2/04/00

Las principales etapas de la evolucin del metabolismo celular. Una aproximacin evolucionista al estudio del metabolismo

CHOMIN CUNCHILLOS Institut Charles Darwin International Paris

Summary
All biological phenomena are the result of an evolutionary process. The cellular metabolism is not one exception and traces of this process can be found in modern cells. In this paper we are pointing out, through a comparative analysis, metabolic features meaningful enough as to allow us to propose a philogenetical pattern of a display of cellular metabolism and identify the main stages of it. The first model of this type was developed by F. Cordn (1990) within his Theory of Integration Levels Units and it is part of the development of it. The pattern we are presenting here fully agrees whith that the Cordns, but it is reasoned from arguments outside his theory which enables us to separate the model from the theory. Besides, to arrive at the same conclusions coming from different arguments reinforces the ones from that theory and, as a consequence, the theory itself.

Resumen
Todos los fenmenos biolgicos son el resultado de un proceso evolutivo. El metabolismo celular no es una excepcin y en las clulas actuales se pueden encontrar huellas de ese proceso. En este trabajo ponemos de manifiesto, a travs del anlisis comparado, rasgos metablicos suficientemente significativos como para permitirnos proponer un modelo filogentico de despliegue del metabolismo celular e identificar las principales etapas del mismo. El primer modelo de este tipo fue desarrollado por F. Cordn (1990), en el contexto de su teora de unidades de niveles de integracin, y forma parte del desarrollo de la misma. El que presentamos aqu coincide plenamente con el de Cordn, pero est razonado a partir de argumentos que no son privativos de su teora, con ello perseguimos independizar la discusin del primero de la argumentacin de la segunda, de manera que la verosimilitud del modelo que proponemos, en el que se llega a las mismas conclusiones, refuerce los argumentos propios de la teora y, como consecuencia, a esta.

Introduccin El metabolismo celular, como cualquier otro fenmeno biolgico, es necesariamente el resultado de un proceso evolutivo. Es te trabajo trata de mostrar, entre otras cosas, que dentro de la estructura de las clulas actuales se pueden encontrar datos que debidamente interpretados permiten reconstruir de forma verosmil su evolucin. El primer modelo de desarrollo evolutivo del metabolismo celular fue realizado por el bilogo espaol, recientemente fallecido, F. Cordn (1909-1999) en un contexto muy particular: como aplicacin de su teora de unidades de niveles de integracin a la reconstruccin de la evolucin biolgica (Cordn, 1990; Cunchillos, 1997). En el trabajo que presentamos aqu se deduce la historia del metabolismo celular de consideraciones que no son privativas de esta teora, con ello perseguimos independizar la discusin del modelo de la argumentacin de la teora, de manera que la verosimilitud del primero sirva como confirmacin indirecta de la segunda (sin duda, el hecho de que, a partir de argumentos diferentes, se llegue al mismo modelo refuerza los utilizados por Cordn). Dado que el desarrollo original del modelo que exponemos se hizo en el contexto de la teora de unidades de niveles de integracin, nos parece obligado comenzar por hacer una reflexin general sobre el trabajo de Cordn. A lo largo del siglo XX, la ciencia, muy particularmente la biologa, ha utilizado frecuentemente el concepto de nivel para justificar, mediante la emergencia de propiedades nuevas en la evolucin, posturas antirreduccionistas (autonomistas desde el punto de vista de la biologa) o, ms concretamente, para defender el rechazo bien a la posibilidad bien a la pertinencia de algunas explicaciones reduccionistas [ver, por ejemplo, Bunge (1959), Rosenberg (1985) y Mayr (1988)]. Pero el reduccionismo, si es posible, siempre es deseable (Rosenberg, 1985), esto es, para descartar l as explicaciones reduccionistas hay que argumentar de forma incontestable su imposibilidad terica. Aplicando lo dicho al concepto de nivel, ste slo podr ser verdaderamente til como argumento antirreduccionista, si se le dota del suficiente contenido terico. A pesar de esto, han sido pocos los esfuerzos rigurosos por desarrollar este concepto. Cordn es una de las pocas excepciones, y su teora de unidades de niveles de integracin (a pesar de ser prcticamente desconocida) es considerada por algunos epistemlogos como la ms importante teorizacin actual de los niveles y el porvenir del pensamiento biolgico moderno (Tort, 1997)1. Esta teora considera a las protenas globulares como unidades de un nivel intermedio entre la molcula y la clula. Teniendo en cuenta que, en este marco, las unidades de nivel se corresponden con etapas de la evolucin, en sta, a partir del nivel molecular, se daran las siguientes: Evolucin molecular Evolucin protenica Evolucin celular Los ltimos veinticinco aos Cordn los consagr esencialmente a aplicar su teora a la reconstruccin del proceso de la evolucin biolgica, comenzando por la formacin de las primeras protenas en la evolucin molecular (Cordn, 1977 y 1990). Su trabajo cubre hasta las primeras fases de la evolucin celular. Uno de los resultados de este trabajo es su modelo de desarrollo filogentico del metabolismo (cuyo origen y desarrollo, segn Cordn, habra tenido lugar en la etapa celular de la evolucin). Este modelo, que constituye el primer modelo cientfico de evolucin aplicada a este objeto, reconstruye el origen y la evolucin del ncleo central del metabolismo celular formado por el ciclo del ctrico (o ciclo de Krebs) y las rutas de sntesis y de demolicin de los aminocidos, los cidos grasos y los monosacridos2. El conjunto formado por estas rutas es comn a todas las clulas actuales,

Adems de la teora de unidades de niveles de integracin de Cordn, el nico esfuerzo terico digno de sealar en este sentido es el desarrollo del concepto de nivel de complejidad hecho por v. Bertanffy (1949) , muy limitado pero que no deja de ser el que utiliza generalmente la ciencia actual. En Introduction la thorie des niveaux dintgration Ch. Cunchillos (1997) se puede encontrar una discusin de las dos teoras. 2 No tenemos en cuenta, en este trabajo, el metabolismo de las molculas complejas, ya que, aunque probablemente son los precursores trficos de las que consideramos, su metabolismo se reduce, en todos los casos, a una hidrlisis que produce los monomeros correspondientes. La comparacin de las diferentes hidrlisis no permite decidir sobre la anterioridad de una sobre otra, en cualquier caso, sea cual sea el polmero precursor, a partir de la hidrlisis se tuvo que desarrollar la ruta de demolicin que corresponde a sus monmeros ; como consecuencia, a partir del anlisis comparado del metabolismo de estos se puede deducir el orden de utilizacin de las molculas complejas de las que proceden. Tampoco se consideran otros metabolitos como los aminocidos aromticos o las bases nitrogenadas, molculas con alto contenido en nitrgeno que poseen una estructura aromtica compleja. Estas molculas muy probablemente han sido poco frecuentes en el medio en todos los momentos de la evolucin, por lo que raramente formaran parte del ambiente trfico celular. En cualquier caso, no es verosmil que hayan sido utilizadas en el catabolismo primitivo por dos razones : 1/ su bajo contenido energtico en comparacin con las que consideramos (aminocidos alifticos, monosacridos y cidos grasos) ; y 2/ porque su proporcin C/N es poco adecuada a la

