FACULTAD DE BIOQUIMICA Y CIENCIAS BIOLOGICAS LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGIA OPERACIONES Y PROCESOS BIOTECNOLOGICOS I - Ao 2009 GUA DE PROBLEMAS UNIDADES TEMTICAS II

III

Problema 1: Un proceso fermentativo se lleva a cabo en un CSTR de volumen V1 = 1 m3. El crudo, que es estril, contiene el sustrato en una concentracin de 60 g/m3. El proceso est gobernado por las siguientes cinticas de formacin de biomasa y consumo de sustrato: 4 rx = 3 s 4+s

rs = -10 rx donde: x = concentracin de biomasa, g m-3 s = concentracin de sustrato, g m-3 rx = velocidad de formacin de biomasa,g m-3 h-1 rs = velocidad de formacin de sustrato, g m-3 h-1 a) Calcule el mximo flujo de alimentacin tolerado por el quimiostato y la mxima productividad celular, esta ltima expresada en (g clulas h-1 m-3) b) Para llevar la capacidad de alimentacin de crudo a 3.75 m3h-1 en condiciones de mxima productividad, se propone la incorporacin de un nuevo reactor de volumen V2. Calcule este volumen para el caso en que los reactores se dispongan en paralelo. c) Para el mismo caudal de alimentacin y el volumen V2 calculado en (b), determine la produccin de un arreglo en serie del mismo par de reactores, considerando las dos alternativas. Discuta las diferencias entre ambas secuencias y entre stas y el arreglo en paralelo.

Problema 2: Se pretende disear (esto es, calcular su volumen) un reactor tanque continuo agitado, para producir 1.2 kg/h de cierto tipo de biomasa a temperatura ambiente (25-30 C). La cintica de formacin de la biomasa puede representarse adecuadamente mediante el modelo de Contois:

= max
s + Ks x donde s es la concentracin del sustrato limitante, en g sustrato/l Los parmetros de la ecuacin de Contois para el sistema en estudio a 25 C fueron ajustados en el rango 28 g/l s 42 g/l , resultando:

max = 0.75 h-1 y Ks = 4 g sustrato/g biomasa

La alimentacin es estril, con una concentracin de sustrato sf = 40 g/l. El rendimiento en biomasa en el rango de concentracin de sustrato de inters es: YX/S = 0.45 g biomasa/g sustrato. (a)Disee el reactor - obviamente para la produccin deseada - utilizando como criterio la condicin de que el valor de la concentracin del sustrato en la corriente de salida sea igual al 75% del valor correspondiente a la corriente de alimentacin al reactor. Reporte el volumen del reactor, los caudales de alimentacin y de salida y las concentraciones de sustrato y biomasa en la corriente de salida. Explicite las hiptesis de su modelo de reactor. (b) Disee el reactor - obviamente para la produccin deseada -, pero adoptando como criterio de diseo la minimizacin de su volumen. Reporte las mismas variables que en la parte (a). (c) Verifique si en la solucin obtenida en (b) la concentracin de sustrato est dentro del rango en que fueron ajustados los parmetros de la ecuacin de Contois. Si as no fuera, aceptara como vlidos los resultados obtenidos en (b)? Qu recursos utilizara para superar esa dificultad? (d) Escriba las ecuaciones que le permitirn predecir el valor de las concentraciones de biomasa y de sustrato 24 horas despus de la interrupcin simultnea de la alimentacin y salida del reactor diseado segn (b).

