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So Lus - MA
2013
So Lus - MA
2013
___________________________________________
Prof. D. Sc. Ferdinan Almeida Melo...
Universidade Estadual do Maranho
1 Membro
___________________________________________
Prof. D. Sc .Hamilton Pereira Santos...
Universidade Estadual do Maranho
2 Membro
___________________________________________
Prof. D. Sc. Michele Moreira Martins Oliveira
Faculdade de Imperatriz FACIMP
Co-orientadora
___________________________________________
Prof. D. Sc. Ana Lucia Abreu Silva
Universidade Estadual do Maranho
Orientadora
AGRADECIMENTOS
RESUMO
ESTUDO EPIDEMIOLGICO E VIROLGICO DAS LENTIVIROSES DE
PEQUENOS RUMINANTES (LVPR) NA MESORREGIO DO OESTE
MARANHENSE, BRASIL. . MOURO, P. A.; ABREU SILVA, A. L. 2013. __ f.
Dissertao de Mestrado Universidade Estadual do Maranho, So Luis, 2013.
soro
ABSTRACT
EPIDEMIOLOGIC AND VIROLOGICAL STUDY OF LENTIVIRUSES (SRLV)
IN SMALL RUMINANT) FROM THE WEST MESOREGION MARANHENSE,
BRAZIL. MOURO, P. A.; ABREU SILVA, A. L. 2013. __ f. Dissertation (Master in
Animal Science) Universidade Estadual do Maranho, So Luis, 2013.
SUMRIO
Pgina
1. INTRODUO
12
2. JUSTIFICATIVA
14
3. OBJETIVOS
3.1 Objetivo Geral
3.2 Objetivos especficos
15
15
15
4. REVISO DE LITERATURA
4.1 Lentiviroses de Pequenos Ruminantes (LVPR)
4.2 Estrutura viral dos Lentivrus de caprinos e ovinos
4.3 Epidemiologia
4.4 Patogenia
4.5 Imunologia
4.6 Infeco in vivo e in vitro
4.7 Transmisso
4.8 Sinais Clnicos
4.9 Diagnstico
4.10 Medidas de Controle
16
16
17
20
23
24
25
27
30
32
35
5. MATERIAL E MTODO
5.1 Marco amostral
5.2 Aplicao dos questionrios
5.3 Amostra e Prevalncia
5.4 Estudo Sorolgico
5.4.1 Clculo de Prevalncia
5.5 Cultivo Celular e Isolamento Viral
5.6 Anlises Estatsticas
38
38
39
39
40
41
42
43
6. RESULTADOS
44
44
51
7 DISCUSSO
52
8 CONCLUSES
57
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
58
APNDICE
75
10
LISTA DE TABELAS
Pgina
TABELA 01. Doenas causadas por Lentivrus.
16
22
44
48
11
LISTA DE FIGURAS
Pgina
FIGURA 01. Estrutura das partculas virais, apresentando a localizao das
principais protenas: transcriptase reversa (RT), capsdeo (CA),
transmembranar (TM), protena de superfcie (SU) e nucleoprotena (adaptado
de COFFIN, 1996).
20
38
40
43
44
45
46
50
51
52
52
12
1. FAO
2. IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica
3. PPM 4. LVPR - lentiviroses de pequenos ruminantes
5. MVV - vrus maedi-visna
6. CAEV vrus artrite-encefalite caprina
7. IDGA - Imunodifuso em Gel de Agarose
8. OIE - Organizao Mundial para Sade Animal
9. MAPA - Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
10. PNSCO - Programa de Sanidade Caprina e Ovina
11. PNVCLVPR - Plano Nacional de Vigilncia e Controle de Lentiviroses de
Pequenos Ruminantes
12. AIDS - vrus da imunodeficincia adquirida
13. FIV - imunodeficincia felina
14. SIV - imunodeficincia dos macacos
15. MSC - membrana sinovial caprina
16. RIFI - Imunofluorecncia Indireta
17. PCR - reao em cadeia da polimerase
18. MEM - meio essencial mnimo de Eagle
19. SFB - soro fetal bovino
20. BVD vrus da diarreia viral bovina
22. OR - razo de odds
23 . SPSS - Statistical Package for Social Science for Windows
13
1. INTRODUO
Os pases em desenvolvimento detm aproximadamente 95% dos rebanhos
de caprinos e ovinos no mundo, refletindo o importante papel econmico e social para
populaes de baixa renda (FAO, 2008).
