DIRECCION GENERAL DE ED CACION TECNOLOGICA IND !

TRIAL CENTRO DE "AC#ILLERATO TECNOLOGICO $ %e servicios no& '(& Po)a Rica* +eracr,) LA"ORATORIO DE ANALI!I! CLINICO!& M-%,lo I+.- ANALIZA SANGRE CON BASE EN TCNICAS INMUNOHEMATOLGICAS
Y HEMOSTTICAS

Subm !ul": R#ali$a an%li&i& '#ma("l )ic"& !# &#*i# blanca + '#m"&(a&ia ,*%c(ica n"- .

TIEMPO DE PROTROMBINA
Objetivo:
El alumno realizar en el Laboratorio la determinacin del tiempo de protrombina como prueba preoperatorio y adquirir habilidad, conocimiento y destreza en el uso del material de Laboratorio Clnico e interpretacin de estas pruebas de coagulacin sangunea .

Importancia:
Los Factores intrnsecos de la coagulacin se activan en presencia de tromboplastina calcica en plasma citratado, el tiempo de protrombina o tiempo de uic! ha servido para determinar transtornos de la coagulacin, la protrombina es la determinacin mas "recuente #unto con la $%&& 'tiempo de tromboplastina activada(. El &% es sensible a las anomalas de los "actores e)trnsecos de la coagulacin 'Factor **,+,+**, , y "ibrin-geno(, as. como sus inhibidores. Es ademas un indicador de en"ermedad hep/tica El dianostico clinico debe realizarse tomando en cuenta todos los datos clinicos y de laboratorio. 0n tiempo de coagulacin prolongado indica de"iciencia de alguno de los siguientes "actores de coagulacin1 Factor *'"ibringeno(,Factor ** 'protrombina(, Factor +' %roacelerina, "actor lbil(,Factor +** '%roconvertina2"actor estable(y "actor , '3tuart2%o4er(

Tcnica
Material
5radilla &orundas de algodn 9eringas desechables de : ml. cronmetro ; tubos de ensaye de 6: ) 677 mm 6 gradilla %ipeta automtica de 677 y <77 microlitros. =a>o ?ara a :@oC

Reactivos
cloruro de calcio citrato de sodio al 67 8 tromboplastina liquida activada

PROCEDIMIENTO:
Tcnica Manual : 6.2 obtener sangre venosa <.2 centri"ugar la muestra y separar el plasma citratado :.2 calentar a :@oC el reactivo de traba#o y la muestra ;.2A&1 mezclar suavemente por inversion y pipetear 677 microlitros de %.C. y Aeactivo de &raba#o Aeactivo de traba#o 'tromboplastina liquida activada( 677 microlitros %lasma citratado 677 microlitros B.2 atemperarlos $ :@C C D.2 pipetear Cloruro de calcio 'microlitros( 677 @.2 %oner en marcha el cronmetro y medir el tiempo de "ormaci-n del coagulo, inmediatamente despuEs de la adici-n del reactivo.

Laboratorio de Anlisis Clnicos Gonzlez Gutirrez

QFB. Gloria

CALC LO!:
Los valores se pueden e)presar en segundos, pero se recomienda e)presarlos en actividad porcentual '8(. +ALORE! DE RE.ERENCIA: &iempo de %rotrombina en segundos 1 &iempo de %rotrombina en porcenta#e '8( 6: 2 6@ segundos @72 6<7 8

E+AL ACION:
6.2 cual es la importancia de la determinacin del &iempo de %rotrombina en el Laboratorio cl.nico <.2 que contiene el reactivo de traba#o :.2 que parmetros debes cuidar en la prctica ;.2 que es la protrombina B.2 valores de re"erencia del tiempo de protrombina D.2 que se valora con la determinacin de protrombina @.2 menciona los "actores de coagulacin F.2 cual es la va comGn de la cascada de coagulacin

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QFB. Gloria Gonzlez

DIRECCION GENERAL DE ED CACION TECNOLOGICA IND !TRIAL CENTRO DE "AC#ILLERATO TECNOLOGICO $ %e servicios no& '(& Po)a Rica* +eracr,) LA"ORATORIO DE ANALI!I! CLINICO!& M-%,lo I+.- ANALIZA SANGRE CON BASE EN TCNICAS INMUNOHEMATOLGICAS
Y HEMOSTTICAS

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TIEMPO DE TROMBOPLASTINA T.T.P.

