EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD DE ENZIMAS EXTRACELULARES EN CEPAS DE HONGOS LEVADURIFORMES RECUPERADAS DE LOCALIZACIN MUCOSA

Bulacio L*&; Puigdomenech G&; Ramos L*&; Ramadn S*; Sortino M*; Racca L#; Lpez C*. *CEREMIC FCByF-UNR. Suipacha 531 2000 Rosario. #Area Estadstica - FCByF-UNR. &ISPI 9009 SJB de La Salle. lcbulacio@hotmail.com
INTRODUCCIN Los hongos levaduriformes, integran la microbiota habitual de la piel y las mucosas. No obstante, pueden producir infecciones oportunistas. Entre los factores que influyen en el desarrollo de estos cuadros estn los relacionados con el estado inmunolgico del hospedero (presencia de ciertas patologas de base, estados fisiolgicos que cursan con inmunosupresin, tratamientos prolongados con antibiticos, corticoides, citostticos, etc.), y los que obedecen a la agresividad de los microorganismos. Se asocia la produccin de enzimas hidrolticas, con mayor capacidad de invasin, y por lo tanto mayor infectividad de las cepas colonizantes. OBJETIVO El objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad de diferentes enzimas producidas por cepas de hongos levaduriformes aisladas de localizaciones mucosas. MATERIALES Y METODOLOGA Se analizaron 74 cepas provenientes de mucosa oral: 51 de Candida albicans, 11 de C. parapsilosis, 6 de C. tropicalis, 3 de C. dubliniensis y 3 de C. krusei. Primeramente se obtuvieron cultivos de 24 h en Sabouraud glucosa. La actividad enzimtica fue evaluada empleando el equipo apiZYM que estudia en forma semicuantitativa, la actividad de 19 enzimas. Se procedi de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Para estudiar la asociacin entre la actividad de las distintas enzimas y las especies aisladas se utiliz el test exacto de Fisher.

RESULTADOS La actividad de -fucosidasa, -galactosidasa, -quimotripsina, -glucuronidasa y tripsina fue negativa en todas las cepas estudiadas. En cuanto a las catorce enzimas restantes, los porcentajes de cepas que presentaron actividad enzimtica detectables se muestran en el grfico 1. Evaluando la existencia de relacin entre la actividad enzimtica y la especie aislada, se concluy que no existe asociacin entre la actividad enzimtica y la especie recuperada para las siguientes enzimas: -glucosidasa (p>0,70), -galactosidasa (p>0,70), glucosidasa (p>0,50), leucina arilamidasa (p>0,20), N- acetil -glucosaminidasa (p>0.60), Naftol-AF-Bi-fosfohidrolasa (p>0.20), valina arilamidasa (p>0,20), esterasa lipasa (p>0,40), esterasa (p>0,10), fosfatasa cida (p>0,30), y la enzima -manosidasa (p>0,80).

Grafico 1: Porcentajes de cepas con actividad positiva para las diferentes enzimas ensayadas
100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
3% 7% 4% 12% 8% 34% 38% 48% 38% 49% 85% 80% 95% 81%
-glucosidasa -galactosidasa -glucosidasa -manosidasa cistina arilamidasa lipasa fosfatasa alcalina leucina arilamidasa N-acetil -glucosaminidasa Naftol-AF-Bi-fosfohidrolasa Fosfatasa cida Valina arilamidasa Esterasa lipasa Esterasa

Existe asociacin marginalmente significativa entre la presencia o ausencia de actividad de cistina arilamidasa y la especie aislada (p=0,06), siendo ms frecuente la presencia de tal enzima en C. dubliniensis y C. krusei, y menos en C. albicans, C. parapsilosis. La asociacin es muy significativa en el caso de la actividad de la lipasa (p< 0,005) ms frecuente en C. krusei, seguida de C. tropicalis y C. parapsilosis, as como para la fosfatasa alcalina (p< 0,005), ms frecuentemente producida en C. parapsilosis y C. tropicalis. DISCUSIN La produccin de enzimas hidrolticas en levaduras, especialmente en las provenientes de pacientes inmunocomprometidos o con lesiones, es informacin a considerar cuando se instaura profilaxis o tratamiento antifngico, ya que estos factores de virulencia pueden provocar una mayor capacidad invasiva, as como una disminucin en la eficacia de los tratamientos.