones se recogen en unas estructuras redondas pequeas que son las rejillas. Estas rejillas (de metal, + frecuente el cobre) con los trozos o ultrafinas pegados se contrastan.

D) TINCIN O CONTRASTE M. OPTICO (tincin): antes de empezar la tincin hay que quitar la parafina del tejido ya que esta parafina no es hidrosoluble. As que hay que introducir el porta en xileno quitando la parafina, llamado desparafinar. A continuacin se hidrata con alcoholes de concentracin decreciente desde xileno pasando por alcoholes hasta llegar a agua. Ya esta el tejido preparado para ser coloreado con hematoxilina y eosina pasndolos a agua para lavar el colorante. Debemos sellar el tejido para quitarle el agua y dejarlo conservado (EUKIT, DPX). Para esto se utilizan blsamos que no son solubles en agua a si que debemos deshidratar el tejido y luego aclarar en xileno que si es soluble en los blsamos. Echamos blsamo y colocamos encima otro cristal mas pequeo llamado cubre. Con esta tincin las estructuras biolgicas son resaltadas mediante colorantes capaces de fijarse selectivamente sobre ellos segn su afinidad especifica, relacionada con su naturaleza qumica. Existen varios tipos de tinciones: Tinciones vitales: teir clulas vivas. De rutina: la tincin de hematoxilina y eosina. Mediante esta tincin se puede demostrar la relacin entre clulas tejidos y orgnulos. Especiales: se tie una estructura en particular de la clula. (Ej. Tcnicas histoqumicas). Clasificacin de colorantes: Segn su origen: Naturales: tomados del medio natural Artificiales: fabricados Segn su composicin: cidos: eosina: tien elementos bsicos como citoplasma de un color rosa anaranjado. Bsicos: hematoxilina: tien elementos cidos como el ncleo de color violeta. Eosina y hematoxilina se emplean juntas al realizar una tincin para ver la clula entera. Metacromticos: tincin diferente a la del colorante utilizado, esta propiedad se llama metacromasia y el colorante cambia su color cuando acta sobre ciertos componentes celulares. Azul de toluidina (ms importante) es azul pero cuando se pone en contacto con sustancias o elementos metacromticos se vuelve violeta. Tie molculas cargadas negativamente, molculas de alto peso molecular y esteres de sulfato (glucosalinoglicanos). Mecanismos de coloracin: 1. Disolucin: se emplean colorantes liposolubles adems el tejido se fija por congelacin. Sirve para teir lpidos o grasas. Posee la propiedad de que son ms solubles en los lpidos que el solvente que los

contiene por eso tienden a abandonar la solucin para incorporarse a los lpidos del tejido. Colorantes: Sudan III: tie lpidos de color rojo Sudan IV: tie lpidos de color negro Tetraxido de Osmio: tie lpidos de negro Cuando estos no se utilizan y se cambian por tcnicas convencionales de tincin los lpidos del tejido se disuelven debido a los alcoholes de manera que se observan huecos blancos por la disolucin de las grasas llamada visin negativa de las grasas. 2. Impregnacin: se emplean metales como la plata, el plomo y el osmio utilizados en forma de xidos o de sales los cuales son reducidos por los componentes celulares precipitando en forma de metales insolubles. El ms utilizado es la plata, entonces hablamos de impregnaciones argnticas: Gomori (especifica para fibras de reticulita), Reticulina y Verhoeff (para fibras elsticas) dan precipitados negros. Clases de tinciones segn el numero de colorantes: Monocromicas: un colorante Policromicas: varios colorantes (ticrmicos). Ticrmico de Masson: tie de color verde sobre toda fibra colgena de tejido conjuntivo. Ticrmico de Mallory: tie de color azul las mismas fibras colgenas. M. ELECTRONICO (contraste): No se utilizan colorantes, no se observan colores solo blancos, grises y negros. Se utilizan sales de metales pesados para contrastar el tejido. -Para M. Electrnico de transmisin: Acetato de uranilo Citrato de plomo -Para M. Electrnico de barrido: Se sombrea la mezcla con carbono y con platino.

B) METODOS DE ESTUDIO DE LA COMPOSICIN QUIMICA DE LA CELULA (estudian los componentes qumicos del interior de la clula). Tcnicas Histoqumicas: 1. Identificacin de aldehdos: Reaccin plasmal: para poner de manifiesto los aldehdos libres de la clula. Feulgen: para poner de manifiesto el ADN. PAS (cido peridico de Schiff): pone de manifiesto los hidratos de C. PAS +: con hidratos de C PAS -: sin ellos Resultado: cuando hay aldehdos se observa color rosa fuerte y en las tres tcnicas se utiliza el reactivo de Schiff (incoloro). Este es la fuchsina decolorada con anhdrido sulfuroso. Reaccin plasmal: sencilla, si en el tejido estudiado hay aldehdos libres reaccionaran con el reactivo de Schiff produciendo un color rosa fuerte. Feulgen: se produce en el tejido una hidrlisis cida con cido clorhdrico (HCL) con lo cual quedan grupos aldehdos libres, estos grupos son tratados con el reactivo de Schiff vindose el color rosa fuerte. PAS: se realiza una hidrlisis con cido peridico quedando aldehdos libres que se ponen de manifiesto con el reactivo de Schiff y que deja de nuevo el color rosa fuerte. 2. Identificacin de Enzimas (proteinas que manipuladas se desnaturalizan y se destruyen por ellos no se pueden fijar): El tejido se fija por congelacin. Las 2 tecnicas ms importantes: Fosfatasa cida: tie enzimas marrn oscuro. Fosfatasa alcalina: las tie de negro. Se utiliza un sustrato sobre el que acta la enzima que hay en la clula cuya presencia queremos poner de manifiesto. Tcnicas Auto radiogrficas: se utilizan sustancias radiactivas (como istopos radiactivos) que tienen afinidad a un determinado compuesto celular. Principales Istopos: Trimidinatrinitada: afn con ADN Uridinatrinitada: afn con ARN Se coloca la clula en la sustancia radiactiva para enmarcar algn componente. Se lava y se coloca en parafina. Se corta y se coloca en un porta en una emulsin fotogrfica que tiene cristales de bromuro de plata. El porta se revela como si fuera una foto. El cristal de bromuro de plata sobre el que ha incidido se transforma en un filamento de plata mientras que los cristales sobre los que no ha incidido ningn istopo desaparecen.

Al final al M. ptico observamos pequeos puntos que son los filamentos de plata. Al M. Electrnico veremos los filamentos de plata perfectamente. Tcnicas Inmunocitoqumicas: (base-antgeno-anticuerpo) T. Directa- fluorescencia T. Indirecta- PAP (peroxidasa-antiperoxidasa) Para M. Electrnico: 1. Tincin negativa: suspensiones de clulas 2. Sombreado: material inorgnico y suspensiones. 3. Criofractura: material biolgico. 1. Tincin negativa: no se utilizan cortes sino suspensiones. Sobre la rejilla se coloca la gota de suspensin de clulas la que se coloca una capa de cido fosfotnstico que se mete por todos los orificios de la clula. Como resultado veremos el fondo y los orificios de color ya que se han acumulado los metales pesados por tanto los electrones chocan se dispersan sin atravesar la muestra. El material lo veremos brillante ya que los electrones pueden atravesarlo al no depositarse sobre l metales pesados. Al final nos queda algo parecido al negativo de una foto. 2. Sombreado: se observa con detalle la superficie de partculas muy pequeas. Se utiliza una campana al vaco. En un lado de esta tenemos una platina en cuyo borde se deposita la muestra sobre una rejilla con soporte de carbono. Al otro lado de la campana hay unos electrodos hechos de diferentes metales (platino, carbono). Los electrodos se calientan haciendo que le metal incida sobre un lado de la muestra. Seguidamente se disolvemos el material biolgico quedndonos un molde de platino o del metal llamado replica. A veces se necesita reforzar la replica depositando adems del metal una capa continua de carbono y enzima la replica. 3. Criofractura: la muestra se coloca sobre un soporte y se introduce en nitrgeno lquido con lo que se congela proceso llamado cro fijacin. A continuacin la muestra congelada se mete en una campana con una cuchilla que le da un golpe seco a la muestra que se fractura hacindolo siempre por el sitio ms dbil. Despus sobre una de las caras de fractura se deposita una capa continua de carbono, a continuacin se realiza un sombreado de platino y por ltimo se realiza la rplica. -Congelacin grabado: congelacin y corte de cuchilla separndose por la membrana a nivel de la bicapa lipdica. Despus se aumenta la T de manera que el hielo de superficie de fractura se sublima (slido a gas) con lo que las partculas que estn en la zona de fractura quedan mucho ms marcadas.

Se deposita una pelcula continua de carbono y sobre esta se sombrea con platino para obtener la replica disolviendo la materia orgnica. Fraccionamiento celular: sirve para separar los distintos orgnulos de una clula, para ello las clulas se trituran y se centrifugan varias veces. En cada centrifugacin se separa un orgnulo diferente de la clula (1 ncleo). Se observa a la velocidad a la que sedimenta cada orgnulo pudiendo saber el coeficiente de sedimentacin expresado en unidades S (Svedberg) (Ej. Ribosomas 70s).

LA MEMBRANA PLASMTICA
Definicin: es una envoltura continua que rodea a la clula y la separa del medio externo. Se caracteriza primero porque no se observa al microscpico ptico solamente con el electrnico, segundo es una estructura semipermeable (permite el paso de unas molculas pero no de otras), tercero todas las membranas biolgicas tienen una estructura general como son ensamblajes de lpidos y protenas, cuarto es una capa muy delgada de aproximadamente 75 A de espesor. Por ltimo al M. electrnico se observa con una estructura trilaminar que presenta 2bandas oscuras y una clara intermedia lo que se llama unidad de membrana. Con criofractura la membrana plasmtica se fractura a nivel de la bicapa de lpidos separndose en 2 caras de fractura, la externa llamada emimembranaexoplasmica y la interna llamada emimembranaprotoplasmica. La externa da al exterior de la clula y la interna es la que da hacia el citoplasma. Composicin qumica: hay que aislarla del citoplasma para realizar su estudio. Despus se proceder a su anlisis con mtodos bioqumicos y biofsicos. La membrana ms fcil de aislar es la de entrocito humano (por ello la mayora de los datos obtenidos son de ella). Esta contiene un 52% de protenas, un 40% de lpidos y un 8% de hidratos de carbono. Las molculas lipidicas son las mas pequeas mientras que las protenas son de gran tamao. Los hidratos de carbono son cadenas de oligosacaridos y se encuentran siempre asociados a protenas o a lpidos formando glucoproteinas o glucolipidos. Lpidos: molcula de naturaleza antiptica es decir que poseen un extremo polar hidrofilito y otro no polar hidrofobito. En ambiente acuoso forman micelas que son unas estructuras esfricas o bien bicapas. En membrana plasmtica se encuentran siempre formando bicapas. Tipos: -Fosfolipidos (estn en las dos caras) Externa: fosfatidil colina Interna fosfatidil serina o fosfatidil inositol. -Esfingolipidos: esfingomielina (cara externa). -Esteroles: colesterol (ambas caras). Fosfolipidos: tienen una cabeza esfrica polar e hidrofilita de la que parten 2 colas hidrocarbonadas e hidrofbicas que son cadenas de cidos grasos. Una de las colas es recta debido a que esta formada por cidos grasos saturados (sin dobles enlaces) mientras que la otra se encuentra ligeramente flexionada debido a que esta formada por cidos grasos insaturados (con dobles enlaces). En la parte superior de las dos colas se sita el colesterol lo que hace que esta regin sea mas rgida, mientras que los extremos no tiene colesterol por lo que son regiones ms fluidas. Colesterol: es muy abundante, posee una cabeza polar y una anillo no polar. Por cada molcula de fosfolipido hay una molcula de colesterol. En la bicapa lipidica su grupo polar se sita junto a la cabeza del fosfolpido y el anillo inmoviliza parte de las colas del fosfolpido (superior) dejando el resto de las colas flexibles.

Movilidad de los lpidos: No son estticos sino que presentan movimientos dentro de la bicapa. Difusin lateral: dos lpidos de la misma cara de bicapa que estn juntos se intercambian el uno por el otro. Flexin: las cadenas de cidos grasos se flexionan Rotacin: el lpido gira sobre si mismo Flip-Flop: el lpido que esta en una cara de la bicapa se intercambia por otro de la otra capa. Se produce gracias a las enzimas flipasas. Importancia de la fluidez de la membrana: Permite interacciones dentro de la propia membrana, por otro lado interviene en el movimiento celular en el crecimiento y divisin celular. Es importante a nivel de las uniones intercelulares en el proceso de secrecin y en el proceso de endocitosis. Distribucin de los lpidos de membrana: Se diponen de forma asimtrica, no son los mismos en las dos caras de la membrana. En la cara externa (exoplamica) existen fostolipidos con grupo terminal colina mientras que en la cara interna o protoplasmita posee el grupo terminal amino. PROTEINAS: Estructura: son antipticas (regin polar y regin no polar). No se disponen al azar sino que se orientan de forma particular dentro de la bicapa. Su distribucin es asimtrica. Algunas sirven de receptores, participando en procesos de reconocimiento y adhesin celular. Otras actan como transportadoras, existen molculas dentro y fuera de la celula que deben entrar o salir no siendo posibles sino se unen a estas protenas. Otras estn relacionadas con el citoesqueleto incluso con otras clulas adyacentes y tb presentan movimientos dentro de la bicapa. Clasificacin: Proteinas integrales o transmembrana: Incluidas en el interior de la bicapa, atravesndola. Son liberadas solo por agentes que desordenen la bicapa (detergentes). Generalmente asociadas a lpidos. Son insolubles en medios acuosos. Las dos ms importantes son la glicoforina y la banda III. Proteinas perifericas: Se encuentran en la periferia de la bicapa tanto en cara externa como interna. Son liberados por agentes que dejan la bicapa intacta como son las soluciones salinas, son por lo tanto protenas fciles de extraer. Generalmente estn asociados a lpidos y protenas integrales. Son solubles en medios acuosos. El ms importante es la espectrina.

