BRUNA PAULA TORRES QUINTO

AVALIAO DA ATRATIBILIDADE DE RAES PARA JUVENIS DE Litopenaeus vannamei (BOONE,1931) PRODUZIDAS COM BIOFLOCOS E HIDROLISADO PROTEICO DE PEIXE EM SUBSTITUIO FARINHA DE PEIXE.

Recife, 2013

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

AVALIAO DA ATRATIBILIDADE DE RAES PARA JUVENIS DE Litopenaeus vannamei (BOONE,1931) PRODUZIDAS COM BIOFLOCOS E HIDROLISADO PROTEICO DE PEIXE EM SUBSTITUIO FARINHA DE PEIXE.

Bruna Paula Torres Quinto

Orientadora: Prof. Dr. Roberta Borda Soares

Monografia apresentada Universidade Federal Rural de Pernambuco para a obteno do grau de Bacharel em Cincias Biolgicas

Recife, Setembro, 2013

Ficha Catalogrfica
Q7a Quinto, Bruna Paula Torres Avaliao da atratibilidade de raes para juvenis de Litopenaeus vannamei (BOONE,1931) produzidas com bioflocos e hidrolisado proteico de peixe em substituio farinha de peixe / Bruna Paula Torres Quinto. Recife, 2013. 36 f.: il. Orientador (a): Roberta Borda Soares. Dissertao (Bacharelado em Cincias Biolgicas) Universidade Federal Rural de Pernambuco, Departamento de Biologia, Recife, 2013. Inclui referncias e anexo(s). 1. Raes 2. Farinha de peixe 3. Hidrolisado proteico de peixe 4. Camaro I. Soares, Roberta Borda, Orientadora II. Ttulo

CDD 639.3

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

AVALIAO DA ATRATIBILIDADE DE RAES PARA JUVENIS DE Litopenaeus vannamei (BOONE,1931) PRODUZIDAS COM BIOFLOCOS E HIDROLISADO PROTEICO DE PEIXE EM SUBSTITUIO FARINHA DE PEIXE.

Bruna Paula Torres Quinto

Monografia aprovada no dia 17/09/2013 pelo Departamento de Pesca e Aquicultura, como pr-requisito para obteno do grau de Bacharel em Cincias Biolgicas

________________________________
ProfDr Roberta Borda Soares (Orientadora) [Departamento de Pesca e Aquicultura] [Universidade Federal Rural de Pernambuco] ____________________________________________ Prof.Dr. Silvio Ricardo Maurano Peixoto [Departamento de Pesca e Aquicultura] [Universidade Federal Rural de Pernambuco] _____________________________________________ MSc. Bruna Critas Souza do Valle [Departamento de Pesca e Aquicultura] [Universidade Federal Rural de Pernambuco] ______________________________________________ Prof. Dr. Ronaldo Oliveira Cavalli [Departamento de Pesca e Aquicultura] [Universidade Federal Rural de Pernambuco]

DEDICATRIA

Dedico esse trabalho aos meus pais, Vilma e Vicente, que sempre me incentivaram a seguir em frente, e se esforaram muito para que eu pudesse alcanar os meus objetivos,com todo amor e pacincia. Ao meu amado companheiro e futuro esposo, Diogo Albuquerque, que sempre esteve comigo em todos os momentos difceis e por todo o amor e carinho compartilhados.

AGRADECIMENTOS

Agradeo professora Roberta Borda Soares, pela minha insero no Laboratrio de tecnologia em Aquicultura, e pela sua pacincia e dedicao na orientao deste trabalho e ao Professor Silvio Peixoto por aceitar participar da avaliao deste trabalho bem como os seus conselhos para melhora do mesmo. Agradeo a todos do LTA por compartilharem seus conhecimentos, pela ajuda nos momentos necessrios e pela sua amizade, Karin, Camila Barros, Vivian, Diego, Ingrid, Bruna, Thas, Nathalia, Roberta Nery, e Camila Brito. Agradeo a Bruna do Valle, por toda a sua pacincia e por disponibilizar seu tempo me ajudando na redao deste trabalho, e realizao do experimento, juntamente com Luciano Santos. Aos meus pais, por apoiarem os meus estudos, mesmo nos momentos de dificuldade. Ao meu querido companheiro e amigo, Diogo Albuquerque por me ajudar nas tradues necessrias e por toda a sua ajuda no perodo em que estive na faculdade, por toda a pacincia e seu amor dedicados. Ao meu irmo, Victor, por me ajudar com as figuras deste trabalho, e pelo apoio dado durante esses anos de graduao. Aos meus amigos da faculdade com quem compartilhei muitos momentos bons, e por toda a ajuda quando precisei, Polyanna, Felipe, Bruna Lucena, Rafaela Falco, Karin, Tati, Flvio, Paulo, Rassa, Arlindo. Agradeo a todos por tudo o que fizeram por mim!