Problema 3: Diseo de un Reactor Tanque Continuo Agitado (CSTR) con inhibicin. (a) Grafique la concentracin de biomasa x y la de sustrato s en funcin del factor de dilucin D para un sistema cuya velocidad de produccin de biomasa rx est dada por:

rx

max s x Ks + s + i Ks /Ki

con: s0 x0 Ks Ki i = = = = = = = 10 g/l 0 1 g/l 0.01 g/l 0.05 g/l 0.5 h-1 0.1 g clulas/g sustrato

max

YX/S

Incluya en el mismo grfico los valores de x y s para i = 0 (b) Asuma un CSTR diseado para operar en condiciones libres de inhibicin. Derive las ecuaciones para los cocientes (s/si) y xD/(xD)i donde el subndice i indica condiciones de presencia del inhibidor. Cmo afecta la presencia del inhibidor el comportamiento del reactor en lo que a (xD)max y lavado del reactor respecta? (c) Repita (a) y (b) para el caso en que i aumenta con x, tomando i = x/10

Problema 4: En la figura adjunta se representa el crecimiento de cierto tipo de biomasa, una vez superada la fase lag. La velocidad especfica de crecimiento graficada puede expresarse mediante la ley logstica:

x = max (1 ) k
a) Obtenga los parmetros max y k b) Calcule la produccin de esa biomasa en un esquema de reactores consistente en un Reactor Tanque Continuo Agitado Ideal (en estado estacionario) de 2.0 m3 de volumen seguido de un Reactor Tubular (operando en condiciones de flujo pistn) de 3.0 m3 cuando al sistema se alimentan 0.9 m3/h de crudo estril. c) Qu porcentaje de la mxima productividad se alcanza en el CSTR operando en las condiciones del punto (b)? d) Determine el mximo caudal que puede procesarse con el esquema del punto (b) e) Alguien sugiere que invirtiendo el orden de los reactores en la secuencia puede mejorarse la produccin. Opine al respecto. f) Otro colaborador sostiene que el CSTR del esquema propuesto es innecesario, ya que con el mismo reactor tubular operando con un gran reciclo puede igualarse y an superarse la produccin del esquema del punto (b). Opine, fundamentando matemticamente su respuesta, sobre esta propuesta.

0 50

8 50

Concentracion de clulas (g/litro)

40

40

30

30

20

20

10

10

0 0 1 2 3 4 5 6 7 8

t (horas)

Problema 5: Se est analizando un proceso de produccin de un microorganismo de frmula CH1.8O0.6N0.15 utilizando glucosa (C6H12O6) como fuente de carbono. La formacin de biomasa est acompaada por la produccin de etanol (C2H6O). Para obtener informacin sobre la bioreaccin se

realizan experiencias utilizando un reactor tanque continuo perfectamente agitado de 1 litro de volumen til, alimentado con una corriente estril conteniendo glucosa en una concentracin s0 = 30 g/l, obtenindose los resultados que se muestran en la Tabla 5.1. Caudal de alimentacin (l/h) 0.025 0.050 0.075 0.100 0.125 0.150 Concentraciones en la corriente de salida (g/l) Biomasa Glucosa Etanol 12.00 1.45 3.25 11.94 2.86 3.00 11.08 4.24 3.04 9.70 5.75 2.81 10.10 7.30 2.56 9.00 8.30 2.58 Tabla 5.1

a)Determine si los rendimientos sustrato/biomasa y sustrato/etanol pueden considerarse constantes en el rango de concentraciones analizado b)Determine si puede representarse la cintica de formacin de biomasa con una expresin del tipo $ s , donde s es la concentracin de glucosa. "aproximacin de 1er. Orden a la Ecuacin de Monod": =

$ . En tal caso, estime el valor de la constante

$ s , con $ = 0.0175 l g 1h 1 , YX/S = 0.425 g biomasa/g sustrato, YP/S = 0.115 c)Asumiendo que = g etanol/g sustrato, dimensione un reactor tanque agitado discontinuo capaz de producir, utilizando ese microorganismo, 5.0 kg de etanol en 24 horas, a partir de un medio conteniendo inicialmente 10.0 g glucosa/l y 1.0 g biomasa/l. Reporte las concentraciones de biomasa y glucosa al finalizar la fermentacin.
d)Dimensione un reactor tanque agitado continuo capaz de obtener la misma produccin diaria de etanol a partir de la misma cantidad diaria de crudo utilizada en el reactor discontinuo. e)Dimensione un reactor tanque agitado continuo capaz de producir la misma cantidad diaria de etanol procesando un crudo con la misma composicin, pero en condiciones de mxima productividad. Reporte el caudal de alimentacin de crudo que le permite operar en estas condiciones. Analice crticamente las diferencias entre los resultados de (c) , (d) y (e).