HIDRATOS DE CARBONO Son el componente minoritario. Forman una cubierta en la cara externa de la membrana, el glucocalix. No existe en la cara interna de la membrana por lo tanto la distribucin de los hidratos de C. en la membrana es asimtrica. Se encuentran unidos covalentemente a protenas, formando las glucoprotenas y unidos a lpidos formando los glucolpidos. Adems el glucocalix es PAS + (se teir rosa fuerte con reactivo de Schiff). Funciones del glucocalix: Responsable de la selectividad en la incorporacin de molculas de bajo peso molecular a la clula. Adems estabiliza a la membrana. Interviene en los fenmenos de reconocimiento (durante el desarrollo embrionario sobre todo). Presenta propiedades inmunitarias, siendo responsable de los distintos grupos sanguneos. Se localizan en el glucoprotenas como CADHERINAS O INTEGRINAS de algunas uniones intercelulares. Son lugares de anclaje de enzimas. Modelos de membrana: Existen muchas teoras pero el modelo ms aceptado es el modelo de mosaico fluido estudiado con tincin negativa y criofractura. 1. Lpidos y protenas se encuentran dispuestos en un mosaico situndose en una configuracin estable de baja energa libre. 2. Las membranas son estructuras fluidas donde lpidos y protenas se mueven dentro de la bicapa. 3. Las membranas son asimtricas en cuanto a sus componentes (lpidos, protenas, hidratos). Renovacin de la membrana: Es dinmica, esta continuamente renovndose a partir de las vesculas del complejo de golgi. Estas vesculas van a formar membrana plasmtica. Por otro lado a travs de la endocitosis se pierde membrana, lo que mantiene un equilibrio. Diferenciaciones de la membrana: Existen regiones de la membrana adaptadas a diferentes funciones: adsorcin, secrecin, transporte de lquidos, adherencia mecnica, interacciones con clulas adyacentes y con la matriz extracelular. a) Diferenciaciones de la superficie libre (de la parte apical de la clula): - Microvellosidades: evaginaciones de membrana que aumentan la superficie apical de la clula. Suelen tener un esqueleto de actina. Con borde en chapa (en forma de dedo, agrupadas de igual tamao y paralelas). M. banales, aisladas, escasas, irregulares y desiguales. Borde en cepillo, agrupadas desordena das, largas e irregula res.

Estereocilios: invaginaciones de la membrana plasmtica largas e irregulares que no presentan esqueleto de actina.

Cilios

b) Diferenciaciones de la superficie basal: - Invaginaciones basales: evaginaciones de la membrana plasmtica en la porcin basal de la clula donde se disponen mitocondrias (Laberinto basal de Rhodin). c) Diferenciaciones de la superficie lateral: - Espacios intercelulares: espacios entre clulas vecinas. - Interdigitaciones: entrantes y salientes de la superficie de una clula que se acoplan con los entrantes y salientes de la clula vecina. - Complejos de unin: estructuras que unen dos clulas vecinas o bien unen la clula con la matriz extracelular. Tipos segn disposicin: Zonula: tiene forma de cinturn que rodea a la clula. Fascia: placa grande de forma irregular. Macula: forma puntiforme redondeada u oval.

Tipos de uniones: Uniones estrechas: - Znula ocludens (tipo de unin znula en forma de cinturn). Uniones comunicantes: - Unin GAD, Nexos o unin en hendidura (tipo fascia). Uniones adherentes: - Desmosoma puntiforme o macula adherens (tipo macula). - Desmosoma en banda o znula adherens (tipo znula). - Hemidesmosoma (macula). ZONULA OCLUDENS Forma un cinturn que rodea la clula (znula). Se localiza en el borde apical de las clulas epiteliales. Las membranas de las clulas vecinas que se van a unir parece que se fusionan en puntos. No existe espacio intercelular entre las clulas vecinas que se unen. Presencia de protenas transmembrana en la zona donde establecen contacto las dos membranas de las clulas vecinas. Estas protenas forman las hebras de cierre. Es una unin impermeable. Impide el paso de macromolculas dejando solo pasar los impulsos nerviosos.

UNIN GAD Formada por estructuras hexagonales en forma de cilindros llamados conexones, cada uno formado por 6 subunidades que se disponen en una de las membranas y otras 6 subunidades que se disponen en la membrana vecina. Cada una de estas subunidades es una protena transmembrana llamada conexina. Los conexones dejan en su interior un canal (centro) de 2 a 3 nanmetros a travs del cual pasan las molculas de peso molecular inferior a 1000 dalton. Existe en esta unin un intercambio elctrico y qumico, interviene en la sincronizacin de la contraccin del msculo cardiaco y del liso y tb interviene en las sinapsis elctricas. Los conexones pueden abrirse o cerrarse. (si la concentracin de Ca++ aumenta se cierran y si disminuye se abren).

DESMOSOMA PUNTIFORME Entre las membranas de las clulas que se van a unir existe un espacio intercelular de 25 a 35 nanometros. Este esta ocupado por unas proteinas que son las Cadherinas. Esta unin esta formada por 2 placas citoplasmticas densas de forma esfrica, son protenas y estn localizadas debajo de la membrana de cada una de las clulas que se unen. La composicin de estas placas es diferente a la del desmosoma en banda formadas por la protena desmoplaquina. A estas placas se anclan filamentos intermedios que son tonofilamentos de queratina.

HEMIDESMOSOMAS Son como medio desmosoma. Estos unen una clula con la matriz extracelular mediante unas protenas llamadas integrinas. La placa citoplasmtica es solo una tb redonda.

DESMOSOMA EN BANDA O ZONULA ADHERENS Forma un cinturn alrededor de la clula, debajo de la zonula ocludens (parte +superior) Existe un espacio intercelular de 25 a 30 nanometros ocupado por protenas de unin transmembrana, cadherinas. Debajo de la membrana existe una placa densa continua a la que se anclan las cadherinas y tb los microfilamentos de actina. Esta placa densa esta formada por unas protenas llamadas cateninas que son de tres tipos alfa, beta y gamma.

PARED CELULAR VEGETAL Esta situada en la superficie externa de clulas vegetales. Forma un exoesqueleto que soporta mecnicamente a los tejidos vegetales, dndoles rigidez, adems protege a la clula y a los tejidos de daos fsicos como accidentes mecnicos. Tb la pared mantiene el equilibrio osmtico y permite el paso de sust. a travs de ella interviniendo en procesos como la adsorcin, la transpiracin y la secrecin. La pared tb es una barrera que protege a la clula de la infeccin bacteriana, patgenas o de hongos. Crece en contacto intimo con la membrana plasmtica y fuera de ella. No existe en tejidos reproductores ni en el endosperma. Composicin quimica: Polisacaridos: Azucares con 6 carbonos: glucosa (+importante, celulosa), galactosa, manosa, mucosa, rhamnosa, ac. galacturnico y ac. glucurnico (pectinas). GLUCOSA Varios monmeros de glucosa se unen por enlaces beta 1-4 formando largas cadenas lineales de aproximadamente 2000 a 20000 unidades de glucosa. Estas tienen forma de cinta y forman la molcula de celulosa (C6 H10 O5). PECTINAS Son polisacridos ramificados muy hidratados que tienen numerosos residuos de cidos galacturnicos y glucurnicos. Estos acidos crean altas cargas negativas importantes para la formacin de uniones electroestticas con las extenzimas. Su estructura tan ramificada le permite atrapar agua lo que contribuye a que la matriz de la pared este en estado de gel sirviendo por lo tanto para hacer gelatinas y mermeladas. Ser la pectina muy abundante encontrndose en forma de sales de Ca y Mg. AZUCARES CON 5 C (xilosa + arabinosa= HEMICELULOSA) HEMICELULOSA: Formada por polisacridos ramificados. Presenta un eje de glucosa o xilosa del cual parten cadenas laterales de arabinosa, manosa, galactosa o tb xilosa sino forma el eje. Tiene forma de cinta y debido a su ramificacin hace que la matriz tenga consistencia de gel. Adems se dispone formando una cubierta que rodea a microfibrillas de celulosa unindose a estas por puentes de H.

PROTEINAS (ricas en hidroxiprolina) - Glicoproteinas: resultan de la unin de la protena con un hidrato de C. son protenas estructurales que forman la estructura del la pared. 1. Extensinas 2. Lectinas 10 a 20% de Enzimas: participan en la sntesis de la pared en su formacin y en su crecimiento.

EXTENSINAS Contienen gran cantidad de hidroxiprolina y tb de serina y de lisina. Estos aminocidos producen carga positiva en la pared lo que le da un carcter bsico. Adems tienen una alta proporcin de hidratos de C. Son insolubles y se unen a la pectina por atraccin cnica, tb se unen entre si por enlaces covalentes. LECTINAS Glicoprotenas solubles cargadas negativamente que contribuyen a mantener la estructura de la matriz. Lignina: unin de alcoholes derivados de la fenilalanina. Es densa e insoluble. Adems es un material plstico de gran resistencia. Tienen tb dureza e impermeabilidad. Se encuentra sobre todo en paredes secundarias. Componentes grasos: cutina, suberina y ceras, son cidos grasos insaturados. Algunos como la cutina o ceras se encuentran en la superficie externa de las plantas. Sustancias diversas: sales minerales (silicatos y carbonatos), taninos, resinas y agua). ORGANIZACIN MACROMOLECULAR DE LA PARED (FIBRAS + MATRIZ) FIBRAS Microfibrillas de celulosa: (+abundante) forma aproximadamente de el 20 a 30% de la pared. Las molculas de celulosa tienen forma de cinta y se empaquetan paralelas unas con otras en nmero de 60 a 70 para formar las microfibrillas. Cada molcula de celulosa se une a su vecina por puentes de H. Son insolubles. Formacin de microfibrillas de celulosa: las molculas de glucosa que van a formar celulosa as como los monosacridos que van a formar la hemicelulosa se sintetizan en el complejo de golgi. La celulosa va a ser sintetizada en la superficie externa de la membrana. En esta existe un complejo enzimtico llamado celulosa sintetasa que forma unas rosetas y cada roseta esta formada pro 6 subunidades que son protenas transmembrana. Estos complejos enzimticos van cojiendo molculas de glucosa del citoplasma, las unen unas con otras y forman cadenas de molculas de celulosa. Todas las molculas de celulosa las empaqueta y forma microfibrillas las cuales quedan en la superficie externa de la membrana. Debajo de la membrana plasmtica en el citoplasma existen microtbulos que son los que indican la direccin de la formacin de las molculas de celulosa. Adems conforme la microfibrilla de celulosa va creciendo, los complejos enzimticos se van moviendo por la membrana. Microfibrillas de callosa: se dan en levaduras y hongos. Son polmeros de glucosa que forman cadenas lineales unidas por enlaces beta 1-3. Micofibrillas de quitina: se encuentran en hongos, son polmeros de N.acetil glucosalina que forma cadenas unidas por enlaces beta 1-4. Xilosa, manosa y glucosa: se dan en algas

Manosa: en dtiles y en el caf. MATRIZ Polisacridos: Hemicelulosa Pectina Glucoprotenas: Extensinas Lectinas Lignina Componentes grasos: Cutina Suberina Ceras Sustancias diversas: S. minerales (silicatos y carbonatos) Taminos Resinas Agua

IDENTIFICACIN AL MICROSCOPICA DE LOS COMPONENTES DE LA PARED (TEIDOS). Celulosa: se pone de manifiesto con cloruro de zinc (violeta), hematoxilina (violeta) o verde luz (verde). Lignina: con cloruro de zinc (amarilla), verde yodo (verde) o saframina (rojo) Pectina: rojo de rutenio (rojo). Componentes grasos: sudan III (rojo).

ESTRUCTURA DE LA PARED Lamina media Pared primaria Pared secundaria LAMINA MEDIA Es el cemento que sujeta las clulas individuales unas con otras para formar los tejidos. Al M.O es difcil de observar, sin embargo se observa muy bien junto a los conjuntos de clulas donde el material intercelular es ms abundante. Esta formada por pectina rica en Ca y Mg y en los tejidos leosos tb aparece lignina. Es una sustancia amorfa, coloidal y sin actividad ptica con luz polarizada, se dice por tanto que es istropa, no poseen por lo tanto la ordenacin de sus molculas. PARED PRIMARIA Es la parte que se desarrolla en una clula joven y la nica en muchos tipos de clulas. Esta formada por un 5% de celulosa poco polimerizada, tiene tb pectina, hemicelulosa aproximadamente un 50% y tb algunas protenas. A veces tb presenta lignina. Al igual que la lamina media es istropa es decir tampoco posee una ordenacin de sus mol. La pared primaria se forma antes de que la clula haya dejado de crecer, por lo que pasa por un periodo de nacimiento en superficie que es lo que se llama crecimiento primario.

