Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL HDL

P !ina " de # POP$IO %&' Re(iso) %%

COLESTEROL HDL*PP
+,-DAME-TO Os quilomicrons, as lipoprotenas de muita baixa densidade (VLDL) e as lipoprotenas de baixa densidade (LDL) so quantitativamente precipitadas com fosfotungstato e ons magnsio !p"s centrifuga#o, o sobrenadante contm as lipoprotenas de elevada densidade ($DL), cu%o colesterol quantificado fotometricamente mediante as rea#&es acopladas descritas abaixo ! absorb'ncia do complexo formado (vermel(o), medida em )** nm, diretamente proporcional + concentra#o de colesterol $DL da amostra
CHE steres do colesterol Colesterol + cidos graxos CHOD Colesterol + O Colest - 4 - en - ona + H O 2 2 2

POD 2H2O2 + fenol + 4 Aminoantip irina 4H2O + quinonei min a

APLICA./O CL0-ICA ! dosagem do ,olesterol $DL no sangue, %untamente com a de triglicrides e de colesterol total, empregada principalmente na avalia#o de risco de doen#a arterial coronariana AMOSTRA Preparo do Paciente ! amostra de sangue deve ser col(ida ap"s %e%um de -. (oras para evitar a interfer/ncia da lipemia p"s0prandial que geralmente est+ presente em amostras obtidas sem %e%um Amostras 1tili2adas 1oro ou plasma ((eparina, 2D3!) Estabilidade e arma2enamento da amostra O analito est+vel por 4 dias a .05 6, 3ol1me ideal 1tili2ado para an lise (Definir o volume ideal a ser encamin(ado para an+lise) 3ol1me m4nimo 1tili2ado para an lise (Definir o volume mnimo a ser encamin(ado para an+lise) Crit5rios para re6ei7o da amostra 7o utili8ar amostras fortemente (emolisadas +a2er re8er9ncia ao man1al o1 POP de coleta: separa7o e distrib1i7o de material; REAGE-TE ,TILI<ADO COLESTEROL HDL PP 9OLD !7!L:1! D:!97;13:,! L3D! ,7<= > *? -@. 4A@B***-0-C !v 7ossa 1en(ora de D+tima, .?C? Eelo $ori8onte > F9 > Erasil Darmac/utica Gespons+velH Ludmilla <arreiras ,ampos ,GD0F9 )@C? Componentes do @it ,onservar entre .05I, "* Padro > ,ontm colesterol *,). mmolBL e a8ida s"dica -@,C mmolBL !rma8enar bem vedado para evitar evapora#o ! concentra#o equivalente (@* mgBdL) do <adro est+ indicada no r"tulo do frasco &*Precipitante 0 ,ontm +cido fosfotungstato -,) mmolBL e cloreto de magnsio )@ mmolBL Estabilidade Os reagentes so est+veis at o vencimento da data de validade impressa no r"tulo do produto e na caixa quando conservados na temperatura recomendada, bem vedados e se evite a contamina#o durante o uso Rea!ente -o +ornecido Geagente de ,or do Jit de ,olesterol ><< ,at @C* da 9old !nalisa CAT; ="' MS >%%&&&'%%?>

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL HDL

P !ina & de # POP$IO %&' Re(iso) %%

Dever+ ser adquirido separadamente Preca17Aes e C1idados Especiais -0 !plicar os cuidados (abituais de seguran#a na manipula#o dos reagentes e amostra biol"gica .0 Gecomendamos o uso das Eoas <r+ticas de Laborat"rios clnicos para execu#o doteste ?0 De acordo com as instru#&es de biosseguran#a, todas as amostras devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes @0 O <adro (-) contm a8ida s"dica como conservante 2vitar contato com os ol(os, pele e mucosas 7o aspirar ou ingerir )0 Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resolu#&es normativas locais, estaduais e federais de preserva#o do meio ambiente EB,IPAME-TOS Procedimento T5cnico Man1al 2spectrofotKmetro (leitura entre @A* a )@* nm)L ,entrfugaL Ean(o0FariaL 3ubos e <ipetasL ,ronKmetro Procedimento T5cnico A1tomati2ado ,itar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamentoL Da8er refer/ncia ao manual ou <O< para utili8a#o do mesmo Procedimento T5cnico Alternati(o ,itar o equipamento alternativo e os procedimentos para medi#o dos ensaios :ndicar as possveis diferen#as quando os procedimentos manuais substiturem os procedimentos automati8ados Procedimento em Analisadores A1tom ticos Fencionar o manual ou <O< para utili8a#o do equipamento analtico !nexar o guia de aplica#o dos reagentes para o sistema autom+tico In8l19ncias Pr5*Anal4ticas Os valores de ,olesterol $DL de uma mesma pessoa e em ocasi&es diferentes podem variar consideravelmente devido +s varia#&es biol"gicas e tambm as varia#&es do mtodo analtico !s concentra#&es de colesterol $DL podem ainda variar devido aH dietas, pr+tica de exerccio, varia#o do peso corporal, a#o de (ormKnios, uso de +lcool, fumo Inter8er9ncias ! bilirrubina at ) mgBdL, lipemia (triglicrides at 4)* mgBdL), (em"lise ((emoglobina at -5* mgBdL) no produ8em interfer/ncias significativas Valores de bilirrubina acima de ) mgBdL produ8em resultados falsamente diminudos Valores de triglicrides acima de 4)* mgBdL produ8em resultados falsamente elevados PROCEDIME-TO Procedimento Man1al A*Condi7Aes da Rea7o LeituraH ,omprimento de onda )** nm FedidaH ,ontra o Eranco 3ipo de Gea#oH <onto final -otas -0! rela#o amostraB precipitante deve ser mantida em -B.0O sobrenadante obtido deve ser completamente lmpido e claro ?0!p"s a centrifuga#o, remover o sobrenadante lmpido dentro de -) minutos para evitar resultados falsamente elevados @0!lgumas amostras, principalmente as lip/micas, podem apresentar o sobrenadante lmpido com uma camada na sua superfcie que no deve ser pipetada para evitar resultados falsamente elevados )0!mostras lip/micas e algumas no lip/micas podem resultar em sobrenadantes turvos 7estes casos, diluir o soro a M com solu#o de 7a,L -)*mmolBL (*,5)N) e repetir a precipita#o Geali8ar a dosagem e multiplicar o resultado final por .

