Manual de Cianobactrias Planctnicas: Legislao, Orientaes para o Monitoramento e Aspectos Ambientais

2013

Manual de Cianobactrias Planctnicas: Legislao, Orientaes para o Monitoramento e Aspectos Ambientais

Maria do Carmo Carvalho Livia Fernanda Agujaro Denise Amazonas Pires Claudia Picoli
CETESB Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Diretoria de Engenharia e Qualidade Ambiental Diretoria de Controle e Licenciamento Ambiental Departamento de Anlises Ambientais Departamento de Laboratrios Descentralizados Departamento de Gesto Ambiental III Diviso de Anlises Hidrobiolgicas Diviso do Laboratrio de Campinas Setor de Comunidades Aquticas

So Paulo

2013

 2013 Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB)

Dados Internacionais de Catalogao

(CETESB Biblioteca, SP, Brasil)

C418m

CETESB (So Paulo). Manual de cianobactrias planctnicas : legislao, orientaes para o monitoramento e aspectos ambientais / CETESB ; Maria do Carmo Carvalho ... [et al.]. -- So Paulo : CETESB, 2013. 47 p. : il. color. ; 14 x 21cm. - - (Srie Manuais, ISSN 0103-2623) Disponvel tambm em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/> Publicado tambm em CD. ISBN 978-85-61405-46-5

1. gua poluio controle 2. gua - qualidade 3. Algas verde-azuis - monitoramento 4. Cianobactrias - florao 5. Cianobactrias - remoo. 6. Eutrofizao mananciais 7. Sade pblica - riscos. I. Carvalho, Maria do Carmo. II. Agujaro, Livia Fernanda III. Pires, Denise Amazonas IV. Picoli, Claudia. V. Ttulo. VI. Srie.

CDD (21.ed. esp) 579.390 286 CDU (2.ed. port.) 628.19 : 582.232

Catalogao na fonte e normalizao das referncias: Margot Terada - CRB 8.4422

CDD (21.ed. esp.)

AGRADECIMENTOS

As autoras agradecem bibliotecria Margot Terada pela minuciosa e preciosa reviso deste documento nos aspectos relativos s normas ABNT. Agradecemos Gerente de Diviso Marta Lamparelli, que sempre nos incentivou, e pela reviso e sugestes tcnicas. Agradecemos farmacutica bioqumica Consuelo Rico Salgueiro pela valiosa contribuio no texto sobre Sistemas de Qualidade. Agradecemos tambm ao apoio da Gerente do Departamento de Anlises Ambientais, Dra. Maria Ins Z. Sato.

LISTA DE ILUSTRAES E TABELAS

Fotos 1 2 11 12 15 16 20

Ttulo Florao de cianobactrias do gnero Microcystis no reservatrio de Barra Bonita Cianobactrias que ocorrem no Estado de So Paulo Cianobactrias que ocorrem no Estado de So Paulo Equipamentos e acessrios utilizados na Amostragem e Anlise

p. 16

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Figuras 1 2 Distribuio esquemtica de floraes. Requisitos sugeridos para controle da qualidade em laboratrios de ensaio de fitoplncton e cianobactrias

p. 41 45

Tabelas 1 Caractersticas gerais dos principais grupos de cianotoxinas, seu alvo em mamferos e gneros produtores. Limites mximos admissveis, segundo a Portaria MS 2914/11 Classificao dos corpos dgua e padres para gua doce (Resoluo CONAMA 357/2005). Valores orientadores para a proteo da sade humana em guas recreacionais. Resumo das verificaes para o controle de qualidade

p. 20

2 3

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LISTA DE SIGLAS

ALS ALS-PDC ANA BMAA CETESB CONAMA ETA LMA LPS MIB OMS STX VMP WHO

Amyotrophic lateral sclerosis Amyotrophic lateral sclerosis Parkinson dementia complex Agncia Nacional de guas Aminocido no-protico -N-metilamino-L-alanina Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Conselho Nacional do Meio Ambiente Estao de Tratamento de gua Limites Mximos Admissveis Lipopolissacardeos 2-metil-isoborneol Organizao Mundial da Sade Saxitoxina Valor Mximo Permitido World Health Organization (Organizao Mundial da Sade)

Sumrio
APRESENTAO .......................................................................................... 13 1 INTRODUO ................................................................................................... 15 2 RISCOS PARA A SADE PBLICA ................................................................ 21 3 USO DOS CORPOS DGUA E LEGISLAO ............................................. 23 3.1 Abastecimento pblico ................................................................................ 23 3.2 Preservao da vida aqutica ..................................................................... 25 3.3 Balneabilidade .............................................................................................. 26 4 PLANEJAMENTO E AES ............................................................................ 29 4.1 Preveno de Floraes de Cianobactrias .............................................. 29 4.2 Monitoramento Preventivo .......................................................................... 30 4.3 Planos de Contingncia ................................................................................ 33 4.4 Medidas Corretivas ....................................................................................... 36 4.5 Recuperao do Manancial .......................................................................... 37 5 MTODOS DE AMOSTRAGEM E ANLISE ................................................... 38 5.1 Amostragem.................................................................................................. 38 5.2 Metodologia analtica ................................................................................... 42 6 SISTEMA DE QUALIDADE ............................................................................... 43 7 RECOMENDAES FINAIS ............................................................................ 46 BIBLIOGRAFIA .................................................................................................... 48 APNDICE A Glossrio .................................................................................... 53

APRESENTAO

O rpido crescimento da populao, a formao de aglomerados urbanos e o aumento da produo agrcola e industrial resultaram no aumento do despejo de poluentes nos corpos dgua, principalmente matria orgnica e nutrientes como nitrognio e fsforo, tornando-os cada vez mais eutrofizados. Este fenmeno propicia a proliferao excessiva de algas e cianobactrias potencialmente txicas (floraes) em reservatrios e corpos hdricos usados para abastecimento pblico. Esses eventos tm sido cada vez mais frequentes, causando srios problemas econmicos e de sade pblica. A presente publicao fruto do esforo dos tcnicos para atender uma das atribuies da Companhia Ambiental de So Paulo (CETESB), que a transferncia de tecnologia. As informaes contidas nesse manual podem ser utilizadas por profissionais que trabalham em outras entidades ambientais, prestadores de servio, alm de pesquisadores de Universidades e Institutos de Pesquisa.

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1 INTRODUO
As atividades humanas vm causando um crescente enriquecimento artificial dos ecossistemas aquticos (eutrofizao) por nutrientes como nitrognio e fsforo, advindos da utilizao de fertilizantes na agricultura, da descarga de esgotos industriais e domsticos sem tratamento adequado, destruio da mata ciliar dos mananciais, alta taxa de urbanizao e falta de saneamento bsico. Esse processo produz mudanas na qualidade da gua, como a reduo do oxignio dissolvido, morte de peixes, decrscimo na diversidade de espcies da comunidade fitoplanctnica e aumento da incidncia de floraes de algas e cianobactrias potencialmente produtoras de toxinas. Outros fatores, como a baixa profundidade mdia do corpo dgua, o grande tempo de residncia e a intensa ocupao urbana e agropastoril nas reas de entorno de reservatrios tambm favorecem este fenmeno. Como principal consequncia da eutrofizao destaca-se a proliferao excessiva de organismos fitoplanctnicos, fenmeno conhecido como florao ou bloom, sendo as cianobactrias os organismos mais frequentes em floraes de guas continentais (foto 1). As cianobactrias so organismos procariontes e podem ser filamentosas ou cocides, ocorrendo isoladamente ou em colnias. So cosmopolitas e apresentam grande tolerncia s condies ambientais e climticas, podendo ser encontradas na maioria dos ecossistemas terrestres e aquticos, principalmente na gua doce, alm de ambientes extremos, como fontes termais, neve e deserto. A bainha de mucilagem e a formao de aertopos em algumas espcies so estruturas que conferem vantagens sobre outros grupos. Alm disso, algumas espcies de cianobactrias podem ser fixadoras de nitrognio, por meio de uma estrutura denominada heterocito, o que tambm representa uma vantagem sobre outras espcies.