Este periodo de crecimiento puede ser anterior o simultaneo con el crecimiento en espesor que es lo que se llama crecimiento secundario de la planta. Es tpica de clulas vivas, dndose por tanto en tejidos como los meristemos, la epidermis, el parnquima, el colenquima y el floen. Se ha visto que los cambios de espesor en su crecimiento son reversibles. En esta pared los microfilamentos de celulosa se encuentran entrecruzados lo que permite que la clula pueda crecer en superficie. Presenta un crecimiento en grosor por intususcepcin y adems posee comps de punteadura. PARED SECUNDARIA Se forma en la superficie interna de la pared primaria. Esta formada desde un 50% a un 90% de celulosa, un 25% de hemicelulosa y lignina. Es mucho ms densa y menos hidratada que la pared primaria. Es anistropa ya que presenta una ordenacin de sus molculas. Comienza a desarrollarse cuando la clula ha dejado de crecer, por lo tanto esta pared no tiene crecimiento en superficie. Se encuentra sobre todo en clulas muertas como las clulas del esderenquima y del xilema. En ella los microfilamentos de celulosa se disponen de forma ordenada y paralela y poseen crecimiento en espesor por aposicin. Posee punteaduras. En la mayora de las paredes secundarias se pueden distinguir 3 capas: - Capa externa, en contacto con la pared primaria. - Capa central, es la capa ms gruesa. - Capa interna, en contacto con la membrana del protoplasto. En estas tres capas los microfilamentos de celulosa se orientan de forma diferente siguiendo generalmente un patrn helicoidal. FORMACIN DE LA PARED Durante la mitosis, al final de la anafase los microtbulos del huso se encuentran rodeados por un material denso denominado fragmoplasto. Los microtubulos de este dirigen las vesiculas procedentes del golgi hacia el plano ecuatorial Existen entonces unas vesculas que contienen en su interior los precursores de la matriz. Una vez que las vesculas estn en el plano ecuatorial comienzan a fusionarse unas con otras formando lo que se llama la placa celular. Esta comienza a formarse en el centro del plano ecuatorial y luego se extiende hacia los laterales de la clula hasta que contacta con la pared de la clula madre formndose las dos clulas hijas. Conforme se va formando la placa celular quedan atrapadas en ella cisternas de retculo endoplasmatico los cuales van a dar lugar a los plasmodesmos. La placa celular va a formar la lmina media y luego cada clula hija va a formar la pared primaria. Una vez se a terminado el crecimiento celular algunas clulas forman la pared secundaria.

CRECIMIENTO DE LA PARED Crecimiento en espesor: - Por aposicin: cuando los nuevos materiales se colocan ordenadamente unos sobre otros de forma centrpeta. - Por intususpensin: los nuevos materiales se insertan en la pared intercalndose entre las partculas ya existentes. Crecimiento en superficie o longitud: Se da solamente en la pared primaria. La pared primaria es rgida y cuando se va a producir este crecimiento se produce una estimulacin por auxinas que activan una bomba de H+ que hay en la membrana, como consecuencia se produce una entrada de H+ al citoplasma. El citoplasma se hace cido (PH entre 3y4). Este PH cido hace que se produzca una activacin de las enzimas hidroliticas que hay en el interior de la clula que son las expansinas. Estas enzimas hacen que se produzca la ruptura de los protones de H entre los microfilamentos de celulosa como consecuencia se produce un aflojamiento de las micofibrillas de celulosa debido a el aumento de la presion de turgencia, de manera q las micofibrillas se separan mas dejando huecos. Cuando estos huecos se rellenan de hemicelulosa, pectina y nuevos microfilamentos de celulosa se reducirn por lo tanto el crecimiento en superficie o elongacin de la pared se producir. DIFERENCIACIONES DE LA PARED - Plasmodesmos - Campos de punteaduras - Punteaduras PLASMODESMOS Durante la formacin de la pared quedan atrapados en la placa celular cisternas del retculo endoplasmtico los cuales van a formar canales que comunican dos clulas vecinas, estos son los plasmodesmos. Se encuentran sobre todo en clulas jvenes aunque tb pueden aparecer en clulas adultas. Pueden aparecer en hilera o bien distribuyndose de forma irregular. Con M.E el plasmodesmo aparece como un conducto cilndrico revestido de membrana. Este conducto tiene un dimetro de 20 a 30 manmetros. En el su centro existe una estructura cilndrica, estrecha que se denomina desmotbulo. Esta parece ser una continuacin de las membranas del retculo. Dentro de este desmotbulo algunos cientficos han podido observar un bastn denso pero esto esta por confirmarse. Entre el exterior del demotbulo y la cara interna de la membrana plasmtica existe un anillo que es de citosol o matriz citoplasmtica. A menudo los bordes de los plasmodesmos presentan un estechamiento que tiene una gran importancia ya que regula el flujo de molculas. A travs de los plasmodesmos circulan lquidos, solutos y macromolculas adems el incremento de la concentracin en el citoplasma inhibe el transporte a nivel del plasmodesmo. Los plasmodesmos se pueden comunicar entre si formndose plasmodesmos ramificados. CAMPOS DE PUNTEADURAS

Es una depresin de la pared primaria que queda atravesada por un grupo muy numeroso de plasmodesmos. PUNTEADURAS Son diferenciaciones de la pared celular que favorecen los intercambios de sustancias entre clulas. Se da en clulas que tienen pared secundaria. Una punteadura es un adelgazamiento de la pared celular que generalmente se corresponde con otro complementario y al mismo nivel en la clula vecina. Existen tres tipos: - Sin pared secundaria a nivel de la punteadura: Punteadura simple Par de punteaduras simples - Con pared secundaria que forma un reborde: Punteaduras areoladas Punteaduras simples: solo existen en una clula pero no en la vecina. Par de punteaduras simples: la punteadura esta en las dos clulas vecinas y adems son simtricas. Punteaduras areoladas: Par de punteaduras areoladas: existen punteaduras areoladas en las 2 clulas. Par de punteaduras semiareoladas: cunado en una celula hay una punteadura areolada y en la vecina una simple. Punteadura areolada simple: aparece solo una punteadura en una celula y en la vecina no. A veces en estas punteaduras existe un engrosamiento en forma lenticular de la pared primaria de la punteadura. Este engrosamiento se conoce con el nombre de toro o torus. En el borde del toro la lmina media y la fina pared primaria se hidrolizan quedando solamente finas fibrillas de celulosa que no poseen matriz. Estas se disponen en forma de radios y unen el toro al borde de la punteadura y adems le dan movilidad. Estas fibrillas se llaman margen de la punteadura. La funcin del toro es actuar como vlvula o tapn teniendo gran importancia cuando existen diferencias de presin. -Cuando las traqueas estn llenas de sabia ascendente el toro se encuentra en su sitio existiendo un transporte de la sabia entre las dos clulas. Por otro lado si estn vacas la disminucin de presin hace que el toro se desplace quedando entonces el paso cerrado.

Las punteaduras segn su forma y distribucin pueden ser de varios tipos: Escalariformes: son alargadas y en forma de peldaos de una escalera. Opuestas: redondeadas y de distribucin horizontal. Alternas: redondeadas y de distribucin diagonal. Se puede tener una mezcla de estos tres tipos de punteaduras (escalariforme opuesta, escalariforme alterna).

TEMA 3
1. LA MATRIZ CITOPLASMTICA (citosol o hialoplasma). Definicin: es el medio interno de la clula en donde se encuentran dispuestos los orgnulos. Es un medio reductor, neutro en clulas vivas (PH-68), es acidfilo en clulas fijadas y tiene una viscosidad variable. Al M.O se observa vaco y homogneo y al M.E es granular homogneo y poco denso. Composicin qumica: Funciones: Sntesis de protenas (tb el ret. Endoplasmatico) Vas metablicas de la glucosa6fosfato. Gliclisis anaerobia Sntesis de glucgeno Va de las pentosas Glucogenolisis Sntesis de algunos aminocidos, hexosas, cidos grasos y nucletidos. 85% de agua Contiene enzimas de gliclisis anaerobia. Tiene ARN de transferencia y mensajero. Monosacridos Aminocidos Nuclesidos y nucletidos Compuestos del metabolismo intermedio. Iones.

2. INCLUSIONES CITOPLASMATICAS (PROTOPLASMA) Estructuras inertes de la clula sin capacidad vital para tener continuidad biolgica (estructuras muertas). Clasificacin: Orgnulos de reserva: - Glucogeno - Lpidos - Almidn (vegetales) Pigmentos: - Melanina (melanocitos) - Lipofuscina - Hemosiderina - Fernitina - Carotenoides Cristales

Orgnulos de reserva GLUCOGENO

En las clulas animales los hidratos de C. se almacenan en forma de glucogeno. Este es transformado por la clula segn sus necesidades para producir glucosa la cual va a proporcionar energa a la clula. El glucogeno se encuentra en las fibras musculares esquelticas y en hgado. Adems es PAS+. Con M.E se ha visto que el glucogeno se puede presentar en forma de partculas: Alfa- con forma de roseta Beta- pequeos puntitos Gamma- filamentos Se puede encontrar difuso en la clula o prximo al retculo endoplasmtico liso. LIPIDOS Las clulas almacenan los lpidos en forma de gotitas de triglicridos. Estas gotas no presentan membrana, solamente estn recubiertas externamente por filamentos intermedios de vimentina. En preparaciones histolgicas para M.O los lpidos se disuelven con los reactivos empleados en la deshidratacin dejando en su lugar vacuolas claras y vacas, lo que se denomina visin o tincin negativa de las grasas. Con el M.E los lpidos se observan en forma de estructuras esfricas cuya densidad vara del gris al negro dependiendo del grado de instauracin de los cidos grasos que lo formen. Su funcin es energtica. Se observan en el hgado y en clulas adiposas, adipositos. Como resultado de su metabolismo se origina en el citoplasma de algunas clulas unas estructuras laminares concntricas que de llaman figuras de mielina. Se ponen de manifiesto con colorantes especficos para ellos como Sudan III (rojo) y tetraoxido de osmio. ALMIDN Solo aparece en clulas vegetales sobretodo en cereales y patata. Son sustancias anistropas, tienen forma esfrica ovalada o angular. Se observa en el interior de los cloroplastos y en unos plastos especiales, los amiloplastos. Pigmentos MELANINA Tienen un color marrn pardo negruzco, se sintetiza en los melanocitos. Se encuentra unidad a la protena estructural de unos orgnulos densos elipsoideos rodeados de membrana, los melanosomas. Estos se forman en el complejo de golgi. LIPOFUSCINA Es de color pardo amarillento. Aparece en forma de grnulos irregulares. Tiene un contenido heterogneo. Se tien con colorantes lipiditos. Son PAS+ y fosfatasa cida positiva. En clulas viejas son muy numerosos. Se les ha considerado como los estadios finales de la actividad autofagica de los lisosomas secundarios. Son por lo tanto residuos no digeribles por la clula por eso se les ha llamado cuerpos residuales.

HEMOSIDERINA Se encuentra en el hgado, bazo y medula sea.

Es de color pardo dorado y rico en hierro. Aparece en el citoplasma de clulas fagocticas que participan en la degradacin de la hemoglobina de los eritrocitos viejos. FERRITINA Es una protena con hierro que se encuentra en el plasma de la sangre CAROTENOIDES Se encuentran en clulas vegetales y animales sobre todo en algunos vertebrados como la rana, peces y reptiles (pero no mamferos). En la piel de estos animales existen carotenoides que se denominan cromatforos: - Melanforos: contienen melanina. Son de color marrn. - Xantforos: de color amarillo. - Eritroforos: de color rojo. Cristales: formas de almacenamiento de protenas. Se encuentran en clulas vegetales y animales. En vegetales pueden ser de oxalato clcico, de sulfato clcico o de slice. Pueden tener diferentes formas: prismticas, redondeadas en forma de roseta y las hay formando drusas. 3. CITOESQUELETO Esta formado por una red tridimensional de filamentos proteicos que se encargan de mantener la forma de la clula as como de sostener y desplazar los orgnulos citoplasmticos. Es una estructura dinmica que participa en el movimiento de la clula. Lo componen: - Microtubulos - Microfilamentos de actina - Filamentos intermedios A) MICROTUBULOS INESTABLES (existencia corta) ESTABLES (existencia larga) Centriolo Cilio Flagelo MICROTUBULOS INESTABLES Estructura y composicin qumica: son estructuras cilndricas huecas de unos 25 nanmetros de dimetro y poseen pared de 4 nanmetros de espesor. En la clula pueden encontrarse aislados formando parejas, dobletes o bien formando tros, tripletes. Los dobletes se dan en le cilio y los tripletes en el centrolo. La pared del microtbulo esta formada por 13 protofilamentos. Cada uno esta constituido por una protena globular llamada tubulina. Esta, esta formada por dos monmeros alfa y beta. Los dos juntos forman un heterodimero por lo tanto los protofilamentos estn formados por heterodimeros de tubulina alfa y beta los cuales se alternan a lo largo del protofilamento. El microtbulo adems es una estructura polarizada, con un extremo positivo y otro negativo en funcin de su capacidad de crecimiento. Es extremo positivo tiene mayor capacidad de crecimiento.

Los microtbulos se encuentran unidos a otras protenas que son los MAPs: protenas asociadas a microtbulos. POLIMERIZACION Y DESPOLIMERIZACIN El microtbulo es una estructura que esta en continuo proceso de ensamblado y desensamblado de heterodimeros de tubulina. Con lo cual esta continuamente creciendo y acortndose. Presentan un extremo + y otro -. En el positivo se aaden heterodimeros a mayor velocidad que los que se liberan y en el negativo se separan ms heterodimeros de los que se aaden. En el positivo adems se aaden heterodimetos que van avanzando a lo largo del microtbulo separndose por el extremo negativo. En el citoplasma los heterodimeros no estn libres sino que estn unidos a una molcula de GTP. Estas uniones se dirigen al extremo positivo y se ensamblan al microtbulo producindose en este momento la hidrlisis del GTP el cual se transforma en GDP por lo tanto los heterodimeros que salen por el extremo van unidos a GDP. Factores que influyen en la polimerizacin y despolimerizacin: 1. La temperatura: 37 grados favorece la polimerizacin pero cuando baja se produce una despolimerizacin. 2. El GTP: heterodimeros unidos a GTP favorecen la polimerizacin pero los que estn unidos a GDP favorecen la despolimerizacin. 3. Concentracin de iones: muchos iones de Mg producen polimerizacin pero muchos iones de Ca despolimerizacin. 4. Ph: 68 aumenta la polimerizacin. 5. MAPs: estabilizan a los microtubulos influyendo en polimerizacin. 6. Droga: Colchizina que impide la polimerizacin. FORMACIN DE MICROTUBULOS Se forman en el centro organizador de microtbulos (MTOC) tb llamado centrosoma. Este esta formado por un material denso relacionado con el centrolo formado por tubulina gamma. Protenas asociadas a microtbulos MAPs: P. Reguladoras: protenas que se unen a microtbulos cuando disminuye la temperatura impidiendo que estos se despolimericen. Se dan sobre todo en peces rticos. Son tres: MAD1A, 1B y 1, 2, 3. P de enlace: se unen por un lado a microtbulos y por otro a otras estructuras. Son dos: P. TAU o P. MAP2. Motores moleculares: son protenas que se unen a microtbulos desplazndose sobre ellos arrastrando vesculas o bien orgnulos: - Quinesina: se desplaza hacia el extremos produciendo el transporte antergrado. - Dineina: se desplaza hacia el extremo- produciendo el transporte retrogrado. - Dinamina: tiene funcin de ATPasa.

