Efeito Do Potencial de Protecao Catodica

EFEITO DO POTENCIAL DE PROTEO CATDICA NA CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA Mariana Machado Galvo
Dissertao Apresentada ao Curso de Psgraduao em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos para a Obteno do Grau de Mestre em Cincias
Orientadora: D.Sc. Eliana Flvia Camporese Srvulo Co-orientadora: D.Sc. Simone Louise Delarue Csar Brasil
Escola de Qumica Universidade Federal do Rio de Janeiro Abril, 2008
EFEITO DO POTENCIAL DE PROTEO CATDICA NA CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA Mariana Machado Galvo
Dissertao submetida ao corpo docente do curso de Ps-graduao em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos da Escola de Qumica da Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ, como parte dos requisitos necessrios a obteno do grau de Mestre em Cincias. Aprovada por:
Eliana Flvia Camporese Srvulo, D.Sc. Orientadora
Simone Louise Delarue Csar Brasil, D.Sc. Co-orientadora
Ladimir Jos de Carvalho, D.Sc.
Mrcia Teresa Soares Lutterbach, D.Sc.
Mrcia Monteiro Machado Gonalves, D.Sc.
Rio de Janeiro, RJ Abril, 2008.
FICHA CATALOGRFICA
Galvo, Mariana Machado. Efeito do potencial de proteo catdica na corroso microbiologicamente induzida / Mariana Machado Galvo. Rio de Janeiro, 2008. xii, 104 p.; il. Dissertao (Mestrado em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos) Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ, Escola de Qumica EQ, 2008. Orientadoras: Eliana Flvia Camporese Srvulo e Simone Louise Delarue Csar Brasil 1. Biocorroso. 2. Proteo Catdica. 3. Bactrias redutoras de sulfato. I. Srvulo, Eliana Flvia Camporese (Orient.). II. Universidade Federal do Rio de Janeiro. Escola de Qumica. III. Ttulo.
ii
Aos meus pais, Marlene e Ruben, que so a base de tudo e pelos quais nutro uma imensa admirao e gratido.
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AGRADECIMENTOS
Profa. Dra. Eliana Flvia Camporese Srvulo, orientadora e amiga,
por toda ajuda, orientao, dedicao, pacincia e amizade ao longo desses 5 anos;
Profa. Dra. Simone Louise Delarue Csar Brasil, por sempre ter
acreditado na aventura de uma microbiologista pelo mundo da eletroqumica;
Lisiane, por toda pacincia nas anlises de pite, fundamentais a
esse trabalho; Marcela e a todos do laboratrio de Geotecnia da COPPE/UFRJ
pela disponibilizao do gerador imprescindvel a realizao dos ensaios;
Aos amigos do laboratrio E-107 e 109: Ju, Thiago, Kally, Ulrich,
Aike e em especial ao Douglas, pelo apoio e momentos de descontrao;
amiga Rayane, pela amizade e ajuda na realizao dos
experimentos da primeira etapa desta tese; Ao Brian Teplica, por toda pacincia e amor; toda minha famlia, em especial s minhas primas Ins e Adriana
e ao meu tio Augusto, pela amizade e incentivo dado; Aos novos amigos do INT, em especial Dra. Mrcia Teresa
Lutterbach, pela oportunidade dada e pelas folgas concedidas na reta final da tese;
Ao CNPq pelo apoio financeiro.
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RESUMO
GALVO, Mariana Machado. Efeito do Potencial de Proteo Catdica na Corroso Microbiologicamente Induzida. Orientadoras: Eliana Flvia Camporese Srvulo e Simone Louise Delarue Csar Brasil. Rio de Janeiro: EQ/UFRJ, 2008. Dissertao (Mestrado em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos).
A proteo catdica uma tcnica extremamente utilizada como mtodo de preveno contra a corroso em estruturas enterradas e submersas. comum considerar como critrio de proteo a aplicao de potencial em valores de, no mnimo, -800 mVAg/AgCl. Contudo, um valor mais catdico (-950 mVAg/AgCl) indicado para proteo de estruturas na presena de bactrias redutoras de sulfato (BRS). No entanto, a presena de depsitos de sulfeto em estruturas metlicas submersas sob proteo catdica tem levado cientistas a questionar se esse potencial est realmente protegendo o metal da atividade das BRS. Esse estudo foi realizado para determinar o efeito de diferentes potenciais de proteo catdica (-800 mVAg/AgCl, -900 mVAg/AgCl e -1000 mVAg/AgCl) na corroso microbiolgica em gua do mar. Cupons de ao-carbono AISI 1020, protegidos e no protegidos por corrente impressa, foram expostos gua do mar natural contendo bactrias indgenas, incluindo BRS, por 7 dias. Ao final dos ensaios foram realizadas as quantificaes de bactrias heterotrficas, bactrias produtoras de cido e BRS ssseis bem como a determinao da atividade hidrogensica. O nmero de microrganismos aderidos s superfcies protegidas foi inferior ao obtido para os cupons no protegidos. Contudo, a atividade hidrogensica aumentou com a aplicao de potenciais mais negativos. A anlise da morfologia da superfcie metlica mostrou maior nmero de pites e pites mais profundos sob cupons protegidos com potenciais mais negativos, o que sugere elevada atividade microbiana sob baixos potenciais de proteo catdica.
ABSTRACT
GALVO, Mariana Machado. Effect of Cathodic Protection Potential on Microbiologically Induced Corrosion. Orientadoras: Eliana Flvia Camporese Srvulo e Simone Louise Delarue Csar Brasil. Rio de Janeiro: EQ/UFRJ, 2008. Dissertao (Mestrado em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos).
Cathodic protection is a technique widely used as a prevention method against corrosion of buried and submerged structures. The application of potentials values below -800 mVAg/AgCl is commonly considered as protection criterion. However, an even more cathodic value of -900 mVAg/AgCl is adopted in the presence of sulfate-reducing bacteria (SRB). Nevertheless, the presence of sulfide-containing deposits on protected steel has led scientists to question if the decreased potential is protecting the metal from SRB activity. This study was performed to determine the effect of different cathodic protection potentials (-800 mV, -900 mV and 1000 mV (Ag/AgCl) on microbial corrosion in seawater. Carbon steel AISI 1020 coupons, both unprotected and protected with impressed current, were exposed to natural seawater containing indigenous bacteria, including sulfate-reducing bacteria, for 7 days. Sessile heterotrophic bacteria, acid-producing bacteria, and SRB quantifications were performed at the end of the essays as well as the determination of hydrogenase activity. The number of microorganisms adhered to the protected steels were lower than to the unprotected ones. However, the hydrogenase activity increased with the application of more cathodic potentials. Analyzes of metal surface morphology revealed a higher number of pits and deeper pits on coupons protected with lower potentials, suggesting a high microbial activity under low cathodic protection potentials.
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NDICE GERAL
CAPTULO I Introduo e Objetivos I.1 INTRODUO I.2 OBJETIVOS CAPTULO I I Reviso Bibliogrfica II.1 CORROSO II.2 CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA II.3 BIOFILME II.4 MICRORGANISMOS QUE PARTICIPAM DA CMI II.4.1 Bactrias oxidantes de enxofre II.4.2 Bactrias redutoras de sulfato II.4.3 Bactrias produtoras de cido II.4.4 Bactrias precipitantes de ferro II.4.5 Bactrias produtoras de exopolissacardeos II.4.6 Fungos II.4.7 Algas II.5 MECANISMOS DE BIOCORROSO II.5.1 Produo de metablicos corrosivos 1 2 4 6 7 8 9 13 13 13 15 16 17 17 18 18 19
II.5.2 Co nsumo de inibido res de co rro so pelo 20 metabolismo microbiano II.5.3 Destruio de revestimentos protetores 20 II.5.4 Induo da formao de clulas de aerao diferencial 20 II.5.5 Despolarizao Catdica II.6 I N C I D N C I A PRTICA EC O N M I C A BIOCORROSO 21 DA 22
II.7 DETECO E MONITORAMENTO DA BIOCORROSO 24 II. 7.1 M to do s micro bio l gico s II.7.2 Anlises fsico -qu imico s II.7.3 Mtodos eletroqumicos 25 25 26
vii
II.8 MTODOS DE PREVENO E CONTROLE DA CMI II.8.1 Limpeza mecnica II.8.2 Limpeza qumica II.8.3 Revestimentos II.8.4 Tcnicas em desenvolvimento II.9 PROTEO CATDICA II.9.1 Mtodo de proteo catdica II.9.2 Mecanismos da proteo catdica II.9.3 Critrios da proteo catdica
28 29 30 30 31 32 33 36 38
II.9.4 Aplicaes prticas dos sistemas de proteo catdica 39 CAPTULO III Materiais e Mtodos III.1 ENSAIOS PRELIMINARES III.1.1 Corpos-de-prova III.1.2 Fluido de processo III.1.3 Sistema III.1.4 Microrganismos III.1.5 Procedimento experimental III.1.5.1 Quantificao celu lar III.1.5.2 Perda de massa / taxa de corroso III.1.5.3 Anlises eletro qumicas III.2 ENSAIOS DE PROTEO CATDICA III.2.1 Corpos-de-prova III.2.2 Fluido de processo III.2.3 Sistema III.2.4 Procedimento experimental III.2.4.1 Quantificao celular III.2.4.2 Perda de massa / taxa de corroso III.2.4.3 A tividade hidro g ensica III.2.4.5 Avaliao da co rro so po r pite 41 42 42 43 44 45 45 47 48 49 49 49 51 51 53 54 55 55 56
III.2.4.4 Dosagem de exopolissacardeo (EPS) 55
viii CAPTULO IV Resultados e Discusso IV.1 ENSAIOS PRELIMINARES IV.1.1 Monitoramento microbiolgico IV.1.2 Perda de massa dos cupons de ao-carbono IV.1.3 Anlises eletroqumicas IV.2 ENSAIOS DE PROTEO CATDICA CAPTULO V Concluses e Recomendaes V.1 CONCLUSES V.2 RECOMENDAES Referncias Bibliogrficas 57 58 58 63 67 71 91 92 94 95
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NDICE DE FIGURAS
Figura 1: Representao do processo de corroso do ferro Figura 2: Modelo de biofilme 7 10
Figura 3: Imagens de pites formados sobre uma superfcie metlica 12 Figura 4: Representao esquemtica da cadeia de transferncia de eltrons em Desulfovibrio, com H2 como fonte de energia e sulfato como aceptor final de eltrons 15
Figura 5: Esquema da interao entre as bactrias produtoras de cido e as BRS na biocorroso Figura 6: Corroso em duto enterrado Figura 7: Biocorroso por aerao diferencial Figura 8: Esquema da despolarizao catdica 16 19 21 22
Figura 9: Duto contendo eletrodos acoplados para monitoramento eletroqumico Figura 10: Curva de polarizao catdica e andica 27 28
Figura 11: Sistema de proteo catdica galvnica ou por anodo de sacrifcio Figura 12: Sistema de proteo catdica por corrente impressa Figura 13: Diagrama de Pourbaix Figura 14: Corpos-de-prova usados nos ensaios preliminares Figura 15: Clula usada nos ensaios preliminares 34 36 38 43 44
Figura 16: Corpo-de-prova usado no ensaio de proteo catdica 50 Figura 17: Superfcie metlica dos corpos de prova antes do incio dos ensaios Figura 18: Sistema utilizado nos ensaios de proteo catdica 50 52
x Figura 19: Clula eletroqumica conectada ao potenciostato e ao computador 53
Figura 20: Colonizao da superfcie de ao carbono AISI 1020 por BRS 59
Figura 21: Clula de ensaio aps 14 dias do experimento com BRS em anaerobiose 60
Figura 22: Variao da populao de microrganismos ssseis nos ensaios com associao de BRS e Pseudomonas 62
Figura 23: Variao da perda de massa ao longo dos experimentos64 Figura 24: Curvas de polarizao para o ensaio conduzido com BRS em anaerobiose 68
Figura 25: Curvas de polarizao para o ensaio na presena de BRS e Pseudomonas em aerobiose 69
Figura 26: Curvas de polarizao para o ensaio na presena de BRS e Pseudomonas em anaerobiose 70
Figura 27: Nmero de microrganismos ssseis nos biofilmes formados sobre ao carbono sem e com aplicao da proteo catdica, em 3 diferentes potenciais Figura 28: Clula de ensaio aps 7 dias de experimento 71 72
Figura 29: Ensaio controle da atividade hidrogensica realizado com bactria hidrogenase negativa 74
Figura 30: Atividade hidrogensica dos biofilmes aderidos aos cupons 75
Figura 31: Evoluo de hidrognio no corpo-de-prova polarizado a 1000 mV Figura 32: Observao microscpica de suspenso do biofilme 76 77
Figura 33: Densidade de corrente de proteo catdica ao longo do tempo 79
xi Figura 34: Desprendimento da camada formada sobre cupom polarizado a -1000mV em gua do mar estril 79
Figura 35: Linhas de tendncia linear obtidas nos ensaio de proteo catdica ao longo do tempo 80
Figura 36: Perda de massa dos cupons metlicos nos ensaios de proteo catdica Figura 37: Aspecto dos cupons aps a decapagem 82 84
Figura 38: Superfcie dos corpos-de-prova sem proteo catdica dos diferentes ensaios realizados 85
Figura 39: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -800 mV 86 Figura 40: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -900 mV 86 Figura 41: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -1000 mV87 Figura 42: Imagens do ataque localizado sobre o cupom protegido 88 Figura 43: Imagens de uma das reas de ataque localizado sobre o cupom protegido a -1000 mV na presena de microrganismos 89
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NDICE DE TABELAS
Tabela 1: Classificao da taxa de corroso do ao carbono Tabela 2: Anlise microbiolgica da gua do mar utilizada 49 51
Tabela 3: Taxas de corroso e classificao do processo corrosivo correspondente para os diferentes ensaios realizados Tabela 4: Concentrao do biopolmero nos biofilmes 67 78
Tabela 5: Taxas de corroso e classificao do processo corrosivo correspondente para os diferentes ensaios de proteo catdica Tabela 83
6: Dados da corroso localizada dos corpos-de-prova 88
protegidos catodicamente na presena de microrganismos
CAPTULO I Introduo e Objetivos
Galvo, M.M.
I.1 INTRODUO
Com o desenvolvimento industrial, a utilizao de instalaes metlicas enterradas ou submersas, tais como oleodutos, gasodutos, adutoras, navios, plataformas de petrleo, tanques de armazenamento, dentre muitas outras, tem sido cada vez mais freqente. Em conseqncia, os problemas de corroso aumentaram em grandes propores, impondo o desenvolvimento e aperfeioamento de novas tcnicas para o seu combate e controle. Quando a corroso das superfcies metlicas ocorre mediante a participao de microrganismos ela denominada biocorroso ou corroso microbiologicamente induzida (CMI). Os microrganismos aderem ao metal formando estruturas denominadas biofilmes. Estas pelculas biolgicas modificam drasticamente as condies da interface metal/soluo formando uma barreira ao contato entre o metal e o meio lquido circundante. Com isso, a corroso microbiolgica ocorre sobre uma superfcie modificada, com caractersticas fsico-qumicas e biolgicas muito particulares, que pode-se considerar biologicamente condicionada. Ignorar este fato e interpretar um processo de corroso microbiolgica com os mesmos parmetros e consideraes que um caso de corroso qumica pode conduzir a um fracasso total num tratamento e inclusive a um agravamento dos problemas que afetam o sistema em questo. Dentre os diferentes mtodos usados para o controle da corroso um dos mais empregados a proteo catdica (PC). Proteger catodicamente uma estrutura significa eliminar, por processo artificial, as reas andicas da superfcie do metal fazendo com que toda a estrutura adquira comportamento catdico. Como conseqncia, o fluxo de corrente eltrica anodo/catodo deixa de existir e a corroso eliminada.
Galvo, M.M.
Esse mtodo especialmente atraente em ambientes marinhos onde a condutividade da gua, por conta da sua salinidade, alta o suficiente para permitir a distribuio uniforme da corrente sobre toda a superfcie da estrutura a ser protegida. Atualmente, a maioria dos oleodutos e gasodutos em operao no Brasil so protegidos catodicamente. Igualmente as plataformas de prospeco e produo de petrleo no mar, em operao, alm das demais estruturas submersas, so tambm protegidas catodicamente. Essa tcnica ainda bastante empregada em tanques de armazenamento, navios e peres de atracao. A maioria das instalaes e equipamentos acima citados construda de ao carbono, um material que por ser relativamente barato e apresentar uma ampla gama de propriedades tem sido extensivamente empregado. Porm, ao carbono apresenta, em geral, baixa resistncia corroso sendo comumente associado a sistemas de proteo catdica quando utilizado em estruturas enterradas, submersas ou, menos freqentemente, em estruturas em concreto. A determinao da corrente de proteo catdica de forma criteriosa fundamental exposta do ao a fim de se evitar e, da o sub no ou o de de superdimensionamento do sistema. No primeiro caso, a estrutura permaneceria empolamento processo corrosivo atravs caso superproteo, alm do gasto desnecessrio, esta poderia ocasionar o revestimento protetor liberao hidrognio bem como a fragilizao da estrutura. A quantidade de corrente aplicada depende, dentre outros fatores, das propriedades eletroqumicas da superfcie metlica e do tipo de filme que formado sobre essa superfcie na PC. Esses dois fatores so influenciados pelos microrganismos que esto presentes naturalmente na gua do mar. A economia da proteo catdica depende da quantidade de corrente necessria para polarizar a estrutura. Em geral, considera-se o valor de 800 mVAg/AgCl para estruturas submersas. No entanto, na presena de bactrias redutoras de sulfato (BRS) tem sido sugerido potencial mnimo de proteo mais negativo (900 mVAg/AgCl)
Galvo, M.M.
(GUEZENNEC, 1994; PINEAU et al., 2003). Alguns autores citam que em ambientes com sulfetos, seria necessria uma corrente maior para proteo catdica; porm, j foram relatados casos onde produtos de corroso associados a BRS foram encontrados abaixo de incrustaes de estruturas polarizadas a -900 mV (ROMERO et al., 2006). As informaes que tratam da interao da proteo catdica e a atividade microbiana so ainda muito limitadas e, geralmente contraditrias. Por isso, considerando a relevncia deste estudo, as poucas publicaes e que a corrente aplicada aos sistemas para proteo das instalaes metlicas varia em funo das condies do material e do ambiente, fundamental avaliar a efetividade do potencial adotado na preveno da corroso em funo da presena e da quantidade de BRS, microrganismos considerados os principais responsveis pelo processo de CMI devido produo de sulfetos, agente extremamente corrosivo. Ademais, h que se determinar tambm a participao de microrganismos produtores de exopolissacardeos que contribuem para que as BRS colonizem mais rapidamente as superfcies slidas.
I.2 OBJETIVOS