RESUMO

O presente estudo teve como objetivo avaliar o poder de atratibilidade de raes produzidas com diferentes nveis de substituio da farinha de peixe por hidrolisado proteico de peixe (HPP) e biofloco na alimentao de juvenis do camaro marinho Litopenaeus vannamei. As raes para os indivduos na fase de berrio foram formuladas com teor de protena de 42%, tendo como principal fonte proteica a farinha de peixe na rao basal, que contribuiu com 40% dos ingredientes. A substituio da farinha de peixe pelos ingredientes testados foi feita nos nveis de 0 (controle), 10, 20, 30 e 40%. Foi estabelecida a proporo de 1:1 de HPP e biofloco para todas as raes testadas. Os testes de atratibilidade foram feitos em triplicata para cada tipo de rao, de modo a comparar todas entre si. Os animais foram mantidos em jejum durante 24 h at o momento do experimento.Os resultados mostraram que a atratibilidade das raes formuladas com esses ingredientes no diferiram significativamente entre si e quando comparados com a rao comercial. Palavras-chaves: atratibilidade, rao, farinha de peixe, hidrolisado proteico de peixe, camaro

ABSTRACT This objective of this study is to evaluate the atractibility of produced diets with different substitution levels of fishmeal by fish proteic hidrolisate (FPH) and biofloc in the feeding process of Litopenaeus vannamei during in nursery phase. Diets were formulated with protein content of 42%. The main protein source in fish meal basal diet, which contributed 40% of the ingredients. The substitution of fishmeal by the tested ingredients was made in levels of 0(control),10,20,30 and 40%. A proportion of 1:1 of FPH and biofloc was stablished for all tested meals. Attraction tests were performed in triplicate for each type of feed. in order to compare all together. The animals were fasted for 24 h until the time of the experiment. Atratibility tests showed that the formulated meal with these ingredients did not differ significantly from each other and when compared with the commercial feed. Keywords: atractibility, ration, fishmeal, protein fish hidrolisate, shrimp

LISTA DE TABELAS

Pg Tabela 1.Composio proximal e aminocidos dos principais ingredientes (g kg-1 de matria seca) que compem a rao................................................................................31 Tabela 2. Formulao das raes com substituies parciais da farinha de peixe por farinha de biofloco e hidrolisado proteico de peixe (g kg-1 de matria seca).................32 Tabela 3. Mdia do nmero de escolhas dos camares para cada tratamento................33

LISTA DE FIGURAS

Pg Figura 1. Esquema da caixa utilizada para os testes de atratibilidade....................34

SUMRIO

RESUMO ABSTRACT LISTA DE TABELAS LISTA DE FIGURAS

1.INTRODUO............................................................................................11 2.REVISO DE LITERATURA........................................................................13 3.OBJETIVOS.....................................................................................................18 3.1Objetivo geral.....................................................................................18 3.2Objetivos especficos.........................................................................18 4. MATERIAIS E MTODOS............................................................................18 5. RESULTADOS...............................................................................................22 6. DISCUSSO...................................................................................................22 7. CONCLUSO.................................................................................................25 8.REFERNCIAS............................................................................................25 9.TABELAS.......................................................................................................32 10. FIGURAS......................................................................................................35 11. NORMAS DE PUBLICAO ....................................................................36

1. INTRODUO A aquicultura vem se tornando um ramo que cresce cada vez mais, com o declnio dos estoques pesqueiros. No entanto, os custos com a alimentao dos organismos cultivados, que base de farinha de peixe, so muito altos (NAYLOR et al. 2000; DEUTSCH et al. 2006; ABE et al. 2008). A farinha de peixe um dos principais ingredientes que compem a dieta de camares marinhos por apresentar elevao valor nutricional, contendo aminocidos essenciais, como a lisina e metionina; e cidos graxos (cido eicosapentanico (EPA) e o cido docosahexanico (DHA)), dos quais obtm energia necessria para o seu metabolismo e crescimento (NAYLOR et al. 2000), alm de servir como agente quimioatrativo. No entanto, seu elevado custo e possvel escassez devido presso sofrida nos estoques pesqueiros, impulsionam novas pesquisas na busca de ingredientes que tenham potencial para substituir seu valor nutricional mantendo a qualidade dos animais cultivados (SIMO et al. 2008; WATANABE & PONGMANEERA, 1991). Alimentos de origem vegetal possuem bom contedo proteico. No entanto, a deficincia de alguns cidos graxos (EPA e DHA) e alguns aminocidos essenciais resultam em baixa atratibilidade acarretando uma baixa ingesto, podendo ocasionar uma reduo no crescimento dos camares (NAYLOR et al. 2000 ; NUNES et al. 2006). Assim, ingredientes que sejam naturalmente atrativos aos camares so de grande importncia na produo de raes. Outra questo importante o reaproveitamento de resduos na alimentao. Esta prtica permite minimizar danos ao meio ambiente, ao passo que contribui com a disponibilidade de novos produtos que possam substituir, de forma eficaz, os j existentes (MARTONE et al. 2005). Um produto gerado pelo cultivo de camares,