FUNCIONES DE LOS MICROTUBULOS

Movimiento de orgnulos y vesculas. Interviene en la morfologa celular siendo los que dan la forma a la clula. Determina la orientacin de las microfibrillas de celulosa en la pared celular. Desplaza pigmentos sobre todo en la piel de anfibios y reptiles. Importantes tb en la mitosis.

MICROFILAMENTOS DE ACTINA Su principal componente es la actina formada por monmeros de actina G que es la globular. Esta estructura tiene forma de pesas y teniendo una parte positiva y otra negativa. Debido a esta diferencia de carga estas pesas se van a ir uniendo unas con otras para formar un cordn helicoidal que es el filamento actina F es decir de actina fibrosa. Esta es la que va a formar el microfilamento de actina. La actina G es por lo tanto la actina no polimerizada y la F la polimerizada. Tb aqu existen protenas asociadas a la actina llamadas ABPs (actin binding protein). Protenas asociadas a la actina: villina, filamina, alfa actinina, tropomiosina Polimerizacin de la actina: Los monmeros de actina G estn libres en el citoplasma y unidos a ATP estn estabilizados por iones Ca Mg y K. El paso de actina G a actina F se produce aumentando la concentracin salina del medio y la hidrlisis del ATP producindose as la polimerizacin. Poseen tb un extremo positivo de crecimiento ms rpido y otro negativo de crecimiento ms lento. En ambos se agregan monmeros de actina G pero en el + se agregan ms que se liberan y en el negativo al contrario. En el positivo se aade actina G unida a ATP y en el negativo sale actina unida a ADP. (ATP-GTP). Cuando el filamento de actina ha llegado a la longitud mxima o a la deseada, en el extremo positivo se aaden unas protenas llamadas de casquete o de remate que son las que terminan el alargamiento del filamento. La polimerizacin de actina queda inhibida por las citocalasinas. FILAMENTOS INTERMEDIOS Formados por protenas fibrosas que forman largos filamentos de gran resistencia. Estructura: el montaje de filamentos intermedios comienza por un monmero que presenta un extremo amino (NH) y otro carboxilo (COOH). 2monomeros se unen helicoidalmente de forma paralela formando un heterodimero. 2 heterodimeros se unen de forma antiparalela formando un tetrmero. Varios tetrmeros se colocan en fila uno detrs de otro y forman un protofilamento. 2protofilamentos se unen dando una protofibrilla. 4 de estas se unen formando el filamento intermedio que es macizo.

MICROTUBULOS ESTABLES

CENTRIOLO: tiene forma de cilindro hueco, la clula puede tener un solo centrolo o bien dos. Cuando tiene dos estos centrolos se disponen de forma perpendicular formando el diplosoma. Los centrolos estn rodeados por un material denso que es el centro organizador de microtbulos. Este se puede concentrar en algunos puntos formando lo que se llama satlites pericentriolares. El centrolo se puede localizar cerca del ncleo y el complejo de Golgi que presenta una regin distal y otra proximal. La distan es la alejada del ncleo y la proximal la cercana al ncleo. La pared del centrolo esta formada por 9tripletes de microtbulos que se encuentran adosados y son los microtbulos A, B y C. Estos tripletes no estn rectos sino que presentan una ligera inclinacin respecto a sus vecinos como si fueran aspas de un molino. Es microtbulo A es completo. Est formado por 13 protofilamentos mientras que el B y el C solo tienen 10 protofilamentos, los tres que les faltan los tienen compartidos. Los tripletes se encuentran unidos por puentes proteicos, puentes que van desde el microtbulo A de un triplete hasta el microtbulo C del triplete vecino. En la regin proximal del microtbulo se observa una estructura tubular central de la cual parten radios que conectan con el microtbulo A de los tripletes. Esta estructura no esta en la zona distal.

CILIO: Esta formado por varias partes: el tallo ciliar, la zona de transicin, el corpsculo basal o kinetosoma y las raicillas filiares. Tallo ciliar: se distingue la membrana plasmtica de la matriz y el axonema con una formula 9+2 y esta formado por microtbulos. Se encuentra dentro del la matriz citoplasmtica. Es una estructura formada por 9 dobletes de microtubulos perifricos y 2 microtubulos centrales. Es una estructura tubular llamada axonema que tiene la formula 9+2 (9 microtubulos perifricos y 2 centrales). Este axonema puede variar en los distintos animales. De los pares de microtbulos perifricos uno de ellos es el A y otro el B. el A es completo, formado por beta protofilamentos mientras que el 13 esta formado por 10 protofilamentos compartiendo 3 con el microtbulo A. Del A parten dos brazos de dineina, uno interno y otro externo. Adems parten puentes proteicos de nexina que comunican el microtubulo A con el microtubulo B vecino. Estos puentes de nexina estn muy separados unos de otros. Por ltimo de los microtbulos A parten radios que van desde el A hasta la vaina central que rodea al par de microtbulos centrales. Estos radios no se encuentran todos a la misma distancia sino que estn separados 24, 32, 40 nanmetros. Los microtbulos centrales son completos (13protofilamentos) y entre ellos hay un puente de comunicacin. Zona de transicin: esta en la parte basal del tallo ciliar. En ella el par de microtbulos central se interrumpe debido a que a este nivel existe una placa densa que se denomina placa basa. Tb a la zona de transicin llegan fibrillas procedentes de microtbulos C del corpsculo basal, estas fibrillas son llamadas fibrillas de transicin. El cuerpo basal: es prcticamente un centrolo ya que posee su misma estructura. Este posee una regin distal y proximal y se encuentra anclado al citoplasma de la clula.

Las raicillas ciliares: son fibras largas que parten de los tripletes del cuerpo basal. Presentan una estriacin transversal en bandas claras y oscuras. No se observan en humanos. Funciones de los elementos ciliares: Races filiares: anclan al cilio al citoplasma. Se estiran y se contraen y estn relacionadas con el batido y la orientacin de los cilios. Formadas por una protena que es la centrina. Puentes de nexina: mantienen el axonema organizado. Brazos de dineina: tienen actividad ATPasa, es decir producen la energa necesaria para el deslizamiento de unos microtbulos sobre otros cuando se produce el movimiento ciliar. Radios y vaina central: regulan la actividad ATPasa de la dinena. FLAGELO: son largos y aislados mientras que los cilios son cortos y agrupados. Adems los flagelos son escasos y los cilios numerosos. Los flagelos se mueven formando hondas y los cilios baten juntos. El flagelo tiene una axonema de formula 9+9+2. En la parte central tiene un axonema 9+2 y rodendolo tiene 9 fibras densas.

TEMA 4
MITOCONDRIA Definicin: 1) Orgnulos presentes en todas las clulas eucariotas que acumulan en forma de ATP la energa liberada por la oxidacin enzimtica de las molculas nutritivas. 2) Organelas rodeadas de 2membranas del tamao aproximado de una bacteria. Contienen ADN y realizan la fosforilacin oxidativa por lo que producen la mayor parte del ATP de las clulas eucariotas. Localizacin: en clulas eucariotas aerobias. Forma: generalmente filamentosas, redondeadas o helicoidales. Tamao: son de 05 micras de ancho hasta entre 2 y 50 micras de largo. Numero: depende del tipo de clulas (como ejemplo se cogen los hepatocitos) 1000-1600 mitocondrias en hepatocitos 300000 mitocondrias en ovocitos 1 mitocondria en flagelados. Distribucin: las mitocondrias estn por todo el citoplasma pero si la clula es especializada las mitocondrias se agruparan en las zonas donde hace falta ms energa (tbulos renales, conos y bastones, espermatozoides y clulas musculares estriadas). Movimiento: estn movindose continuamente, se parten se deforman se fusionan Estructura: (al M.O) son homogneas (Altman: las llamo bioblastos al considerarlos unidad de vida (1884) y Benda las llamo mitocondrias (1897)) (la primera vez que se observaron fue en los tbulos renales) Mito= hilo o filamento Chondrion= granulo Ultraestructura: a partir de 1952 aparece el M.E (Palade) de manera que comienza un mejor estudio. En realidad fueron creados en 1940 por los alemanes para la guerra pero fueron mantenidos en secreto. Tcnicas: (cortes ultrafinos o secciones, tincin negativa y criofractura). - Cortes ultrafinos: La membrana externa esta separada de la membrana interna por la cmara externa o espacio intermembrana. La membrana interna se prolonga en unas cisternas o tmulos llamados crestas que pueden ser laminares o tubulares. Laminares: saquitos aplanados que pueden ser longitudinales o transversales. Tubulares: son tubos que incluso pueden ser triangulares. La matriz mitocondrial: Elementos constantes: (en todos) o ADN en forma de 2 a 6 anillos. o Motorribosomas (70s en levaduras y 55s en vertebrados) o Granulos densos: grandes, oscuros de naturaleza lipdica. Son zonas de acumulo de iones bivalentes (bsicamente calcio). Elementos variables: (no en todos, son especificos) o Proteinas o Glucogeno

o Ferritina (proteina+hierro) Tincin negativa: se vio que en la membrana interna habia una estructura con un tallo de tipo ATPasa y esta (F0F1ATPasa) posee una base Fo, un tallo llamado F1 y una cabeza de 9 nanmetros. Criofractura: hacia los aos 70 se dio su mximo esplendor, se estudio la membrana descubriendo que la interna posea zonas lisas y otras con muchsimas partculas.

ORGANIZACIN MACROMOLECULAR DE LAS MITOCONDRIAS - Membrana externa: Porinas: se dan en la membrana externa de cloroplastos y bacterias. Son un canal proteico transmembrana por el que pueden pasar iones y la mayora de molculas pequeas de 5000 daltons. Estudios importantes han descubierto que las porinas son 3 canales, 3 monmeros formados por protenas. Enzimas: relacionadas con la sntesis de lpidos. Existe un tipo de enzimas que convierten los sustratos lipiditos en formas que son metabolizadas en la matriz (modifican lpidos) - Membrana interna: Proteinas: que llevan a cabo la cadena de transporte de electrones y sus reacciones de oxidacin. (ej. ATPsintasa que forma ATP en la matriz). Protenas de transporte: (membrana interna es impermeable) que permiten el paso de metabolitos hacia el interior y el exterior de la matriz. - Matriz: Hay un cmulo de enzimas para la oxidacin del piruvato y los ac. grasos, para la realizacin del Ciclo de Krebs del ac. ctrico, la sntesis de ac. grasos y protenas y la replicacin del ADN. - Cmara externa: posee enzimas para la solidificacin del ATP de la matriz para fosforilar otros nucletidos.

Cadena respiratoria o cadena de transporte de electrones: lleva a cabo la fosforilacin oxidativa. Esta formada por complejos enzimticos respiratorios de la membrana interna. - Complejo I: NADH deshidrogenasa - Complejo III: citocromo b-c1 - Complejo IV: citocromo-oxidasa

Estn formados por protenas y otros grupos qumicos que llevan iones metlicos y forman una va de paso de los electrones a travs de los complejos. Los electrones pasarn del CI al CIII y seguidamente al CIV. (La ATPsintasa fue vista por primera vez con tincin negativa formada por 3unidades alfa y 3beta. Las mitocondrias sintetizan ATP que sale al exterior. En el hialoplasma los H de carbono aparecen en la primera etapa de las oxidaciones. En la gliclisis se forman cadenas cortas de carbono que entran en la matriz mitocondrial donde tiene lugar la 2etapa de la oxidacin: la oxidacin del piruvico y el ciclo de Krebs. Como resultado de las 2 oxidacines se obtiene CO2 y ATP. El piruvato y los ac. Grasos se oxidan y se forman acetilCOA que entra en el ciclo de Krebs y se forma CO2 que es expulsado, tb se forma NADH que va a ceder electrones que van al CI al CIII y al mismo tiempo se bombean protones a el espacio intermembrana. Los electrones llegan al O2 y unidos a protones forman agua. Estos protones pasan a travs de la ATPasa y se produce la sntesis de ATP. El bombeo activo de protones: 1. Genera un gradiente de concentracin de protones (de PH) a travs de la membrana mitocondrial interna (PH8 en la matriz y PH7 en la cmara externa. 2. Como resultado de la perdida de protones e iones positivos se genera un potencial de membrana a travs de la membrana interna (carga negativa en el interior y positiva en exterior). El gradiente electroqumico de protones se utiliza para impulsar la sntesis de ATP va enzimtica ATP sintasa. ATP sintasa: esta formada por una subunidad alfa (F1). La unin tonel ATP y ADP promueve la sntesis de ATP por la subunidad beta que cataliza la sntesis de ATP. La subunidad beta regula el flujo de protenas a travs del canal de protenas. La subunidad Fo esta formada por la sub-c que forma el canal de H+ y por la sub a,b que estabilizan el canal. Esta subunidad acta como transportador transmembrana para los protones que pasan haciendo que el tallo gire rpidamente dentro de la cabeza inducindole a fabricar ATP. (100 moleculas de ATP/segundo-1 molecula de ATP/3 protones que pasan). Si el gradiente de protones cae por debajo de un cierto nivel, la ATPsintasa hidrolizar ATP reconstituyendo el gradiente de protones A travs del ciclo del ac. ctrico o de Krebs se producen electrones de elevada energa que son transportados por molculas transportadoras NADH y FADH. El NASDH cede un hidruro H- que es transformado en un protn H+ y en 2 electrones de alta energa que son transferidos a la membrana interna donde entran en la cadena respiratoria.