O presente trabalho teve como principal objetivo avaliar o potencial de proteo catdica na corroso microbiolgica do ao carbono AISI 1020 atravs da anlise de formao de biofilmes e o ataque decorrente superfcie do metal. Preliminarmente, foram realizados experimentos para obteno de dados a fim de que permitissem definir as condies experimentais. Para tanto o estudo foi dividido em duas etapas: Estudo preliminar realizado com o objetivo de avaliar a ao de BRS e sua associao com cultura de Pseudomonas aeruginosa na
Galvo, M.M.
corroso do material metlico em gua do mar em condio de aerobiose e anaerobiose, atravs de curvas de polarizao e perda de massa;
Ensaios de proteo catdica realizado a fim de se avaliar o efeito da aplicao de diferentes potenciais de proteo catdica na formao de biofilmes atravs de monitoramento microbiolgico e por avaliao de pites.
Galvo, M.M.
CAPTULO II Reviso Bibliogrfica
Galvo, M.M.
II.1 CORROSO
A corroso o resultado de alteraes indesejveis ocorridas em materiais, principalmente metlicos, devido ao qumica e/ou eletroqumica do meio ambiente, associada ou no a esforos mecnicos (GENTIL, 2003). Na corroso eletroqumica, os eltrons so cedidos em determinada regio e recebidos em outra, aparecendo uma pilha de corroso (Figura 1). O processo eletroqumico de corroso pode ser decomposto em trs etapas principais: processo andico passagem dos ons para a soluo; deslocamento dos eltrons e ons observa-se a transferncia dos eltrons das regies andicas para as catdicas pelo circuito metlico e uma difuso de anions e ctions na soluo; processo catdico recepo de eltrons, na rea catdica, pelos ons ou molculas existentes na soluo.
H2O +1/2O2 2OH-
Fe2+
2eCatodo
Fe
Anodo
Figura 1: Representao do processo de corroso do ferro (GENTIL, 2003). A corroso um processo espontneo que est constantemente transformando os materiais metlicos ou no metlicos de modo que deixam de satisfazer os fins a que se destinam (GENTIL, 2003). Nesse contexto, o processo corrosivo assume uma importncia transcendental na vida moderna, que totalmente dependente da utilizao dos metais e suas ligas.
Galvo, M.M.
As estruturas metlicas de grande porte como, por exemplo, oleodutos, gasodutos, adutoras, peres de atracao de embarcaes, tanques de armazenamento de combustveis, plataformas de petrleo, muitas vezes se apresentam enterradas ou submersas onde maior a probabilidade de ocorrer o processo corrosivo. A maioria dessas instalaes representam investimentos de grande monta que, como conseqncia, exigem dos materiais envolvidos durabilidade e resistncia corroso, que no s justifiquem os valores investidos, mas que impeam a ocorrncia de acidentes que so causa de irreparveis e incalculveis danos materiais, ao meio ambiente, e especialmente, aos seres vivos.
II.2 CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA
A efetiva participao dos microrganismos nos processos de deteriorao dos materiais ficou evidente quando teve incio a disposio de estruturas metlicas em solos e ambientes aquticos, onde h presena de uma microbiota diversificada (GONZLEZ et al., 1998). Quando a corroso de um material se processa sob a influncia de microrganismos este processo denominado biocorroso ou corroso microbiologicamente induzida (CMI). A biocorroso est diretamente relacionada com a aderncia de microrganismos na superfcie dos materiais e a sua posterior colonizao. Estas estruturas microbianas, denominadas de biofilmes ou biofouling, so constitudas de agregados celulares, material polimrico extracelular resultante do metabolismo microbiano, matria orgnica e inorgnica e, principalmente, de gua (DAVEY e OTOLLE, 2000). Os microrganismos participam de forma ativa na dissoluo do metal, mas sem modificar a natureza eletroqumica caracterstica do processo corrosivo (COETSER e CLOETE, 2005). Tem-se assim, um
Galvo, M.M.
processo andico de dissoluo metlica e um processo catdico complementar, o qual, dependendo das caractersticas do ambiente (pH, oxignio dissolvido, composio qumica, etc.), transcorrer atravs de algumas reaes catdicas possveis, tais como: reduo de oxignio (em meio aerado e pH aproximadamente neutro) ou reduo de hidrognio (em meio no aerado e pH cido) (VIDELA, 1996). Apesar da participao dos microrganismos no processo corrosivo ter sido comprovada no incio do sculo passado, apenas nas ltimas duas dcadas foi dada a devida importncia aos problemas causados pela biocorroso, o que tem propiciado a interao entre reas to dspares como a microbiologia, a eletroqumica e a cincia dos materiais. Alm disso, estudos utilizando tcnicas mais avanadas como microscopia eletrnica, microeletrodos especficos, capazes de explorar a interface metal/soluo, anlises microbiolgicas e metodologias especficas para deteco de corroso localizada vm permitindo o melhor entendimento da participao dos microrganismos na deteriorao de materiais, o que por sua vez contribuir para o controle da corroso (VIDELA, 2003).
II.3 - BIOFILME
Os microrganismos esto amplamente distribudos na natureza e apresentam tendncia a aderir s superfcies que ofeream condies favorveis ao seu desenvolvimento, formando estruturas denominadas de biofilmes. De acordo com o conceito mais moderno, os biofilmes podem ser definidos como estruturas complexas constitudas de agregados de clulas microbianas inseridas numa matriz exopolissacardica e canais intersticiais, por onde ocorre a passagem do fluido circulante (Figura 2) (LEWANDOWSKI et al., 1995).
Galvo, M.M.
10
Figura 2: Modelo de biofilme segundo Blicq, 2008 (etapas descritas no texto). Os biofilmes ocorrem tanto em ambientes naturais quanto industriais, especialmente quando na fase aquosa h limitao de nutrientes. A adsoro microbiana s superfcies slidas uma conhecida estratgia adotada por microrganismos em meio oligotrfico, de forma a beneficiarem-se do acmulo de nutrientes sobre as superfcies. (CHARACKLIS e MARSHALL, 1990). As etapas de formao do biofilme j foram descritas por diversos autores (LEWANDOWSKI, 2000; BEECH e SUNNER, 2004; JANNING et al., 2005), podendo ser apresentadas, de maneira geral, como: 1) formao de um filme de material orgnico e inorgnico que modifica a distribuio de cargas na superfcie slida, facilitando a aderncia dos microrganismos presentes no lquido (microrganismos planctnicos); 2) adeso e multiplicao de microrganismos aerbios (ssseis); 3) produo de substncias polimricas extracelulares (EPS) por alguns microrganismos;
Galvo, M.M.
11
4) crescimento biofilme;
de
microrganismos
anaerbios
internamente
ao
5) aumento da espessura do biofilme, o que pode favorecer o desprendimento das camadas mais externas. O EPS pode ser constitudo de lipdeos, polissacardeos, protenas e cidos nuclicos. O contedo dessas macromolculas no EPS varia, dependendo da espcie bacteriana produtora e das condies nutricionais e ambientais (CHAN, XU e FANG; 2002). O material polimrico, alm de favorecer a fixao dos microrganismos tambm serve como fonte nutricional no caso de uma condio de estarvao, ou seja, baixa disponibilidade de nutrientes (COSTERTON et al., 1995). As protenas e carboidratos que compem os exopolmeros podem ainda se ligar a ons metlicos atravs de seus grupos funcionais o que pode intensificar o processo corrosivo (BEECH, 2004). Ademais, a presena de EPS no biofilme pode ter ao protetora a diferentes produtos qumicos, como por exemplo, protegendo os microrganismos contra a exposio direta a metais e biocidas que poderiam inativ-los rapidamente caso estivessem livres na fase aquosa (planctnicos). Do mesmo modo, a presena do biofilme impede o contato da superfcie metlica com inibidores de corroso, eventualmente adicionados ao sistema com o objetivo de controlar o processo corrosivo. Estes inibidores so substncias qumicas que, adicionadas em quantidade adequada, inibem as reaes andicas, catdicas ou ambas (GENTIL, 2003). Os biofilmes so ecossistemas microbianos complexos uma vez que nele podem coexistir espcies de diferentes grupos microbianos como bactrias, fungos, algas e protozorios. Cabe salientar que as bactrias so os principais microrganismos envolvidos na formao dos biofilmes. A complexidade das populaes envolvidas, bem como a espessura do biofilme, criam entre outros fatores, um gradiente de aerao atravs das vrias camadas de sua estrutura. Deste modo, so formados diferentes nichos com condies adequadas para o
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desenvolvimento de microrganismos anaerbios, incluindo as bactrias redutoras de sulfato (BRS). As BRS geram metablitos considerados principais causadores da corroso localizada usualmente na forma de pite (CASTANEDA e BENETTON, 2008). A formao de pites se caracteriza por corroso localizada do material em reas limitadas, mas, em geral, de considervel profundidade (GENTIL, 2003). A Figura 3 representa essa forma de corroso.
C
Figura 3: Imagens de pites formados sobre uma superfcie metlica: a) observao feita atravs de estereoscpio (20X de aumento) ; b) por microscopia eletrnica de varredura confocal (CSLM) e c) representao de um corte transversal (SOUZA et al., 2005 e RAO, et al., 2005).
Os sistemas industriais possuem vrias caractersticas que podem favorecer a colonizao de superfcies metlicas por microrganismos, como por exemplo, a ocorrncia de gua estagnada, gua no tratada e vazes intermitentes de fluidos em dutos (LICINA, 1990 apud GONALVES, 2003). A adeso de microrganismos cria uma nova condio na interface metal/soluo que pode favorecer a deteriorao do metal.
Galvo, M.M.
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II.4 - MICRORGANISMOS QUE PARTICIPAM DA CMI
Diversos microrganismos podem participar do processo de biocorroso, direta ou indiretamente. Em geral, os microrganismos que participam da CMI so quantificados e estudados como grupos microbianos. Esses grupos englobam microrganismos de diferentes espcies que apresentam caractersticas em comum. A seguir, sero descritos apenas os grupos microbianos freqentemente isolados e reconhecidamente envolvidos em casos de CMI. II.4.1 Bactrias oxidantes de enxofre A maioria das bactrias envolvidas na CMI fazem parte do ciclo do enxofre na natureza, como o caso das bactrias oxidantes do enxofre. Dentre as bactrias oxidantes de enxofre, destaca-se o gnero Acidithiobacillus, antigamente denominado de Thiobacillus (KELLY e WOOD, 2000), que so microrganismos quimioautotrficos aerbicos que utilizam o dixido de carbono como nica fonte de carbono. Por exemplo, a espcie A. thiooxidans capaz de oxidar 31 g de enxofre por grama de carbono, causando uma elevada acidez no meio, devido produo metablica de cido sulfrico, podendo reduzir o pH a valores inferiores a 0,5 (SAND e GEHRKE, 2003). Essa elevada acidez confere grande agressividade ao ambiente, no apenas para superfcies metlicas, mas tambm para estruturas de pedra e concreto (WARSCHEID e BRAAMS, 2000). II.4.2 Bactrias redutoras de sulfato As bactrias redutoras de sulfato (BRS) encontram-se espalhadas em zonas anaerbicas de diferentes ambientes como solo, sedimentos, guas doce e salgada assim como na boca e intestino de muitos animais, incluindo o homem (MATIAS et al., 2005). Esses
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microrganismos so particularmente relevantes em habitats marinhos devido alta concentrao de sulfato na gua do mar. As BRS so consideradas os principais microrganismos envolvidos no processo de corroso microbiolgica (JAVAHERDASHTI, 1999) e na acidificao de reservatrios de leo e gs pelo sulfeto produzido (RAJASEKAR et al., 2005). As BRS so bactrias heterotrficas capazes de metabolizar fontes de carbono diferenciadas, desde molculas simples at hidrocarbonetos (KNIEMEYER et al., 2007). Membros do gnero Desulfovibrio so os representantes mais estudados deste grupo microbiano (RABUS et al., 2000), os quais utilizam cidos orgnicos, lcoois ou hidrognio molecular como fonte de energia para a reduo do sulfato. O resultado dessa reduo a produo de sulfetos, bissulfetos e gs sulfdrico, assim como produtos metablicos intermedirios (tiossulfato, tetrationatos, politionatos), que possuem um papel importante na corroso anaerbica do ferro (GONZLEZ et al., 1998). O hidrognio um importante componente no metabolismo da maior parte das BRS. Ele pode ser usado como nica fonte de energia, na presena de acetato ou CO2 como fonte de carbono (BRANDIS e THAUER, 1981). As enzimas diretamente envolvidas no metabolismo de hidrognio molecular, chamadas de hidrogenases, so responsveis pela oxirreduo do hidrognio: H2 2H+ + 2e-. As hidrogenases podem ser classificadas em dois grupos
principais em relao aos metais presentes nos stios ativos: [Fe] hidrogenase e [NiFe] hidrogenase. Segundo a reviso de Matias et al. (2005), essas protenas podem ser citoplasmticas, periplasmticas ou ainda estar associadas membrana. Quando uma BRS cresce as custas de hidrognio, a sua oxidao se d pelas hidrogenases periplasmticas. Essas enzimas clivam o H2 liberando prtons no periplasma enquanto os eltrons so transferidos para o citoplasma para a reduo do sulfato, gerando assim um gradiente de prtons atravs da membrana (Figura 4). Essas enzimas vm sendo cada vez mais estudadas devido ao
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seu possvel envolvimento na teoria da despolarizao catdica que ser discutida no item II.5.5.
Figura 4: Representao esquemtica da cadeia de transferncia de eltrons em Desulfovibrio, com H2 como fonte de energia e sulfato como aceptor final de eltrons (MATIAS et al., 2005).
Considerando que as BRS so microrganismos aerotolerantes, a corroso ocorre abaixo de tubrculos (camadas de produto de corroso), sob os quais pode-se encontrar pites profundos, em funo do ataque ao metal pelos sulfetos produzidos durante seu metabolismo (GENTIL, 2003).
II.4.3 Bactrias produtoras de cido
Na natureza encontram-se tambm vrias bactrias heterotrficas que apresentam a capacidade de produzir cidos orgnicos de cadeia curta, tais como os cidos frmico, actico, ltico, propinico, butrico, rico. As assim denominadas bactrias produtoras de cido esto diretamente relacionadas biocorroso pela produo de substncias
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corrosivas. Nos ltimos anos, essas bactrias vm recebendo especial ateno devido a sua relao com as BRS, uma vez que esses cidos secretados podem ser metabolizados pelas BRS (Figura 5). Assim, o efeito sinergtico desses dois grupos microbianos pode intensificar a CMI (BOGAN et al., 2004). A atividade de outras espcies bacterianas tambm pode resultar na gerao de cidos inorgnicos como cido ntrico (Nitrobacter, Pseudomonas), cido nitroso (Nitrosomonas) e cido sulfdrico (BRS, Clostridium) (VIDELA, 2003).
Figura 5: Esquema da interao entre as bactrias produtoras de cido e as BRS na biocorroso (Adaptado de PINEAU, et. al.; 2003).
II.4.4 - Bactrias precipitantes de ferro Dentre este grupo de microrganismos, tambm conhecido como grupo das ferrobactrias, encontram-se as bactrias redutoras e oxidantes do ferro. esto tambm envolvidas na CMI. Dentre as oxidantes do ferro, destaca-se a espcie Acidithiobacillus ferroxidans e os gneros Gallionella e Crenothrix (EDWARDS et al., 2001). Esses
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microrganismos so aerbios e obtm a energia necessria ao seu metabolismo a partir da oxidao do on ferroso a frrico. Em decorrncia desse processo de oxidao, h a formao de hidrxidos de ferro, que por serem em geral insolveis, precipitam sobre as superfcies, possibilitando a corroso por aerao diferencial, a ser descrito no item II.5.4 (STAROSVETSKY et al., 2001). II.4.5 - Bactrias produtoras de exopolissacardeos (EPS) Dentre as bactrias ainda cabe mencionar as do gnero Pseudomonas. Essas bactrias tm importante papel no processo corrosivo, j que produzem polmeros extracelulares (EPS), que protegem as clulas contra os ons metlicos e criam condio de anaerobiose, o que favorece o desenvolvimento das BRS presentes no interior do biofilme (BEECH e GAYLARDE, 1989). Bactrias pertencentes espcie Pseudomonas aeruginosa apresentam capacidade de se associar ao fungo filamentoso do gnero Hormoconis e as BRS em biofilmes formados nas paredes internas de tanques de combustvel de avies a jato. Essas associaes, aparentemente, foram responsveis por graves casos de corroso do alumnio e suas ligas (VIDELA, 2003). II.4.6 Fungos Os fungos filamentosos secretam uma ampla gama de enzimas hidrolticas e oxidativas que frequentemente esto relacionadas com a destruio de revestimentos de estruturas metlicas. Alm disso, alguns fungos produzem cidos orgnicos, podendo ento ocasionar a corroso de materiais metlicos como cobre, ferro e alumnio (JUZELIUNAS et al., 2007). Little et al. (2001) citam a corroso de ao carbono devido produo de metablitos cidos e dixido de carbono por Aspergillus niger e Penicillium sp. Alm disso, os fungos podem contribuir para o aumento da espessura do biofilme.
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II.4.7 Algas
Algumas algas so reconhecidamente capazes de produzir cidos orgnicos (MARCUS e OUDAR, 1995). Entretanto, a maior contribuio das algas em processos corrosivos pode estar relacionada ao favorecimento do crescimento dos outros microrganismos presentes no biofilme. A atividade das algas nos biofilmes gera oxignio, que favorece a produo de EPS pelas bactrias, criando condio de anaerobiose propcia para a atividade das BRS, conseqentemente promovendo a corroso das superfcies abaixo dos biofilmes. Como a quantidade de cido gerada pelas algas no representa risco potencial na deteriorao de materiais, a presena de espcies desse grupo microbiano no interfere diretamente no processo de corroso. Por isso, de um modo geral, a sua quantificao no feita durante o monitoramento microbiolgico dos sistemas industriais (SODR, 1996).
II.5 - MECANISMOS DE BIOCORROSO