assim como de outros organismos aquticos, em Sistema de Bioflocos (BFT) so os agregados microbianos ou bioflocos, que possuem um teor de protena bruta variando entre 24 e 40% (AVNIMELECH, 2007 & AVNIMELECH, 2009). O biofloco formado por diversos microrganismos que atuam na melhoria e manuteno da qualidade de gua. Entretanto, quando o seu volume se eleva muito nos tanques de cultivo, sua remoo parcial deve ser imediata para que no traga prejuzos ao sistema. O descarte deste produto normalmente feito no ambiente, e seu aproveitamento vem como uma forma de minimizar danos ambientais, alm de representar uma fonte a de alimento. Outro produto que pode ser utilizado na formulao de raes, em substituio farinha de peixe, o hidrolisado proteico de peixe. Produzido a partir de resduos de peixe da indstria pesqueira, ele derivado da quebra de cadeias longas de molculas proteicas atravs de enzimas proteolticas resultando em partes insolvel e solvel, sendo esta ltima rica em aminocidos livres (MARTONE et al. 2005). Estes so atrativos eficientes para organismos aquticos, atuando como importantes sinais qumicos utilizados na deteco do alimento e interao com outros indivduos (HATT et al. 1981). Sua presena promove acelerao no encontro do alimento e no seu consumo pelos camares, evitando dessa forma, as perdas nutricionais por lixiviao na gua, j que o seu consumo lento (NUNES, 2011). Os nveis de protena e gordura das raes imersas por 8h em gua salgada podem cair em mais de 13% reduzindo assim a ingesto dos principais nutrientes pelos camares (NUNES, 2011). Deste modo, ingredientes que, alm de uma boa composio nutricional, possam atuar como quimioatratantes aumentam as chances de ingesto destes nutrientes de forma integral. Alimentos produzidos a partir de farinhas de organismos marinhos so ricos em aminocidos, que funcionam como bons atrativos alimentares para camares, por

apresentarem baixo peso molecular e boa solubilidade na gua. Os crustceos so muito sensveis quimiorreceptivamente a compostos solveis na gua (CARR & DERBY, 1986; DERBY & SORENSEN, 2008; HARPAZ et al. 1987; JOHNSON & ATEMA, 1983; NUNES et al. 2006; SMITH et al. 2005; SURESH, 2011; ZIMMER-FAUST, 1989). Os animais aquticos necessitam de sentidos especiais para conseguirem localizar o alimento, por viverem em um ambiente turvo e cheio de pequenas substncias dissolvidas, capazes de serem localizadas por aguados sistemas de quimiorrecepo, presentes principalmente em peixes e crustceos (DERBY E SORENSEN, 2008). A quimiorrecepo um importante mecanismo que auxilia os animais na procura do alimento (HARPAZ ET AL, 1987), bem como na identificao de possveis predadores ou parceiras sexuais (DERBY E SORENSEN, 2008). Os crustceos decpodes possuem quimiorreceptores olfativos nas antennulas e receptores gustativos nos perepodos e peas bucais. Dessa forma, eles sentem o odor do alimento a uma certa distncia, com movimentos antenulares e controlam a ingesto ou rejeio do alimento pelos receptores gustativos (ACHE, 1982). Assim, o presente estudo objetiva avaliar a capacidade de atrao de raes produzidas com diferentes nveis de hidrolisado proteico de peixe (HPP) e biofloco em substituio da farinha de peixe na alimentao de juvenis do camaro marinho L. vannamei.

2. REVISO DE LITERATURA O camaro branco, Litopenaeus vannamei, originrio do Oceano Pacfico e foi introduzido em muitos pases por ser uma espcie que se adapta s mais variadas

condies de cultivo. Sendo uma espcie que tolera altas variaes de salinidade, possui boa resistncia doenas, necessita de menos farinha de peixe na alimentao do que algumas outras espcies, proporcionando um menor custo e apresentam maior ganho de peso e converso alimentar (LEBEL et al. 2010; BRIGGS et al. 2005). Sendo assim, a principal espcie cultivada no Brasil (ROCHA, 2013) e no mundo, representando 71,8 % da produo dos camares marinhos cultivados no ano de 2010 (FAO, 2012). A aquicultura vem se tornando um ramo que vem crescendo em relao ao pescado. No ano de 2004, das 106 milhes de toneladas de produtos obtidos da pesca e da aquicultura, 46% foi oriundo do cultivo aqucola. Os recursos pesqueiros esto sofrendo uma grande presso devido explorao indiscriminada, acabando por reduzir seus estoques. Tal fato observado desde a dcada de 80 (FAO, 2007). Em 2005 a produo total da pesca mundial chegou a quase 142 milhes de toneladas, aumentando em mais de 1 milho de toneladas em relao a 2004. Sendo que a maior parte dessa contribuio foi da aquicultura, devido ao declnio da pesca e aumento do cultivo (FAO, 2007). Em 2010 a produo aqucola mundial alcanou um outro recorde, de 60 milhes de toneladas, excluindo plantas aquticas, sendo que 15 % da produo foi de camares, onde o L.vannamei, que foi introduzido internacionalmente, com exito, representou 71,8 % da produo de todos os camares marinhos cultivados (FAO, 2012). A aquicultura vem crescendo a uma taxa mdia anual de 8,8 por cento desde a dcada de 80, tendo-se expandido em aproximadamente 12 vezes (FAO, 2012). Assim, a aquicultura torna-se um meio mais vivel para a produo de alimento aqutico, rico em protena, capaz de abastecer a demanda crescente por esse tipo de alimento (CAMARGO E POUEY, 2005). Na carcinicultura, assim como em outros cultivos de organismos aquticos, a farinha de peixe amplamente utilizada, pois, alm de ser um produto nutritivo,