Segundo dados do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE,
2011), o efetivo brasileiro de caprinos de, aproximadamente, 9,3 milhes de cabeas.
O principal efetivo encontra-se localizado no Nordeste do Pas (91,2%). A Bahia o
grande estado produtor de caprinos no Brasil, detendo 29,2% do efetivo nacional. O
rebanho nacional de ovinos est estimado em 17,6 milhes de cabeas, sendo o maior
efetivo do rebanho na regio Nordeste e o estado do Rio Grande do Sul, na regio Sul, o
detentor dos maiores rebanhos de ovinos.
No estado do Maranho a principal atividade pecuria a criao de
bovinos com um rebanho estimado em, aproximadamente, 7,2 milhes de cabeas
(PPM, 2011). Neste estado a criao de caprinos e ovinos corresponde a 369.450 e
231.348, respectivamente, e segundo dados do Instituto Brasileiro de Geografia e
Estatstica (IBGE) ocorreu queda de 0,99% no rebanho caprino e aumento de 0,76% no
rebanho ovino em relao ao ano de 2010.
A criao de caprinos caracteriza-se, na maioria das vezes, pelo baixo uso
de tecnologia, o que facilita a prevalncia de doenas infecciosas, parasitrias e
nutricionais, dificultando a expanso da atividade. Dentre as doenas j identificadas
nos rebanhos brasileiros destacam-se alguns agentes considerados exticos como o
vrus da lngua azul, Brucella ovis e os lentivrus de pequenos ruminantes (LVPR)
(SOUZA et al., 2010; SOUZA, 2011; MARTINEZ et al., 2011) que compreende vrios
isolados distribudos, basicamente, em dois grupos filogenticos, cujos prottipos so os
vrus Maedi-Visna (MVV) que acometem ovinos e Artrite-encefalite Caprina (CAEV)
em caprinos (VALAS et al., 1997; CASTRO et al., 1999a; VALAS et al., 2000).
Os LVPR so responsveis por causarem enfermidades infectocontagiosas e
acometem animais de todas as idades, sexo ou da raa, e tm como principais sinais
clnicos a artrite, encefalite, mamite e com menor frequncia problemas respiratrios
(FRANKE, 1998). Essas enfermidades levam o animal a apresentar uma queda
14
15
2. JUSTIFICATIVA
No Brasil, os rebanhos caprino e ovino, representam 26,9 milhes de
cabeas (IBGE, 2011). Os maiores plantis nacionais esto nas Regies Sul e Nordeste,
que, juntas, possuem 94,6% do rebanho caprino nacional e 85,2% do rebanho ovino
nacional (IBGE, 2011). No estado do Maranho o rebanho de caprinos e ovinos
representam 3,9% e 1,3%, respectivamente, da criao nacional. A Microrregio de
Imperatriz apesar de apresentar condies geoclimticas favorveis criao de
caprinos e ovinos apresenta uma populao pequena destes animais, sendo estimada em,
aproximadamente, 7.550 caprinos e 35.219 ovinos (IBGE, 2011). No estado do
Maranho a criao dessas espcies vem diminuindo o que, possivelmente, pode ser
explicado pela queda da produo e da produtividade destes rebanhos, causada por
problemas advindos da m implantao dos manejo alimentar e higinico-sanitrios,
que possibilitam a entrada de patognos causadores de doenas como por exemplo as
lentiviroses de pequenos ruminantes (LVPR). As lentiviroses so causadas por RNAvrus pertencentes famlia Retroviridae que apresenta tropismo por clulas do sistema
monoctico-fagocitrio. Aproximadamente 25% dos caprinos e ovinos infectados com
LVPR podem desenvolver artrite, sobretudo da articulao carpo-metacarpiana,
encefalomielites,
emagrecimento,
mastite
complicaes
respiratrias,
como
16
3. OBJETIVOS
3.1 Objetivo Geral
Avaliar as condies scio-econmicas, de manejo alimentar e higinicosanitrio, bem como, realizar o diagnstico das lentiviroses de pequenos ruminantes, em
criaes de caprinos e ovinos em 14 municpios da microrregio de Imperatriz - MA.