Durante la transferencia de electrones desde NAD hasta el oxigeno, los protones son bombeados a travs de la membrana por cada uno de los complejos enzimticos respiratorios. La ubiquinona (Q) y el citocromo c actan como transportadores mviles que trasportan electrones desde un complejo al siguiente. La transferencia de electrones a lo largo de la cadena respiratoria es energticamente muy favorable ya que los electrones comienzan con una gran cantidad de energa que van perdiendo a lo largo de la cadena. Finalmente entran en el citocromo-oxidasa donde se combinan con una molcula de oxigeno y forman agua. El transporte de electrones genera un gradiente a travs de la membrana. Cada complejo enzimtico respiratorio acopla la energa liberada por la transferencia de electrones que se produce a su travs, con la captacin de protones del agua de la matriz mitocondrial y los libera al otro lado de la membrana en el espacio intermembrana o cmara externa. Cuando se impide de forma natural o artificial el gradiente de protones: - 2-4 dinitrofenol (DNP) desacoplador de la fosforilacin oxidativa. Soluble en membranas fosfo lipidicas y en soluciones acuosas. Transporta protones a travs de la membrana interna de manera que no se forma el gradiente de concentracin de protones ni el potencial elctrico de membrana. La energa liberada se disipa en forma de calor de manera que no se forma ATP. - Termogenia: desacoplador natural de la fosforilacin oxidativa. Las mitocondrias de la grasa parda (grandes, redondeadas y con crestas como tabiques concntricos) tienen en su membrana interna termogenia, una protena transmembrana que convierte los gradientes de protones en calor. La grasa parda por ello la tienen los fetos y nios recin nacidos adems de animales en hibernacin y adaptados al fro (focas). BIOGENESIS DE LAS MITOCONDRIAS BIPARTICIN: por estrangulacin y segmentacin o por formacin de tabiques o particin.

PLASTOS Definicin: son organelas capaces de acumular y sintetizar sustancias de reserva. Se dan en clulas vegetales eucariotas. Clasificacin: - Pigmentados:

Cloroplastos Cromoplastos No pigmentados llamados leucoplastos: Amiloplastos (almidn) Protemoplastos (protenas) Elenioplastos (lpidos y grasas)

CLOROPLASTOS: son organelas donde se realizan fenmenos fotosintticos - Reacciones luminosas (dependen de la luz): Absorcin de fotones Transporte de electrones Sntesis de ATP y NADPH Formacin de O2 a partir de H2O - Reacciones oscuras (no luz): Fijacin de O2 Sntesis de glucosa (como hidratos de carbono) con la participacin de ATP (fuente de energa) y de NADPH (reductor) Sntesis de aminocidos y ac. grasos Sntesis de almidn (polmero de glucosa) Forma, tamao y numero. Forma discoidal: de 4-6 micras de dimetro, 25 por clula en vegetales superiores. Forma helicoidal: 1-2 por clula en algas espirogiras Forma estrellada: 2 por clula Forma de copa: 1 por clula Distribucin: segn la longitud de honda de la luz. Movimientos individuales Clasificacin: - Agranulares (algas, sin grana): Tilacoides (cisternas alargadas) Aislados Asociados Pirenoides Estigmas - Granulares (con grana, los +frecuentes): Tilenoides: zonas proteinaceas relacionadas con la sntesis y almacenamiento de los polisacridos. Algunas veces esta entre tilacoides, otras esta atravesado por ellos y algunas veces puede estar rodeado por almidn. En cloroplastos en forma de copa el tilenoide ocupa el centro rodendose de almidn y es rodeado y atravesado a la vez por tilacoides. Estigmas: son hileras de glbulos lipiditos (aparecen en algas fotosensibles) poseen pigmentos carotenoides y son sensibles a la luz. CLOROPLASTOS GRANULARES (se dan en) 1. Membrana externa 2. Membrana interna (separada de la externa por un espacio) 3. Estroma (parte interna) en el hay tilacoides aislados y granos apilados

Grana: de 05 micras de dimetro y de 40-80 por cloroplasto Tilacoides apilados: de 5-25. Son cisternas. El alud es el lculo (lo que encierra el grana) - Hendidura particional: hueco entre tilacoides - Particin: zona de contacto de tilacoides ADN: circular Ribosomas Plastoglbulos (grandes estructuras redondeadas de naturaleza lipidica) Granos de almidn MEMBRANAS DEL CLOROPLASTO Membrana externa: posee la protena porina por la que pasa agua, iones y molculas de bajo peso molecular. Membrana interna: posee protenas transportadoras que permiten el paso de agua y gases (CO2 y O2). Membrana tilacoides: poseen ATPsintasa (CFo, CF1ATPasa) o Presentan el complejo antena II y el fotosistema II en contacto o Plastoquinona, citocromo b6-f plastoquinona o Complejo antena I y fotosistema I asociado o Ferredoxina y NADPH reductasa Complejo antena: contiene uno o ms complejos cosechadores de luz (LHCs): LHC: posee clorofila a, clorofila b, carotenoides y protenas. Fotosistema 1 (DSI) y fotosistema II (PSII): contiene clorofila a, protenas y trasportadores de electrones, adems del centro de reaccin: zona del fotosistema que posee 2moleculas de clorofila modificadas, PSI-P700 que absorbe una longitud de onda a 700 nanmetros y la PSII-P680 que absorbe una longitud de onda de 680nm. La luz cuando incide en los complejos hace que sus fotones produzcan excitaciones en los electrones de las clorofilas de los complejos. Inmediatamente despus bajan a su nivel primero pasando la energa a otra molcula de clorofila. Cuando esta energa llega al fotosistema, acta sobre la clorofila del centro de reaccin que pierde un electrn que es recibido por un aceptor del lado opuesto quedando con carga negativa (clorofila=muy oxidante) Este proceso ocurre tanto en el FSI como en FSII. El hueco que deja el electrn es ocupado por un electrn de la fotolisis del agua, realizada por unas protenas que llevan tomos de Manganeso, cloruro FOTOSINTESIS La fijacin del CO2 esta catalizada por carboxibismutos y se lleva a cabo gracias a la rubisco. BIOGENESIS DEL CLOROPLASTO Biparticin:(Se realiza a partir de un protoplasto) - Durante la formacin y el crecimiento de la celula - Depende de la intensidad y la longitud de onda de la luz. Protoplasto: aparece en clulas meristemticas de tallos y hojas. Es una sustancia vesicular con doble membrana. Tiene un dimetro de 07-15 (ADN, ribosomas o algn tilacoide). Con luz: aparecen fbulas a partir de la membrana interna llamadas cuerpos protilacoidales que forman los tilacoides y despus el grana

En oscuridad: se forma un etioplasto con cuerpos prolamerales (tbulos ordenados centrales y otros perifricos o laminas). Con luz da lugar a un cloroplasto. CROMOPLATOS (llevan pigmentos). - Disueltos en glbulos osmiofilos (xantofila) - Sobre fibrillas lipoproteicas (licopeno) - Pigmento forma cristales rodeados de membrana LEUCOPLASTOS (en clulas embrionarias) aparecen en meristemos y tejidos en la oscuridad excepto en la epidermis. Caractersticas ultraestructurales: poseen doble membrana, sin grana, aparecen crestas escasas y largas y tbulos aislados o en grupos. Estroma: puede haber almidn (sin membrana) - Protenas (rodeadas de membrana) granulasas paracristalinas - Fitoferritina: en grnulos pequeos - Plastoglobulos: osmiofilos, se tien con cido smico como los lpidos - Ribosomas

TEMA 5
RIBOSOMAS Solo son observables al M.E, estas organelas fueron descritas por Palade en 1953. Daban un color violeta con hematoxilina-eosina por lo que son cidas (ac. ribonucleicos). Estn presentes en todas las clulas, libes en el hialoplasma o citosol, dentro de algunos orgnulos (mitocondrias y cloroplastos) y unidos a las membranas del retculo endoplasmtico. Tamao: de 12 nanmetros de ancho a 25nanmetros de longitud. Importancia: en ellos se sintetizan las protenas. Estructura: formados por 2subunidades que estn libres en el citoplasma y que se unirn cuando se vaya a formar una protena. Las subunidades se forman en el nucleolo (1grande y otra pequea). Adems de su estudia al M.E se estudian haciendo gradientes por centrifugacin de manera que las partculas de las clulas se separan segn su peso, dando velocidades de sedimentacin distintas. Esta velocidad se mide mediante unidades S (Svergver) que miden la velocidad o coeficiente de sedimentacin. S posee un valor de uno por diez elevado a menos trece cm/sg. Segn esta cualidad podemos diferenciar: - Ribosomas procariotas: ribosomas 70s Tratados qumicamente se disocian en: R 50s R 30s - Ribosomas eucariotas: ribosomas 80s Tratados qumicamente se disocian en: R 60s R 40s Los ribosomas son como esponjas, estn formados por molculas de ARNr (ribosmico) y varias protenas unidas quedando grandes huecos que son ocupados pro agua (70% peso de ribosoma es agua). Procariotas: Subunidad mayor: dos molculas de ARNr, una de 23s y otra de 5s. A estas cadenas se le unen 31 molculas de protenas llamadas L (de large, por la subunidad mayor.) Subunidad menor: una cadena de ARNr de 16s unida a 21 protenas llamadas S (de small, por la subunidad menor). Eucariotas: Subunidad mayor: 3 cadenas de ARNr, una de 28s, otra de 58s y otra de 5s unidas a unas 49 o 50 protenas llamadas L. Subunidad menor: 1cadena de ARNr de 18s unida a 32 protenas S. Cada subunidad posee un saliente denominado cabeza. Adems hay unos entrantes que hacen que aparezcan a cada lado de la cabeza unos lbulos. De los dos lbulos hay uno que parece ms largo llamado tallo en el que estn los enzimas que aportan la energa necesaria para la sntesis de protenas.

En la subunidad menor aparecen plataformas con dos lugares, uno A (aminocidos) y otro P (Pectidos). En la mayor aparece un tunel por donde salen los pectidos o protenas que se forman. Tb en la subunidad menor aparece un lugar donde se une el ARNm. La informacin celular siempre se encuentra en el ARN as que para realizar una protena debemos de utilizar este ARN. El ARN que se forma del ADN por la trascripcin es el ARNm que lleva la informacin para la formacin de protenas. En el ARN hay una serie de secuencias de bases. El ordenamiento de cada 3bases lleva la informacin para que se una un aminocido Esa secuencia es un codn. Estos codones se correspondern con el ordenamiento de los aminocidos de la protena. El paso de ARN a protenas es el llamado proceso de traduccin. El ARN posee 4bases diferentes, su combinacin da bastantes ms posibilidades de las necesarias ya que son 64 posibilidades y solo 20 aminocidos posibles. ARNt (transferente): aparece como una molcula enrollada con ciertas dilataciones. Presenta la organizacin de bases que aparece en una de sus vueltas ya que es complementaria a la del ARNm y el extremo 3 lugar donde se va a unir el aminocido que va a trasportar este ARNt. Funcin de los ribosomas: Las protenas que sintetizan los ribosomas quedarn libres en el citosol. Las subunidades estn separadas de manera que para que se inicie la formacin de la protena se tiene que formar 1complejo de iniciacin formado por la subunidad menor unida al ARNm que debe tener 1codn de iniciacin con la secuencia AUG. Una vez formado este complejo llegar el ARNt con su anticodn que siempre llevar en su extremo 3 el aminocido metionina (que es el 1 en todas las protenas). Cuando todo esto a ocurrido el ARNt se sita en el sitio P del ribosoma dejando el sitio A libre para la llegada de un nuevo ARN de transferencia. Entre dos aminocidos creados acta la pectidiltransferasa que forma un enlace pectdico entre los dos aminocidos quedando los aminocidos unidos al sitio A dejando libre el ARNt que haba en el sitio P que a su vez dejara libre el sitio P permitiendo que el ARN que haba en A se transloque de A a P. Entonces se queda libre el lugar A para que llegue un ARNt nuevo. Este proceso continua as hasta que llegue la fase de terminacin que se produce cuando el ribosoma se sita sobre un codn de terminacin: UAA, UAG o UGA. Cuando se lee cualquiera de los tres a ese codn no se le une ninguna ARNt sino un factor de liberacin que acta sobre la pectidiltransferasa la cual en lugar de formar un enlace, aade agua liberando el pptido formado del ARNt quedando libres las dos subunidades ribosmicas. La lectura de un ARNm no se da en un solo ribosoma sino que lo hacen varios ribosomas a la vez y por ello es frecuente ver en el citoplasma filamentos unidos a puntitos, este conjunto es un polisoma o poliribosoma. Biognesis de los ribosomas: La formacin de los ribosomas tiene lugar en el nucleolo donde hay una cadena de ADN llamado organizador nucleolar. Este se transcribe en una cadena

bastante larga de ARNr que es de 45s la que se romper por los extremos pasando a 41s. Este se dividir en dos de 32s y 20s. A su vez la cadena de 32s se escindir en una de 28s y otra de 58s y la cadena de 20s se transformar en una de 18s. Por lo tanto todava faltara una cadena de 5s, esta no se forma a partir del organizador sino que se sintetiza por otros cromosomas fuera del nuclolo. As tenemos todos los componentes. Las protenas se formaran fuera del ncleo y a travs de sus poros entrarn en l donde se ensamblarn con el ARNr formndose la subunidad mayor y menor que saldrn al citoplasma donde estarn dispuestos para unirse para la sntesis de protenas.

