Potencial de accin

Una de las propiedades fundamentales de las clulas nerviosas as como de los distintos tipos de clulas musculares, es la capacidad de experimentar potenciales de accin. El potencial de accin es un rpido cambio en el potencial de membrana, seguido por un retorno al potencial de reposo. Anlogo elctrico Como se discuti en el repartido anterior, la mayora de las clulas mantienen una diferencia de potencial elctrico a travs de sus membranas plasmticas, entre los compartimentos extra e intracelular, llamado potencial de membrana. Los posibles mecanismos involucrados en la generacin y mantenimiento de este potencial ya fueron discutidos, pero podemos resaltar la importancia de los gradientes inicos y de las diferencias de permeabilidad de la membrana como factores fundamentales. ara !ue exista una diferencia de potencial elctrico a travs de la membrana, sta debe ser capa" de separar cargas de uno y otro lado de la clula. or otra parte, la membrana posee protenas !ue constituyen canales de paso para ciertos iones, resultando en la ocurrencia de flu#os $corrientes% !ue efectivamente atraviesan la membrana. or este motivo, se suele representar a una pe!ue&a unidad de superficie de membrana mediante un anlogo elctrico !ue incluye un capacitor $Cm%, en paralelo a una fuente $Vr% y a una resistencia $Rm% $'igura (%. El capacitor representa el )ec)o de !ue la membrana plasmtica es capa" de separar cargas entre ambos lados de la clula otro . La resistencia representa la existencia de canales !ue permiten el flu#o de iones a travs de la membrana. La fuente es la encargada de cargar el capacitor al potencial de reposo en ausencia de estmulos, y representa el efecto de todo el *aparato+ de generacin del potencial de reposo. ,i no se inyecta corriente en la clula, la diferencia de potencial a travs de la membrana, Vm, es igual a Vr.
Figura 1. -nlogo elctrico de la membrana. La diferencia de potencial de membrana, Vm = Vi Ve, es la resta entre el potencial intracelular y el extracelular. La capacitancia de membrana, Cm, est conectada en paralelo con una resistencia, Rm, y una fuente, Vr, la cual representa el potencial de reposo. Cuando no se est inyectando corriente, el potencial de membrana $Vm% es igual al potencial de reposo $Vr%. La orientacin de este potencial de reposo es tal !ue el lado externo de la membrana !ueda cargado positivamente, mientras !ue el lado interno negativamente.

En el circuito RC de la 'igura (, se representa a una pe!ue&a unidad de superficie de membrana, despreciando la propagacin de los flu#os de corriente a lo largo de la clula. En la rama resistiva del diagrama se agrega la fuente !ue genera el potencial de reposo, Vr. En cual!uier instante, la corriente I !ue atraviesa a la membrana es igual a la suma de la corriente de la rama resistiva, Ir, ms la de la rama capacitiva, Ic.
I = I r I c

$(%

,i no se inyecta corriente mediante electrodos, la corriente neta !ue atraviesa a la membrana es cero. or lo tanto, las corrientes resistiva y capacitiva deben ser iguales en valor absoluto y de signo opuesto.

dV La corriente capacitiva tiene la forma I C =C m d t , expresin !ue puede derivarse a partir de la

definicin de capacitancia, C =Q / V . La expresin para la corriente resistiva est dada por la ley de .)m, y es simplemente el producto de la diferencia de potencial elctrico transmembrana y el inverso de la resistencia. or tanto, podemos plantear la siguiente ecuacin diferencial(/
( ,i se define la diferencia de potencial a travs de la fuente como Vr=Vri-Vre, $Vri=Vi, y Vre=Ve%, entonces se puede obtener !ue a potencial constante, Vm-Vr = RI. Este anlisis es contrario a la convencin seg0n la cual las fuentes se suman cuando se las atraviesa desde el borne negativo )acia el positivo, lo !ue nos llevara a la siguiente ecuacin/ Vm+Vr=RI.