tambm possui agentes atrativos que so importantes para se evitar o desperdcio da rao, permitindo que o alimento seja encontrado mais rapidamente (SIMO et al. 2008; WATANABE & PONGMANEERA, 1991). Porm, para a produo da farinha de peixe, necessrio que haja uma elevada quantidade de pescado disponvel e, como a obteno do pescado est cada vez mais difcil, (FAO, 2007), este produto torna-se economicamente invivel. Diante desta preocupao, alguns estudos que buscam o desenvolvimento de produtos que possam substituir a farinha de peixe e manter seu padro nutricional e atrativo, j esto sendo desenvolvidos. Harpaz et al. (1987) testou 28 diferentes produtos para testar a atratibilidade no camaro Macrbrachium rosenberguii, onde ele observou que as melhores respostas corresponderam a uma rao formulada com aos aminocidos taurina, glicina, arginina, betana, e trimetilamina. Barros e Valenti (1997) estudaram o poder de atrao de trs tipos de alimentos para larvas de M. rosembergui, sendo dois tipos de raes formuladas e o terceiro, consistiu em nuplios de Artemia, onde o ltimo provocou melhor resposta dos camares. Mendonza et al. (1997) conduziu um experimento de atratibilidade, com M. rosenberguii, usando putrescina, cadaverina (aminas biognicas) e dois feromnios sexuais obtidos de extratos de urina de carangueijo e glndula verde do camaro de gua doce, comparando-se com uma rao comercial e extratos de lula. Os resultados mostraram melhores respostas para a cadaverina. Smitt et al. (2005) estudou o efeito atrativos a base de lula, farinha de crustceos, farinha de krill, hidrolisado de peixe, hidrolisado de krill e Finnistim, para o camaro

Penaeus monodon. As raes contendo farinha de crustceo, farinha de krill, hidrolisado de krill e hidrolisado de peixe, mostraram maior preferncia pelo camaro. Nunes et al. (2006) estudou a atratibilidade de nove tipos de rao comercial para juvenis de L. vannamei, onde ele observou que as mais eficientes foram produzidas a partir de hidrolisado de lula, de protena solvel de peixe e de um complexo de aminocidos com moluscos bivalves enzimaticamnte digeridos, comparando com raes produzidas a partir de leo de peixe, farinha de peixe, farinha de sangue, farinha de carne e ossos e farinha de lula. Grey et al. (2009), estudou o efeito do hidrolisado proteico de salmo como atrativo para juvenis de L.vannamei, comparando com a rao comercial, e este provou ser to eficiente quanto a comercial. Suresh (2011) comparou diversos ingredientes para juvenis de L. stylirostris (camaro azul) com formulaes de raes de animais de origem marinha e terrestre, e um controle (comercial), constatando que houve uma maior preferncia por produtos de origem terrestre e aqutica, em comparao com a rao comercial. Neto et al. (2012) fez um estudo sobre a atratividade da spirulina em subsituies parciais a farinha de peixe no camaro L. vannamei, comparando com uma rao comercial, onde a primeira teve o melhor resultado. Alm de estudos com crustceos, podemos citar estudos feitos com outros organismos aquticos, que tambm possuem o mesmo mecanismo de identificao quimiorreceptiva de alimentos, como os peixes. Refstie et al. (2004) utilizou

hidrolisado proteico de peixe, como atrativos para o salmo do atlntico em comparao com uma rao comercial, em substituies de 10 a 15 %, onde a rao hidrolisada apresentou as melhores escolhas.

