Universidad Nacional Andrs Bello Laboratorio Qumica Analtica e Instrumental QUI-141 Profesora: arina !

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LABORATORIO 6:

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE

FSFORO POR ESPECTROFOTOMETRA

Integrantes: $duardo %alderrama Curso: QUI141 & 'ecci(n )* Fe !a "e entrega: s#bado + de ,ctubre del -)1*

Intro"u #$n
La $s.ectrofotometra es uno de los mtodos de an#lisis instrumental m#s comunes/ en es.ecial el de U%%isible/ 0ue consiste en convertir las sustancias en derivados coloreados .ara .oder ser anali"ados1 !eneralmente se utili"an a.aratos 0ue miden absorci(n de lu" monocrom#tica/ de una lon2itud de onda conocida/ llamados es.ectrofot(metros1 La cantidad de lu" absorbida est# relacionada con la concentraci(n de la sustancia en estudio se23n la le4 de Beer:

A56 787l

91:

'iendo A la absorbancia o densidad (.tica/ medida .or el a.arato/ 8 la concentraci(n de la sustancia en estudio/ l el es.esor de disoluci(n atravesada .or la lu"/ o .aso (.tico/ 4 6 es la absortividad o absortividad molar si se usa la concentraci(n en molaridad/ la cual es caracterstica de cada sustancia medible colorimtricamente1 $l .aso (.tico de las cubetas usualmente de 1 cm1 Las cubetas suelen ser de .l#stico o vidrio (.tico .ara las mediciones en el es.ectro visible/ 4 de cuar"o .ara las 0ue se llevan a cabo en la re2i(n ultravioleta 9.or deba;o de *<) nm:1 =e acuerdo con la formula 91:/ .ara una sustancia determinada/ medida en condiciones similares 9i2ual cubeta e i2ual lon2itud de onda: se cum.le: A 5c A> c> Por lo tanto/ e7iste una .ro.orcionalidad entre la absorbancia 4 la concentraci(n1 La le4 de beer dice 0ue la absorbancia total de una me"cla a determinada lon2itud de onda/ ser# i2ual a la suma de las absorbancias individuales de las es.ecies 0ue absorben1 $n el an#lisis 0umico .odemos construir una curva de calibrado de .atr(n e7terno/ 0ue consistente en medir cantidades conocidas de analito 9.atrones o est#ndares: 4 lue2o .uede utili"arse .ara inter.retar la res.uesta a la cantidad de una muestra desconocida1 As a .artir de una 2r#fica se .uede determinar la concentraci(n de una muestra .roblema/ ocu.ando la absorbancia medida vs la concentraci(n de analito:

Las disoluciones blanco/ contienen todos los disolventes 4 reactivos .ero sin el analito/ 4 .or lo tanto .ueden utili"arse .ara medir las res.uesta a im.ure"as o es.ecies interferentes 4 utili"arlas como un ??cero@@ en la medici(n de la absorbancia1

Aambin .uede reali"arse otro mtodo al Bacer uso de adicion-.atr(n 4 construir una curva de calibraci(n de .atr(n interno/ donde aCadimos cantidades conocidas de analito a la muestra .roblema1 As a .artir del aumento de la absorbancia se anali"a cuanto analito Ba4 en la muestra .roblema1

Los ob;etivos del .r#ctico son el an#lisis del contenido de f(sforo en una muestra real mediante es.ectrofotometra U% & %isible 4 la A.licaci(n de mtodos de cuantificaci(n Baciendo uso de curvas de calibraci(n 4 de adici(n est#ndar1

Parte E%&er#'enta(
11 Dateriales 4 reactivos usados:
$s.ectrofot(metro de doble Ba" U%-%is 8ubetas de 1 cm de .aso (.tico Datraces aforados de +) mL Datraces aforados de 1)) mL Bureta de 1) mL Pi.eta aforada de 1) mL Pro.i.eta Probeta de +) mL 'oluci(n .atr(n stocE de f(sforo de a.ro7imadamente 1)) m2FL 'oluci(n B: Dolibdato de amonio con tartrato de antimonio 4 .otasio en G -',4 + N m#s #cido asc(rbico1

