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OBJETIVOS:
Distinguir los microorganismos relacionados con los sndromes clnico infeccioso
ms frecuente.
Relacionar en la coloracin de Gram , la presencia de abundantes clulas
epiteliales con una mala tcnica de obtencin de la muestra..
Determinar mediante la coloracin de Gram de un frotis directo de secrecin
farngea u otro si la muestra es significativa.
Mencionar los mtodos de laboratorio bacteriolgicos ms comunes que se utilizan
en el diagnstico de las patologas infecciosas bacterianas.
Determinar si nicamente debe realizarse cultivo para diagnosticar faringitis
estreptoccica
Reconocer la flora normal delas vas respiratorias superiores as como la flora
patgena.
Reconocer la coloracin de Gram directa como el mtodo diagnstico para ciertos
procesos denominados Urgentes
1.2 INTRODUCCIN:
Entre las infecciones de las vas respiratorias superiores se incluyen muchos procesos
inflamatorios agudos que afectan principalmente: la nariz, senos para-nasales, el odo
medio, los tejidos laringoepiglticos y lo que es ms importante y comn, las amgdalas
palatinas o criptas amigdalinas.
Los trastornos agudos de las vas respiratorias son la causa principal de visita al mdico.
Los sntomas que ms consultan son el llamado dolor de garganta y el resfriado comn;
de estas infecciones surgen muchas confusiones, debido a que en su mayora son
transitorias, relativamente benignas, probablemente porque:
La mayora de las infecciones de las vas respiratorias son ocasionadas por virus,
por lo tanto la frecuente prescripcin de antibiticos contra ellos carece de
fundamento.
1.3.1 CONSIDERACIONES:
Los microorganismos que causan enfermedad en el tracto respiratorio superior, la
nasofaringe y faringe deben entrar en contacto con el epitelio de la mucosa, adherirse y
multiplicarse.
Aunque se pueden aislar gran nmero de especies de bacterias y hongos a partir de
muestras tomadas del tracto respiratorio superior, son muy pocos los microorganismos
que provocan una verdadera patologa en esta rea.
Por lo tanto, es necesario conocer las bacterias que pueden ser aisladas como parte de la
flora de huspedes sanos y adems otras especies que en ciertas circunstancias pueden
causar enfermedad.
Los microorganismos aislados de sitios normalmente estriles del tracto respiratorio, por
mtodos que evitan la contaminacin con la flora normal deben ser identificados en forma
definitiva e informada inmediatamente.
Ciertos microorganismos se consideran agentes etiolgicos de enfermedad si se
encuentran en cualquier nmero en el tracto respiratorio, ya que se expresan en cualquier
husped.
1.3.2: FLORA NORMAL DE LA NARIZ:
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcos aureus ( poco frecuente )
Streptococcus pneumoniae
(irregular,ocasional, transitorio)
Neisseria meningitidis (Poco frecuente)
Escherichia coli (ocasional o transitorio)
Haemophillus influenzae
Corinebacterias
Micobacterias (ocasional, transitorio)
Staphylococcus epdermidis
Stphylococcus aurus
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarius
Streptococcus pneumoniae (poco frecuente)
Neisseriae meningitidis
Otras Neisserias
Veillonellae
Escherichia coli- Klebsiella u otros bacilos Gram negativos
Pseudomona aeruginosa
Bacteroides
Espiroquetas
Lactobacilos
Corinebacterias
Actinomicetos
Micoplasma
1.3.5
1.3.6
1.4
Staphylococcus epidermidis
Stphylococcus aurus
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarius
Streptococcus mutans
Streptococcus pneumoniae
Neissriasp.
