Los BACTERIFAGOS (fagos) son parsitos intracelulares obligados que se multiplican al interior de las bacterias, haciendo uso de algunas

o todas sus maquinarias biosintticas. Sin embargo, los bacterifagos son tiles en el diagnstico de laboratorio para la identificacin de bacterias patgenas (fago-tipificacin). Aunque la fago-tipificacin no se usa en el laboratorio clnico de rutina, s se usa a en los laboratorios de referencia con propsitos epidemiolgicos. Recientemente, se ha desarrollado un nuevo inters en el posible uso de los bacterifagos para el tratamiento de infecciones bacterianas y en la profilaxis. De manera que la decisin de si los bacterifagos sern usados en la medicina clnica o no, an est por ser determinada.

COMPOSICIN Y ESTRUCTURA DEL BACTERIFAGO

Aunque diferentes bacterifagos pueden contener diferentes materiales todos ellos contienen cido nucleico y protena. Dependiendo del fago, el cido nucleico puede ser ya DNA o ya RNA pero no ambos y puede existir en varias formas. Los cidos nucleicos de los fagos a menudo contienen bases raras o modificadas. Estas bases modificadas protegen a los cidos nucleicos del fago de las endonucleasas que cortan los cidos nuclicos del husped durante la infeccin. El tamao de los cidos nucleicos vara dependiendo del fago. Los fagos ms simples solo tienen suficiente cido nucleico para codificar un promedio de 3-5 productos gnicos, mientras que los fagos mas complejos, pueden codificar para mas de 100 productos gnicos. El nmero de protenas de diferentes clases y la cantidad de cada una de ellas en la partcula del fago variar dependiendo de la clase de fago que se trate. El fago mas simple posee varias copias de solo una o dos diferentes protenas, mientras que los mas complejos podran poseer muchos tipos de protenas diferentes. La funcin de las protenas durante la infeccin es proteger al cido nucleico de las nucleasas de su medio ambiente. Estructura Los bacterifagos vienen en muchas diferentes formas y tamaos. Tamao - T4 est entre los fagos mas grandes, tiene aproximadamente 200 nm de largo y 80-100 nm de ancho. Otros fagos son mas pequeos. La mayora de los fagos estn entre un rango de 24200 nm de longitud. Cabeza o Cpside Los fagos clsicos poseen una estructura a manera de cabeza y pueden variar de tamao y forma. Algunos son icosadricos (20 caras) otros son filamentosos. La cabeza o cpside est compuesta de muchas copias de una o ms protenas diferentes. Al interior de la cabeza se encuentra el cido nucleico. La cabeza acta como una cubierta protectora para el cido nucleico. Cola Muchos, aunque no todos los fagos muestran una cola unida a la cabeza del fago. La cola es un tubo hueco a travs del cual el cido nucleico pasa durante la infeccin. El tamao de la cola puede variar y algunos fagos ni siquiera la tienen. En los fagos ms complejos como T4, la cola se rodea de una cortina contrctil durante la infeccin de la bacteria. Al extremo de la cola los fagos ms complejos como T4 presentan una placa en la base y una o mas fibras unidas a ella. Esta placa de base y las fibras de la cola estn involucradas en la unin de los fagos a la clula bacteriana. No todos los fagos tienen placas de base ni fibras de la cola, En tales casos existen otras estructuras que se ven asociadas en la unin de partcula del fago a la bacteria.

INFECCIN DE LAS CLULAS HUSPED

Adsorcin El primer paso en el proceso de infeccin es la adsorcin del fago a la clula bacteriana- Este paso es reversible est mediado por las fibras de la cola o por alguna estructura anloga en aquellos fagos que carecen de las mismas. Las fibras de la cola se unen a receptores especficos en la clula bacteriana y la especificiad del husped del fago. La naturaleza del receptor bacteriano vara en las diferentes bacterias. Los ejemplos incluyen protenas sobre la pared celular de la bacteria, LPS, acidos teicoicos, flagelos y pili. Estos receptores estn en la bacteria para otros propsitos y los fagos han evolucionado de manera que son capaces de usar estos receptores para llevar a cabo la infeccin. 1.Fijacion:cuando una fibra del tallo establece contacto con los receptores adecuados. A medida que mas fibras del tallo conatctan con mas receptores, la placa basal se asienta en la superficie. 2. Contraccion del fago : una vez que la placa basal esta firmemente asenrada en la superficie celular, se prodecen cambios conformacionales en la placa basal y vaina del tallo. La vaina se reorganiza de tal forma que se contrae, hacindose mas corta y ancha. Algunos fagos tienen enzimas digetivas que degradan varios componentes de la envoltura bacteriana. 3. Penetracion. Cuando el tubo central es empujado a travs de la pared celular. Inyeccin del ADN. El ADN es extruido de la cabeza, pasa a travs del tubo del tallo y penetra a la clula husped. Fases tempranas de la replicacin. La maquina biosintetica de la celula hospedera resulta alterada, como un preludio a la sntesis de acidos nucleicos vricos. Tipicamente, en esta fase se forman los enzimas vrico especficos. Replicacin del acido nucleico. Sntesis de protenas que constituyen las subunidades estructurales de la cubierta del virus. Ensamblaje. De las unidades estructurales ( y de los componentes membranosos en virus con envoltura) y empaquetamiento del acido nucleico en las nuevas particulas vricas. Liberacin. De la celula de las partculas vricas maduras.

