Bilirrubinas

Disciplina: Bioqumica Curso: Anlises Clnicas 3. Mdulo Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini

Bilirrubina
o principal produto do metabolismo do heme da hemoglobina.

Hemoglobina
Protena Globular Globina

GLOBINA

4 Cadeias Polipeptdicas

2 tipo alfa 2 tipo beta

Comparative Biochemistry and Physiology, 146 (2007) 22-52

Hemoglobina
Protena Globular Globina Grupo Heme

Comparative Biochemistry and Physiology, 146 (2007) 22-52

Hemoglobina
Protena Globular Globina Grupo Heme Funo: Oxigenao dos tecidos Capacidade antioxidante ao sangue GLOBINA 4 Cadeias Polipeptdicas 2 tipo alfa 2 tipo beta

Comparative Biochemistry and Physiology, 146 (2007) 22-52

Bilirrubina
o principal produto do metabolismo do heme da hemoglobina. 20% precursores dos eritrcitos destrudos na medula ssea
eritropoiese no-efetiva, outras protenas heme como a mioglobina, os citocromos e a peroxidase.

Sntese da Bilirrubina
1) Eritrcitos so eliminados no bao quando ficam velhos ou danificados. A hemoglobina liberta, que decomposta em grupo heme e em globinas (transformadas em aminocidos) Pela ao da Heme oxigenase o grupo Heme forma a Biliverdina.

Sntese da Bilirrubina
2) Posteriormente, devido a ao da Biliverdina redutase, a biliverdina transformada em bilirrubina no conjugada nas clulas retculo-endotelial do bao. Esta bilirrubina no conjugada no solvel em gua. Em seguida, ligado albumina e enviado para o fgado.

Sntese da Bilirrubina
3) O complexo bilirrubina-albumina metabolizado nos hepatcitos.

Sntese da Bilirrubina
4) Nos Hepatcitos, ela conjugada com cido glicurnico pela enzima glucuroniltransferase, tornando-o solvel em gua. Muito do que vai para a bile e, portanto, fora para o intestino delgado.

Sntese da Bilirrubina
5) A bilirrubina conjugada que permanece no intestino grosso e metabolizada pelas bactrias colnicas de urobilinognio. Urobilinognio reabsorvido (circulao entero-heptica) e excretada na urina, juntamente com uma forma oxidada, urobilina; Quando presente nas fezes, essas apresentam colorao marrom.

Sntese da Bilirrubina
1) Eritrcitos so eliminados no bao quando ficam velhos ou danificados. A hemoglobina liberta, que decomposta em grupo heme e em globinas (transformadas em aminocidos) Pela ao da Heme oxigenase o grupo Heme forma a Biliverdina. 2 ) Posteriormente, devido a ao da Biliverdina redutase, a biliverdina transformada em bilirrubina no conjugada nas clulas retculo-endotelial do bao. Esta bilirrubina no conjugada no solvel em gua. Em seguida, ligado albumina e enviado para o fgado. 3) O complexo bilirrubina-albumina metabolizado nos hepatcitos. 4) Nos Hepatcitos, ela conjugada com cido glicurnico pela enzima glucuroniltransferase, tornando-o solvel em gua. Muito do que vai para a bile e, portanto, fora para o intestino delgado. 5) A bilirrubina conjugada que permanece no intestino grosso e metabolizada pelas bactrias colnicas de urobilinognio. Urobilinognio reabsorvido (circulao entero-heptica) e excretada na urina, juntamente com uma forma oxidada, urobilina; Quando presente nas fezes, essas apresentam colorao marrom.

Bilirrubina
No-Conjugada , Indireta Produzida no bao; Apolar , ou seja, insolvel em gua; Transportada para o fgado via corrente circulatria; Ligada de maneira firme, mas reversvel, albumina. Conjugada, Direta Produzida por reao enzimtica da bilirrubina no-conjugada; Molcula polar+apolar; Solvel em gua; Eliminada na urina.

Hiperbilirrubinemia
Ictercia
a pigmentao amarela de pele, esclertica e membranas mucosas. Bilirrubina plasmtica > 3,0 mg/dL Sinal patologias hepticas e biliares.

Hiperbilirrubinemia
Predominantemente no-conjugada (indireta) Predominantemente conjugada (direta)

Pr heptica; Excesso de bilirrubina noconjugada no sangue circulante; No excretada na urina; Atravessa a barreira hematoenceflica.

Comprometimento na captao, no armazenamento ou na excreo da bilirrubina. Tanto a bilirrubina conjugada como a noconjugada so retidas; Variadas concentraes no soro.

Deteco de bilirrubina
Paciente:
Jejum (8h)

Amostra:
Soro (mantido no escuro)

Realizao Teste:
At 3h aps coleta da amostra.

Deteco de bilirrubina
Mtodos: 1883-Erlich
reao com o cido sulfanlico diazotado, em amostras de urina.

Van den Bergh e Snapper

presena de bilirrubina no soro sangneo pelo emprego do diazo -reagente de Erlich e lcool como acelerador.

Deteco de bilirrubina
Mtodos:
Fundamentao terica dos mtodos: frao que produz cor com a reao de Van den Bergh em soluo aquosa bilirrubina direta (polar+ apolar), enquanto a frao que desenvolve cor com o lcool bilirrubina indireta (apolar).

Deteco de bilirrubina
Mtodos: Malloy e Evelyn:
Propuseram o uso de metanol a 50% para evitar a precipitao das protenas.

1938 -Jendrassik e Grof:

uso de cafena-benzoato-acetato para acelerar a reao azo-acoplada. Na maioria

Deteco de bilirrubina
Mtodos: Espectrofotometria direta:
Diluio da amostra em uma soluo tampo. Mtodo no apresenta uma padronizao adequada.

Enzimtico:
Enzima bilirrubina oxidase ; Oxidao da bilirrubina biliverdina (incolor). A reao monitorada pela reduo da absorvncia; Vantagem: elevada especificidade da enzima pela bilirrubina.

Cromatografia lquida de alta performance (HPLC).

Quantifica as vrias fraes da bilirrubina. Usado somente em laboratrios de pesquisa.

Urobilinognio: Urina e Fezes

Bilirrubina Conjugada

Bilirrubina Livre

Urobilinognio

Bilirrubina Livre + Bactrias

Urobilinognio: Urina e Fezes

urobilinognio na urina e nas fezes formao e excreo da bilirrubina urobilinognio na urina e nas fezes doenas hepticas, obstrues intrahepticas ou extrahepticas. Valores de referncia para o urobilinognio urinrio so de 0 -4 mg/dia.
Valores diminudos so impossveis de serem detectados. O exame visual da amostra fecal com urobilinognio reduzido revela cor cinza ou argila.

Referncia
Valter T. Motta, Bioqumica Clnica: Princpios e Interpretaes, Captulo 14 Sistema Hepatobiliar.