TINCIN DE GRAM

Objetivos del proyecto

Este proyecto tiene como objetivo llevar a la prctica los conocimientos tericos explicados en clase, consiguiendo con ello un mayor conocimiento y profundizacin en la materia.

Con este trabajo conseguimos adems una mayor prctica y desenvolvimiento con los utensilios del laboratorio.

Materiales

Bacterias (sarro, saliva, yogurt !lco"ol Cristal violeta #ugol $afranina o fucsina bsica !gua destilada

Procedimiento
El m%todo de tincin es el siguiente& '. $e prepara el frotis, se seca y se fija. (. $e cubre con cristal violeta durante un minuto. ). #avar suavemente con agua destilada para eliminar el exceso de colorante. *. $e traza con lugol un minuto. El lugol act+a como mordiente aumentando la afinidad del colorante por la bacteria. ,. #avar con agua el exceso de lugol. -. $e gotea alco"ol.acetona de forma continua "asta /ue la preparacin deje de perder color y se lava enseguida con agua abundante.

7. Se cubre la preparacin con un colorante de contraste, como la safranina, durante un minuto. 0. $e lava con agua y se seca al aire, observndose a continuacin con el objetivo de inmersin. 1. Clasificar las bacterias seg+n su forma (esf%rica .cocos. ,alargada .bacilos. ,bacilos cortos .cocobacilos. y por su agrupacin (aislado, diplos, t%traadas, cadenas, racimos, empalizada .

Mecanismo de la tincin de Gram

Por qu unas bacterias se tien de violeta y otras rosadas?

#as diferencias bsicas /ue nos permiten ver las bacterias de distintos colores residen en la pared bacteriana, las paredes celulares de bacterias de tipo gramnegativo poseen una capa lip2dica externa la cual se ti3e con cristal violeta al igual /ue la pared de las c%lulas de tipo grampositivo pero con la diferencia de /ue estas no tienen una esa capa lip2dica, /ue al ser tratada con alco"ol desaparece (debido a /ue el alco"ol es un disolvente orgnico y disuelve la pared lip2dica y por tanto la c%lula /ueda de nuevo sin te3ir y para poder observarla basta con a3adir safranina (colorante /ue se /uedar en la capa de mureina /ue "a /uedado a"ora expuesta.

Dificultades encontradas
4ificultad para encontrar las cantidades con las cuales realizar la tincin, por ello al mirar al microscopio encontrbamos grandes restos slidos de los colorantes. #os colorantes ti3en muc"o y al no estar familiarizados con los utensilios /ue deb2amos utilizar, manc"amos tanto el laboratorio como a nosotros mismos. 5o sab2amos con certeza cmo era la vista al microscopio de las bacterias /ue buscbamos, por ello es posible /ue passemos por alto algunas bacterias creyendo /ue eran restos de colorante.