Neisseriae meningitidis
Veillonella
Escherichia coli
Haemophillus influenzae
Bateroides
Espiroquetas
Lactobacilos
Corinebacterias
Actinomicetos
Micoplasma
FLORANORMAL DE OIDO MEDIO Y SENOS:
Habitualmente estriles
FLORA NORMAL OIDO EXTERNO:
Flora cutnea
Pseudomona aeruginosa
Stpahylococcus epidermidis
Staphylococcusaureus
Branhamella catharralis
PATOGENOS DEFINIDOS DEL TRACTO RESPIRATORIO
Corynebacterium diphtheriae
Neisseria gonorrhoeae
Mycobacterium tuberculosis
Mycoplasma pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Bordetella pertussis
Legionellasp
Pneumocystis carinii
Nocardia sp
Histoplasma capsulatum
Coccidioides inmitis
Criptococcus neoformans
Blastomyces dermatitidis
Virus
Francisella tularensis
Bacillus anthracis
Yersinia pestis
Pseudomonas pseudomallei
Coxiella burnetti
Chlamydia psittaci
Brucella sp
Salmonella sp
Pasteurella multocida
Parsitos
Klebsiella rhinoescleromatis
1.5
1.5.1
EPIGLOTITIS BACTERIANA:
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estructuras resulta en una obstruccin de las vas areas superiores que pone en
peligro la vida del paciente, por lo general, nios. Al igual que el crup viral y la
traquetis bacteriana, la epiglotitis se presenta con estridor repentino precedido por
fiebre, tiraje inspiratorio y una caracterstica salivacin y babeo. El diagnstico es
fundamentalmente clnico, aunque radiografas de cuello lateral pueden ayudar a
visualizar la obstruccin de la trquea. El principal causante es una bacteria, el
Haemophilus influenzae, aunque otros organismos pueden verse implicados en
algunos casos, como lo son el Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis y
los Estafilococos. En la mayora de los casos, la intubacin endotraqueal debe ser
realizada de inmediato por un profesional calificado de la salud.
1.5.2
DIFTERIA
ANGINA DE LUDWIG
7
Los sntomas del absceso periamigdalino abarcan:
Escalofros
Dificultad y dolor al abrir la boca
Dificultad para deglutir
Babeo o incapacidad para tragar saliva
Hinchazn facial
Fiebre
Dolor de cabeza
Voz velada
Dolor de garganta (puede ser intenso y generalmente es en un lado)
Ganglios de la mandbula y garganta sensibles
Signos y exmenes
Un examen de la garganta con frecuencia muestra hinchazn en un lado y en el paladar.
La vula en la parte posterior de la garganta puede estar distanciada de la hinchazn. El
cuello y la garganta pueden estar enrojecidos e hinchados en uno o en ambos lados.
Se pueden realizar los siguientes exmenes:
Tambin puede encontrrsela como, Enfermedad o Infeccin de Vincent o de PlautVincent, Gingivostomastitis ulceronecrtica, Gingivitis ulcerosa necrosante aguda
(ANUG,acutenecrotizing gingivitis) , o c o m o b o c a d e t r i n c h e r a . R e c i b i e s t a
l t i m a d e n o m i n a c i n p o r encontrrsela comnmente, en los soldados de la Primer
guerra mundial. S e p r e s e n t a c o m o u n a u l c e r a c i n p s e u d o m e m b r a n o s a
q u e a f e c t a a l m a r g e n d e l a s e n c a s , l a mucosa oral, las amgdalas, y pueden
llegar a provocar absceso periamigdalino.
Etiologa:
En estas lesiones se aislaron dos bacterias de asociacin simbitica, Gram (-)
que desarrollan lentamente en cultivo, una es la especie Fusobacterium
fusiforme (anaerobia), y la otra es Borrelia Vicenti (microaerfila). Debido a que el
Fusobacterium tiene forma de huso cone x t r e m o s a f i l a d o s , y l a B o r r e l i a e s u n a
espiroqueta de morfologa helicoidal, con espirasirregulares (de
mayor tamao que los treponemas) reciben el nombre de asociacin
f u s o - espirilar. Habitan en cavidad oral, colon y en algunos casos, tracto genital
femenino.
Epidemiologa:
Se observa en individuos con mala higiene bucal, stress, que absorbieron metales
pesados (especialmente bismuto y mercurio), malnutricin severa,
discrasias
sanguneas, e n f e r m e d a d e s
debilitantes
como
l e u c e m i a s , t r a s t o r n o s i n m u n i t a r i o s p r i n c i p a l m e n t e c o n deficiencia
en la funcin fagoctica de los neutrfilos, asociada usualmente al alcohol, y al
hbitointenso de tabaco. Tambin puede aparecer como una complicacin de
un traumatismo o unainfeccin complicada por herpes simplex. Ya no se considera un
trastorno contagioso.