Pela natureza eletroqumica da corroso verifica-se o
aparecimento de reas andicas e catdicas na superfcie do material metlico, com a conseqente ocorrncia de um fluxo de corrente eltrica no sentido convencional, das reas andicas para as catdicas atravs do eletrlito, sendo o retorno dessa corrente realizado por intermdio do contato metlico entre essas regies (Figura 6).
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Figura 6: Corroso em duto enterrado (GENTIL, 2003). Os microrganismos participam do processo corrosivo de forma ativa, sem alterar contudo, a natureza eletroqumica do fenmeno, apenas intensificando o processo de corroso atravs de diferentes mecanismos. Cabe ressaltar que os biofilmes so constitudos de consrcios microbianos, assim, todos esses mecanismos que sero descritos a seguir, podem transcorrer de forma simultnea ou consecutiva, sendo muito difcil que um caso de biocorroso se deva a um nico mecanismo. II.5.1 - Produo de metablitos corrosivos Como anteriormente mencionado (item II.4.1 e II.4.3), alguns microrganismos so capazes de sintetizar e secretar cidos durante o seu metabolismo. Esses cidos ao entrarem em contato com a superfcie metlica podem destruir o filme protetor (camada de passivao) de uma determinada superfcie intensificando a corroso (ANGELL, 1999).
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II.5.2 - Consumo de inibidores de corroso pelo metabolismo microbiano Bactrias e fungos podem acelerar a corroso indiretamente, j que algumas espcies apresentam a capacidade de metabolizar substncias usadas para inibir a corroso (MORTON & SURMAN, 1994). Este o caso do consumo fngico de nitratos inibidores de corroso do alumnio como fonte de nitrognio. II.5.3 - Destruio de revestimentos protetores Pode ocorrer ainda a destruio de revestimentos protetores que so aplicados sobre diferentes superfcies metlicas. Muitas vezes, esses revestimentos so de natureza orgnica e podem servir de nutrientes para diferentes microrganismos (DAVIS, 1967). Os cidos produzidos tambm podem contribuir para a degradao desses recobrimentos, assim como os gases formados durante o metabolismo microbiano. Esses gases podem difundir-se, gerando presso em regies que apresentam descontinuidades, como incluses e vazios, ocasionando a formao de bolhas, que levam ruptura da proteo. II.5.4 - Induo da formao de clulas de aerao diferencial O processo de corroso por aerao diferencial ocorre quando um material metlico exposto a regies diferentemente aeradas (Figura 7). Assim, qualquer biofilme que no seja capaz de promover o recobrimento total e uniforme de uma dada superfcie (do metal ou liga), ser um gerador de clulas de aerao diferencial em potencial (GENTIL, 2003).
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Figura 7: Biocorroso por aerao diferencial (BORENSTEIN, 1994). No caso dos biofilmes, a complexidade das populaes presentes, bem como a presena de EPS, evitam a difuso de oxignio. Em conseqncia, se estabelece uma condio de anaerobiose na base do biofilme. Considerando que a formao de biofilme sobre superfcies slidas no capaz de recobrir uniformemente toda a superfcie, criamse regies aeradas e no aeradas, favorecendo a corroso por aerao diferencial (CHARACKLIS e MARSHALL, 1990). II.5.5 - Despolarizao Catdica Em princpio, a dissociao da gua resulta na formao de hidrognio molecular que se adsorve superfcie metlica, polarizandoa e, por conseguinte impedindo a evoluo do processo corrosivo uma vez que detm a recombinao de tomos de hidrognio na zona catdica (Figura 8). Segundo a Teoria da Despolarizao Catdica (VON WOLZOGEN KHR e VAN DER VLUGT, 1961), o processo de biocorroso ocorre na regio catdica pelo consumo enzimtico do hidrognio molecular, mediante a capacidade hidrogensica de algumas BRS, conforme citado no item II.4.2 (POSTGATE, 1984).
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Figura 8: Esquema da despolarizao catdica (POTEKHINA et al., 1999 apud GONALVES, 2002). Essa teoria tem sido questionada nas ltimas dcadas (EDYVEAN et al., 1992; VIDELA, 2001; PINEAU, 2003) por no considerar o efeito corrosivo do sulfeto de hidrognio e/ou sulfeto de ferro, produtos de corroso. Alm disso, considera apenas a ao dos microrganismos que possuem a enzima hidrogenase, no mencionando os demais microrganismos envolvidos no processo corrosivo.
II.6
INCIDNCIA
PRTICA
ECONMICA
DA
BIOCORROSO
Segundo avaliao realizada nos Estados Unidos pelo CC Technologies Laboratories, Inc. sob superviso da U.S. Federal Highway Administration (FHWA) e apoio da NACE (NACE International The Corrosion Society), estima-se que os prejuzos causados pela corroso metlica correspondem a 3,1% do Produto Interno Bruto (PIB) daquele pas, ou seja, aproximadamente 276 bilhes de dlares por ano (KOCH et al., 2001). Calcula-se que um tero desse valor poderia ser
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economizado com o uso de materiais mais resistentes corroso e tcnicas mais adequadas de combate corroso, incluindo a otimizao do projeto e prticas de manuteno mais eficazes. No Brasil, embora no haja levantamentos especficos, comum adotar-se o ndice de 3,5% do PIB com os gastos com corroso, o que corresponderia a cerca de R$ 45 milhes. Contudo, no foi encontrado nenhum levantamento que
correlacione os custos de corroso qumica e microbiolgica. Existe apenas uma estimativa feita por Javaherdashti (1999) que calcula que o custo poderia estar em torno de 20-30% do total da corroso. Esses custos tm origens muito diversas e podem estar relacionados a paradas freqentes das instalaes para limpeza ou substituio de peas corrodas, perdas de produto atravs de tubulaes ou tanques corrodos, alteraes de produto pelo desprendimento de depsitos biolgicos que podem se formar nas paredes de tanques de armazenamento, dutos, etc. Poucas indstrias esto livres da ocorrncia de biocorroso e de outros problemas relacionados formao de biofilmes. Por exemplo, na Gr-Bretanha, 50% dos casos de corroso em tubulaes enterradas foram atribudas a causas microbiolgicas (IVERSON, 1987). A indstria do petrleo, em suas atividades de extrao, processamento, distribuio problemas biolgicos. e Alm armazenamento, pela ao da indstria apresenta corrosiva do petrleo, freqentes associada tambm a e graves causados depsitos
apresentam
problemas de biocorroso as indstrias naval e porturia, as usinas hidroeltricas, as nucleares, as indstrias qumicas e de processos, as refinarias de lcool, os sistemas de distribuio de gs natural, leo e combustveis, de distribuio e armazenamento de gua potvel, entre outras (SILVA et al., 1986; VIDELA, 2003; MOISEEVA e KONDROVA, 2005). J foi relatado caso de biocorroso at mesmo no interior de estao espacial (KLINTWORTH e REHER, 1999).
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Diversos metais e ligas esto sujeitos biocorroso. J foram reportados casos de CMI em ao carbono, lato, cobre, zinco, alumnio e, at mesmo, em metais mais resistentes a corroso qumica, como o ao inoxidvel e o titnio (RAO et al., 2005; JUZELIUNAS et al., 2007). Com o avano tecnolgico, os custos de combate corroso evidentemente se elevam, tornando-se um fator de grande importncia a ser considerado j na fase de projeto de grandes instalaes industriais para evitar ou minimizar sua corroso e consequentemente, prolongar a vida til.
II.7 DETECO E MONITORAMENTO DA BIOCORROSO
Os programas de monitoramento da biocorroso aumentaram em complexidade a partir dos ltimos anos do sculo XX. No final dos anos 80, mesmo em sistemas cujas condies eram indicativas da ocorrncia de corroso microbiolgica, somente se controlava a corroso qumica, a formao de incrustaes e, em alguns casos, a concentrao de bactrias planctnicas. No entanto, tais anlises no permitem detectar ou prever os efeitos prejudiciais da biocorroso (VIDELA, 2002). Uma das tcnicas mais utilizadas para o monitoramento da corroso em dutos a utilizao dos pigs inteligentes ou instrumentados. A passagem desse instrumento internamente ao duto, impulsionados pelo prprio fluido transportado, permite estimar a rea corroda, a sua localizao, bem como a aquisio de dados para posterior classificao do processo corrosivo (TORRES, 2001). No entanto, esses instrumentos so incapazes de detectar a corroso microbiolgica uma vez que esta localizada (pites). O uso de tcnicas de amostragem e monitoramento adequados, complementados por metodologias microbiolgicas e eletroqumicas necessrio para entender os efeitos resultantes da atividade microbiana e o papel dos biofilmes no processo de corroso e, depois, implementar
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medidas de preveno adequadas. Cabe ressaltar que essa avaliao tem de ser realizada para cada sistema em particular, considerando as condies operacionais, composio fsico-qumica da gua utilizada e a concentrao e caractersticas dos microrganismos presentes no sistema (VIDELA, 2003). A seguir sero descritos os mtodos usuais de
deteco/monitoramento da biocorroso.
II.7.1 Mtodos Microbiolgicos
O monitoramento da biocorroso deve ser realizado pelo uso de dispositivos incorporados ao sistema que permitam a avaliao apropriada da populao microbiana planctnica e sssil presente. necessrio identificar os grupos microbianos e enumerar os microrganismos causadores da corroso. Em geral, realiza-se a contagem de bactrias aerbias totais, bactrias redutoras de sulfato, bactrias anaerbias totais e produtoras de cido (VIDELA, 2003). Essa contagem pode ser feita, dentre outras formas, atravs de tcnicas tradicionais de crescimento em meios seletivos, atravs de contagem direta por microscopia, ou ainda atravs de tcnicas moleculares.
II.7.2 Anlises fisico-qumicas
As determinaes do teor de oxignio, sulfeto, cloreto, pH, umidade, so importantes para o monitoramento da gua ou solo onde se encontra a estrutura metlica uma vez que essas variveis influenciam diretamente o processo corrosivo e o metabolismo dos microrganismos.
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II.7.3 Mtodos eletroqumicos
Os mtodos eletroqumicos baseiam-se na natureza eletroqumica dos processos corrosivos, podendo ser utilizados com sucesso em inmeras aplicaes. Esses mtodos permitem a deteco de alteraes sensveis na cintica do processo corrosivo, o que os tornam extremamente atraentes para efetuar o monitoramento in situ da evoluo do processo corrosivo em equipamentos industriais, atravs de sistemas informatizados de aquisio de dados (GENTIL, 2003). O uso de tcnicas eletroqumicas para o monitoramento da corroso microbiologicamente induzida tem sido intensamente estudado. Contudo, uma rea que ainda requer estudos para padronizao e implementao em experimentos de laboratrio e aplicao em campo. Potencial de corroso O potencial de corroso (Ecorr), ou potencial a circuito aberto, pode ser tomado pela diferena entre o metal, imerso no meio corrosivo, e o eletrodo de referncia. Dada a sua simplicidade, a determinao do potencial de corroso tem sido usada em estudos sobre a formao de biofilmes (IGNATIADIS e AMALHAY, 2001). Em dutos, o monitoramento eletroqumico pode ser feito atravs da instalao de segmentos que possuem eletrodos acoplados (Figura 9).
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Figura 9: Duto contendo eletrodos acoplados para monitoramento eletroqumico (TORRES, 2001).
Curvas de polarizao Para o levantamento das curvas de polarizao utiliza-se um potenciostato em conjunto com um eletrodo de referncia e um contraeletrodo para medir o potencial de corroso. A operao consiste em polarizar o eletrodo de trabalho fixando valores de potencial (E) na direo catdica (valores mais negativos), andica (valores menos negativos) ou ambas, registrando os valores correspondentes de corrente eltrica (i) revelados pelo prprio aparelho. A polarizao pode ser feita de dois modos: controlando o potencial (potenciosttica ou potenciodinmica) ou a corrente aplicada (galvanosttica ou galvanodinmica). A partir dos potenciais e das correntes obtidas constri-se as curvas de polarizao que representam as reaes catdica e andica (Figura 10).
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Figura 10: (A) Curva de polarizao catdica e andica e (B) Curva andica mostrando regio de passivao (NUNES, 2007). Essas curvas do indicao da formao de pelculas protetoras quando o metal sofre passivao de algum tipo (ex: ao inox, alumnio em alguns meios). Quando h formao de pelcula protetora, a corrente fica extremamente baixa, seguindo quase paralela ao eixo y. Pode ocorrer ainda a formao de pelcula aps certo fornecimento de corrente (Figura 10b); assim, h uma reduo brusca na densidade de corrente para uma faixa de potencial, at que haja rompimento da camada passivadora por alguma reao andica que promova elevao da corrente. Quando a corrente variada ao longo do processo de polarizao, indicando a ausncia de pelcula passivadora, pode-se dizer que est ocorrendo uma dissoluo ativa, ou seja, o metal est corroendo (Figura 10a). Deste modo, atravs das curvas de polarizao pode-se verificar a formao de filmes protetores, dissoluo ativa do metal no meio e, em alguns casos a corrente de corroso (GENTIL, 2003).
II.8 - MTODOS DE PREVENO E CONTROLE DA CMI
Diversos mtodos podem ser empregados para prevenir e/ou controlar a corroso microbiologicamente induzida. A escolha do
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mtodo ser ditada pela relao custo-benefcio, ou seja, eficincia pretendida e estimativa de custos. Contudo, a fim de selecionar o tratamento adequado deve-se considerar ainda a caracterstica do sistema como o tipo de funcionamento (aberto ou fechado), a caracterstica da gua, a geometria do sistema, os materiais estruturais, etc. A seguir sero relacionados alguns dos mtodos atualmente indicados para preveno da CMI (VIDELA, 2002). A proteo catdica por ser uma tcnica de destaque ser abordada num item a parte (item II.9).
II.8.1 - Limpeza mecnica A limpeza mecnica envolve qualquer mtodo capaz de remover fisicamente depsitos formados sobre superfcies metlicas. Inclui-se a escovao, a utilizao de jatos dgua com alta presso (hydroblast) ou materiais abrasivos e, principalmente, o tratamento por pigging. Esse ltimo o mais empregado na limpeza de dutos e caracteriza-se pela utilizao de instrumentos, denominados pigs, que ao serem inseridos no sistema, se deslocam no interior dele com a presso da gua ou do prprio fluido transportado na tubulao. Durante o seu percurso, o pig remove incrustaes, depsitos orgnicos e qualquer material que esteja aderido parede interna da tubulao. Entretanto, esse tipo de limpeza pode resultar em aumento da concentrao de microrganismos viveis na fase planctnica no impedindo a recolonizao mais a frente do sistema. Assim, torna-se necessria a aplicao freqente desse tratamento, o que sem dvida aumenta o custo operacional. Alm disso, a passagem freqente de pig pode diminuir a espessura da tubulao devido abrasividade do prprio instrumento, podendo aumentar a rugosidade da superfcie, o que facilita a adeso de microrganismos.
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II.8.2 - Limpeza qumica A limpeza qumica geralmente aplicada aps a limpeza mecnica sendo mais efetiva na limpeza de espaos fechados de difcil acesso e zonas de ataque localizado. Nesse tipo de limpeza, pode-se utilizar cidos minerais, cidos orgnicos e quelantes (compostos orgnicos e inorgnicos capazes de formar complexos com ons metlicos). O tratamento com substncias qumicas, denominadas biocidas, um dos mtodos mais utilizados contra a CMI. Em geral, a aplicao destas substncias ocorre depois da limpeza mecnica, sendo mais eficiente em espaos fechados e zonas de ataque localizado. Os biocidas so capazes de eliminar ou inibir o crescimento microbiano e podem ser tanto inorgnicos, como cloro, oznio e bromo, como orgnicos, tais como, isotiazolonas, sais quaternrios de amnio e aldedos (GONALVES, 2002). Os requisitos mais importantes para um biocida de uso industrial so: no ser corrosivo para os metais do sistema, eficcia em baixas dosagens, baixo custo, biodegradabilidade e seletividade para os microrganismos a eliminar (RAMESH e RAJESWARI, 2005). Porm, normalmente os biocidas comercialmente disponveis so txicos e no biodegradveis. Por isso, apesar de ser um dos mtodos mais empregados, o uso freqente de biocidas pode causar poluio ambiental, podendo ainda ser a causa do surgimento de microrganismos resistentes ao produto. Alm disso, na presena de um biofilme espesso, o biocida pode no se difundir da maneira esperada, no eliminando os microrganismos presentes no interior dos biofilmes.
II.8.3 - Revestimentos aplicados por tcnica de pintura A aplicao de revestimentos como mtodo de proteo contra a corroso microbiologicamente induzida focada na aplicao de produtos no txicos como silicone e resinas tipo epxi, entre outros.
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Em geral, os revestimentos constituem um bom mtodo de preveno desde que sejam contnuos, visto que qualquer imperfeio da pelcula pode ocasionar a formao de stios preferenciais para ataque localizado. As pinturas antifouling tambm so usadas como mtodo de controle microbiano, em particular, quando o uso de biocidas restrito, como, por exemplo, em sistema aberto. Como citado anteriormente, os microrganismos podem causar a deteriorao desses revestimentos (item II.5.3). Assim, essa tcnica normalmente aplicada em conjunto com outro mtodo.
II.8.4 - Tcnicas em desenvolvimento b Biofilmes com produo in situ de peptdeos antimicrobianos Este estudo, realizado em escala de laboratrio, utiliza uma espcie de Bacillus geneticamente modificada para a produo de gramicidina S, um composto antimicrobiano (ZUO, 2005). O biofilme formado na presena desta bactria apresentou taxa de corroso inferior, devido reduo do nmero de Desulfovibrio vulgaris ssseis pelo agente anti-microbiano secretado pelas clulas de Bacillus. b Biofilmes regenerativos Pesquisadores do Electric Power Research Institute da Califrnia esto investigando uma nova forma de prevenir a CMI pelo uso de biofilmes polimricos regenerativos produzidos por algumas bactrias (SYRETT, 1995; HERNANDEZ et al., 1994). O uso desse tipo de revestimento seria particularmente vantajoso em relao aos revestimentos usuais devido a sua capacidade regenerativa, no necessitando de manuteno freqente sendo menos susceptveis a danos mecnicos.
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b Excluso biocompetitiva Estratgias de excluso biocompetitiva tm sido avaliadas, principalmente por indstrias de petrleo, para o controle da corroso por BRS (ECKFORD e FEDORAK, 2004; STOTT, DICKEN e RIZK, 2008). Em particular, tem sido estudada a adio de nitrato para estimular o crescimento de bactrias redutoras de nitrato (BRN) em detrimento das BRS. Assim, o crescimento das BRS seria reduzido, minimizando os efeitos da CMI. Esta ttica j est sendo usada em poos de injeo em alguns pases.
II.9 - PROTEO CATDICA

