Critrios importantes na escolha da matriz

Alta estabilidade mecnica Boa estabilidade qumica Alta capacidade de Adsoro Tamanho do poro Forma do poro Superfcie da matriz Tamanho da partcula

Escolha da matriz
Alta estabilidade mecnica Permite maximizao do fluxo de alimentao, pois minimiza a deformao do gel com o entupimento dos canais por onde passam as molcula;

Escolha da matriz
Boa estabilidade qumica Mantm a estrutura do leito, pois resistente esterilizao e sanitizao por agentes como hidrxido de sdio;

Escolha da matriz
Alta capacidade de Adsoro Diminui o volume do leito e, com isso, maximiza a velocidade de operao: depende da densidade dos grupamentos disponveis;

Escolha da matriz
Tamanho do poro Deve permitir o acesso da biomolculaalvo ao stio de adsoro;

Escolha da matriz
Forma do poro Deve ser de difcil bloqueio para no reduzir a rea superficial disponvel;

Escolha da matriz
Superfcie da matriz Deve minimizar adsores noespecficas de molculas indesejveis que, eventualmente, podem entupir a matriz;

Escolha da matriz
Densidade da matriz Deve ser adequada sua aplicao; os leitos fluidizados requerem densidades altas o suficiente para manter a estabilidade do leito;

Escolha da matriz
Tamanho da partcula Influencia a escolha do equipamento que far a separao e o coeficiente de transferncia de massa dos solutos da fase mvel para a fase estacionria.

Algumas matrizes empregadas na purificao de protenas

Celulose Agarose Dextrana Poliacrilamida

Celulose
um polissacardeo linear de monmeros de glicose unidos por ligaes 1-4. A celulose tem uma estrutura macroscpica que possibilita boa vazo da fase mvel e fcil acesso de macromolculas a seus grupos trocadores. Capacidade de adsorver gua em quantidade 4 vezes maiores superior sua massa. A celulose esfrica oferece as melhores propriedades termodinmicas, uma vez que tm melhor rigidez e estabilidade qumica.

Agarose
Polissacardio natural complexo obtido da purificao do gar. composto de cadeias polimricas do dissacardeo agarobiose (D-galactose e 3,6-anidro-1-galactose). A matriz altamente porosa e com mnima adsoro no-especfica. Gis de agarose simples tm baixa estabilidade em valores extremos de pH. Pode ser aumentada com a formao de ligaes cruzadas com dibromopropanol para propiciar um gel que pode ser autoclavado a 120oC e ser estvel em pH de 3 a 14. O grau de ligaes cruzadas e a quantidade de agarose controlam o tamanho do poro do gel.

Dextrana
Polissacardeo extracelular produzido pela bactria Leuconostoc mesenteroides, consiste de resduos de glicose unidos por ligaes 1-6. Cada resduo tem 6 grupos hidroxilas que proporcionam matriz muito hidroflica, com boa estabilidade qumica e de fcil derivatizao. As matrizes de dextrana so menos estveis hidrlise cida em comparao celulose. Os gis so macios, facilmente compressveis e intumescem em soluo aquosa. O poro relativamente homogneo e no requer qualquer pr-tratamento alm do intumescimento. As dextranas com ligaes cruzadas so autoclavveis, biodegradveis.

Poliacrilamida
Os gis de poliacrilamida so produzidos pela polimerizao da acrilamida na presena de NNmetileno bis-acrilamida. A polimerizao feita na presena de um catalisador e na ausncia de oxignio. Os gis so autoclavveis e, embora sejam quimicamente estveis podem liberar acrilamida que txica.

Cromatografia de Troca Inica

Interao Hidrofbica