procariotas y eucariotas, y en consecuencia, tuvo que desarrollarse en un proceso ocurrido en una etapa previa a su diversificacin (en una clula ancestral de todas las actuales). De su concepto de unidad de nivel de integracin y del carcter de unidad de nivel directamente infracelular que, para l, tiene la protena, Cordn (1994) concluye que la primera clula no pudo originarse sino a partir de una asociacin heterotrofa de protenas (Cordn, 1977) que se alimentaba de pptidos procedentes de restos de otras asociaciones, que le llegaban disueltos o en suspensin en el agua, y de los que extraa, uno a uno, los aminocidos con los que, a continuacin, cada protena reconstrua su soma y la asociacin, como consecuencia, el suyo propio. En este marco terico, el metabolismo de la primera clula estara reducido a la hidrlisis y la sntesis del enlace peptdico y a la utilizacin metablica de los aminocidos producidos en la primera; en consecuencia, las rutas metablicas de estos tuvieron que ser las primeras en desarrollarse (antes que las de los monosacridos y las de los cidos grasos). Como vemos ms adelante, el anlisis comparado de las rutas de sntesis y de demolicin de los diferentes metabolitos nos lleva a la misma conclusin en cuanto a la anterioridad del metabolismo de los aminocidos en el desarrollo filogentico. Ya hemos adelantado que para la argumentacin de nuestra exposicin no hemos utilizado los criterios caractersticos de la citada teora, sino otros que se pueden asumir con carcter general, de forma que el modelo deducido de ellos, siendo evidentemente compatible, resulta independiente de la teora de niveles de integracin. Hay que sealar tambin que el anlisis cladstico de las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos (nico sector en que, de momento, se ha aplicado) ha confirmado las fases propuestas por el modelo que corresponden al desarrollo evolutivo del metabolismo de los aminocidos (Cunchillos y Lecointre, 1999). El mtodo de trabajo en la reconstruccin del desarrollo filogentico del metabolismo celular En la reconstruccin de una filogenia, el anlisis comparado se ha mostrado siempre como una herramienta eficaz, como vamos a ver, es tambin de gran ayuda para estudiar la evolucin del metabolismo celular, siempre y cuando se escojan adecuadamente las caractersticas del metabolismo que van a ser comparadas. La comparacin es la herramienta ideal para reconstruir el pasado a partir de los datos del presente, nos permite identificar aquellos parecidos actuales que indican un origen comn (homologas), establecer una subordinacin de caracteres y, con ello, reconstruir una filogenia. La comparacin, en el mbito metablico, entre clulas actuales pone en evidencia, sobre todo en bacterias pero tambin en clulas eucariontes, una gran variabilidad - diferentes formas de heterotrofismo, de autotrofismo fotosinttico y quimiosinttico, diversas formas de respiracin o fermentacin, etc. - pero bajo esta diversidad se comprueba la existencia de un ncleo metablico universal, comn a todas las clulas actuales, formado por unas cincuenta rutas entre otras, las de sntesis y las de demolicin de los aminocidos y los cidos grasos, la glucolisis, la glucognesis, la ruta de las pentosas y el ciclo de Krebs. Este ncleo es doblemente importante porque, por una parte, constituye la mayor parte del metabolismo de cualquier clula y, por otra, porque en l confluyen o de l parten las otras rutas ms especficas. Esta universalidad fue detectada ya en 1926 por Kluyver, que enunci el concepto de unidad de la bioqumica considerado por Van Niel (1949) como el principal argumento a favor del origen monofiltico de las clulas. Dicho de otra manera, ese ncleo comn tuvo que desarrollarse durante una etapa inicial de la evolucin celular, en una clula ancestral de todas las actuales3. Como consecuencia, las diferencias metablicas que podemos observar hoy entre dos especies celulares (p. e. la presencia de una transformacin o ruta metablica diferente) se deben atribuir bien a adquisiciones posteriores al desarrollo del citado ncleo comn, que nos informan sobre el desarrollo del metabolismo en una etapa posterior, o bien cabe la posibilidad de que tales diferencias representasen adquisiciones anteriores al despliegue de ese conjunto, conservadas en unas especies y perdidas en otras, en cuyo caso su comparacin tampoco nos orienta sobre la etapa que queremos reconstruir. A otro nivel, el de la estructura de las protenas, la universalidad del citado ncleo metablico supone que una misma transformacin metablica sea llevada a cabo, en diferentes especies, por enzimas que, teniendo la misma especificidad de funcin y de substrato, presentan entre s importantes diferencias estructurales. Admitido el desarrollo durante una etapa comn a la evolucin de todas las clulas actuales del
composicin celular. Adems sus rutas metablicas dependen de las de los otros monmeros para su ingreso y salida del ciclo, lo que sugiere que su despliegue filogentico fuese posterior.
3

La falta de sentido de las transformaciones metablicas aisladas nos impone el hecho de que el metabolismo (considerado como un conjunto de transformaciones organizadas en rutas, lo que supone otro de protenas funcionando coordinadamente) tiene que haberse desarrollado en la etapa celular de la evolucin. (Probablemente haya existido un metabolismo precelular, correspondiendo a la actividad enzimtica de protenas aisladas no coordinadas en un conjunto organizado.) 3