A proteo catdica no uma tcnica recente, sendo utilizada a muitos anos em pases desenvolvidos, depois de ter sido experimentada pela primeira vez, na Inglaterra, em 1824, por um cientista, Sir Humphrey Davy, que realizou um estudo extraordinrio no campo da eletroqumica. Esse cientista fixou pequenos pedaos de outros materiais, como ferro, estanho e zinco, nas chapas de cobre que revestiam os cascos de madeira dos navios, para retardar a sua corroso (DUTRA e NUNES, 1991). No Brasil, o incio da utilizao da proteo catdica se deu por volta de 1964, com a construo do Oleoduto Rio-Belo Horizonte (ORBEL) da PETROBRAS. Atualmente a proteo catdica uma tcnica consagrada no mundo inteiro para combater a corroso de estruturas metlicas enterradas ou submersas, e, em menor grau de aplicao prtica, para a proteo de estruturas de concreto armado (GENTIL, 2003). Proteger catodicamente uma estrutura significa eliminar, por processo artificial, as reas andicas da superfcie do metal, fazendo com que toda a estrutura adquira comportamento catdico. Para tanto, o metal deve ser polarizado em um determinado potencial, de forma a manter o metal em seu domnio termodinmico de imunidade Como conseqncia, o fluxo de corrente eltrica anodo/catodo no material
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deixa de existir e a corroso totalmente eliminada. Os mtodos usados para proteger catodicamente os materiais sero descritos a seguir (item II.9.1). Teoricamente, com a utilizao da proteo catdica consegue-se manter as estruturas metlicas completamente imunes corroso por tempo indeterminado, mesmo para superfcies sem qualquer tipo de revestimento e expostas a condies extremamente agressivas (NUNES, 2007). Porm, a sua aplicao mais vantajosa quando as superfcies metlicas so previamente revestidas, j que, desta forma, a rea a proteger substancialmente reduzida, diminuindo, portanto, a corrente necessria. A grande vantagem dessa tcnica permitir o controle seguro da corroso em instalaes que, por estarem enterradas ou imersas, no podem ser inspecionadas ou revestidas periodicamente.
II.9.1 - Mtodos de proteo catdica Para a obteno da proteo catdica, dois mtodos podem ser empregados: proteo catdica galvnica e a proteo catdica por corrente impressa. Ambos os mtodos apresentam o mesmo princpio de funcionamento, que o de injeo de corrente eltrica na estrutura atravs do eletrlito. A escolha, na prtica, do mtodo a ser utilizado, depende da anlise de vrias consideraes tcnicas e econmicas, sendo que cada um tem vantagens e desvantagens. Proteo catdica galvnica Neste processo, tambm denominado de proteo catdica por anodos de sacrifcio, o fluxo de corrente eltrica fornecido origina-se da diferena de potencial existente entre o metal a proteger e outro escolhido como anodo, que deve apresentar potencial mais negativo de acordo com a Tabela de Potenciais (GENTIL, 2003). Esses metais, utilizados em ligas apropriadas, so eletronegativos em relao ao ao,
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podendo proteg-lo com facilidade. Na prtica, para a utilizao em solos, o magnsio e o zinco so bastante eficientes. J para a gua do mar, o zinco e o alumnio so os mais indicados. Os anodos galvnicos, quando empregados enterrados, devem ser envoltos em uma mistura de gesso, bentonita e sulfato de sdio, enchimento condutor. Esse enchimento permite a diminuio da resistividade eltrica anodo/solo, reduz os efeitos da polarizao do anodo e distribui uniformemente o seu desgaste (Figura 11).
Figura 11: Sistema de proteo catdica galvnica ou por anodo de sacrifcio (IEC, 1990).
Quando se dimensiona um sistema de proteo catdica com anodos de sacrifcio, uma das preocupaes primordiais do projetista deve ser o clculo de sua vida, uma vez que em funo dela sero considerados os aspectos econmicos para a deciso sobre a sua utilizao. Dentre as principais vantagens desse mtodo de proteo catdica pode-se destacar: No requer suprimento de corrente alternada no local. Os custos reduzidos com manuteno.
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No oferecer risco de superproteo. Por outro lado, a quantidade de corrente fornecida estrutura limitada pela diferena de potencial, bastante baixa, entre os anodos e a estrutura. Alm disso, a proteo ficar muito mais difcil se as resistividades eltricas do meio no local no forem suficientemente baixas.
Proteo catdica por corrente impressa Nesse processo o fluxo de corrente fornecido origina-se da fora
eletromotriz de uma fonte geradora de corrente eltrica contnua, sendo muito utilizados na prtica os retificadores que, alimentados com corrente alternada, fornecem a corrente eltrica contnua necessria proteo da estrutura metlica (Figura 12). Para a disperso dessa corrente eltrica no eletrlito so utilizados anodos especiais inertes, ou seja, anodos que apresentam um desgaste muito baixo. A grande vantagem do mtodo por corrente impressa consiste no fato de a fonte geradora (retificador de corrente) poder ter a potncia e a tenso de sada necessrias. Podendo assim, ser aplicado em qualquer meio, mesmo naqueles cujo eletrlito seja de elevada resistividade eltrica. Alm disso, esse mtodo pode ser aplicado, com economia, para a proteo de instalaes metlicas de grande porte.
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Figura 12: Sistema de proteo catdica por corrente impressa (IEC,1990). II.9.2 - Mecanismos da Proteo catdica Alguns mecanismos ocasionam a reduo da corroso quando se aplica a proteo catdica: 1. O potencial do metal reduzido de modo a atingir um valor tal que, termodinamicamente, impea que a reao M Mn+ + neocorra na superfcie metlica, o que no Diagrama de Pourbaix (Figura 13), corresponde a zona de imunidade. 2. O eletrlito adjacente superfcie metlica se torna mais bsico devido reduo dos ons hidrognio, H+, ou reduo do oxignio 2H2O + 2e- H2 + 2OH- (1) H2O + O2 +2e- 2OH- (2) As reaes (1) e (2) levam a um aumento na alcalinidade que, tem um efeito benfico na proteo de estruturas em gua do mar. O bicarbonato presente na gua do mar, em condio alcalina gerada pela
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reao catdica, tende a formar carbonatos. Por sua vez, a precipitao de carbonatos de clcio e de magnsio reconhecidamente importante por agir como uma barreira fsica contra o ataque generalizado da corroso, podendo reduzir o teor de oxignio dissolvido em contato com as superfcies os metlicas. custos da Consequentemente, proteo catdica. h A a reduo da densidade de corrente necessria para manter um dado potencial, o que minimiza formao destes precipitados pode ser dada por: HCO3- + OHMg2+ + 2OHCa2+ + CO3= Ca2+ + Mg2+ + 2CO3=

