Ventura Hunter Carolina Practica: Estudios enzimticos Propsito: Identificara la presencia de enzimas en muestras biolgicas por medios de ensayos

enzimticos para su cuantificacin en determinados productos.

Material, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo. 1 perilla 1 pipeta de 5 ml 1 pipeta de 1 ml 6 tubos de ensaye 1 gradilla 1 vaso de precipitado ermmetro 1 parrilla !lmidn "ana#oria Papa $arne !gua o%igenada &ugol

Fundamento
Las enzimas son substancias de naturaleza proteica que actan como catalizadores de las reacciones qumicas que se lleven a cabo en el citoplasma celular. Cada clula produce las enzimas necesarias para el funcionamiento del organismo en el cual se encuentran de acuerdo con las "instrucciones" contenidas en el ADN. l nmero de enzimas en un organismo puede ser mu! grandes" dependiendo de su comple#idad. Las enzimas se caracterizan por sus propiedades catalticas" contienen uno o mas centros de acci$n capaces de transmitir la informaci$n de su entorno. stos centros son% &.' De ad(esi$n al substrato $ co'substrato. ).' Activos *donde se cataliza la reacci$n+. ,.' De regulaci$n. As mismo contienen componentes proteicos" aunque la gran ma!ora de las enzimas contienen componentes de otras familias. Las enzimas pueden contener iones met-licos s$lidos o coenzimas tales como el NAD. $ /AD formando parte del centro activo. La reacci$n de la ureasa produce una (idr$lisis ! causa que el p0 de la soluci$n de reacci$n se eleve. La elecci$n de un indicador adecuado" permite que la ruptura de urea sea visible. 1isten varios mtodos de (idr$lisis de urea" de entre los cuales" los m-s empleados son los b-sicos ! aquellos que utilizan a la enzima ureasa. Las protenas contienen grupos 230 libres en sus cadenas laterales" los cuales pueden ser directa o indirectamente responsables de la acci$n cataltica de la enzima. 4a#o determinadas condiciones las enzimas pueden e1perimentar cambios irreversibles en su conformaci$n. Cuando esto ocurre" las propiedades catalticas se pierden" (a! un descenso brusco en la solubilidad ! cambios en las propiedades fsicas ! qumicas que pueden ser observados. 5or medio de la desnaturalizaci$n" la estructura completa de la enzima que previamente mantena un estado de riguroso orden" cambia a un estado de desorden dr-stico" llamado 6enrrollamiento azaroso7. 0a! numerosas vas de desnaturalizaci$n de las enzimas" siendo stas utilizadas de acuerdo a los fines que se tengan" en 4iotecnologa generalmente se utiliza el calor" la acetona ! el per$1ido de (idr$geno. Las enzimas son e1tremadamente especficas es decir nicamente reaccionan con una substancia en particular8 ! no con otras substancias a pesar de que la estructura de sta sea

mu! similar. Algunas enzimas reaccionan lentamente a concentraciones elevadas de substrato que a concentraciones ba#as del mismo. n este caso se asume que m-s de una sola molcula del substrato se ad(iere al centro activo de la enzima" in(ibiendo la reacci$n. La in(ibici$n competitiva de una reacci$n enzim-tica ocurre cuando una molcula con estructura similar a la del substrato empleado" compite por ad(erirse al mismo centro activo. 9bteniendo como resultado que la reacci$n enzim-tica disminu!a.

ALGUNAS DE LAS P IN!IPALES EN"IMAS

Nom#re $ient%&i$o !lco#ol: '!( o%idoreductasa &)lactato: '!( o%idoreductasa ! P: ) piruvato)fosforo) transferasa !cetilcolina: acetil)#idrolasa P-ptidos:p-ptido)#idrolasa Nom#re $om'n !lco#ol)des#idrogenasa &actato)des#idrogenasa Piruvato),inasa !cetilcolinesterasa rombina Fun$i(n )iol(*i$a *ermentacin alco#lica +etabolismo de los carbo#idratos +etabolismo de los carbo#idratos $onduccin de impulsos nerviosos +ecanismo de coagulacin de la sangre