ncleo metablico cuya historia tratamos de reconstruir, es obligado suponer que las protenas que realizan la misma funcin enzimtica en distintas especies celulares tienen un origen comn, esto es, se han diferenciado a partir de una protena ancestral y, por consiguiente, estas diferencias han aparecido despus de la separacin de esas especies. La comparacin entre las estructuras de dichas protenas puede servir para deducir su evolucin a partir del momento de separacin de dichas especies celulares, no as para reconstruir la historia del ncleo metablico comn, desarrollado en una etapa anterior. Los mismos argumentos nos permiten descartar, para los fines que nos proponemos, la comparacin entre las secuencias de nucletidos de los genes correspondientes a esas protenas. Sin embargo esta conservacin de la funcin obliga a pensar que las diferencias detectadas no han afectado a los rasgos estructurales de los centros activos que son necesarios para la catlisis (p. e. en la triosa-fosfato-isomerasa, se puede substituir, por otro aminocido, cualquier histidina diferente a la his-95, que forma parte del centro activo, sin que se vea afectada la actividad cataltica del enzima, pero la substitucin de este aminocido por asparraguina supone una disminucin de 10.000 veces de esta actividad, (Knowles 1991), de lo que es fcil deducir que esa histidina es uno de los rasgos estructurales necesarios para la catlisis y que habr sido preservado en la evolucin, si bien hay que tener en cuenta que el que se haya conservado su posicin relativa en el centro activo en la estructura terciaria de la protena no necesariamente quiere decir que se haya conservado su posicin en la secuencia de aminocidos no necesariamente tiene que tratarse de la posicin 95). Parece, pues, que sera muy interesante poder comparar, de forma ordenada y sistemtica, las estructuras de los centros activos de protenas con parecidas y diferentes funciones enzimticas, pertenecientes a la misma y a distintas especies celulares, con el fin de tratar de reconstruir la evolucin de dichos centros a lo largo del desarrollo del metabolismo celular. Desgraciadamente, las dificultades para ello son todava enormes y, hasta el momento, existen pocos datos en ese sentido. (Hay que destacar el excelente trabajo de revisin de la estructura del centro activo de la triosa-fosfato-isomerasa, realizado por Knowles, que acabamos de citar.) Dada la estricta complementariedad entre cada centro activo y la reaccin que cataliza, una alternativa a la comparacin de los primeros es la de las propias transformaciones metablicas, con la ventaja aadida de que conocemos mucho mejor los mecanismos enzimticos de las transformaciones metablicas que la estructura de los correspondientes centros activos. Cordn (1990) se ha apoyado, en parte, en esta metodologa para construir su modelo. Por otra parte, como sealan, entre otros, Zuckerkandl y Pauling (1965) las estructuras biolgicas conservan inscrita en su organizacin gran parte de su propia historia. Como vemos a continuacin, una reflexin sobre la estructura y la funcin del metabolismo celular permite obtener datos pertinentes a la reconstruccin de esa historia. En nuestro intento de reconstruir el desarrollo evolutivo del metabolismo celular hemos partido, entre otras consideraciones, del anlisis comparado: 1/ de las transformaciones metablicas entre s; 2/ de su organizacin en rutas; y 3/ de otros rasgos del metabolismo de inters filogentico. La comparacin entre transformaciones metablicas se ha mostrado particularmente til para decidir el origen comn de dos de ellas o la anterioridad evolutiva de una respecto a otra, lo que ha permitido a Cordn reconstruir con gran detalle el desarrollo evolutivo del metabolismo celular, sin embargo, como vemos a continuacin, para establecer las grandes etapas de este desarrollo (a las que, por razones de espacio, nos limitamos aqu), hay que recurrir a otro tipo de comparaciones. Las principales etapas del desarrollo del metabolismo celular 1 El metabolismo de la primera clula El metabolismo de las clulas actuales es un complejo proceso constituido por un millar de reacciones qumicas (catalizadas por protenas globulares: los enzimas) ordenadas en un centenar de secuencias (las rutas metablicas) que, en lneas generales, conectan la entrada de alimento, su aprovechamiento, la sntesis de componentes del soma celular, la de reservas y el aprovechamiento de stas. Como cualquier otro fenmeno biolgico, el metabolismo no puede ser sino un resultado de la evolucin, su propia complejidad sugiere la de su historia evolutiva. Parece lgico pensar que el metabolismo adquiri esta complejidad en el curso de su evolucin y que, por lo tanto, tuvo que consistir originariamente en un proceso mucho ms simple. La evolucin biolgica se interpreta generalmente como el resultado de la seleccin natural de variantes originadas por mutacin - esto es, cualquier proceso evolutivo relativo a los seres vivos debe ser interpretado como el producto de la seleccin de variantes proteicas surgidas por mutacin - lo que implica: 1/ la aparicin de protenas nuevas surgidas a partir de las anteriores, y 2/ la seleccin de las ms adecuadas. Dado que el metabolismo celular es el producto de la actividad de numerosas protenas (enzimas), debemos pensar que el millar largo de enzimas, organizados en unas cien rutas metablicas, que constituyen la base somtica del metabolismo de cualquier clula actual o, si se prefiere, de cuya actividad resulta su

metabolismo - procede de un corto nmero de enzimas organizados en pocas rutas muy sencillas y que stas se han ido alargando, y aumentado su nmero hasta la situacin actual, por aparicin de nuevos enzimas a partir de la mutacin de los anteriores y la seleccin de sus variantes ms adecuadas. La simplicidad del metabolismo de las primeras clulas no solo nos viene sugerida por el argumento anterior, sino que si consideramos la estructura y funcin de su substrato somtico, los enzimas, concluimos lo mismo. La identidad de naturaleza (protenas globulares) y de funcin (enzimtica) de todos ellos hace obligado pensar que han tenido un origen comn y, como consecuencia, que todos proceden de un primer enzima a partir del cual se fueron diferenciando los dems. As pues, parece evidente que el desarrollo evolutivo del metabolismo celular se acompa del correspondiente proceso de diferenciacin enzimtica. Las primeras clulas poseeran un metabolismo muy sencillo, reducido a pocos enzimas, que, a lo largo de la evolucin, se volvera cada vez ms complejo por adquisicin de nuevas transformaciones metablicas (al diferenciarse nuevos enzimas a partir de los ya existentes) que alargaran progresivamente las rutas anteriores. La reconstruccin de la historia del metabolismo ha de consistir, pues, en identificar las rutas ms primitivas, dentro de stas las transformaciones o secuencias de transformaciones que se originaron primero, y, a continuacin, el orden de aparicin de las secuencias y rutas sucesivas. 2 El orden de aparicin de las transformaciones metablicas Ya en 1945 Horowitz seal que, dado que los metabolitos intermedios, en general, no tienen inters fisiolgico y la capacidad para producirlos no confiere ninguna ventaja selectiva, las reacciones individuales solo tienen sentido para el organismo cuando se les considera en su conjunto, pero que carecen de l contempladas individualmente. Si se tiene en cuenta, tambin, que la aparicin de una nueva transformacin solo puede ser ventajosa si se integra en el metabolismo anterior y, adems, mejora su eficacia (de otro modo el enzima correspondiente ser eliminado), parece imponerse un orden de despliegue en el desarrollo de cada ruta metablica. A partir de esta consideracin, Horowitz dedujo que el despliegue de las rutas de sntesis tuvo que seguir el orden inverso al que siguen los enzimas dentro de la ruta (el primero en aparecer sera el ltimo de la ruta, el segundo el penltimo y as sucesivamente) de forma que, obtenido el producto final de la ruta que le confiere su sentido fisiolgico, el desarrollo de sta estara dirigido por la ventaja de obtenerlo a partir de precursores cada vez ms sencillos. Una argumentacin semejante aplicada a las rutas de demolicin nos lleva a la conclusin de que su desarrollo tuvo que seguir el mismo orden que presentan los enzimas en la ruta - la primera transformacin estara impuesta por el substrato de partida, procedente del alimento, y la aparicin de las dems por la ventaja de intensificar su demolicin. Estas conclusiones parecen vlidas para rutas de sntesis o de demolicin cuyos productos finales o substratos iniciales, respectivamente, fueran impuestos a la clula desde el exterior por formar parte, al menos inicialmente, de su alimento - bien por ser constituyentes del soma tomados directamente del medio al comienzo, sintetizados metablicamente despus, bien por ser aprovechados como fuentes de energa a travs de su demolicin. Es posible imaginar, sin embargo, otros escenarios alternativos para molculas obtenidas por las propias clulas en el curso de su evolucin por modificacin de otras anteriores que fueran, hasta ese momento, productos finales o metabolitos intermedios de rutas ya existentes (cuyo origen podramos denominar metablico). Las nuevas secuencias de sntesis se desarrollaran progresivamente por adicin de nuevos enzimas a rutas o secuencias anteriores (coincidiendo su orden de aparicin con el de las transformaciones en la ruta: de precursor a producto). Las rutas de demolicin, en este caso, se desplegaran conducidas por la ventaja de aprovechar los nuevos productos sintetizados (siguiendo el orden inverso al de las transformaciones en la ruta). En resumen, se pueden diferenciar dos orgenes evolutivos diferentes para las molculas metablicas que condicionaran el orden de despliegue de sus respectivas rutas de demolicin y de sntesis: 1. molculas de origen trfico, cuyas rutas de demolicin se desarrollaran en el sentido alimento residuos (siguiendo el mismo orden de las transformaciones en la ruta), mientras que las correspondientes a las sntesis seguiran el orden inverso producto final precursores. 2. molculas de origen metablico, para las que el despliegue ocurrira en el sentido contrario: de precursores a producto final, para las de sntesis (el mismo orden de las transformaciones en la ruta) y, en el caso de las de demolicin, hacia la de molculas de tamao progresivamente mayor. Hay que insistir, adems, en que, en uno y otro caso, las presiones selectivas que dirigieron el despliegue tuvieron que ser diferentes: 1/ para las molculas de origen trfico, intensificar la demolicin (como medio para aumentar el rendimiento obtenido del alimento) en las rutas de demolicin; 2/ conseguir sintetizar los productos finales a partir de precursores cada vez ms sencillos, en las correspondientes de sntesis; 3/ sintetizar metabolitos de tamao creciente (hasta uno ptimo) en los que se conserve una