Problema 6: La velocidad especfica de produccin de cierto microorganismo sobre glucosa puede expresarse mediante la Ecuacin de Blackman: max max s ; s 2 Ks 2 Ks ; s 2 Ks

donde s es la concentracin de glucosa. En la tabla 6.1 se presenta la respuesta de un CSTR con alimentacin estril y una vez alcanzado el estdo estacionario, a cambios en el caudal de dilucin D, en el rango s 2 Ks. En la tabla 6.2 se reportan los resultados para un reactor batch, operando en la regin s 2 Ks. D (h-1) s (mg l-1) x (g cl l-1)

t (h)

0.23 0.36 0.49 0.67

18 38 58 85

Tabla 6.1 (s < 2 Ks)

0.5 1.50 1.0 2.36 1.5 3.60 2.0 5.44 2.5 8.40 Tabla 6.2 (s >2 Ks)

a) Estime los valores de los parmetros max y Ks b) Adoptando max = 0.865 h-1 y Ks = 66 mg l-1, calcule la produccin horaria de un CSTR de 1 m3 de capacidad cuando al mismo se alimentan 2.0 m3 h-1 de crudo no estril, conteniendo glucosa en una concentracin s0 = 250 mg l-1 y biomasa en una concentracin x0 = 100 mg l-1. El rendimiento biomasa/sustrato es constante: Yx/s = 0.4 g biomasa/g glucosa. c) Compare la produccin obtenida en (b) con la de un reactor tubular de igual volumen operando en rgimen de flujo pistn y alimentado en las mismas condiciones que el CSTR. d) Analice crticamente sus resultados. Puede extender sus conclusiones a cualquier rango de variacin de las varibles D y s ?

Problema 7: Basndose en el modelo para el quimiostato de Monod desarrollado en clase, obtenga las expresiones de la concentracin de biomasa, x; de sustrato, s; del factor de dilucin mximo, Dmx; y de la productividad mxima de biomasa (Dx)mx, para el caso en el que

mx s x rx = ke x
( Ks + rs = Y 1 s)

mx s x
( Ks + s)

Discutir analogas y diferencias con el caso desarrollado en clase. En particular, qu podra representar fsicamente el trmino kex? Existen estados estacionarios no triviales (es decir, con x>0) para cualquier s>0 y D < Dmx?.

Problema 8 : Cuando un trmino negativo es incluido en la cintica celular para modelar el metabolismo endgeno o la energa de mantenimiento, la ecuacin resultante, asumiendo exceso de sustrato puede ser escrita: 1 Y

1 Y

ke x

donde: Y= rendimiento del crecimiento celular, g clulas producidas/g de sustrato consumido para el crecimiento ke = constante de mantenimiento, g de sustrato consumido para energa de mantenimiento/(g clulas unidad de tiempo) Y = rendimiento aparente, g clulas/gramos de sustrato consumido

(a) Demuestre que en un CSTR, x y s estn relacionados a travs de: D Y ke Y + D

(s0 - s)

(b) Qu relacin debe existir entre ke, Yy D en estas condiciones? (c) Analice cuantitativamente si el crecimiento de A. aerogenes sobre glicerina graficado en la figura responde a este modelo.