Cm

dV m V mVr =I dt Rm

$1%

-l integrar esta 0ltima ecuacin, es posible obtener una expresin para Vm en funcin del tiempo. La 'igura 1 muestra los resultados obtenidos como consecuencia de la inyeccin de una corriente despolari"ante $movimiento de cargas desde el interior )acia el exterior celular% a travs de la membrana plasmtica de una clula $cuadros - y 2%, y en un circuito como el presentado en la 'igura ( $cuadro C%.
Figura 2. 3nyeccin de corriente en una clula, y en un circuito RC como el de la 'igura (. -% 4iagrama de estimulacin en la clula. 2% Cambio del potencial de membrana debido a la inyeccin de un pulso rectangular de corriente saliente. C% 5ariacin de volta#e en el circuito RC en respuesta a la inyeccin de un pulso rectangular de corriente. 6omado de An introduction to Membrane Transport and Bioelectricity. 7. 8. 2yrne and ,. 9. ,c)ult".

En los grficos 2% y C% de la 'igura 1 es posible apreciar un aumento en el potencial de membrana celular $:embrane otential% $fase de despolari"acin%, y en el volta#e $Vm% del circuito, respectivamente, los cuales alcan"an, luego de un cierto tiempo, un valor estacionario $meseta de las curvas%, mientras se mantiene el pulso de corriente. -dems, en el grfico C% se observa una posterior fase de rela#acin del volta#e $descenso de Vm%, )asta su valor inicial; esta rela#acin comien"a cuando cesa el pulso de corriente. Es importante se&alar !ue las fases de aumento y de rela#acin del volta#e en el circuito RC siguen un curso temporal similar al del potencial de membrana de la clula <la fase de rela#acin del potencial de membrana no aparece en el grfico 2%=. ara la fase de despolari"acin, la corriente total, I, es distinta de cero, y el potencial de membrana se despla"a desde su valor de reposo a un nuevo valor. ,i observamos el grfico 2% de la 'igura 1, el valor de reposo en este caso es de >?@ m5, llegando a >A@ m5 por efecto del estmulo de corriente. En esta situacin, la solucin de la ecuacin 1 es/
V m=V r V m ( e t / R
m

Cm

donde Vm es el nuevo valor del potencial de membrana, Vr es el potencial de reposo, y V m = IR m representa el cambio mximo en el volta#e provocado por la entrada de corriente. Cuando t = R m C m tenemos !ue el factor !ue multiplica a Vm es igual a @.?B, indicando !ue la respuesta al estmulo $diferencia entre el potencial inicial y el final, es decir Vm % alcan" un ?BC de su valor final. - este tiempo se lo suele representar con la letra griega tau, = R m C m , y se le suele llamar constante de tiempo. En el caso del grfico 2% de la 'igura 1, D es igual a (@ ms. Cuando se interrumpe el pulso de corriente, se produce la rela#acin del potencial de membrana )acia su valor de reposo <la fase de rela#acin del potencial de membrana no aparece en el grfico 2%=. ara esta situacin, la solucin de la ecuacin 1 se obtiene igualando la corriente total I a cero, resultando/
V m=V r V m e t / R
m

Cm

En este caso, el potencial de membrana retorna exponencialmente al valor de reposo, con una constante de tiempo tambin igual a tau. Cuando t = , el factor !ue multiplica a Vm es igual a