Objetivo:
El alumno realizar en el Laboratorio la determinacin del tiempo de tromboplastina como prueba preoperatorio y, adquirir habilidad, conocimiento y destreza en el uso del material de Laboratorio Clnico e interpretacin de estas pruebas de coagulacin sangunea .

Importancia:
La medida del tiempos de $%&&, es la determinacin mas comGn #unto con la %& sirve para determinar transtornos de la coagulacin y es particularmente sensible a los de"ectos de la coagulacin intrnseca '"actores +***, *,,,*,,**(. La prueba de &iempo de &romboplastina %arcial $ctivada es un procedimiento de screening universalmente utilizado para detectar anomalas en el sistema intrnseco de coagulacin. %uede usarse tambiEn en pruebas de "actores para detectar de"iciencias de los "actores **, +, +***, *,, ,, ,*, y ,**, pero es insensible al "actor plaquetario :, se recomienda para controlar la terapia por heparina.

Tcnica
Material
5radilla &orundas de algodn 9eringas desechables de : ml. cronmetro ; tubos de ensaye de 6: ) 677 mm 6 gradilla %ipeta automtica de 677 y <77 microlitros. =a>o ?ara a :@oC

Reactivos
cloruro de calcio citrato de sodio al 67 8 reactivo triniclot a%%&

PROCEDIMIENTO:
Tcnica Manual : 6.2 obtener sangre venosa <.2 centri"ugar la muestra y separar el plasma citratado :.2 calentar a :@oC el reactivo de traba#o y la muestra ;.2A&1 mezclar suavemente por inversion y pipetear 677 microlitros de %.C. y Aeactivo de &raba#o Cloruro de calcio 'microlitros( 677 microlitros %lasma citratado 677 microlitros B.2 atemperarlos $ :@C C, por B minutos D.2 pipetear Aeactivo de traba#o 'triniclot a%%( 677 @.2 %oner en marcha el cronmetro y medir el tiempo de "ormaci-n del coagulo, inmediatamente despuEs de la adici-n del reactivo.

CALC LO!:
El tiempo obtenido en segundos es el tiempo de tromboplastina parcial activada del paciente

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QFB. Gloria

+ALORE! DE RE.ERENCIA: &iempo de &romboplastina en segundos 1 <<2:7 segundos

E+AL ACION:
6.2 cual es la importancia de la determinacin del &iempo de tromboplastina en el Laboratorio cl.nico <.2 que contiene el reactivo de traba#o :.2 que parmetros debes cuidar en la prctica ;.2 que es la tromboplastina B.2 valores de re"erencia del tiempo de tromboplastina

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RETRACCION DEL COAGULO

Objetivo:
El alumno realizar en el Laboratorio el proceso de retraccin del coagulo, adquirir habilidad, conocimiento y destreza en el uso del material de Laboratorio Clnico e interpretacin de estas pruebas de coagulacin hematolgicas.

Importancia:

Cuando los mecanismos celulares de la coagulacin se activan como ocurre en una lesin vascular, las plaquetas tienden a obturar el sitio lesionado "ormando as. un trombo dentro del cual quedan atrapados ademas de plaquetas los otros elementos "ormes de la sangre. Las plaquetas entonces liberan una protena "ibrilar contrctil, llamada trombostenina que es la causante de la retraccin del coagulo, e)isten transtornos plaquetarios sobre todo cualitativos donde est "uncin se encuentra alterada $l tomar una muestra de sangre sin anticoagulante y colocarla en un tubo, ocurre primero coagulacin y posteriormente la retraccin del coguloH est en "uncin de la cantidad y capacidad "uncional de las plaquetas.

Tcnica
Material
&ubo de ensaye &orundas de algodn 9eringas de : ml 6 tubo de 6:)677 con tirabuzn =a>o ?aria a :@oC centr"uga

Reactivos
ninguno

PROCEDIMIENTO:
6.2 obtener sangre venosa con anticoagulante EI&$ al 67 8 <.2 se vaca al tubo de ensaye con tirabuzn, se de#a coagular y se mantiene a :@oC. durante 6 hora :.2 despuEs de esta incubacin se saca y se observa el coagulo 'compacto o gelatinoso, el tubo con el suero y los glbulos ro#os restantes se centri"ugan a :777 rpm durante B min, despuEs de lo cual se lee el volumen total del suero que corresponde al suero e)pulsado por el coagulo.