In+i#i$i(n de las en,imas- e%isten compuestos de estructuras seme.antes al sustrato de una enzima /ue al unirse a su centro activo impide /ue desarrolle su accin catal0tica de forma irreversible. 1tros in#ibidores act2an sobre una parte de la estructura de la enzima distinta al centro activo3 de modo /ue si dic#o centro /ueda afectado se produce un blo/ueo definitivo de la accin de la enzima3 pero en caso contrario la in#ibicin es reversible. (ebido a su naturaleza proteica3 las enzimas se desnaturalizan e inactivan por encima de los 64 grados celcius o en presencia de medios muy cidos o muy alcalinos. Nomen$latura- el nombre aplicado a las enzimas derivan del sustrato sobre el /ue act2an3 al /ue se a5ade la terminacin 6asa7. !s03 las carbo#idrasas act2a sobre los carbo#idratos8 las fosfatasas sobre los fosfatos3 etc. 9e diferencian adems diversos nombres especiales instituidos por la tradicin con la pepsina3 tripsina3 pancreatina3 etc. ea$$iones en,im.ti$as- /0 *rupos1 las o%irreductasas :catalizadora; las transferasas :facilitan el transporte de grupos; las #idrolasas :catalizan la descomposicin por la adicin de los constituyentes del agua;

las lisasas :rompen enlaces /u0micos; las iosomerasas :favorecen las redistribuciones en el interior de las c-lulas; las ligasas :aceleran la unin de mol-culas;

Apli$a$iones medicina ciertos tratamientos terap-uticos3 se basan en la in#ibicin de las enzimas acompa5antes de las bacterias3 como lo /ue frenan su accin infecciosa sobre el paciente.

&as sulfamidas3 por e.emplo3 son elementos blo/ueantes de las enzimas bacterianas.

2#ser3a$iones y desarrollo de la pr.$ti$a

En un tubo de ensaye introducimos un pedazo de zana#oria3 en otro tubo de ensaye introducimos pedacitos de papa y por ultimo en otro tubo colocamos un pe/ue5o trozo de carne.

! cada uno de los < tubos de ensaye se les agrega 5 ml de agua o%igena

El tubo de ensaye /ue conten0a la carne mostro espuma en la carne la cual subi #asta la parte superior del agua o%igenada3 la carne se coci. &a zana#oria mostro un cocimiento en el agua o%igenada /ue la conten0a se observaron varias burbu.as tambi-n esta subi a la parte superior del agua o%igenada lo mismo sucedi con la papa3 aun/ue esta tambi-n se coci se observaron menos burbu.as /ue las de la zana#oria. &os < tubos mostraron una temperatura de <4= c

9e verti agua en un vaso de precipitado el cual se coloco sobre la parilla el-ctrica en el vaso de precipitado pusimos < tubos de ensaye uno con zana#oria3 otro con papa y el ultimo con carne3 a cada uno se agrego un poco de agua.

! un tubo de ensaye se le agrego carne y menos de 14 ml de agua o%igenada y se tapo con papel. (espu-s de varios minutos observamos /ue el papel se mo.o por completo. &a carne se coci y subi #asta la parte superior del agua o%igenada3 en donde observamos espuma. 9u temperatura fue de <1= c

! otro tubo de ensaye se le agrego saliva y > ml de solucin de almidn3 se e%puso al calor de la parrilla el-ctrica3 despu-s de esto le agregamos > gotas de lugol. En el tubo de ensaye observamos una coloracin negra /ue en la parte superior se notaba transparente.

! un tubo de ensaye agregamos solucin de almidn y > gotas de lugol3 se e%puso al calor de la parrilla el-ctrica aun/ue no ocurri nada ya /ue necesitaba ms tiempo en la parrilla3 tendr0a /ue #aber /uedado transparente.

! los tubos /ue estaban en la parrilla el-ctrica y a cada uno de ellos se les agrego > ml de agua o%igenada. &os tubos mostraron un color transparente aun/ue el /ue tenia la carne mostro un part0culas de carne flotando en el tubo.

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