@.BE; por lo tanto, la magnitud de la variacin del potencial de membrana e!uivale a un BEC de su valor inicial, es decir, ya se )a extinguido en un ?BC. Es importante aclarar !ue para mantener la convencin de signos, las corrientes salientes $como la !ue se aplica en el experimento anterior% llevan signo positivo, mientras !ue las corrientes entrantes llevan signo negativo. El )ec)o de !ue la membrana se despolarice o se )iperpolarice, depende del sentido de la corriente capacitiva. ,i sta es saliente $por tanto, positiva%, deposita cargas positivas en el interior de la membrana y las !uita del lado exterior, producindose una despolari"acin. ,i por el contrario la corriente capacitiva es entrante $signo negativo%, deposita cargas positivas en el exterior de la membrana y las !uita del lado interior, producindose una )iperpolari"acin. Cuando se inyecta corriente mediante un electrodo, la corriente capacitiva tiene el mismo sentido !ue la corriente total, y por lo tanto la inyeccin de corrientes entrantes hiperpolari a, mientras !ue la inyeccin de corrientes salientes despolari a. En el caso en !ue la corriente total I es igual a cero, las corrientes resistivas, o inicas, son iguales y contrarias a la capacitiva. Una corriente inica entrante circula por la rama capacitiva en sentido saliente, y por lo tanto, produce una despolari aci!n" -simismo, una corriente inica saliente circula por la rama capacitiva en sentido entrante, y por lo tanto produce una hiperpolari aci!n. Respuestas subumbral El anlogo elctrico de la 'igura ( resulta consistente con la evidencia experimental. ,i en una clula se introduce un microelectrodo $de aproximadamente @.A micrmetros de dimetro%, ubicando otro electrodo en el medio extracelular, es posible medir variaciones en la diferencia de potencial de membrana ba#o diversas condiciones. Un experimento frecuente consiste en )acer pasar un pulso de corriente de intensidad constante a travs de la membrana de una clula, y observar como responde ante este estmulo el potencial de membrana. En general, para *pe!ue&os+ valores de intensidad de corriente se observa un cambio en el potencial de membrana como el !ue se muestra en los grficos 2% y C% de la 'igura 1. El comportamiento del potencial de membrana en estas situaciones puede ser modelado satisfactoriamente por el circuito RC presentado en la 'igura (, aplicando las ecuaciones de carga y descarga del capacitor en este tipo de circuito. Potencial de accin ,i se aumenta progresivamente la intensidad del pulso de corriente aplicado en el experimento de estimulacin, y el potencial de membrana es llevado por encima de un cierto valor umbral, se desencadena lo !ue se denomina potencial de acci!n. En ste, la diferencia de potencial a travs de la membrana vara drsticamente, incluso cambiando de signo, para luego volver a su valor inicial $'igura B%. En esta particular respuesta $potencial de accin% puede identificarse una fase inicial de despolari aci!n, a lo largo de la cual el potencial de membrana tiende )acia valores positivos, una fase de repolari aci!n !ue devuelve el potencial )acia valores negativos, y una tercera fase de hiperpolari aci!n, en la cual el potencial atraviesa valores ms negativos !ue el potencial de reposo, para volver paulatinamente a ste. Un comportamiento de este tipo dista muc)o del presentado por un circuito RC simple como el de la 'igura (, por lo !ue es necesario efectuar modificaciones al anlogo elctrico para poder describir una respuesta como la del potencial de accin. - principios del siglo FF $(G(1%, 2ernstein postul !ue el potencial de accin se deba a un rpido aumento en la permeabilidad de la membrana a todos los iones. ,i bien esta )iptesis explica satisfactoriamente las medidas extracelulares del potencial de accin, una ve" !ue se desarrollaron tcnicas para el registro intracelular, se )i"o evidente una discrepancia. El )ec)o de !ue el potencial de membrana llegue a valores positivos no es explicable en trminos de un aumento indiscriminado de la permeabilidad de membrana a todas las especies inicas. 8acia mediados del siglo FF, 8odgHin, 8uxley y Iat" propusieron una explicacin basada en una idea similar a la expuesta por 2ernstein, pero teniendo en cuenta especficamente dos iones

Figura 3. Jepresentacin es!uemtica de un potencial de accin ueden distinguirse las diferentes fases, el valor umbral, y el pico mximo de volta#e alcan"ado. 6omado de/ en.KiHipedia.orgLKiHiL3mage/-ctionMpotentialMvert.png. 5isite tambin/ KKK.blacHKellpublis)ing.comLmatt)eKsLc)annel.)tml.

