LABORATORIO QUIMICA AMBIENTAL DETERMINACIN DE DBO5 y DQO (GUA N3)

1.-

DETERMINACIN DE DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO (DBO 5)

El mtodo se basa en determinar el oxgeno consumido por microorganismos, cuando se incuba una muestra en la oscuridad a 20C, durante cinco das, determinndose el oxgeno con el mtodo Winckler Azida modi icada! 1.1.- Aparatos y mat r!a" s 1.1.#.- Aparatos -Bot ""a $ !%&'(a&!)% para DBO* de capacidad 2"0 ml a #00 ml, con tapa de $idrio esmerilado % sello &idrulico! -I%&'(a$or $ a!r o (a+o $ a,'a* con control de temperatura a 20oC ' (oC! 1.1.1.--o"'&!o% s --o"'&!)% tamp)% $ .os.ato/ )isol$er *," g de +,2-./, 2(,0" g +2,-0/, ##,/ g 1a2,-0/ 2 0,20 % (,0 g 1,/C3 en alrededor de "00 ml de agua destilada % diluir a un litro! El p, debe ser 0,2 sin proceder a un ma%or a4uste! )escartar la soluci5n o cual6uiera de las soluciones siguientes, si se obser$an signos de crecimiento biol5gico! --o"'&!)% $ s'".ato $ ma,% s!o 0 pta0!$rato/ )isol$er 22," g de 7g89 / 1 0,20 en agua destilada % diluir a un litro! -reparar la soluci5n semanalmente, usando material de $idrio esterilizado % agua destilada reciente o estril! :-o"'&!)% $ &"or'ro $ &a"&!o/ )isol$er 20," g de CaC32 en agua destilada % diluir a un litro! :-o"'&!)% $ &"or'ro .2rr!&o/ )isol$er 0,2" g de ;eC3# 2 <,20 en agua destilada % diluir a un litro! :-o"'&!)% $ s'".!to $ so$!o/ )isol$er (,"0" g de 1a28.# en (000 ml de agua destilada! Esta soluci5n no es estable, preparar diariamente! --o"'&!)% $ &"or'ro $ amo%!o/ )isol$er (,(" g de 1,/C3 en alrededor de "00 ml de agua destilada, a4ustar el p, a 0,2 con soluci5n de 1a., % diluir a un litro! Esta soluci5n contiene 0,# mg de 1=ml! :-o"'&!)% $ s'".ato $ ma%,a% so/ )isol$er /*0 g de 7n8./ 2 /,20 >o /00 g de 7n8./ o #</ g de 7n8./2 ,20? en agua destilada, iltrar % diluir a un litro! Esta soluci5n no debe dar color en presencia de almid5n, al a@adir una soluci5n de +3 en medio cido! -R a&t!3o 4"&a"!-yo$'ro-a5!$a/ )isol$er "00 g de 1a., >o 000 g +., ? % (#" g de 1a3 >o ("0 g de +3? en agua destilada % diluir a un litro! A@adir (0 g de 1a1 # disueltos en /0 ml de agua destilada! Este reacti$o no debe dar color alguno, en presencia de almid5n, al a@adir una soluci5n de +3 en medio cido! Como medida de seguridad, la preparaci5n de esta soluci5n debe e ectuarse ba4o campana % en ba@o de agua ra! --o"'&!)% $ a"m!$)% a" #6/ -reparar una soluci5n acuosa de almid5n disol$iendo 2 g de almid5n soluble en (00 ml destilada caliente! Agregar 0,2 g de cido saliclico como preser$ante! :-o"'&!)% patr)% $ Na#-#78 7*7#5 N/)isol$er <,20" g de 1a2820# 2",20 en agua destilada! A@adir (," ml de 1A., 5 0,/ g de 1a., en lente4a % a orar a (000 ml! Estandarizar con soluci5n de dicromato de potasio!