Os decpodes possuem certas especializaes cuticulares, olhos, estatocistos e proprioreceptores (RUPERT & BARNES, 1996). H inervaes quimiosensoriais em todo o corpo dos crustceos (DERBY & SORENSEN, 2008), sendo que a maior parte das clulas quimiorreceptoras esto localizadas no primeiro par de antenulas e nos perepodos, com as respectivas funes de olfato e gustao, sendo essas estruturas importantes para a percepo de alimento, predadores e parceiras sexuais (ACHE, 1972). importante ressaltar que a taxa metablica de um individuo est intimamente relacionada com a temperatura. Alteraes na temperatura vo afetar no seu metabolismo (TAYLOR & COLLIE, 2003). Temperaturas muito baixas prejudicam a quimiorrecepo dos camares e com isso, a alimentao (HARPAZ, 1987). Dentre as especializaes cuticulares desses animais esto as setas, proeminncias articuladas da cutcula, localizadas em toda a sua superfcie corporal desses animais, porm predominam nas quelas principais (WATILING, 1989) funcionando tanto como quimiorreceptores, como mecanorreceptores (MESCE, 1993). Eles dispem tambm de estatocistos, localizados na base das antenulas, do abdmen, urpodos e telson (RUPERT & BARNES, 1996). Estes so estruturas arredondadas em forma de taa que tem funo de orientao, possuindo em seu interior, os estatlitos, que so agregados de gros de areia que se deslocam de acordo com o movimento do animal, tocando os pelos sensoriais na parede do estatocisto, e assim, os estmulos so enviados ao crebro, indicando assim, a direo que o animal deve seguir (TAKUMIDA, 1996). Os olhos podem ser medianos, presentes principalmente na fase larval naupliana, o qual contm entre trs e quatro ocelos. Este olho naupliano, tem funo de orientao para se guiar em direo a uma fonte luminosa. No estgio adulto, o olho

naupliano se degenera, dando lugar a dois olhos compostos localizados sobre um pednculo, dando a eles um amplo campo visual. O comportamento alimentar que os crustceos adotam, na presena de um sinal qumico inicia-se com o movimento das antenulas para deteco do alimento, em seguida eles precisam se orientar e se locomover em direo a este, com o movimento dos perepodos, e finalmente o inicio a alimentao, com o movimento das quelas, levando o alimento em direo boca (HARPAZ et al. 1987). Os aminocidos so estimulantes eficientes para organismos aquticos, pois so importantes sinais qumicos utilizados na deteco do alimento e comunicao com outros indivduos (HATT et al. 1981), assim como outras molculas de baixo peso molecular, que incluem compostos de amnio quaternrio, nucleosdeos, nucleotdeos e cidos orgnicos (CARR & DERBY, 1986). Essas molculas geralmente esto presentes na superfcie dos tecidos das presas de crustceos carnvoros (DERBY & SORENSEN, 2008). Dentre alguns aminocidos atrativos segundo alguns autores, esto a taurina, glicina, isoleucina, arginina, betana, trimetilamina, glutamina, alanina, valina, prolina, serina, histidina, tirosina (HARPAZ et al. 1987, SMITH et al. 2005; NUNES et al. 2006), fenilalanina (CARR & DERBY, 1986), os aminocidos na forma de L (hydoxi-L-prolina e L-glutamato) e cloreto de amnio (JOHNSON & ATEMA, 1983).

3. OBJETIVOS 3.1 Objetivo Geral Avaliao da capacidade de atrao de raes formuladas com diferentes nveis de substituio da farinha de peixe por bioflocos e hidrolisado proteico de peixe (HPP).

3.2 Objetivos especficos Observar o trajeto dos camares em direo rao escolhida Estabelecer a mdia do nmero de escolhas de cada rao

4. MATERIAIS E MTODOS O presente trabalho foi dividido em trs fases que incluram: (1) preparao dos ingredientes (farinha de bioflocos e HPP) para substituio da farinha de peixe; (2) confeco das raes e (3) teste de atratibilidade com as raes. Fase 1: Preparao da farinha de bioflocos e do hidrolisado proteico de peixe (HPP) para confeco das raes O biofloco para a produo das raes foi obtido de uma fazenda de carcinicultura situada no municpio de Rio Formoso, litoral norte de Pernambuco. O biofloco foi coletado dos tanques de cultivo do camaro L. vannamei quando atingiram o volume de 20ml/L. Este material foi coletado com a ajuda de um sistema de decantao montado ao lado dos tanques. Em seguida, esse material passou por filtragens consecutivas em malhas de 250m e 50m de abertura e por um filtro de celulose de 10 m. O material filtrado foi seco em local ventilado livre de exposio solar. O trmino da secagem foi feito em estufa de circulao de ar forada a 50 o C por 48h. Em seguida, o biofloco foi triturado a uma granulometria de 250m e acondicionado em recipientes fechados a -20o C para posterior anlise.

Esquema de coleta do biofloco para o preparo das raes experimentais. Para a produo do HPP foram utilizados resduos de tilpia, obtidos de indstrias de beneficiamento de pescado. Aps o descongelamento esses resduos foram lavados com gua filtrada e triturados com gua destilada, na proporo de 1:1, em liquidificador seguido da adio de 0,5% enzima comercial (alcalase) para quebra da cadeia proteica em aminocidos. O produto foi levado a banho-maria, com temperatura de 45o C por trs horas sendo submetida a leve e constante agitao para ativao enzimtica. Em seguida o hidrolisado foi mantido a uma temperatura de 100C, durante 10 minutos, para a desativao enzimtica. Terminado este processo, o produto foi filtrado em peneira com malha de 1mm2 e a parte lquida, HPP, acondicionada em recipientes hermeticamente fechados e mantidos a -20o C para anlise. A metodologia para a produodo HPP foi adaptada de Bezerra (2000). As anlises dos ingredientes testados foram feitas em laboratrio comercial seguindo a metodologia da Association of Oficial Analytical Chemists - AOAC (2007) para protena bruta, cinzas, lipdios, umidade, e aminocidos (Tabela 1).