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Foto 1 - Florao de cianobactrias do gnero Microcystis no reservatrio de Barra Bonita.

Fonte: CETESB (2006)

As floraes podem ser de dois tipos: as denominadas scums, ou natas, que apresentam elevada concentrao de clorofila a, durao de poucas horas ou dias e espessura de poucos milmetros, e as hyperscums - com massa flutuante de clulas de espessura variando entre 50 e 75 cm, densamente compactada, que impede o movimento de gua entre as clulas. A durao dessas ltimas varia de semanas at muitos meses. No entanto, algumas floraes, nas quais a densidade de algas elevada, podem apresentar uma nata conspcua apenas em algumas horas, apresentando uma distribuio mais uniforme na coluna dgua ao longo do dia. Muitas floraes j foram reportadas em corpos dgua brasileiros, inclusive em reservatrios utilizados para o consumo humano. A ocorrncia de floraes de cianobactrias nos corpos dgua utilizados para abastecimento urbano pode representar um srio risco sade da populao, em razo da capacidade destes organismos produzirem potentes toxinas. As floraes tambm podem interferir no equilbrio dos ecossistemas aquticos, pois criam um biofilme superficial que 16

altera a transparncia do meio, podendo conduzir desoxigenao do corpo dgua. Alm disso, representam um srio problema para as estaes de tratamento de gua, pois podem causar perda de carga dos filtros e alterao no odor e no sabor da gua tratada, pela produo de geosmina e o MIB - 2-metilisoborneol que so compostos metablicos desses organismos. O estudo das floraes e o conhecimento de suas causas so essenciais para sua preveno e manejo. No Brasil, vrias cianobactrias j foram relatadas como potenciais produtoras de toxinas, como espcies de Microcystis, Cylindrospermopsis, Dolichospermum (antiga Anabaena), Planktothrix, Aphanizomenon, entre outras (fotos 2 a 15). Fotos 2 a 11 - Cianobactrias que ocorrem no Estado de So Paulo.

Legenda: 2- Microcystis aeruginosa; 3- M. wesembergii; 4 M. panniformis; 5 Lyngbya sp.; 6 Radiocystis fernandoi; 7 Trichodesmium sp.; 8 Microcystis protocystis; 9 Planktothrix sp.; 10 Cyanodictyon iac; 11 Woronichinia sp. Fonte: Carvalho (2012)

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Fotos 12 a 15 - Cianobactrias que ocorrem no Estado de So Paulo.

Legenda: 12- Dolichospermum crassum (Anabaena); 13 Dolichospermum planctonicum (Anabaena); 14 Cylindrospermopsis raciborskii; 15 Cuspidothrix sp. Fonte: Carvalho (2012).

Vrios gneros e espcies de cianobactrias que formam floraes so citados na literatura como potenciais produtores de toxinas altamente potentes, denominadas cianotoxinas (tabela 1). As cianotoxinas podem ser neurotxicas, hepatotxicas ou dermatotxicas. A maioria corresponde a endotoxinas, pois somente so

liberadas para o meio externo por rompimento da parede celular, o que acontece por senescncia das clulas ou sob a ao de algicidas, como o sulfato de cobre. Outras, como a cilindrospermopsina, podem ser excretadas pela clula em condies fisiolgicas normais. As neurotoxinas so compostos alcalides de ao rpida, produzidos por vrios gneros de cianobactrias, cuja caracterstica o bloqueio neuromuscular. 18

Provocam a morte de animais no intervalo de poucos minutos a poucas horas, devido parada respiratria. Trs tipos foram descritos at o momento: anatoxinaa, anatoxina-a(s) e saxitoxinas. As hepatotoxinas receberam maior ateno por serem as causadoras mais comuns de intoxicaes. Essas toxinas apresentam ao mais lenta, causando a morte entre poucas horas e poucos dias, em decorrncia de hemorragia heptica e choque hipovolmico. Nesse grupo at o momento, foram descritas: as microcistinas, nodularinas e cilindrospermopsinas. Os lipopolissacardeos (LPS) so componentes da membrana celular das cianobactrias, e so endotoxinas pirognicas, capazes de produzir irritaes na pele e alergias. Esses compostos so importantes especialmente nos locais com risco de exposio s clulas de cianobactrias, como os destinados balneabilidade. Alguns estudos vm associando o aminocido no-protico -N-metilamino-Lalanina (BMAA), uma neurotoxina que pode ser produzida por alguns gneros de cianobactrias, como a possvel causa de esclerose aminiotrfica lateral (ALS), grave doena neurolgica que se caracteriza por paralisia progressiva associada ao Mal de Parkinson e doena de Alzheimer, atualmente designada pela sigla ALS-PDC (complexo ALS-Parkinson-demncia). Algumas cianobactrias

planctnicas foram testadas e 97% das amostras eram produtoras do BMAA, a maioria pertencente aos gneros relacionados a floraes de Microcystis, Dolichospermum e Cylindrospermopsis. Tambm vem sendo pesquisada a biomagnificao dessa toxina.

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Tabela 1 - Caractersticas gerais dos principais grupos de cianotoxinas, seu alvo primrio em mamferos e gneros produtores.
GRUPO DA TOXINA Peptdeo cclico Microcistinas Fgado ALVO PRIMRIO EM MAMFEROS GNEROS DE CIANOBACTRIAS

Nodularina Alcalides Anatoxina-a, Homoanatoxina-a

Fgado

Dolichospermum (Anabaena), Anabaenopsis, Aphanocapsa, Arthrospira, Hapalosiphon, Microcystis, Nostoc, Oscillatoria, Planktothrix, Radiocystis, Snowella, Woronichinia Nodularia Dolichospermum (Anabaena), Aphanizomenon, Arthrospira, Cylindrospermum, Microcystis, Oscillatoria, Planktothrix, Phormidium, Raphidiopsis. Dolichospermum (Anabaena) Lyngbya, Schizothrix, Planktothrix Dolichospermum (Anabaena), Cylindrospermopsis, Aphanizomenon, Raphidiopsis, Umezakia Lyngbya Dolichospermum (Anabaena), Aphanizomenon, Lyngbya, Cylindrospermopsis, Planktothrix

Nervo Simptico

Anatoxina-a(S) Aplisiotoxina, Debromoaplisiotoxina Cilindrospermopsinas

Lyngbyatoxina-a Saxitoxinas

Nervo Simptico Pele, trato gastrointestinal rgos mltiplos (fgado, rim, bao, trato gastrointestinal, corao, timo, pele) Pele, trato gastrintestinal Nervo axnico

Lipopolissacardeos (LPS)

Potencial irritante; afeta Todos qualquer tecido exposto

Fonte: Modificado de Deberdt (2002, apud Agujaro, 2007) e Stewart et al. (2006, apud Agujaro, 2007)

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Mortandades de peixes podem estar associadas s floraes de cianobactrias, embora esses organismos sejam considerados menos suscetveis s cianotoxinas quando comparados aos mamferos. A depleo de oxignio pode ser outro fator relevante nessas mortandades, tendo em vista o processo de respirao das cianobactrias durante a noite, alm da decomposio de matria orgnica. H tambm evidncias de que o excesso de cianobactrias pode causar a morte de peixes por asfixia e pela obstruo das brnquias. Apesar de no ser o foco deste manual, importante citar algumas cianobactrias marinhas nocivas, j que as floraes desses organismos podem trazer impactos econmicos severos pesca, aquacultura e turismo. No Brasil, o gnero Trichodesmium j foi identificado em vrias reas da regio litornea. Entre janeiro e fevereiro de 2000, a CETESB realizou, nas guas costeiras do estado de So Paulo, o monitoramento de uma florao de cianobactrias que se iniciou no Paran e que, devido s condies de vento e correnteza, acabaram atingindo o litoral paulistano. A espcie identificada na ocasio foi T. erythraeum, e segundo resultados de anlises da CETESB, no foi considerada txica. Floraes deste gnero, quando txicas, so responsveis pelo sintoma de febre de Tamandar. O simples contato com os aerossis liberados pelas ondas suficiente para que o banhista apresente sintomas referentes a problemas respiratrios.