H2O + CO3= (3) Mg(OH)2 (4) CaCO3 (5) CaCO3.MgCO3 (6)
A corrente aplicada ao metal deve ser tal que situe o potencial eletroqumico da estrutura metlica na regio de imunidade, que pode ser determinado pelo diagrama de equilbrio eletroqumico potencial versus pH (Eh x pH), tambm denominado diagrama de Pourbaix (Figura 13). De acordo com o diagrama para o sistema Fe-H2O, a 25C e 1 atm, verifica-se que, em funo do pH do meio, h um potencial abaixo do qual o metal se encontra imune corroso, ou seja, o ferro se encontra em seu estado metlico.
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Figura 13: Diagrama de Pourbaix (GENTIL, 2003). II.9.3 - Critrios de proteo catdica Alguns critrios tm sido adotados na prtica para se determinar o potencial que a estrutura metlica deve atingir na proteo catdica (NUNES, 2008). Dentre eles, destacam-se: (a) critrio de 100 mV mais negativos do que o potencial natural; (b) aplicao de um potencial mnimo de proteo. Na prtica, o critrio (b) o mais empregado. Neste caso, para alcanar tal potencial, na proteo por corrente impressa o retificador deve ser ajustado a este novo valor de potencial. Na proteo galvnica, o potencial alcanado pela estrutura ser funo da diferena de potencial entre o metal a proteger e o metal usado como anodo de sacrifcio.
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Em geral, considera-se o valor de 800 mVAg/AgCl para estruturas submersas. No entanto, algumas normas internacionais sugerem a adoo de um potencial mnimo de proteo mais negativo na presena de BRS, de 900 mVAg/AgCl, (BS 7361-1, 1991; ISO 15589-1, 2003; DNVRP-B401, 2005). Segundo essas normas, em ambientes com sulfetos, seria necessria uma corrente ainda maior para proteo catdica, por isso seria necessria essa reduo de potencial. Convm ressaltar que o potencial proposto para proteo na presena de BRS ainda no apresenta base cientfica comprovada dependendo, portanto, de estudos investigativos que relacionem os processos eletroqumico e microbiolgico.
II.9.4 - Aplicaes prticas dos sistemas de proteo catdica Atualmente todos os oleodutos e gasodutos, existentes em operao no Brasil, so protegidos catodicamente, a maior parte deles com sistemas por corrente impressa. A grande maioria das principais adutoras de ao das Companhias de Saneamento do Brasil est tambm protegida catodicamente. Como principais exemplos podem-se citar os sistemas de gua das cidades de So Paulo, Rio de Janeiro, Vitria e Salvador. Todas as plataformas de prospeco e produo de petrleo no mar, atualmente em operao, so tambm protegidas catodicamente. Essa tcnica ainda bastante empregada em tanques de armazenamento, minerodutos, navios e peres de atracao. O custo total estimado para a proteo catdica nos EUA de 2,22 bilhes de dlares por ano. Esse custo est relacionado com a instalao e operao do sistema assim como com a substituio de anodos de sacrifcio corrodos (KOCH et al., 2001). De uma maneira geral, acredita-se que sistemas de proteo catdica, principalmente quando por anodos galvnicos, no
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necessitam de manuteno. Essa crena destituda de fundamento, uma vez que a proteo catdica das estruturas depende do funcionamento permanente do sistema instalado. Qualquer que seja o sistema instalado, proteo catdica por anodos galvnicos ou por corrente impressa, que deve-se estabelecer os ajustes um programa de acompanhamento possibilite quando necessrio.
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CAPTULO III Materiais e Mtodos
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O presente captulo tem como objetivo apresentar os materiais, os equipamentos e os meios/solues utilizados nos diversos ensaios realizados neste trabalho, assim como descrever todos os procedimentos experimentais adotados. Antes de iniciar os experimentos de proteo catdica foram feitos ensaios preliminares a fim de definir as condies em que os ensaios de proteo catdica iriam ser conduzidos.
III.1 ENSAIOS PRELIMINARES
Nesta etapa, foi estudada a ao de BRS na corroso do ao carbono atravs de curvas de polarizao, perda de massa e quantificao de microrganismos. Tambm foi feito o estudo da associao de BRS e Pseudomonas tanto em condio de aerobiose quanto de anaerobiose a fim de se definir a influncia do oxignio e da participao de microrganismos produtores de exopolissacardeos na corroso microbiologicamente induzida.
III.1.1 Corpos-de-prova Foram usados cupons metlicos de ao carbono AISI 1020 devido ao seu extenso uso em instalaes industriais e porturias. Estes cupons apresentaram diferentes formatos e dimenses dependendo da finalidade do seu emprego, conforme detalhamento a seguir: Ensaios de perda de massa e quantificao celular - foram usados corpos-de-prova retangulares com rea total de aproximadamente 14 cm2, considerando as duas faces do cupom (Figura 14a). Estes cupons foram submetidos a um tratamento prvio consistindo do jateamento de areia para a remoo de possveis incrustaes, seguido da imerso em acetona para desengraxamento e, por fim, da secagem com jato de ar quente. Os cupons foram mantidos
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em dessecador at o momento de uso, quando foram pesados ao dcimo de miligrama. Ensaios eletroqumicos foram usados cupons retangulares com rea mdia de 1,5 cm2, soldados a um fio de cobre de modo a efetuar as conexes eltricas (Figura 14b). O metal foi embutido em resina para que apenas uma de suas faces ficasse exposta. Antes do uso, os cupons foram lixados com lixas de 100 a 600, desengordurados por imerso em acetona e secos com jatos de ar quente. Em seguida, foram recobertos com camada de esmalte e mantidos em dessecador para evitar a sua oxidao. No momento da insero dos cupons no sistema, a camada de esmalte foi retirada com acetona.
(a)
(b)
Figura 14: Corpos-de-prova usados nos ensaios: (a) perda de massa e quantificao celular e (b) eletroqumicos.
III.1.2 - Fluido de processo Nos ensaios preliminares foi utilizada gua do mar coletada na praia de Itacoatiara, regio Ocenica de Niteri/RJ, tomando-se o cuidado de manter-se distante de zonas residenciais com o propsito de
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garantir baixo teor de matria orgnica e uma quantidade reduzida de microrganismos. A gua foi posteriormente esterilizada por filtrao em membrana Millipore de 0,22 m de porosidade e armazenada em frascos estreis temperatura ambiente at o momento de uso. A quantidade total de gua usada nos experimentos veio de uma nica coleta. Antes de cada uso foram feitos testes de esterilidade atravs da inoculao de alquotas em caldo nutriente (Merck No. 5443), Postgate E (POSTGATE, 1984) modificado e meio fluido ao tioglicolato (Difco 256), para a deteco de bactrias aerbicas, redutoras de sulfato e anaerbicas, respectivamente.
III.1.3 - Sistema Os ensaios foram conduzidos em cubas de vidro de 1 L de capacidade, dotadas de um eletrodo de referncia (Ag/AgCl) e de um contra-eletrodo de ao inoxidvel. As cubas foram dispostas sobre placas de agitao. Durante todo perodo do ensaio, o sistema foi ligeiramente agitado de modo que as clulas planctnicas fossem mantidas em suspenso, sem risco de ocorrer arraste dos biofilmes formados. Na Figura 15 pode ser visualizada a representao do sistema utilizado.
Figura 15: Clula usada nos ensaios preliminares.
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Antes de cada experimento, a cuba foi desinfetada por imerso em soluo de 6 g/L de metabissulfito de sdio. Aps 24 horas de contato, foram realizadas lavagens sucessivas com gua destilada estril, para total remoo do desinfetante. Em seguida, 800 mL de gua do mar estril (item III.1.2) foram introduzidos na cuba de ensaio. Nutrientes tambm foram adicionados para garantir a formao de biofilmes e a viabilidade das clulas planctnicas e ssseis, no decorrer do perodo de ensaio. Com este fim foi feita uma nica adio de nutrientes no incio do experimento, constando de 50 mL do meio Postgate E modificado pela no adio de agar-agar e sulfato ferroso e de 50 mL de caldo nutriente. Os corpos-de-prova foram fixados no interior da cuba atravs de fios de nylon (perda de massa) ou hastes de metal revestidas de plstico (ensaios eletroqumicos), paralelamente s paredes da cuba. Todo o procedimento foi realizado em cmara de fluxo laminar de modo a evitar contaminao.
III.1.4 - Microrganismos Os ensaios realizados no estudo preliminar foram conduzidos na presena de diferentes culturas microbianas: Cultura mista enriquecida de BRS obtida a partir de cultivos
sucessivos de amostra de gua de um sistema de resfriamento de uma indstria petrolfera em meio Postgate E modificado (Postgate, 1984). Cultura de Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, gentilmente cedida
pelo INCQS/FIOCRUZ e mantida em gar nutriente (Merck No. 5443).
III.1.5 - Procedimento experimental Os ensaios foram conduzidos com o intuito de avaliar a corroso pelas culturas microbianas consideradas os principais responsveis
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pela CMI e deste modo definir as condies para a continuidade do trabalho. Para tanto, foram realizados 3 experimentos; BRS em anaerobiose; BRS/Pseudomonas em aerobiose; BRS/Pseudomonas em anaerobiose; Cada clula de ensaio (Figura 15) foi preenchida com gua do mar estril acrescida de nutrientes. As culturas foram inoculadas de modo a estabelecer uma concentrao inicial de 108 NMP/mL. Os experimentos foram conduzidos temperatura ambiente e sob agitao branda. O sistema foi projetado de modo a permitir a entrada de ar durante os ensaios. Para os ensaios conduzidos em condies de aerobiose, a abertura foi fechada com rolha de algodo hidrfobo para evitar a contaminao do sistema. Nos ensaios conduzidos em anaerobiose o fluido foi purgado com gs inerte (N2) at reduzir a concentrao de oxignio a valor inferior a 1ppm, e a seguir vedado com rolha de borracha. Os experimentos foram periodicamente monitorados para controle do oxignio dissolvido. Em aerobiose, a concentrao de oxignio variou de 7,7 a 8,1 ppm. Nos experimentos realizados em anaerobiose a cada abertura do sistema para retirada de cupons eram tambm realizadas purgas com nitrognio de modo a garantir um teor reduzido de oxignio dissolvido. O tempo total foram de cada experimento foi de 28 dias e, de
semanalmente,
feitas
anlises
eletroqumica
(curvas
polarizao), fsico-qumicas (perda de massa/pH) e microbiolgicas (BRS/Pseudomonas). Dos 9 corpos de prova inseridos no sistema para cada ensaio, quatro (Figura 14a) foram utilizados para quantificao de microrganismos ssseis (com 7, 14, 21 e 28 dias) e, aps remoo do biofilme, para as determinaes da perda de massa. Nas determinaes eletroqumicas foram utilizados cinco cupons (Figura 14b) dispostos ao
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redor do contra-eletrodo de ao inox, de tal modo a receber igualmente a corrente eltrica sobre as faces expostas. As curvas de polarizao foram feitas no incio do ensaio e com 7, 14, 21 e 28 dias. Os ensaios foram realizados no mnimo em duplicata a fim de garantir um desvio inferior a 10%. Todos os resultados apresentados foram expressos em valores mdios. III.1.5.1 - Quantificao celular Os cupons, retirados assepticamente do sistema foram raspados com o auxlio de uma esptula estril em soluo redutora a fim de se obter uma suspenso celular. A partir dessa suspenso foram feitas diluies decimais sucessivas de 1 mL que foram inoculadas em meios adequados para a quantificao de cada um dos grupos microbianos. Pseudomonas aeruginosa A quantificao desta bactria foi feita por contagem de unidades formadoras de colnias (ufc) pela tcnica pour-plate em placas de Petri contendo gelose nutriente (Merck No. 5443). A quantificao celular foi determinada aps um perodo de incubao de 48 horas a 30 1C. Bactrias redutoras de sulfato (BRS) A quantificao deste grupo microbiano foi feita atravs da tcnica do nmero mais provvel (NMP) (HARRISON, 1982) em meio Postgate E modificado (POSTGATE, 1984) de composio em g/L: KH2PO4 0,5; NH4Cl 1,0; CaCl2.6H2O 1,0; MgCl2.7H2O 2,0; NaCl 30,0; extrato de lvedo 1,0; cido ascrbico 0,1; FeSO4.7H2O 0,5; agar 1,9; lactato de sdio 7 mL e soluo de resazurina (0,025%) 4 mL. A condio de anaerobiose foi garantida atravs da purga e distribuio do meio com N2 e vedao dos frascos tipo penicilina com rolhas de borrachas e lacres metlicos. A determinao do crescimento celular foi feita aps o perodo de incubao de 28 dias a temperatura de 30 1C.
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III.1.5.2 - Perda de massa/Taxa de corroso
Aps a remoo dos microrganismos aderidos, os cupons foram tratados, segundo Norma ASTM G1-03 (2003) que padroniza a metodologia para medidas de perda de massa em laboratrio. Esse tratamento consiste na imerso dos corpos-de-prova em soluo de Clark por 30 segundos. Este tempo foi definido aps levantamento da curva de decapagem. A soluo de Clark, consistindo de cido clordrico (HCl), xido de antimnio III (Sb2O3) e cloreto estanhoso (SnCl2), promove a decapagem do metal, isto , elimina os produtos da corroso aderidos superfcie. Em seguida, os cupons foram lavados com gua destilada, seguida de lcool anidro e, finalmente, secos com jato de ar quente. Ao final do tratamento, os cupons foram pesados em balana analtica ao dcimo de miligrama. O valor correspondente diferena dos pesos de cada cupom antes e aps os ensaios, divididos pela rea total do corpo-de-prova representa a massa perdida num dado tempo. Os resultados de perda de massa foram utilizados no clculo da taxa de corroso de acordo com a seguinte equao:
Taxa de corroso (mm/ano) = perda de massa (g) x 365 (dias/ano) x 10 (mm/cm) densidade do metal (g/cm3) x rea(cm2) x tempo (dias)
Com o intuito de avaliar a taxa de corroso do ao carbono durante o ensaio de perda de massa, foi adotada a Norma NACE RP-0775 (1999) que define a intensidade do processo corrosivo.
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Tabela 1: Classificao da taxa de corroso do ao carbono Taxa de corroso uniforme (mm/ano) < 0,025 0,025 a 0,120 0,130 a 0,250 > 0,250
Fonte: Norma NACE RP-07-75
Corrosividade Baixa Moderada Alta Severa
III.1.5.3 - Anlises eletroqumicas Foi utilizado o potenciostato Omnimetra modelo PG40 para o levantamento de polarizao andicas e catdicas. As curvas foram feitas atravs da tcnica potenciocintica e a velocidade de varredura dos ensaios foi de 20 mV/min. A cada semana utilizava-se um corpode-prova diferente para cada polarizao. Como referncia foi adotado o eletrodo de prata/cloreto de prata (Ag/AgCl) e como contra-eletrodo foi utilizado o ao inoxidvel.
III.2 - ENSAIOS DE PROTEO CATDICA
III.2.1 - Cupons metlicos Foram usados corpos-de-prova retangulares de ao carbono AISI 1020 (Figura 16a), com rea total aproximada de 12,4 cm2 consideradas ambas as faces, que foram afixados a uma haste de ao inoxidvel (Figura 16b) revestida de material isolante para possibilitar as conexes eltricas necessrias ao ensaio.
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A
haste de ao inox (b).
Figura 16: Corpo-de-prova usado no ensaio de proteo catdica (a) e
Antes do uso, os cupons foram lixados usando lixas no 100 a 1500, desengordurados por imerso em acetona e secos com jato de ar quente de modo a obter uma superfcie uniforme e livre de imperfeies que impediriam a determinao da densidade de pites (Figura 17).
Figura 17: Superfcie metlica dos corpos de prova antes do incio dos ensaios.
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III.2.2 - Fluido de processo
Nos Niteri/RJ,
experimentos local
conduzidos
para
avaliao elevado
da
proteo nvel de
catdica, a gua do mar foi coletada na Praia da Boa Viagem, reconhecidamente com microrganismos, resultante do constante despejo de rejeitos domsticos. Essa gua foi utilizada como fonte de nutrientes e de microrganismos, em funo do seu contedo de matria orgnica e da quantidade e diversidade da populao microbiana, nela j determinadas, o que era fundamental para a execuo dos experimentos. A anlise microbiolgica da gua utilizada apresentada na Tabela 2. A coleta foi feita durante o perodo de mar baixa e no mesmo dia do incio do experimento tanto para minimizar as variaes das caractersticas microbiolgicas e qumicas, quanto para manter a integridade da microbiota indgena posto que o estudo tinha como meta estabelecer o efeito de diferentes potenciais sobre populao sssil de BRS, em condies ambientais. Portanto, a presena de uma microbiota indgena era fundamental. Tabela 2: Anlise microbiolgica da gua do mar utilizada ANLISE Bactrias Aerbias (ufc/mL) Bactrias produtoras de cido (NMP/mL) BRS (clulas/mL)
ufc unidades formadoras de colnia Os resultados foram expressos em valores mdios de 5 determinaes.
CONCENTRAO CELULAR 6,86 x 105 3,10 x 103 2,50 x 101
III.2.3 Sistema Foi utilizada a mesma clula do ensaio anterior (item III.1.3) previamente esterilizada conforme descrito. Os ensaios foram
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conduzidos com 800 mL de gua do mar in natura. Para cada ensaio foram inseridos 4 corpos-de-prova idnticos (Figura 16a) no sistema: dois para serem acoplados ao potenciostato e, portanto, protegidos catodicamente, enquanto os demais permaneciam sem nenhuma proteo para fins comparativos. Um eletrodo de referncia de Ag/AgCl e um contra-eletrodo de platina tambm foram inseridos ao sistema (Figura 18A(I)). Foi adicionada alquota de um cultivo de clulas ativas de BRS de 3 dias a fim de estabelecer concentrao inicial de aproximadamente 108 clulas/mL.
I A A B
Figura 18: Sistema utilizado nos ensaios de proteo catdica. A) clula de ensaio, (I) Contra-eletrodo de platina; B) Disposio dos eletrodos na clula de ensaio: 1 e 2 Corpos-de-prova sem proteo catdica, 3 e 5 Corpos-de-prova protegidos catodicamente, 4 Eletrodo de Referncia e 6 Contra-eletrodo.
A corrente necessria para fixao do potencial foi dada atravs do Potenciostato Microqumica MQPG-01 conectado a um computador (Figura 19). O potencial aplicado foi medido com Multmetro (Minipa Et 20 33) atravs do eletrodo de referncia de prata/cloreto de prata.
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Figura 19: Clula eletroqumica conectada ao potenciostato e ao computador.
III.2.4 Procedimento experimental
Nesta etapa os cupons metlicos foram polarizados em trs diferentes potenciais na presena e ausncia de microrganismos a saber: -800 mV
Ag/AgCl
valor admitido na prtica para proteo de
estruturas metlicas; -900 mV