3.2 Objetivos especficos
Realizar aplicao de questionrio para o reconhecimento das condies de
manejo higinico-sanitrio, reprodutivo e alimentar, nas criaes de
caprinos e ovinos na regio estudada;
Realizar diagnstico sorolgico por meio da tcnica de Imunodifuso em Gel de
Agarose para Lentivrus de Pequenos Ruminantes (LVPR) nos caprinos e
ovinos amostrados;
Estabelecer cultura de clulas primrias de crnea, plexo coride e membrana
sinovial ovina e caprina de fetos;
Isolar vrus de animais suspeitos nas culturas de clulas anteriormente
estabelecidas para observar efeito citoptico.
4. REVISO DE LITERATURA
4.1 Lentiviroses de Pequenos Ruminantes (LVPR)
Os pequenos ruminantes podem ser infectados por um grupo de lentivrus,
genericamente denominados de Lentivrus de Pequenos Ruminantes (LVPR), que
compreende vrios isolados distribudos, basicamente, em dois grupos filogenticos,
17
Hospedeiro
Tropismo
a
AIEV
MVV
CAEV
FIV
Equinos
Ovinos
Caprinos
Felinos
Macrfagos
Macrfagos
Macrfagos
T-
BIV
Bovinos
CD4+/Macrfagos
T-
SIV
Primatas
CD4+/Macrfagos
T-
Humanos
CD4+/Macrfagos
T-
Vrus da imunodeficincia
HIV 1/2
humana
Fonte: Tavares e Pereira (1999).
CD4+/Macrfagos
18
19
Protease (PR)
Matriz (MA)
Envelope
Integrase (IN)
RNA
genmico
Nucleoproten
a (NP)
Protena de
Superfcie
(SU)
Transcriptase
Reversa (RT)
Adsoro
Transcriptase
reversa
Capsdeo
(CA)
RNA
Protena
Transmembranar
(TM)
DNA Viral
80 - 100nm
DNA pr-viral
Transcrio
Protenas
Vrus livre
Remonte e brotamento
das partculas virais
RNA m
Traduo
20
4.3 Epidemiologia
O reconhecimento da Maedi-Visna provavelmente remonta a 1915, quando
uma pneumonia intersticial progressiva foi relatada em ovinos da frica do Sul. Uma
sndrome similar foi posteriormente notificada em ovinos de Montana em 1923
(PASSICK, 1998 apud MARSH, 1923). No entanto, somente aps uma epidemia de
pneumonia e paralisia progressiva, envolvendo ovinos da Islndia entre 1939 e 1952,
que esta doena recebeu maior ateno. A origem deste surto foi rastreada, indicando a
21
adulta
com
artrite
num
rebanho
com
uma
elevada
incidncia
de
22
N de
amostras
360
248
4019
420
270
600
397
1344
672
47
692
1605
245
3146
343
150
242
562
1294
2350
125
1030
275
253
67
29
843
Ocorrncia
(%)
2,5
40,73
1
11
2,2
8,2
17,6
22,99
3,8
4,25
29,2
13,4
21,63
0,73
8,75
0
21,07
14,1
0,3
5,9
48,8
43,01
34,93
6,72
6
34,5
2,7
Autores
Batista et al. (2004)
Melo & Franke (1997)
Pinheiro et al. (2001a)
Silva et al. (2005)
Castro et al. (2002)
Bandeira et al. (2008)
Saraiva Neto et al. (1995)
Callado et al. (2003)
Oliveira et al. (2006a)
Melo et al. (2003)
Ramalho (2000)
Almeida et al. (2001)
Edelweis et al. (2001)
Oliveira et al. (2006b)
Torres et al. (2009)
Lima et al., 2009
Cunha & Nascimento (1995)
Lilembaun et al. (2007)
Yorinori (2001)
Gouveia et al. (2003)
Garcia et al. (1992)
Leite et al. (2004)
Madureira & Gomes (2007)
Sell (2000)
Moojen et al. (1986)
Santin et al. (2002)
Sobrinho et al. (2010)
4.4 Patogenia
A idade, raa e o sexo dos animais parecem no intervir na sua
suscetibilidade frente ao CAEV (ROWE e EAST, 1997), porm outros fatores como
estresse, as infeces bacterianas e virais concomitantes podem aumentar o risco da
23
24
25
26
vertical de LVPR para embries e fetos (FIENI et al., 2003; BOLEA et al., 2006).
Moncitos contendo LVPR esto presentes intermitentemente na circulao de animais
infectados, porm nas fmeas, provavelmente por influncia hormonal, ocorrem
perodos alternados de expresso viral reduzida e um grande nmero de moncitos
infectados circulantes, principalmente no final da gestao e inicio da lactao
(MILHAU et al., 2005).