Las clulas eucariotas estn divididas en 2grandes compartimentos, uno el limitado pro un sistema de endomembranas, el espacio luminar o cisternal formado pro el ncleo, el retculo endoplasmtico, el aparato de Golgi, endosomas, lisosomas y el otro compartimiento es el limitado por la membrana plasmtica, espacio citoslico (ocupado por el citosol o hialoplasma). RETICULO ENDOPLASMTICO: Se le llama as porque no llega al borde de la clula. Es el mayor sistema delimitado por membranas. Esta formado por una serie de tbulos, cisternas y vesculas entre las que se distingue una cara citoslica (en contacto con hialoplasma) y otra luminar (en contacto con la parte interior). El retculo contribuye al transporte dentro de la clula. Interviene en intercambios celulares mediante el trasporte activo y pasivo. Tb contribuye a formar el armazn o sostn del citoplasma. Es el sistema de endomembranas ms desarrollado. Formado por unas membranas que delimitan el espacio. Poseen una estructura de membrana unitaria trilaminar. Presenta aspecto homogneo, es de baja electronegatividad pero a veces presenta algunas inclusiones que pueden ser cristalinas (ordenadas). Las cavidades estn punteadas. Tb hay retculo formado por unos tbulos que se unen y se ramifican (se anastomorfan). - RER (rugoso o granular): se encuentra en la cara citoplasmtica de la membrana, en el aparecen ribosomas. La ultra estructura es a base de cavidades aplanadas o cisternas y algunas veces pueden aparecer estructuras en forma de vescula o tbulos. - REL (liso o agranular): su estructura es de forma tubular con tbulos anastomosados y raramente pueden aparecer vesculas.

Composicin qumica: Sus membranas estn formadas por lpidos y protenas. Los lpidos estn en menor cantidad que en la membrana plasmtica (al 30%) por lo que son membranas muy fluidas. Hay ms protenas que en la membrana plasmtica (70%): - 30 cadenas polipeptdicas (gligoprotenas). - 30-40 enzimas que actan en la sntesis de lpidos, peptidasas que rompen peptidos, hidrolasas y glucosiltransferasas. - Citocromos. Las cavidades contienen protenas sintetizadoras. Sus caractersticas dependen del tipo celular: Plasmocitos-inmunoglobulina, Fibroplastos-protocolageno, Pncreas endocrinoprohormona (proinsulina). REL. El REL Y RER son continuos. El REL no posee ribosomas por lo que no sintetiza protenas. Es el menos abundante salvo en algunas clulas como las que sintetizan esteroides (testculos, ovarios y corteza suprarrenal). Las clulas hepticas contienen mucho REL porque estn encargadas de la eliminacin de todas las sustancias txicas, detoxificacin. Otras clulas, las musculares estriadas poseen un REl especial ya que las miofibrillas estn rodeadas de ret. Sarcoplasmtico. Funciones: - Detoxificacin: mediante oxidaciones (donde intervienen citocromos) y conjugaciones (unin de una molcula con otra para eliminar su actividad txica. - Glucogenolisis: liberacin de glucosa a la sangre por la rotura de glucgeno. - Sntesis de lpidos: Biosntesis de lpidos. Alargamiento y desaturacin de cidos grasos. - Liberacin de iones calcio: funcin del retculo sarcoplstico que acumula iones calcio para liberarlos cuando sea necesario. RER Se encuentra en todas las clulas excepto en espermatozoides. Es ms abundante que el liso sobre todo en clulas que van a formar protenas para ser expulsadas fuera de la clula y a las que deban sintetizar membrana (bastones de la retina). La membrana adems de protenas enzimticas contiene protenas integrales especiales: - Protenas de acoplamiento: tiene la capacidad para unirse a una partcula especial, la partcula de de reconocimiento de seal (PRS) - Proteina receptora de ribosomas: ribofobicas, unen la membrana del retculo a los ribosomas. - Protena de poro: andan dispersas por la bicapa pero cuando es necesario se organizan en un canal o poro. Este retculo esta en continuacin con la envoltura nuclear que es RER especializado.

Funciones: Sntesis de protenas, modificacin de protenas (agregando cido sulfurico o provocando sulfataciones, plegamientos y glicosilacin) y formacin de todas las membranas celulares. Formacin de los pptidos por el paso del ARN por los ribosomas: Despus del codn de iniciacin aparece una secuencia llamada pptido seal. Este es reconocido por la partcula de reconocimiento de la seal (PRS). El complejo que se forma es reconocido a su vez por una protena receptora de acoplamiento (protena integral). Las protenas del poro son estimuladas al producirse este proceso organizndose y formando un poro de translocacin. Cuando esto ocurre se libera la PRS. El pptido seal se une a las paredes del poro. Protena excretada: Cuando termina la lectura del ARNm se separan las protenas del tnel o canal quedando liberadas o sueltas. Entonces una peptidasa de seal, corta el pptido seal dejando libre a la protena en el interior de la cavidad. El pptido seal se disuelve. Protena transmembrana: Adems de la secuencia inicial hay otra secuencia en la parte posterior llamada secuencia de poro de transferencia que es hidrofbica, as que tendr apetencia pro la capa lipdica de manera que cuando pase por el tnel se agregara a el haciendo que este se disgregue dejando que la secuencia se una a la membrana. El resto de ADN se leer y formar una protena fuera de la cavidad. La peptidiltransferasa cortar al pptido seal quedando una protena con una porcin citoslica, otra interna y otra unida a la membrana dando una protena transmembrana. Protena con varios pasos a travs de la membrana: La secuencia seal no esta en el inicio de la cadena sino que aparecer ms delante de la protena. Cuando aparezca el ribosoma se une y pasa todo el proceso de antes quedando la seal unida al canal. Ms adelante aparecer una seal de poro de membrana haciendo que el resto de la protena no pase dentro. El tnel se disgrega quedando la protena unida por dos partes a la membrana. GLICOSILACIN DE PROTEINAS La formacin de oligosacridos ocurre sobre una molcula de un lpido de membrana que se une a un resto di fosfrico al que se une un oligosacrido. La protena que se esta sintetizando debe llevar la asparagina (un aminocido). Una membrana del retculo debe tener una enzima glicosiltransferasas que hace que se rompa la unin con los restos fosforitos del lpido unindose a la esparagina. Biognesis del Reticulo endoplasmatico: el retculo esta continuamente formndose para crear un equilibrio dinmico. Todas las membranas de la clula se forman en el retculo. Para formar una membrana necesitamos la sntesis de protenas, lpidos y su ensamblaje. - Las protenas poseen una vida media de 4 o 5 das si son grandes y de 16 a 28 das sin son pequeas. Constantemente se estn sintetizando para formar parte de la membrana endoplasmatica. Las sintetizadas en los ribosomas quedan adheridas a las cisternas del retculo, estas sern las protenas intrnsecas y las perifricas sern las de la cara interior. Las sintetizadas en los ribosomas libres sern las de la cara de a fuera o citoslica. - Los lpidos poseen una vida media de 2dias. Se sintetizan continuamente. Cuando se forma la bicapa lipidica se aaden las protenas.

APARATO DE GOLGI El primero en describir una estructura similar a este aparato fue Camilo Golgi estudiando el cerebelo de la lechuza ya que en todos los cerebelos hay unas neuronas llamadas clulas de Purkinje. El observ que alrededor del ncleo haba una red llamndola aparato reticular interno. Santiago Ramon y Cajal lo describi varias veces hasta que en 1954 al observarlo con el M.E fue confirmada su existencia. Con el M.E se ve una zona perinuclear (cerca del ncleo), clara, formada por una estructura en forma de disco con un dimetro de 1 a 3 micras. Estos discos estn relacionados entre si. Aparecen en todas las clulas y su desarrollo depende del tipo celular y del estado funcional de la clula. Con tcnicas de fluorescencia se pone muy de manifiesto. Ultraestructura: cada uno de estos apilamientos se llama dictiosoma y un aparato de Golgi puede formarse por uno o ms dictiosomas. No todos los saculos son iguales, en cada dictiosoma hay una cara externa prxima al retculo y otra interna prxima al ncleo. La cara externa tb es llamada convexa, proximal, de formacin o cara cis, la interna tb tiene otros nombres como cncava, distal, trans y de maduracin. La parte ms externa es una compleja red de tbulos y vesculas por eso es llamada retculo o red cis del golgi. Toda esta red acaba unindose dando una cisterna llamada cisterna cis (homognea). Luego aparecen 2 o 3 cisternas mediales (homogneas). Luego hay otra llamada cisterna trans y seguida a esta aparece otra red de tubulos y vesculas llamada red o retculo trans del golgi. Entre cisterna y cisterna aparece siempre un espacio intercisternal de unos 20 nanmetros. En la cara cis aparecen una serie de vesculas pequeas de 20 nanmetros de dimetro procedentes del RER llamadas vesculas de transicin o de transferencia o transporte (transportan sustancias desde el RER al Golgi). En la cara trans tb hay vesculas 4 o 5 veces mayores que las de la cis, son vesculas que llevan las sustancias de desde el Golgi hasta otros lugares. Estas vesculas tienen una envoltura de una protena llamada clatrina, son vesculas de secrecin. El tamao del aparato de Golgi en una clula suele ser igual. La cantidad de membrana que se aade por las vesculas de transicin es la misma que sale por las vesculas de secrecin manteniendo un equilibrio dinmico. Para explicar el paso de la cara cis a la trans existen dos teoras: - Progresin cisternal: el retculo cis se transforma en cisternas trans que pasara a cisterna cisternas medias y estas a cisternas que por ultimo sern vesculas de secrecin. - Cisternas estacionarias: no se mueven las cisternas sino que le paso de protenas de la cara cis a la trans es por medio de vesculas que se intercambian entre las cisternas vecinas. Reconocimiento: el golgi esta mucho ms ordenado que el retculo adems nunca presentara puntitos ya que no tienen ribosomas. Funciones: la mayora de las protenas que proceden de RER pasan por el golgi porque este les realizara una serie de procesos: Modificacin de macromolculas o protenas: Glicosilaciones de lpidos y protenas Sulfataciones Escisin o rotura de macromolculas

Embalaje y transporte de protenas: Se produce para echar fuera de la clula las protenas por las que se compone la membrana plasmtica, este proceso es la exocitosis o secrecin que puede ser regulada o continua. Tb se realiza un transporte de las protenas internamente. Se forma el acrosoma del esperma. Formacin de la pared celular: el fragmoplasto se forma en la divisin celular por un montn de vesculas. Glicosilacines: aadir molculas de glucidos o azucares. Esta funcin comienza en el RET. Proteinas: se producen alargamientos y terminaciones de polisacaridos por unin de galactosa, fructosa, maosa y ac salico. Pueden ocurrir dos cosas: a) Que se desprendan las glicoproteinas de la membrana golgiana de manera que son excretadas. b) Si las glicoproteinas quedan unidas a la membrana del golgi, al exocitar las glicoproteinas quedaran revistiendo la membrana plasmtica. Lipidos: igual con las mismas dos opciones. Sulfataciones: (comienzan en el retculo) El sulfato es activado en el retculo y en el golgi por medio de unas enzimas llamadas sulfotrasferasas que pasan el sulfato a formar parte de las protenas. Escisin de molculas: ocurre con frecuencia en prohormonas que para ser activas deben ser partidas en otros ms pequeos. Las glicoxilaciones en unos de los componentes del aparato de golgi lo que significa que la composicin de estos no es igual. En el retculo cis se fosforila manosa muy importante para la formacin de los lisosomas. En la cisterna cis se elimina manosa en la intermedia sigue la eliminacin y se aade N-acetil glucosalina. En la cisterna trans se aade galactosa y en le retculo trans se aade galactosa y en el retculo trans se aade N-acetil neuramitico. - Transporte retrogrado: se da al pasar de cisternas ms maduras a otras ms jvenes ya que las vesculas contienen enzimas necesarias en la cara externa. Estos trasportes estn controlados tb por una cubierta y unas sustancias. - Transporte y distribucin de protenas: todo lo que pasa por el golgi y va hacia la membrana decimos que sufre la va exocitosis o secrecin: Continua: una vez formada la vescula de secrecin inmediatamente es transportada hasta la superficie liberando su contenido. Esa vescula pasara a formar parte de la membrana plasmtica. Para que esto ocurra las vesculas estan cubiertas por una capa de 7 protenas llamadas octamero. Regulada: otras quedan almacenadas en el citoplasma, concentrndose hasta que llega una seal externa que dirige al liberacin de las vesculas

Adems de la ruta secretora aparecen otras vesculas que transportan otras sustancias y a todo este transporte por vesculas se le llama transporte vesicular. La va de entrada a las clulas es el proceso de endocitosis que depender de la materia que entra: Fagocitosis: restos celulares y microorganismos. No la hacen todas las clulas solo las fagocticas (neutrofilos, manocitos y macrfagos) Pinocitosis: pequeas molculas y sustancias disueltas. Endocitosis mediada: proceso selectivo para que se produzca debe haber en la membrana unos receptores de carga que deben reconocer a la molcula que interesa endocitar, llamada ligando. Cuando el ligando se une al receptor la membrana plasmtica se invagina, tendiendo a formar una vescula. Para que esto ocurra debe formarse una cubierta interna de la protena clatrina. En este sistema de transito vesicular aparece ahora el compartimiento endosmico o endosomal formado por dos tipos de estructuras tubulo-vesiculares. Uno de ellos se dispone perifricamente y es llamado endosoma temprano otro dispuesto en las proximidades del ncleo es llamado endosoma tardo. Los dos intervienen en el transito vesicular. No poseen clatrina y en su interior poseen un contenido cido, en los tempranos de PH6 y en los tardos PH5,5. Hay que destacar que el medio es cido pero no aparecen enzimas hidroliticas (lo que los diferencia con los lisosomas). La funcin esencial de ellos es la separacin entre receptor y ligando. Cuando esto ocurre los endosomas toman forma de raqueta con una parte tubular y otra vesicular. La tubular recoge a los receptores separados y la vesicular a los ligandos. La parte tubular se dirige entonces hacia la membrana de la que procede y restituye all a los receptores. Pero no siempre ocurre as, a veces la parte tubular se dirige hacia otra cara de la clula. Entonces la membrana pasa a formar parte de la membrana plasmtica quedando libre. Este proceso se llama transcitosis. Para el paso del endosoma temprano al tardo hay dos teorias: - La primera a traves de un transporte de vesiculas entre ambos endosomas - La segunda se basa en que el endosoma temprano se traslada al mismo tiempo que va modificando su contenido transformndose en tardo. Su contenido cido se debe a que en su membrana hay una bomba de H que gasta ATP. Vesiculas clatrinicas: 1. La clatrina se rompe antes de entrar en el endosoma. 2. En la cara trans del golgi se forman vesculas de clatrina que se rompe para la unin con el endosoma. Otras vesculas cubiertas llamadas: COPI Y COPII Las cubiertas con COPI realizan movimientos retrgrados y las cubiertas con COPII son protenas que se transportan entre el retculo hasta el golgi. Formacin de la clatrina: se forma a base de uniones de protenas llamadas trisqueliones (de 3 brazos) formadas por cadenas de 3zonas pesadas y tres ligeras. Los trisqueliones llegan a formar la cubierta proteica formada por 12 pentgonos y 8 hexgonos. Para que se forme esta cubierta hacen falta otras protenas. Deben existir los receptores que se unirn a los ligandos estimulando la unin del receptor a una protena adaptina o adaptadora. Esta unin estimula la unin a la clatrina. La membrana se invagina hasta formar un espacio globoso que se estrangula de la membrana gracias a la dinamina (hidrfoba) que fija y rompe el GTP para liberar energa para la escisin de la membrana. Una vez formada la vescula se adentra rompindose la clatrina para unirse al endosoma.

