FARMCIA 3 Perodo/2014

HISTOLOGIA
Prof Esp.Luciana S. de Mello Cordeiro Teixeira Mdica Veterinria

Aula Prtica: 01 e 02

Tema da Aula: O MICROSCPIO E A MICROSCOPIA

Data: ........../........../.............

Professora: LUCIANA CORDEIRO

Aluno (a): ................................................................................................................................

Assuntos: Estruturao, manuseio, utilizao e funcionamento do microscpio ptico (MO) ou microscpio de luz (ML). Objetivo(s): Entender a importncia da utilizao do microscpio ptico no estudo tecidual Aprender a usar e familiarizar-se com o microscpio ptico; Identificar os sistemas de constituio do microscpio; Conhecer todos componentes inseridos na estrutura do microscpio; Aprender a funo de cada uma das partes de constituio do microscpio; Entender o mecanismo geral de funcionamento do microscpio na ampliao da imagem; Manusear corretamente o microscpio.

MICROSCPIO DE LUZ

O microscpio ptico (MO), ou microscpio de luz (ML), um instrumento que permite observar objetos de pequenas dimenses ou invisveis a olho nu. Fornece uma imagem consideravelmente aumentada, geralmente

invertida da esquerda para a direta, devido associao de lentes. constitudo por dois sistemas, um formado por partes mecnicas e o outro por partes pticas. Cada sistema engloba uma srie de componentes constituidores do equipamento como um todo.
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SISTEMAS DO MICROSCPIO DE LUZ

Cada um dos sistemas do MO tem finalidade especfica, o Sistema Mecnico se responsabiliza pela estabilidade e sustentao do equipamento, e o Sistema ptico, composto por um conjunto de elementos transparentes (lentes biconvexas diferenciadas em objetivas, situadas prximas ao objeto que se observa, e oculares, prximas ao olho do observador) que conduzem o feixe luminoso usado na microscopia, que por sua vez tem como funo o estabelecimento da imagem do objeto estudado. Como um todo, envolvendo sistemas mecnico e ptico, o MO composto por: a) Base ou p: sustenta todo o conjunto do MO podendo ser triangular, redondo, oval

ou de outra forma qualquer desde que seja amplo, slido e pesado a fim de suportar essa sustentao. b) Brao, Coluna ou Estativa: esta se articula com o p sustentando o tubo do

microscpio onde se encontram as lentes. c) Mesa ou Platina: uma mesa em miniatura, perpendicular ao grande eixo do

microscpio, que sustenta a lmina e tem orifcio no centro dando passagem para a luz. A lmina presa por meio de pinas, presilhas ou garras e desloca-se por meio de um mecanismo de deslizamento, provido de botes que se movimentam chamados charriot. d) Canho ou tubo: faz a comunicao entre as partes pticas de resoluo e

ampliao, ou seja, entre a objetiva e a ocular. e) f) Revlver: pea giratria do tubo que proporciona a fixao e troca de objetivas. Parafuso Macromtrico: permite movimentos mais grosseiros da platina em direo

as objetivas ou vice-versa. g) Parafuso Micromtrico: permite movimentos menores mais delicados da platina em

direo s objetivas ou vice-versa, para focalizao complementar. Localiza-se prximo ao parafuso micromtrico ou adaptado sobre ele. Em certos microscpios, s existe um parafuso em lugar do macro e do micromtrico (roda de enfoque). h) Parafuso condensador: tambm se situa na poro inferior da coluna, destinando-

se a elevar e abaixar o condensador. i) Trava: parte mecnica, junto ao brao do microscpio pode existir uma alavanca que

trava o movimento do parafuso macromtrico em uma determinada posio, impedindo a

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movimentao da platina e protegendo as objetivas contra possveis choques na lmina estudada. j) Objetivas: situadas sempre prximas do objeto que observado no microscpio,