Ag/AgCl
- potencial empregado na presena de BRS; esse valor foi empregado a fim de simular um caso
-1000 mV
Ag/AgCl
de superproteo. Para fins comparativos foram realizados ensaios controles
simultaneamente sem proteo catdica, com e sem a presena de microrganismos: Controle bitico I: cupom inserido na clula com
microrganismos (-800 mV) no polarizado;
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Controle
bitico
II:
cupom
inserido
na
clula
com
microrganismos (-900 mV) no polarizado; Controle bitico III: cupom inserido na clula com
microrganismos (-1000 mV) no polarizado; Controle abitico I: cupom inserido na clula sem
microrganismos (-800 mV) no polarizado; Controle abitico II: cupom inserido na clula sem
microrganismos (-900 mV) no polarizado; Controle abitico III: cupom inserido na clula sem
microrganismos (-1000 mV) no polarizado; Os sistemas foram conduzidos em aerobiose, temperatura ambiente e sob agitao magntica branda. O tempo total de cada experimento foi de 7 dias, quando foram feitas as quantificaes celulares (BRS, bactrias heterotrficas aerbicas totais e produtoras de cido), as anlises de perda de massa, quantificao de exopolissacardeos, atividade hidrogensica e as determinaes de pites (inspeo visual e medida da profundidade).
III.2.4.1 - Quantificao celular Nos ensaios de proteo catdica foi adotada a mesma
metodologia descrita para remoo dos biofilmes dos cupons metlicos (item III.1.5.1). Porm, tanto os cupons que estavam sob proteo quanto os que no estavam foram raspados em tampo fosfato 10mM (pH 7,0) estril purgado com N2. Foi utilizado o tampo ao invs da soluo redutora a fim de que a determinao de exopolissacardeo do biofilme fosse possvel. Neste ensaio, alm das BRS foram quantificadas: Bactrias aerbias heterotrficas a mesma metodologia descrita para quantificao P. aeruginosa (item III.1.5.1).
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Bactrias produtoras de cido - A determinao foi feita atravs do NMP em meio vermelho de fenol acrescido de 1% de glicose e 3% de NaCl (Merck, No. 1109870500), em aerobiose. A quantificao celular foi determinada aps um perodo de incubao de 14 dias a 30oC.
III.2.4.2 - Perda de massa/Taxa de corroso
Aps a remoo dos microrganismos aderidos, os cupons foram retirados das hastes e tratados conforme procedimento descrito no item III.1.5.2. Neste item indicada a metodologia para determinao da perda de massa e da taxa de corroso. Os valores obtidos so uma mdia aritmtica da perda de massa dos dois cupons.
III.2.4.3 - Atividade hidrogensica
O teste foi realizado conforme descrito por Iverson (1966). Por este mtodo, a deteco da atividade hidrogensica de BRS se d pelo aparecimento da colorao azul caracterstica da reduo do corante metil viologen em funo da liberao de eltrons que resultam do consumo de hidrognio molecular adsorvido na superfcie do cupom metlico.
III.2.4.4 - Dosagem de exopolissacardeo (EPS)
Para analisar o teor de EPS presente no biofilme, 10 mL da suspenso celular obtida atravs da raspagem da superfcie metlica em soluo tampo fosfato 10mM (pH 7,0) foi filtrada em membrana de ster celulose (Millipore) com tamanho de poro de 0,22 m, utilizando um aparato de filtrao a vcuo da Millipore.
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A membrana com as clulas foi transferida para uma placa de Petri limpa. As clulas eram cuidadosamente raspadas da superfcie da membrana com uma esptula e ressuspensas em 4,0 mL de EDTA-Na 1mM dissolvido no mesmo tampo. A mistura permanecia em repouso por 2 horas temperatura de 4C. Aps este perodo, esta era filtrada em filtros Millex (Millipore) com tamanho de poro de 0,22 m para reteno das clulas e de fragmentos celulares. O filtrado era armazenado sob refrigerao e posteriormente utilizado para anlise de polissacardeo ligado s clulas aderidas pelo mtodo de Dubois et al (1956), conforme descrito por Cammarota, 1998.
III.2.4.5 - Avaliao da corroso por pite
Aps raspagem para remoo dos biofilmes, os cupons foram analisados quanto presena de pites. Foram feitas as anlises de densidade e profundidade de acordo com a Norma ASTM G 46/94 (2005). A inspeo visual da presena e distribuio dos pites ao longo da superfcie metlica corroda foi feita em estereoscpio (marca Carl Zeiss, modelo Stemi 200-C), em aumento de 20X, sob condies adequadas de iluminao incidente. A densidade de pites foi calculada a partir da relao nmero total de pites, visualizados em ambas as faces do corpode-prova, pela rea total expressa em metros quadrados. A profundidade dos pites foi determinada tambm com o auxlio do estereoscpio, em aumento de 50X, utilizando programa que correlaciona a diferena entre as leituras de foco do ajuste fino da superfcie do metal e da base do pite.
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CAPTULO IV Resultados e Discusso
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IV.1 ENSAIOS PRELIMINARES

Nesse estudo foi feita a determinao da influncia das BRS na corroso microbiologicamente induzida de ao carbono AISI 1020, em sistemas conduzidos em aerobiose e anaerobiose, na presena e ausncia de bactrias produtoras de material polimrico extracelular (EPS). O propsito deste estudo era definir as condies a serem adotadas nos ensaios de proteo catdica. Para determinar a efetividade deste mtodo no controle da CMI era fundamental estabelecer as condies mais drsticas, ou seja, mais favorveis para a atividade metablica de BRS ssseis, considerados como os principais responsveis pela degradao de materiais. Os resultados sero apresentados em blocos, conforme os parmetros monitorados a fim de facilitar a anlise.
IV.1.1 - Monitoramento microbiolgico A Figura 20 apresenta a colonizao dos cupons expostos gua do mar na presena apenas de BRS planctnicas (populao inicial de 108 NMP/mL), em condio de anaerobiose (cerca de 1% de O2 dissolvido). Decorridos sete dias, foi evidenciado um nmero considervel de BRS no biofilme formado, de 5,1 x 105 NMP/cm2. Esse resultado demonstra a capacidade das clulas planctnicas de BRS em aderir e colonizar superfcies slidas, desde que as condies de cultivo sejam propcias. Em geral, o nmero de microrganismos presentes em biofilmes recm formados est correlacionado concentrao dos respectivos microrganismos na fase planctnica (FASSARELA et al., 2007; SOUZA, SRVULO e FRANA, 2005). Com relao especificamente as BRS, foram encontrados valores na literatura variando de 103 a 105 NMP/cm2 em biofilmes formados sobre cupons de ao carbono expostos gua do mar, contendo altos teores de matria orgnica e clulas microbianas, devido contaminao freqente de despejos domsticos e industriais
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(GONALVES, SRVULO e FRANA, 2003; TORRES, 2001). Nestes trabalhos a quantidade de BRS na fase planctnica era baixa, 102-103 NMP/mL, porm estavam associadas a vrias outras espcies microbianas, dentre elas as bactrias formadoras de exopolissacardeos. Essa caracterstica normalmente atribuda s bactrias do gnero Pseudomonas.
1,00E+12 1,00E+10
NMP/cm
1,00E+08 1,00E+06 1,00E+04 1,00E+02 1,00E+00 7 14 21 28

Tempo de exposio (dias)
Figura 20: Colonizao da superfcie de ao carbono AISI 1020 por BRS. No presente trabalho, o nmero de BRS ssseis confirma a capacidade de espcies deste grupo microbiano em aderir a superfcies slidas. A aderncia provavelmente ocorre via material polimrico extracelular j que, conforme evidenciado por vrios autores, algumas espcies de BRS produzem EPS (CHAN, XU & FANG, 2002; PREZ et al., 2007). Zinkevih et al. (1996) caracterizaram os exopolmeros produzidos por duas distintas linhagens de BRS, tanto na fase planctnica quanto em produtos de corroso severa removidos da superfcie de ao carbono, em gua do mar enriquecida com os constituintes do meio Postgate C, a 37C. Segundo os autores, a composio dos materiais polimricos sintetizados pelas culturas planctnicas foi similar, apresentando polissacardeos, protenas e cidos nuclicos. Por outro lado, o EPS nos biofilmes apresentou composio diferenciada, variando
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em rendimento e em composio de acares e aminocidos, indicando que o tipo de metal e as condies do ambiente regulam a fisiologia destes microrganismos influenciando na sua resposta interao com o habitat. No perodo monitorado, a populao sssil de BRS apresentou valores mximo e mnimo de 2,6 x 106 e 7,3 x 104 NMP/cm respectivamente; no se verificando uma tendncia definida de aumento ou decrscimo. Similarmente, a populao de BRS na fase planctnica se manteve praticamente constante ao longo de todo o perodo monitorado. Estes resultados sugerem que as populaes de BRS presentes atingiram uma condio desfavorvel, quer por estarvao nutricional quer por inibio aos produtos gerados durante seu metabolismo, que induziram um estado de latncia. Vrios estudos j comprovaram a capacidade das BRS de permanecer em estado latente por perodos prolongados, proliferando ao encontrar ambiente apropriado (POSTGATE, 1984; BARTON, 1995). A gerao de sulfeto pode ter concorrido para a inibio das BRS, visto que ocorreu o enegrecimento intenso do fluido no 14 dia de ensaio, caracterstico da formao de sulfeto ferroso (Figura 21).
Figura 21: Clula de ensaio aps 14 dias do experimento com BRS em anaerobiose. A toxicidade das clulas de BRS ao H2S dependente do seu estado de dissociao, ou seja, est relacionado ao valor de pH. A toxicidade do sulfeto decorre da sua difuso passiva pela membrana celular, desnaturao de protenas e, conseqentemente, enzimas por ligao cruzada e pela alterao do pH intracelular.
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Na literatura mencionada a inibio de Desulfovibrio sp. por concentraes de H2S em torno de 550 e 250 mg/L para valores de pH de 6,2-6,6 e 7,0, respectivamente (REISS et al., 1991). Segundo estes autores, o crescimento diretamente proporcional concentrao de H2S at o seu valor inibitrio, quando ocorre reduo no nmero de clulas em velocidade similar a do crescimento. Tambm se deve mencionar que a formao de um biofilme um sistema dinmico, que envolve um equilbrio entre o crescimento celular e o arraste de microrganismos do biofilme que, por sua vez, conseqncia do aumento da sua espessura e da velocidade do fluido (COSTERTON, 1995). O acmulo de clulas no biofilme dependente da atividade metablica e, portanto, da disponibilidade de nutrientes, presena e quantidade de metablitos txicos e das condies fsicas (pH, O2, ...). A Figuras 22 (A e B) mostram a variao das populaes ssseis de BRS e Pseudomonas para os ensaios conduzidos com a associao das duas culturas bacterianas, para alto e baixo teor de O2 dissolvido, respectivamente. Em ambas as condies de disponibilidade de oxignio foram determinadas quantidades de BRS em 7 dias superiores a quantificao feita no ensaio apenas com BRS (Figura 20). A associao das culturas microbianas particularmente, em aerobiose, foi a mais adequada para o desenvolvimento das BRS, apesar destas bactrias serem aerotolerantes. A disponibilidade de oxignio provavelmente propiciou a produo mais intensa de EPS pela bactria Pseudomonas, criando condies nutricional e fsica favorveis atividade das BRS. Torres e de Frana (2002) tambm observaram que o nmero de BRS em biofilmes formados sobre cupons de ao carbono expostos gua do mar foi diretamente proporcional concentrao de oxignio presente. Os autores tambm apontam como justificativa a produo mais intensa de EPS pelo metabolismo aerbio da espcie Pseudomonas, em funo da maior quantidade de energia gerada nesta condio.
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A colonizao das superfcies metlicas tambm foi diferenciada em funo da disponibilidade de oxignio (Figura 22). Em aerobiose, no 14 dia foi determinada a elevao do nmero de BRS ssseis em 2 ordens de grandeza; este valor se manteve inalterado at o fim do monitoramento (Figura 22A). Distintamente, em teor reduzido de oxignio, houve um decrscimo da populao sssil de BRS, embora a partir do 14 dia no tenha sido mais detectada qualquer variao (Figura 22B). Estes resultados do suporte teoria anteriormente levantada de que houve interrupo do metabolismo das clulas de BRS, por exemplo, por um dos motivos ento sugerido, sem contudo impedir a sua sobrevivncia. A
UFC/cm, NMP/cm
1,0E+12 1,0E+10 1,0E+08 1,0E+06 1,0E+04 1,0E+02 1,0E+00 7 14 21 28 Tempo de exposio (dias)
Pseudomonas
BRS
Figura 22: Variao da populao de microrganismos ssseis nos ensaios com associao de BRS e Pseudomonas (A- em aerobiose; B- em anaerobiose).
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Em condio de aerobiose, a populao sssil de Pseudomonas apresentou perfil semelhante ao de BRS, embora seu nmero tenha sido sempre menor (Figura 22A). O mximo de clulas foi determinado no 21 dia de ensaio, com posterior equilbrio. As clulas de Pseudomonas demoraram um pouco mais para atingir o seu valor mximo, que foi duas ordens de grandeza inferior ao detectado para as BRS. Entretanto, em reduzida concentrao de oxignio dissolvido, a concentrao celular determinada para Pseudomonas nos biofilmes permaneceu praticamente constante por 21 dias, apresentando elevao em duas ordens de grandeza ao final do perodo. O lento crescimento de Pseudomonas no biofilme pode ser explicado pela baixa disponibilidade de oxignio, induzindo o metabolismo anaerbio que gera pouca energia e, conseqentemente, pouca sntese de componentes celulares (FILIATRAULT et al., 2006). Por sua vez, o metabolismo das BRS parece depender da atividade de outros microrganismos, mesmo que a condio de anaerobiose j tenha sido estabelecida, em termos nutricionais. Deve ser considerado ainda que os nutrientes s foram adicionados uma nica vez no incio do processo, logo seu esgotamento do sistema mais rpido em condio de aerobiose, posto que promove maior produo de energia e sntese de material celular. IV.1.2 - Perda de massa dos cupons de ao-carbono Os valores correspondentes s perdas de massa dos cupons de ao carbono AISI 1020, nas diferentes condies estudadas, esto apresentados na Figura 23.
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Perda de massa (mg/cm 2)
10 8 6 4 2 0 7 14 21 28 Tempo de exposio (dias)
BRS e Pseudomonas (anaerobiose)
BRS e Pseudomonas (aerobiose)
BRS (anaerobiose)
Figura 23: Variao da perda de massa ao longo dos experimentos. Analisando a figura pode-se observar que os ensaios realizados com a associao de Pseudomonas e BRS, quer em aerobiose quer em anaerobiose, apresentaram aumento da perda de massa diretamente proporcional ao tempo de exposio. No entanto, a maior perda de massa foi determinada em condio de aerobiose. Este comportamento pode ser atribudo a diferentes efeitos, de forma independente ou mesmo associada, como: elevado nmero de BRS ssseis, maior atividade de Pseudomonas, presena de oxignio e, inclusive, ao tipo de metal. Como j mencionado, a atividade metablica intensa de BRS resulta na gerao de metablitos agressivos, especialmente grande quantidade de sulfeto, um agente comprovadamente corrosivo. No caso da produo de exopolissacardeos pode haver intensificao da corroso pela gerao de clulas de aerao diferencial sobre a superfcie metlica, sobretudo quanto maior a concentrao de oxignio no fluido. Alm disso, o oxignio pode comportar-se como acelerador do processo eletroqumico de corroso (GENTIL, 2003). Em solues no-aeradas, a reao catdica se processa com velocidade pequena, sendo conseqentemente o processo andico
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tambm lento. Neste caso, o hidrognio molecular, produto da reao catdica de reduo da gua, pode ficar adsorvido na superfcie do catodo, polarizando a pilha formada com conseqente reduo do processo corrosivo. Entretanto, na presena de oxignio, este se reduz preferencialmente comprometendo a polarizao da superfcie metlica pelo hidrognio, acelerando o processo corrosivo, conforme detalhado no item II.9.2 (eq. 1 e 2). O ao carbono devido ao seu menor custo comparativamente ao das outras ligas, vm sendo muito empregado nos mais diversos setores industriais. No entanto, este material apresenta baixa resistncia ao corrosiva, em especial quando em contato com a gua do mar. A gua do mar considerada a mais corrosiva por apresentar elevada salinidade. O efeito do cloreto de sdio nos processos corrosivos deve-se ao fato deste sal ser um eletrlito forte elevando portanto, a condutividade condutividade, da o soluo anodo e eletroltica. o catodo Em esto guas muito com baixa e, prximos
consequentemente, os ons gerados nas regies andicas e catdicas formam um produto de corroso compacto e aderente superfcie metlica constituindo um filme protetor. Em guas salgadas, ou seja, de elevada condutividade, anodo e catodo tendem a se distanciar e portanto h formao do produto de corroso longe da superfcie metlica resultando em um depsito poroso pouco efetivo como barreira protetora (HAMILTON, 1995). Note-se ainda que no ensaio com a associao das duas culturas microbianas em anaerobiose houve um aumento considervel da perda de massa no 28o dia de ensaio, possivelmente devido maior adeso de Pseudomonas verificada neste dia (Figura 22B). Provavelmente o maior nmero de Pseudomonas em contato com o metal alm da criao de clulas de aerao diferencial levou a uma maior corroso uma vez que essas bactrias produzem cidos que podem atacar a superfcie metlica. De acordo com Beech (2000), Pseudomonas aeruginosa produz
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polissacardeos extracelulares cidos como o cido algnico durante a colonizao de superfcies metlicas. De acordo com a Figura 23, comparativamente as perdas de massa dos experimentos com BRS em anaerobiose foram inferiores s determinadas nas outras condies avaliadas. Provavelmente, isto se deveu formao de um filme de FeS que atuou como uma barreira protegendo a superfcie metlica do contato com o on cloreto (MA et al., 2000). A corrosividade dos sulfetos dissolvidos est intimamente
relacionada com a concentrao de sulfetos e o pH. Para concentraes superiores a, aproximadamente 515 ppm, Shannon e Boggs (1975) observaram a formao de camadas duras e aderentes de sulfeto de ferro na superfcie do ao. Estas camadas conferiram uma proteo relativa ao metal base. Quando as concentraes de sulfeto eram baixas, o sulfeto de ferro produzido era no-aderente e gelatinoso conferindo pequena ou nenhuma proteo. Os dados de perda de massa foram usados para clculo das taxas de corroso em cada um dos casos estudados (Tabela 3). A taxa de corroso em apenas 14 dias de exposio do material ao meio com a associao das duas culturas microbianas na presena de oxignio pde ser classificada como alta. A anlise dos dados apresentados na Tabela 3 tambm permite concluir que, na presena de ambas as culturas de microrganismos, a corroso classificada como alta, independente do teor de oxignio. Neste caso, o oxignio s contribui para acelerao do processo. Contudo, as BRS individualmente no interferem no processo corrosivo, pelo contrrio, j que se evidencia uma reduo da taxa de corroso do ao carbono em funo do tempo. Portanto, pode-se estabelecer que os microrganismos efetivamente intensificam o processo corrosivo, sendo que a presena de diferentes espcies microbianas no biofilme, por conta dos produtos gerados e da
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sua interrelao nesta estrutura, compromete severamente a vida til do ao carbono. Tabela 3: Taxas de corroso e classificao do processo corrosivo correspondente para os diferentes ensaios realizados
*determinada a partir da classificao NACE
IV.1.3 Anlises eletroqumicas
As curvas de polarizao andicas e catdicas obtidas ao longo dos ensaios foram representadas em grficos relacionando o potencial aplicado versus a densidade de corrente (Figuras 24 a 26). Vale lembrar que quando os microrganismos esto presentes eles modificam as reaes, apresentando uma interao dinmica, sendo difcil saber ao certo os tipos de reaes que esto ocorrendo na superfcie metlica no decorrer do tempo. Por isso, no possvel analisar as curvas caso a caso. As curvas andicas mostraram que o ao carbono apresentou dissoluo ativa em todos os ensaios realizados, ou seja, nenhum domnio de passivao ocorreu na faixa de polarizao realizada. No ensaio realizado apenas com BRS em anaerobiose (Figura 24) apenas a curva andica do tempo 0 foi diferente, uma vez que as outras tendiam a uma mesma densidade de corrente limite. Do mesmo modo, a curva catdica do incio do experimento tambm foi diferente das demais. Neste caso, observa-se um aumento da densidade de corrente
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com o crescimento das BRS. Outra observao que o potencial de corroso se torna mais catdico na presena dessas bactrias, caracterstico de meios mais redutores.
BRS
t = 0 dias t = 7 dias t = 14 dias
t = 21 dias t = 28 dias
-200
Potencial (mV Ag/AgCl)
-400
-600
-800
-1000
-1200 1E-6 1E-5 1E-4 1E-3 1E-2 1E-1 1E+0 1E+1 1E+2
Densidade de corrente (mA/cm)
Figura 24: Curvas de polarizao para o ensaio conduzido com BRS em anaerobiose.
As curvas andicas do ensaio com BRS e Pseudomonas em aerobiose (Figura 25), tiveram comportamento semelhante e no se observa, como no caso de BRS em anaerobiose, aumento da densidade de corrente com o crescimento dos microrganismos. No entanto, as curvas catdicas apresentaram valores de densidade de corrente diferentes, chegando a variar em at uma ordem de grandeza aps o incio do crescimento dos microrganismos. Neste caso, observa-se que h variao da densidade de corrente para valores mais elevados. O
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potencial de corroso praticamente no sofreu alterao com exceo somente da medida aps 14 dias de ensaio.
BRS + Pseudomonas (Aerobiose)
T = 0 dias T = 7 dias
T = 14 dias T = 21 dias T = 28 dias
-200
-400
-600
-800
-1000
-1200 1E-6 1E-5 1E-4 1E-3 1E-2 1E-1 1E+0 1E+1 1E+2
Densidade de Corrente (mA/cm)
Figura 25: Curvas de polarizao para o ensaio na presena de BRS e Pseudomonas em aerobiose. As curvas andicas obtidas do ensaio com BRS e Pseudomonas em anaerobiose (Figura 26) praticamente no variaram sendo observada a tendncia ao mesmo valor de densidade de corrente andica. J para as curvas catdicas foi observado um aumento de densidade de corrente para um mesmo potencial, tal qual observado para a associao de BRS e Pseudomonas em aerobiose, aps o incio do crescimento microbiano. Comparando ainda as condies de aerobiose e anaerobiose (associao de BRS e Pseudomonas), observa-se uma ligeira elevao da
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faixa de variao da densidade de corrente catdica no caso de aerobiose, compatvel com a presena de oxignio.
BRS + Pseud. (Anaerobiose)