A soroconverso dos animais infectados pode ocorrer em um intervalo de
semanas, meses ou at mesmo anos, podendo ocorrer perodos de sororeverso
(HANSON et al., 1996).
Os LVPR apresentam algumas caractersticas interessantes como
persistncia da infeco, mesmo na presena de uma resposta imunolgica, devido
restrio da replicao viral (GENDELMAN et al., 1986) e da capacidade de mutaes,
resultando na formao de subpopulaes virais heterogneas denominadas quasispcie
(PASICK, 1998a).
Os LVPR podem se replicar em vrios tipos celulares (Tabela 1), tais como:
as clulas musculares lisas (LEROUX et al., 1995a), clulas epiteliais da tuba uterina
(LAMARA et al., 2002a), clulas endoteliais (LECHAT et al., 2005), clulas epiteliais
da glndula mamria (MILHAU et al., 2005), clulas epiteliais de crnea de feto
caprino (HECKERT et al., 1992; SIMARD et al., 2001). No entanto, a principal clula
utilizada in vitro para replicao destes vrus so as de membrana sinovial (MS)
(CRAWFORD et al., 1980); segundo ABREU et al. (1998) estas clulas replicam
CAEV satisfatoriamente, tanto em clulas de baixa passagem (5 a 7) como de alta (17
a 18), produzindo efeito citoptico (ECP) tpico caracterizado por vacuolizao e
formao de sinccios, seguido de morte celular. A formao destes sinccios parece ser
resultado da ligao do vrus clula e que ocorre graas a interaes das glicoprotenas
de envelope (SU) virais e receptores especficos das clulas. Na superfcie das clulas
de membrana sinovial caprina (MSC) e plexo coride ovino so expressas trs protenas
(15, 30 e 50 kDa) que foram identificadas como receptores para Maedi-Visna
(LEROUX et al., 1995a).
As clulas de linhagem tambm vm sendo usadas para replicao dos
LVPR. As clulas fibroblsticas de embrio caprino imortalizadas-T (TIGEF) e as de
MS imortalizadas com telomerase humana apresentam boa permissividade a ambos
27
4.7 Transmisso
J est bem estabelecido que a principal via de infeco da LVPR a
digestiva, por meio da ingesto de colostro ou leite pelas crias de mes infectadas
(ADAMS et al., 1983; ROWE et al., 1992; STACHISSINI et al., 2007), porm a
transmisso pode ocorrer, tambm, por outras vias onde h contato direto entre os
animais, ou indiretamente por materiais contaminados com sangue ou leite de animais
infectados (AL-ANI e WESTWEBER, 1984). A presena do anticorpo no colostro no
evita a infeco (RADOSTITS et al., 2002).
ROWE et al. (1991) relatam que aproximadamente 69% das infeces pelo
CAEV ocorrem pela ingesto de leite ou colostro contaminado e que os 31% restantes
devem ser creditadas a outras vias de infeco. Desta forma, tem sido observada uma
limitao dos programas de controle baseados somente na transmisso por leite e
colostro entre a me infectada e sua prole enfatizando a necessidade da adio de outros
mtodos de controle que considerem um maior espectro de vias de infeco (SILVA,
2007).
EAST et al. (1993) descreveram as vias de transmisso do vrus, dividindoas em quatro vias possveis e constatadas:
- Colostro: A ingesto do colostro de fmeas soropositivas tem sido considerada a
principal via de transmisso nas propriedades onde realizado o aleitamento coletivo
com pool de colostro ou leite, onde uma s fmea positiva poder contaminar todos
os filhotes (EAST et al., 1993). O vrus da CAEV pode ser encontrado nos leuccitos
perifricos a partir de duas semanas aps a infeco e permanecer disseminando vrus
durante toda vida. Cabras soropositivas eliminam o vrus durante toda vida pelo leite e
outras secrees, servindo desse modo como reservatrio do vrus. Cabras soronegativas
tambm podem eliminar o vrus pelo leite (GEDEK et al., 1993).
- Infuso Intramamria: esta via de transmisso possvel de ocorrer durante a
ordenha mecnica, com equipamentos de ordenha ou manejo inadequado dos mesmos.
28
29
30
taquipnia,
consolidao
pulmonar,
som
mido
auscultao
31
4.9 Diagnstico
Levando em considerao que cerca de 35% dos animais infectados
apresentam sintomas clnicos da enfermidade (GUEDES et al., 2001), so de extrema
importncia os testes laboratoriais no diagnstico da infeco (LARA et al., 2005).