Manifestaciones clnicas:
Es una enfermedad de comienzo generalmente abrupto y puede ir
acompaado de malestar y fiebre ligera. Los sntomas principales son
e n c a s a g u d a m e n t e dolorosas y hemorrgicas, salivacin, aliento ftido
(halitosis), lesiones ulcerosas con exudado purulento. Las ulceraciones tienen
un aspecto caracterstico como cortada con sacabocados,sangran con solo
leve presin o irritacin y abundan sobre todo en las encas marginales, y las
papilas interdentales. Son dolorosos el acto de deglutir (odinofagia) y el de hablar. Las
lesiones en mucosas son ms raras, pero pueden aparecer en formas de ulceraciones
ms difusas, cubiertas c o n u n a p s e u d o m e m b r a n a q u e s e d e s p r e n d e c o n
facilidad. Ms rara vez hay lesiones en las a m g d a l a s , f a r i n g e ,
los bronquios, el recto o la vagina. Con frecuencia hay
f i e b r e y linfoadenopatia regional.
Diagnstico:
9
Se logra rpidamente por la observacin de un extendido de material tomado de
laslesiones ulcerosas teido con Giemsa o Gram. En el preparado de observan bacterias
espiraladasy bacilos finos de extremos afilados. Este es uno de los muy pocos
casos donde se puede hacer diagnstico por observacin directa de un
preparado teido con Gram, lo que justifica realizar microscopia cuando se
sospecha angina de Vincent. El cultivo para anaerobios no resulta til. C u a n d o
afecta a la faringe se plantea el diagnstico diferencial con
d i f t e r i a , Faringitis estreptoccica o e s t a f i l o c c i c a , o e s t o m a t i t i s h e r p t i c a .
Las reas como cortadas en saca bocados, con bordes mellados y
m e m b r a n a s g r i s c e a s e n l a s p a p i l a s i n t e r d e n t a l e s y e n l o s bordes, son
hallazgos casi patognomnicos.
Tratamiento:
Con el desbridamiento y el lavado a base de agua oxigenada diluida
( 1 : 3 ) s e obtiene un alivio en 24 horas, adems puede utilizarse antibiticos en trastornos
extremadamenteagudos, como la asociacin amoxicilina-cido clavulnico o clindamicina
por va oral. Hay que tener presente que el trastorno puede reaparecer.
Faringitis
Diagnstico
El diagnstico de faringitis es clnico, cuando se sospeche de faringitis de etiologa
bacteriana mediante la clnica y la epidemiologa, esta debe ser confirmada mediante un
cultivo o la realizacin de una prueba rpida (RADT rapid antigen detection test), estos 2
estudios se deben correlacionar con la clnica, ya que ambos indican la presencia de
Streptococcus pyogenes en faringe, pero existe un 15 a 20% de los pacientes que pueden
ser portadores asintomticos. No existen elementos de la historia y /o examen fsico
capaces, por s solos, de hacer un diagnstico certero de faringitis bacteriana.
Ninguno de los mtodos diagnsticos es capaz de diferenciar entre una faringitis causada
por S. pyogenes y el caso de un portador crnico de S. pyogenes con un cuadro de
faringitis viral intercurrente.
Ni la leucocitosis observada en la biometra hemtica ni la determinacin de
antiestreptolisinas son pruebas tiles para diferenciar entre una faringitis viral y una
bacteriana.
1.6
MATERIALES
10
1.6
Prueba de la coagulasa
Prueba de la Catalasa
Lminas porta-objetos
Lminas cubre-objetos
Batera para la coloracin de Gram
PROCEDIMIENTO
1.7
1.7.1
Los hisopos de secreciones de faringe han sido inoculados tradicionalmente en agar con
5% de sangre de oveja, sin embargo, la sangre de otros animales tambin servir para
proporcionar los nutrientes requeridos para la mayora de patgenos usuales ,
principalmente S. Pyogenes
El aislamiento del S. Pyogenes en placas de agar sangre, requiere una incubacin de 1824 horas a una Temperatura de 37 C, despus delos cuales se observar las