2 RISCOS PARA A SADE PBLICA

A presena de cianotoxinas na gua de consumo humano implica em srios riscos sade pblica, j que so hidrossolveis e passam pelo sistema de tratamento convencional, sendo inclusive resistentes fervura. Assim, o monitoramento das cianobactrias txicas e cianotoxinas nos mananciais de gua para abastecimento pblico imprescindvel para identificar os locais com risco potencial. Tambm so 21

necessrios estudos epidemiolgicos em populaes de risco, para quantificar os efeitos adversos sade. Ressalta-se que estas publicaes so periodicamente revisadas, sendo importante verificar sempre se existem verses atualizadas dessas regulamentaes. O primeiro relato de intoxicao de animais causada por florao de cianobactrias de 1878, na Austrlia, com a morte de diversos animais. Desde ento, os registros de ocorrncia de floraes em reservatrios utilizados para abastecimento pblico tm sido frequentes no mundo todo. As intoxicaes de populaes humanas pela ingesto de gua contaminada por cianobactrias j foram descritas em diversos pases, como Austrlia, Inglaterra, China e frica do Sul. Em 1983, a populao de uma cidade rural na Austrlia foi abastecida com gua de um reservatrio com uma densa florao de Microcystis aeruginosa. O corpo dgua foi tratado com o algicida sulfato de cobre, o que causou a lise celular e liberou a toxina na gua, causando srios danos hepticos populao. Num outro evento em 1979, em Palm Island, Austrlia, cerca de 140 crianas e 10 adultos foram hospitalizados aps ingesto de gua de um pequeno reservatrio tratado com sulfato de cobre para resolver os problemas de gosto e odor. Em uma semana, muitas pessoas apresentavam hepatoenterite severa, com cerca de 20 casos necessitando terapia intravenosa. No houve mortes e investigaes posteriores levaram caracterizao do gnero Cylindrospermopsis e da cianotoxina cilindrospermopsina. No Brasil, em 1996, foi confirmado o primeiro caso de mortes humanas causadas por uma cianotoxina, com o envenenamento de pacientes em hemodilise numa clnica na cidade de Caruaru - PE. Esses pacientes, tratados durante uma semana, sofreram doena heptica severa aps a hemodilise, resultando na morte de cerca de 70 pessoas. As investigaes subsequentes revelaram que houve problemas no tratamento da gua tornando o uso da gua imprprio para consumo, resultando na contaminao dos filtros da clnica com dois tipos de cianotoxinas: microcistina e cilindrospermopsina. Microcistinas foram detectadas no sangue e fgado dos indivduos envenenados. Assim como ocorre em humanos, os animais domsticos e silvestres que bebem 22

gua em audes com florao de cianobactrias podem se intoxicar e at morrer ao ingerir clulas txicas.

3 USO DOS CORPOS DGUA E LEGISLAO

Os reservatrios podem ser utilizados para diversas finalidades, mas o abastecimento pblico e a recreao so as atividades que requerem uma maior ateno, j que as principais formas de exposio s cianotoxinas incluem a via oral e drmica, por meio da ingesto ou do uso recreacional da gua. Acredita-se que a inalao de aerossis (durante o banho, prtica de esportes aquticos, entre outros) tambm pode ser uma importante via de exposio, dependendo da toxicidade da cianotoxina, mas essa relao ainda precisa ser melhor estudada. Nos ltimos anos, em diversos locais do Brasil, tem ocorrido um aumento expressivo de floraes de cianobactrias, com a presena de cianotoxinas e outros compostos, incluindo substncias causadoras de gosto e odor. Em funo dos riscos potenciais sade e preservao da vida aqutica, este tema vem ganhando espao na legislao nacional. Ressalta-se que estas legislaes ou publicaes so periodicamente revisados, sendo importante verificar sempre se existem verses atualizadas dessas regulamentaes. O gerenciamento e controle das cianobactrias em ambientes aquticos para atendimento de legislaes requer a implementao de programas de monitoramento.

3.1 Abastecimento pblico No Brasil, a Portaria 2914/2011 do Ministrio da Sade estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilncia da qualidade da gua para consumo humano e seu padro de potabilidade. Sua primeira verso, em 2000, foi pioneira ao inserir numa norma legal a obrigatoriedade do monitoramento das cianobactrias no manancial. A portaria em vigor exige que os

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responsveis pelo controle da qualidade da gua de sistemas de abastecimento supridos por mananciais superficiais monitorem as cianobactrias no ponto de captao de gua mensalmente, quando o nmero de clulas de cianobactrias no exceder 10.000 clulas/mL e semanalmente, quando o nmero de clulas de cianobactrias exceder este valor. Tambm exige que sempre que o nmero de cianobactrias no ponto de captao exceder 20.000 clulas/mL seja realizada a anlise semanal das cianotoxinas. Nesse caso, exigida a anlise de microcistinas e saxitoxinas, devido ao seu efeito agudo e carginognico. As microcistinas ocorrem com frequncia e podem chegar a altas concentraes na gua bruta. Um exemplo a represa de Barra Bonita, onde em 2006 foram detectados valores de microcistinas de aproximadamente 400 g/L, em um episdio de florao de Microcystis. As saxitoxinas so neurotxicas e sua

presena vem sendo detectada em diferentes mananciais brasileiros. Os limites mximos admissveis - LMA de cianotoxinas nas guas de abastecimento pblico foram propostos por vrios pesquisadores, a fim de evitar os efeitos danosos sade pblica (Tabela 2). A Organizao Mundial da Sade OMS adotou como valor mximo permitido 1,0 g/L de microcistina em gua potvel, e este valor tambm foi includo na Portaria MS 2914/2011, como valor mximo aceitvel em gua para abastecimento pblico no Brasil. O LMA para saxitoxina estabelecido pela Portaria do Ministrio da Sade tambm segue o valor da OMS: 3,0 g/L. A literatura mais recente tem reavaliado esses valores, havendo uma tendncia para se consolidarem propostas de alterao dos limites considerados seguros, por isso importante se manter atualizado no que tange a essas publicaes. Em relao cilindrospermopsina, a Portaria do Ministrio da Sade recomenda essa anlise sempre que for detectada a presena de gneros potencialmente produtores, observando o valor mximo aceitvel de 1,0 g/L. Tambm existe recomendao para a anlise da presena de anatoxina-a(s) quando for detectada a presena de gneros de cianobactrias potencialmente produtores no monitoramento de cianobactrias, porm sem estabelecimento de um LMA. 24

Quando os valores do LMA na gua bruta forem atingidos ou ultrapassados, h a necessidade do uso de estratgias para evitar a intoxicao da populao.

Tabela 2 - Limites mximos admissveis para cianotoxinas, segundo a Portaria 2914/2011.

