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Los principales inconvenientes del proceso de inmovilizacin son (4): 1. La alteracin de la conformacin de la enzima respecto de su estado nativo.

Reactores

Son los mtodos de inmovilizacin ms utilizados y de los que se dispone de una mayor informacin. La eleccin del soporte y del tipo de enlace resultan determinantes en el comportamiento posterior del biocatalizador. Se debe procurar que la inmovilizacin incremente la afinidad por el sustrato, disminuya la inhibicin, amplie el intervalo de pH ptimo y reduzca las posibles contamina-ciones microbianas. Adems el soporte debe tener resistencia mecnica adecuada a las condiciones de operacin del reactor y ser fcilmente separable del medio lquido para que pueda ser reutilizado. Se han utilizado una gran variedad de materiales como soportes para la inmovilizacin de numerosas enzimas. Estos materiales

difieren en tamao, densidad, porosidad y forma, aunque generalmente nos los encontramos en forma de cilindro, hojas, fibras y ms corrientemente en forma de esferas. Los soportes pueden clasificarse en dos grandes grupos:

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MIGUEL ARROYO

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Actualmente el mtodo ms novedoso de cross-linking consiste en la cristalizacin de enzimas y su

heterogneo en el cual todos los componentes que intervienen en el proceso cataltico (pH, sustratos, productos, inhibidores, cofactores, activadores, etc.) se encuentran en interfase: en el medio de reaccin y en la fase constituida por el soporte con la enzima. Como consecuencia, la actividad enzimtica se ve

afectada por efectos de tipo difusional, estrico y del microentorno.

2) Efectos electrostticos entre el sustrato y el soporte, de tal manera que, si tienen la misma carga

4) Efectos en el microentorno (15): La enzima inmovilizada se encuentra en un entorno diferente al habitual, especialmente cuando el soporte tiene grupos cargados elctricamente. El efecto observado suele ser un desplazamiento en el valor del pH ptimo de la catlisis enzimtica y, muchas veces, un ensanchamiento en el intervalo de pH en el cual la enzima puede actuar. Por ejemplo, una enzima unida a un soporte cargado negativamente (v.g. CM-sephadex) tendr en su microentorno una concentracin mayor de hidrogeniones que en el medio de reaccin. Como resultado, la enzima inmovilizada ser ms activa a un pH ms alcalino. La enzima sera ms activa a pH ms cidos si estuviera unida a un soporte

cargado positivamente (v.g. DEAE-sephadex).

Fuerte

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1. Condiciones de reaccin

2. Rendimiento en peso seco

puede disear un biosensor para cualquier tipo de compuesto

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Ars Pharmaceutica, 39:2; ?-??, 1998

La presencia de lactosa en la leche (4,3-4,5%) y en algunos derivados lcteos es perjudicial para aquellas personas que carecen de lactasa intestinal, y su ingesta provoca diarreas y diversos trastornos intestinales. La eliminacin de este azcar se puede conseguir tratando la leche con -galactosidasa de levaduras inmovilizada en fibras de acetato de celulosa (30) y es de gran importancia en la preparacin de productos lcteos dietticos. Su eliminacin tambin es interesante en la preparacin de helados, ya que la lactosa tiende a cristalizar a temperaturas bajas.

Las lipasas inmovilizadas de diversos microorganismos se han empleado en la interesterificacin de aceites y grasas. Este mtodo permite transformar el aceite de palma en un sucedaneo de la manteca de coco, componente principal del chocolate (34). El chocolate contiene aproximadamente un 30% de manteca de coco, por lo que este proceso es potencialmente muy interesante en la industria. Mediante el empleo de la lipasa inmovilizada adecuada, se puede sustituir el cido palmtico de las posiciones 1 y 3 del aceite de palma por cido esterico (Figura 8).

VII. 5. Aplicaciones en la Industria Qumica

Adv. Enzymol. 57: 179-249.

(14)

20: 203-257.

Germain, P.; Crichton, R. (1988) Characterization of a chemically modified -amilase immobilized on porous silica. J.