Como el in sodio se encuentra ale#ado del e!uilibrio en condiciones fisiolgicas $estado de reposo% #$%a=+&' mV, aproximadamente%, un aumento en la permeabilidad a este in $recordar !ue en reposo la permeabilidad de la membrana al sodio es muy ba#a% )ara tender el potencial de membrana al valor del potencial de e!uilibrio de sodio, el cual es positivo. Esto explicara el origen de la fase de despolari"acin del potencial de accin. ara !ue el potencial de membrana vuelva a valores negativos, tal como ocurre durante la fase de repolari"acin, es necesaria la existencia de una corriente inica neta saliente, !ue !uite cargas positivas del interior de la clula $placa interna del capacitor% y las deposite en el exterior de la misma $placa externa del capacitor%. El in candidato para e#ectuar esta tarea es el potasio, ya !ue su potencial de e!uilibrio es negativo en condiciones de reposo $$(= -)* mV, aproximadamente%, lo cual implica !ue a valores positivos del potencial intracelular $Vi% se producira una corriente saliente de este in, ante un aumento en la permeabilidad al mismo. Esta corriente causara !ue el potencial de membrana retorne )acia valores negativos, acercndose al potencial de e!uilibrio de potasio. ara !ue esto 0ltimo suceda, es necesario !ue la corriente de sodio, !ue se verifica en la direccin opuesta, se anule. 4ado !ue en esta fase de repolari"acin, el potencial de membrana alcan"a valores ms negativos con respecto a su valor de reposo, lo cual favorece la entrada de sodio, esta anulacin de la corriente de sodio slo podra ocurrir si se redu#era drsticamente la permeabilidad a este in, poco tiempo despus de )aber alcan"ado su valor mximo. La evidencia experimental !ue sustenta esta )iptesis fue obtenida por 8odgHin, 8uxley y Iat", !uienes aplicaron tcnicas de control de volta#e y control espacial $ver ms adelante% para develar este comple#o #uego de corrientes y conductancias !ue dependen del tiempo y del potencial de membrana. Anlogo elctrico con corrientes inicas Es posible expresar el comportamiento de la membrana en el potencial de accin, extendiendo el es!uema simple del circuito RC $'igura (%, mediante la inclusin de una fuente y de una resistencia para cada in involucrado $'igura N%. En este nuevo circuito, las resistencias se representan mediante su inversa, la conductancia $+=,-R%. La conductancia de un in est relacionada con la permeabilidad de la membrana a ese in.
Figura 4. -nlogo elctrico de la membrana con resistencias variables, especficas para cada in. Otese la diferente orientacin de las bateras de sodio y de potasio.

La flec)a !ue atraviesa a cada una de las resistencias indica !ue stas son variables, en este caso, funciones !ue dependen del potencial de membrana y del tiempo. La Ley de .)m establece !ue

I =V / R . ,i la resistencia se mantiene constante, la relacin entre el potencial y la corriente es

lineal, es decir, el grfico de I vs V ser una recta de pendiente constante igual a ,-R. Los grficos de I vs V obtenidos por 8odgHin y 8uxley, para los diferentes iones, fueron curvas con pendientes cambiantes, de lo cual puede inferirse !ue la conductancias para esos iones varan de acuerdo con el volta#e $las conductancias resultan ser dependientes del volta#e%. or otra parte, para un valor de potencial fi#o, si la resistencia es constante en el tiempo, tambin lo es la corriente. ,in embargo, los grficos de intensidad de corriente con respecto al tiempo, para un mismo valor de volta#e, muestran !ue la corriente vara de diferentes formas seg0n el in en cuestin, por lo !ue las conductancias tambin resultan ser dependientes del tiempo. Otese !ue el circuito simple de la 'igura (, !ue modela las respuesta electrotnicas o *pasivas+ de la membrana, posee una resistencia constante, y es necesaria la introduccin de resistencias variables para dar cuenta de la respuesta *activa+ del potencial de accin. En el modelo de circuito ampliado, tambin se cumple $siempre !ue no se consideren efectos de propagacin% !ue la suma de las corrientes resistivas y capacitiva es cero. Las corrientes resistivas, !ue son transportadas por los iones involucrados, dependen del valor de la conductancia para ese in, del potencial de membrana, y del potencial de e!uilibrio del in/ Ii = +i #Vm - $i. La combinacin de factores *!umicos+ y *elctricos+ !ue afectan el valor de la corriente inica estn representados como una resta de potenciales elctricos/ el potencial de e!uilibrio del in, $i, en el cual se refle#a la diferencia de concentracin de ese in a un lado y otro de la membrana, y el potencial de membrana $Vm,%. ,i el potencial de membrana es igual al potencial de e!uilibrio del in, este 0ltimo presentar una distribucin de e!uilibrio electro!umico, y por lo tanto no )abr flu#o neto a travs de la membrana del in. En la ecuacin anterior, esto se traduce en !ue la corriente transportada por el in es cero. or otra parte, la corriente tambin se anula en el caso en el !ue la conductancia para el in sea cero, lo cual es esperable/ no puede )aber corriente transportada por el in si ste es incapa" de atravesar la membrana. odemos escribir entonces la ecuacin de corriente del anlogo elctrico de la membrana con corrientes inicas/
I =C dV + %a V m $ %a + ( V m $ ( dt