Fase 2: Preparo das raes

As raes foram elaboradas para os indivduos na fase de berrio de modo a apresentarem em sua composio 42% de protena bruta. A dieta controle (sem adio do combinado de floco microbiano e HPP) e as demais dietas a serem testadas contendo floco microbiano e HPP, foram formuladas com ingredientes selecionados. Aps os resultados da anlise nutricional do HPP e biofloco, as raes foram elaboradas substituindo a farinha de peixe em 0, 10, 20, 30 e 40% (Tabela 2). As raes foram elaboradas apresentando em sua composio a proporo de 1:1 de HPP e biofloco. A farinha de peixe presente na rao controle representou 40% dos ingredientes (Tabela 2). Os ingredientes foram misturados manualmente, em seguida a mistura foi espalhada em bandejas numa espessura de 3-5 mm e levada estufa por 9 horas a 50o C. Por fim, as raes foram peneiradas na granulometria de 1,40mm, e secas novamente em estufa por mais 30 minutos. As raes foram armazenadas e conservadas a -18o C durante todo o perodo de alimentao. A sua composio nutricional foi avaliada em laboratrio comercial.

Fase 3. Testes de atratibilidade das raes O experimento seguiu a metodologia recomendada por Suresh et al. 2011. Foram utilizados juvenis de L. vannamei, obtidos de uma larvicultura comercial, previamente aclimatados s condies experimentais. O peso mdio dos animais para este experimento foi de 0,6 g. Para o teste, foram utilizadas caixas retangulares de polietileno com volume til de 50 litros que contou com uma divisria em uma das extremidades no sentido do comprimento, conferindo duas cmaras para a deposio das raes testadas. Na outra extremidade, no sentido da largura, foi instalada outra divisria removvel (Figura 1), separando os animais do estmulo (alimento). Este

ambiente foi utilizado como rea de adaptao dos animais que se deu por um perodo de 30 minutos. As caixas foram recobertas com uma proteo escura para evitar estresse ao animal. Os parmetros de qualidade de gua foram aferidos e a gua previamente filtrada para a execuo deste teste. Para cada teste foram estocados cinco animais em cada caixa, na rea de adaptao, e aps 30 minutos duas (02) raes diferentes foram depositadas nas cmaras separadamente. Aps 10 minutos da deposio das raes, os animais eram liberados, com a retirada da divisria que o separava do alimento, e seu trajeto em direo a rao escolhida era observado. A cada novo teste com as raes, os animais eram substitudos e a gua completamente trocada para evitar resduos de outras raes. Este teste foi realizado em triplicata e alternando as diferentes raes de modo a comparar todas entre si. Os camares permaneceram em jejum por 24 h at o momento do teste para acelerar o processo de escolha do alimento. O nmero de escolhas para cada rao foi contabilizado e submetido anlise de varincia (ANOVA), levando em considerao as premissas necessrias. Para isso, foi utilizado o programa Statistica 7.0.

5. RESULTADOS Os parmetros de qualidade de gua apresentaram os valores de salinidade, temperatura, pH e oxignio dissolvido de 25g/L; 25C; 7,3 e 5,49 mg/L respectivamente. A amnia apresentou concentrao de 0,25ppm e nitrito de 1,75ppm. As raes testadas apresentaram aceitao equivalente, no havendo diferena estatstica entre os tratamentos quando comparados entre si e com a rao comercial. A mdia de escolhas para cada tratamento est representada na tabela 3.

Os aminocidos presentes nas farinhas de HPP e de bioflocos esto representados na tabela 1. Sendo que o HPP foi o que apresentou valores mais prximos de aminocidos essenciais farinha de peixe.

6. DISCUSSO Os parmetros de qualidade de gua estiveram dentro dos nveis recomendados para juvenis de L. vannamei por Ponce- Palafox et al. (1997) para os valores de salinidade e temperatura. Os valores de pH, oxignio dissolvido, amnia e nitrito estiveram de acordo com o indicado por Boyd (1990) para o cultivo de camares. A escolha inicial do alimento pelo animal depende de sua atratibilidade e este fator implica na diminuio no tempo de alimentao evitando assim, o desperdcio de nutrientes por lixiviao (NUNES, 2011). Dessa forma, a realizao deste teste de atratibilidade de grande importncia para a avaliao da viabilidade das raes experimentais produzidas para substituir a rao comercial. As raes elaboradas com biofloco e hidrolisado proteico de peixe, apresentaram teor de protena bruta de 42%, que est de acordo com os nveis indicados para juvenis deste gnero, os quais necessitam de 40% de protena (NRC, 2011). Os ingredientes testados em conjunto indicaram um bom potencial nutritivo para a substituio da farinha de peixe nos nveis testados, tendo o biofloco apresentado teor de protena de 24%, que corrobora com resultados encontrados por Avnimelech, (2009) que indicou teores proticos para o biofloco variando entre 24 e 40,6%. Entretanto, segundo o mesmo autor, este produto parece no possuir propriedades atrativas suficientes. Os aminocidos presentes na farinha de biofloco estiveram em quantidades bem mais baixas que a farinha de peixe (tabela 2).