determinada estructura, en las rutas de sntesis de molculas de origen metablico; y 4/ aprovechar los productos de los nuevos tramos de sntesis, en las de demolicin. As pues, parece claro que el tipo de despliegue que haya tenido una ruta habr dependido del papel inicial de la correspondiente molcula dentro de la historia del metabolismo. Teniendo esto en cuenta, Cordn (1990) propone un desarrollo impuesto desde el exterior para las rutas de los aminocidos (de productos a precursores para las rutas de sntesis, de alimento a residuos en las de demolicin); y como molculas sintetizadas de nuevo por la clula para los cidos grasos y los monosacridos (aumento progresivo del tamao de los metabolitos en las rutas de sntesis y demolicin de metabolitos cada vez mayores para las de demolicin).
catabolismo alimento coenzimas anabolismo

coenzimas

sntesis de soma

metabolitos

energa residuos

Figura 1.- Esquema funcional del metabolismo celular

3 La primera ruta Como hemos indicado, en este trabajo se trata de reconstruir las lneas generales de la evolucin del ncleo metablico formado por el ciclo del ctrico (o ciclo de Krebs) y las rutas de sntesis y de demolicin de los aminocidos, los cidos grasos y los monosacridos. En este conjunto de rutas que es comn a las clulas actuales y tuvo que desarrollarse en una clula ancestral de todas ellas, se pueden distinguir tres sectores: - el de los aminocidos, formado por el ciclo del ctrico y las rutas de sntesis y demolicin de todos los aminocidos alifticos; - el de los cidos grasos, que est formado por las rutas de sntesis y demolicin de los cidos grasos; - el de los monosacridos, que est formado por las rutas de sntesis (glucognesis y ciclo de Calvin), de demolicin (glucolisis) y de intertransformacin (ruta de las pentosas) de los monosacridos. Cada ruta metablica, a su vez, est constituida por un conjunto ordenado de transformaciones metablicas, estructuradas somticamente sobre protenas con funcin enzimtica (enzimas) que: - en el caso de las rutas de demolicin, transforman en residuos las molculas (de aminocidos, cidos grasos o monosacridos) procedentes del alimento o de las reservas celulares correspondientes; - y en el caso de las rutas de sntesis, parten de metabolitos intermedios, suministrados por las rutas de demolicin, para convertirlos en aminocidos, en cidos grasos o en monosacridos que estn destinados a las reservas correspondientes o a la alimentacin de rutas de sntesis de molculas ms complejas. Como resultado, las rutas de demolicin quedan situadas entre la entrada de alimento y su utilizacin por la clula, proporcionando a sta las molculas y la energa necesarias para mantener su actividad (como se representa esquemticamente en la Figura 1). As, el catabolismo aprovisiona con piezas y coenzimas las rutas de sntesis, de tal manera que se intercala entre el alimento y su utilizacin en el anabolismo, y, como consecuencia, ste ltimo depende totalmente de los metabolitos que le suministran las rutas de demolicin. De esta situacin se deduce la prioridad evolutiva de las primeras rutas de demolicin respecto a las correspondientes de sntesis. Parece, pues, evidente que el desarrollo filogentico del metabolismo tuvo que comenzar por el de una ruta dedicada a demoler molculas procedentes del alimento celular. Pero a cul de los tres sectores considerados hay que asignar esta primera ruta? 4 La primera ruta de demolicin Si se acepta el supuesto de que la primera clula se origin a partir de una asociacin de protenas (hiptesis defendida por Cordn, y que, como hemos indicado, es una consecuencia del hecho

de considerar la protena globular como nico nivel entre el molecular y el celular), el alimento de la primera clula tuvo que consistir necesariamente en pptidos procedentes de restos de asociaciones de protenas, y de ello se deduce que sus primeras rutas metablicas estuvieron dedicadas a la demolicin de aminocidos. Esta consecuencia, se nos dir, no tiene este grado de evidencia ms que si, dentro del contexto de la teora de niveles, se admite de partida el carcter de nivel de integracin directamente infracelular de la protena; sin embargo, como vemos a continuacin, el anlisis comparado del metabolismo celular nos conduce a la misma conclusin (lo que constituye una confirmacin indirecta del postulado de Cordn). Entre los argumentos que el estudio comparado del metabolismo nos aporta a favor de este supuesto merecen ser destacados los siguientes: 1. La composicin qumica de las molculas correspondientes a cada uno de los tres sectores es un dato que, a este respecto, parece decisivo. Las de los aminocidos son las nicas que pueden suministrar los tomos necesarios tanto para sus sntesis como para las de los otros compuestos; como consecuencia, se puede entender el carcter de vanguardia de este sector en el desarrollo evolutivo, ya que, desde su origen, sus rutas de demolicin y de sntesis pudieron constituir un ncleo metablico incipiente pero con pleno sentido funcional (la demolicin del alimento suministrara a la clula la energa suficiente para mantener su actividad, y las piezas para reconstruir su soma ), a partir del cual pudieron desplegarse los otros dos sectores, comenzando por sus respectivas rutas de sntesis. No sera posible, sin embargo, deducir un modelo coherente de desarrollo del metabolismo ni a partir del de los monosacridos ni del de los cidos grasos. 2. La comparacin entre las estructuras qumicas de estas molculas apoya igualmente esta interpretacin. Mientras que los cidos grasos y los monosacridos tienen una estructura montona, en la que solo vara el nmero de carbonos de la cadena, las correspondientes a cada uno de los diferentes aminocidos metablicos nicamente tienen en comn el extremo amino-cido (COOH-CH-NH2), siendo el resto de la cadena exclusivo de cada uno de ellos (pudiendo incluir N y S, adems de tomos de C, H y O), sin que exista la menor regla en su estructura (Figura 2).
Aminocidos cidos grasos Monosacridos (aldosas) Monosacridos (cetosas)
COOH-CH- R NH2 COOH-(CH 2 )n -CH3 CH2 OH-(HCOH)n -COH CH2 OH-(HCOH)n -CO-CH2 OH