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL HDL

P !ina ' de # POP$IO %&' Re(iso) %%

7o caso de persistir a turbide8 ou de no obter uma boa sedimenta#o do precipitado, a amostra no poder+ ser utili8ada para dosagem do ,olesterol $DL por esta metodologia C0<ara a determina#o do colesterol $DL no sobrenante, utili8ar o Geagente de ,or do Jit de ,olesterol 0 << ,at @C* $* T5cnica de An lise <recipita#o das VLDL e LDL -02m um tubo de centrfuga pipetarH
!mostra <recipitante .)* OL .)* OL

.0!gitar fortemente por ?* segundos ?0,entrifugar a ?)** rpm durante -) minutos para obter um sobrenadante lmpido @0 <ipetar o sobrenadante lmpido, imediatamente ap"s a centrifuga#o, tomando o cuidado para no ressuspender o precipitado para evitar resultados falsamente elevados Ver notas acima C Colorimetria) -0:dentificar ? tubos de ensaio e pipetarH
3ubos 1obrenadante <adro Eranco 000000000 000000000 3este -** OL 0000000000 <adr o 00000000 -** OL

Geagente de ,or (,at @C*) -*** OL

-*** OL -*** OL

.0$omogenei8ar e incubar em ban(o0maria a ?4I, por -* minutos O nvel da +gua o ban(o0maria deve ser superior ao nvel dos reagentes nos tubos ?0Da8er as leituras fotomtricas do <adro (!<) e do 3este (!3) em )** nm, 8erando o aparel(o com o Eranco ! cor est+vel durante C* minutos CDLC,LOS ,< P @*mgBdL P ,oncentra#o 2quivalente indicada no r"tulo do frasco ,3 P ,oncentra#o do 3este !< P !bsorb'ncia do <adro !3 P !bsorb'ncia do 3este D, P ,< Q !< ,3 (mgBdL) P D, R !3 EEemplo ,< P @* mgBdL 1e !< P *,?.* 1e !3 P *,?A@ D, P ,< Q !< P @* Q *,?.* P -.) ,3 P D, R !3 P -.) R *,?A@ P @A mgBdL C lc1lo da Concentra7o do Colesterol 3LDL e LDL ! concentra#o do ,olesterol VLDL e LDL pode ser calculada atravs da equa#o de DriedeSald, que muito exata para amostras cu%os valores de triglicrides no ultrapassem @** mgBdL e no perten#am a pacientes portadores de lipoprotenemia do tipo ::: 2qua#o de DriedeSald ,olesterol LDL P ,olesterol 3otal > ($DL T VLDL) ,olesterol VLDL P 3riglicrides Q ) Aten7o U 2sta tcnica de dosagem adequada para fotKmetros cu%o volume mnimo de solu#o para leitura igual ou menor do que -*** OL