T = 0 dias T = 7 dias
T = 14 dias T = 21 dias T = 28 dias
-200
-400
-600
-800
-1000
-1200 1E-6 1E-5 1E-4 1E-3 1E-2 1E-1 1E+0 1E+1 1E+2
Densidade de Corrente (mA/cm)
Figura 26: Curvas de polarizao para o ensaio na presena de BRS e Pseudomonas em anaerobiose.
Conforme pode ser constatado, a condio mais agressiva para os corpos-de-prova foi obtida na presena de BRS e Pseudomonas em ambiente aerado. Esses resultados corroboram os de perda de massa e da formao do biofilme. Nota-se tambm que para proteo catdica deste sistema, na pior condio (28 dias) haveria necessidade de uma maior densidade de corrente a ser aplicada de 1,03 mA/cm2 para potencial de 900 mV, o que elevaria sobremodo os custos operacionais se comparado ao caso onde somente BRS est presente. Neste caso, de acordo com as curvas levantadas, a densidade de corrente seria muito
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inferior, de 0,24 mA/cm2 para o mesmo potencial. Resultado que tambm confirma os dados de perda de massa. Assim, analisando esses resultados, pode-se verificar a variao da densidade de corrente de proteo catdica quando se admite a presena de elevada concentrao da microbiota indgena, que constituda por espcies sabidamente responsveis por induzir o processo de corroso. A presena de oxignio tambm foi considerada por sua efetiva contribuio na formao de EPS, acelerando a corroso do metal. Ficou ainda definida a importncia de elevar o nmero de BRS a fim de avaliar a influncia da proteo catdica, j que segundo os pesquisadores devido a sua presena a necessidade de alterar o potencial empregado de 800 mV para 900 mV.
IV.2 - ENSAIOS DE PROTEO CATDICA

A formao de biofilmes sobre cupons de ao-carbono foi acompanhada em 3 diferentes potenciais de proteo catdica (Figura 27).
log.[NMP/cm ,UFC/cm ]
1,00E+06 1,00E+05 1,00E+04 1,00E+03 1,00E+02 1,00E+01 1,00E+00
-2
-2
-800 -900
Potenciais aplicados (mV Ag/AgCl)
Sem proteo Com proteo -1000
Bactrias Bactrias produtoras de redutoras de cido sulfato Figura 27: Nmero de microrganismos ssseis nos biofilmes formados Bactrias heterotrficas sobre ao carbono sem e com aplicao da proteo catdica, em 3 diferentes potenciais.
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Pode-se notar que o nmero inicial de clulas presentes na gua do mar permitiu a formao de biofilmes em todas as condies estudadas. Contudo, o nmero de bactrias aderidas aos cupons que estavam sob proteo catdica foi inferior ao obtido para os cupons que no estavam sob proteo, para todas as condies testadas. A formao de uma camada de produto de corroso sobre o metal fornece aos microrganismos locais perfeitos para a sua fixao, aumentando assim, a quantidade de biofilme na superfcie metlica (GUEZENNEC, 1991). Conforme pode ser observado na Figura 28, os corpos-de-prova que no estavam sob proteo apresentaram uma densa camada de produtos de corroso aderente, nas condies do teste. Entretanto, os cupons protegidos permaneceram praticamente com o mesmo aspecto de quando foram inseridos no sistema. Superfcies com elevada rugosidade, apresentando imperfeies ou com produtos de corroso podem ser mais suscetveis formao do biofilme do que superfcies bem polidas. As microrrugosidades protegem as clulas adsorvidas das foras de cisalhamento, reduzindo as taxas de dessoro. Alm disso, favorecem a adsoro microbiana na medida em que aumentam a rea superficial disponvel para adsoro (CHARACKLIS, 1990).
Figura 28: Clula de ensaio aps 7 dias de experimento (A- sem proteo catdica; B- polarizado a -900 mV).
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A adeso de microrganismos a uma superfcie tambm influenciada por interaes eletrostticas (BUSSCHER e WEERKAMP, 1987). Uma superfcie protegida catodicamente uma regio carregada negativamente e, portanto, repele qualquer partcula de carga negativa (item II.9.2 equaes 1 e 2). Broedelius e Vandamme (1987) afirmam que, apesar da natureza complexa da parede celular, os microrganismos so negativamente carregados sob condies normais. E, no caso das clulas que apresentam biopolmeros externamente parede celular, tem-se uma ampla distribuio de cargas negativas uma vez que so constitudos bacteriana principalmente de polissacardeos. repelida da Assim, superfcie a clula eletrostaticamente catdica
(EDYVEAN et al., 1992). Contudo, mesmo aceitando a repulso eletrosttica das clulas como inibitria colonizao microbiana das superfcies, notria a capacidade de adeso das bactrias a superfcies carregadas negativamente atravs da ligao com ctions divalentes como Ca2+ e Mg2+ (COSTERTON et al., 1995). Assim, possvel explicar o menor nmero de microrganismos determinados nos ensaios onde as superfcies metlicas foram protegidas catodicamente (Figura 27). A anlise da Figura 27 permite estabelecer a efetividade da proteo catdica no controle do crescimento de bactrias aerbias em estruturas de ao carbono imersas em gua do mar. O nmero de bactrias heterotrficas totais e de bactrias produtoras de cido sobre os cupons protegidos foi bem inferior ao dos cupons no protegidos nos trs potenciais estudados. Outros autores tambm mostraram que a proteo catdica reduz a adeso e reproduo de bactrias aerbias durante os primeiros estgios da exposio e que o grau dessa reduo depende da densidade de corrente aplicada (EDYVEAN, 1984; DE MELE, 1993 e VIDELA, 1994). Provavelmente a adeso de bactrias aerbias limitada pela produo de hidrognio catdico e reduo do oxignio na superfcie protegida (item II.9.2 equaes 1 e 2). Assim como observado para as bactrias aerbias, o nmero de BRS aderidas aos cupons protegidos foi inferior aos cupons no
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protegidos. Isso provavelmente se deve ao fato de os cupons no protegidos apresentarem maior nmero de bactrias heterotrficas totais e produtoras de cido aderidas. Essas bactrias podem favorecer o crescimento das BRS tanto pela produo de exopolissacardeos, estabelecendo uma condio de anaerobiose na base do biofilme quanto pela produo de cidos orgnicos de cadeia curta que podem ser metabolizados pelas BRS. Contudo, ao contrrio do evidenciado para os demais
microrganismos monitorados, a reduo do potencial de proteo catdica parece ter levemente favorecido o crescimento das BRS, provavelmente devido ao aumento da reduo do oxignio, o que favorece condies de anaerobiose abaixo dos depsitos. Alm disso, o hidrognio catdico produzido pode ter estimulado o crescimento de bactrias com capacidade de sntese da enzima hidrogenase, como o caso de algumas espcies de BRS. A fim de validar tal hiptese, a atividade da enzima hidrogenase foi determinada nos biofilmes formados sobre os cupons polarizados nos diferentes potenciais e nos controles, utilizando o corante metil viologen como aceptor final de eltrons. Conforme pode ser observado na Figura 29, na ausncia de bactrias hidrogenase positivas no houve formao da colorao azul, indicativa da atividade hidrogensica.
Figura 29: Ensaio controle da atividade hidrogensica realizado com bactria hidrogenase negativa.
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No entanto, a partir da anlise da Figura 30 possvel observar que os biofilmes dos cupons protegidos catodicamente ou no apresentaram a enzima hidrogenase ativa.
Figura 30: Atividade hidrogensica dos biofilmes aderidos aos cupons: A) -800 mV com proteo e B) controle bitico I; C) -900 mV com proteo e D) controle bitico II; E) -1000 mV com proteo e F) controle bitico III.
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Destaca-se que os biofilmes dos corpos-de-prova sob proteo catdica apresentaram uma colorao mais acentuada do que seus controles, cuja intensidade foi diretamente relacionada com a reduo do potencial aplicado. Estes resultados sugerem ser a atividade hidrogensica funo da disponibilidade de H2. A ocorrncia de liberao de hidrognio, devido a um abaixamento excessivo do potencial, justificada a partir da observao do diagrama Eh x pH (Figura 13). O domnio de imunidade do ferro se encontra abaixo da linha a, correspondente reduo de hidrognio. Isto significa que, em condies de proteo catdica, a reao de reduo de hidrognio termodinamicamente favorvel, e sua cintica depende de fatores como pH da soluo e da sobretenso de hidrognio, ou seja, a diferena entre o potencial de polarizao e o potencial de equilbrio dado pela equao 2H+ + 2e- = H2 (BRASIL, 1996). A liberao de hidrognio foi visivelmente mais intensa durante a aplicao do potencial de -1000 mV, na ausncia de microrganismos (Figura 31a). A visualizao das bolhas de H2 no foi to expressiva nos ensaios com microrganismos provavelmente devido ao consumo pelas bactrias hidrogensicas positivas (Figura 31b).
Figura 31: Evoluo de hidrognio no corpo-de-prova polarizado a -1000 mV (A - na ausncia de microrganismos; B - na presena).
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De acordo com da Silva, Bassguy e Berguel (2004) a capacidade de adaptao das bactrias a diferentes ambientes, possibilita que mesmo estirpes consideradas hidrogenase-negativas possam se tornar positivas durante processos corrosivos. A disponibilidade de hidrognio pode ter induzido o seu metabolismo pelas bactrias presentes no biofilme. O aparecimento de reas marrom-amarelada observadas parece ser devido presena de compostos insolveis de ferro como Fe203 ou Fe(OH)3 formados como resultado da oxidao do metal por pequenas quantidades de oxignio presente no nitrognio, no gar ou na superfcie do prprio metal. Na Figura 32 tem-se a observao microscpica da suspenso do biofilme em tampo fosfato corada pelo mtodo de Gram. Os biofilmes obtidos a partir dos trs potenciais estudados apresentaram clulas de similar morfologia microscpica; em sua grande maioria na forma de bastonetes Gram-negativos. Note-se que tanto as BRS quanto as bactrias principais responsveis pela formao de EPS so Gramnegativas. Pode-se tambm observar a presena de alguns bastonetes ligeiramente curvos, conforme indicado pelas setas, morfologia caracterstica de algumas espcies de BRS.
Figura 32: Observao microscpica de suspenso do biofilme.