Problema 9: La pretendida equivalencia entre el modelo de Luedeking-Piret para el crecimiento y formacin de productos (1) y el modelo de energa de mantenimiento de Pirt (2) ha sido objeto de polmica permanente. D una opinin fundada al respecto. (1) rfp = x + x

(2)

1 Y

1 Y

donde: Y = rendimiento celular observado basado en sustrato Y = coeficiente de rendimiento de crecimiento (terico o sin mantenimiento) m = coeficiente de mantenimiento, g sustrato/(g clula . h)

Problema 10: Un microorganismo se utilizar para remover parcialmente un contaminante de aguas residuales, aprovechando el hecho de que el contaminante constituye un sustrato necesario para el crecimiento celular. El caudal a tratar es de 1000 l/h, con una concentracin del contaminante s0 = 120 mg/l y no contiene biomasa. La velocidad especfica de crecimiento del microorganismo sobre el sustrato a remover se muestra en la figura y puede representarse mediante la Ecuacin de Andrews:

$ =

s Ks + s + s2 KI

El consumo especfico del sustrato a remover es de 0.1 g sustrato/g de biomasa formada. a) A partir de la informacin disponible en la grfica adjunta, determine los parmetros de la ecuacin de Andrews

$ = 0.75 h-1, Ks = 40 mg/l y KI = 10 mg/l, disee un CSTR capaz de reducir la b) Adoptando concentracin del contaminante a 10 mg/l. Reporte la concentracin de biomasa a la salida del reactor
c) Alguien sugiere que un mejor diseo, desde el punto de vista del volumen total de reactores a construir, consiste en utilizar dos CSTR en serie, el primero de ellos diseado para operar en condiciones de mximo y el segundo para completar el tratamiento hasta el grado de contaminacin tolerado (10 mg/l). Opine al respecto, fundamentando matemticamente su respuesta d) Otro biotecnlogo sugiere que la configuracin del punto (c) puede mejorarse encontrando el volumen de cada reactor que hace mnimo el volumen total. Formule y resuelva el problema de optimizacin para esta ltima alternativa.
(/s)s->0 = 0.01875 mg h l
-1 -1

* = 0.15 h

-1

(h )

-1

s = 20 mg/l

s (mg de sustrato/litro)

Problema 11: Considere un CSTR con separador de biomasa y reciclo como el que se muestra en la figura.

F,xf

F',x0

F',x FR,xR F,xS

a) Mediante un balance de biomasa global en el esquema, demuestre que si la alimentacin es estril y la cintica de formacin de biomasa responde a la ecuacin:

x = max (1 ) k
la mxima productividad que puede obtenerse de este esquema es:

Pmax = max

k 4

siendo x la concentracin de biomasa en g l-1; el volumen til del reactor es V= 1 m3; max = 1.0 h-1 y k = 20.0 g l-1 b) Calcule la concentracin de biomasa a la salida del esquema operando en condiciones de mxima productividad cuando el caudal de alimentacin es F = 1 m3/h c) Determine todos los caudales y concentraciones de las corrientes involucradas en el esquema operando en condiciones de mxima productividad cuando el separador produce una concentracin en la corriente de reciclo xR = 3 xs. d) Verifique que con los valores obtenidos en (c) se satisface el balance de biomasa en el reactor Problema 12: Un reactor tanque agitado de 2.0 m3 de volumen til se operar en forma discontinua para producir cierto microorganismo sobre glucosa. Su velocidad especfica de produccin responde a una cintica con inhibicin por biomasa del tipo:

= max
s + Ks x donde s es la concentracin de glucosa, x la de biomasa, max = 0.2 h-1 y Ks = 4.0 g sustrato/g biomasa. Al reactor conteniendo 2.0 m3 de crudo estril se cargan 0.5 kg de biomasa y 10 kg de glucosa. El rendimiento biomasa/sustrato es constante: Yx/s = 0.4 g biomasa/g glucosa.