O HPP, apresenta elevados nveis de protena, como j constatado por Zavareze et al (2009) que encontrou nveis de protena de 87% para hidrolisado de Prionotus punctatus. Alm disso, possui boa palatabilidade e digestibilidade (GOLDHOR & REGENSTEIN, 1988), sendo ainda, um bom atrativo para raes de acordo com Furlan & Oetterer (2002). Aminocidos so importantes quimioatrativos. O HPP apresentou teores de aminocidos essenciais mais prximos aos da farinha de peixe, que foram a arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina e valina. Segundo Carr & Derby (1986) a capacidade de atrao da maioria das substncias melhor quando elas atuam em conjunto, do que isoladas. Substncias de baixo peso molecular, como os aminocidos, compostos de amnio quaternrio, nucleosdeos e nucleotdeos, e cidos orgnicos so potentes estimulantes. Esses mesmos autores acharam atividade atrativa para a fenilalanina, mesmo quando testada individualmente, no camaro Palaemonetes pugio , estando presente nas raes formuladas nesse estudo na concentrao de 22,5 (g kg-1), comparado com 27,6 (g kg-1) presente na farinha de peixe. Nunes et al. (2006), utilizando juvenis de L. vannamei em um teste de atratibilidade, avaliando nove tipos de atrativos, verificou que o mais eficiente, foi um composto formado pela juno dos aminocidos alanina, valina, glicina, prolina, serina, histidina, glutamina, tirosina e betana. Dentre os quais, esto presentes nas raes formuladas desse estudo a histidina e a valina. A valina esteve presente nas concentraes de 32 (g kg-1) na farinha de peixe e 26,7 (g kg-1) no HPP e a histidina com 20,6 (g kg-1) na farinha de peixe e 11,8 (g kg-1) no HPP. Harpaz et al. (1987), utilizando 28 diferentes produtos para testar a atratibilidade no camaro macrbrachium rosenberguii, observou que as melhores respostas

corresponderam aos aminocidos taurina, glicina, arginina, betana, isoleucina, e trimetilamina. Dentre esses componentes, a isoleucina e a arginina estiveram presentes no contedo da rao. Os teores de isoleucina na rao comercial e HPP foram de 27,8 (g kg-1) e 20,9 (g kg-1), respectivamente e os teores de arginina foram de 48, 7 (g kg-1) e de 47 (g kg-1), nesta mesma ordem. Segundo Smith et al. (2005), os aminocidos mais eficientes em termos de atratibilidade so a arginina, taurina, glicina, glutamina, alanina e betana. Onde novamente, a arginina esteve presente. Os resultados do teste de atratibilidade das raes no apresentaram diferenas estatsticas entre os tratamentos, mesmo quando comparados com a rao comercial. Da mesma forma, Grey et al (2009) utilizando hidrolisado de salmo como atrativo para juvenis de L.vannamei, ao substituir 50g/kg da rao total, constatou que no houve nenhuma diferena significativa entre a rao contendo o comercial. Suresh et al (2011), observou que o hidrolisado de peixe possui propriedades atrativas numa concentrao de at 3% de substituio da rao comercial, no camaro Litopenaeus stylirostris. Concentraes de HPP em nveis muito altos acarreta em um teor excessivo de lipdeos, o que dificulta a sua dissoluo na gua, e desta forma perde suas propriedades atrativas (ZIMMER-FAUST, 1989). No entanto, no presente estudo, foram estudadas substituies parciais pela farinha de peixe em nveis de 2 % at 8 % da rao total e mesmo assim, no houveram diferenas significativas entre a rao comercial e as raes formuladas, para juvenis de L. vannamei. hidrolisado e a rao

7. CONCLUSO

As raes experimentais, com substituio da farinha de peixe por biofloco e hidrolisado proteico de peixe, so to efetivas quanto a rao comercial em relao atratibilidade dentro dos nveis testados. Desta forma, a combinao dos ingredientes testados pode ser considerada uma alternativa vivel ao uso de farinha de peixe na formulao de dietas para L. vannamei.

