UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL

ALIMENTACIN HUMANA Y ANIMAL

DATOS PERSONALES:

ALUMNA:
CAIPO INFANTES, YESICA GIMENA

CICLO:

VI

TRUJILLO PER

2013

INGENIERA AGROINDUSTRIAL

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PRCTICA N 5: DETERMINACIN DE LA ACTIVIDAD DE LA AMILASA SALIVAL

I.

Introduccin Las enzimas pueden ser descritas como catalizadores complejos de origen biolgico, que tienen un alto grado de especificidad y eficiencia, esto permite que las reacciones qumicas dentro de las clulas ocurran rpidamente a travs de vas bien definidas; sin estas protenas especializadas, la vida tal como es no podra existir.

Las enzimas son sustancias relativamente frgiles, con tendencia a sufrir desnaturalizacin bajo condiciones inapropiadas. En el manejo de las enzimas, la primera consideracin debe ser siempre evitar la desnaturalizacin e inactivacin. Los tratamientos comparativamente violentos (cidos fuertes, altas temperaturas, etc.) frecuentemente empleados en qumica orgnica, son rpidamente fatales para las enzimas.

El xito en el manejo de las enzimas, depende de evitar condiciones en las que ellas son inestables. Estas condiciones varan para las diferentes enzimas, pero en general debe evitarse altas temperaturas y soluciones cidas y alcalinas fuertes. Es aconsejable no someterlas a temperaturas por encima de la corporal.

Las reacciones enzimticas pueden ser medidas controlando el sustrato no transformado (sustrato residual), o controlando los productos liberados, despus de un tiempo determinado de incubacin, en condiciones especficas de pH y temperatura.

Objetivos: a. La presencia de almidn no transformado (sustrato residual). b. La presencia de azcares reductores (productos de reaccin).

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II. Materiales, Reactivos y Procedimiento

Materiales - Tubos de ensayo - Pipetas de 10, 5 y 1 ml. - Cocina elctrica - Incubadora - Vaso de acero - Gradilla para tubos de ensayo

Reactivos - Solucin de almidn pH 6.0 al 1% - Cloruro de sodio 0.1 M - Enzima al 1% - cido clorhdrico 0.05 N - Solucin yodada - Reactivo de Benedict cualitativo.

Figura 1. Materiales y reactivos

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Procedimiento Se investiga la actividad de la amilasa salival: Enzima que como la pancretica, tiene la capacidad especfica de producir la degradacin del almidn a maltosa (disacrido reductor) y algo de glucosa como ejemplo de un sistema enzimtico

Se arma el siguiente esquema:

TUBOS COMPONENTES Solucin de almidn 1% pH 6.9 Solucin de cloruro de sodio 0.1 M Agua destilada I 5 ml 1 ml 4 ml II 5 ml 1 ml 3 ml

a. Colocar los tubos al bao de agua a 37C por 5 minutos. b. Agregar 1 ml de enzima al tubo II. c. Volverlos a colocar al bao de agua a 37C durante 10 minutos.

CONTROL DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA POR EL SUSTRATO RESIDUAL

De cada uno de los tubos de incubacin, transferir 0.5 ml a sus correspondientes del cuadro siguiente, inmediatamente de cumplidos los 10 minutos, sin retirar los tubos de bao de agua.

TUBOS COMPONENTES cido Clorhdrico 0.05 N De los tubos I y II: Etapa A Solucin yodada I 5 ml 0.5 ml 0.5 ml II 5 ml 0.5 ml 0.5 ml

Mezclar: Observar y anotar los resultados de cada tubo de acuerdo a la intensidad de color resultante

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CONTROL DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA POR LOS PRODUCTOS FORMADOS TUBOS COMPONENTES De los tubos I y II: Etapa A Reactivos de Benedict I 1 ml 5 ml II 1 ml 5 ml

Hervir por 10 minutos, mezclar, observar y anotar los resultados de cada tubo de acuerdo a la intensidad del color resultante.

Figura 2. Tubos de ensayo en la incubadora.

Figura 3. Adicin de amilasa al tubo II.

Figura 4. Tubos de ensayo en agua hervida.