a) Determine el tiempo de operacin si se establece como criterio que la fermentacin debe detenerse cuando rx alcanza su valor mximo. Reporte las concentraciones finales de biomasa y sustrato. b) Plantee el sistema de ecuaciones cuya resolucin le permitira conocer para un dado tiempo t, las concentraciones de biomasa y sustrato si la fermentacin se lleva a cabo en el mismo reactor, pero operando en forma semicontinua: con corriente de alimentacin pero sin corriente de salida. La alimentacin es estril, de caudal constante F, con una concentracin de sustrato sf. El volumen inicialmente cargado al reactor es V0, conteniendo sustrato en una concentracin s0 y biomasa en una concentracin x0. Problema 13: Se dispone de un reactor tanque continuo agitado y de un reactor tubular, ambos de 1 m3 de volumen til, para producir cierto tipo de biomasa cuya velocidad especfica de crecimiento puede expresarse mediante la ley logstica:

x = max (1 ) k
siendo max = 0.75 h-1 , k = 40 g l-1

y x la concentracin de biomasa, en g l-

-1

a) Encuentre el arreglo en serie de los reactores que le permite obtener la mayor produccin cuando al esquema se alimenta 1 m3 h-1 de alimentacin no estril conteniendo 10.0 g l-1 de biomasa. Puede considerar que el reactor tanque continuo agitado es ideal y que el reactor tubular opera en rgimen de "flujo pistn" b) Determine la produccin de un arreglo en paralelo de esos mismos reactores, si el caudal de alimentacin se distribuye en partes iguales c) Cmo distribuira el caudal de alimentacin en el arreglo en paralelo para obtener la mxima produccin?

Problema 14: Para producir un determinado producto, se utiliza la siguiente estrategia: En una primera etapa, se produce una levadura de frmula CH1.6O0.5N0.15 por fermentacin aerbica de glucosa en un reactor discontinuo perfectamente agitado, conteniendo 1 m3 de medio de cultivo. Las concentraciones iniciales de glucosa y biomasa son 50.0 g l-1 y 2.0 g l-1, respectivamente. El rendimiento biomasa/sustrato es YX/S = 0.52 g biomasa/ g glucosa. Como fuente nitrogenada se utiliza NH3. En esta etapa, los nicos productos de la bioreaccin son biomasa, CO2 y H2O. La velocidad especfica de formacin de biomasa est dada por:

= max
s + Ks donde s es la concentracin de glucosa, en g l-1, max = 0.6 h-1 y Ks = 2.5 g l-1 Cuando la concentracin de biomasa alcanza los 10 g l -1, se suspende la alimentacin de O2 al bioreactor y se cambian las condiciones del medio para que la levadura formada produzca un compuesto determinado con un rendimiento YP/S = 0.70 g producto/g glucosa, y no se reproduzca ms. La cintica de formacin del producto es de primer orden en la concentracin de biomasa: rfp = x , con = 0.15 g producto/(g biomasa h)

1)Determine el tiempo total de la operacin necesario para obtener 20 kg de producto. Reporte la concentracin de glucosa al final de la operacin 2)Formule el problema de minimizacin del tiempo de operacin requerido para obtener la produccin deseada del compuesto. Proponga un procedimiento para encontrar ese ptimo 3)Calcule la cantidad de O2 consumido durante la etapa de fermentacin aerbica

Problema 15: El sistema esquematizado en la figura (un reactor tanque contiuo perfectamente agitado de 1 m3 de capacidad, con reciclo) se utilizar para producir un microorganismo cuya cintica de crecimiento responde a la "aproximacin de primer orden de la Ecuacin de Monod ": = mx

s Ks

siendo s la concentracin de sustrato, en g sustrato l 1 ; mx = 2.5 h 1 y Ks = 250.0 g sustrato l 1 . El rendimiento msico de la bioreaccin es Y X/S = 0.32 g biomasa/g sustrato. El separador opera de modo tal que el caudal de la corriente de salida del sistema es el 20% del caudal de la corriente que ingresa al separador, y contiene toda la biomasa producida (esto es, no hay biomasa en la corriente de reciclo). La concentracin de sustrato no se altera en el separador.