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL HDL

P !ina = de # POP$IO %&' Re(iso) %%

U O analista sempre deve fa8er uma verifica#o da necessidade de a%uste do volume para o fotKmetro empregado no seu laborat"rio U Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados proporcionalmente, sem alterar o desempen(o do teste e os c+lculos 2m caso de redu#o dos volumes necess+rio observar o volume mnimo de leitura fotomtrica U Volumes da amostra menores do que -* OL so crticos em aplica#&es manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a impreciso da medi#o RES,LTADOS +ator de Con(erso de ,nidades Vnidades convencionais (mgBdL) R *,*.C P Vnidades 1: (mmolBL) CO-TROLE DA B,ALIDADE Materiais :dentificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nWmero de cat+logo Geferenciar <O< para limpe8a e secagem dos materiais utili8ados Controle Interno Descrever a calibra#o peri"dica de pipetas, equipamentos utili8ados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para arma8enamento dos Xits ,itar a utili8a#o de soros controles (nvel normal >c"digo 000000000 e patol"gico >c"digo 0000000) nas an+lises reali8adas %untamente com a freqY/ncia da utili8a#o dos mesmos Descrever o procedimento de verifica#o de novos lotes de controles e reagentes ,itar <O< para controle interno Controle EEterno Descrever os procedimentos utili8ados nas avalia#&es de qualidade feitas por programas de compara#o entre laborat"rios ou outros controles de qualidadeH <7,Z01E!, eBou <2LF01E<, Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e EEterno Definir como os dados de controle so arquivados e gerenciados Da8er refer/ncia ao manual ou <O< de garantia da qualidade 3ALORES DE RE+ERF-CIA 3alores dese6 (eis o1 recomendados 1ubstituem os valores de refer/ncia e so determinados a partir de dados epidemiol"gicos, calculados estatisticamente, que relacionam os nveis do colesterol com a preval/ncia de doen#a arterial coronariana (D!,) "*Ad1ltos
,olesterol 3otal Valor dese%+vel [ .** mgBdL Valor limtrofe .** a .?A mgBdL Valor 2levado \ .@* mgBdL 00000000000000 ,olesterol $DL Valor Dese%+vel \ C* mgBdL Valor baixoH [ @* mgBdL 0000000000000 000000000000 ,olesterol LDL Valor dese%+vel [ -** mgBdL Valor limtrofe -?* a -)A mgBdL Valor elevado -C* a -5A mgBdL Valor muito elevado \ -A* mgBdL

&* Crian7as e adolescentes

,olesterol 3otal Valor dese%+vel [ -4* mgBdL Valor limtrofe -4* a -AA mgBdL Valor elevado \ .** mgBdL ,olesterol $DL Valor dese%+vel ] @* mgBdL Valor Eaixo [ ?) mgBdL 000000000000000000 ,olesterol LDL Valor dese%+vel [ --* mgBdL Valor limtrofe --* a -.A mgBdL Valor elevado \ -?* mgBdL

SIG-I+ICADO CL0-ICO !s lipoprotenas de lata densidade ($DL P $ig( Densit^ Lipoproteins) exercem uma a#o importante na concentra#o do colesterol nos tecidos !tuam ainda no retorno do colesterol dos tecidos perifricos para o fgado

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL HDL

P !ina # de # POP$IO %&' Re(iso) %%

! taxa de ,olesterol $DL mantm uma rela#o inversa com o fator de risco de D!, (Doen#a !rterial ,oronariana), isto , quanto maior o seu teor na circula#o menor o risco de D!, Deste modo, o colesterol $DL exerce um efeito protetor contra a aterosclerose ! preval/ncia da enfermidade coronariana muito maior em indivduos com nveis redu8idos de $DL do que em indivduos com teores elevados !o contr+rio, a taxa de ,olesterol LDL est+ diretamente relacionada com o fator de risco de D!,, isto , quando maior o seu teor na circula#o maior a probabilidade do individuo desenvolver essa doen#a O colesterol, a (ipertenso arterial, o fumo e a intoler'ncia + glicose so quatro grandes fatores para o desenvolvimento da D!, 2xerccios fsicos podem aumentar o ,olesterol $DL, assim como algumas drogasH lovastatina, +cido nicotnico, ciclofenil, cimetidina, etanol, estrog/nios, terbutalina Valores baixos de ,olesterol $DL so encontrados em indivduos obesos, de vida sedent+ria, fumantes, diabticos, na colestase, (epatopatia, arterioclerose, coronariopatia, etc LI-EARIDADE ! rea#o linear at .** mgBdL <ara valores maiores, diluir a amostra com solu#o de 7a,L -)* mmolBL (*,*5)N) e reali8ar uma nova determina#o Fultiplicar o valor obtido pelo fator de dilui#o empregado LIMITA.GES DO MHTODO Os resultados devero ser usados em con%unto com informa#&es disponveis da avalia#o clnica e outros procedimentos diagn"sticos RE+ERF-CIAS $I$LIOGRD+ICAS -0 Eurstein F, 1c(olnicX $G, Forfin G = Lipid Ges -A4*L --H )5? .0 Eurtis ,!, !s(Sood 2G 3iet8 Dundamento de Zumica ,lnica, @ a 2d 0 9uanabara JooganL -AA5 ?0 9rove 3$ ,lin ,(em -A4AL .)H)C* @0 _arnicX G9, 7agu^ent 3, !lbers !! ,lin ,(em -A5)L .H.-40... )0 ,OL2132GOL $DL0<<, :nstru#&es de Vso, 9old !nalisa Diagn"stica -ome Elaborado por) Apro(ado por) Implantado por) S1bstit1i POP) Re(isado por) Re(isado por) Re(isado por) Desati(ado por) Ra2o) -Kmero Cpias Destino Assinat1ra Data IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII IIIJIIIJIII