constituem-se em sistemas centrados de lentes convergentes que formam a imagem, real e invertida do objeto. Essa imagem que acompanhada pela ocular e tornada definitiva. k) Oculares: as oculares so formadas por sistemas de lentes cuja posio est sempre

prxima ao olho do observador. Sua finalidade recolher a imagem aumentada, vertical a direta. Como a imagem que a objetiva fornece invertida, a imagem, final do microscpio ser tambm invertida. As oculares so formadas por duas lentes, a superior (lente ocular) e a inferior (lente de campo ou coltica). Outros elementos so importantes constituintes da parte ptica de um microscpio, dentre eles pode-se citar: l) Fonte Luminosa ou de Luz: pode ser distante, como a luz solar ou prxima como a

luz de uma lmpada. Os microscpios modernos, mais aperfeioados, possuem uma lmpada embutida. m) Diafragma ou ris: quando for conveniente, pode-se limitar parte dos raios de luz

perifricos que chegam ao objeto. Para tanto, o microscpio dispe de um diafragma que permite diminuir a abertura de entrada do feixe luminoso. n) Condensador: possvel tambm aumentar a quantidade de luz que atravessa o

objeto, tanto no caso da luz ser fraca, como no caso em que o aumento da objetiva exige raios mais intensos. Neste caso, usa-se o condensador como um dispositivo auxiliar que condensa os raios luminosos. o) Filtros: os filtros so discos de vidro coloridos ou recobertos com gelatina colorida

que absorvem parte das radiaes luminosas que atingem o objeto, permitindo utilizar faixas estreitas de comprimento de onda proporcional, para uma dada objetiva, ao comprimento de onda da luz empregada. O uso dos filtros pode favorecer grandemente a absoro ou aumentando o poder de resoluo. Alm do mais, usando filtros de cores complementares possvel aumentar o contraste entre estruturas de formas pouco diferenciadas.

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OBSERVAO MICROSCPICA

No que respeita a microscopia ptica existem dois mtodos fundamentais de observao, de acordo com o tipo de preparao a observar:

Se a lmina no est corada (exame a fresco): a observao feita com objetivas secas e iluminao no muito intensa,

Se a lmina est corada: a observao feita com objetivas de imerso, iluminao mxima e intensa.

COMO UTILIZAR O MICROSCPIO

Sequncia de passos para se efetuar observaes ao microscpio de luz: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Retirar a capa do microscpio; Identificar as diferentes partes do microscpio; Ligar o microscpio no boto lateral; Limpar a lmina a ser examinada; Ajustar o Charriot de modo a centrar o orifcio da platina; Colocar a lmina sobre a platina (com a lamnula voltada para cima) e sobre a lente

frontal do condensador; 7. 8. 9. 10. Comear as observaes, utilizando-se a objetiva de menor aumento; Ajustar o condensador; Ajustar as oculares para a obteno de uma nica imagem. Olhar pela ocular, ao mesmo tempo em que se eleva lentamente a platina, girando o

parafuso macromtrico, at que a preparao aparea focalizada. Os ajustes finais de focalizao devem ser efetuados com o parafuso micromtrico; 11. Se houver necessidade de efetuar observaes com outras objetivas, exceto a

objetiva de 100x (imerso), girar o revlver e encaixar a objetiva adequada. Se a focalizao no for automtica, faa uso do parafuso micromtrico;

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12. 13.

Deslocar a lmina sobre a platina, utilizando toda sua extenso; Ao efetuar a mudana de objetiva, certificar se a visualizao esta sendo mantida;

14. Quando desejar retirar a lmina do microscpio, girar o revlver de modo a deixar a objetiva panormica em posio de observao. Abaixar a platina girando o parafuso macromtrico. Remover a lmina com cuidado para que os dedos no toquem as lentes das objetivas e para que a lmina no toque nas mesmas. 15. Ao terminar: No esquea a lmina no Charriot; desligar a luz e retirar o fio da tomada; colocar a capa no microscpio; limpar a mesa.