Desse
modo
diagnstico
dever
basear-se
nos
sinais
clnicos,
leses
32
33
no sangue nos estgios iniciais da doena, sendo uma alternativa tambm para
identificao de animais falso negativos (PINHEIRO et al., 2001a; FROTA et al.,
2005). Para isto, tm sido utilizados iniciadores derivados das sequncias dos genes gag
ou pol, em PCR, em amostras de leuccitos, clulas do leite, lavado brnquio alveolar,
lquido sinovial e clulas obtidas por tripsinizao de monocamadas ou explantes
(COSTA et al., 2007).
As prticas de gerenciamento para controle da enfermidade em rebanhos de
alta qualidade tm demonstrado insuficincia no seu objetivo, sendo a tcnica de PCR
uma ferramenta importante para diminuir o risco de resultados falso negativos, possveis
de ocorrer com a tcnica de IDGA (MODOLO et al., 2009). O leite, colostro, smen ou
lquido sinovial como fonte de DNA do vrus para a tcnica de PCR oferece menor
sensibilidade se comparado a amostras de sangue (REINA et al., 2008).
Os LVPR podem ser isolados de amostras de animais vivos, tanto pelo cocultivo em clulas de membrana sinovial caprina (MSC), como leuccitos do sangue
perifrico, clulas somticas do leite, smen e fluidos uterinos, como, tambm de
animais mortos infectados, a partir de explantes de tecidos como MSC, glndula
mamria, pulmo, plexo coride e tecidos linfides. Para isolamento do lentivrus
caprino de amostras clnicas, utiliza-se cultivo primrio de clulas de MSC, sendo que o
efeito citoptico caracterstico a presena de clulas multinucleadas tpicas (sinccio)
(PINHEIRO et al., 2001).
FIENI et al. (2003), identificaram tecidos infectados com o lentivrus
caprino do trato reprodutivo empregando a tcnica de Double-Nested-PCR, com esta
tcnica demonstraram o DNA pr-viral em clulas uterinas, da glndula mamria,
clulas do oviduto e no fluido uterino.
Outra tcnica utilizada para identificao de partculas virais em tecidos
infectados a imunohistoqumica, podendo esta ser utilizada tanto para testes de
susceptibilidade in vitro quanto para identificao do vrus em tecidos de animais
naturalmente infectados. CARROZA et al. (2003) utilizando o PCR in situ associado
imunohistoqumica em clulas de tecido pulmonar e glndulas mamrias, identificaram
vrios tipos celulares carreando o cido nuclico viral.
A Microscopia Eletrnica (ME) para o diagnstico viral encontra como
principal limitante o alto custo e a necessidade de equipamento sofisticado e pessoal
34
com treinamento apurado para a realizao dos exames. PINHEIRO (2001) observou o
CAEV por ME, em cultivo clulas de plexo coride caprino. As partculas virais de 70110 nm, com um corpo central de 30-50 nm, apresentaram forma e tamanho semelhante
ao MVV.
35
elevado valor zootcnico, desde que sejam identificados com uma marca de fcil
visualizao.
recomendvel ainda a separao de animais sadios e infectados, pois a
transmisso horizontal pelo contato com secrees e excrees pode ocorrer (ADAMS
et al., 1983; ZINK et al., 1990). A transmisso horizontal pode ser potencializada em
rebanhos infectados quando se aumenta a concentrao de animais, uma vez que o
contato ntimo aumenta a probabilidade de contato com macrfagos ou moncitos
contendo o vrus, j que estes no so resistentes no ambiente (NARAYAN et al.,
1983). Recomendam-se testes sorolgicos peridicos, de uma a duas vezes por ano, em
animais acima de nove meses (MOOJEN, 2001).
Diversos
estudos
epidemiolgicos
das
Lentiviroses
de
Pequenos
36
37
5. MATERIAL E MTODO
38
n=
p . q . z
d
Onde:
p = Prevalncia esperada (50,00%, uma vez que no existem relatos da
prevalncia de LVPR no municpio de Imperatriz, MA).
q = 100 p
z = 1,96 (intervalo de confiana a 95%)
d = erro amostral ( 5%)
Foram testados 10 animais por rebanho, estratificados segundo a composio
aproximada dos rebanhos (SOUZA NETO, 1987) com um reprodutor, seis matrizes e
trs fmeas jovens (entre 6 e 12 meses), selecionados aleatoriamente.