caractersticas de las colonias y sus propiedades hemolticas
1.7.2 DIFERENCIACION DE ESTREPTOCOS (ver cuadro siguiente, prxima hoja).
POSITIVA
CULTIVO
AGAR SANGRE
CONTROL DE CALIDAD
DE LA MUESTRA
11
NO HEMOLISIS
HEMOLISIS
STREPTOCOCOS
NO PATGENOS
BETA
STREPTOCOCO
BETA HEMOLTICO
SENSIBILIDAD A LA
BACITRACINA (+)
ALFA
OTROS
STREPTOCOC
SBHA DEL
GRUPO A
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Las secreciones del tracto respiratorio inferior estarn contaminadas con las secreciones
del tracto respiratorio superior, especialmente saliva, a menos que la muestra se tome
mediante alguna tcnica invasiva. Por esto esputo se considera una muestra clnicamente
menos apropiada para el cultivo.
La buena calidad de las muestras de esputo depende de una cuidadosa instruccin del
paciente y dela presencia de un tcnico que supervise todas las fases del proceso de su
recoleccin.
Los pacientes deben ser instruidos para que proporcionen un espcimen luego de una
expectoracin profunda.
El material debe ser recogido en un recipiente estril, tratando de reducir al mnimo la
contaminacin con saliva.
Los pacientes que son incapaces de producir un esputo pueden ser asistido por un
tcnico en terapia respiratoria que mediante drenaje postural y percusin torcica tratar
de estimular la produccin de un esputo aceptable.
MATERIALES
2.3.2
2.3.3
13
Una de las aplicaciones ms importante de esta coloracin es la evaluacin dela calidad
del esputo expectorado que se recibe para un cultivo bacteriolgico
Una muestra aceptable tendr menos de10 clulas epiteliales escamosas por campo
microscpico (aumento de 100x)
El nmero de PMN puede no ser importante ya que muchos pacientes sufren una
neutropenia severa. Por otra parte, la presencia de 25% o ms de PMN por campo junto
con unas pocas clulas epiteliales escamosas aseguran la excelente calidad dela muestra
RESULTADO:
PMN : abundantes
Diplococos Gram positivos Lanceolados
INTERPRETACIN: Sospechoso DE Neumona por S.pneumoniae. Confirmar con cultivo
2.3.4
CULTIVOS
Hemocultivos
Cultivo de esputo
La mayora de los agentes etiolgicos de infecciones comunes del tracto respiratorio
inferior pueden ser aislados en los medios empleados usualmente: agar sangre-agar
chocolate Agar de MacConkey
En caso de sospecha de neumona por Micoplasma pneumoniae, recuerde que esta
bacteria carece de pared celular y por lo tanto no sirve la coloracin de Gram y que el
cultivo es tedioso, largo y que lo mejor es hacer el diagnstico mediante pruebas
serolgicas.
Los virus y las chlamydias requieren tcnicas de cultivos celulares
CULTIVO
CONTROL DE CALIDAD
DIPLOCOCOS GRAM (+) PMN
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO DE
NEUMONA POR S. PNEUMONIAE
AGAR SANGRE
(HEMOLISIS ALFA)
AGAR
MACCONCKEY
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SENSIBILIDAD A LA
OPTOQUINA (+)
DIAGNOSTICO
CONFIRMADO DE
S. PNEUMONIAE
SECRECION DE TRACTO
RESPIRATORIO SUPERIORINFERIOR
CULTIVO
AGAR SANGRE
CONTROL DE CALIDAD
COCOS GRAM POSITIVO -PMN
TEST DE CATALASA
POSITIVA
GENERO STPAHYLOCOCCUS
NEGATIVA
GENERO
ESTREPTOCOCOS
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TEST DE COAGULASA
NEGATIVA
POSITIVA
TEST DE LA
NOVOBIOCINA
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
SENSIBLE
OTROS
STAPHYLOCOCCUS
2.5 DIAGNOSTICO
INFERIORES
2.5.1
DE
TUBERCULOSIS
LAS
INFECCIONES
CRNICAS
RESISTENTE
STAPHYLOCOCCUS
SAPROPHITICUS
RESPIRATORIAS
16
2.5.2
INTRODUCCION
2.5.4
2.6.5
Micobacterias
17
Estos microorganismos se tien fcilmente con la fushina fenicada pero son muy
resistente a la decoloracin, an con decolorantes fuertes como el alcohol cido (cido
clorhdrico concentrado al 3% en alcohol de 95%)
2.6.6
2.6.7
PROCEDIMIENTO
Fijar los frotis por el calor
Cubrir los portaobjeto con fuscina fenicada
Calentar la preparacin cuidadosamente en un mechero Bunsen, sin que hierva la
muestra, durante 5 minutos. Agregar ms fuscina conforme sta se evapora; la
preparacin no deber quedar seca en ningn momento.