a) Calcule la mxima productividad de biomasa, en g/(lh), que puede esperarse de este sistema, y complete la Tabla 7 de especificacin de las corrientes en esa situacin. Corriente Descripcin N 1 2 3 4 5 Alimentacin Entrada al Reactor Salida del Reactor Reciclo Salida del Sistema Tabla 7 b) Encuentre el estado estacionario a que se llega si alimentado el sistema segn (a), se interrumpe el reciclo. Compare la produccin en la nueva situacin con la anterior y comente acerca de las ventajas del reciclo. Proponga modificaciones al sistema para mejorar la produccin. Problema 16: En la Tabla 8 se reportan las concentraciones de un cierto microorganismo (x) y de sustrato (s) obtenidas en un CSTR con alimentacin estril conteniendo 20 g/l de sustrato, para distintos caudales de dilucin: D(h-1) 0.5 1 1.5 2 x (g/l) 7.62 7.45 7.02 6.53 s (g/l) 1.37 2.63 3.87 5.13 Caudal (m3/h) Conc. Sustrato ( gl 1 ) 40.0 Conc. Biomasa ( gl 1 ) 0.0

0.0

10

2.5

6.01 Tabla 8

6.37

a) Verifique si las cinticas de formacin de biomasa (rx) y de sustrato (rs) pueden representarse mediante el siguiente modelo:

$ s x kd x rx = $ rs = s x Y

$ , k d e Y parmetros (constantes). En caso afirmativo, determine los valores de esos parmetros siendo a partir de la informacin de la Tabla 8.
b) Obtenga la expresin del rendimiento observado de la bioreaccin transcurriendo en un CSTR:

Yobs =

x xe (donde el subndice "e" denota "entrada" al bioreactor) se s

en funcin de los parmetros del modelo y de la concentracin de sustrato en el reactor.

c) Asumiendo que se cumple (a) con:

$ = 0.4 g sustrato 1 l h 1 ; k d = 0.05 h 1 ; Y = 0.45 g biomasa / g sustrato

dimensione un CSTR de volumen mnimo capaz de producir 10 kg/h del microorganismo cuando es alimentado con un crudo estril en el que la concentracin de sustrato es se = 15 g/l. Reporte el caudal al que debe alimentarse el crudo y las concentraciones de sustrato y biomasa.

Problema 17: Para determinar la cintica de formacin de un microorganismo se hace la siguiente experiencia: a un reactor tanque continuo perfectamente agitado se alimenta una corriente estril conteniendo el sustrato limitante en una concentracin s0 = 25 g / l , obtenindose los resultados de la Tabla 9 para distintos valores del caudal de alimentacin. a) Determine si puede modelarse la cintica de produccin de biomasa con la Ecuacin de Monod, o si ante la presencia de inhibicin por biomasa resulta aplicable la Ec. de Contois, = max

s s + Ki x

b) Estime los parmetros de la Ecuacin que mejor aproxima los resultados experimentales y el rendimiento biomasa/sustrato YX/S. c) Asumiendo que puede utilizarse el Modelo de Contois, con Ki = 3.75 g s / g b , max = 125 . h 1 ,

YX / S = 0.55 g b / g s , determine el caudal de alimentacin de una corriente estril conteniendo el sustrato en una concentracin s0 = 25 g s / l que hace mxima la produccin de biomasa de un
reactor tanque continuo perfectamente agitado de 1 m3 de capacidad. Reporte las concentraciones de biomasa y de sustrato a la salida del reactor operando en las condiciones halladas.

Tiempo de Residencia (h)

Conc. sustrato (g/l)

Conc. biomasa (g/l)

11

1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

22.29 17.55 14.47 12.31 10.71 9.48 Tabla 9

1.52 4.08 5.70 7.10 7.92 8.47

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