Parmetro Microcistina Condio Limites Mximos Admissveis 1,0 g/L

Anlise obrigatria em gua para consumo humano

Saxitoxinas (STX) Cilindrospermopsina Anatoxina-a(s) Recomendao de anlise em gua para consumo humano quando forem observadas cianobactrias potencialmente produtoras

3,0 g/L de equivalente STX 1,0 g/L No foi estabelecido valor

Fonte: Portaria 2914/11

3.2 Preservao da vida aqutica Quanto manuteno da integridade dos ecossistemas aquticos, a Resoluo CONAMA 357/2005, do Ministrio do Meio Ambiente dispe sobre a classificao das guas doces, salobras e salinas do Territrio Nacional, bem como estabelece as condies e padres de lanamento de efluentes, com o objetivo de preservar o equilbrio dos ambientes e das comunidades aquticas (Tabela 3). Mesmo sendo exigidas as anlises do nmero de clulas de cianobactrias e clorofila a nesta Resoluo, no h indicao da implementao de pontos de monitoramento sistemtico, nem das frequncias a serem adotadas para avaliar a clorofila a, clulas de cianobactrias e suas toxinas.

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Tabela 3 - Classificao dos corpos dgua e padres para gua doce.

CLASSES (USO DESTINADO) 1 (abastecimento de aps contato de consumidas aps contato de frutferas, aps de 60 100.000 / 10 0,05 (lntico) 50.000 /5 (dessedentao de animais) Fonte: Resoluo CONAMA 357/2005 0,075(intermedirio) 0,15 (ltico) 0,030 (lntico) 30 50.000 /5 0,050(intermedirio) 0,1 (ltico) 0,020 (lntico) 10 20.000 / 2 0,025(intermedirio) 0,1 (ltico) CLOROFILA a (g.L-1)

CIANOBACTRIA (cls.mL-1/mm3.L-1)

FSFORO TOTAL (mg.L-1)

tratamento recreao primrio, hortalias cruas). 2

simplificado, irrigao

(abastecimento de e

tratamento recreao primrio, hortalias 3

convencional, irrigao

aqicultura e pesca). (abastecimento recreao tratamento convencional ou avanado, contato secundrio,

dessedentao de animais).

3.3 Balneabilidade Um aspecto bastante preocupante do efeito das cianotoxinas na sade humana est relacionado ao uso das guas para fins recreacionais. Estudos de avaliao de risco sade humana em guas recreacionais, planos de monitoramento e aes mitigadoras em ambientes impactados por cianobactrias devem ser implementados pelos rgos ambientais e gestores de recursos hdricos. H carncia de estudos epidemiolgicos com informaes sobre os efeitos agudos e crnicos das cianotoxinas em humanos para embasar avaliaes de risco que possam proteg-los. Valores mximos permitidos - VMP de cianotoxinas em guas

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recreacionais so mais difceis de estabelecer em funo das muitas vias de exposio pelos usurios. No Brasil, a Resoluo CONAMA 274/2000, do Ministrio do Meio Ambiente, que define os critrios para a classificao de guas destinadas recreao de contato primrio (aquela de contato direto e prolongado com a gua - natao, mergulho, esqui-aqutico, na qual a possibilidade do banhista ingerir gua elevada), no contempla valores orientadores para floraes de cianobactrias. No entanto, seu texto considera passveis de interdio, pelos rgos de controle ambiental, trechos dos corpos dgua em que ocorra toxicidade ou formao de nata decorrente de floraes de algas, e estabelece como uma das condies imprprias para banho a ocorrncia de florao de algas e/ou outros organismos que oferecem risco sade humana. Apenas a inspeo visual adotada na Resoluo CONAMA 274/2000 no oferece garantias populao de uma exposio segura. Considera-se a ocorrncia de uma florao quando o nmero de clulas de cianobactrias ultrapassa 10.000 cls/mL; entretanto, dependendo da espcie, no ocorre nenhuma alterao de colorao ou formao de espumas. Neste caso, a populao pode estar sendo exposta ao risco sem o conhecimento das autoridades de sade pblica. O manual da OMS considera trs vias de exposio s cianobactrias em guas recreacionais: contato direto de partes expostas do corpo (incluindo ouvidos, olhos, boca, garganta e reas cobertas com roupa de banho que podem capturar e concentrar clulas), a ingesto acidental e a inalao de gua contendo clulas de cianobactrias.

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Tabela 4 - Valores orientadores para a proteo da sade humana em guas recreacionais.

PROBABILIDADE DE EFEITO ADVERSO SADE VALORES ORIENTADORES OU SITUAES Baixa Nvel 1
Microcistina (g/L) Clorofila a (g/L) Clulas de cianobactrias (cls./mL) Riscos Sade Aes Recomendadas 2-4 (valor esperado)* 10 20.000 Efeitos adversos agudos (ex. irritaes da pele e sintomas gastrointestinais) so pouco provveis Sinalizao e informao s autoridades pertinentes

Moderada Nvel 2
Microcistina (g/L) Clorofila a (g/L) Clulas de cianobactrias (cls./mL) Riscos Sade 20 (valor esperado)* 50 100.000 Efeitos adversos agudos resultam em irritaes na pele e sintomas gastrointestinais em baixas frequncias; potencial para efeitos crnicos, quando algumas espcies esto presentes. Procurar natas, restringir banhos, sinalizar o local, alertando para riscos moderados, informar autoridades locais e posteriormente investigar os perigos.

Aes Tpicas

Alta Nvel 3
Microcistina (g/L) Clorofila a (g/L) Clulas de cianobactrias (cls./mL) sem valores sem valores nata, milhes de clulas. Potencial para envenenamentos agudos severos; Riscos Sade Potencial para enfermidades crnicas, dependendo da espcie presente; Efeitos adversos agudos: irritaes cutneas e enfermidades gastrintestinais Aes Tpicas Aes imediatas para prevenir contato com nata, sinalizar o local, alertando para riscos altos, informar s autoridades locais.

Fonte: Modificado de WHO (2003). *Valores esperados para essa concentrao de clulas e clorofila a, caso as cianobactrias presentes sejam produtoras de cianotoxinas.

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4 PLANEJAMENTO E AES A Organizao Mundial de Sade recomenda que as entidades gestoras do sistema de abastecimento pblico de gua desenvolvam planos para garantir a qualidade da gua, incorporando metodologias de monitoramento e um plano de contingncia para gesto de riscos relativos presena de cianobactrias. Dessa forma, privilegia-se uma abordagem focada na preveno, garantindo a proteo da sade pblica. A garantia da qualidade das guas para abastecimento pblico est intimamente relacionada proteo da respectiva fonte de gua bruta. A gesto das causas de contaminao das guas naturais traduz-se em maior disponibilidade com menor grau de contaminao, implicando num menor esforo no processo de tratamento. Quanto melhor a qualidade da gua afluente a uma Estao de Tratamento de gua - ETA, menos dispendiosos os meios necessrios salvaguarda da sade pblica.

4.1 Preveno de Floraes de Cianobactrias As aes de preveno do processo de eutrofizao nos mananciais de abastecimento so extremamente importantes e devem se basear no controle dos fatores que contribuem para o processo. Algumas aes elencadas a seguir so formas de diminuir o impacto nos corpos dgua e o enriquecimento artificial dos mesmos: Regulamentao do uso e ocupao do solo na bacia hidrogrfica; Ordenamento da ocupao territorial; Adoo de boas prticas na agricultura e pecuria; Controle da eroso e do uso de fertilizantes e herbicidas; Preservao das matas ciliares; 29

 Tratamento em nvel tercirio do esgoto domstico e efluentes industriais brutos; Avaliao do regime de operao de reservatrios, como o tempo de residncia e o fluxo da gua, que podem influenciar as condies hidrodinmicas. As aes preventivas incluem ainda o monitoramento e registro das populaes de cianobactrias, e para guas recreacionais, limitaes de uso durante as floraes e recomendaes para lavar o corpo e equipamentos aps as atividades de contato primrio e secundrio.

