MECANISMO DE REPLICACION A. ADHERENCIA : La protena G de la superficie del virus, se une a los receptores nicotnicos de la celula blanco (neurona).

. PENETRACION: Por endocitosis, se forma una vesicula que al ingresar deja libre a la nucleocapside en el citoplasma por accin del PH = 6.1 (fusin ph dependiente) TRANSCRIPCION: D. La polimerasa sintetiza 5 ARNm individuales , uno para cada protena viral. REPLICACION: Paso del ARNm a ARN genmico, se da por la protena N. La polimerasa transcribe el ARN genmico negativo, a un ARN genmico positivo que ser usado de plantilla para transcribir molculas de ARN negativo por medio de la transcriptasa (protena L y NS) ENSAMBLAJE: EL ARNm de la protena G, se traduce en el retculo endoplasmico, para luego ser transportado por el aparato de Golgi a la superficie celular . Las protenas G y M, forman una especie de parche El ARN- se asocia con las protenas N, L y NS; para formar la nucleocapside se une a la protena M en la superficie interna de la membrana plasmtica. SALIDA: La salida es en yema.

B.

C.

E.

F.

PATOGENESIS El virus ingresa a las clulas nerviosas o musculares de la zona de entrada (receptor nicotnico), se puede mantener en estos lugares por un periodo muy prolongado. Al replicarse no produce sntomas, esta es la etapa de incubacin. Se transporta por axones al SNC en un movimiento retrogrado, hacia los ganglios y a la medula espinal. Disemina hacia: Las clulas del cerebelo, clulas de purkinge, clulas del hipocampo y nucleos pontinos. Esta es la fase prdromo. Al implecarse el cerebro, se entra en la fase nerviosa. Que termina en estado de coma y muerte.

INMUNIDAD La proteina M bloquea los poros nucleares inhibiendo la exportacin del ARNm , previniendo la respuesta infectiva. La nucleoproteina de la rabia (protena N) inhibe la sealizacin antiviral RIG-I La fosfoprotena (NS) inhibe la sealizacion del interferon tipo I del hospedero. Tambien inhibe la via de sealizacin STAT-1 La vacuna ms efectiva, es la vacuna de cerebro de raton lactante, que fue introducida en 1956. Es muy inmunogenica. Sin embargo, en el caso de reacciones adversas se debe tratar con vacunas de clulas diploides. Que tiene 2 tipos la WI-38 inactivada en tri-N-butil-fosfato y la MRC-5 inactivada en propionolactona y desarrollada en fibroblastos humanos. Otras vacunas de virus inactivados, han sido desarrolladas en clulas diploides pulmonares de feto de mono Rhesus Vacuna de cerebro de ratn lactante tipo Fuenzalida. Fue introducida en 1956. Se prepara a partir de cultivo de virus de la rabia inactivados con luz ultravioleta en cerebro de ratones recin nacidos. Es muy inmunognica. Se recomienda una dosis diaria por 14 das de 0.5 ml en nios menores de tres aos y 1.0 ml para adultos, por va subcutnea, en la regin periumbilical o inter-escapulovertebral. En caso de heridas extensas se recomienda continuar la vacunacin hasta por 21 das. Las reacciones secundarias generalmente son locales, como dolor, eritema e induracin en el sitio de la aplicacin, que se presentan hasta en el 20% de los casos y generalmente al final de la inmunizacin. Se calcula que 1 por cada 8000 receptores de vacuna, pueden presentar alguna complicacin neurolgica como encefalitis, mielitis transversa, neuropata perifrica y neuritis. Las complicaciones estn en relacin directa con el nmero de dosis de vacuna y la edad del paciente. En caso de presentarse cualquiera de estas reacciones adversas debe suspenderse este tipo de vacuna y continuar con la de clulas diploides. Se pueden utilizar esteroides en el manejo de las reacciones severas, que pongan en peligro la vida del paciente. Vacuna de embrin de pato. Se