CALC LO!:
El volumen total de la sangre es el 677 8, se toma el total del volumen del suero despuEs de centri"ugarlo y se le resta el hemat-crito obtenido, por lo cual tenemos lo siguiente1 $ltura de la columna de suero . $ltura de la columna de sangre total , 677 J retraccin del coagulo

+ALORE! DE RE.ERENCIA: Mayor del 30 % de retraccin

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QFB. Gloria

E+AL ACION:
6.2 importancia clinica de la retraccin del coagulo <.2 que elementos contiene el coagulo :.2 cuales son los "ibrinopKptidos de las redes de "ibrina ;.2 en que casos se incrementa el valor de retraccin del coagulo

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Y HEMOSTTICAS

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FRAGILIDAD CAPILAR
Objetivo:
El alumno realizar en el Laboratorio el proceso de retraccin del coagulo, adquirir habilidad, conocimiento y destreza en el uso del material de Laboratorio Clnico e interpretacin de estas pruebas de coagulacin hematolgicas.

Importancia:
La hemostasia es un con#unto de "enmenos que tienden a controlar el sangrado cuando hay lesin en un vaso sanguneo. Ientro de los mecanismos que participan en este proceso estn 1 los vasculares y los celulares, representados por el endotelio vascular y las plaquetas respectivamente. 0na de las pruebas que mide ambos mecanismos es la prueba del torniquete o "ragilidad capilarH puesto que las plaquetas y el cemento intercelular de los vasos 'vitamina C( son los "actores de mayor importancia para conservar la integridad de los vasos. Cuando los eritrocitos se sitGan en una solucin hipotnica, el agua penetra osmticamente a travEs de la membrana esto resulta en un aumento de volumen de la cElula la cual se hincha adquiere "orma es"Erica y una vez que alcanza el volumen critico, la membrana empieza a permitir el paso de molEculas de gran tama>o tales como la hemoglobina para "inalmente reventar. 0na "ragilidad osmtica aumentada se encuentra en la es"erocitosis hereditaria y en las anemias hemolticas idiopticas y sistemtica adquiridas, en los cuales e)ista una tendencia a la es"erocitosis. 0na "ragilidad osmtica reducida denota un aplanamiento e)cesivo de los hemates. Esto se observa en anemia de cElulas "alci"ormes, talasemia, policitemia vera anemia sideropenica, ictericia y en varias anemias en las cuales se encuentran cElulas en diana.

Tcnica
Material
5radilla &orundas de algodn 9eringas desechables de : ml. &ubos de ensaye de 6: ) 677 mm Centri"uga < %ipetas graduadas de B ml. 6 pipeta graduada de < ml.

Reactivos
EI&$ al 67 8 3olucin 3alina &ampn al 6 8 pL @.;

PROCEDIMIENTO:
6.2 Mbtener sangre venosa con anticoagulante <.2se colocan etiquetas 6D tubos de ensaye en una gradilla y se enumeran del 6 al 6D :.2montar la prueba de la siguiente manera1 No de tubo ml. de Sol Sal al 1 % ml. de Agua destilada Conc. De solucin (%)

1 2 3

3.8 3.! 3.#

1.2 1"# 1.!

0. ! 0. 2 0.!8

# $ !

3.2 3.0 2.8

1.8 2.0 2.2

0.!# 0.!0 0.$!

QFB. Gloria

Laboratorio de Anlisis Clnicos Gonzlez Gutirrez

7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8

2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2

0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24 0.20 0.16

;.2mezclar el contenido de los tubos B.2agregar a cada tubo 7.< ml. de sangre invertir cuidadosamente cada tubo para asegurar la mezcla D.2 las gradillas que contienen los tubos se de#an reposar a temperatura ambiente durante :7 minutos @.2transcurrido el tiempo indicado, se mezcla cuidadosamente su contenido y se centri"ugan los tubos a <777 rpm durante B minutos

CALC LO!:
E)aminar los tubos, observando en que punto comienza la hemlisis y en que punto se completa. El menor indicio e color ro#o en el liquido sobrenadante, indica el inicio de la hemlisis de los glbulos ro#os menos resistentesH la hemlisis completa queda indicada por una solucin ro#o claro y ausencia de eritrocitos residuales en el "ondo del tubo o de enturbiamiento al agitar el tubo ligeramente +ALORE! DE RE.ERENCIA: Lemlisis inicial 1 7.;727.;;8 Lemlisis total1 7.<F27.:< 8

E+AL ACION:
6.2 que es la "ragilidad capilar <.2 que es la hemostasia :.2 que nos valora clnicamente la "ragilidad capilar ;.2valores de re"erencia B.2 que es la presin osmtica D.2 en que casos clnicos se encuentra aumentada la "ragilidad capilar

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QFB. Gloria Gonzlez