4.2 Monitoramento Preventivo No apenas efeitos adversos da ocorrncia das cianobactrias devem ser avaliados, mas tambm seu importante papel na estrutura e funcionamento dos ecossistemas aquticos como produtores primrios, fixadores de nitrognio atmosfrico e bioindicadores de qualidade da gua. Os programas de monitoramento de floraes de cianobactrias e cianotoxinas representam um desafio especial, pois estes organismos se multiplicam no ambiente e podem concentrar-se em determinadas pores de lagos e reservatrios pela ao do vento. Assim, a formao e disperso de floraes podem mudar em dias ou mesmo horas, tornando difcil a avaliao dos perigos associados. O planejamento de um programa de monitoramento deve considerar o objetivo a ser alcanado e as caractersticas do corpo dgua avaliado. Em ambientes lnticos (represas e lagos) ocorrem considerveis populaes de cianobactrias, que encontram condies ideais para seu desenvolvimento. Nestes locais deve-se considerar a heterogeneidade espacial e temporal de sua distribuio para fins de amostragem.

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J em sistemas lticos (rios e riachos), com uma dinmica hidrolgica intensa e curto tempo de residncia, no existem condies ideais para a ocorrncia de cianobactrias planctnicas formadoras de floraes, mas podem apresentar cianobactrias bentnicas, aderidas em substratos como rochas, plantas aquticas, troncos, e nesses casos podem ser utilizadas com sucesso como indicadores biolgicos da qualidade da gua. A presena significativa de cianobactrias planctnicas nestes ambientes pode estar associada a fontes externas, como barramentos montante, lagoas marginais, despejos de lagoas de tratamento ou tanques de piscicultura. Programas de monitoramento podem incluir ainda: Avaliao dos perigos sade causados por

cianobactrias/cianotoxinas; Identificao de reas suscetveis; Desenvolvimento de regulamentaes em relao aos locais

destinados ao abastecimento e recreao; Informao e educao para o pblico; Desenvolvimento de um programa de controle de poluio por nutrientes, entre outros. O monitoramento de cianobactrias pode contemplar diferentes nveis de complexidade. Uma simples inspeo visual do corpo d gua, com mudana de colorao ou formao de natas, j indica a necessidade de um monitoramento mais sistemtico. Variveis como o fsforo total e a clorofila a tambm podem ser monitoradas, como preveno e um indcio para o aparecimento de floraes. A presena de toxinas s avaliada aps a constatao da presena de clulas de cianobactrias em densidade significativa no ambiente (acima de 10.000 cls./mL). importante ressaltar que a bacia hidrogrfica, assim como os fenmenos naturais ou antrpicos afetando esta bacia, devem ser avaliados em sua totalidade.

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A frequncia do monitoramento est relacionada ao tempo de diviso celular das cianobactrias. Apesar da Portaria 2914/2011 exigir uma frequncia mensal quando as concentraes esto abaixo de 10.000 cls./mL, recomenda-se o monitoramento quinzenal em uma primeira avaliao do ambiente. Os

monitoramentos em perodos mais curtos podem ser necessrios para avaliar tendncias de floraes j estabelecidas ou seu deslocamento vertical na coluna dgua em diferentes horrios. A predominncia de diferentes espcies de cianobactrias est relacionada s condies ecolgicas, hidrolgicas e ao manejo do local estudado. Para o monitoramento das cianotoxinas, deve-se considerar que a persistncia no ambiente varia com o tipo de toxina. As microcistinas apresentam degradao mais lenta: estudos demonstraram que foi necessrio um perodo de 30 dias para degradao de 90% da microcistina dissolvida no ambiente. Esta caracterstica importante porque, apesar de determinado local no conter um nmero significativo de clulas de cianobactrias, as toxinas podem estar presentes em concentraes elevadas. Considera-se tambm que uma mesma cepa de cianobactria pode produzir mais de um tipo de cianotoxina, com diferentes tempos de permanncia no ambiente. No monitoramento importante avaliar a variabilidade do contedo de cianotoxinas ao longo do desenvolvimento das cianobactrias, pois a toxicidade cumulativa das microcistinas representa um perigo potencial. Se a concentrao de toxinas mostra pouca variao durante vrias semanas, ou meses, de floraes para certas espcies chave, predies podem ser baseadas em contagens de clulas. Assim, as anlises de toxinas, que tem um custo mais elevado ou uma complexidade analtica maior, podem ser realizadas esporadicamente. Um importante aspecto a ser observado no monitoramento voltado para a balneabilidade a dificuldade de se realizar amostragens exatamente nas margens com floraes mais intensas, devido grande heterogeneidade espacial resultante da disperso da nata superficial.

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Para fins de abastecimento pblico, o monitoramento deve ser na tomada de gua, em perfil vertical, para acompanhar o deslocamento das cianobactrias pela coluna dagua. Pontos dispersos pelo manancial podem ser interessantes para avaliar potenciais fatores responsveis pela produo das floraes e seu deslocamento em funo de ventos e fatores hidrodinmicos. A CETESB realiza monitoramento sistemtico em vrios corpos dgua no Estado de So Paulo e utiliza ndices que contemplam cianobactrias para avaliao da qualidade da gua tanto com vistas ao abastecimento pblico quanto preservao da vida aqutica que podem ser consultados nos Relatrios Anuais de Qualidade das guas Interiores (disponvel no site www.cetesb.sp.gov.br ).

4.3 Planos de Contingncia Os Planos de Contingncia tm como objetivo descrever as medidas a serem tomadas numa situao de emergncia. Eles contemplam aes de

monitoramento e gerenciamento e estabelecem um sistema de nveis de alerta, estipulando uma sequncia de respostas graduadas na ocorrncia de uma florao de cianobactrias. Essas aes devem ser apropriadas para o local considerado. Existem muitos planos de contingncia propostos na literatura, cada um definido em funo das caractersticas do local monitorado. Qualquer desenvolvimento em massa de cianobactrias pode representar um risco em potencial para a sade, pois estima-se que muitas toxinas ainda no identificadas possam ser produzidas por estes organismos e podem ter impacto na sade da populao. Os alertas populao so de extrema importncia para esclarecimento quanto aos riscos aos quais esto expostas. Como parte dos Planos de Contigncia, as aes de monitoramento - como a avaliao preliminar da florao - incluem as inspees de cor e odor do local, observao de natas, presena de partculas na gua, verificao da ocorrncia ou no de mortandade de peixes, e outras informaes do local que possam ser importantes para a avaliao final. A inspeo visual pode gerar resultados 33

rpidos sobre a presena das floraes, principalmente quando observadas mudanas de colorao. Entretanto no totalmente eficaz, pois as natas podem se dispersar ou se acumular em curtos perodos de tempo. Alm disso, populaes metalimnticas ou bentnicas podem ser subestimadas. A avaliao das caractersticas fsicas (morfometria e ventos) e qumicas (nutrientes) de determinado corpo dgua e seu potencial para o desenvolvimento das floraes so uma etapa importante do monitoramento eficiente, que deve incluir amostragens para identificao das espcies de cianobactrias envolvidas, alm da anlise da presena e concentrao de cianotoxinas na gua. A partir desses resultados, possvel fazer uma avaliao dos riscos para a sade humana e animal, contato com os rgos pblicos responsveis pelo corpo d gua e pela comunicao dos riscos populao. O treinamento de gestores para o enfrentamento de episdios crticos desse tipo indispensvel. Os protocolos que tm sido utilizados para implementao de Planos de Contingncia em geral contemplam trs nveis de alerta, que so definidos em funo do local avaliado. A OMS, por meio do guia Toxic Cyanobacteria in Water: a guide to their public health consequences, monitoring and management , apresenta alguns valores de referncia a serem utilizados em programas de monitoramento e estabeleceu trs nveis de alerta relativos ao uso da gua para abastecimento pblico e orientaes a serem seguidas aps a identificao de cianobactrias nos corpos dgua. A Portaria 2914/2011 se baseou nesses dados da OMS para definir os valores de referncia no Brasil. Segundo a OMS, o Nvel de Vigilncia se instala quando, no monitoramento, for detectada uma colnia ou cinco filamentos de cianobactria em 1 mL da amostra de gua, quando o monitoramento passa a ser semanal. Entretanto, o documento informa que esse valor deve ser adaptado de acordo com o conhecimento do local avaliado e com o histrico do monitoramento. A Portaria 2914/2011 estabelece que o monitoramento deve ser semanal quando a contagem de clulas de cianobactrias exceder 10.000 cls/mL ou forem detectados gosto e odor 34

diferentes na gua de abastecimento, pois estes podem ser florao. Neste caso as medidas necessrias so:

indcios de uma

Aumentar a frequncia de coletas para pelo menos semanal; Inspecionar a entrada de gua na captao, para observar a presena de natas de cianobactrias;

Aplicar medidas corretivas necessrias; Realizar tratamento adequado para remoo do gosto/odor; Avaliar as aes implementadas e tomada de deciso em funo desses resultados. Se o nmero de clulas de cianobactrias diminuir, volta-se ao monitoramento regular; se esse resultado no for atingido, deve-se passar ao Alerta de Nvel 1.