39
Para fins deste estudo foi coletado sangue por venopuno jugular
utilizando tubo tipo vaccutainer sem anticoagulante (Figura 04), para a realizao da
Imunodifuso em Gel de Agarose utilizando o kit comercial1 seguindo as
recomendaes do fabricante.
40
1998). Terminada a adio dos reagentes, as placas foram incubadas em cmara mida
temperatura em torno de 25C, sendo a leitura final realizada aps 48 horas de
incubao.
Os soros foram considerados positivos quando ocorria a formao de linha
de precipitao entre o poo central (Ag) e o soro testado, apresentando identidade com
a linha formada entre o soro padro e o Ag (Figura 3); no caso de animais negativos no
houve formao de linha de precipitao com identidade.
Onde:
p = prevalncia observada.
p.(100-p)
n
Onde:
= desvio padro;
p = prevalncia observada;
n = nmero de amostras testadas.
Os resultados dos testes sorolgicos foram analisados utilizando-se o teste
41
42
43
OR
(95% IC)
520 (72,2%)
190 (27,8%)
ns
0,9185
426 (60,0%)
210 (30,0%)
71 (10,0%)
ns
0,4469
LVPR -
n (%)
481
176
392
199
66
44
600
500
400
300
481
(92,5%)
200
176
(92,6%)
100
0
39
(7,5%)
14
(7,4%)
Ovinos
Caprinos
Positivo
Negativo
45
2 (50,0%)
Senados La Roque
S. Franscisco do
2 (50,0%)
2 (40,0%)
3 (60,0%)
4 (100,0%)
Ribamar Fiquene
5 (100,0%)
Mont es Altos
4 (80,0%)
Lajeado Novo
1 (20,0%)
Joo Lisboa
1 (25,0%)
It inga
1 (33,3%)
Imperatriz
1 (33,3%)
3 (75,0%)
2 (66,7%)
2 (66,7%)
4 (100,0%)
Davinpolis
4 (80,0%)
1 (20,0%)
Cidelndia
1 (25,0%)
Buritirana
1 (50,0%)
3 (75,0%)
1 (50,0%)
Amarante
3 (100,0%)
2 (33,3%)
Aailndia
0
4 (66,7%)
2
Negativo
Posit ivo
46
47
Fatores
predisponentes
LVPR +
LVPR% -
n (%)
OR
(95%
IC)
LVPR +
LVPR% -
n (%)
OR
(95% IC)
48
Aleitamento
artificial
Realiza
No realiza
Quarentena
Sim
No
Piquete maternidade
Possui
No possui
Marcao
Sim
No
Isolamento de
animais doentes
Isola
No isola
Utilizao de
descartveis
Sim
No
Separao de jovens
e adultos
Realiza
No realiza
17
10
21
9
38 (66,7%)
19 (33,3%)
ns
0,7784
7
20
6
24
13 (22,8%)
44 (77,2%)
ns
0,8288
7
20
9
21
16 (28,1%)
41 (71,9%)
ns
0,9628
3
24
4
26
7 (12,3%)
50 (87,7%)
ns
0,4759
15
12
15
15
30 (52,6%)
27 (47,4%)
ns
0,8778
14
13
19
11
33 (57,9%)
24 (42,1%)
ns
0,5432
3
24
4
26
7 (12,3%)
50 (87,7%)
ns
0,5607
49
50
51
7. DISCUSSO
A maioria dos produtores informou que criam os animais apenas para o
consumo, no entanto, esporadicamente medida que o rebanho cresce, eles vendem o
excedente. Os produtores que criam para consumo prprio (36,36%) no vendem os
animais porque estes so de baixo valor zootcnico. Em contrapartida, os que realizam a
52
53
54
55
Feitosa et al (2010) tambm obtiveram xito no isolamento viral por meio do co-cultivo
de leuccitos com MSC.
O efeito citoptico produzido caracterizado pela formao de clulas
gigantes multinucleadas (sinccio) e lise celular (CAREY & DALZIEL, 1983).
Os padres relacionados ao tipo de efeito citoptico e destruio da
monocamada, de forma geral foram similares com os relatos de isolamento de amostras
lticas de LVPR (NARAYAN et al., 1980; CHEBLOUNE et al., 1996; MARCHESIN
et al., 1997; CASTRO et al., 1998; LIMA, 2004).