Adaptinas: - Reconocen los receptores de carga de membrana - Reconocen los receptores de carga del aparato de golgi. Endocitosis del colesterol Colesterol: liquido que esterificado es insoluble (hidrfobo) de manera que para cruzar la membrana debe sufrir el proceso antes nombrado. Para ello se forma una vescula de 20 a 25 nanmetros de dimetro que contiene en su interior los esteres de colesterol (colesterol + ac.graso) para evitar la hidrofobia hay una capa de fosfolipidos y colesterol no esterificado. Adems en la superficie esta la protena APO B que facilita la unin de la partcula LDL (lipoprotena de baja densidad) a los receptores de membrana. La APO B sera reconocida por los receptores de la membrana plasmtica al mismo tiempo que se ira formando la cubierta de clatrina. Finalmente se invagina la partcula LDL quedando la vescula. Inmediatamente se produce la despolimerizacin de la clatrina que lleva a la liberacin de los trisqueliones quedando la vescula no cubierta que se transforma o se une al endosoma temprano. Despus por una u otra va llegara al endosoma tardo. Este, debido a su contenido cido separar la unin entre los ligandos y el receptor formando la porcin tubular con los receptores que sern reciclados hasta la membrana plasmtica y otra porcin vesicular se unir con el lisosoma producindose en este la digestin dando lugar a aminocidos que integran la protena APO B, los ac. grasos unidos al colesterol y el colesterol que ir a formar parte de las membranas o de hormonas, donde sea necesario.

EL NUCLEO Nucleoplasma: (cariolinfa o jugo nuclear) sustancia semifluida y ligeramente basofila que baa a la cromatina y a la matriz nuclear. Formada pro enzimas que participan en la duplicacin del ADN, en la trascripcin del ARN, en el transporte y empaquetamiento de ADN Aparecen unas estructuras fibrilares o granulares que son asociaciones de ARN y protenas llamadas ribonucleoprotenas extranucleares: Fibrillas pericromatinicas: son delgadas con un dimetro de 3 a 5 nanometros y se dan en las proximidades de la heterocromatina. Es ARN mensajero recin sintetizado. Grnulos pericromaticos: tb se dan en las proximidades de la heterocromatina de un dimetro de 30 a 50 nanometros, las hay de dos tipos: - Grnulos que son ARN ribosmico + protenas ribosmicas - Resultado de la espiralizacin o condensacin del ARNm que antes se encontraba como fibrillas. Granulos intercromatinicos: dimetro de 20 a 25 nanometros y son considerados como que contienen ARN. Aparecen interconectados por fibrillas y se piensa que sean componentes de la matriz nuclear. La matriz nuclear: es tomada como componente o como independiente del ncleo. Es una red fibrilar que se extiende por todo el ncleo desde la lmina nuclear hasta contactar con los cromosomas. Contribuye a mantener y dar forma al ncleo. Cromatina: Heterocromatina: cromatina oscura, condensada, es inactiva. Las masas de heterocromatina son llamadas cariosomas o falsos ncleos: - Constitutiva: cromatina que forma parte estructural del cromosoma. Son trozos de cromatina que permanece concentrada en todas las clulas (ej. Centrmeros o telomeros). - Facultativa: aparece en algunas clulas, no en todas. Aparece con el paso del tiempo. En clulas jvenes es escasa y en clulas viejas muy alta. EJ. C.gonosomica: cromatina sexual que solo aparece en mujeres en las que el cromosoma X se condensa dando un corpsculo C.autosomica: cromosomas no sexuales. Eucromatina: cromatina clara, activa por lo que debe estar desplegada. Estructuralizacin de la cromatina: ADN:esta formado por una doble cadena, cada una formada pro nucletidos que se forman por un nucleosido y un resto fosforito. El nucleosido es la unin de una pentosa (desoxirribosa) con una base: Base pirimidinica: C y T Base purica: A y G Es una molcula muy dbil de manera que presenta una serie de movimientos y apilamientos que le dan consistencia. El ADN se asocia a 8 histonas: 2H2A, 2H2B, 2H3 y 2H4. Alrededor de ellas el ADN da una vuelta y donde hay 146pares de bases. Esta estructura al M.E aparece como un rosario formado por nucleosomas.

Asociado al nucleosoma hay otra histona llamada H1 que protege el ADN que queda entre los nucleosomas, para ellos enrolla a esta estructura formada pro nucleosomas a la que llamamos fibra nucleosmica (espesor de 10 a 11 nanmetros) de manera que la fibra se enrolla dando una estructura ms estable llamada fibra de cromatina (de 30nanometros). En cada vuelta puede haber hasta 6 nucleosomas. A la asociacin del nucleosoma con la protena H1 se le llama cromatosoma. Tb hay otrs protenas no histonicas que participan en la transcripcin, duplicacinLa ms importante es una protena no histona que va a formar un armazn sobre el cual se va a plegar la fibra cromatinica. Las fibras de cromatina forman bucles que se asocian a la protena no histonica dando una asociacin de unos 300 nanometro para seguir empaquetndose hasta llegar a 1400 nanometros dando un cromosoma metafsico. Todo este plegamiento sirve para empaquetar de forma estable y poco frgil a la cromatina para la divisin. Alrededor del ncleo aparece una membrana externa y otra interna. La envoltura nuclear (externa) descansa sobre una capa de filamentos de vimentina. Dentro, en la cara interna aparece una capa densa llamada lmina densa o corteza nuclear formada por filamentos intermedios llamados lamininas: A, B y C. En la envoltura nuclear aparecen unos poros nucleares que suelen estar dispuestos anrquicamente. Pero cuando aparecen muchos se ordenan formando hexgonos que contienen en sus vrtices los poros. Los poros o complejo de poro esta formado por un anillo nuclear y un poro, poseen la estructura de una protena, una estructura anular con un transportador central y una serie de filamentos externos y otros internos que acaban en otro anillo. En el anillo hay entre 50 y 100 protenas organizadas en distintos anillos: un primer anillo citoplasmtico de 8 protenas globulares de las que salen 8 fibrillas llamadas unidades de columna o andamio. Tb hay unas protenas globulares o subunidades de transporte unidas a las de columna. Aparecen otras que parecen anclar a las de columna al poro y a la membrana llamadas subunidades luminales. En la cara ncleo plasmtica aparecen otras 8 protenas que forman un anillo nuclear del que parten 8 fibrillas llamada filamentos de la cesta que acaban en un anillo ms pequeo, proteico llamado anillo terminal. Transporte a travs del poro: cuando son pequeas molculas pasan fcilmente a travs del poro pero cuando son grandes acta el transportador del centro. Las protenas que han de entrar en l deben tener una secuencia seal que es reconocida por unos receptores de importancia nuclear. Al reconocerse se acoplan formndose un complejo que estimula al poro a abrirse para el paso al interior del ncleo. Cuando el complejo entra dentro se separa la protena del receptor quedando esta dentro y siendo el receptor devuelto al citoplasma. En el reconocimiento y la orientacin del complejo hasta el poro intervienen las fibras. Lamina nuclear: capa proteica interna que refuerza la envoltura nuclear. Al M.E es una red casi perfecta de unos cuadrados formados por la asociacin de filamentos intermedios o laminina que se asocian formando dmeros que si estn sueltos se encuentran fosforilados pero que cuando pierden los restos fosforitos se asocian formando tetrmeros (2 dimeros). La asociacin de tetrmeros dar la red de filamentos. La fosforilacin y desfosforilacin se producen para romper y formar la lamina media.

Hay un factor MPF que estimula la fosforilacin de las lamininas. Cuando se fosforilan se despolimerizan es decir se sueltan las lamininas porque se rompen los tetrmeros. Al romperse se romper tb la envoltura nuclear as que quedan disociadas la envoltura y la lmina durante la divisin celular. Cuando la divisin acaba, alrededor de cada cromosoma se produce la desfosforilacin de las lamininas con su trocito de envoltura nuclear. Esto ocurre porque el MPF no acta dejando que las fosfatasas acten sobre las lamininas. As se van formando mini ncleos o ncleos pequeos tb llamados carcomeros (cromosoma rodeado de envoltura nuclear). Todos los carcomeros se unen formando un solo ncleo. Nucleolo: estructura que normalmente aparece redondeada. En el se distinguen dos partes: la amorfa (clara) y el nucleonema (oscura, condensada y de aspecto reticulado). Este nucleonema se divide en dos: - PAS fibrosa: fibrillas de ARNr y algunos ARNm. - Parte granular: ARN unido a protenas. En el se forman los componentes que darn los ribosomas. La parte esencial es la fibrilar ya que es la zona donde se estn formando las cadenas de ARNr. Esta formado por un filamento central de ADN y por unas zonas que se asemejan a una escobilla. El ADN se transcribe a ARN debido a que existe un engrosamiento en el que aparece la ADN polimerasaI. La parte clara es la zona donde esta el ADN que forma cadenas de ARN, llamado organizador nucleolar. Este esta formado por los trozos de ADN que llevan informacin para la sntesis de ARNr. Este organizador puede ser una sola cadena o varias cadenas que se adentran en el nucleolo para aportar su informacin. Por ello a veces puede haber dos nucleolos o ms dependiendo de la organizacin de las cadenas. La cromatina del resto del ADN organizador nucleolar queda prxima al nucleolo por lo que se llama cromatina asociada al nucleolo. En el organizador del nucleolo hay un motivo que se repite para sintetizar los componentes de una cadena de 45S y esta ser metilada y seccionada para formar las cadenas de ARN que formarn ribosoma: el ADN 45s se divide en dos uno de 20s y otro de 32s. El de 20 dar una de 18s y el de 32s dar dos, una de 28s y otra de 5s. el segmento que falta vendr de cromosomas externos al nucleolo.

Sistemas de control del ciclo: Estos sistemas disparan los principales procesos del ciclo celular con protenas quinasas activadas cclicamente. Las protenas quinaasa son enzimas capaces de fosforilar aminocidos. - Los Cdk: quinasas dependientes de la ciclina: se regula por acumulacin y destruccin de ciclinas. Su actividad se regula adems por su fosforilacin y desfosforilacin. Hay distintos complejos Cdk que disparan las diferentes etapas del ciclo celular. - MPF: factor promotor de la fase M es un complejo de ciclina mittica con Cdk que controla la entrada en la fase M. - Ciclina de la fase S: es un Cdk que controla la entrada en S. El ciclo celular puede detenerse en puntos de control especficos para asegurar que la prxima etapa del ciclo no comience antes de que haya terminado correctamente la anterior. El ciclo puede detenerse por protenas inhibidoras de Cdk que pueden bloquear el ensamblado o la actividad de uno o ms complejos ciclina Cdk o porque no se sinteticen estos complejos. Control del nmero celular de animales pluricelulares: Las clulas animales proliferan solo si se encuentran con factores de crecimiento que activan factores de seales intracelulares para sobrepasar los frenos normales que bloquearan la progresin del ciclo celular. Las clulas animales tienen un lmite en el nmero de veces de dividirse. Muchas clulas normales mueren por muerte celular programada o apoptosis (suicidio). Para evitarla necesitan seales de otras clulas. La apoptosis depende de una familia de enzimas proteoliticas que se activan ellas mismas por una cascada proteolitica. Las clulas cancerosas resultan de la acumulacin de mutaciones que activan genes promotores de la proliferacin (protoontogenes) e inactivan genes supresores de la proliferacin (genes supresores de tumores) en una nica clula y su progenie por lo que proliferan sin freno.

Divisin celular y citocinesis: Mitosis o cariocinesis: (fase M) se produce la divisin del ncleo. Citocinesis: divisin del citoplasma en dos. Mitosis: profase, pro metafase, metafase, anafase, telofase. Mitosis: se inicia con un proceso de fosforilacin de protenas que produce la condensacin de cromosomas (por fosforilacin de H1), rotura de la envoltura nuclear porque se fosforilan las laminas dando unas vesculas y cambios en el cito esqueleto. Finaliza con la desfosforilacin de protenas. (Anafase).