O Alerta de Nvel 1 se instala a partir da confirmao de uma florao de cianobactrias potencialmente nocivas, que podem causar problemas ao abastecimento de gua. A OMS considera que os limites para esse nvel de alerta so valores superiores a 2.000 cls./mL ou 1,0 g/L de clorofila a, assumindo que a espcie considerada potencialmente txica pela literatura (como Microcystis aeruginosa, Dolichospermum (Anabaena) circinalis, Cylindrospermopsis

raciborskii, entre outras). Nesse caso, as aes envolvem: Coleta de amostras para testes de toxicidade e confirmao da identificao das cianobactrias envolvidas na florao. Essa identificao deve ser feita por um profissional especialista. interessante tambm fazer essas coletas na gua j tratada, para confirmao da no contaminao e eficincia de remoo. Verificao da eficincia do processo de conteno da florao. Alerta s autoridades locais; Manuteno do monitoramento, pelo menos semanal. Se possvel, coletar amostras em outros locais prximos para estabelecer variabilidades. 35

A tomada de deciso depende dos resultados observados nessa etapa. Se aps trs amostras sucessivas for diagnosticada tendncia de estabilizao da florao, ou se as espcies envolvidas no evento no forem txicas, o Alerta de Nvel 1 mantido, at que a florao desaparea. Os limites considerados para um Alerta de Nvel 2 (nmero de clulas de cianobactrias igual ou superior a 100.000 cels/mL ou 50 g/L de clorofila a, com presena de toxinas confirmada por anlises qumicas ou bioensaios) descrevem uma florao txica estabelecida. Essas condies so indicativas de um aumento significativo no risco de efeitos adversos sade humana pelo abastecimento de gua no tratada, ou tratada por um sistema ineficiente, mesmo se a exposio for de curta durao. O uso de algicidas nesse caso pode agravar o problema, podendo aumentar a concentrao de toxinas na gua em funo da lise celular. Se no for possvel tratar a gua com mtodos avanados, como o uso de carvo ativado, deve ser utilizado um plano de contingncia para evitar o consumo da gua. O plano pode envolver, por exemplo, a mudana da captao para um reservatrio alternativo. As medidas imediatas nesse caso incluem o aumento da frequncia de monitoramento de amostras e dos testes de toxicidade, alm da anlise da gua tratada para toxinas livres relacionadas espcie dominante da florao. Caso a anlise no esteja disponvel, a gua deve ser considerada imprpria para consumo. As autoridades locais devem ser notificadas, e a populao deve ser orientada. O uso de placas indicativas do problema recomendado.

4.4 Medidas Corretivas As medidas corretivas envolvem a interveno no ponto de captao (manejo da captao de gua bruta) e a remoo desses organismos e compostos no sistema de tratamento de gua. Devem tambm ser avaliados o uso de aeradores ou misturas artificiais da coluna dgua e a utilizao de barreiras mecnicas para isolamento das natas. 36

No ponto de captao, vrias medidas podem ser tomadas para diminuir o risco de contaminao da gua que alimenta a estao de tratamento. A escolha do local de alocao do ponto de captao deve ser feita longe de zonas abrigadas e de baixa circulao, onde as floraes tendem a se acumular. A distribuio das populaes de cianobactrias e algas deve ser levada em conta e pode influenciar na profundidade da tomada de gua, evitando a captao no ponto de mxima densidade de clulas de cianobactrias, ou estabelecendo alternativas em diferentes locais ou profundidades. As cianotoxinas so intracelulares e, em condies normais, apenas uma pequena proporo liberada pelas clulas viveis para o ambiente. Porm, quando ocorre a lise da clula, as toxinas so liberadas de forma significativa para a coluna dgua. Por isso, a remoo de cianobactrias e cianotoxinas nas estaes de tratamento deve ser feita de forma cuidadosa e planejada. Os processos de tratamento de gua para abastecimento pblico devem remover as clulas viveis sem promover a sua lise, alm de remover a frao dissolvida das cianotoxinas.

4.5 Recuperao do Manancial No caso de recuperao de um corpo dgua j eutrofizado, o controle das fontes externas de nutrientes deve ser complementado pelo controle interno de nutrientes e cianobactrias, ou seja, o tratamento do prprio corpo dgua. Esse controle pode envolver mtodos fsicos (circulao artificial da gua, aerao do hipolmnio, dragagem de sedimentos), mtodos qumicos (uso de algicidas, precipitao do fsforo) e mtodos biolgicos, com o uso da biomanipulao. Um dos mtodos qumicos mais utilizados no mundo todo, inclusive no Brasil, a aplicao de algicidas. Porm, a utilizao dessa tcnica deve ser muito cuidadosa, pois induz a lise das clulas e liberao das cianotoxinas no corpo dgua. No Brasil, o uso de algicidas para o controle do crescimento de cianobactrias em mananciais de abastecimento de gua foi proibido pela Portaria 2914/11. Essa portaria estabelece que as autoridades ambientais e de recursos 37

hdricos devem definir a regulamentao das excepcionalidades sobre o uso de algicidas. No Estado de So Paulo a Resoluo Conjunta SMA/SSRH n 004/2012 estabelece essa regulamentao.

5 MTODOS DE AMOSTRAGEM E ANLISE

A seguir sero descritos os mtodos de coleta e anlise com ilustrao dos principais equipamentos e acessrios necessrios para a coleta e anlise.

5.1 Amostragem A adoo de tcnicas adequadas de coleta constitui um dos requisitos bsicos em estudos quantitativos e qualitativos das cianobactrias. No entanto, a escolha da metodologia depende do problema a ser analisado e senso crtico na adequao dos mtodos. fundamental a obteno de amostras representativas da comunidade, seja utilizando aparelhos sofisticados ou adaptando dispositivos mais simplificados. O planejamento amostral tambm ir depender dos objetivos a serem alcanados, do esforo requerido e das condies espaciais locais. Entretanto, algumas recomendaes so extremamente importantes e devero sempre ser levadas em conta, como considerar a variabilidade do sistema a ser estudado, que reflete a distribuio espacial, vertical e horizontal das cianobactrias, a frequncia e os aspectos temporais relacionados s caractersticas ambientais nas diferentes pocas do ano. Para amostragens de monitoramento indicado consultar o Guia nacional de coleta e preservao de amostras, publicado pela CETESB e pela Agncia Nacional de guas ANA em 2012, que possui informaes teis para campanhas de monitoramento.