(R es caracterstico de cada aminocido)

Figura 2.- Frmulas generales de los aminocidos, cidos grasos y monosacridos

La diversidad estructural de los aminocidos sera la de esperar para molculas cuya utilizacin en el metabolismo tenga un origen trfico, esto es, que, por formar parte de su ambiente trfico, han sido impuestas a la clula desde el exterior y a las que sta se ha visto forzada a adaptarse. Mientras que la homogeneidad de los monosacridos y los cidos grasos se explica bien si suponemos para ellas un origen
FOTOSNTESIS Glucosa Gliceraldehido-P Glicerol-P Cistena Glicina Glicrico-P Serina Alanina Enolpirvico -P Pirvico Acetil -CoA Ctrico Oxalactico Isoctrico Asparraguina Asprtico Mlico Cetoglutrico Succinil-CoA Succnico Glutmico Glutamina Prolina Arginina CIDOS GRASOS

Fumrico

Propionil- CoA Acil -CoA Cetocidos cetobutrico

Figura 3.- Ncleo central del metabolismo celular: ciclo del ctrico y rutas de sntesis y demolicin de aminocidos, cidos grasos y monosacridos

Valina *Pirvico

Isoleucina

Metionina

Treonina

Homoserina

metablico, como molculas sintetizadas por la clula a partir de metabolitos intermedios de alguna ruta desarrollada antes, cuyos rasgos estructurales, por resultar adecuados a una funcin nueva, se conservan con modificaciones de tamao. 3. Si nuestra interpretacin anterior es acertada (origen trfico para los aminocidos metablicos y metablico para los primeros monosacridos y cidos grasos), tuvieron que ser diferentes las presiones selectivas que guiaron el desarrollo evolutivo del metabolismo en uno y otro caso, lo que debera haber quedado reflejado en la estructura actual de su metabolismo. Como vemos a continuacin, la estructura de las rutas metablicas de los tres sectores es coherente con esta interpretacin. El sector de los aminocidos posee una estructura muy compleja, en la que: - para cada aminocido existe una ruta de sntesis y otra de demolicin que, aunque compartan algn tramo con otras, siempre poseen la exclusividad de alguno propio; - hay un gran nmero de tipos de transformaciones metablicas diferentes; - en sus rutas metablicas se recurre a muchos coenzimas diferentes (diez en total); - las rutas son muy complejas, estando formadas por un nmero variable, de una a otra, de tramos metablicos diferentes; - algunas rutas de demolicin terminan paradjicamente en un tramo de sntesis; - las rutas de demolicin y las rutas de sntesis no presentan casi ningn paralelismo. Por el contrario, los otros dos sectores presentan una estructura mucho ms simple, donde: - hay pocas rutas por sector; - stas estn formadas por un nmero pequeo de transformaciones diferentes; - en ellas se recurre a pocos coenzimas diferentes (tres en cada sector); - las rutas de sntesis y de demolicin son rigurosamente inversas; - casi siempre, las transformaciones metablicas estn ordenadas en tramos cortos repetidos de manera montona a lo largo de las rutas. La complejidad del sector de los aminocidos parece reflejar un desarrollo forzado por la estructura de los metabolitos, como si sta, de acuerdo con el supuesto precedente, estuviera impuesta desde el exterior por la composicin del alimento celular. La adaptacin de la clula a una explotacin mejor de su ambiente trfico impulsara el desarrollo de nuevas transformaciones de demolicin capaces de obtener del alimento un mayor rendimiento metablico. La diversidad estructural de los aminocidos alimentarios justificara la variedad de soluciones (transformaciones, coenzimas y tramos de sntesis en rutas de demolicin) a las que se recurre en este sector. Por su parte, la sencillez de las rutas metablicas de los otros dos sectores sugiere un desarrollo dirigido a la obtencin de metabolitos de tamao creciente, mediante la repeticin de tramos de alargamiento en sus rutas de sntesis, conservando unos rasgos estructurales (sin duda por ser los adecuados a una determinada funcin - probablemente, al comienzo por lo menos, la de reserva), que se habran obtenido inicialmente en un metabolito pequeo en el curso anterior de la evolucin. Las rutas de demolicin se habran desplegado, invirtiendo rigurosamente las de sntesis, dirigidas por la ventaja selectiva de aprovechar metablicamente los productos obtenidos en cada nuevo tramo de sntesis. 4. El que una de las funciones principales de los cidos grasos y de los monosacridos sea la de reserva celular, refuerza igualmente los argumentos anteriores. 5. Finalmente, las rutas de sntesis y demolicin de los aminocidos guardan con el ciclo unas relaciones ms completas que las de los monosacridos y las de los cidos grasos. Como se representa en la Figura 3, las cuatro entradas del ciclo del ctrico (oxalactico, -cetoglutrico, acetil-CoA y succinilCoA) son utilizadas por las rutas de demolicin de los aminocidos (como vemos ms adelante estas entradas permiten hacer una clasificacin filogentica de los mismos), siendo tres de ellas exclusivas de este sector, mientras que la tercera, el acetil-CoA, es utilizada, adems, por los otros dos. Algo parecido ocurre con las dos salidas del ciclo (oxalactico y -cetoglutrico), ambas alimentan rutas de sntesis de aminocidos, pero solo una, el oxalactico, es utilizada por los otros dos sectores. Como resultado, el conjunto formado por el ciclo del ctrico y las rutas de demolicin y de sntesis de los aminocidos (Figura 4) puede interpretarse como un ncleo unitario, con pleno sentido para las sntesis y las demoliciones, al que se han adosado posteriormente los otros dos sectores. En apoyo de esta interpretacin, el ciclo del ctrico propiamente dicho consiste en la interconversin de dos cetocidos, el oxalactico y el -cetoglutrico, productos de la desaminacin de dos aminocidos, el asprtico y el glutmico, respectivamente. Los argumentos precedentes parecen suficientes para defender la hiptesis de que la primera ruta metablica en desplegarse fue una de demolicin de algn aminocido de origen alimentario, y que esta ruta tuvo que desplegarse progresivamente en el sentido aminocido ciclo del ctrico (el mismo de la actuacin de los enzimas en la ruta). Lo que nos permite postular dos grandes fases en el desarrollo del metabolismo celular: durante la primera habra tenido lugar el despliegue progresivo de las rutas de demolicin y de sntesis de los aminocidos que culminara en la formacin del ciclo del ctrico (en el

curso de esta fase la intensificacin de las demoliciones habra sido la principal ventaja selectiva), lo que dara lugar a un primer ncleo metablico a partir del cual, en una segunda fase, se desarrollaran los otros dos sectores mediante el despliegue de transformaciones simples (muchas de ellas presentes en el metabolismo de los aminocidos), estructuradas en tramos dobles de sntesis y demolicin inversos, repetidos regularmente.
Cistena Glicina Glicrico-P Enolpirvico-P Serina Pirvico Acetil-CoA Ctrico Oxalactico Asparraguina Asprtico Mlico Cetoglutrico Succinil-CoA Succnico Propionil-CoA Acil-CoA Cetocidos Valina * Pirvico Homoserina Isoleucina Metionina Treonina Cetobutrico Glutmico glutamina Isoctrico Prolina Arginina Alanina