Ciclo del centrosoma: Se forma al final de la mitosis: contiene un par de centrolos y se encarga de la organizacin de microtubulos: Etapas: -G1: uno de los centrolos se aleja del otro. -S: se duplica cada uno de los centrolos -G2: se alargan los centrolos hijos. En el inicio de la mitosis cada par de centrolos se aleja del otro hacia los polos opuestos de la clula (2centrosomas). A medida que se separan, el centrosoma organiza las fibras de microtubulos que constituirn el huso mittico. Profase: 1 Se produce la condensacin de los cromosomas replicados en la interfase: - Fosforilacin de las histonas H1 - Fosforilacin de las condensita en presencia de topoisomerosaII. 2 Separacin de la mayor parte de la cohesina que mantiene juntas a las cromtidas hermanas. 3 Organizacin del huso mittico: - Formacin del aster alrededor de cada centrosoma. - Aumento y alargamiento de los microtubulos entre los centrosomas. - Fragmentacin del retculo y el Golgi en vesculas. Prometafase: Comienza de repente con la fragmentacin de la envoltura nuclear. Los microtubulos del huso penetran en la regin central de la clula alargndose y acortndose en sus extremos libres. Algunos microtubulos se unen a un cinetocoro de los cromosomas (microtubulos cinetocricos). El cromosoma contacta con la pared del microtubulo y se mueve activamente a lo largo del microtubulo empujado por las protenas motoras del cinetocoro. Al cinetocoro por ultimo se asocia establemente al extremo del microtubulo. El cinetocoro libre se asocia a microtubulos del polo opuesto. Cada cromatida hermana esta as conectada por sus cinetocoros a microtubulos (de 20 a 40) de polos opuestos del huso. Los cromosomas primero oscilan y despus se mueven hacia el centro del huso mittico entre los 2 polos. Los microtubulos unidos a un polo son inicialmente ms largos que los unidos al otro polo. A medida que los cromosomas se mueven hacia el centro del huso los microtubulos largos unidos a un polo se acortan y los cortos se alargan hasta que tienen la misma longitud por adiccin y perdida de unidades de tubulina al extremo unido al cinetocoro. Los extremos (-) de los microtubulos unidos a los polos (centrosoma) se despolimerizan lenta y continuamente durante esta fase y la siguiente. Metafase: Todos los cromosomas estn alineados en el ecuador del huso formando la denominada placa metafsica.

Los microtubulos del huso son: M. astrales: que irradian del centrosoma y determinan el plano de citocinesis. - M. cromosomicos o cinetocoricos: tiran de los cromosomas en sentido opuesto. Mantienen a los cromosomas en el plano ecuatorial. - M. plolares: estn unidos a un centrosoma por un extremo y por el otro estn libres. Los de un centrosoma se interdigital con los que estn unidos al opuesto. Forman una estructura que mantiene la integridad del huso. Hay un flujo de tubulina en los microtubulos del huso. Se aaden y se separan rpidamente en el extremo positivo unido al cinetocoro. Se aaden ms tubulinas que las que se pierden. En el extremo negativo se separan tubulinas, las tubulinas parece que se mueven desde los positivos a los negativos (efecto in). La longitud total de cada microtubulo se mantiene. Anafase: Las cromatidas hermanas de cada cromosoma se separan y comienzan a moverse hacia polos opuestos. Esto se realiza en todos los cromosomas simultneamente. Los microtubulos unidos a cada cinetocoro se acortan habiendo perdida de tubulina en los cinetocoros. Es un movimiento lento (1micra/min) que asegura la segregacin correcta de los cromosomas. Dura entre 2 y 60 min. - Anafase A: se produce el movimiento de los cromosomas hacia los polos - Anafase B: se da al mismo tiempo que la A. Los dos polos se alejan producindose un deslizamiento de los microtubulos polares que estn solapados. Se produce tb un alargamiento del huso al aadirse tubulina en el extremo positivo. Telofase: Los cromosomas cerca de los polos se agrupan. La envoltura nuclear se vuelve a organizar (por desfosforilacin de las laminas) formndose as dos ncleos. Los cromosomas se van descondensando dejndose de ver en el microscopio. Las vesculas de retculo se fusionan y forman cisternas. Persisten los microtubulos polares entre uno y otro polo que pasaran despus a llamarse microtubulos zonales. Aparece lo que se denomina anilla de contraccin (invaginacin en la parte central de la clula) que al final provocar la divisin de la clula en dos clulas hijas. -

Citocinesis: Divisin del citoplasma en dos. Aparece una invaginacin en la superficie celular alrededor de toda la clula (anafase tarda aparece) a nivel de la placa metafsica. El surco se va haciendo cada vez ms profundo hasta que se separan dos clulas. Teoria del anillo contrctil: la fuerza requerida para dividir una clula la genera una delgada banda de citoplasma contrctil en el cortex de la clula debajo de la membrana plasmtica del surco. Este anillo esta formado por numerosos filamentos de actina dispuestos paralelamente y cortos filamentos de miosina.

Meiosis: (Del griego maiosis: disminuir) Proceso por el que el nmero de cromosomas se reduce de manera que las clulas que se forman contienen solo uno de cada par de cromosomas homlogos y formados por una sola cromatida. Asegura una fase haploide en el ciclo vital y la fertilizacin, adems de una fase diploide. Van Beneden (1883): el ncleo del cigoto de Ascares tena 4cromosomas y los gametos solo eran dos. Weisman, Hertwig y Van Beneden: los gametos se formaban por medio de una divisin especial en la que se reduca el nmero de cromosomas. Tipos de meiosis: 1. Gametica o terminal: se da en animales pluricelulares y muchos protozoos. Relacionada con la formacin de gametos (haploides). 2. Zigotica o inicial: se da en protozoos y hongos. Ocurre despus de la fertilizacin. Produce esporas haploides que se dividen por mitosis. Se produce una generacin adulta haploide. 3. Esprica o intermedia: en plantas y algas. El zigoto diploide da lugar a un esporofito diploide que produce esporas haploides (meiosis) que producen los gametos haploides. El gametofito haploide forma los gametos por mitosis. Etapas de la meiosis: Son dos divisiones celulares y una sola replicacin de ADN. Fase premeiotica: replicacin de ADN en fase S ms larga que la premitotica. Al principio de G2 se determina la va mittica o meiotica. Primera divisin meiotica: - Profase I: (muy larga y complicada) compuesta por Leptotene, Zigotene, Paquitene, Diplotene, Diacinesis, Metafase I, Anafase I y Telofase I. Segunda divisin meiotica: - Profase II: compuesta por Metafase II, Anafase II y Telofase II.

Primera divisin meiotica: Profase I: Leptotene: (leptos: delgada) los cromosomas se hacen gradualmente visibles (MO) aunque solo se ve un filamento por cromosoma con el M.E se ven dos cromatidas en cada cromosoma unidas por sus extremos a la envoltura nuclear formando ramilletes. Zigotene: (sigon: yugo) asociacin de cromosomas homlogos o sinapsis. Estos se llaman c. bivalente (2 cromosomas) o ttrada (4 cromatidas). Su funcin es la formacin del complejo sinaptonemico visto al M.E. Paquitene: (pachys:gruesa) la sinapsis se ha completado. El complejo sinaptonemico esta completamente formado y mantiene juntos a los cromosomas homlogos. Sobre el complejo sinaptonemico aparecen los ndulos de recombinacin (M.E 100 nanmetros) a intervalos irregulares en el centro del complejo sinaptonemcio, en lugares donde esta ocurriendo el sobrecruzamiento de las cromatidas. Se necesitan algunas enzimas para completar la recombinacin gentica que se inicia al principio de la profase (estas enzimas estn en los ndulos de recombinacin). Diplotene: (diplo. Doble) disfuncin del complejo sinaptonmico. Tendencia de cromosomas homlogos a separarse quedando solo unidos en los quiasmas que indican las zonas de sobrecruzamiento de 2cromatidas hermana. Diacinesis: (dia: a travs) se da la mxima condensacin de los cromosomas que se separan totalmente de la envoltura nuclear. Aparecen 4 cromatidas separadas unidas por sus centrmeros. Las cromtatidas no hermanas quedan unidas por quiasmas. Se produce la terminalizacin de los quiasmas y la desaparicin del ncleo. Metafase I: se organiza el huso meiotico. Se fragmenta la envoltura nuclear. Se produce un movimiento de las ttradas hacia el ecuador del huso. Las parejas de cromosomas homlogos forman la placa metafsica. Los dos homlogos de cada bivalente se conectan con las fibras cromosomitas de polos opuestos. La orientacin de los cromosomas paternos y maternos de cada bivalente es al azar. Anafase I: separacin de cromosomas homlogos. Desaparicin de los quiasmas que quedaban. Las cromatidas hermanas quedan unidas fuertemente por los centrmeros. Se produce un movimiento hacia los polos del huso. Cada polo recibe cromosomas maternos y paternos. Cada cromatida puede tener fragmentos de cromatidas maternos y paternos (recombinacin). Telofase I: tb llamada intercinesis. Es muy corta. Los cromosomas no se condensan completamente. La envoltura nuclear puede o no formarse de nuevo.

Segunda divisin meiotica: No se replica el ADN, las clulas tienen n cromosomas y estn formadas por dos cromatidas y no hay nucleolo. Profase II: corta, si hay envoltura nuclear que se desorganiza otra vez y los cromosomas se descondensan. Metafase II: formacin del huso. Alineacin de los cromosomas a la placa metafsica. Los cinetocoros de las cromatidas hermanas aparecen en caras opuestos y estas se unen a microtubulos de polos opuestos. Anafase II: los centrmeros se dividen al mismo tiempo. Las cromatidas independientes se mueven hacia polos opuestos del huso. Telofase II: se reorganiza la envoltura nuclear alrededor de cada grupo de cromosomas. Gametogenesis: Espematogenesis: fotocopias Ovognesis: fotocopias.

CROMOSOMAS Y MITOSIS, CITOCINESIS, CICLO CELULAR, MEIOSIS Y GAMETOGENESIS Cromosomas: Se dibujaron por primera vez por Hofmeister (1984), dibujo unas estructuras de clulas madre de los granos de polen.ms tarde Waldeyer (1988) los llamo cromosomas o cuerpos coloreados y Tejo y Levan (1956 descubrieron que el numero de cromosomas humano eran 46. Definicin: estructuras semejantes a cordones compuestos de ADN y protenas asociadas que transportan parte o toda la informacin gentica de un organismo. Son especialmente evidentes durante la mitosis y la meiosis. M.O: se tien con la tcnica de Feulgen, son basofilos, tb se tien con hematoxilinaeosina aunque su tcnica normalmente utilizada es la Orceina-Grensa. M.E: se ven filamentos de cromatina. Tamao: 0`6 micras de dimetro, de 4-6 (hasta 10) micras de longitud. (Cromosomas humanos 2n (46) es 220 micras). Numero 2n: hombre (46), pungidos (monos) (48), protozoos (300), crustceos (100127), insectos (220), ascaris megalocephala (4) y ascaris univalens (2). Estructura: existen dos cromtida hermanas que constituyen cada cromosoma. En el cromosoma aparece un estrechamiento de la cromatina llamado constriccin primaria o centrmero. En cada cromtida hay un cinetocoro. Los dems estrechamientos son constricciones secundarias. Los extremos de los cromosomas son los telomeros. El satlite es una parte redondeada que puede o no estar en los cromosomas. Cada cromtida posee dos brazos que segn la posicin del centrmero sern iguales o diferentes. Clasificacin: Autosomas y heterosomas o cromosomas sexuales. Los autosomas son comunes de machos y hembras pero los heterosomas son nicos. Segn la posicin del centrmero: - C. Telocntricos: centrmero en el borde no poseen el brazo pequeo. - C. Acrocntricos: uno grande y otro pequeo. - C. Submetacentricos: uno es ligeramente ms grande que el otro. - C. Metacentricos: iguales. Segn el numero de centrmeros: - C. Monocentricos: un centrmero - C. Dicentricos: dos centromeros - C. Policentricos o de centrmero difuso.

Bandas cromosomicas: subunidades de los cromosomas. Cada una de ellas posee propiedades diferentes de coloracin, adems posee periodos de replicacin diferente, cada banda se replica a un tiempo diferente. Son unidades de condensacin que se condensan individualmente. Son muy sensibles a las radiaciones. Tipos de Bandas: Bandas Q: quinacrina (colorante fluorescente que tie zonas intercalares. Son por tanto bandas intercalares. Bandas G: giemsa, son bandas intercalares. Estas bandas coinciden con las Q (son las mismas) aunque estas requieren de un tratamiento previo de proteasas. Bandas C: giemsa, se tien pero con un tratamiento previo de soluciones alcalinas y salinas. Son regiones que limitan con el centrmero. No desaparecen en la interfase porque estn formadas por heterocromatina constitutiva. Bandas R: se tien con naranja de acridina. Son bandas entre las Q y las G: Bandas N: giemsa, pero con tratamiento previo de impregnacin argntica, se dan en los telmeros. CARIOTIPO: Se coge sangre y se aslan linfocitos hacindoles que se dividan y deteniendo su divisin en la metafase. Entonces se pasa a un portaobjetos en el que lo ncleos de cromosomas estn libres pero agrupados. Los cromosomas se ordenan por tamaos y se realiza su cariotipo. Definicin: pares de cromosomas homlogos de un ncleo, ordenados segn su tamao y orden decreciente. Sirve para ver si los cromosomas de una persona estn completos y todo lo relacionado con ellos. Los grupos de cromosomas humanos son de tamaos similares. Se clasifican de la A a la G y del I al VII. Cada cromosoma se identifica por medio de un nmero. Cada par de homlogos tienen una morfologa y una secuencia de bandas caracterstica. Actualmente se utilizan tcnicas de hibridacin con un ADN marcado. Se hace que el ADN se una a otro ADN complementario que ha sido colocado de manera que si los dos ADN son iguales el segundo se colocar igual que el complementario.