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Para amostragem quantitativa, geralmente utiliza-se garrafas adaptadas com dispositivo de fechamento. So garrafas cilndricas que descem abertas e presas a um cabo graduado at a profundidade desejada, onde so fechadas automaticamente por meio de um peso (mensageiro), acionando o dispositivo de fechamento. As garrafas mais comumente utilizadas so as do tipo Kemmerer, Niskin, Nansen e van Dorn (fotos 16 e 17). Essas garrafas so utilizadas para amostragem composta da coluna dgua ou em diferentes profundidades, devido a heterogeneidade vertical na distribuio destes organismos. As amostras de superfcie podem ser coletadas com garrafas do tipo van Dorn horizontal (foto 17) ou apenas utilizar baldes ou frascos de vidro. Para a determinao de presena ou ausncia de cianotoxinas recomenda-se a escolha de um local com maior concentrao de cianobactrias, podendo ser utilizada rede de plncton com abertura de malha de 20m (foto 18) ou um galo, se no local houver grande concentrao de organismos na superfcie. Deve-se, tambm, observar, em campo, a ocorrncia de ventos ou chuva, que podem prejudicar a amostragem.

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Fotos 16 a 20 - Equipamentos e acessrios utilizados na Amostragem e Anlise

Legenda: 16 e 17 Garrafa de van Dorn; 18 Rede de Plncton; 19 Cmara de SedgwickRafter; 20 Cmara de Utermhl. Fonte: Carvalho (2012).

A distribuio vertical das cianobactrias pode variar em perodos curtos de tempo - horas ou dias. Assim, a localizao da amostra na coluna de gua pode ter um efeito substancial sobre os resultados. Por exemplo, se as cianobactrias forem coletadas em profundidade na coluna de gua, e amostras para outras variveis forem coletadas na superfcie os resultados podem ser incoerentes. As distribuies das cianobactrias na coluna da gua podem ser observadas na figura a seguir.

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Figura 1 Distribuio esquemtica de floraes

Legenda: A: as cianobactrias acumulam nas margens, local associado s coletas de balneabilidade. B: mesma distribuio em toda zona ftica ou limntica. C: profundidade especfica na zona ftica, principalmente em locais rasos onde a luz penetra at o fundo. D: floraes metalimnticas. Este um caso especial de uma populao mantendo uma determinada profundidade na zona ftica. Floraes metalimnticas so evidenciadas pelos fortes aumentos do oxignio em profundidade, geralmente perto da interface do epilmnio e metalmnio. So preocupantes no abastecimento de gua potvel porque as populaes no so visiveis e podem estar localizadas na mesma profundidade de locais que so utilizados para captao de gua. E: distribuio em toda a coluna da gua. F: cianobactrias no sedimento. Fonte: Adaptado de Graham et al., (2008)

Cuidados durante a coleta so necessrios, tendo em vista o potencial de produo de toxinas e que o contato com a pele pode causar irritao. Assim, o uso de luvas durante a coleta torna-se necessrio. Ateno especial deve ser dada aos respingos nos olhos e inalao de aerossis durante a amostragem, fazendo uso de mscaras e culos quando necessrio.

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5.2 Metodologia analtica A correta identificao de cianobactrias possibilita a avaliao imediata sobre o potencial txico da gua e serve de orientao para a escolha de metodologia para deteco de cianotoxinas. A contagem de cianobactrias requer algumas estratgias que so descritas em Chorus e Bartram (1999) e Norma Tcnica CETESB L5.303 (2013, no prelo). Em caso de caracterizao de floraes, que representam risco sade pblica, necessrio considerar que pode ocorrer uma menor preciso da contagem em funo da maior rapidez de resposta. As amostras podem ser preparadas pelos mtodos de centrifugao ou sedimentao, utilizando microscpio normal ou invertido. Amostras preparadas por centrifugao podem sofrer perdas dos organismos e rompimento de clulas. Se a concentrao for muito elevada, a contagem ser mais trabalhosa e demorada. A anlise do material centrifugado pode ser feita em cmaras de Sedgwick-Rafter (foto 19). Em casos excepcionais pode-se utilizar uma lmina normal com lamnula selada com esmalte transparente, desde que conhecido o volume avaliado. O mtodo de sedimentao realizado em Cmara de Utermhl (foto 20), em que realizada uma sub-amostragem de volumes de 10, 5 ou 2 mL. A cmara dever permanecer em local plano para fornecer distribuio homognea e em ambiente mido para evitar a evaporao durante o tempo de sedimentao. Neste caso necessria a utilizao de um microscpio invertido para a contagem. Para amostras provenientes de ambientes com alta concentrao de

cianobactrias no necessrio concentrar a amostra. Em alguns casos, necessrio diluir a amostra caso haja muito material em suspenso, observando que procedimentos de diluio devem ser considerados para clculo da densidade ao final da contagem. Outra estratgia que pode facilitar a contagem de colnias de cianobactrias a 42

desintegrao das colnias e eliminao da mucilagem pela hidrlise alcalina com KOH (Hidrxido de Potssio) ou NaOH (Hidrxido de Sdio) a quente, levando-se em conta, para o clculo do resultado final, a diluio empregada no ensaio.

6 SISTEMA DE QUALIDADE O controle de qualidade laboratorial e da amostragem permitem que em todas as etapas do ensaio sejam realizadas verificaes sistemticas que garantam a representatividade, exatido e consistncia dos dados gerados. Para que se possa entender a dinmica de sistemas de qualidade, deve-se primeiramente reconhecer a importncia dos dados gerados, uma vez que aes sero tomadas a partir dos resultados ao final do processo. Sistemas da qualidade so implementados e estabelecidos baseados em normas referenciadas e na garantia da qualidade regularmente avaliada. Dos principais requisitos organizacionais para a implementao de um sistema da qualidade ressaltam-se a declarao da poltica da qualidade, manual da qualidade, procedimentos padronizados, controle de documentos, anlises crticas sistemticas, atendimento ao cliente, aes corretivas, aes preventivas, controle de trabalho no-conforme e auditorias internas. Como requisitos tcnicos assinalam-se a qualificao do pessoal, sua avaliao e treinamentos constantes, condies ambientais, metodologias referenciadas (ou validadas) e revises peridicas das mesmas, validao de mtodos, equipamentos, rastreabilidade, controle da qualidade e apresentao dos dados. A tabela 5 apresenta um resumo das verificaes sistemticas que podem ser realizadas a fim de garantir a qualidade em todas as fases do processo analtico.

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Tabela 5 Resumo das verificaes para o controle da qualidade

Amostragem Definio de um plano de amostragem; Verificaes sistemticas dos equipamentos e frascarias; Controle da temperatura e da luminosidade no acondicionamento e transporte. Amostras preservadas em campo devem ser checadas quanto possveis alteraes qumicas do preservativo, que pode perder sua funo. Tampas devem permitir total vedao da amostra; Para permitir visualizao de mobilidade de algumas espcies de cianobactrias necessria tambm a coleta de material sem o uso de preservativos. A temperatura da amostra, do local do ensaio e dos equipamentos deve ser similar para garantir uma distribuio aleatria na cmara de sedimentao para efetuar a contagem dos organismos/clulas. A agitao manual do frasco de amostragem para a homogeneizao das partculas deve ser padronizada. O preenchimento da cmara aps homogeneizao da amostra deve ser realizado delicadamente para permitir uma distribuio aleatria dos organismos/clulas. Fazer uma avaliao preliminar (boa sedimentao, distribuio e espcies presentes), percorrendo toda a cmara; Definir o tipo de leitura, transectos ou campos. O nmero de transectos ou campos determinado pelo tcnico, conforme definio do erro aceitvel e em funo do objetivo do ensaio. Grau de concordncia entre os resultados de um mesmo mensurando efetuadas sob as mesmas condies de medio. Observaes 1) Condies de repetitividade incluem: - mesmo procedimento de medio; - mesmo observador; - mesmo instrumento de medio utilizado nas mesmas condies; - mesmo local; - repetio em curto perodo de tempo. Grau de concordncia entre os resultados das medies de um mesmo mensurando efetuadas sob condies variadas de medio.