56
8. CONCLUSES
Os resultados obtidos por meio da aplicao de questionrio aos produtores,
os testes de imunodifuso em gel de agarose e cultivo celular demonstram que:
57
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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73
IDENTIFICAO DO PRODUTOR
Nome:____________________________________________________Idade:________
Endereo: ________________________________________________________
Cidade: ___________________________ CEP: _____________________________
Telefone de Contato:__________________Com: _______________________
Reside na Propriedade:
( ) Sim
( ) No
Filiado : _______________________________________________________
REBANHO
1)
Ano de Incio da Criao : _________________________________________
2)
3)
Estado: ______
4)
( ) Leite
5)
Tipo de Criao :
( ) Intensiva
( ) Semi-intensiva
6)
( ) Caprina
( ) Ovina
7)
Origem dos Reprodutores: ( ) Comprados
Emprestados
8)
Participa de Feiras de Animais ?
( ) No
Onde ? _________________
9)
Composio de Rebanhos Caprino e Ovino :
( ) Mista
( ) Extensiva
( )Outras__________
( ) Trocados (
( ) Sim
SR
D
Outr
a
Rebanho
Total
( ) Cimentado ( ) Outro
74
12)
Pastagem:
( ) Natural
13)
rea de Pastagem:
( ) Artificial
Natural : __________ ha
( ) Ambas
Artificial : __________ ha
14)
Tipo
de
Pastagem
_____________________________________________
15)
Finalidade da Pastagem Artificial:
Direto ( ) Suplementao Cocho
( ) Feno
16)
( ) No
Artificial:
( ) Silagem (
) Pastoreio
( ) Sim
( ) No
( ) Sim
18)
19)
20)
Mineralizao :
( ) No
( ) Qual : __________________________
( ) Sim
21)
Sala de Processamento de Leite :
( ) No
( ) Tipo : __________________________
22)
Destino do Leite :
( ) Consumo
( ) Sim
) Capim de Corte
( ) Sim
( ) Venda
23)
A Comercializao Feita: ( ) In Natura ( ) Congelado( ) Subprodutos
Em P ( ) Longa Vida
24)
Local de Comercializao:
Municpio ___________
( ) Mesmo Municpio
25)
Fabricao de Subprodutos: ( ) Queijo
( ) Sorvete ( ) Outro ______________
26)
Acompanhamento Tcnico : ( ) No
) Iorgute
( ) Em Outro
(
) Doce de leite
( ) Sim
27)
Profissional que Realiza o Acompanhamento :
( ) Veterinrio
( ) Zootecnista
( ) Engenheiro Agrnomo (
Tcnico em Agropecuria
( ) ADR
28)
Freqncia de Acompanhamento Tcnico :
( ) Semanal
( ) Quinzenal ( ) Mensal ( ) Semestral (
Necessita
29)
( )
( ) Pblico
) S Quando
75
MANEJO SANITRIO:
30)
Numerar, em ordem de importncia, as alteraes clnicas, colocando o mesmo
nmero nas de mesmas importncias.
( ) Aborto
( ) Ectoparasitoses
( ) Artrite
( ) Linfadenite Caseosa - Mal do Caroo
( ) Miases - Bicheiras
( ) Mamites
( ) Ceratoconjuntivites
( ) Pneumonias
( ) Diarrias Freqentes
( ) Pododermatites - Mal dos Cascos
( ) Sintomas Nervosos
( ) Ectima Contagioso
31)
Vermifugao:
( ) No
( ) Sim
Freqncia : ____________
32)
33)
Sim
( ) No
34)
Prticas Zoosanitrias Adotadas com Freqncia :(
) Administrao do
Colostro
( ) Corte e Desinfeco do Umbigo
( ) Marcao
( ) Vermifugao
( ) Permanncia Mnima de 12 Horas Aps a Vermifugao no Curral
( ) Desinfeco do Curral aps Vacinao e Vermifugao
( ) Troca Anual do Vermfugo
( ) Faz Uso de Esterqueiras
( ) Vermfuga os Animais Recm Chegados na Propriedade
( ) Faz Quarentenrio Mesmo dos Animais da Propriedade Aps Feiras
( ) Separa Animais Jovens de Adultos
( ) Separa Machos de Fmeas
( ) Faz Descanso de Pastagens
( ) Enterra ou Crema Animais Mortos com Morte Natural
( ) Os Diagnsticos So Feitos por Tcnicos
( ) Isola Animais Doentes
( ) Possui Piquete Maternidade
( ) Esteriliza Material de Aplicao de Medicamentos
( ) Usa Seringas e Agulhas Descartveis
( ) Faz Aleitamento Artificial
( ) Adota e Cumpre Calendrio Profiltico
Vacinas
Doena
Freqncia
Exames Laboratoriais
76
Doena
Coprolgico
Brucelose
Leptospirose
Tuberculose
Toxoplasmose
CAEV
No
Sim
Observao
Periodicidade
( ) Sim
36)
( ) Sim
37)
Tipo de Diagnstico :
( ) No
( ) Clnico
( ) Laboratorial
38)
Assinale com um "X" , no quadro a seguir, as medidas adotadas no criatrio e
acrescentar outras no citadas.