-1 Dtodos 4 condiciones e7.erimentales $n el .resente .ractico se Bace uso de la es.ectrosco.ia U%-%isible/ donde utili"amos un instrumento conocido como es.ectrofot(metro .ara medir la absorbancia 4 encontrar la concentraci(n de analito en una muestra .roblema utili"ando dos mtodos/ el .rimero donde se constru4e una curva de calibraci(n de .atr(n e7terno 4 el se2undo con una curva de calibraci(n de .atr(n interno1 *1 =escri.ci(n de la tcnica: 'e toman 1) mL de una muestra .roblema 4 se llevan a un matra" de +) mL/ lue2o se a2re2a a2ua Basta la mitad/ se a2ita/ se a2re2an H mL de la soluci(n B/ se a2ita suavemente/ se enra"a con a2ua 4 se Bomo2eni"a1 'e toma una alcuota de 1) ml de un soluci(n .atr(n stocE de 1)) ..m de fosforo 4 se llevan a un matra"/ se afora con a2ua destilada1 A .artir de esta soluci(n de 1) ..m se toman alcuotas de 1/-/ */ 4/ + ml 0ue se llevan a + matraces de +) mL .ara cada alcuota1 A cada uno de estos matraces se a2re2a a2ua Basta la mitad/ se a2ita/ lue2o se a2re2an H mL de soluci(n B/ se a2ita suavemente 4 se enra"a Basta el aforo con a2ua1 'e es.eran *) minutos antes de medir con el es.ectrofot(metro 'e .re.ara el blanco/ de modo 0ue se toman H ml de la soluci(n B/ 4 se afora con a2ua1 Lue2o se lleva a una cubeta 4 se mide con el es.ectrofot(metro1 Iinalmente se llevan las muestras de concentraci(n

conocida 4 la muestra .roblema a las cubetas 4 se mide a los HH- nm con el es.ectrofot(metro .ara lue2o construir una tabla de absorci(n vs concentraci(n 4 se reali"a el res.ectivo 2rafico1 ABora se reali"a el mtodo de adicion est#ndar/ donde se .re.aran cuatro matraces a los cuales se le a2re2a 1) mL de la muestra .roblema 4 en orden a cada matra" se le a2re2a otro volumen adicional de )/ 1/ -/ * mL de .atr(n de 1) ..m de fosforo antes .re.arado1 Lue2o a cada matra" se le vierte a2ua Basta la mitad/ se a2ita/ se le a2re2an H mL de la soluci(n B/ se enra"a Basta el aforo con a2ua/ se Bomo2eni"a 4 se es.eran *) minutos1 Las soluciones se llevan a sus res.ectivas cubetas 4 se mide con el es.ectrofot(metro a los HH- nm/ se constru4e una tabla con los datos de absorbancia vs concentraci(n 4 se reali"a el res.ectivo 2rafico1

Resu(ta"os
11 8urva de calibrado de .atr(n e7terno: Jes.ectivas diluciones .ara encontrar la concentraci(n: 1 mL 7 1) ..m 5 81 - mL 7 1) ..m 5 81 * mL 7 1) ..m 5 81 4 mL 7 1) ..m 5 81 + mL 7 1) ..m 5 81 7 +) mL 7 +) mL 7 +) mL 7 +) mL 7 +) mL 81 5 )/- ..m 8- 5 )/4 ..m 8* 5 )/< ..m 84 5 )/H ..m 8+ 5 1/) ..m Absorbancia )/1+)/--* )/-+4 )/*)* )/*4< )/-44

8oncentraci(n 9..m: )/)/4 )/< )/H 1/) Duestra .roblema

'i la ecuacion de la recta es: 4 5 )/-+)+7 K )/1)*1 Por lo tanto la concentracion de la muestra .roblema es: )/-44 5 )/-+)+7 K )/1)*1 7 5 )/+<- ..m contenido en los +) ml del matra"

.or lo tanto el volumen de la alicuota de 1) mL corres.onde a la concentraci(n real de la muestra .roblema: +) mL 7 )/+<- ..m 5 1) mL 7 8m. 8m. 5 -/H1 ..m de contenido de f(sforo en la muestra .roblema1

-1 8urva de calibrado de .atr(n Interno: %olumen aCadido de est#ndar ) mL 1 mL - mL * mL Absorbancia )/-4+ )/*)4 )/**)/*L+

CMP 5 b 8't m %DP CMP ) *)/ -4+1 7 1) ..m:F 9)/ )4*4 7 1) mL: CMP ) 4/<+ ..m de contenido de f(sforo en la muestra .roblema1

