Metodos de esterilizacion MTODOS FSICOS.

Calor Hmedo. (autoclave)

La utilizacin del calor y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposicin y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos. El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben principal mente a dos razones: 1) El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas son producidas por reacciones que eliminan agua. 2) El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado que el aire.

Ventajas del calor hmedo:

-Rpido calentamiento y penetracin -Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo -No deja residuos txicos -Hay un bajo deterioro del material expuesto

Desventajas:
-No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua -Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos -Costo elevado

Calor Seco. (esterilizador)

El calor seco produce desecacin de la clula, es esto txicos por niveles elevados de electrlitos, fusin de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con stos. La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos requiere mayor temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es baja.

Ventajas del calor seco:

-No es corrosivo para metales e instrumentos. -Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no voltiles.

Desventajas:

-Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor. -Economico

Radiaciones.
La accin de las radiaciones del tipo de radiacin y el tiempo de exposicin.

a). Radiaciones ionizan tes: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos, estructuras proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos, dando lugar a mutaciones en los microorganismos que los incapacitan metablicamente para producir una enzima esencial y sobreviviendo la muerte bacteriana. Las radiaciones tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles (termo sensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos.

b). Rayos Gamma: Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energa atmica. Este tipo de esterilizacin se aplica a

productos o materiales termolbiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibiticos, vacunas, alimentos, etc.

c). Rayos X: Penetran bien, pero requieren mucha energa, son pocos operativos para su empleo masivo, su uso es muy costoso, por lo tanto son muy poco usados con fines de esterilizacin d). Rayos Ultravioletas: Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos. El ADN absorbe una longitud de onda de 2600 y libera energa ocasionado rearreglo de enlaces qumicos son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilizacin en quirfanos.

Mecnicos.
a). Filtracin: En la filtracin se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Los filtros que se utilizan pueden no retener virus o micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin segn el dimetro de poro que se utilice. La filtracin se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones intravenosas, drogas

diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibiticos y vitaminas. Este mtodo es til para identificar microorganismos en muestras de agua potable y otras sustancias. Tambin l aire puede ser sometido a una limpieza exhaustiva provocando su paso a travs de materiales capaces de retener los microorganismos y partculas en suspensin

Tipos de filtros: 1.- Filtros profundos o Filtros de profundidad: Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo. En este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de absorcin y de retencin mecnica en la matriz. 2.- Membranas filtrantes: Tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del poro quedan retenidas en la matriza del filtro debido a efectos electrostticos. 3.- Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): Son pelculas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partcula con un tamao mayor al del poro. b). Sedimentacin: Es un mtodo por el cual los microorganismos son eliminados de depsitos hdricos. Se fundamenta e el hecho

de que la densidad de muchas bacterias es algo mayor de 1.0; en consecuencia, se depositan en el fondo del recipiente que las contiene quedando el lquido sobrenadamente no estril del todo, pero su poblacin microbiana disminuye notablemente. En el laboratorio la sedimentacin se acelera por centrifugacin. Es utilizado este mtodo para identificar microorganismos en muestras de agua potable y otras sustancias.

MTODOS QUMICOS.
Estos mtodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos.

a). Oxido de etileno: Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc. Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus; es un agente microbiano de amplio espectro, destruye la bacteria en estado vegetativo, incluyendo al bacilo de la tuberculosis, las esporas y los virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma, plstico, papel, etc.), equipos electrnicos,bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y adems cancerigeno.

-Otros: b). Aldehdos: Son agentes alquilantes que actan sobre las protenas, provocando una modificacin irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimtica. Estos compuestos destruyen las esporas.

c). Glutaraldehdo: Consiste en preparar una solucin alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar durante 10 minutos para destruir patogenos vegetativos en un 99.8% y 45 minutos para el 100% para desinfectar, y luego un enjuague de 10 minutos. Este mtodo tiene la ventaja de ser rpido y ser el nico esterilizante efectivo fro si se sumerge el material y equipo por 10 horas. Puede esterilizar plstico, goma, vidrio, metal, etc. La solucion se mantiene activa durante 40 dias una vez hecha la mezcla. d) Formaldehdo: Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodn, que despus pueden ser expuesta al calor para una rpida esterilizacin (accin del gas formaldehdo). Tambin pueden ser usadas en Estufas de Formol, que son cajas de doble fondo, en donde se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60 C y pueden esterilizar materiales de ltex, goma, plsticos, etc. Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.

e). Esterilizacin por gas-plasma de Perxido de Hidrgeno: Es proceso de esterilizacin a baja temperatura la cual consta en la transmisin de perxido de hidrgeno en fase plasma (estado entre lquido y gas), que ejerce la accin biocida.

Posee como ventajas:

No deja ningn residuo txico. Se convierte en agua y oxgeno al final del proceso. El material no precisa aireacin. El ciclo de esterilizacin dura entre 54 y 75 minutos.

Desventajas:
No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa, algodn, lquidos, humedad, madera o instrumental con lmenes largos y estrechos.