obtiene a partir de cultivo de virus de la rabia en embriones de pato inactivados con betapropionolactona; aunque produce menos reacciones adversas que la vacuna de cerebro de ratn es menos inmunognica, por lo que se dej de utilizar desde 1982. Las complicaciones neurolgicas asociadas a la vacuna se han correlacionado a la inadecuada inactivacin del virus y en las vacunas iniciales a la presencia de tejido neuronal. Vacunas de clulas diploides humanas (VCDH). Son desarrolladas en clulas diploides humanas; existen dos tipos de stas: la WI-38 inactivada en tri-Nbutil-fosfato y la MRC-5 inactivada en propionolactona y desarrollada en fibroblastos humanos. Otras vacunas de virus inactivados, han sido desarrolladas en clulas diploides pulmonares de feto de mono Rhesus adsorbidas (VRA). A partir de 1976 estas vacunas han sido utilizadas en humanos para profilaxis de rabia pre y post-exposicin en todo el mundo. La dosis de estas vacunas es de l.0 ml intramuscular en el rea deltoidea y en los lactantes en la regin anterolateral superior del muslo en los das 0, 3, 7, 14 y 28. En algunos pases de Europa se recomienda una sexta dosis. Las reacciones adversas son menos frecuentes y graves que con las vacunas previas; principal mente en nios, se reportan efectos locales como prurito, eritema, dolor y edema en el sitio de la aplicacin en el 25% de los vacunados, y reacciones sistmicas como cefalea, nuseas, mareos, dolor abdominal y mialgias en el 20% de los casos aproximadamente. Se han descrito casos de sndrome de Guillain Barr, con recuperacin completa, enfermedad similar a 8 la de complejos inmunes con urticaria, angioedema, artralgias o artritis en aproximadamente el 7% de pacientes adultos con antecedente de vacunacin previa. Estas vacunas son estables a temperaturas de 37 C durante un mes y al menos por tres aos y medio a temperaturas entre 2 y 8 C. Vacunas elaboradas con tcnicas de biologa molecular. En estas vacunas recombinantes el genoma que codifica para las glicoprotenas se ha insertado en el virus vaccinia. Ensayos preliminares en el modelo animal sugieren que estas vacunas estimulan una excelente respuesta inmune.

PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS EN ANIMALES

a)

b)

c) d) e)

Asegurar al animal firmemente sobre la mesa de autopsia, decapitarlo y sostener fuertemente la cabeza con un frceps. Hacer una incisin en el medio del crneo a travs de la piel, en forma transversal llevndola a los costados y tambin levantando msculo y fascia, desde el sector posterior de los ojos extendindose hacia la base del crneo, separndose del mismo. Usar un martillo y cincel para hueso, una sierra o en su defecto cuchillo de carnicero, abrir el crneo a partir del agujero occipital hasta los huesos frontales. Despus unir los cortes longitudinales con una incisin transversal, por la lmina del frontal, inmediatamente por encima de los ojos y separar la calota con una pinza y un escoplo o similar. Extraer el encfalo del crneo con un nuevo juego de instrumentos estriles. Si se toman muestras de varios animales, no compartir los elementos. Colocar el encfalo en el recipiente rotulado y refrigerar inmediatamente. Depositar el instrumental en un recipiente con desinfectante o para ser autoclavado, previo a su lavado.

f) g)

Introducir el remanente del animal, toallas descartables, papel de diario, etc., en las bolsas de plstico para incinerarlo. Limpiar la superficie de trabajo con desinfectante.

Tipo de muestra * Saliva * Biopsia de nuca Suero y Lquido cefalorraqudeo (LCR) Biopsia de cerebro en casos extremos Criterios para definir una muestra como positiva IFD: inmunofluorescencia directa EB: ensayo biolgico en ratones PCR: reaccin en cadena de la polimerasa.

Inmunofluorescencia Directa

La tcnica de rutina para el diagnstico de rabia es la inmunofluorescencia directa, que se basa en la deteccin de protenas virales en improntas de hipocampo, cerebelo o mdula por medio de anticuerpos especficos (monoclonales o policlonales) contra las protenas virales conjugados a fluorescena. Esta tcnica se puede realizar tambin en muestras de impronta de crnea y biopsias de cuero cabelludo.

Otras tcnicas auxiliares para el diagnstico comprenden la determinacin en suero o LCR, de anticuerpos antiglicoprotena por ELISA o por la tcnica de inhibicin de focos fluorescentes en cultivo celular, RT-PCR en muestras putrefactas y la inoculacin del virus en cerebro de ratones lactantes o en cultivos celulares, estas ultimas se pueden aplicar en LCR, BCC y en muestras de SNC dudosas.