D#s us#$n
$n la determinaci(n de calibrado de .atr(n e7terno/ se obtuvo un 2rafico lineal con un r - 5 )/MMMH/ lo 0ue demuestra una buena .recisi(n en el .re.arado de las soluciones/ .or lo 0ue la concentraci(n de f(sforo calculada/ la cual es de -/H1 ..m/ es confiable1 $n esta determinaci(n se Bi"o el uso de un blanco 0ue al contener todo los solventes 4 reactivos sin el analito/ 0ue sirvi( .ara descartar las interferencias en la medici(n 4 ocu.arla como un .unto cero en la medici(n de absorbancia1 $n la determinaci(n de calibrado de .atr(n interno 9adicion de .atr(n: se obtuvo un 2r#fico lineal con un r- 5 1/ lo cual indica 0ue la curva .resenta una correlaci(n .ositiva .erfecta1 As el r- obtenido es tan ace.table como la obtenida con el calibrado de .atr(n interno1 Por esto creemos 0ue la concentraci(n obtenida la cual fue de 4/<+ ..m .uede estar mas cercana a la concentraci(n real de fosforo en la muestra .roblema 0ue el valor obtenido en el calibrado de .atr(n interno1 $n el 2rafico fue eliminado el .unto corres.ondiente al aCadido de - ml de .atr(n .or0ue su.onemos un error en la toma de las alcuotas de la soluci(n .atr(n de 1) ..m con la .i.eta1 La matri" es todo lo 0ue Ba4 en la muestra .roblema 4 el efecto 0ue .roduce es el cambio 0ue e7.erimenta la absorbancia con todo lo 0ue Ba4 en la muestra adem#s del analito1 $s .or esto 0ue la matri" afecta a la absorbancia medida1 Puede 0ue la matri" ten2a com.onentes desconocidos 0ue sean im.osibles de incluir en las disoluciones de .atr(n al construir la curva de calibrado1 As cuando se a2re2a un volumen .e0ueCo de soluci(n del .atr(n a la muestra desconocida/ no varia si2nificativamente la absorbancia medida 90ue se traduce en la concentraci(n calculada: 4 se debe a 0ue la matri" e;erce el mismo efecto sobre el mismo analito aCadido sobre el 0ue Ba4 en la muestra .roblema1 8abe destacar 0ue el efecto matri" es un efecto indeterminado de las es.ecies 0ue rodean a la muestra 0ue afectan a la sensibilidad/ cuando el efecto de una es.ecie es determinado 94 aditivo: se Babla de interferencia1

$l uso de la adicion de .atr(n es es.ecialmente 3til cuando la com.osici(n de la muestra es desconocida 4 afecta a la seCal analtica1 Pero la desventa;a es 0ue este mtodo esta basado en la e7tra.olaci(n .or lo tanto no es tan .reciso 4 se .uede cometer un error1 $n cambio el mtodo utili"ando la determinaci(n .or .atr(n e7terno se basa en la inter.olaci(n 4 .or lo tanto la absorbancia medida .ara la muestra .roblema cae dentro de la .ro.orcionalidad de la absorbancia con la concentraci(n/ el cual es bastante .reciso 4 f#cil de visuali"ar1 $n este caso no .odemos estar se2uro de si ocurre o no un efecto de matri" sin tener una forma de com.arar ambos mtodos utili"ados1 Pero estamos se2uros de 0ue la concentraci(n real de la muestra .roblema debe de estar en el ran2o de las concentraciones obtenidas en ambos mtodos .or0ue la es.ectrosco.ia U%-%isible es un mtodo bastante .reciso/ a .esar de esto no tenemos el valor real de la concentraci(n de la muestra .roblema .ara saber la e7actitud1

Con (us#$n
'e Bi"o cum.limiento de los ob;etivos en ra"(n de 0ue se .udo cuantificar/ mediante es.ectrofotometra U%-%isible/ el contenido de f(sforo en una muestra real 2racias a las absorbancias obtenidas e7.erimentalmente/ al reali"ar las corres.ondientes curvas de calibraci(n1 Pero no estamos se2uros de cual concentraci(n obtenida de ambos mtodos/ 4/<+ o -/H1 ..m/ est# mas cercana a la concentraci(n real de la muestra .roblema1 A .esar de esto el .r#ctico se considera como e7itoso .or0ue se a.rendi( sobre el uso del es.ectrofot(metro

B#+(#ogra,-a
I1 Pino Pre"1 =1 Pre" Bendito/ An#lisis de elementos-tra"a .or es.ectrofotometra de absorci(n molecular Ultravioleta-visible/ 8a.itulo </ es.ectrofotometra U%visible/ instrumentaci(n1 Universidad de 'evilla 91MH*:1 P.1 1-*-1-41

1 =an"er/ L1 A1 8urrie1 !uidelines for calibration in anal4tical cBemistr41 Part 11 Iundamentals and sin2le com.onent calibration1 Pure A..l1 8Bem1 L) 91MMH: ..1 MM*-1)14

1 =an"er/ D1 ,tto/ L1 A1 8urrie1 !uidelines for calibration in anal4tical cBemistr41 Part -: Dulticom.onent calibration 9IUPA8 AecBnical Je.ort:1 Pure A..l1 8Bem1 L< 9-))4: ..1 1-1+-1--+