$B%

Modelo de Hogd in ! Hu"le! En (GA1, 8odgHin y 8uxley proponen un modelo matemtico basado en el anlogo elctrico de la 'igura N, el cual incluye ecuaciones !ue describen la dinmica de las conductancias de sodio y de potasio en funcin del potencial de membrana y del tiempo. Este modelo es capa" de reproducir los cambios !ue experimenta el potencial de membrana durante el potencial de accin. :ediante tcnicas como la del control de volta#e $*voltage>clamp+%, la cual permite fi#ar el potencial de membrana en un valor deseado, y la del control espacial $mtodo del *cable axial+%, !ue consiste en colocar dentro y fuera del axn un par de alambres conductores $electrodos% paralelos al e#e longitudinal del mismo, logrndose as mantener constante el potencial de membrana con respecto al espacio $ / = @ % y adems anular la corriente total transmembrana, lograron colectar evidencia experimental !ue les permiti formular y a#ustar su modelo a la realidad biolgica del axn gigante del calamar. En particular, controlando el valor del potencial de membrana, pudieron obtener estimaciones del comportamiento real de las conductancias en funcin del tiempo y del potencial de membrana. -sumiendo la existencia de canales inicos1, 8odgHin y 8uxley obtuvieron ecuaciones
1 En (GA1 se desconoca el mecanismo de transporte de iones a travs de las membranas. 8odgHin y 8uxley supusieron la existencia de protenas capaces de formar poros para el pasa#e de iones, presentando estos poros conformaciones conductivas y no conductivas, dependiendo de estructuras cargadas en el interior de los mismos $*compuertas+%, las cuales eran sensibles al volta#e. En base a consideraciones cinticas acerca de la apertura y del cierre de varios de estos poros $*canales+%, desarrollaron un elegante modelo matemtico !ue describe con gran exactitud las variaciones de las conductancias con el volta#e y con el tiempo, observadas en el axn gigante de calamar. -un!ue es importante se&alar !ue seg0n el conocimiento actual sobre la estructura de los canales, el modelo de poros empleado por estos investigadores no resulta ser el ms adecuado.