QUALIDADE DA IMAGEM E TERMOS EMPREGADOS NA MICROSCOPIA

Ao se olhar para um espcime usando um microscpio, a qualidade da imagem avaliada pelas seguintes caractersticas: ampliao, brilho, foco, resoluo e contraste.

Ampliao - produto do poder de amplificao da objetiva multiplicada pelo da

ocular. A ampliao refere-se ao grau de aumento da imagem em relao ao objeto. A ampliao total obtida com o microscpio ptico consiste no produto da ampliao da objetiva pela ampliao da ocular.

Brilho - intensidade de luz

ou obscuridade da imagem. A luminosidade est relacionada ao sistema de iluminao e pode ser alterada mudando-se a voltagem
Imagem de um gro de plen sob boa luminosidade (esquerda) e fraca luminosidade (direita)

da lmpada e ajustando-se o condensador e as aberturas do

diafragma ou do furo feito com a agulha.

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Foco - relacionado com a focal com e os pode botes ser de

distncia controlado

focalizao, expressa uma imagem definida e ntida sem apresentar-se borrada.

Imagem de um gro de plen no foco (esquerda) e fora de foco (direita)

Resoluo - capacidade

de formar imagens distintas (separadas) de dois pontos

situados muito prximos um do outro, no objeto observado. da sua

Depende
Imagem de um gro de plen com boa resoluo (esquerda) e com baixa resoluo (direita)

essencialmente ou seja, de

objetiva,

abertura numrica (AN) e do comprimento de onda de luz utilizada.

Contraste - relacionado ao sistema de iluminao e pode ser ajustado pela mudana na intensidade de luz e da abertura do diafragma.

Imagem de um gro de plen com bom contraste (esquerda) e com contraste ruim (direita)

Profundidade de campo - distncia vertical, de cima abaixo do plano focal, capaz

de produzir uma imagem aceitvel.

Campo de viso - rea do objeto de estudo que pode ser vista atravs do

microscpio com uma determinada lente objetiva.

Distncia focal - distncia exigida para a lente focalizar a luz. Ponto focal/foco - ponto onde a luz proveniente da lente converge.

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RELATRIO DE AULA PRTICA DE HISTOLOGIA

Data: ........../........../............. Curso: FARMCIA Srie /Turma (P): ......................

N Relatrio: ................ Turno: ............................

Tema da Aula: ........................................................................................................................

Professora: ............................................................................................................................. Aluno(a): ........................................................................................... RA: ............................. EXERCCIOS DE FIXAO

1.

Como se calcula o aumento final de um material observado ao

microscpio?

2.

O que Poder de Resoluo?

3.

Anote o aumento total em cada campo.

Objetiva: 4X Aumento:__________ Objetiva: 40X Aumento:__________

8

Objetiva: 10X Aumento:__________ Objetiva: 100X Aumento:__________

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4.

Na ilustrao abaixo, faa a identificao de cada um dos componentes do

microscpio, e enquanto partes do equipamento, determine a qual sistema (ptico ou mecnico) cada estrutura apontada se estabelece.

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5.

Na tabela que segue abaixo, cite a funo de todos os componentes do

microscpio, indicados numericamente na ilustrao anterior. 1 8

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10

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6.

Sobre os componentes do microscpio e suas respectivas funes faa a

palavras cruzadas abaixo. HORIZONTAL 1. 2. 3. 4. 5. Pea que est localizada na mesa do microscpio e serve para prender a lmina. Parte do microscpio responsvel pelo foco da imagem. Sustenta as objetivas. Parte do microscpio que o sustenta. Controla a intensidade da luz.

VERTICAL 1. 2. 3. 4. 5. Pea do microscpio que movimenta a lmina. Parte do microscpio que movimenta a mesa no sentido vertical. Diz-se de 10x, 40x ou 100x. Responsvel pelo aumento da imagem. Parte do microscpio que est diretamente ligado ao observador PLATINA (parte do microscpio que acomoda a lmina).

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