8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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9.TABELAS

Tabela 1. Composio proximal e aminocidos dos principais ingredientes (g kg-1 de matria seca) que compem a rao. Farinha de peixe Aminocidos essenciais Arginina Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Treonina Valina Anlise proximal Protena bruta Extrato etreo Cinzas Umidade 693,2 92,4 229,2 71,1 584,8 374,7 26,7 813,2 247,1 4 366 86,3 450 17,4 63 117,8 148 40 53 110 117 12 4 120 47 20,6 27,8 48 51 27,5 27,6 29,8 32 48,7 11,8 20,9 35,7 41,2 17,1 22,5 24,6 26,7 10,4 3,3 8,2 15,6 8,2 2,7 10,7 10 13,8 32,3 11,7 19,9 34,2 28,63 6,1 21,8 17,3 24 6,4 3 5,1 8,9 3,6 2,1 6,3 3,7 5,9 8,6 3,9 5,1 9,2 5,8 1,9 5,5 4,6 6,9 Farinha de biofloco Farelo de soja Farelo de trigo Farinha de trigo

HPP

Tabela 2. Formulao das raes com substituies parciais da farinha de peixe por farinha de biofloco e hidrolisado proteico de peixe (g kg-1 de matria seca). Ingredientes Farinha de peixe Farinha de biofloco Hidrolisado Farelo de soja Farelo de trigo Farinha de trigo Levedura Gelatina leo de peixe Mistura de vitaminas e mineraisb Bentonita Anlise proximal Protena bruta Extrato etreo Cinzas Umidade ENNc Energia Bruta (Kj/g)
a

T0 400 0 0 130 150 230 25 10 30 10 15

T10 360 20 20 130 150 230 25 20 20 10 15

T20 320 40 40 150 150 230 30 20 10 10 0

T30 280 60 60 190 150 190 30 15 15 10 0

T40 240 80 80 225 150 140 40 15 20 10 0

Comerciala

436 83 101,6 173,7 205,7 201,4

437,4 83,3 98,8 158,4 222,1 203,5

427,7 88,7 90,7 168,5 234,4 199,8

425,9 91,9 98,5 185,4 198,3 199,9

429,1 101,9 104,2 170,5 194,3 202,2

400 80 130 130 -

Nveis mnimos de protena e extrato etreo e mximo de cinzas e umidade na rao estabelecidos pelo fabricante Premix min. e vit. (mineral and vitamin mix) (Supremais, Campinas-SP): Composio por quilo de produto (composition per kg the product): Vit. A = 1.200.000 UI; vit. D3 = 200.000 UI; vit. E = 12.000 mg;vit. K3 = 2400 mg; vit. B1 = 4800 mg; vit. B2 = 4800 mg; vit. B6 = 4000 mg; vit. B12 = 4800 mg; c. flico (folic acid) = 1200 mg; pantotenato de clcio (calcium pantothenate) = 12.000 mg; vit. C = 48.000 mg; biotina (biotin) = 48 mg; colina (choline) = 65.000 mg; cido nicotnico (nicotinic acid) = 24.000 mg; Fe = 10.000 g; Cu = 600 mg; Mn = 4000 mg; Zn = 6000 mg; I = 20 mg; Co = 2 mg e Se = 20 mg. c ENN (carboidratos de mais fcil digesto) expresso por ENN= 100-(PB+EE+CZ+UMID)
b

Tabela 3. Mdia e erro padro do nmero de escolhas dos camares para cada rao.

Tratamento

Mdia Erro padro

0% 10% 20% 30% 40% Comercial

32,00 3,72 32,00 3,72 30,67 2,47 36,00 3,46 34,67 1,51 26,67 4,02

10. FIGURAS

Figura 1. Esquema da caixa utilizada para os testes de atratibilidade. A- Cmara de aclimatao para os camares B- Cmaras para deposio das raes

NORMAS

FORMATO TRADICIONAL a) Papel tamanho A4, digitado em espao 1,5 linha, Fonte Arial, tamanho 12, apenas no anverso; b) Normas para as citaes e referncias bibliogrficas de acordo com a Associao Brasileira de Normas Tcnicas - ABNT mais recente. c) Texto escrito em portugus, apresentando obrigatoriamente: Capa, folha de rosto, pgina com a relao nominal e local para a assinatura dos membros da Comisso de Avaliao, Resumo, Abstract, Sumrio, listas de tabelas e figuras (se houver) Introduo, Reviso bibliogrfica, Objetivo geral, objetivos especficos, Material e mtodos, Resultados, Discusso, Concluso, Referncias Bibliogrficas e anexos (se houver). Os itens dedicatria e agradecimentos so optativos. d) Ficha catalogrfica elaborada pela Biblioteca Central de UFRPE.

FORMATO DE ARTIGO CIENTFICO a) Papel tamanho A4, digitado em espao 1,5 linha, Fonte Arial, tamanho 12, apenas no anverso; b) Escrever o artigo de acordo com as normas da revista para a qual enviar o artigo e anexar as normas da revista. Em caso de revista internacional, com texto escrito em outro idioma, o aluno dever apresentar, tambm, uma verso completa do artigo em portugus. c) Texto apresentando obrigatoriamente Capa, folha de rosto, pgina com a relao nominal e local para a assinatura dos membros da Comisso de Avaliao, Pgina de apresentao, listas de tabelas e figuras (se houver), Introduo, Reviso bibliogrfica, Objetivo geral, objetivos especficos, manuscrito do artigo completo, Concluso, normas da revista em que se deseja publicar o artigo, Referncias Bibliogrficas e anexos (se houver). Os itens dedicatria e agradecimentos so optativos.