para las conductancias de sodio y de potasio en funcin del volta#e y del tiempo < +i#Vm0t.=. Estas ecuaciones describen satisfactoriamente los cambios !ue se registran en las conductancias de estos dos iones, ante diferentes valores de despolari"acin. Es decir/ a% el rpido incremento $el cual alcan"a un mximo%, y el posterior decremento en la conductancia de sodio $decremento asociado a lo !ue estos investigadores llamaron *inacti1aci!n+ de la conductancia de sodio%, mientras se mantiene el valor establecido de volta#e $tcnica del control de volta#e%, b% el aumento ms lento y sostenido $ausencia del fenmeno de inactivacin% en la conductancia de potasio, mientras se mantiene el valor establecido de volta#e, y c% las conductancias de estas dos especies inicas tienden a alcan"ar valores mximos cada ve" mayores cuando se incrementa el nivel de despolari"acin. Cualitativamente, es posible constatar !ue un sistema de conductancias !ue se comporte de este modo puede originar una despolari"acin transitoria similar a la ocasionada por el potencial de accin. ,i ante la inyeccin de corriente el potencial de membrana supera cierto valor umbral, las conductancias para los iones sodio y potasio tienden a aumentar. El rpido e importante cambio en la conductancia de sodio, sumado al pronunciado gradiente electro!umico de este in $a un potencial de membrana cercano al de reposo, la diferencia Vm-$%a d como resultado un valor relativamente grande%, producen una corriente inicial entrante de sodio, la cual tiende a despolari"ar a la membrana, *colocando+ cargas positivas en el interior celular. Esto despolari"a a0n ms a la clula, favoreciendo el incremento en la conductancia de este in, lo cual promueve un mayor ingreso de sodio y un aumento en la despolari"acin de la membrana $*feedbacH positivo+%. uede identificarse a este mecanismo despolari"ante, +rosso modo, con lo !ue sucede en la fase de depolari"acin del potencial de accin $fase inicial%. La gran apertura de canales de sodio, esto es, el aumento en la conductancia de sodio, determina !ue el potencial de membrana se vuelva cada ve" ms positivo. ,in embargo, a medida !ue el potencial de membrana se aproxima al valor del potencial de e!uilibrio de sodio, la corriente entrante transportada por este in disminuye, a pesar de !ue su conductancia a0n permane"ca elevada. Esta disminucin del flu#o de cargas positivas al interior de la clula $corriente de sodio%, es acompa&ada por un aumento de la corriente saliente de potasio. - potenciales de membrana positivos, la conductancia de potasio $la cual aumenta en forma ms lenta !ue la correspondiente de sodio% se )alla cercana a su valor mximo )acia el final de la fase despolari"ante. En estas circunstancias, el gradiente electro!umico de potasio es grande $el valor de la diferencia Vm-$( es relativamente grande%. Esto trae apare#ado un aumento de la corriente de potasio )acia el final de la fase de despolari"acin, *depositndose+ cargas positivas en el exterior de la membrana, y por lo tanto promoviendo la repolari"acin de la misma. Cuando la corriente saliente de potasio pasa a ser mayor !ue la corriente entrante de sodio, el flu#o neto de cargas positivas es saliente, y la membrana inicia la fase de repolari"acin, donde el potencial de membrana tiende )acia valores negativos. Esta cada en el potencial de membrana, en primera instancia, provocara un aumento de la corriente de sodio despolari"ante, por un aumento de su gradiente electro!umico $aumento de Vm-$%a%. ,in embargo, lo !ue se verifica es una disminucin de la corriente de sodio, causada por la cada en la conductancia de este in, lo !ue se conoce como *inacti1aci!n+ de los canales del sodio. Esto previene !ue la corriente entrante aumente, y garanti"a !ue la corriente neta sea saliente, y tendiente a repolari"ar a la membrana. Una ve" !ue esta repolari"acin comien"a a consolidarse, el potencial de membrana toma valores negativos, y por consiguiente, la conductancia de potasio comien"a a disminuir, retornando paulatinamente a su valor de reposo. Jesulta importante destacar !ue la ecuacin diferencial empleada por 8odgHin y 8uxley para describir el cambio en el potencial de membrana, la cual posee expresiones explcitas para las conductancias variables de sodio y de potasio <+i#Vm0t.=, no es soluble analticamente, por lo !ue en el prctico esta ecuacin ser resuelta mediante una simulacin numrica computacional. Re#erencias Bernstein, J. (1912) Elektrobiologie. Die Lehre von den elektrischen Vorgngen im Organismus auf moderner Grundlage dargestellt. Braunschweig: Vieweg & Sohn 8odgHin -.L., 8uxley -.'.$(GA1% - !uantitative description of membrane current and its application to conduction and excitation in nerve" 2 3hysiolo+y, ((E, A@@>ANN.