Fumrico

Figura 4.- Rutas de sntesis y demolicin de los aminocidos alifticos

As pues, la hiptesis segn la cual el primer sector metablico en desarrollarse fue el de los aminocidos y que tal desarrollo comenz por el de una de sus rutas de demolicin, postulado obligado en la perspectiva de la teora de las unidades de niveles de integracin, se deduce tambin del anlisis comparado de los tres sectores (lo que, como hemos indicado, confirma indirectamente dicho postulado). 5 Las rutas de demolicin de los aminocidos A continuacin, consideramos el sector de los aminocidos alifticos, ms concretamente sus rutas de demolicin, con el fin de poner de manifiesto algunos rasgos de las mismas que, en nuestra opinin, son suficientemente significativos, desde un punto de vista filogentico, como para permitirnos avanzar un modelo de despliegue evolutivo de este sector e identificar las principales etapas del mismo. Vamos a considerar tres aspectos de estas rutas: - los tramos metablicos que comparten; - su estructura en tramos funcionalmente diferentes; - y el recurso a coenzimas en ellas. En la Figura 4, que representa la estructura general de este sector, incluido el ciclo del ctrico, podemos observar que, aunque hay tantas rutas de sntesis y de demolicin como aminocidos, cada una de ellas no es enteramente exclusiva de un nico aminocido, sino que siempre posee al menos un tramo metablico en comn con otras. Estos tramos, que, como se discute a continuacin, pueden representar homologas, por lo que son una de las caractersticas con significado evolutivo ms evidente, dan lugar a un ordenamiento en red de las rutas, que confluyen (las de demolicin) en determinados metabolitos para compartir a continuacin tramos metablicos comunes, o se separan (las de sntesis) despus de un tramo comn en otros independientes. Ahora bien, estos tramos compartidos solo admiten dos explicaciones evolutivas: - o bien tienen un origen mltiple, aparecieron independientemente en cada una de las rutas que los comparten, y son, por tanto, tramos anlogos;

- o bien tienen un origen comn, primero se originaron en una ruta y a continuacin se extendi su aplicacin a otras, en cuyo caso se trata de tramos homlogos4.
Cistena Glicina Serina Alanina Pirvico Acetil-CoA Ctrico Oxalactico Asparraguina Asprtico Mlico Cetoglutrico Succinil-CoA Succnico Propionil-CoA Acil-CoA Cetocidos Valina Isoleucina Metionina Treonina Cetobutrico Glutmico glutamina Isoctrico Prolina Arginina

Fumrico

Figura 5.- Rutas de demolicin de los aminocidos alifticos

En la Figura 5 se representan solo las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos5. Se puede observar como stas confluyen progresivamente hacia el ciclo en el que desembocan a travs de cuatro entradas (oxalactico, -cetoglutrico, acetil-CoA y succinil-CoA). Como consecuencia de esta confluencia, los tramos ms prximos al ciclo son compartidos por un mayor nmero de rutas. Las rutas que poseen tramos comunes pueden reunirse en cuatro grupos, que corresponden a las cuatro entradas en el ciclo: - las rutas del asprtico y la asparraguina, grupo 1, entran en el ciclo a travs del tramo asprtico oxalactico; - las rutas de demolicin del glutmico, la glutamina, la prolina y la arginina, grupo 2, comparten el tramo glutmico -cetoglutrico; - las de la alanina, la serina, la cistena y la glicina, grupo 3, confluyen en el tramo pirvico acetil-CoA; - finalmente, el grupo 4 est formado por las rutas de demolicin de la metionina, la treonina, la valina y la isoleucina que tienen en comn el tramo propionil-CoA succinil-CoA. Como hemos indicado, las rutas de cada grupo comparten al menos un tramo, pero pueden tener en comn ms de uno - por ejemplo, las del grupo 4 poseen en comn el tramo final, propionil-CoA succinil-CoA, pero dos de ellas, las de la metionina y la treonina, comparten adems el tramo: cetobutrico propionil-CoA. Como los tramos compartidos pueden representar homologas, es de esperar que las rutas de cada grupo mantengan entre s relaciones filogenticas ms estrechas que con el resto. Dentro de las rutas de demolicin podemos diferenciar tres tipos de tramos metablicos desde el punto de vista de su funcionalidad para el catabolismo: 1/ los dedicados a la desaminacin; 2/ los que conducen a la descarboxilacin; y 3/ tramos de sntesis (situados, paradjicamente, en rutas de demolicin). Si consideramos el tipo de tramos que componen cada ruta, stas se pueden clasificar en tres tipos:
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Para decidir si un determinado parecido representa una analoga o una homologa, es preciso evaluar el grado de este parecido. En nuestro caso, cuanto mayor sea la complejidad de la transformacin metablica o del tramo de ruta comunes, mayor ser nuestra conviccin de que corresponden a una homologa, y, en consecuencia, que revelan un origen comn. 5 Por razones de simplicidad en la representacin, en las Figuras 3, 4 y 5 faltan las rutas de la leucina y la lisina que entran en el ciclo a travs de acetil-CoA pero de forma diferente a como lo hacen los aminocidoss del grupo 3. El anlisis de sus transformaciones metablicas muestra que guardan relaciones evolutivas con las de la isoleucina y la valina, en el caso de la leucina, y con el cierre del ciclo, la lisina (Cordn, 1990).

