CRESCIMENTO E RENOVAO CELULAR BIOLOGIA 11ANO (PGINA 13-29)

Experincias Experincia de Griffith

Aps a descoberta de Friedrich Miescher em 1869 da existncia do DNA, Griffith realizou uma srie de experincias em 1928 que vieram a desenvolver a importncia do DNA para a clula. A partir das bactrias que causam a pneumonia (Strepococcus Pneumoniae) que se podem dividir em duas estirpes, S (lisas, capsuladas e virulentas) e R (rugosas, no capsuladas e no patognicas), Griffith procedeu da seguinte forma: Lote 1: O rato foi infetado com a estirpe virulenta e morreu. Lote 2: O rato foi infetado com a estirpe no virulenta e sobreviveu. Lote 3: O rato foi infetado com a estirpe virulenta morta pelo calor e sobreviveu. Lote 4: O rato foi infetado com a estirpe no virulenta juntamente com a virulenta morta pelo calor e morreu. Surgiam bactrias tipo S vivas no rato. Griffith tirou concluses acerca do sucedido no lote 4. A experincia sugeria que as bactrias do tipo S conseguiam transmitir a sua virulncia s do tipo R. No entanto, o cientista no foi capaz de explicar como. Assim sugeriu a existncia de um princpio transformante, que permitiria que as S transmitissem informao s R, de modo a que as ltimas pudessem desenvolver cpsula. Isto foi desenvolvido na experincia de Avery.

Experincia de Avery
Na sequncia dos trabalhos de Griffith, Avery tentou descobrir qual seria a substncia que transmitia a informao entre as bactrias do tipo S e R. Avery suspeitava de que o principio transformante era o DNA. Assim, cultivou 5 colnias de bactrias tipo R em meio propcio. Sendo a A a de controlo, na B misturou DNA das bactrias tipo S, na C adicionou DNA das bactrias tipo S juntamente com DNAase, na D juntou DNA das bactrias tipo S juntamente com RNAase e na E acrescentou DNA das bactrias tipo S juntamente com Protease. Nas colnias B, D e E surgiram colnias de bactrias tipo S. Assim, Avery chegou concluso que o princpio transformante era, efetivamente, o DNA.

Experincia de Hershey e Chase

Hershey e Chase utilizarem em 1953 bacterifagos para provar definitivamente que o suporte fsico da informao gentica o DNA. Os bacterifagos so vrus, ou seja, so seres exclusivamente constitudos por DNA ou RNA e uma cpsula de natureza proteica. Tendo em considerao que: Os vrus no penetram nas cpsulas das bactrias. As protenas da cpsula dos vrus no tm fsforo, mas enxofre. O DNA tem fsforo, mas no enxofre.
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CRESCIMENTO E RENOVAO CELULAR BIOLOGIA 11ANO (PGINA 13-29) Marcou-se dois lotes de bacterifagos radioactivamente. No primeiro marcou-se o enxofre das protenas e no segundo o fsforo do DNA. O objetivo destas marcaes era ser possvel seguir os trajetos de cada uma das substncias. Assim, foi possvel descobrir que o DNA viral toma o comando da clula bacteriana, enquanto que as protenas no chegam a penetrar na cpsula.

Universalidade e variabilidade da molcula de DNA

Nos procariontes o DNA encontra-se no hialoplasma, como uma molcula circular, sem outros constituintes associados nucleide. O ncleo das clulas eucariticas separado do citoplasma pelo invlucro nuclear (membrana dupla). No ncleo, podem existir nuclolos regies em cuja constituio entram cidos nucleicos e protenas.

cidos Nucleicos - Localizao do Material Gentico

No ncleo existe cromatina, material fibroso e facilmente corvel, constitudo por filamentos de DNA associados a protenas. As unidades de estrutura da cromatina so os cromossomas. Nucletido Unidade bsica dos cidos nucleicos. Cada nucletido constitudo por uma base azotada, uma pentose e um grupo fosfato. DNA molcula pertencente categoria dos cidos nucleicos; na sua estrutura encontra-se, em cdigo, a informao que programa todas as actividades celulares e que transmitida de gerao em gerao. O nmero e a ordem dos nucletidos, a sequncia nucleotdica, define as caractersticas de cada individuo.

Composio qumica dos cidos nucleicos: DNA (cido desoxirribonucleico) e RNA (cido ribonucleico):

Base Azotada

Grupo Fosfato

Pentose

Cada nucletido constitudo por uma Base Azotada (Adenina, Guanina, Citosina, Timina, Uracilo), uma Pentose [Monossacardeo de 5C; Glcido] (Desoxirribose ou Ribose) e por um Grupo Fosfato.