1.#.- 9ro& $!m! %to 1.#.1.- 9r para&!)% $ "as (ot ""as $ DBO -Aa$ar las botellas con detergente, en4uagar con agua destilada % secar! :- ""o $ a,'a/ -ara e$itar 6ue entre aire dentro de la botella de diluci5n durante la incubaci5n, se debe emplear un sello de agua! Esto se logra llenando la botella completamente a rebalse % poniendo cuidadosamente el tap5n de modo 6ue al taparla se desplace el exceso de agua sin de4ar burbu4as! Cubrir el sello de agua con una cubierta de plstico, o con una caperuza de papel aluminio, para reducir la e$aporaci5n del agua durante la incubaci5n! 1.#.#.- 9r para&!)% $ a,'a $ $!"'&!)% -Colocar un $olumen apropiado de agua destilada en un en$ase de $idrio o polietileno de alta densidad % lle$arla a una temperatura de 20C! :A@adir por cada litro de agua, ( ml de cada una de las siguientes solucionesB tamp5n os ato, sul ato de magnesio, cloruro de calcio % cloruro rrico! :8aturar la soluci5n con oxgeno disuelto mediante agitaci5n o por aireaci5n con aire iltrado, libre de sustancias orgnicas! Co%tro" $ " a,'a $ $!"'&!)%/ 3ncubar, una botella de )C. con agua de diluci5n durante cinco das a 20C! )eterminar oxgeno inicial % inal! El oxgeno consumido no debe ser ma%or a 0,2 mg=A % pre erentemente no ma%or 6ue 0,( mg=A! 1.#.8.- 9r tratam! %to $ "a m' stra -A"ma& %am! %to $ "as m' stras/ A in de e$itar la reducci5n de la )C., el tiempo de almacenamiento debe ser mnimo entre la toma de muestra % el anlisis, segDn se indicaB a) m' stras p'%t'a" s / si el anlisis se e ectDa despus de 2 & de tomada la muestra, almacenar a /C o menos, % comenzar el anlisis pre erentemente antes de < & % nunca despus de 2/ &E () m' stras &omp' stas / conser$ar las muestras puntuales a /C o menos, durante la mezcla! Aos perodos de mezcla no podrn exceder de 2/ &! -ara almacenar las muestras compuestas, utilizar los mismos criterios de las muestras puntuales, considerando 6ue el tiempo de almacenamiento comienza una $ez inalizado el perodo de mezcla! -M' stras 4&!$as o a"&a"!%as/ 1eutralizar las muestras a p, <," a 0," con ,28./ (1 o 1A., (1 segDn corresponda! -rocurar no diluir la muestra ms 6ue 0,"F! -M' stras :' &o%t! % % &"oro/ 8i la muestra procede de un proceso 6ue &a sido sometido a un tratamiento de cloraci5n, aun cuando no se detecte cloro residual, es con$eniente usar agua de diluci5n con in5culo! Eliminar el cloro residual agregando soluci5n de 1a28.#E para esto es necesario determinar el $olumen de soluci5n de 1a28.# necesario para descomponer el cloro presente en la muestra neutralizada, agregando (0 ml de cido actico >(B(? o cido sul Drico >(B"0?, (0 ml de soluci5n de %oduro de potasio al (0F % titular con 1a2820# 0,02" 1 &asta $ira4e del indicador almid5n! Agregar a la muestra neutralizada el $olumen de sul ito % mezclar, luego de (0 a 20 min la muestra debe dar negati$a al ensa%o de cloro residual! -M' stras :' &o%t! % % otras s'sta%&!as t);!&as/ Algunas aguas residuales contienen metales t5xicos, en tal caso se re6uiere de un tratamiento % estudio especial! :M' stras so(r sat'ra$as &o% o;<, %o $!s' "to/ En muestras 6ue contengan ms de G mg=A de oxgeno disuelto a 20C es necesario lle$ar a la saturaci5n a 20C por agitaci5n $igorosa o por aireaci5n con aire comprimido limpio! :A='st $ t mp rat'ra/ A4ustar la temperatura de las muestras a 20C ' ( C antes de &acer las diluciones!