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- las rutas de los grupos 1 y 2 estn formadas solo por tramos de desaminacin; - las que corresponden al grupo 3 poseen un primer tramo de desaminacin seguido de un segundo de descarboxilacin; - en el grupo 4, las rutas de demolicin incluyen, adems, un tercer tramo de carboxilacin. Esta correspondencia entre el agrupamiento de rutas (de acuerdo a su confluencia en el ciclo) y su tipologa (de acuerdo al significado funcional de sus tramos constituyentes) que es aun ms patente cuando se tiene en cuenta el anlisis comparado de las transformaciones metablicas (Cordn, 1990) apoya la hiptesis, que hemos adelantado, de una historia comn para las rutas de demolicin de cada grupo. Pero, adems, nos permite hacer consideraciones transversales que permiten relacionar entre s los desarrollos evolutivos de las rutas correspondientes a los diferentes grupos. As, tenemos que: - todas las rutas comienzan con un tramo de desaminacin que produce -cetocidos (las rutas de los grupos 1 y 2 se reducen a este tipo de tramos); - las rutas de los grupos 3 y 4 aaden un segundo tramo dedicado a la descarboxilacin del cetocido producido en el anterior (las rutas del grupo 3 estn constituidas por estos dos tramos, entrando en el ciclo a travs del acetil-CoA producido en la descarboxilacin del pirvico); - y, finalmente, las rutas del grupo 4 contienen un tercer tramo de sntesis que convierte en succinil-CoA el propionil-CoA producido en los tramos de descarboxilacin. La generalidad de las desaminaciones respecto a las descarboxilaciones, y de stas respecto a los tramos de sntesis sugiere nuevamente, que el orden de despliegue de la ruta fuera el esperado para una de demolicin cuyo substrato venga impuesto desde el exterior por la composicin del alimento (como hemos supuesto que tuvo que ocurrir con las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos), lo que resulta coherente con que los tramos finales de las rutas del grupo 4 sean de sntesis, aunque situados en el interior de rutas de demolicin, lo que parece reflejar una complicacin secundaria de la ruta correspondiente - como si su desarrollo hubiera estado condicionado por la evolucin anterior del resto del metabolismo. Todo ello induce a pensar que el desarrollo de las rutas de demolicin de los aminocidos tuvo lugar segn la siguiente secuencia de acontecimientos: 1/ despliegue de las desaminaciones; 2/ despliegue de las descarboxilaciones; 3/ despliegue de los tramos de carboxilacin del propionil-CoA en las rutas del grupo 4. Lo que implica, a su vez, que las primeras rutas en alcanzar su estado definitivo fueron las de los grupos 1 y 2, a continuacin se completaran las del grupo 3, y, finalmente, las del grupo 4. Si, como hemos supuesto, el desarrollo de las rutas de demolicin de los aminocidos tuvo lugar
Rutas de demolicin de los aminocidos Coenzimas utilizados
NAD (NADP) Piridoxal-fosfato FAD (FMN) Tiamin-pirofosfato Lipoamida Coenzima A ATP Biotina Cobalamina Tetrahidroflico
Directa

ASP GLU ASN GLN ARG PRO ALA SER

CIS GLI MET TRE ILE VAL LEU

LIS

Entrada en el ciclo

Pirvico Succinil-coA Acetil-coA

en el sentido aminocido-substrato ciclo del ctrico (esto es, en el sentido de los enzimas en la ruta), puesto que en este sentido las rutas convergen progresivamente (Figura 5), su desarrollo evolutivo tuvo que ir acompaado de una confluencia cada vez mayor cuyo resultado final sera la formacin del ciclo.

Figura 6.- Recurso a los coenzimas en las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos. ASP=asprtico, GLU=glutmico, ASN=asparraguina, GLN=glutamina, ARG=arginina, PRO=prolina, ALA=alanina, SER=serina, CIS=cistena, GLI=glicina, MET=metionina, TRE=treonina, ILE=isoleucina, VAL=valina, LEU=leucina, LIS=lisina.

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A continuacin vamos a considerar otro aspecto del metabolismo de los aminocidos que permite matizar el anlisis anterior, se trata de la utilizacin de coenzimas en sus rutas de demolicin. Desde un punto de vista filogentico parece lgico suponer que el recurso a coenzimas en la evolucin del metabolismo fuera progresivo, aumentando su nmero con el tiempo, paralelamente al nmero y a la dificultad de las transformaciones metablicas desarrolladas. En consecuencia, sera de esperar que las rutas de demolicin de los aminocidos pudieran ordenarse por el nmero de coenzimas utilizados en ellas. Confirmando este supuesto, en la Figura 6, los aminocidos aparecen ordenados segn el nmero de coenzimas utilizados en sus rutas de demolicin (creciente hacia la derecha)6. En primer lugar, hay que resaltar que el simple hecho de que este criterio permita ordenar los aminocidos, como lo muestra la figura, supone necesariamente la existencia de algn tipo de relacin (la que se postula u otra equivalente) entre los aminocidos de una parte, y de la otra el nmero y el tipo de coenzimas utilizados en sus rutas de demolicin. Si, como suponemos, el orden de las rutas de demolicin de los aminocidos en la figura est en relacin con el de su desarrollo evolutivo sera de esperar, en una primera aproximacin, que el desarrollo evolutivo definitivo de las rutas de demolicin de los aminocidos situados ms a la izquierda en la figura (en las que se recurre a un menor nmero de coenzimas) se alcanzase antes. En segundo lugar, el orden de los aminocidos no es cualquiera, sino que, com o se puede observar en la parte inferior de la Figura 6, se corresponde con las diferentes entradas de sus rutas de demolicin en el ciclo del ctrico. De manera que, de la consideracin de esta tabla, se puede deducir la misma clasificacin de las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos que se ha deducido antes a partir de la consideracin de los tramos compartidos por las mismas. (Los grupos 1 y 2 aparecen mezclados por razones evolutivas en las que no entramos aqu, pero que un anlisis ms detallado pone de manifiesto.) Estos hechos sugieren, de nuevo, la precedencia evolutiva de las rutas de demolicin correspondientes a los dos primeros grupos de aminocidos (en las que se utiliza menor nmero de coenzimas). Finalmente, si los criterios utilizados son vlidos, el orden de las rutas de los aminocidos, horizontalmente, debera corresponder, en vertical, con la utilizacin progresiva de coenzimas, y debera reflejar el orden de aparicin de las transformaciones en las que estos son utilizados. De este modo se pueden agrupar y ordenar las transformaciones en cuatro tipos que debemos suponer sucesivos en la evolucin: 1. las desaminaciones, con recurso a NAD+ ; 2. las transaminaciones, en las que se utiliza piridoxal-fosfato; 3. las descarboxilaciones, en las que se recurre a cuatro nuevos coenzimas: lipoamida, tiaminpirofosfato, FAD y coenzima A; 4. y, finalmente, las metilaciones, en las que se utiliza tetrahidroflico, y las carboxilaciones, en las que se recurre a ATP, biotina y cobalamina. Se puede observar que el orden deducido a partir de este criterio coincide con el obtenido de la consideracin de la funcionalidad de los tramos metablicos y, nuevamente, con el que se supone para molculas de origen trfico. Lo mismo ocurre con el agrupamiento de aminocidos, al que se llega tambin desde la consideracin de los tramos compartidos y que es coherente con la tipologa de rutas hecha de acuerdo con su composicin en tramos funcionales. Hay que destacar que los tres criterios utilizados en el anlisis de las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos (tramos compartidos tomados como ndices de posibles homologas -, funcionalidad de los tramos metablicos y recurso a coenzimas) representan aspectos del metabolismo entre los que a priori no es fcil establecer ninguna relacin, salvo, como hemos supuesto, la de que todos son el resultado de un mismo proceso evolutivo. El que a partir de tres criterios aparentemente independientes se llegue a las mismas consideraciones finales indica que entre esos tres aspectos del metabolismo existe una relacin qu otra puede ser que la filogentica? En nuestra opinin, el anlisis anterior permite defender dos conclusiones: 1. Un agrupamiento filogentico de las rutas de demolicin de los aminocidos: - El grupo 1 contiene solo transformaciones de desaminacin, utiliza nicamente un coenzima (NAD) y comparte el tramo asprtico oxalactico.