CICLO DE MULTIPLICACIN DEL FAGO

FAGOS LTICOS O VIRULENTOS Los fagos lticos o virulentos son fagos que solo pueden multiplicarse en bacterias y matan a la clula debido a la lisis al trmino del ciclo de vida. Periodo de eclipse En esta fase no se observan copias del virus en la clula, adems, las partculas de fago no infeccioso se pueden encontrar ya sea en el interior o en el exterior de la clula bacteriana. El cido nucleico del fago se apodera de la maquinaria biosintticas del husped y se elaboran los mRNAs y las protenas fago especficas. Existe una expresin ordenada de la sntesis macromolecular dirigida por el fago, tal como se observa en las infecciones por virus animales. Los mRNAs tempranos codifican para las protenas tempranas, las cuales se necesitan para la sntesis del DNA de fagos y para apagar la biosntesis del DNA, RNA y protenas del husped. En algunos casos las protenas tempranas literalmente degradan el cromosoma del husped. Luego de que el DNA del fago se sintetiza, entonces los mRNAs y las protenas tardas se fabrican. Las protenas tardas son las protenas estructurales que conforman al fago, tambin son las protenas necesarias para causar la lisis de la clula bacteriana. Fase de acumulacin intracelular En esta fase el cido nuclico y las protenas estructurales de que estn hechos, se ensamblan y las partculas infecciosas se acumulan dentro de la clula. Lisis y Fase de liberacin Despus de un tiempo la bacteria empieza a sufrir lisis y los fagos intracelulares se liberan al medio. El nmero de partculas liberadas por bacteria infectada puede ser tan alto como 1000.

FAGO LISOGNICO O TEMPERADO Los fagos lisognicos o temperados son aquellos que bien pueden multiplicarse via el ciclo ltico o entran en un estado quiescente en la clula. En este estado quiescente la mayora de los genes del fago no se transcriben; el genoma del fago existe en un estado reprimido. Al DNA del fago en este estado reprimido se le conoce como profago porque no es un fago pero posee el potencial para producir fagos. En la mayora de los casos el DNA de fago realmente se integra en el cromosoma del husped y se replica junto con el cromosoma del husped y se transmite a las clulas hijas. La clula que alberga un profago no se ve negativamente afectada por la presencia del profago y el estado lisognico puede persistir indefinidamente. A la clula que alberga un profago se le conoce como lisgena. La privacin de nutrientes favorece la lisogenia. El fago se vuelve inactivo (lisognico) al mismo tiempo que su husped. El resultado es un genoma del fago pero reprimido estable el cual est integrado dentro del

cromosoma de la clula husped. Cada fago temperado solamente reprimir la expresin de su propio DNA y no la de otro fago, as que la represin es muy especfica (inmunidad a la superinfeccin con el mismo fago). Eventos que conducen a la terminacin de la Lisogenia En cualquier momento en que la bacteria lisognica quede expuesta a condiciones adversas, el estado lisognico puede ser terminado. Este proceso se le llama induccin. Las condiciones que favorecen la terminacin del estado lisognico incluyen: desecacin, exposicin al la luz UV o radiacin ionizante, exposicin a qumicos mutagnicos, etc. Las condiciones adversas que conducen a la produccin de proteasas (protena recA) la cual destruye a la protena llamada represor. Esto a su vez conduce a la expresin de los genes del fago, al proceso inverso al proceso de integracin, llamado escisin y al proceso de multiplicacin ltica. La decisin de lambda de entrar en el ciclo ltico o en el ciclo lisognico cuando este penetra en la clula inicialmente est determinada por la concentracin dentro de la clula, tanto del represor, como de otra protena del fago llamada cro. La protena cro del fago, apaga la sntesis del represor y por lo tanto previene el establecimiento de la lisogenia. Las condiciones ambientales que favorecen la produccin de cro conducirn al ciclo ltico mientras que aquellas que favorecen la produccin del represor favorecern la lisogenia. Conversin Lisognica Cuando la clula est lisogenizada ocasionalmente hay genes extra que el fago lleva y que se empiezan a expresar en la clula. Estos genes pueden cambiar las propiedades en la clula. Estos genes pueden cambiar las propiedades de la clula bacteriana. Este proceso se le llama conversin lisognica o conversin por fago. Esto puede tener importancia clnica, por ej. Se ha demostrado que los fagos lisognicos llevan genes que pueden modificar al antgeno O de Salmonella, el cual es uno de los antgenos principales ante los cuales est dirigida la respuesta inmune. La produccin de toxina por Corynebacterium diphtheriae est mediada por un gen que es acarreado por un fago. Solo aquellas cepas que se han convertido por lisogenia son patgenos.