As bases azotadas podem dividir-se em: Bases Pricas: Adenina e Guanina, que formam um anel duplo (sendo ambas presentes no RNA e DNA). Bases Pirimdicas: Uracilo (apenas presente no RNA), Timina (apenas presente no DNA) e Citosina (presente em ambos) que formam um anel simples. Os nucletidos formam ligaes entre si, formando cadeias polinucleotdicas.

CRESCIMENTO E RENOVAO CELULAR BIOLOGIA 11ANO (PGINA 13-29) Cada molcula de DNA constituda por duas cadeias polinucleotdicas unidas entre si, atravs das bases azotadas. Cada molcula de RNA constituda por uma nica cadeia polinucleotdica. Estas ligaes estabelecem-se entre o grupo fosfato de um dos nucletidos e o carbono 3 da pentose do nucletido seguinte. Chamam-se ligaes fosfodister. Atravs da anlise do DNA de vrios organismos por Chargaff foi possvel chegar-se concluso de que a percentagem de Adenina igual de Timina e que a de Guanina igual de Citosina. Assim, a percentagem de Purinas igual de Pirimidinas. A partir destas investigaes e da descoberta de Rosalind Franklin, Watson e Crick apresentaram na Universidade de Cambridge, o Modelo de Dupla Hlice do DNA.

Estrutura do DNA Modelo de Dupla Hlice do DNA

Os nucletidos que formam uma cadeia polinucleotdica ligam-se entre si atravs de ligaes covalentes (do tipo fosfodister) que se estabelecem entre o grupo fosfato e os carbonos 3 e 5 das pentoses. As cadeias designam-se por antiparalelas uma vez que a extremidade 5 de uma cadeia corresponde a extremidade 3 da outra cadeia. Entre as bases azotadas verifica-se uma ligao por pontes de hidrognio. Ou seja a Adenina emparelha com a Timina (por duas pontes de hidrognio) e a Guanina Citosina (por trs pontes de hidrognio). Por isso so bases complementares, o que justifica as propores encontradas por Chargaff.

Estrutura do RNA
A molcula de RNA formada por uma cadeia simples de nucletidos e muito mais pequena que a molcula de DNA. Esta molcula sintetizada a partir do DNA e pode apresentar trs formas: RNA mensageiro (mRNA) RNA de transferncia (tRNA) RNA ribossmico (rRNA)

Diferenas entre DNA e RNA

DNA Estrutura em Hlice Desoxirribose Adenina, timina, guanina, citosina Cadeia longa e dupla Ncleo, mitocndrias, cloroplastos RNA Estrutura Contnua Ribose Adenina, guanina, citosina e uracilo Cadeia curta e simples Hialoplasma

Gene Segmento de DNA com uma certa sequncia nucleotdica, podendo atingir milhares de pares de bases, correspondente a uma determinada informao. Genoma - Conjunto de genes correspondente informao gentica de um individuo. O genoma humano possui de 30 a 50 mil genes, englobando 2825 milhes de pares de bases.
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Replicao do DNA
Hiptese semiconservativa (a qual foi apoiada por Watson e Crick) Hiptese conservativa Hiptese dispersiva A molcula de DNA tem a capacidade de copiar a sua prpria informao, ou seja, de se replicar. Segundo a hiptese da replicao semiconstrutiva, a dupla cadeia de DNA separa-se, na presena de enzimas especficas, as DNA polimerases, por ruptura das ligaes de hidrognio. Cada cpia da molcula de DNA contm uma das cadeias da molcula de DNA original e uma cadeia que se formou de novo, segundo a regra da complementaridade de bases. No fim do processo, formam-se duas molculas de DNA, idnticas molcula original . Em cada uma das novas molculas, uma das cadeias pertence molcula inicial. A replicao semiconservativa permite explicar a transmisso do programa gentico e a relativa estabilidade da composio do DNA no decurso das divises celulares.

Experincia de Meselson e Stahl Cultivaram E.Coli num meio de cultura com 15N durante vrias geraes de bactrias, transferindo posteriormente para um meio com azoto normal. Extraiu-se DNA neste momento, 20 minutos depois e 40 minutos depois. Atravs da densidade do DNA recolhido foi possvel chegar-se concluso que o DNA se duplica de modo semiconservativo, sendo que se conserva sempre uma cadeia e se gera uma nova.