Preservao

Aclimatao

Homogeneizao Preparo da Cmara

Contagem

Repetitividade

Reprodutibilidade

(continua)

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Tabela 5 Resumo das verificaes para controle da qualidade (continuao)

Reprodutibilidade (continuao) Observaes: 1) Para que uma expresso da reprodutibilidade seja vlida, necessrio que sejam especificadas as condies alteradas que incluem: - princpio de medio; - mtodo de medio; - observador; - instrumento de medio; - padro de referncia; - local; - condies de utilizao; - tempo. Avaliar periodicamente a preciso entre os tcnicos por meio de um ensaio de uma mesma amostra aplicado a diferentes laboratrios.

Interlaboratorial

A Figura 2 apresenta uma sugesto de aes de controle da qualidade em laboratrios de ensaio de fitoplncton e cianobactrias.

Figura 2 Requisitos sugeridos para controle da qualidade em laboratrios de ensaio de fitoplncton e cianobactrias.

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7 RECOMENDAES FINAIS

A presena de toxinas naturais coloca em risco a manuteno da qualidade da gua, seja para a agropecuria, uso recreacional ou abastecimento pblico. As floraes, na sua maioria, alm de produzirem substncias txicas, produzem gosto e odor indesejveis na gua, que no so eliminados pelo sistema de tratamento convencional. A remoo de algumas substncias txicas ou organolpticas da gua por carvo ativado um procedimento bastante conhecido e deve ser utilizado durante perodos de floraes. A tcnica de remoo de toxinas mais adequada deve ser avaliada caso a caso. Em perodos de floraes de cianobactrias, no aconselhvel a pr-clorao da gua bruta, pois a grande quantidade de matria orgnica aumenta a probabilidade de formao de compostos do grupo de trihalometanos, que tem potencial cancergeno alm do possvel rompimento das clulas, liberando toxinas. Em ambientes utilizados para recreao importante a interdio de locais onde ocorram floraes e deve ser alertado populao que: Floraes de cianobactrias podem ser txicas e causar irritabilidade aos olhos e pele, bem como causar distrbios gastrintestinais, hepatoenterites e outros efeitos txicos ao homem; Nadar em praias onde as guas tm colorao verde ou massa de cianobactrias na superfcie da gua, ou beber essa gua sem os devidos tratamentos, pode causar danos sade; A fervura da gua no remove ou destri toxinas de

cianobactrias; O consumo de peixes e outros organismos de guas com floraes deve ser evitado.

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 importante lembrar que h a necessidade de diminuir ou mesmo eliminar os lanamentos de cargas poluentes no ambiente aqutico, principalmente esgotos domsticos, que so a fonte primria de nutrientes para os corpos hdricos, visando evitar a recorrncia de floraes. O controle da poluio ambiental, associado ao reflorestamento de matas ciliares, fundamental para evitar que o uso de guas superficiais para consumo humano caminhe para um colapso. O uso racional dos mananciais aliado s medidas de recuperao de guas eutrofizadas, minimizariam a proliferao exagerada de cianobactrias, inclusive nas regies favorveis para a florao.

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APNDICE A Glossrio

Aertopos: vesculas gasosas que ocorrem especialmente em cianobactrias planctnicas e auxiliam na sua flutuao. Bainha de mucilagem: camada mucilagenosa que envolve clulas ou tricomas, formada por polissacardeos excretados pelas clulas. cianobactrias mucilagenoso. Biofilme: comunidade biolgica com alto grau de organizao, na qual os organismos formam comunidades estruturadas, coordenadas e funcionais. Estas comunidades encontram-se embebidas em matrizes polimricas produzidas por elas mesmas. A associao dos organismos em biofilmes constitui uma forma de proteo ao seu desenvolvimento, favorecendo relaes simbiticas e permitindo a sobrevivncia em ambientes hostis. Cianotoxinas: Toxinas produzidas por cianobactrias que causam efeitos adversos sade do homem e de alguns animais. Cocide: esfrico. Cosmopolita: diz-se do organismo que ocorre em todos os continentes ou guas ocenicas. Endotoxina: toxinas que esto presentes no interior das clulas, e que somente so liberadas para o meio aps o rompimento da parede celular. Isso pode ocorrer devido ao envelhecimento da clula ou utilizao de compostos qumicos que atuem sobre essa parede. Epilmnio: Camada de gua superior termoclina. Eutrofizao: o processo de enriquecimento das guas de ecossistemas aquticos por meio do aumento da concentrao de nutrientes, especialmente nitrognio e fsforo. Pode ser um processo natural, devido falta de mistura 53 coloniais frequentemente chamada de Nas

envelope

entre as camadas superficiais e profundas de um ecossistema aqutico, ou artificial, com o aporte de efluentes agrcolas, urbanos ou industriais nos corpos dgua. Este enriquecimento produz mudanas na qualidade da gua, como a reduo do oxignio dissolvido, morte de peixes, decrscimo da diversidade de espcies das diferentes comunidades e aumento da incidncia de floraes de cianobactrias. Filamento: conjunto constitudo pela bainha mucilagenosa e pela fileira de clulas (tricoma). Fitoplncton: constitudo pelos organismos aquticos microscpicos

fotossintetizantes do plncton. responsvel pela base da cadeia trfica em ambientes aquticos, por meio da fotossntese. Fotossntese: Processo de converso de dixido de carbono para carbono orgnico (carbohidrato) que ocorre ao nvel dos cloroplastos, pela ao da energia luminosa absorvida pelos pigmentos fotossintetizantes, especialmente clorofila. Lntico: Ambientes de gua parada, como lagos e reservatrios. Lise: dissoluo ou destruio da clula, com rompimento da membrana celular e liberao do contedo citoplasmtico. Ltico: Ambientes de gua corrente, como rios. Manancial: uma fonte de gua, superficial ou subterrnea, utilizada para abastecimento humano e manuteno de atividades econmicas. As reas de mananciais compreendem as pores do territrio percorridas e drenadas pelos cursos dgua, desde as nascentes at os rios e represas. Mata Ciliar: Formao vegetal localizada nas margens dos rios, crregos, lagos, represas e nascentes, essencial ao equilbrio ambiental. considerada pelo Cdigo Florestal Federal como "rea de preservao permanente", com

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diversas funes ambientais, devendo respeitar uma extenso especfica de acordo com a largura do rio, lago, represa ou nascente. Metalmnio: Zona de um corpo dgua, ocupada pela termoclina e situada entre o hipolmnio e epilmnio. Monitoramento: observao, medio e avaliao contnua ou repetida do ambiente para propsitos definidos, considerando a variao espacial e temporal, utilizando mtodos comparveis para a coleta e medio dos dados. Montante: todo local que se situa antes de um ponto referencial qualquer de um curso dgua. Por exemplo: a nascente de um rio o seu ponto mais a montante. Plncton: comunidade de organismos microscpicos, que vivem em

suspenso, flutuando livremente ou com movimentos fracos, mas sem capacidade de movimentao ativa contra correntes. Procarionte: organismo cujo DNA e tilacides esto livres no citoplasma, ou seja, no possuem membrana envolvendo o ncleo e o plasto. Tcnica de Utermhl: tcnica utilizada para contagem de fitoplncton. Os organismos so concentrados diretamente em cmaras de sedimentao as cmaras de Utermhl e so observadas no microscpico invertido. Tempo de Residncia: o tempo mdio que a massa de gua fica retida em um compartimento antes de ser transportada para o compartimento adjacente. O tempo de residncia (TR) constitui um indicador importante do

comportamento ecolgico e da capacidade de auto-limpeza de sistemas estuarinos e costeiros. Zona ftica: Camada de um corpo dgua onde a luz pode penetrar o suficiente para que se d a fotossntese.

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