Lavar con abundante agua el exceso de colorante
Decolorar con la solucin cido-alcohol hasta que la muestra adopte un color rosa
claro ( unos 30 segundos)
Lavar con agua para detener la decoloracin
Teir con azul de metileno 1 minuto
Lavar con agua el exceso de colorante
Secar la preparacin
Examinar al microcopio con objetivo de 100x
INFORMACION DEL NUMERO DE BACILOS ACIDO ALCOHOL RESISTENTES
(BAAR) OBSERVADOS EN FROTIS TEIDOS.
NUMERO DE BAAR OBSERVADOS
NINGUNO
2.6.8
INFORME
NEGATIVO
1-2/300 CAMPOS
NUEVA MUESTRA
1-9/100 CAMPOS
(+)
1-9/ 10 CAMPOS
(++)
(+++)
(++++)
CULTIVO
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CHLAMYDIA PNEUMONIAE
Se diagnostica con mayor frecuencia en nios de menor edad y en adultos jvenes. Este
agente requiere un medio complementario enriquecido para reproducirse invitro. Es de
crecimiento lento y posee las propiedades tpica de un mi. Es pequeo microorganismo
procariota rodeado de una membrana celular y carece de pared celular, es un
microorganismo pequeo, se distingue de los virus porque crece en ambientes libre de
clulas.
Las manifestaciones clnicas de una infeccin aguda por C. pneumoniae varan desde las
asintomticas, hasta las potencialmente fatales. Los cuadros ms comunes son la
neumona y la bronquitis. En menor frecuencia le siguen la faringitis y sinusitis. Tambin
puede presentarse una combinacin de estos cuadros. Sin embargo, lo ms frecuente es
la infeccin asintomtica
Ms de la mitad de los adultos en los Estados Unidos y de varios otros pases
occidentales, poseen anticuerpos especficos contra C. pneumoniae. Asimismo, este
parmetro es muy frecuente en nios en edad escolar, mientras que en menores de 5
aos, es infrecuente. Dada la alta prevalencia de anticuerpos en la poblacin general y la
esperada declinacin de los mismos tras la infeccin aguda, se cree que todas las
personas se infectan en algn momento de su vida con C. pneumoniae y que la
reinfeccin es un fenmeno comn.
Diagnstico
El diagnstico de neumona es eminentemente clnico (con una semiologa caracterstica).
Habitualmente se utilizan la radiografa de trax que evidencian neumonas atpicas
(consolidacin difusa interticial).
El diagnstico de infeccin por C. pneumoniae en los laboratorios de apoyo clnico, se
realiza fundamentalmente por microinmunofluorescencia, la cual detecta los anticuerpos
IgG e IgM producidos en respuesta contra este agente. Como la aparicin de estos
anticuerpos es lenta, su pesquisa slo tiene un valor diagnstico retrospectivo.
Otra tcnica utilizada es el cultivo en lineas celulares HL, sin embargo, se descarta su uso
rutinario por ser una tcnica de difcil implementacin, an cuando su sensibilidad es
aceptable.
La aplicacin de la tcnica de PCR para diagnosticar la infeccin aguda ha venido su
subsanar estos inconvenientes, debido a su rapidz y mayor especifidad. Tambin ha
demostrado ser ms sensible que el cultivo.
Bibliografa:
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pediatr. [online]. abr. 1991, vol.62, no.2 [citado 10 diciembre de 2008], p.128-131.
disponible en la world wide web: [1] issn 0370-4106.
wikipedia.org
scribd.com
kidshealth.org