-T2&%!&as $ $!"'&!)%/ Como una primera aproximaci5n, emplear el siguiente criterio para de inir el rango de diluciones a utilizarB 7*76 a 1*76Hesiduos industriales con alta carga de materia orgnica! 1*76 a 5*76Agua ser$ida, cruda % sedimentada! 5*76 a #5*76 E luentes tratados biol5gicamente! #5*76 a 177*76Agua natural o residuo industrial l6uido de ba4o contenido orgnico! Considerando 6ue las Dnicas diluciones 6ue producen resultados $lidos son a6uellas donde el oxgeno residual, despus de " das de incubaci5n a 20C, es al menos ( mg=A % el consumo de oxgeno de 2 mg=A, se deben e ectuar una serie de diluciones en el rango 6ue corresponda, segDn lo antes se@alado, a in de obtener estas condiciones! -D!"'&!)% % (ot ""a DBO :Isando una pipeta de punta anc&a, agregar el $olumen de muestra &omogeneizada a botellas )C. de capacidad conocida, 6ue contengan agua de diluci5n! :Alenar las botellas con su iciente agua de diluci5n, con in5culo si es necesario, de modo 6ue la inserci5n del tap5n desplace todo el aire, sin de4ar burbu4as! :En el caso de diluciones ma%ores 6ue (B(00, realizar una diluci5n de la muestra en matraz $olumtrico, pre$io a tomar la muestra para la diluci5n en la botella! :-ara la medici5n de oxgeno disuelto, es necesario preparar dos botellas de cada diluci5n! :)eterminar, el oxgeno disuelto inicial de una botella, tapar la segunda botella, sellar con agua e incubar " das a 20C! 1.#.>.- D t rm!%a&!)% $ o;<, %o $!s' "to M2to$o yo$om2tr!&o mo$!.!&a&!)% $ a5!$a -A la botella 6ue contiene la muestra a@adir, sucesi$amente, ( ml de la soluci5n 7n8. / % ( ml de soluci5n lcali : %oduro : azida! :Japar cuidadosamente, excluir las burbu4as de aire % mezclar con precauci5n por in$ersi5n $arias $eces! :Cuando el precipitado &a sedimentado &asta un tercio de la capacidad de la botella, a@adir (,0 ml de ,28./ concentrado! :Kol$er a tapar % mezclar con precauci5n por in$ersi5n $arias $eces &asta 6ue la disoluci5n sea completa! :Jitular un $olumen de 200 ml con 1a2820# 0,02" 1 &asta obtener un color amarillo plido, a@adir algunas gotas de soluci5n de almid5n, % continuar la titulaci5n desaparici5n del color azul! :Al titular 200 ml de muestra, ( ml de soluci5n de 1a2820# 0,02" 1 e6ui$ale a ( mg de oxgeno disuelto = litro! 1.8.E;pr s!)% $ r s'"ta$os

-M' stras &o% a,'a $ $!"'&!)% %o !%o&'"a$a )C." mg = A L)( : )2 en 6ueB )( L oxgeno disuelto, mg=A, de la muestra diluida inmediatamente despus de la -reparaci5nE )2 L oxgeno disuelto, mg=A, de la muestra diluida al 6uinto da de incubaci5n a 20 CE - L racci5n $olumtrica decimal de la muestra!

#.- DETERMINACIN DE DEMANDA QU?MICA DE OXIGENO (DQO). El mtodo se basa principalmente en la oxidaci5n de la materia orgnica por el dicromato en medio de cido sul Drico, con lo cual el carbono es con$ertido en C02 % el &idr5geno en agua! Aa cuanti icaci5n se realiza por colorimetra! #.1.Aparatos y mat r!a" s

#.1.1.- Aparatos :Jubos de reacci5n con tapa &ermtica resistente a altas temperaturas! Aos tubos deben ser la$ados con ,28./ al 20F % posteriormente con agua destilada! :Clo6ue de digesti5n regulable a ("0C 2C :Espectro ot5metro con capacidad de lectura entre #"0 nm % <20 nm :Cubetas de ( cm de paso 5ptico para la regi5n $isible! :7icropipeta graduable de 0:" mA con precisi5n de 0,0" mA! #.1.1.- -o"'&!o% s -o"'&!)% D!, stora/ disol$er en aprox! "00 mA de agua destilada, (0,2(<g de + 2Cr2.0 secado pre$iamente a (0#C por 2 &, agregar (<0 mA de , 28./ % ##,# g de ,g8./! Ina $ez disuelto % en riado a temperatura ambiente, a orar a (A! -o"'&!)% Cata"<t!&a/ Agregar (0 g de Ag28./ a (A de ,28./! )e4ar reposar con agitaci5n ocasional &asta completa disoluci5n, lo cual puede demorar &asta 2 das! Muardar en en$ase mbar! -o"'&!)% patr)% $ @ta"ato $ potas!o (1mA B 1 m, DQO)/ 8ecar ;talato cido de potasio a (20C &asta peso constante! )isol$er 0,/2" g en agua destilada % diluir a "00 mA! El ,C..C:C <,/:C..+ tiene una )9. te5rica de (,(0< mg .2=mg! C'r3a $ Ca"!(ra&!)%/ 8e con ecciona una cur$a de calibraci5n para un rango de 0:(000 mg=A de )9.! Considerando los $alores0E "0E (00E 200E /00E <00E *00E (000 mg )9.=A! A partir de la soluci5n patr5n de ;talato de potasio! Construir cur$a de Concentraci5n $=s Absorbancia! #.8.9ro& $!m! %to

:Agregar 2," mA o alcuota diluda a 2," mA de muestra en el tubo de digesti5n, :Agregar (,"mA de soluci5n digestota % #," mA de soluci5n cataltica! :Japar cuidadosamente % colocar en el blo6ue de digesti5n por 2& a ("0C >proceder de la misma orma con la cur$a de calibraci5n? :Hetirar los tubos % de4ar en riar a temperatura ambiente! :Aeer absorbancia a <00nm contra un blanco de reacti$o!