INSTITUTO TECNOLGICO DE CHETUMAL.

BIOQUMICA I
REPORTE DE PRCTICAS .
POR: CHAN CAMAL FRANCISCO HOY CHUC SILVIA CABRERA RODRIGUEZ CAROLINA TORIZ BRAVO ALETHIA UIZIL COLLI MICHAEL

18/02/2014

PRCTICA DE LABORATORIO

1. INTRODUCCIN El siguiente reporte presenta la segunda etapa de nuestra prctica, que consta de la elaboracin en el laboratorio del extracto acuoso de Cordia sebestena, para la posible determinacin de polisacridos en el tejido vegetal de sus hojas. Aqu se presenta la justificacin sobre la

Estructura algunos polisacridos como el almidn y celulosa (pared celular), para que determinar si existe o no la presencia de polisacridos en la especie, as como apreciar de manera cualitativa los

polisacridos extrados del tejido vegetal de C. sebestena, puede ser til para posteriores investigaciones, como la

importancia de aislar polisacridos del tejido vegetal de hojas, tambin se da a conocer la metodologa utilizada y los materiales necesarios para su preparacin, as como, los resultados obtenidos al concluir con la prctica y una discusin en equipo de lo observado. 2. JUSTIFICACIN La prctica sobre Extraccin de

presencia de actividad antioxidante de la especie, o la posible utilizacin en alguna industria de importancia econmica. 3. OBJETIVOS General: Determinar la presencia de polisacridos en tejidos vegetales. Especfico: 1.- Contribuir al conocimiento general del alumno en tcnicas de laboratorio y uso del mismo. 2.- Contribuir a la educacin integral del alumno, insertando actividades de

polisacridos en tejido vegetal en la especie Cordia sebestena, nos da

entrada a cuestionamientos sobre cul es la importancia de o la finalidad existencia del de

reconocimiento

polisacridos en una especie vegetal, aunado a esto podemos decir, que las plantas de forma natural contienen en su

laboratorio. 3.- Promover que el alumno relacione la importancia de la bioqumica con

actividades relacionadas con la carrera. 4. MATERIALES

Homogeneizador manual, o mortero

molino

(Figura 3.). Nota: Se puede licuar las hojas con el agua destilada para una mejor homogenizacin. 5. Posteriormente, se hierve utilizando un vaso de precipitado por 10 minutos y despus se filtra el contenido. De igual forma se agrega una cucharada de maicena en otro vaso de precipitado, se calienta y mueve hasta homogenizar. (Figura 4). 6. El filtrado se centrifug por 2 minutos por 2500 rpm (4 tubos) (Dos tubos con maicena y dos tubos con el extracto). (Figura 5). Nota: En nuestro caso por falta de tubos que tuvieran el tamao adecuado para la centrifugadora solo se usaron 2 por equipo. (Uno de extracto y el otro de maicena). Si la maicena no se homegeniza bien o se usa demasiada puede llegar a la gelificacin en este caso tendr que repetir de nuevo.

3 Vasos de precipitado de 200 ml. 2 Pipetas de 5 ml. Varilla de vidrio. Una probeta de 100 ml. 2 Vasos de 100 ml. 6 Filtros de caf. 8 Tubos de ensayo. Yodo comercial. Gotero. Guantes de asbesto. Balanza. Maicena. Gradilla. Cuchara (pequea). Parrilla elctrica. Etanol (Alcohol etlico al 95 % ) Hojas de la colecta. Centrifugadora

5. METODOLOGA 7. Se pasa el contenido de los tubos a un 1. Se lavan las hojas con agua purificada. 2. Las hojas se cortan en pedazos de 1 cm (Figura.1). 3. Posteriormente se pesan de 15 a 20 gr. del material vegetal (Figura 2.). 4. Se le agrega al material vegetal 100 ml. De agua purificada y se homogeniza vaso de precipitado de 200 ml se agregan 120 ml de alcohol. Lo mismo con el control. En proporciones; 1 parte de extracto y 2 de alcohol etlico puro o al 95 %. Nota: Se us la cantidad de 5 ml por tubo de ensayo a lo cual se le agreg la cantidad de 10 ml de alcohol en proporciones 1:2. (Figura 6).