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Na tabela 4 esto apresentados os dados da quantificao de EPS produzido pelos biofilmes nos trs potenciais estudados. A concentrao de exopolissacardeos presentes nos biofilmes formados sob proteo catdica foi menor comparativamente aos no protegidos. Esses resultados confirmam a reduzida carga microbiana presente nos cupons polarizados. Tabela 4: Concentrao do biopolmero nos biofilmes Potenciais (mV) -800 -900 -1000 Concentrao do Biopolmero (mg/L) Com proteo catdica Sem proteo catdica 1,35 5,56 2,05 5,18 2,23 5,07
A Figura 33 apresenta a densidade de corrente de proteo F B A catdica ao longo do tempo para os trs potenciais estudados. Vale ressaltar que a densidade de corrente est mostrada em corrente catdica, ou seja, quanto mais negativa maior a corrente.
-5,0E+00
Densidade de corrente (mA/cm )
-3,0E+01 -5,5E+01 -8,0E+01 -1,1E+02 -1,3E+02 -1,6E+02 -1,8E+02 -2,1E+02 -2,3E+02 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180
Tempo (horas)
-1000mV -900mV -800mV -800mV (sm) -900mV (sm) -1000mV (sm)
sm ensaio realizado sem microrganismos
Figura 33: Densidade de corrente de proteo catdica ao longo do tempo.
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A curva de densidade de corrente catdica obtida no ensaio realizado com gua do mar estril com cupons polarizados a 1000 mV (curva preta), apresentou um perfil bem distinto das demais curvas. possvel notar que a densidade de corrente sofre uma reduo at aproximadamente 100 horas de ensaio. Essa reduo pode ser devida formao da barreira calco-magnesiana que detm o processo corrosivo reduzindo a corrente necessria para a proteo catdica. Contudo, ocorre um aumento sbito da densidade de corrente no tempo de cerca de 100 horas. Tal fato pode ser decorrente do desprendimento da camada de proteo pela intensa liberao de bolhas de hidrognio nesse potencial, conforme pode ser visualizado na Figura 34. Aps 100 horas, a densidade de corrente volta a diminuir indicando a formao novamente de um filme protetor sobre a superfcie do cupom.
Figura 34: Desprendimento da camada formada sobre cupom polarizado a -1000mV em gua do mar estril.
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Para a anlise das demais curvas de densidade de corrente, foi construdo um outro grfico plotando-se as linhas de tendncia das curvas com exceo da curva de -1000 mV (Figura 35).
0,00E+00
-1,00E+01
Densidade de corrente (mA/cm 2)
-2,00E+01
-3,00E+01
-4,00E+01
-5,00E+01
-6,00E+01
-7,00E+01 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 Tempo (horas) -800mV (sm) -1000mV -900mV -800mV -900mV (sm)
sm- ensaio realizado sem microrganismos
Figura 35: Linhas de tendncia linear obtidas nos ensaio de proteo catdica ao longo do tempo possvel observar que nos ensaios realizados com gua do mar sem microrganismos, a densidade de corrente diminui ao longo do tempo ao contrrio do observado nos ensaios com microrganismos. Na ausncia de microrganismos, a proteo catdica aumenta o pH na interface metal/soluo, uma vez que ocorre a reduo dos ons hidrognio e reduo do oxignio, causando a liberao de ons hidroxila. Essas reaes levam a um aumento da alcalinidade que, tem um efeito benfico na proteo de estruturas em gua do mar. O bicarbonato presente no meio, em condio alcalina gerada pela reao catdica, tende a formar carbonatos. Por sua vez, a precipitao de carbonatos de clcio e magnsio reconhecidamente importante por agir como uma barreira fsica contra o ataque generalizado da corroso,
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podendo reduzir o teor de oxignio dissolvido em contato com as superfcies metlicas e, consequentemente, reduzir a densidade de corrente necessria para manter um dado potencial, o que reduz os custos da proteo catdica (VIDELA, 2002). O pH da interface metal/soluo desempenha um papel
importante na formao do depsito calcrio e do biofilme. Esse pH interfacial depende da composio qumica da gua, das espcies bacterianas e da densidade de corrente aplicada (NUNES, 2007). Os cidos orgnicos produzidos pela atividade das bactrias produtoras de cido podem modificar o pH interfacial, alm de mudar a cintica, os constituintes e a estabilidade estrutural do depsito formado sobre a superfcie metlica. De acordo com Little, Wagner e Duquette (1988), o cido actico produzido por algumas bactrias desestabiliza o depsito calcreo formado sobre superfcies protegidas catodicamente. Assim, a atividade biolgica na superfcie metlica interfere nas reaes eletroqumicas que ocorrem durante a proteo catdica e induzem mudanas na demanda de corrente catdica necessria para manter um potencial fixo sobre a superfcie do ao carbono. Na Figura 36 encontram-se os valores mdios de perda de massa dos cupons com e sem proteo catdica. A perda de massa dos cupons que estavam sob proteo catdica foi similar nos ensaios realizados com microrganismos. No entanto, esses valores foram bem inferiores queles obtidos para os corpos-de-prova que no estavam protegidos.
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4,0
Perda de massa (mg/cm2)
3,5 3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0
0 -8
V 0m mV 00
) ( sm 0 -9
-8
) mV 00 ( sm 0 1 V -9 0m 00 -1 Potenciais de proteo catdica aplicados Com proteo catdica Sem proteo catdica mV 00
V 0m
) ( sm
sm ensaios realizados sem microrganismos
Figura 36: Perda de massa dos cupons metlicos nos ensaios de proteo catdica As perdas de massa dos cupons no protegidos nos ensaios sem microrganismos (sm) foram as maiores obtidas em todos os ensaios. Isso se deve ao fato do biofilme agir de certa forma como uma barreira para a difuso do oxignio e do on cloreto presente na gua do mar dificultando o seu contato com a superfcie metlica (POTEKHINA, 1999). De acordo com a classificao da taxa de corroso do ao carbono dada pela Norma NACE RP-07-75 (Tabela 5), os cupons que estavam sem proteo catdica apresentaram corroso alta em todos os ensaios realizados. J os cupons que estavam sob proteo catdica sofreram um processo de corroso classificado como moderado. No foi observado para os cupons protegidos catodicamente na presena de microrganismos variao significativa da taxa de corroso generalizada entre os trs potenciais aplicados. Contudo, a taxa de corroso obtida para o cupom polarizado a -800 mV na presena de microrganismos foi
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4 vezes superior obtida para o mesmo potencial na ausncia de bactrias. Esse aumento da taxa de corroso em funo da presena de microrganismos no foi to evidente para os potenciais mais catdicos. Tabela 5: Taxas de corroso e classificao do processo corrosivo correspondente para os diferentes ensaios de proteo catdica
Ensaios 1, 2 e 3: Realizados na presena de microrganismos Ensaios 4, 5 e 6: Realizados na ausncia de microrganismos
No caso de corroso por ao de BRS, que leva a formao de pites, a extenso do processo corrosivo no pode ser determinada somente pela perda de massa. Quando se trata de corroso localizada, a perda de massa pequena, o que leva a crer ser um processo brando de corroso. Porm, os danos da corroso localizada podem ser muito severos uma vez que este tipo de corroso de difcil deteco e pode levar ruptura do metal de forma inesperada. Alm disso, a perda de massa no d nenhuma informao sobre a profundidade de penetrao dos pites tornando-se extremamente importante a anlise da superfcie metlica para determinao do nmero de pites, seu dimetro e profundidade. Na Figura 37 possvel observar que os cupons que estavam sob proteo catdica continuavam a apresentar aspecto espelhado, aps a raspagem e decapagem diferentemente dos cupons no protegidos.
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Figura 37: Aspecto dos cupons aps a decapagem (A- cupons protegidos; B- cupons sem proteo catdica. Logo, analisando apenas o aspecto dos cupons usados nos ensaios de proteo catdica no era possvel visualizar nenhum ponto de corroso localizada. Porm, ao observar a superfcie destes cupons em estereoscpio foi possvel detectar a presena de regies de ataque. H uma ntida distino entre os cupons protegidos e os no protegidos. Nestes ltimos, houve um ataque generalizado da superfcie independentemente da presena ou no de microrganismos (Figura 38).
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Figura 38: Superfcie dos corpos-de-prova sem proteo catdica dos diferentes ensaios realizados: A) controle bitico I; B) controle abitico II; C) controle bitico II; D) controle abitico II; E) controle bitico III e F) controle abitico III (aumento de 20X).
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Pode-se observar para os cupons polarizados uma diferenciao de ataque, tanto maior quanto mais catdico o potencial aplicado (Figuras 39 a 41). Note-se que nas figuras constam todos os pontos de ataque localizado para cada potencial estudado.
Figura 39: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -800 mV (A- na ausncia de microrganismos e B- na presena de microrganismos -20X).
Figura 40: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -900 mV (A- na ausncia de microrganismos; B e C- na presena de microrganismos).
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F
Figura 41: Superfcie dos corpos-de-prova polarizados a -1000 mV (A- na ausncia de microrganismos; B a F- na presena de microrganismos)(aumento de 20X).
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Com base na observao das superfcies dos corpos-de-prova foram determinadas as densidades de pites para cada potencial aplicado, cujos resultados so apresentados na Tabela 6.
Tabela 6: Dados da corroso localizada dos corpos-de-prova protegidos catodicamente na presena de microrganismos Potenciais (mV) -800 -900 -1000 No de reas de corroso localizada 1 2 5 Dimetro da rea (mm) 0,12 0,22 0,42 Densidade de pites (pites/m2) 6 x 103 1 x 104 1 x 105 Profundidade mdia dos pites (mm) 0,20 0,36 0,50
Conforme pode-se observar, o nmero de reas de corroso localizada aumentou com o aumento do potencial catdico empregado. O dimetro da rea, a densidade de pites, assim como a profundidade mdia dos pites tambm foi proporcional ao aumento do potencial catdico. A Figura 42 mostra a imagem em 3 dimenses do ataque localizado observado no cupom protegido catodicamente a -800 mV na presena de microrganismos. Nesta condio foram encontrados os pites menos profundos.
Figura 42: Imagens do ataque localizado sobre o cupom protegido a -800 mV na presena de microrganismos (A- ataque localizado; Bimagem tridimensional do ataque localizado).
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Do mesmo modo, na Figura 43 so apresentadas as imagens do maior pite encontrado (cupons protegidos a -1000 mV na presena de microrganismos).
D
Figura 43: Imagens de uma das reas de ataque localizado sobre o cupom protegido a -1000 mV na presena de microrganismos (A-
ataque localizado; B e D- imagem tridimensional do ataque localizado; C- imagem representativa do corte transversal do pite).
A heterogeneidade da superfcie abaixo do biofilme e o resultante aumento da variabilidade da composio qumica do ambiente ponto a ponto ao longo da superfcie do material propiciaram a corroso localizada. Esse fato tambm j foi relatado por outros autores (VIDELA, 1994 e ROMERO et al., 2004). O aumento das regies de corroso localizada em relao ao potencial aplicado pode ser devido ao aumento da produo de
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hidrognio catdico. Dexter e Lin [1991] observaram a evoluo de hidrognio em superfcies catdicas em densidades de corrente acima de 100 A/cm2. Neste trabalho, densidade de corrente acima de 200 mA/cm2 foram obtidas. Assim, as BRS hidrogenase-positivas retiraram o hidrognio que estava polarizando a superfcie metlica tornando-a suscetvel corroso novamente, alm de formar sulfeto que tambm contribui para o agravamento do processo corrosivo. Contudo, no parece existir uma relao direta do nmero de BRS detectadas em um ponto de corroso com a severidade desta, uma vez que possvel que um pequeno nmero de BRS com hidrogenase muito ativa seja mais corrosivo que um grande nmero de BRS com hidrogenase menos ativa.
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CAPTULO V Concluses e Recomendaes
91
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V.1 CONCLUSES A associao das culturas microbianas (BRS/ Pseudomonas

aeruginosa) particularmente, em aerobiose, foi a mais adequada para o desenvolvimento das BRS, apesar destas bactrias serem anaerbias estritas. A disponibilidade de oxignio provavelmente propiciou a produo mais intensa de EPS pela bactria Pseudomonas, criando condies nutricional e fsica favorveis atividade das BRS;
Os ensaios realizados com a associao de Pseudomonas e BRS,

quer em aerobiose quer em anaerobiose, apresentaram perdas de massa superiores a determinada para apenas BRS em anaerobiose, sendo o aumento da perda de massa diretamente proporcional ao tempo de exposio. A maior perda de massa foi determinada em condio de aerobiose;
Pode-se estabelecer que os microrganismos efetivamente

intensificam o processo corrosivo, sendo que a presena de diferentes espcies microbianas no biofilme, por conta dos produtos gerados e da sua interrelao nesta estrutura, compromete severamente a vida til do ao carbono quando exposto gua do mar;
As curvas andicas mostraram que o ao carbono apresentou

dissoluo ativa em todos os ensaios realizados, ou seja, nenhum domnio de passivao ocorreu na faixa de polarizao realizada;
Para
proteo
catdica
de
cupons
expostos
BRS/Pseudomonas, aps 28 dias, haveria necessidade de uma maior densidade de corrente a ser aplicada de 1,03 mA/cm2 para potencial de 900 mV. J para a proteo catdica do ao carbono exposto a apenas BRS em anaerobiose, de acordo com as curvas levantadas, a densidade de corrente seria muito inferior, de 0,24 mA/cm2 para o mesmo potencial;
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O nmero de bactrias aderidas aos cupons que estavam sob

proteo catdica foi inferior ao obtido para os cupons que no estavam sob proteo, para as polarizaes testadas;
Ao contrrio do que indicado ma literatura, a reduo do

potencial de proteo catdica parece favorecer o crescimento das BRS;
Os biofilmes dos cupons, catodicamente protegidos ou no,

apresentaram a enzima hidrogenase ativa; a atividade hidrogensica foi mais intensa nos biofilmes formados sobre os corpos-de-prova sob proteo catdica. Estes resultados sugerem ser a atividade hidrogensica funo da disponibilidade de H2;
Nos ensaios realizados com gua do mar sem microrganismos, a

densidade de corrente diminui ao longo do tempo ao contrrio do observado nos ensaios com microrganismos;
Os cupons que estavam sem proteo catdica apresentaram

corroso alta. A taxa de corroso obtida para o cupom polarizado a -800 mV na presena de microrganismos foi 4 vezes superior obtida para o mesmo potencial na ausncia de bactrias. Esse aumento da taxa de corroso em funo da presena de microrganismos no foi to evidente para os potenciais mais catdicos.
Ao observar a superfcie dos cupons protegidos catodicamente

em estereoscpio foi possvel detectar a presena de regies de ataque. O nmero de reas de corroso localizada aumentou com o aumento do potencial catdico empregado. O dimetro da rea de corroso, a densidade de pites, assim como a profundidade mdia dos pites tambm foi proporcional ao aumento do potencial catdico;
No parece existir uma relao direta do nmero de BRS

detectadas em um ponto de corroso com a severidade desta, uma vez que possvel que um pequeno nmero de BRS com hidrogenase muito ativa seja mais corrosivo que um grande nmero de BRS com hidrogenase menos ativa.
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94
V.2 RECOMENDAES
Estudar a variao da comunidade microbiana nos diferentes

potenciais aplicados atravs de tcnicas moleculares como a eletroforese em gel de gradiente desnaturante (DGGE);
Estudar a aplicao de revestimentos aliados proteo catdica para

controle da CMI;
Determinar a influncia do potencial de proteo catdica na corroso

microbiolgica do ao carbono AISI 1020 em solo contendo diferentes concentraes de BRS e teores de umidade.
Galvo, M.M.
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Efeito Do Potencial de Protecao Catodica

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EFEITO DO POTENCIAL DE PROTEO CATDICA NA CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA Mariana Machado Galvo

Escola de Qumica Universidade Federal do Rio de Janeiro Abril, 2008

Eliana Flvia Camporese Srvulo, D.Sc. Orientadora

Simone Louise Delarue Csar Brasil, D.Sc. Co-orientadora

Ladimir Jos de Carvalho, D.Sc.

Mrcia Teresa Soares Lutterbach, D.Sc.

Mrcia Monteiro Machado Gonalves, D.Sc.

Rio de Janeiro, RJ Abril, 2008.

Profa. Dra. Eliana Flvia Camporese Srvulo, orientadora e amiga,

acreditado na aventura de uma microbiologista pelo mundo da eletroqumica;

Lisiane, por toda pacincia nas anlises de pite, fundamentais a

esse trabalho; Marcela e a todos do laboratrio de Geotecnia da COPPE/UFRJ

pela disponibilizao do gerador imprescindvel a realizao dos ensaios;

Aos amigos do laboratrio E-107 e 109: Ju, Thiago, Kally, Ulrich,

Aike e em especial ao Douglas, pelo apoio e momentos de descontrao;

amiga Rayane, pela amizade e ajuda na realizao dos

Ao CNPq pelo apoio financeiro.

III.2.4.4 Dosagem de exopolissacardeo (EPS) 55

x Figura 19: Clula eletroqumica conectada ao potenciostato e ao computador 53

Figura 20: Colonizao da superfcie de ao carbono AISI 1020 por BRS 59

Figura 30: Atividade hidrogensica dos biofilmes aderidos aos cupons 75

Figura 33: Densidade de corrente de proteo catdica ao longo do tempo 79

6: Dados da corroso localizada dos corpos-de-prova 88

protegidos catodicamente na presena de microrganismos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO I Introduo e Objetivos

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

H2O +1/2O2 2OH-

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.2 CORROSO MICROBIOLOGICAMENTE INDUZIDA

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.4 - MICRORGANISMOS QUE PARTICIPAM DA CMI

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.4.3 Bactrias produtoras de cido

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.5 - MECANISMOS DE BIOCORROSO

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.7 DETECO E MONITORAMENTO DA BIOCORROSO

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.7.1 Mtodos Microbiolgicos

II.7.2 Anlises fisico-qumicas

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.7.3 Mtodos eletroqumicos

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

CAPTULO II Reviso Bibliogrfica

II.8 - MTODOS DE PREVENO E CONTROLE DA CMI