La situacin, aparentemente desordenada, de las rutas de la glicina y de la metionina en la figura 6 se explica por la estructura de estos aminocidos. La glicina es el aminocido ms sencillo y su demolicin comienza por una transformacin de sntesis (en la que se utiliza el tetrahidroflico) que permite que su ruta confluya con las de los dems aminocidos del grupo 3. En cuanto a la metionina, su peculiar estructura (con un grupo metilo distal unido por un enlace tiol al resto de la molcula) justifica el recurso a tetrahidroflico con el fin de aprovechar el grupo CH3 distal coordinando su metabolismo con el de la glicina.

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- El grupo 2 tambin contiene nicamente transformaciones de desaminacin y utiliza un solo coenzima (NAD), sus rutas comparten el tramo glutmico -cetoglutrico. - El grupo 3 tiene un tramo de desaminacin y otro de descarboxilacin, utiliza seis coenzimas (NAD, piridoxal-fosfato, FAD, lipoamida, tiamin-pirofosfato y coenzima A) y comparte el tramo pirvico acetil-CoA. - El grupo 4 contiene tres tramos funcionales diferentes (sucesivamente: de desaminacin, de descarboxilacin y de carboxilacin), utiliza nueve coenzimas (los sealados para el grupo 3 ms ATP, cobalamina y biotina) y comparte el tramo propionil-CoA succinil-CoA. 2. Un modelo de despliegue evolutivo de las rutas de demolicin de los aminocidos en el que se pueden distinguir las siguientes etapas: - Primera etapa, que corresponde al desarrollo de las desaminaciones, al final de ella se alcanzara el desarrollo definitivo de las rutas de sntesis y de demolicin de los aminocidos de los grupos 1 y 2, y se habran desarrollado adems los tramos de desaminacin en las rutas de demolicin de los aminocidos de los grupos 3 y 4; el anlisis del recurso a coenzimas sugiere, como hemos visto, que en esta primera etapa se pueden diferenciar dos subetapas sucesivas, en la primera se desplegaran las desaminaciones con NAD y en la segunda las transaminaciones y las desaminaciones con recurso a piridoxal-fosfato. - Segunda etapa, durante la cual se desarrollaran las descarboxilaciones en las rutas de demolicin de los aminocidos de los grupos 3 y 4, completndose con ello el desarrollo de las rutas de demolicin del grupo 3. - Tercera y ltima etapa, a lo largo de la cual se desarrollaran las transformaciones que permiten la entrada en el ciclo del ctrico de los productos metablicos de las descarboxilaciones en las rutas de demolicin de los aminocidos del grupo 4. De acuerdo con este orden de desarrollo, se puede observar en la Figura 5 como dos de las cuatro entradas en el ciclo tienen lugar directamente a travs de cetocidos: oxalactico y -cetoglutrico, que son los productos de la desaminacin de los aminocidos asprtico y glutmico; mientras que las otras dos entradas se efectan a travs de metabolitos que han sufrido una transformacin ms intensa. La proximidad de los grupos 1 y 2 al ciclo, y el hecho de que ste ltimo consista en dos rutas de conversin de un cetocido en otro, son dos datos que sugieren que el desarrollo del ciclo pudo haber estado estrechamente unido con el del metabolismo de los aminocidos y particularmente, al menos al comienzo, con el de los grupos 1 y 2. Principales perodos del desarrollo del metabolismo celular Los argumentos anteriores nos parecen suficientes para defender un primer esquema de desarrollo del metabolismo celular. A grandes rasgos, se pueden distinguir dos fases: la primera que corresponde al desarrollo del metabolismo de los aminocidos alifticos, y que culminara en la formacin del ciclo del ctrico; y la segunda en la que tendra lugar el desarrollo del metabolismo de los cidos grasos y de los monosacridos. La primera de estas dos grandes fases se puede dividir, a su vez, en tres etapas sucesivas: - La Primera etapa corresponde al desarrollo de las desaminaciones y de las transaminaciones, con recurso a NAD y a piridoxal-fosfato como coenzimas, y en ella se alcanzara la estructura definitiva del metabolismo de los aminocidos de los grupos 1 y 2. En esta etapa se pueden distinguir dos subetapas, durante la primera se utilizara solo NAD y se desplegaran las desaminaciones en que se usa, en la segunda se recurrira, adems, a piridoxal-fosfato y se desarrollaran las transaminaciones y las desaminaciones dependientes de este coenzima (en las rutas de la serina, la cistena, la metionina y la treonina). - La Segunda etapa, en el transcurso de la cual tendra lugar el desarrollo de las descarboxilaciones (con recurso a: tiamin-pirofosfato, lipoamida, FAD y coenzima A), y en la que se alcanzara el desarrollo definitivo del metabolismo correspondiente a los aminocidos del grupo 3. - Finalmente, en el desarrollo del metabolismo de los aminocidos, se puede distinguir una Tercera etapa, durante la cual se completara el desarrollo definitivo del metabolismo correspondiente al grupo 4 y al ciclo del ctrico.

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El anlisis cladstico aplicado a las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos confirma la secuencia de etapas que proponemos (Cunchillos y Lecointre, 1999).
Cistena Glicina Serina Alanina Pirvico Pirvico Acetil -CoA Oxalactico Asparraguina Asprtico Cetoglutrico Prolina Arginina Oxalactico Asparraguina Asprtico Cetoglutrico Succinil-CoA Propionil- CoA Acil-CoA Cetocidos Cetobutrico Cetocidos Cetobutrico Prolina Arginina Serina Alanina Cistena Glicina

Glutmico

Glutamina

Glutmico

Glutamina

Valina

Isoleucina

Metionina

Treonina

Valina

Isoleucina

Metionina

Treonina

Primera etapa: despliegue de las desaminaciones

Segunda etapa: despliegue de las descarboxilaciones

Cistena Serina

Glicina

Alanina Pirvico Acetil-CoA Oxalactico Asparraguina Asprtico Mlico Fumrico Succnico Acil- CoA Cetocidos Cetobutrico Citrco Prolina Isocitrco Cetoglutrico Succinil-CoA Propionil-CoA Glutmico Glutamina Arginina

Valina

Isoleucina

Metionina

Treonina

Tercera etapa: despliegue final de las rutas de demolicin y cierre del ciclo

Figura 7.- Etapas propuestas en el desarrollo evolutivo de las rutas de demolicin de los aminocidos alifticos

La segunda gran fase considerada corresponde, en nuestra opinin, a dos procesos relativamente independientes (el desarrollo del metabolismo correspondiente a los cidos grasos y a los monosacridos), que pudieron coincidir en el tiempo. Para simplificar, vamos a suponer que tuvieron lugar en dos etapas, aunque, insistimos, pudieron ser ms o menos simultneos. Se distinguen as dos nuevas etapas: - La Cuarta etapa que correspondera al desarrollo de las rutas de sntesis y demolicin de los cidos grasos. - La Quinta etapa sera la correspondiente al desarrollo del metabolismo de los monosacridos. Por razones de espacio, nos hemos limitado aqu a presentar las grandes lneas del desarrollo del metabolismo celular. Este esquema se ve plenamente confirmado por el anlisis comparado de las transformaciones metablicas, que permite, adems, hacer un desarrollo muy detallado de cada una de las etapas que acabamos de enumerar (Cordn, 1990).

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