8. Posteriormente transferimos la mezcla a 2 tubos de ensayo nuevamente y se volvi a centrifugar sin embargo esta vez fue a por 10 minutos y a 3000 rpm. 9. Se retir de la centrifugadora. 10. Posterior a este paso se re-suspendi en un tubo de ensayo con 5 ml de agua destilada, al igual que el control positivo y negativo ( 5 ml de alcohol etlico). Nota: El control positivo se refiere al alcohol y el control negativo al agua (Figura 7). 11. A continuacin se procedi a aplicar 3 gotas de Yodo a 10 ml de muestra, control positivo y negativo (Figura 8). 12. Se procedi a la toma de fotos para la evidencia. 6. RESULTADOS La muestra revel la presencia de polisacridos en el extracto vegetal, ya que se ti de un color entre azul y negro, y se comprob y compar la coloracin de la muestra al agregar el reactivo (Yodo) a los controles tambin (Agua, Alcohol y Maicena); los cuales a su vez mostraron diferente coloracin. 7. DISCUSIN

El yodo como tal es un indicador de polisacridos ya que debido a

caractersticas propias tie o no una muestra en color azul intenso (cuando se detectan polisacridos) esto es debido a la forma de las cadenas helicoidales, lo que nos hace pensar que es una simple reaccin fsica. Ya que el objetivo de la prctica en s es la deteccin de polisacridos se cumpli el objetivo de una forma cualitativa con los cambios en la coloracin de las muestras. 8. PREGUNTAS. Qu es el almidn? El almidn es un polisacrido, ms especficamente un homo polisacrido de reserva energtica predominante en las plantas, constituido por la unin de grandes cantidades de monmeros de glucosa. Se encuentra en los amiloplastos de las clulas vegetales, sobre todo en las semillas, las races y los tallos, incluidos los tubrculos. Adems de utilizarse como reserva energtica, el principal constituyente de la pared celular de las clulas vegetales, les proporciona la forma y la resistencia para que no se deshidraten.

Qu es la celulosa? En bioqumica la celulosa (C6H10O5)n con un valor mnimo de 200 es un polmero natural, constituido por una larga cadena de carbohidratos polisacridos. Es el principal componente de las paredes celulares de los rboles y de otras plantas. Cul es su importancia biolgica? Y donde puede ser encontrada. Es una molcula de gran abundancia que se encuentra en la madera, plantas y algodn. Su principal importancia es el de ayudar en la parte estructural de la planta, ya que forma tejidos de sostn y es el

Con la prctica obtuvimos conocimiento y logramos comparar las cantidades de polisacridos en los estratos de las hojas obtenidas y el conocimiento de los materiales de laboratorio. Qu otros carbohidratos se podran observar? *Celulosa *Almidn *Agar Primer procedimiento. Alcohol - maicena. Al combinar ambas sustancias se logra apreciar un efecto aceitoso. Al separar en un tubo de ensayo se aprecioms la reaccin, se aglutino la

componente principal de las paredes celulares vegetales. Por qu crees que esta prctica implica una salida de campo? Porque es de gran importancia que nosotros como alumnos y futuros Al combinar sucede de lo mismo que con la maicena, se muestra un efecto aceitoso. Al separarlo en un tubo de ensayo, la muestra se aglutina completamente y se

sustancia recipiente.

en

la

parte

inferior

del

Alcohol extracto de hojas.

bilogos contemos de la experiencia, prctica y conocimiento de aprender a identificar, colectar, herborizar, y manejar las especies herbarias Cmo contribuye esta actividad a tu formacin profesional?

aprecia enseguida que la sustancia queda con ms viscosidad. Segn procedimiento. Agua - Extracto de hojas. Al mezclar el empaquetado con el agua y el yodo se aprecia un cambio de color mbar obscuro con un fondo transparente. Maicena agua.

Al mezclar el empaquetado con el agua y el yodo la mezcla se torna negro completamente. Alcohol yodo. Al combinar las sustancias se torna un color mbar brilloso.

ANEXOS

1. Seleccin de hojas y cortado de las mismas en pequeos trozos de 1 cm x 1 cm.

2. Cortado en trozos de 1 cm x 1 cm y lavado de las hojas con agua purificada

3. Pesado de las muestra de hojas. 20 gr. de muestra

4. Se homogeniza con el molino manual las hojas y 100 ml de agua purificada. Y a su vez se homogeniza una cucharada de maicena con 100 ml de agua.

5. Se calienta en una parrilla elctrica la muestra homogenizada de sustrato y maicena durante 10 minutos

6. En un tubo de ensayo y una

balanza se pesan 5 gramos del sustrato homogenizado y de la maicena.

7. Se centrifuga durante 2 minutos a 2500 rpm. La muestra homogenizada de maicena y de sustrato en una centrifugadora.

8. Se saca de la centrifugadora la muestra y se deposita en un vaso de precipitado agregando una cantidad de alcohol igual a 2 de alcohol sobre una de sustrato ( 5 gr de sustrato: 10 gr de alcohol). Se homogeniza y se colocan 5 gr en un tubo de ensayo y se centrifuga a 3000 rpm durante 10 minutos.

9. Se saca de la centrifugadora la muestras, y se deja solamente el sedimento de la muestra, en otro tubo de ensayo se coloca el sedimento y se le agrega 5 gr de agua, a continuacin se le agrega 3 gotas de reactivo yodo y se observa la distinta tonalidad reaccionando de acuerdo a si existe o no polisacridos dentro de las muestras.