X
Medidas
Sorologia peridica e sacrifcio dos positivos
Sorologia peridica e separao dos positivos
Sorologia de todos os animais antes e 30 dias aps a compra
Utilizao individual de materiais descartveis ( seringas e agulhas) ou esterilizados
Desinfeco do nmero do tatuador antes do uso em cada animal
Separao imediata das crias e das mes logo aps o parto
Administrao de colostro de cabra termizado e leite pasteurizado ou fervido
Administrao de colostro e leite de vaca como substituto aos de cabra
Utilizao de inseminao artificial com smen congelado procedente de lote testado por
PCR
REPRODUO
39)
Faz Estao de Monta?
( ) No
( ) Sim
40)
Usa Rufies?
( ) No
( ) Sim
41)
Origem do reprodutor
( ) Mesmo Estado (
)
Outro
Estado
______________
42)
Qual a Relao de Reprodutores por Matriz ? ____ Reprodutor : ___ Matrizes
43)
Observa Repetio de Cios? ( ) No
( ) Sim
44)
Faz Inseminao Artificial ? ( ) No
( ) Sim
45)
Faz Diagnstico de Prenhez ?
( ) No
( ) Sim
46)
Faz Pr-Parto ?
( ) No
( ) Sim
77
47)
( ) No
( ) Sim
( ) Sim
49)
Tipo de Marcao:
( ) Brinco ( ) Tatuagem
Corte na Orelha
( ) Outro _________________
50)
Tipo de Colostro Dado s Crias:
( ) Artificial
( )De Cabra
51)
Tratamento do Colostro:
Termizado
52)
53)
Aleitamento:
( ) In Natura
( ) Natural
57)
Local da Ordenha :
( ) Sim
) De Soja
( ) Mecnica
( )1
58)
Higienizao da Sala e/ou Equipamento:
Produto : ___________________________
( )2
60)
Limpeza das Mos e bere: ( ) No
_____________
( ) Mais de 2
( ) Baia
( ) Curral
( ) No
( ) Sim
( ) No
61)
Imerso das Tetas Aps Ordenha:
_______
) Pasteurizado ( )
( ) De Cabra ( ) De Vaca (
( ) Sala
( ) Artificial
( ) Manual
56)
59)
( ) No
54)
Leite Utilizado no Aleitamento :
( ) Artificial
( ) Outro _______
PRODUO DE LEITE
55)
Tipo de Ordenha :
( ) De Vaca
)Medalha
( ) Sim
( ) Sim
( ) No
Produto
( ) Sim
Produto
:
:
62)
Tratamento Preventivo de Mamites em Cabras Secas: ( ) No
Produto: ______________________
( ) Sim
63)
Critrio de Secagem da Cabra : ( ) Baixa Produo
Lactao
( ) Perodo de Gestao ( ) Outro
) Perodo de
64)
78
65)
Local que Vende Cabritos:
( ) Outro Estado
( ) Prprio Municpio
66)
( ) Em P
Vende Animais :
67)
Idade ao Abate:
Mais de 12
( ) Outros Municpio
( ) Abatidos
( ) Menos de 6 Meses
( ) Entre 6 e 12
( ) Recria
69)
( ) No
( ) Sim
( ) Prprio Municpio
( ) Outros Municpio
70)
Destino da Pele:
( ) Outro Estado
68)
Compra Animais Para:
Terminao
Beneficia a Pele?
( )Terminao
) Recria e
( ) Sim
72)
73)
Sim
( ) No ( )
74)
( ) Sim
75)
No
( ) No
AMOSTRAS:
o
N de ordem
Sangue
Protocolo Identificao
N de ordem
Leite
Protocolo
Identificao
79
OBSERVAES ADICIONAIS
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
__________