Le prlvement La conservation en banque La greffe ACTIVITE TRES REGLEMENTEE
Les Tissus Loi de Biothique Rglementation Consentement du donneur Gratuit du don Scurit sanitaire
Etablissements autoriss Dossier dautorisation Rgles de bonnes pratiques de prlvement
Banque de Tissus autorises Dossier dautorisation Rgles de bonnes pratiques de conservation et de distribution
La greffe de corne
Indications des greffes de cornes
Dcompensation endothliale secondaire pseudophaque : 27% Kratocone : 25% Squelles de kratites : 14% Squelles de traumatisme : 6% Dystrophie de Fuchs : 9%
La corne Coupe sagittale de lil, partie antreiure 1. Conjonctive 2. Corne 3. Iris 4. Cristallin 5. Corps vitr 6. Corps ciliaire 7. Sclrotique
Le prlvement de corne
Donneur: PMOT PPM (dans les 8h, dans les 18h si rfrigration dans les 4h)
Prlvement: Dcoupage de la sclre Suspension dans le milieu de conservation
Restauration anatomique
Le prlvement de corne Dcoupe au Katzin sur 360
Fixation dun fil 2 mm du limbe
Le prlvement de corne Tarsorraphie par suture invisible
Mise en place dun conformateur et de colle
Contre indications
Hmopathies malignes Dmence et pathologies neurologiques Srologies positives Pathologies oculaires Dlai entre prlvement et dcs Absence de sang post mortem
Les cornes
Organoculture 31C pendant 30 jours au maximum 2 valuations de lendothlium Tests srologiques Tests bactriologiques
Evaluation
Evaluation
Evaluation
Evaluation
Remise en culture
Remise en culture
Critres de conformit
Nombre de cellules >2000/mm2 Nombre de cellules mortes <2% Aspect de la mosaque Absence de plis bleus Perte cellulaire < 20%
Arbre dcisionnel Prlvement Srologie et bactriologie conformes Non conformes destruction Non conforme destruction Non conforme destruction
Premire valuation conforme Dcision de greffe Seconde valuation conforme Mise en dturgescence
Greffe
Bactriologie ngative
Positive destruction
La greffe de corne
Traitement post-opratoire
Corticothrapie locale pendant 1 an dcroissance progressive Antibiothrapie locale Collyre ciclosporine si risque de rejet Ablation slective des points partir du 4me mois
Rsultats
Retour progressif de lAV Rsultats jugs entre 1 et 3 mois, mais la vision dfinitive nest obtenue quaprs 1 an Rejets peu frquents (10 20%), gnralement curables La greffe de corne est une des greffes les plus simples et dote dun taux de succs important 50% AV > 5/10 Concerne 4770 greffes en 2004
La greffe de membrane amniotique
Membrane amniotique Description Indications et principes Prlvement et contre indications Procd de conservation
Membrane amniotique Epithlium: sera dtruit par la conglation Membrane basale: favorise la migration, ladhsion et la diffrenciation pithliale Sera le support de la recolonisation Stroma : rservoir de facteurs de croissance avec suppression du signal TGF
Indications
Maladies inflammatoires de la corne et de la conjonctive:
Ulcres (aseptiques, par brlures,post infectieux) ne ragissant pas au traitement classique Destructions svres de la surface de la corne (brlures, maladies bulleuses)
Principes
Linflammation ne laisse pas le temps lpithlium, qui est souvent le seul touch, de se rgnrer et le tissu cicatriciel obscurci la vision Lobjectif est de limiter les phnomnes inflammatoires pour permettre la rgnration de lpithlium partir des cellules limbiques
Prlvement Slection clinique de la donneuse Consentement de la patiente Absence de CI mdicale Dpistage des marqueurs infectieux/biologiques J0 Absence de CI mdicale au cours de la csarienne Prlvement
Csarienne programme
Conditionnement pour le transport
Contre indications
Csarienne non programme Pathologie infectieuse gnitale Fivre maternelle suprieure 38C Liquide amniotique mconial Ictre dtiologie inconnue vnement mettant en jeu lenfant ou la mre Srologies positives
Procd de conservation
Transport strile Rinage des membranes avec solution ATB Sparation de la membrane du chorion
Procd de conservation
Apposition des membranes de nitrocellulose Dcoupage des fragments Contrle bactriologique et histologique Conglation en RPMI + 50% glycrol Stockage 80C
Procd de conservation Rception Contrle microbiologique du milieu de transport Sparation amnios chorion Contrle histologique du placenta Contrle microbiologique sur un fragment Conditionnement des fragments Contrle histologique sur un fragment
Dcoupage de lamnios
Conservation 80C pendant 1 an
Dpistage des marqueurs infectieux/biologiques J120
Rle du stroma Composants MEC et molcules membranaires
Cytokines
NGF KGF (stroma limbique) HGF (stroma cornen)
Syndrome dinsuffisance en cellules souches limbiques
Association : Conjonctivalisation, vascularisation, inflammation chronique, rosions rcurrentes et ulcres persistants, destruction de la membrane basale et fibrose
Indications de la greffe de cellules souches limbiques
Mcanisme: Destruction des SCL et/ou altration du stroma limbique
Causes : Hrditaires ou acquises Brlures oculaires (chimique ou thermique) Maladies bulleuses Radiation ou les anti-mtabolites
Greffe de cellules souches limbiques
Autogreffe : il controlatral Donneur apparent Allogreffe : donneur DCD Expansion ex vivo de SCL sur AMN
Expansion ex vivo de SCL sur AMN
AMN sans pithlium: couche basale cornenne (K3+, Cx 50+/- et Cx 43+) AMN sans pithlium + fibro 3T3 irradis: pithlium plutt cornenne (K3+, Cx 50+ et Cx 43+) AMN complte: couche basale limbique (K3-, Cx 50+/- et Cx 43-)
Rle de la membrane amniotique
Composition de la mb basale Molcules dadhsion communes
Rle du stroma Composant MEC et molcules membranaires Protines anti-inflammatoires, anti-angiogniques et inhibiteurs des protases Cytokines
NGF en grande quantit KGF HGF
Rsultats dexpansion ex vivo de SCL sur AMN
Tsai et al (NEJM 2000):
6 patients, greffe autologue, AMN seule, rpithalisation sans revascularisation, 83% amlioration de lacuit visuelle
Schwab et al (Cornea 2000) :
14 patients, greffe autologue (10) et allognique (4), sur 3T3 et AMN, rpithalisation stable 10/14 avec amlioration de lacuit visuelle, 4/14 conjonctivalisation
Koizumi et al (IOVS 2002) :
13 patients, greffe allognique, sur 3T3 et AMN, rpithalisation stable, 10/13 amlioration de lacuit visuelle
Reconstruction in vitro de la corne
Reconstitution dpithlium partir de limbe sur une membrane basale support Utilisation de matrice comme support pour lpithlium et dans lesquelles on injecte des kratinocytes puis des cellules endothliales
Reconstruction in vitro de la corne
Difficults: Difficult de culture de lendothlium Association des 3 composants Donner la forme Maintenir les capacits optiques
![ADENOMES_HYPOPHYSAIRES[1]](https://imgv2-1-f.scribdassets.com/img/document/89413499/149x198/afd8a65130/1334441510?v=1)