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III. Resultados y Discusiones

Luego, de seguir el procedimiento antes indicado, para la determinacin de la actividad de la amilasa salival en almidn, se obtuvieron los siguientes resultados:

En un primer momento ambos tubos (I y II) eran de color transparente, luego de llevarlos a la incubadora, agregar al tubo II amilasa salival, para luego calentarlos y agregarlos cido Clorhdrico 0.05 N, cambiaron de color, el tubo I de color negruzco y el tubo II de color amarillo transparente. En la Figura 5, se observa el resultado de la accin de la amilasa salival en el tubo II, ya que permiti reducir el almidn en azcar, y por lo tanto, tomar este color (amarillo claro). Caso contrario con el Tubo I que tiene un color negruzco, debido a la existencia de almidn.

Figura 5. Tubo I y II (Izquierda a derecha) luego de accin de Amilasa salival; en medio Tubo I y II con Reactivo de Benedict.

La amilasa salival es la enzima bucal ms destacada e importante, su funcin principal es la de metabolizar el almidn de los residuos de los alimentos que permanecen en la boca despus de las comidas.

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Es as, que luego del tratamiento final con el Reactivo de Benedict (Figura 6), el resultado obtenido despus de hervir las muestras es positivo para el tubo II, esto nos quiere decir que existen en esa muestra azcares reductores.

Figura 5. Resultados finales

IV. Conclusiones

Se demostr la capacidad cataltica de la amilasa salival determinando la presencia de almidn no transformado y la presencia de azcares reductores.

A cierta temperatura la enzima (Amilasa salival) se activa y degrada al almidn en azcar reductor.

La amilasa salival es una enzima de vital importancia en la vida del humano y en los animales, ya que es la primera enzima que acta en el proceso de digestin de los alimentos.

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V. Referencias Bibliogrficas

CARRERA, Jorge; produccin y aplicacin de las enzimas industriales. 2003. Revista de biotecnologa en el sector agropecuario y agroindustrial.

CASTAE,F.X.; DAMM, S.A. Los tanques cilindro-cnicos y el tiempo de guarda de la cerveza. Industria cervecera. [en lnea]. Disponible en www.revistavirtualpro.com. Consultado el 7 de Noviembre de 2013.

CASTRO C.; NAVAS C.; CARO O; PIEROS Y. Obtencin de amilasas fngicas a partir de Aspergillus sp. Aislado de semillas de lentejas. Consultado en pgina oficial de Universidad Jorge Tadeo Lozano, Bogot Colombia. www.utadeo.edu.co. 10 de Noviembre del 2013.

CHERRY H.M.; HOSSAIN, Towhid; ANWAR M.N. Extracellular Glucoamylase from the Isolate Aspergillus fumigates. Pakistan Journal of Biological Sciences. 2004.

NAHVI, Iraj; EMTIAZI, Giti . Production of " Amylase by Flocculant Yeast. Pakistan Journal of Biological Sciences. 2003

MITIDIERI, Sydnei; SOUZA, Anne; SCHRANK, Augusto, HENNING, Marilene. Enzymatic detergent formulation containing amylase from Aspergillus niger: A comparative study with commercial detergent formulations. Bioresource technology. 2005.

ANEXOS

Tabla 1. Ejemplos de grasas, aceites y sus componentes principales, triglicridos o cidos grasos:

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GRASA O ACEITE GRASA HUMANA GRASA DE BUEY

COMPOSICIN Tripalmitina, dioleoestearina Dipalmito-olena, dipalmito-estearina, oleopalmito-estearina, palmito-diestearina cidos oleico, esterico, palmtico, lurico, mirstico y linolico cidos oleico, palmtico, palmito-olico, araquidnico y clupenodnico Olena, linolena y palmitina Laurina, olena, miristina y palmitina

GRASA DE CERDO

ACEITE DE BALLENA ACEITE DE OLIVA ACEITE DE PALMA

Tabla 2. Aceites y grasas, empleados frecuentemente, en la fabricacin de jabones

Sustancia Aceite de oliva Aceite de palma Aceite de ricino Aceite de aguacate Aceite de maiz Aceite de jojoba Aceite de germen de trigo Manteca de cacao ndice de saponificacin 0,134 0,141 0,128 0,133 0,136 0,069 0,132 0,137 Sustancia Aceite de coco Aceite de girasol Aceite de almendras Aceite de soja Aceite de ssamo Aceite de palmiste Cera de abeja Manteca de karit ndice de saponificacin 0,190 0,134 0,136 0,191 0,133 0,156 0,069 0,128

Tabla 3. Caractersticas que aportan al jabn diferentes grasas y aceites

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